Bachelorprojekt. Implementering af P-renin

Størrelse: px
Starte visningen fra side:

Download "Bachelorprojekt. Implementering af P-renin"

Transkript

1 Bachelorprojekt Implementering af P-renin Udarbejdet af Rie Pedersen Bachelorprojekt: Vejledere: Heidi Hvid Nielsen Klinisk Biokemisk Afd. Køge Sygehus Henrik Sander Pyndt Professionshøjskolen Metropol

2 2

3 3

4 Resumé Efter at det var blevet politisk besluttet fra Region Sjællands side af, at KBA Køge sygehus skulle implementere analysen for P-renin, gik et mindre studie i gang. Prøver blev før sendt til Biolab Glostrup Hospital, hvor de anvendte en analysemetode ved navn RIA. På KBA Køge sygehus ville man implementere analysen for P-renin på apparaturet Liaison fra DiaSorin, hvor analysemetoden er CLIA. Så for at kunne implementere analysen, skulle der udføres en godkendt validering og en metodesammenligning mellem RIA og CLIA. Plasmaprøverne der skulle anvendes til metodesammenligning modtog KBA Køge sygehus fra Biolab Glostrup Hospital samt en fortyndingsrække, baseret på korrekthedsmateriale fra NIBSC. Valideringen gav en god akkuratesse, præcision og robusthed og metodesammenligningen viser at der er signifikant forskel på de to metoder og at CLIA måler lidt højere end RIA. Ved akkuratesse forsøget sås det at blev der målt i det lave måleområde fandtes der stor forskel mellem den målte værdi og den beregnede sande værdi. Valideringen vidste at CLIA ikke var en dårlig metode selvom den målte højere end RIA, men derimod kunne det betyde at RIA måske bare måler lidt længere fra den sande værdi. Dermed blev konklusionen at P-renin analysen på apparaturet Liaison sagtens kan implementeres. Forord Til dette projekt har der været et stort samarbejde mellem Biolab Glostrup Hospital og KBA Køge sygehus. Dermed siges der stor tak for hjælpen, det har været til stor gavn. Firmaet DiaSorin har været rare at sponsorere integrale og kontroller til hele projektet, hvilket har været til hjælp. 4

5 Indholdsfortegnelse Resumé... 2 Forord... 4 Introduktion... 6 Indledning... 6 Problemformulering... 6 Materiale og metode... 7 Metodevalg... 7 Indsamling af prøver... 8 Analyseprincipper... 8 Prorenin... 9 Reagenser og kontroller... 9 Analysering Databehandling Resultater Diskussion Konklusion Perspektivering Referencer Bilag

6 Introduktion Indledning Renin er et proteinspaltende enzym der produceres i de juxtaglomerulære celler i nyrerne (1). Renin er en del af renin- angiotensin-aldosteron systemet (RAAS), hvor renin bliver frigivet ved lavt blodtryk i nyrerne(2). Renin er klinisk relevant at måle på, idet det bruges ved udredning af hypertension (3). Eksempelvis ses der forhøjet renin koncentration ved nyrearteriestenose som er en forsnævring af blodtilførelsen til den ene eller begge nyrer. Det betyder at trykket falder og renin bliver frigivet og aktiverer derved RAAS, hvorved blodtrykket stiger. Det betyder at renin forsat bliver frigivet og dermed forsat vil være forhøjet blodtryk i resten af kroppen. Eksempelvis ses der for lav renin koncentration ved primær aldosteronisme, som er en overproduktion af hormonet aldosteron fra binyrerne. I dette tilfælde vil renin koncentrationen være ekstrem lav, grundet det forhøjede blodtryk, faktisk så lavt at det kan være umåleligt (4). Derfor er det vigtigt at have en analyse der kan måle ved ekstrem lave koncentrationer. Der skal spares på laboratorierne i regionen. Derfor har Region Sjælland besluttet at der så vidt muligt ikke længere skal sendes prøver udenfor regionen til analysering. Det betyder for Køge sygehus klinisk biokemisk afdeling (KBA) at analysen for P-renin skal implementeres. Det er tiltænkt fra regionens side af at KBA Køge sygehus skal udføre analysen for hele Region Sjælland. I øjeblikket sender KBA Køge sygehus prøver som skal analyseres for P-renin, til Biolab Glostrup Hospital. På Biolab Glostrup Hospital anvendes analysemetoden radioimmunoassay (RIA). Dette er en manuel analysemetode, hvilket vil sige meget bliver gjort med håndarbejde. Metoden måler på enzymaktiviteten af renin i plasmaet. Ved beslutningen om at KBA Køge sygehus skulle implementere analysen for P-renin, undersøgte man hvilke muligheder der var indenfor denne analyse. KBA Køge sygehus opdagede at firmaet DiaSorin i år 2010 (1) havde frigivet en automatiseret analysemetode for P-renin ved at benytte Chemilumiscent Immunoassay (CLIA) på apparaturet Liaison. Denne analysemetode måler på det direkte renin i plasmaet, det betyder at der måles på den mængde renin der findes i plasmaet. På KBA Køge sygehus eksisterer apparaturet Liaison allerede, og derfor ville det være hensigtsmæssigt at kunne udføre analysen for renin på dette apparatur. Ved implementering af analysen P-renin kræves det at der bliver udført en validering af analysen på apparatet Liaison. Ved en validering er det vigtigt at undersøge om metoden lever op til den ønskede anvendelse og fungerer efter hensigten i laboratoriet. Problemformulering Er det muligt at gennemføre en godkendt validering af analysen P-renin på apparaturet Liaison? Kan KBA Køge sygehus udføre analysen for P-renin på apparaturet Liaison frem for den nuværende benyttede metode RIA på Biolab Glostrup Hospital, uden at det har betydning for akkuratessen? 6

7 Materiale og metode Metodevalg KBA Køge sygehus har et dokument Validering af analysemetoder (7), der beskriver alle parametre, som indgår i en validering. Dette dokument anvendes ved indførelse af ny analyse på et nyt apparat for at sikre gyldigheden af de opnåede analyseresultater, så der leves op til de kravspecifikationer, der er fastsat af afdelingen. Dokumentet beskriver hvilke praktiske undersøgelser og beregninger, der skal udføres for at en given analysemetode kan opfylde de stillede krav. Når en analyse efter validering på et apparat konkluderes til at være valid/godkendt, skal dette forstås som, at den er erklæret egnet til formålet med analysen på apparatet. Idet apparatet Liaison og dets tilhørende reagenser er CE-mærket, er det ikke nødvendig at lave en fuld validering, da CE-mærket betyder at det er valideret af leverandøren og lever op til de opstillede krav til analyserne. Her er der valgt at have fokus på følgende valideringsparametre: akkuratesse, præcision og robusthed for at vurdere om analysen P-renin kan implementeres på apparatet Liaison. Ved bestemmelse af præcision blev der lavet en intraseriel impræcision. Til denne bestemmelse blev der anvendt humant pool materiale i tre niveauer, og der blev målt på de pågældende prøver mindst ti gange i hver af dem. Ved bestemmelse af robustheden blev der lavet en interseriel impræcision. Dag-til-dag variationen siger noget om analysens usikkerhed ved at måle på den samme prøve i en længere periode, i og med at der skiftes integrale og kalibratorer med forskellige lot numre, der skiftes starterreagens og vaskebuffer, forskellige personer betjener apparatet og at der evt. har været teknikker på. Til denne bestemmelse blev der anvendt humant pool materiale i tre niveauer. Akkuratessen kontrolleres ved at analysere korrekthedsmateriale, hvor den sande værdi kendes. Dette korrekthedsmateriale bestilles hos firmaet NIBSC. NIBSC (National Institute for Biological Standards and Control Assuring the quality of biological medicines) er et firma der beskytter sundheden. Korrekthedsmaterialet er verden sundheds organisationen (WHO) international standard. Og er derfor et godkendt materiale at arbejde med. Ved undersøgelse om KBA Køge sygehus kan udføre analysen for P-renin på apparaturet Liaison frem for den nuværende benyttede metode RIA på Biolab Glostrup Hospital, udføres der en metodesammenligning. Dette gøres ved at udføre en bestemmelse af inakkuratessen ved sammenligning mellem målinger udført på Glostrup (ved RIA) og i Køge ved CLIA. Der skal bruges (7) prøver til en metodesammenligning. Der blev indgået en aftale med Biolab Glostrup Hospital, idet det ville kræve en længere tidsperiode, at indsamle et tilstrækkeligt antal prøver på KBA Køge sygehus. Ved arbejde med analysen P-renin anvendes et referenceinterval, indtil dags dato anvendes 6-60 mlu/l (5) referenceintervallet som Biolab Glostrup Hospital har fastlagt. Idet det er dem der udfører analysen. I Region Syddanmark Sygehus Lillebælt anvender man allerede analysemetoden CLIA ved brug af apparaturet Liaison og her bruger de referenceintervallet 4-50 miu/l (6). Idet der er forskel på den metode der skal implementeres CLIA og den nuværende benyttede metode RIA, skal referenceintervallet tages i betragtning om det stadig er aktuelt eller om der skal beregnes et nyt referenceinterval. De etiske overvejelser blev godkendt af Sys Johnsen etisk ansvarlig, inden vi gik i gang med målingerne. 7

8 Indsamling af prøver Vi modtog 45 plasmaprøver som dækkede hele måleområdet fra Biolab Glostrup Hospital. Plasmaprøverne modtog vi opbevaret i en flamingokasse, med et fryseelement i for at holde temperaturen nede. Inden afsendelse fra Biolab Glostrup Hospital havde plasmaprøverne været opbevaret ved -20 C eller derunder. Plasmaprøverne blev først placeret i 80 C fryseren, da vi modtog dem, og senere flyttet over i 20 C fryseren, da det er der alle prøver står som skal analyseres. Dermed opbevarede vi plasmaprøverne som anvisningerne fra DiaSorin (1). Til indsamlingen af det humane pool tappede vi blod fra tre testpersoner. Vi ville skabe et pool bestående af tre niveauer for at dække måleområdet. En testperson skulle hvile i mindst en halv time, som er det der gøres dags dato under prøvetagning, og ville få taget sine prøver liggende. Her forventedes det at renin niveauet ville være mindst muligt, idet kroppen har slappet af og blodtrykket har indstillet sig. Denne testperson blev kaldt hvile og fik taget 10 * 7 ml EDTA-glas. En anden testperson løb op og ned af trapperne i 15 minutter og fik taget 10 * 7 ml EDTA-glas siddende og blev kaldt aktiv. Her forventedes det at renin niveauet ville være lavt, idet pulsen stiger og at blodtrykket stiger og dermed bliver der ikke frigivet renin. En tredje testperson fik taget 10 * 7 ml EDTA-glas siddende med det samme og blev kaldt siddende. Her forventedes det at renin niveauet ville være normalt, idet der ikke er ydet noget eller gjort noget for at mindske blodtrykket. EDTA glassene blev centrifugeret med det samme efter prøvetagning ved stuetemperatur i 10 minutter. Herefter blev hver testpersons plasma overført til hver deres bæger hvor plasmaet fra de 10 glas blev blandet. Herefter afpipetterede vi over i mindre portioner bestående af 600 µl over i kryorør/afpipetteringsrør. Vi opbevarede alle rørerne ved 20 C indtil de skulle anvendes. Da vi havde problemer med bestillingen af korrekthedsmaterialet fra NIBSC, var Biolab Glostrup Hospital rare at sende en fortyndingsrække bestående af 11 prøver og opbevarede dem ved 20 C indtil anvendelse. Vi modtog også hvilke koncentrationer de forskellige rør skulle have, som Biolab Glostrup Hospital havde regnet ud ved brug af fortyndingsformlen. De havde startet med at have en stamopløsning med en vis volumen og koncentration og ud fra den havde de lavet fortyndingsrækken. Denne koncentration blev betragtet som den sande værdi. Analyseprincipper Princippet (1) for analysen på apparatet Liaison er CLIA. CLIA er en sandwich kemiluminescens immunanalyse der anvendes til en kvantitativ reninbestemmelse. Der anvendes to antistoffer i analysen, hvor det første er et specifikt musemonoklonalt antistof der er coated med magnetiske partikler og fungerer som den faste fase. Det andet antistof er et musemonoklonalt reninspecifikt antistof der er bundet til et isoluminol-derivat og fungerer som konjugatet antistof-isoluminol. Under inkubationen vil det renin og prorenin der findes i prøver, kalibratorer og kontroller binde sig til antistoffet med den faste fase. At det er en sandwich metode kommer til udtryk ved at reninmolekylet danner bro imellem antistoffer. Og ved vaskeproceduren efter inkubationen bliver ikke bundet-materiale fjernet. Der bliver nu tilsat starterreagens der reagerer med isoluminolen. Dermed sker der en reaktion idet ammoniumbindingen brydes og dermed udsendes der energi (lys). Lyset bliver målt i relative lysenheder (RLU). Der er omvendt proportionelt med koncentrationen af renin i prøver, kontrolmateriale og kalibratorer. Princippet er illustreret i en lille billedserie nedenfor i figur 1. 8

9 200µl prøvemateriale, 20 µl paramagnetiske partikler og 100µl konjugat. + H 2 O 2 /OH - Figur 1: Disse figure illustrere analyseprincippet. Først bliver der tilsat prøvemateriale, paramagnetiske partikler og konjugat. Derefter binder renin og prorenin til det paramagnetisk coatede antistof. Og det renin specifikke antistof-isoluminol binder sig til renin og ikke prorenin (illustreret i det midterste billede). Herefter tilsættes startereagensder og der udsendes energi i form af lys. Princippet for radioimmunoassay (RIA) består af at enten et antistof eller et antigen er gjort radioaktivt. Den mest anvendte RIA-metode består af et mærket antigen som konkurrerer med et andet umærket antigen, de konkurrerer om et begrænset antal antistof bindingssteder (8). På Biolab Glostrup Hospital måles renin koncentrationen baseret på en aktivitetsmetode. Det betyder at Biolab Glostrup Hospital selv tilsætter angiotensinogen fra får idet koncentrationen af angiotensinogen kan variere. Det medfører en højere produktion af angiotensin I som også er det der måles på. Biolab Glostrup Hospital kalibrerer overfor WHO internationale standard renin og dermed kan de udgive resultater i miu/l. Hele metoden er en længerevarende proces idet der skal inkuberes over flere trin og det hele foregår ved håndkraft. Der måles hvor meget radioaktivt bundet der er ved brug af en gammatæller. Prorenin Prorenin er en forløber til renin og findes i en koncentration der er 10 gange højere end renin koncentrationen (9). Prorenin findes i to forskellige former en lukket og en åben form. Prorenin har en aktiv side ligesom renin har og er derved tilgængelig for angiotensinogen. Ved prorenin i lukket form forstås det, at en klap dækker den aktive side, hvorimod klappen i den åbne form er åben og den aktive side står nu frit. Hvis den åbne form optræder i prøver vil man få falsk forhøjet renin koncentration, idet konjugatet antistof-isoluminol kan binde sig til den aktive side. Ved omkring de -5 C til 4 C kan klappen i prorenin åbne sig og derved være i åben form (9), det kaldes cryoaktivering. Det er derfor vigtigt at prøverne ikke opbevares ved temperaturer mellem -5 C og 4 C. Figur 2: illustrerer hvad der skal forstås med åben og lukket form af prorenin, til højre ses renin (9). Reagenser og kontroller Det benyttede integrale (et kit nok til 100 bestemmelser, som består af paramagnetiske partikler, konjugatet antistof-isoluminol og buffer). Med integralet medfølger kalibratorer hhv. A og B. Kalibratorerne skal man selv opløse, til dette følges den medfølgende vejledning. Kalibratorerne udgør en høj og en lav 9

10 koncentration og danner en to-punkts kalibreringskurve, hvor koncentrationer kan aflæses ud fra de målte RLU-værdier. Dermed benyttes kalibreringskurven under hver enkelt måling. Der skal kalibreres hver gang der startes på et nyt integrale. Systemvæske eller vaskebuffer bruges under hele forløbet ved arbejde på apparatet. Bufferen er en fosfatbuffer og bruges ved skylle procedurer af pipettespidser og rørsystemet, det gøres efter hver afpipettering og efter hver analysering, for at mindske risikoen for kontaminering. Det anvendte starterreagens starter 1 (4% NaOH) og starter 2 (0,12% peroxid opløsning) bliver tilsat efter vaskeproceduren og starter dermed en reaktion af lysudsendelse der bliver målt i RLU. Lyskontrollen (Er en lyskontrol der anvendes under daglig opstart af apparaturet. Lyskontrollen fastslår baggrundsbelysningen og måler pipetterne overfor hinanden). Resultaterne angives i relative lysenheder (RLU) der er omvendt proportional med de pågældende koncentrationer. De anvendte kontroller i to forskellige niveauer måles og vha. kalibreringskurven beregnes koncentrationen. Den angivne koncentration skal ligge indenfor det givne acceptinterval og ellers laves en ny kalibrering. Disse kontroller består begge af rekombineret humant renin og benyttes efter endt kalibrering og efter endt analysering, for henholdsvis at kontrollere kalibreringen og prøverne. En detaljeret oversigt over anvendte materialer og reagenser ses i bilag i tabel 11 og 12. Analysering Præcision: Prøverne vi anvendte var fra vores humane pool, med de tre forskellige niveauer; hvile, siddende og aktiv. Vi optøede fem prøver fra hvert niveau. Vi lagde dem på et vendeapparat, så materialet blev vendt stille og roligt, mens prøverne optøede. Da prøverne var tøet op tjekkede vi om der var luftbobler i og fjernede boblerne, med enden af en vatpind, hvis det var tilfældet. Vi satte prøverne på og bestilte dem manuelt (at oplyse apparatet, ved at taste, hvad prøven hedder, hvor den står og hvad der skal udføres på prøven) idet prøverne ikke havde nogen stregkode som apparaturet kunne genkende. Akkuratesse: Her anvendte vi den fortyndingsrække vi havde modtaget fra Biolab Glostrup Hospital. Vi optøede prøverne, igen på et vendeapparat. Efter optøning lagde vi mærke til at de pågældende rør ikke sad fast i rack`ne til apparaturet, vi valgte at overføre prøverne til kryorør og gav dem samme nummerering som Biolab Glostrup Hospital havde gjort. Herefter satte vi prøverne på og bestilte dem manuelt, idet prøverne ikke havde nogen stregkode. Robusthed: Den interserielle måling er blevet udført alle dage også de dage hvor præcisionsmålingerne, akkuratesseforsøget og metodesammenligningen blev udført. Der var dage hvor vi kun lavede denne måling. Der er blevet kalibreret halvdelen af de dage hvor målingerne blev udført, for at få så mange kalibreringer med som muligt. Der blev skiftet lot nummer både på integralet og kalibratorer. Prøverne vi anvendte var fra det humane pool, med de tre forskellige niveauer; hvile, siddende og aktiv. Prøverne var blevet tøet op på vendeapparatet og der blev sikret at der ikke var luftbobler i. Vi satte prøverne på apparaturet og bestilt dem manuelt. Metodesammenligning: Vi optøede kun halvdelen af prøverne til at starte med, for der ikke skulle gå for lang tid inden analyse. Prøverne blev optøet som ved de andre prøver, ved at ligge dem på et vendeapparat. Prøverne blev sat på apparaturet og disse prøver havde stegkode på som apparaturet kunne 10

11 genkende og gik dermed automatisk i gang med at analysere. Da apparaturet var færdig med at analysere gik vi i gang med at optø de sidste frosne prøver og satte dem på. Der var en af de første prøver der målte > 500 miu/l, med den lavede vi en fortynding der hedder 1:2 (300 µl prøve og 300 µl diluent)med endocrinology diluent fra DiaSorin. Den fortynding satte vi på apparatet og bestilte den manuelt, idet den ingen stregkode havde. Databehandling Ved præcisionsmålingerne og robusthedsmålingerne beregnes der en CV% som bliver vurderet. For akkuratesse målingerne beregnes der en Bias% og et biasplot der vil blive vurderet samt beregnes en parret t-test, for at undersøge om der er signifikant forskel på de to metoder.. Til metodesammenligningen undersøges det om dataerne er normalfordelt, hvorefter der udføres de dertil passende beregninger for at undersøge om der er signifikant forskel på de to metoder. Hertil beregnes der også et Biasplot der vil blive vurderet. 11

12 Resultater Som start præsenteres resultaterne for præcisionsmålingerne. Der er her beregnet en CV% for hver af de tre niveauer. Rådata inklusiv kontroller kan ses på bilag tabel 13. Tabel 1: viser resultaterne for præcisionsmålinger. Præcisionsmålingerne foregik den samme dag og prøvematerialet er fra det humane pool. Der blev beregnet en CV% for hver af de forskellige niveauer. Prøveid. Hvile Siddende Aktiv Middelværdi 15, , , SD 1, , , CV% 7, , , Idet der under metodesammenligningen blev analyseret en del kontroller, blev der også beregnet en CV% for disse. Rådata for disse kontrolmålinger kan ses på bilag tabel 14. Tabel 2: viser resultaterne af præcisionsmåling med kontrolmateriele. Der er her blevet analyseret på samme dag. Kontrol.nr. K1 K2 middelværdi 26, ,81176 SD 0, , CV% 3, , Herefter præsenteres resultaterne fra akkuratessemålingerne. Der er udført en kalibrering til at starte med og en igen mellem anden og tredje omgang af kontroller, alt det og rådata kan ses på bilag tabel 15. Der er her beregnet en Bias%. Tabel 3: viser resultaterne fra akkuratessemålingerne. Materialet var her en fortyndingsrække modtaget fra Biolab Glostrup Hospital. Fortyndingsrækken er lavet ud fra noget korrekthedsmateriale fra NIBSC. Bias % 38, , , , , ,92-4,08-1,84 Idet data er parrede blev der undersøgt om data var normalfordelt og derefter udført en parret t-test. Tabel 4: viser de statistiske beregninger der er udført for at undersøge om der er signifikant forskel mellem den beregnede sande værdi og CLIA. Beregning Sand værdi vs. CLIA Skævhed 1, Topstejl 1, T-test beregnet 0, T-test tabel (9) 2,365 12

13 Difference between methods Dette er et biasplot over akkuratessemålingerne, der giver et billede af hvordan målingerne ligger Mean of all methods Zero bias Figur 3: illustrerer hvordan akkuratessemålingerne ligger visuelt. Af x-aksen ses middelværdien af de to metoder og af y-aksen ses differensen mellem de to metoder. Den sorte stiplede linje er forskellen mellem de to metoder. Og de røde stiplede linjer er 95% grænserne, hvis alle differencerne ligger indenfor de røde linjer er differenserne normalfordelte. Her præsenteres robusthedsmålingerne. Der er her beregnet en CV%. På bilag tabel 16 ses rådata for robusthedsmålingerne inklusiv bemærkning om der er kalibreret og/eller skiftet diverse reagenser. Tabel 5: viser resultaterne for robusthedsmålingerne. Disse målinger er foregået over en periode for at vise dag-til-dag variationen. Der er her anvendt prøvemateriale fra det humane pool. Og videre er der beregnet en CV%. Hvile Siddende Aktiv Middelværdi 16, ,96 35, SD 1, , , CV% 6, , , Idet der under alle målinger er blevet analyseret på kontrolmateriale, udføres der også en robusthedsmåling på kontrollerne. Rådata ses på bilag tabel 17. Tabel 6: viser resultaterne for robusthedsmålingerne med kontroller. Disse målinger foregik over en periode og videre blev der beregnet en CV% for hver af kontrollerne. Kontrolnr. K1 K2 middelværdi 26,6 97, SD 1, , CV% 6, , Til metodesammenligningen blev der ud fra resultaterne beregnet et biasplot for at vise hvordan målingerne lå i forhold til hinanden. Resultaterne (rådata) for metodesammenligningen kan ses i bilag i tabel

14 Difference between methodes Difference between methods Zero bias Mean of all methods Figur 4: dette er biasplottet for CLIA vs RIA med alle 45 patientprøver. Af x-aksen ses middelværdien af de to metoder og af y- aksen ses differensen mellem de to metoder. Den sorte stiplede linje er forskellen mellem de to metoder. Og de røde stiplede linjer er 95% grænserne, hvis alle differencerne ligger indenfor de røde linjer er differenserne normalfordelte. Der blev lavet et biasplot hvor de to høje værdier blev ekskluderet, for så at se hvordan målingerne lå i forhold til hinanden Mean of all methods Zero bias Figur 5: dette er biasplottet for CLIA vs RIA, hvor der er ekskluderet to prøver. Af x-aksen ses middelværdien af de to metoder og af y-aksen ses differensen mellem de to metoder. Den sorte stiplede linje er forskellen mellem de to metoder. Og de røde stiplede linjer er 95% grænserne, hvis alle differencerne ligger indenfor de røde linjer er differenserne normalfordelte. Resultaterne blev også undersøgt om var normalfordelt og da det ikke var tilfældet, blev der udført en Wilcoxon test. Resultatet for den test ses i tabel 8. Tabel 7: viser resultaterne for Wilcoxon testen. Med den kan det ses om der er signifikant forskel på de to metoder. Wilcoxon's W statistic 149,5 2-tailed p < (normal approximation, corrected for ties) 14

15 Diskussion Valideringen gav en god akkuratesse, præcision og robusthed. Metodesammenligningen viser at der er signifikant forskel mellem de to metoder og at CLIA måler lidt højere end RIA. Men selvom der er forskel på de to metoder, fortæller valideringen ikke at CLIA er en dårligere metode. Faktisk viser CLIA sig at være en god metode, idet der ikke ses en CV% der er højere end 8% og en akkuratesse der viser at der måles tæt på den sande værdi, dog ses der lidt problemer i det lave måleområde. Det kan tyde på at RIA ikke er en dårlig metode, men ligger måske lidt længere fra den sande værdi end hvad CLIA gør, i hvert fald i dette tilfælde på KBA Køge sygehus. Andre studier har også udført forsøg med apparaturet Liaison fra DiaSorin, hvor der er udført metodesammenligninger. I dette studie ses der nærmere på hvad andre studier viser og siger om CLIA-metoden på apparaturet Liaison fra DiaSorin og RIA-metoden, og sammenlignes med dette studies resultater. Fejlkilder Under dette forsøg/projekt på KBA Køge sygehus har der været nogle systemfejl angående bestillinger af kontroller. Eksempelvis ved metodesammenligningen var der lidt problemer med apparaturet og indstillingen af kontroller. Liaisonapparatet bestilte ukontrollerede automatiske kontroller, hvilket hurtigt udløste mangel på kontrolmateriale. Det medførte stop på apparaturet, hvilket der hurtigt blev rettet op på. Dog havde de midlertidige afbrydelser haft en lille indflydelse på inkubationstiden, der blev indikeret ved at resultatet fik et flag der symboliserede +/- 2 minutter på inkubationstiden. Det udløste en bekymring for resultaterne, men da kontrollerne lå indenfor acceptintervallet, havde det ikke påvirket resultaterne. Under præcisionsmålingerne og robusthedsmålingerne havde det været en fordel hvis pool prøverne havde præsenteret tre forskellige niveauer og ikke kun de to det blev til. Idet der er så meget tale om vigtigheden af at kunne måle ved meget lave koncentrationer, havde det været oplagt at have haft en human prøve med en meget lav koncentration, som kunne havde været en del af præcisionsmålingerne og robusthedsmålingerne. I stedet bruges, hvad DiaSorin og andre har fundet ud af ved disse koncentrationer. Det eneste KBA Køge sygehus ved om lave koncentrationer, udspringer fra akkuratesseforsøget og der målte KBA Køge sygehus lidt under den sande værdi. Under akkuratesseforsøget blev der analyseret med en ikke godkendt kalibrering, men resultaterne blev godkendt idet kontrollerne efter endt analyse var acceptable. KBA Køge sygehus har ikke selv lavet fortyndingsrækken til akkuratesseforsøgene, hvilket havde været en fordel, idet der dermed ikke vides helt under hvilke forhold den blev lavet, dog stoler KBA Køge sygehus på at Biolab Glostrup Hospital har gjort det helt efter bogen. For at opnå pålidelige resultater, blev der gjort alt for at pool prøverne var ens og ville kunne opfattes som en og samme prøve fordelt i mindre portioner. Det blev blandt andet gjort ved at plasmaet fra de 10 EDTAglas blev blandet sammen i et bæger, et for hver af de tre testpersoner. På den måde blev det sikkert at det er den analytiske variation der blev målt og ikke den biologiske. Igen da vi modtog plasmaprøverne fra Biolab blev de straks opbevaret i -80 C fryseren for at undgå optøning og cryoaktivering. Valideringen Til præcisionsmålingen og robusthedsmålingen, hvor der blev anvendt prøver fra et humant pool, bestående af hvile, siddende og aktiv og et forsøg på at opnå plasma i tre forskellige niveauer henholdsvis lavt, normalt og højt, lykkedes ikke. Den siddende og aktive var i nogenlunde samme niveau, dermed blev der arbejdet med to niveauer. Det humane pool er baseret på raske personer og dermed har det været 15

16 svært at skabe et højt renin niveau. Det kan diskuteres om det overhovedet har været nødvendigt at lave det humane pool til præcisionsmålingen og robusthedsmålingen, man kunne have nøjes med at udføre målingerne med kontrolmateriale. Men idet kontrolmaterialet består af rekombineret renin og ikke humant renin, ville det være interessant at se hvordan CV% ville se ud med humant materiale. Idet det kan give det mest realistiske billede, man kunne forestille sig at der eksempelvis ikke fandtes prorenin i kontrolmaterialet hvilket er tilfældet for humane prøver. Præcisionsmålingerne skulle efter hensigten analyseres to gange, men ved en fejl var apparaturet ikke programmeret til at analysere i dobbeltbestemmelse, derfor måtte prøverne analyseres igen for at opnå et tilstrækkeligt antal målinger. Ved anden måling ses et generelt koncentrationsfald, for hvile falder koncentrationen gennemsnitlig med ca. 2 miu/l, for siddende er det med ca. 5 miu/l og for aktiv er det med ca. 3 miu/l. Det kan være årsag til, at der ses en større CV% (for hvile 7,7% og aktiv 5,0%) end hvad DiaSorin oplyser (prøve A 3,7% og prøve B 2,8%) (1).I øvrigt blev der ved en fejl ikke udført kontrolanalysering til sidst. Resultaterne for præcisionsmålingerne ses i tabel 1. Andre studier har også anvendt DiaSorin Liaison, deres resultater ses i tabel 9. Tabel 8: en oversigt over hvad andre studier har fået i den intraserielle måling. Først angives middelværdien og i parentesen angives CV%. Reference Middelværdi Renin i miu/l (CV%) KBA Køge (humant materiale) 15,1 (7,7) 33,9 (5,0) 37,6 (7,3) KBA Køge (kontrol materiale) 26,8 (3,7) 98,8 (2,8) DiaSorin (1) 15,1 (3,7) 33,8 (2,8) DiaSorin (kontrol materiale)(1) 27,1 (5,6) 99,0 (2,4) Dorrian et al (11) 25 (7,2) 106,9 (1,3) Tabel 9 viser en oversigt over hvad andre studier har fundet af CV% i deres intraserielle måling samt KBA Køge sygehus. KBA Køge sygehus har en højere CV% når det er humant materiale end når det er kontrolmateriale. Det kunne tyde på at der er forskel på om det er humant materiale eller om det er rekombineret materiale. DiaSorin har også anvendt kontrolmateriale til deres intraserielle måling. Her ses det at deres CV% er lidt højere for deres kontrolmateriale end for deres humane materiale. Der ses ikke nogen logisk forklaring på hvordan det kan lade sig gøre. KBA Køge sygehus CV% for kontrolmaterialet ligger meget tæt på det DiaSorin har af CV% for humant materiale, og bedre end DiaSorins CV% for kontrolmateriale. Dorrian et al CV% er tilnærmelsesvis tæt på KBA Køge sygehus CV% for humant materiale, det er dog ikke helt målt i samme niveau, og dermed kan det kun give en idé om hvor KBA Køge sygehus og Dorrian et al ligger i forholdt til hinanden. Da både KBA Køge sygehus og Dorrian et al begge er eksterne laboratorier er det tankevækkende at begge finder samme højere CV% end hvad DiaSorin oplyser. Akkuratesseforsøgene blev udført vha. korrekthedsmateriale fra NIBSC. Der blev fremstillet en, fortyndingsrække, tilsendt fra Biolab Glostrup Hospital. Ved analyse af fortyndingsrækken opstod der problemer med kontrollerne, idet de lå under acceptintervallet efter kalibreringen, de lå så indenfor acceptintervallet efter endt analysering. Der blev bestilt en ny kalibrering og det samme skete igen. Resultaterne blev accepteret idet resultaterne lå forholdsvis tæt på den beregnede værdi og fordi kontrollerne efter endt analyse var indenfor acceptintervallet. Resultaterne ses i tabel 2. Her ses at Bias% i den helt lave ende af måleområdet er høj, hvilket betyder at KBA Køge sygehus Liaison måler lavere end 16

17 den sande værdi i den del af måleområdet. Det fortæller også at Liaison tilsyneladende måler forkert i det område. Omkring de 5-6 miu/l i måleområdet begynder KBA Køge sygehus Liaison at måle højre end den sande værdi i form af at Bias% falder til negative værdier. Efter at Bias% bliver negativ ses der ikke noget systematik. Den negative Bias% overstiger ikke 10 % og det indikerer at KBA Køge sygehus Liaison måler tæt på den sande værdi. For at se om der var signifikant forskel mellem den sande værdi og CLIA-metoden blev der beregnet en parret t-test, der viste at der ikke var signifikant forskel. På figur 3 ses et biasplot over målingerne, her illustreres hvordan de ligger. Her ses det at de første fire målinger ligger meget tæt på 0. Og dermed meget tæt på den sande værdi, idet der ikke er nogen særlig stor differens. Herefter ses det at de sidste fire målinger ligger lidt mere spredt i takt med at der måles højere oppe i måleområdet, men ikke så det har større betydning. Idet alle målingerne ligger indenfor de røde stiplede linjer ses det at data er normalfordelt. Hvilket også de statistiske beregninger i tabel 4 viser. Ved robusthedsmålingerne var der både teknikkerbesøg og skiftning af integrale lot nummer. Der blev også ved flere lejligheder udskiftet vaskebuffer og starterreagens. Der blev løbende fyldt op af reagensmoduler. Under perioden blev der også kalibreret ved flere lejligheder samt udført vedligeholdelse af apparaturet. Efter disse faktorer blev målingerne vurderet og det blev besluttet at der var målinger nok. Resultaterne for robusthedsmålingerne ses i tabel 5. Flere har anvendt DiaSorin Liaison til forsøg hvor de har udført en interseriel måling, deres resultater ses i tabel 10. Tabel 9: en oversigt over hvad KBA Køge sygehus og andre har opnået af CV% i en interseriel måling. CV% angivet i parentes. Reference Middelværdi Renin i miu/l (CV%) KBA Køge (humant materiale) (tabel 3) 16,27 (6,43) 35,27(4,7)38,96(7,98) KBA Køge (kontrol materiale) 26,6(6,1) 97,3(6,0) DiaSorin sted 1 (1) 5,2(2,7) 13,2 (0,6) 34,4 (1,2) 83,0(0,9) 263,5(1,7) DiaSorin sted 2 (1) 17,3(12,2) 36,6(7,0) 82,3(5,4) 244,7(9,3) DiaSorin (kontrol materiale) sted 1 27,3(0,4) 103,0(0,2) (1) DiaSorin (kontrol materiale) sted 2 27,2(1,9) 100,2(4,2) (1) Dorrian et al (11) 4,9(9,2) 8,5(10,4) 27,5(7,9) 109,8(7,3) Morganti et al (12) 4,2(41,0) 12,4(24,7) 29,8(18,1)35,1(10,7) 50,5(11,5) 436(10,7) Tabel 10 viser en oversigt over CV% i den interserielle måling. Her ses det at KBA Køge sygehus CV% for det humane materiale er større i forhold til hvad DiaSorin har for deres humane materiale på sted 1, hvor kittet er udviklet. Men sammenlignes der med DiaSorin sted 2 der er et eksternt laboratorium, ser det bedre ud for KBA Køge sygehus CV%. Her ligger KBA Køge sygehus lidt lavere i CV% end sted 2. KBA Køge sygehus ligger lavere end Dorrian et al og Morganti et al., derimod ligger Dorrian et al meget ens med DiaSorin sted 2, hvor Morganti et al ligger meget langt fra hvad alle andre har fået af CV%, her ses der meget høje CV%. KBA Køge sygehus CV% for kontrolmateriale er lidt højere end hvad DiaSorin har fået både på sted 1 og 2. Det er modsat af hvad der var tilfældet i præcisionsmålingen, hvor KBA Køge sygehus havde en bedre CV% end DiaSorin hvad angår kontrolmateriale. Der er forskel på hvor mange målinger der er blevet udført for at opnå disse CV%. Eksempelvis har KBA Køge sygehus 15 målinger (tabel 5) med det humane materiale, hvor Dorrian et al har 28 målinger (11) og DiaSorin har 40 målinger for hvert sted (1). Dermed har KBA Køge sygehus ikke lige så mange målinger som de andre, men har alle faktorer med ind over når dag-til-dag 17

18 variationen skal findes. For at opnå alle faktorer kan det variere med mængden af målinger. Og udfra oversigten i tabel 10 ses det at KBA Køge sygehus har en fornuftig CV% i den interserielle måling, når man tænker på at der er med en immunkemisk reaktion at gøre. Metodesammenligning Ved metodesammenligningen blev der undersøgt om der var signifikant forskel på de to metoder. Til det blev der udført en non-parametrisk test (wilcoxon test). Resultaterne for wilcoxon testen ses i tabel 8. Her ses at sandsynligheden for at forskellen skyldes tilfældighed er 0,1%. Det betyder at der er signifikant forskel på de to metoder. For at illustrere hvordan målingerne lå i forhold til hinanden se figur 4. På Figur 4 ses et biasplot for CLIA vs. RIA. Her ses at målingerne ligger meget klumpet og tæt på 0, der ligger et par målinger lidt fra klumpen og til sidst ses to målinger helt ude i det høje område af måleområdet og med større differenser. Det ses også at jo længere op i måleområdet man kommer jo mere differens bliver der mellem de to metoder. Klumpen af målinger viser også at CLIA-metoden gennemsnitligt måler højere end RIA-metoden. Det er dog svært at se hvordan målingerne ligger præcist i forhold til hinanden. Idet de to målinger ligger langt fra de andre og for bedre at se hvordan målingerne i klumpen ligger, ekskluderes de to målinger og der blev lavet et nyt biasplot se figur 5. Her ses at målingerne ligger lidt mere spredt. Det ses også at størstedelen af målingerne har en negativ differens og dermed måler CLIA højere end RIA. Dette kunne måske skyldes en fejlkilde, det kunne være at prøverne har været udsat for cryoaktivering under transporten og dermed har der været mere prorenin i prøven end da de blev analyseret på Biolab Glostrup Hospital. Velvidende at der under en metodesammenligning hører en præcisionsmåling til, blev dette ikke udført med RIA-metoden idet det ikke var muligt. Der vil nu ses nærmere på hvad andre studier har fundet ud af ved deres metodesammenligninger. Morganti et al har udført en sammenligning mellem plasma renin aktivitet (PRA) og chemiluminescent immunreaktive renin (CLIR) og har diskuteret deres inter- og intraserielle variation. I begge undersøgelser havde CLIR en mindre variation end PRA. Der var dog en undtagelse ved et af deres laboratorier. De nævner at PRA har en dårlig reproducerbarhed og at det er en analysemetode der tager lang tid idet inkubationstiden er 18 timer (12), hvorimod CLIR er lettere at reproducere og har en inkubationstid på 30 minutter. Inkubationstiderne har både fordele og ulemper. Med den lange inkubationstid vil cryoaktiveret prorenin kunne lukke sig sammen igen, hvor det under den korte inkubationstid ikke kan nå at lukke sig sammen. En anden ting der kan give forhøjede renin koncentrationer er behandling med renin inhibitorer. Det er dokumenteret at aliskiren forandrer prorenin og gør det genkendeligt for fange antistoffet (antistoffet der er coated med de paramagnetiske partikler). Morganti et al er kommet frem til at CLIR er en valid analysemetode og er et godt alternativ til PRA til screening tests, så som aldosteron-renin ratio der bruges til diagnosticering af primær aldosteronisme. De nævner at CLIR er enklere, hurtigere og reproducerbart, dette gør CLIR til fremtiden. CLIR og CLIA består af samme analyseprincip og derfor er det muligt at sammenligne med KBA Køge sygehus resultater. KBA Køge sygehus fandt også en god reproducerbarhed i form af en CV% på mindre end 8% i robusthedsmålingerne. Dermed er KBA Køge sygehus og Morganti et al enige hvad det angår. Man skulle dog mene at KBA Køge sygehus er bedre til at reproducere hvis CV% sammenlignes, her ses i tabel 10, hvor Morganti et al finder store CV%. Dorrian et al har udført en screeningsprocedure for primær aldosteronisme baseret på den nye metode fra DiaSorin på apparaturet Liaison (CLIA). Dermed har Dorrian et al udført en metodesammenligning mellem CLIA og PRA. De finder frem til en overordnet god sammenhæng mellem de to metoder, dog ikke for prøver 18

19 der med metoden PRA var under 1ng/mL/h, her så man ikke nogen sammenhæng. Deres fokus var at klarlægge hvorvidt CLIA er anvendelig i forhold til screening af primær aldosteronisme og stadig bevare en god sensitivitet og specificitet. I deres forsøg på at sammenligne de to metoder som screeningstest fandt de frem til at den samme patientgruppe blev identificeret og dermed er CLIA ligeså anvendelig ved screening af primær aldosteronisme. Campell et al beskriver metoden ir-prc (immunoassay Plasma renin koncentration) som er ligesom CLIA. De nævner at ir-prc CV% er ens med CV% for PRA. De fortæller at ir-prc og PRA er ens og begge kan bruges til screening for primær aldosteronisme, men er dog skeptiske over at ir-prc kan give falsk positiv aldosteron-renin ratio, hvis patienten har nedsat plasma angiotensinogen koncentration. De virker skeptiske overfor at ir-prc kan måle ved meget lave koncentrationer, som er tilfældet for primær aldosteronisme, hvor der skal kunne måles < 2 miu/l (9). Ved at have set hvad andre studier fortæller om de to metoder og hvad KBA Køge sygehus selv har erfaret, ser det ud til at CLIA-metoden er ret ens med RIA-metoden også selvom KBA Køge sygehus måler lidt højere end Biolab Glostrup Hospital. Det der er vigtigt, er at man ikke for målt nogen der er syge til at være raske eller omvendt. Med det nuværende benyttede referenceinterval og med sammenligningen mellem CLIA og RIA, var der enkelte tilfælde hvor CLIA målte en syg til at være rask og omvendt. Det var dog omkring cut off værdierne i referenceintervallet. Men det udelukker ikke at KBA Køge sygehus kan anvende det samme referenceinterval, selvom der skriftes analysemetode, idet det kan skyldes en biologisk variation eller en analytisk variation. Ved et interview med Erik Frandsen Biolab Glostrup Hospital, fortalte han at de arbejder med en analytisk variation på 6 %, det er dog ikke noget der er dokumenteret. KBA Køge sygehus ville nok vælge at en lidt højere analytisk variation og dermed være dækket ind. Præanalytisk Hvad angår det præanalytiske ved denne analyse findes der ikke nogen standardisering indenfor det. DiaSorin skriver at prøvematerialet skal være humant EDTA-plasma og at klokkeslæt og patientens stilling skal noteres. De anbefaler at patientforberedelse og prøveindsamling bliver standardiseret (1). Efter prøvetagning skal prøverne centrifugeres i en ikke afkølet centrifuge, hvorefter EDTA-plasmaet skal adskilles fra cellerne, og straks nedfryses til -20 C eller derunder. De anbefaler prøverne straks bliver analyseret når de er sat på apparaturet. Alt dette blev der taget hensyn til. Ved alle patientprøver var prøvetagningen standardiseret, de blev taget liggende efter at patienten havde hvilet i en halv time. Campell et al beskriver at det præanalytiske er meget vigtig, man skal især undgå cryoaktivering som tidligere beskrevet foregår ved -5 C til 4 C. Derfor er det vigtigt at behandlingen af prøver foregår ved stuetemperatur eller ved -20 C eller derunder. Campell et al er ikke de eneste der nævner vigtigheden af at undgå cryoaktevering, det har Iervasi et al, Dorrian et al og Morganti et al også nævnt. Campell et al forklarer også vigtigheden af at prøverne hurtigt skal centrifugeres. Hvis en blodprøve står for længe ved stuetemperatur ville det kunne resultere i at prorenin vil åbne op. En anden grund kunne være at der ville være forskellige rumtemperaturer i de forskellige årstider. En tredje grund kunne være hvis patienten får inhibitor behandling eksempelvis aliskiren, for hvis dette er tilfældet vil inhibitorerne kunne åbne prorenin. De nævner at blodprøverne skal centrifugeres indenfor en halv time og helst indenfor 10 minutter. Straks efter centrifugering skal prøverne fryses ned. 19

20 Konklusion Idet valideringen gav en præcision og robusthed på < 8% samt en god akkuratesse, betragtes valideringen som værende godkendt. Dermed er det muligt at gennemføre en godkendt validering af analysen P-renin på apparaturet Liaison. Ved metodesammenligningen målte CLIA højere end RIA, men dermed kan det stadig anbefales at KBA Køge sygehus implementere analysen for P-renin. Det skal dog siges ved indførelse af analysen anbefales det at se hvad litteraturen siger ved speciale sygdomme. Det er også vigtigt at angive hvilken analytisk variation der arbejdes med så klinikeren kan tage højde for det. Perspektivering Det ville være muligt at fortsætte med den interserielle måling, idet der findes flere pool prøver i fryseren. En anden interessant undersøgelse kunne være at undersøge hvor stor betydning det har for prøven, hvis prøver bliver opbevaret i køleskab. Og ved implementering af analysen P-renin, er det vigtigt at få standardiseret prøvetagningen. 20

21 Referencer 1. Liaison Direct Renin (310470). DiaSorin S.p.A (2010) 2. Iervasi, A., Zucchelli, G.C., Turchi, S., Emdin, M., Passino, C., Ripoli, A., et al. (2005). Analytical and clinical performance of an automated chemiluminescent immunoassay for direct renin measurement: comparison with PRA and aldosterone assays. Science direct. 3. Lyngbye, J. (2001). Dansk laboratoriemedicin: en håndbog. København: Nyt Nordisk Forlag Arnold Busk. Side FA5A54F1637/0/Renin_P_0205.doc Klinisk Biokemi Køge/Fakse (2010). Validering af analysemetoder. Region Sjælland Sygehus Nord. 8. Andersen, H., Sørensen, U.B., Thomsen, E. (2008). Immunkemiske metoder teori og praksis. Nucleus. Side Campbell, D.J., Nussberger, J., Stowasser, M., Danser, A.H.J., Morganti, A., Frandsen, E., et al. (2009). Activity Assays and Immunoassays for Plasma Renin and Prorenin: Information Provided and Precautions Necessary for Accurate Measurement. Clinical Chemistry Lauritsen, O.S. (2008). Statistik for Bioanalytikere. Odontologisk Boghandel & Forlag, København. 11. Dorrian, C.A., Toole, B.J., Alvarez-Madrazo, S., Kelly, A., Connell, J.M., Wallace, A.M. (2010). A screening procedure for primary aldosteronisme based on the DiaSorin Liaison automated chemiluminescent immunoassay for direct renin. Clinical Biochemistry Morganti, A. (2010). A comparative study on inter and intralaboratory reproducibility of renin measurement with a conventional enzymatic method and a new chemiluminescent assay of immunoreactive renin. Hypertension 28:

22 Bilag Tabel 10: viser en detaljeret liste over de anvendte reagenser. Reagens Producent Lot. nr. Ref. nr. Udløbsdato Integrale (Direct Renin) DiaSorin / / Systemvæske/vaskebuffer DiaSorin Starterreagens 1 DiaSorin / / Starterreagens 2 DiaSorin / / Lyskontrol DiaSorin / / / / / Kontrol 1 DiaSorin Kontrol 2 DiaSorin Kalibrator A DiaSorin / Kalibrator B DiaSorin / Endocrinology Diluent DiaSorin Reaktionsmoduler (kuvetter) DiaSorin / / Renin (stamopløsning) 100 µl miu/l WHO 68/ (fortyndingsdato) Tabel 11: viser en detaljeret liste over de anvendte materialer. Materialer Producent Lot. nr. Ref. nr. Udløbsdato Venosafe 5,5 ml EDTA-glas Terumo Kanyle, (sommerfugl) Terumo B Adapter Terumo Afpippeteringsrør, (m. prop) Sarstedt 7332/ MN*SVS21 BQ30 XX- VF10HGSQ Engangspipetter Sarstedt Finpipette µl Thermo V88421 Pipettespidser (Finntip 1000) Thermo 9226A0 Finpipette 1-5 ml 2579 Pipettespidser (Finntip 5ml) Thermo 8120N0/9027M0 Pur-zellin, (vat) Hartmann Alkoswaps, (sprit) Medic Denmark LOT + 5 ÅR 22

23 Tabel 12: viser rådata for præcisionsmålingerne inklusiv kontroller. Prøveid Enhed µlu/ml Prøveid Enhed µlu/ml Prøveid Enhed µlu/ml Kontrol 1( 21,9-32,9) 28 Kontrol 2 (81,1-121,6) 99,7 Hvile 16,7 Siddende 40,7 Aktiv 34,7 Hvile 16,1 Siddende 40,7 Aktiv 35,1 Hvile 16,2 Siddende 40,4 Aktiv 35,8 Hvile 16,5 Siddende 40,3 Aktiv 35,4 Hvile 15,4 Siddende 40,2 Aktiv 35,8 Kontrol 1 26,7 Kontrol 2 98,2 Hvile 13,7 Siddende 36,4 Aktiv 32,7 Hvile 14,1 Siddende 35,2 Aktiv 30,8 Hvile 14,2 Siddende 34,7 Aktiv 31,7 Hvile 14,2 Siddende 35,4 Aktiv 32,6 Hvile 14,2 Siddende 36,7 Aktiv 32,9 Hvile 15,8 Siddende 37,3 Aktiv 35,3 Hvile 13,7 Siddende 33,1 Aktiv 33,9 Middelværdi 15, , , SD 1, , , CV% 7, , , Tabel 13: viser rådata over kontrollerne for præcisionsmålingen. Kontrolnr.: K1 K2 28,6 102,6 27,3 103,6 27,1 100,4 27,6 97,3 28,1 98,2 26,8 104, ,4 97,5 24,6 96,5 25,8 98,3 27,1 96,2 27,5 97,2 26,9 97,7 25,9 98, ,7 26,3 97,2 26,8 101,5 23

24 middelværdi 26, ,81176 SD 0, , CV% 3, , Tabel 14: viser rådata for akkuratesseforsøgene inklusiv kontroller og bias%. Prøveid Køge Sygehus - CLIA Enhed µlu/ml % Bias Kontrol 1 (21,9-32,9) 19,7 Kontrol 2 (81,1-121,6) 61,5 0 <0,5 Kontrol 1 22,9 Kontrol 2 89,8 Kontrol 1 15,4 Kontrol 2 71,3 0,98 <0,5 1,95 1,2 38, ,9 3,8 2, ,8 8,1-3, ,6 15,9-1, ,3 34,4-9, ,5 66,2-5, ,1-4, ,6-1, >500 Kontrol 1 24,6 Kontrol 2 87 Tabel 15: viser rådata for robusthedsmålingerne med humant materiale inklusiv bemærkninger ved skift af reagenser. Hvile Siddende Aktiv Bemærkning Enhed Enhed Enhed Prøvedato µlu/ml µlu/ml µlu/ml ,8 37,3 Kalibreret. Nyt starterreagens og 35,3 vaskebuffer. 13,7 33,1 33, ,8 40,4 34,7 Kalibreret ,9 36, ,4 43 Nyt vaskebuffer og 37,6 starterreagens. 17,6 42,1 39, , ,5 Nyt vaskebuffer. 17,1 40,1 35,3 Teknikker besøg, der blev skiftet pippetter og starterpumpe ,9 35,5 35,1 Kalibreret. Nyt vaskebuffer og starterreeagens. 24

25 16,5 35,8 34, ,9 34,5 32, ,5 43,3 33,4 16,5 40,1 35, , , ,3 34,7 Nyt integrale lot. nr. tages i brug. Kalibreret. Nyt starterreagens. Kalibreret. Nyt vaskebuffer. Nyt starterreagens og vaskebuffer. Middelværdi 16, ,96 35, SD 1, , , CV% 6, , , Tabel 16: viser rådata for robusthedsmålingerne med kontrolmateriale. Kontrol 1 Kontrol 2 Prøvedato Enhed: miu/l Enhed: miu/l ,2 99,6 27,8 99, ,5 26,5 99,9 26, , ,6 102,6 27,3 103,6 27,1 100,4 27,6 97,3 28,1 98,2 26,8 104, ,4 97,5 24,6 96,5 25,8 98,3 27,1 96,2 27,5 97,2 26,9 97,7 25,9 98, ,7 26,3 97,2 26,8 101,5 27,2 101,4 26, ,

Validitetserklæring for NPU02497 P-Insulin;stofk.

Validitetserklæring for NPU02497 P-Insulin;stofk. Valideringsperiode: December2010- Januar 2011 Arbejdsgruppe: Udstyr: Specialist bioanalytiker Britta Lende Poulsen Bioanalytiker underviser Britta Nielsen Kvalitetsleder Karin Heidemann Advia Centaur XP

Læs mere

Validitetserklæring for NPU01700 P-Cobalamin; stofk.

Validitetserklæring for NPU01700 P-Cobalamin; stofk. Valideringsperiode: Marts 2011 Arbejdsgruppe: Udstyr: Specialist bioanalytiker Britta Lende Poulsen Bioanalytiker Birgitte Riber Christoffersen Kvalitetsleder Karin Heidemann Advia Centaur XP Serienummer:

Læs mere

Validering af P-TSH, P-T3 og P-FT4 udført på. Immulite 2500

Validering af P-TSH, P-T3 og P-FT4 udført på. Immulite 2500 Professionsbachelorprojekt 2010 Ved: Bioanalytikeruddannelsen København Metropol Validering af P-TSH, P-T3 og P-FT4 udført på Immulite 2500 Immulite 2500. [1] Udarbejdet af: Watfaa Saad Majeed, 28.04.1985

Læs mere

Validitetserklæring for NPU27547 P-Thyrotropin (TSH); arb. stofk.

Validitetserklæring for NPU27547 P-Thyrotropin (TSH); arb. stofk. Valideringsperiode: Januar 2011 Arbejdsgruppe: Udstyr: Specialist bioanalytiker Britta Lende Poulsen Bioanalytiker underviser Britta Nielsen Kvalitetsleder Karin Heidemann Advia Centaur XP Serienummer:

Læs mere

Validitetserklæring for NPU19923 P-troponin I, hjertemuskel;massek.

Validitetserklæring for NPU19923 P-troponin I, hjertemuskel;massek. Valideringsperiode: Marts April 2011 Arbejdsgruppe: Udstyr: Specialist bioanalytiker Britta Lende Poulsen Bioanalytiker underviser Britta Nielsen Kvalitetsleder Karin Heidemann Advia Centaur XP Serienummer:

Læs mere

Validitetserklæring for NPU04073 P-Homocystein;stofk.

Validitetserklæring for NPU04073 P-Homocystein;stofk. Valideringsperiode: April Maj 2011 Arbejdsgruppe: Udstyr: Specialist bioanalytiker Britta Lende Poulsen Bioanalytiker Birgitte Riber Christoffersen Kvalitetsleder Karin Heidemann Advia Centaur XP Serienummer:

Læs mere

Validitetserklæring for NPU19763 P-Ferritin;massek.

Validitetserklæring for NPU19763 P-Ferritin;massek. Valideringsperiode: December 2010 Januar 2011 Arbejdsgruppe: Udstyr: Specialist bioanalytiker Britta Lende Poulsen Bioanalytiker underviser Britta Nielsen Kvalitetsleder Karin Heidemann Advia Centaur Serienummer:

Læs mere

Metodevalidering af High Sensitive C- Reaktive Protein

Metodevalidering af High Sensitive C- Reaktive Protein 2013/- 2014 Metodevalidering af High Sensitive C- Reaktive Protein BACHELOROPGAVE UGE 41/2013 TIL UGE 01/2014 PH METROPOL KØBENHAVN BIOANALYTIKER UDDANNELSE HEIDI RAVN FØDT: 090277-1972 HOVEDVEJLEDER:

Læs mere

3006-VAL-1 Cobas e411_probnp.doc Bispebjerg Hospital 2010-09-01/ Forfatter: Pernille Pflug-Christensen Dokumentansvarlig: Pia Ussing.

3006-VAL-1 Cobas e411_probnp.doc Bispebjerg Hospital 2010-09-01/ Forfatter: Pernille Pflug-Christensen Dokumentansvarlig: Pia Ussing. VALIDERINGSRAPPORT COBAS e411 Godkendt til ikrafttrædelse Dato: 21-9-23 Underskrift: 1. INDLEDNING... 2 2. ANALYSEDATA... 2 2.1 Navn, IUPAC-kode eller dansk kode og enhed... 2 2.2 Engelsk navn... 2 2.3

Læs mere

Metodeblad for P-GAD65- Ab

Metodeblad for P-GAD65- Ab Sheet Metodeblad for P-GAD65- Ab C2 Ensure and Monitor Customer and Stakeholder Satisfaction Metodeblad for P-Glutamatdecarboxylase(GAD65)-antistof;arb.stofk. Indikation Forberedelse af patient Præanalytiske

Læs mere

Metodeblad for P-Insulinantistof

Metodeblad for P-Insulinantistof Quality Sheet Metodeblad for P-Insulinantistof C2 Ensure and Monitor Customer and Stakeholder Satisfaction Metodeblad for P-Insulin-antistof; arb.stofk.(proc.) Indikation Forberedelse af patient Præanalytiske

Læs mere

Klinisk biokemisk afdeling 2006-06-06 Dok.nr. V-9047-1

Klinisk biokemisk afdeling 2006-06-06 Dok.nr. V-9047-1 Amager Hospital Klinisk biokemisk afdeling 2006-06-06 Valideringsrapport for undersøgelser og udstyr Udarbejdet efter retningslinier angivet i Dok P-2037. Undersøgelse: Nyt koagulationsudstyr til afløsning

Læs mere

Gentofte Hospital Dato: / Klinisk-biokemisk afdeling. Validering

Gentofte Hospital Dato: / Klinisk-biokemisk afdeling. Validering Udarbejdet af: Taget i brug: 29.01.2007 Karin Heidemann Erstatter: 03.11.2006 Målegruppe: Alle, der deltager i validering Dokumenthistorik Revision: 29.01.2009 Rum nr.: Side / punkt Ændring / tilføjelse

Læs mere

Usikkerhed - Laboratoriets krav og klinisk relevan

Usikkerhed - Laboratoriets krav og klinisk relevan Usikkerhed - Laboratoriets krav og klinisk relevan Henrik L. Jørgensen Klinisk Biokemisk Afdeling Bispebjerg Hospital GUM - definitioner Standard uncertainty Uncertainty of the result of a measurement

Læs mere

Bestemmelse af B-hæmoglobin (Fe) stofkoncentration i blodet ved metodesammenligning på ADVIA 2120 VS. HemoCue 102+.

Bestemmelse af B-hæmoglobin (Fe) stofkoncentration i blodet ved metodesammenligning på ADVIA 2120 VS. HemoCue 102+. Bestemmelse af B-hæmoglobin (Fe) stofkoncentration i blodet ved metodesammenligning på ADVIA 2120 VS. HemoCue 102+. Bachelorprojekt Bioanalytikeruddannelsen København Udarbejdet af Sabero Mohammad (f.

Læs mere

Validering af kliniske biokemiske analyser Forenklinger og fælles fodslag i fremtiden?

Validering af kliniske biokemiske analyser Forenklinger og fælles fodslag i fremtiden? Validering af kliniske biokemiske analyser Forenklinger og fælles fodslag i fremtiden? CVU Øresund Bioanalytikeruddannelsen København 29-11-2007 Overlæge, dr.med. Ulrik Gerdes Klinisk Biokemisk Laboratorium

Læs mere

Metodeblad for P- Proinsulin

Metodeblad for P- Proinsulin Quality Sheet Metodeblad for P- Proinsulin C2 Ensure and Monitor Customer and Stakeholder Satisfaction Metodeblad for P-Proinsulin;stofk Indikation Forberedelse af patient Præanalytiske fejlkilder Prøvemateriale

Læs mere

Præanalytiske forhold

Præanalytiske forhold Præanalytiske forhold Ann Jepsen & Lotte Foegt Poulsen & Yokelin Chan Temadag 2012 Præanalytiske forhold Præanalytiske forhold er de faktorer der kan påvirke analyseresultatet før f r blodprøvetagning,

Læs mere

VALIDERINGSRAPPORT Architect FT4

VALIDERINGSRAPPORT Architect FT4 VALIDERINGSRAPPORT Architect FT4 Godkendt til ikrafttrædelse Dato: 2009-01-13 Underskrift: 1. INDLEDNING... 2 2. ANALYSEDATA... 2 2.1 Navn, IUPAC-kode eller dansk kode og enhed... 2 2.2 Engelsk navn...

Læs mere

Analysenavn: D-Bilirubin NPU: 17194

Analysenavn: D-Bilirubin NPU: 17194 Metodesammenligning Master app. Analysenavn: D-Bilirubin NPU: 17194 Ansvarlig : HJ Dato : 01-11-07 APPARATUR Cobas 1 Næstved Resultater Student s t-test serienummer: Core: AF0634-27, C: AA0632-16 Beregnet

Læs mere

Linda Kjærgaard Professionsbachelorprojekt 03.01.13

Linda Kjærgaard Professionsbachelorprojekt 03.01.13 Kortisol i spyt Af Linda Kjærgaard Bioanalytikeruddannelsen, University College Sjælland Campus Næstved Kortisol i spyt Af Linda Kjærgaard Modul 14 Professionsbachelorprojekt 2012-2013 I-vejleder: Tina

Læs mere

Kemiøvelse 2 1. Puffere

Kemiøvelse 2 1. Puffere Kemiøvelse 2 1 Puffere Øvelsens pædagogiske rammer Sammenhæng Denne øvelse er tilpasset kemiundervisningen på modul 3 ved bioanalytikeruddannelsen. Kemiundervisningen i dette modul indeholder blandt andet

Læs mere

Epidemiologi og Biostatistik

Epidemiologi og Biostatistik Kapitel 1, Kliniske målinger Epidemiologi og Biostatistik Introduktion til skilder (varianskomponenter) måleusikkerhed sammenligning af målemetoder Mogens Erlandsen, Institut for Biostatistik Uge, torsdag

Læs mere

Velkommen til LKO temadag. 4. marts 2014

Velkommen til LKO temadag. 4. marts 2014 Velkommen til LKO temadag 4. marts 2014 Præanalytiske forhold ved prøvetagning Yokelin Chan Habibah Larsen Afdeling KBF Odense Universitetshospital Præanalytiske forhold Definition: Korrekt blodprøvetagning

Læs mere

VALIDERINGSRAPPORT Architect TSH

VALIDERINGSRAPPORT Architect TSH VALIDERINGSRAPPORT Architect TSH Godkendt til ikrafttrædelse Dato: 2009-01-13 Underskrift: 1. INDLEDNING... 2 2. ANALYSEDATA... 2 2.1 Navn, IUPAC-kode eller dansk kode og enhed... 2 2.2 Engelsk navn...

Læs mere

QuikRead CRP fra ORION Diagnostica A/S. Rapport fra en afprøvning i regi af SKUP

QuikRead CRP fra ORION Diagnostica A/S. Rapport fra en afprøvning i regi af SKUP QuikRead CRP fra ORION Diagnostica A/S Rapport fra en afprøvning i regi af SKUP Side 1 af 18 INDHOLDSFORTEGNELSE RESUME........................................................... 2 PLANLÆGNING.....................................................

Læs mere

Leucosep rør LTK.615 INDLÆGSSEDDEL. Til diagnostisk anvendelse in vitro PI-LT.615-DK-V3

Leucosep rør LTK.615 INDLÆGSSEDDEL. Til diagnostisk anvendelse in vitro PI-LT.615-DK-V3 Leucosep rør LTK.615 INDLÆGSSEDDEL Til diagnostisk anvendelse in vitro PI-LT.615-DK-V3 Vejledende information Tilsigtet anvendelse Leucosep rørene er beregnet til anvendelse i forbindelse med indsamling

Læs mere

Holdbarhed på Parathyreoideahormon; stofk. (pmol/l) på Cobas 8000

Holdbarhed på Parathyreoideahormon; stofk. (pmol/l) på Cobas 8000 Holdbarhed på Parathyreoideahormon; stofk. (pmol/l) på Cobas 8000 Forfatter:, 09-12-89, studienr.: 60080393 Bioanalytikeruddannelsen, PH Metropol, modul 14, 7. oktober 2013 2. januar 2014 Vejledere: Kathrine

Læs mere

7. semester Bachelorprojekt, Bioanalytikeruddannelsen, Metropol. Metodevalidering af P- M-komponent; arb.k.(0,1), på Capillarys 2.

7. semester Bachelorprojekt, Bioanalytikeruddannelsen, Metropol. Metodevalidering af P- M-komponent; arb.k.(0,1), på Capillarys 2. 7. semester Bachelorprojekt, Bioanalytikeruddannelsen, Metropol Metodevalidering af P- M-komponent; arb.k.(0,1), på Capillarys 2. Skrevet af: Jesper Østrup Nielsen 29.10.1984 Vejledere: Conni Jølving,

Læs mere

Vestsjællands Amtssygehus Klinisk Biokemisk Afdeling Centralsygehuset i Slagelse

Vestsjællands Amtssygehus Klinisk Biokemisk Afdeling Centralsygehuset i Slagelse Bilag D Vestsjællands Amtssygehus Klinisk Biokemisk Afdeling Centralsygehuset i Slagelse INTERN RAPPORT Afprøvning af Immunofixation af M-komponenter (Bestemmelse af immunoglobulin-klasse og -type) på

Læs mere

MODULPLAN Bioanalytikeruddannelsen

MODULPLAN Bioanalytikeruddannelsen Obligatorisk Modulbeskrivelse præsenterer de studerende til bioanalytikerprofessionen og har fokus på basale laboratoriefærdigheder herunder den til grundlæggende naturvidenskabelige teori. Undervisningen

Læs mere

0 Indhold. Titel: Klorofyl a koncentration. Dokumenttype: Teknisk anvisning. Version: 1

0 Indhold. Titel: Klorofyl a koncentration. Dokumenttype: Teknisk anvisning. Version: 1 Titel: Klorofyl a koncentration Dokumenttype: Teknisk anvisning Forfattere: Stiig Markager og Henrik Fossing TA henvisninger TA. nr.: M07 Version: 1 Oprettet: 20.12.2013 Gyldig fra: 20.12.2013 Sider: 10

Læs mere

Skriftlig tværfaglig mappe-eksamen. onsdag den 25. aug. 2010 kl. 10.00 torsdag den 26. aug. kl. 10.00

Skriftlig tværfaglig mappe-eksamen. onsdag den 25. aug. 2010 kl. 10.00 torsdag den 26. aug. kl. 10.00 Skriftlig tværfaglig mappe-eksamen S5 onsdag den 25. aug. 2010 kl. 10.00 torsdag den 26. aug. kl. 10.00 Væsentligste hjælpemidler: Mappen, Dansk Laboratoriemedicin, Databog i fysik og kemi og lommeregner.

Læs mere

Nye metoder til bestemmelse af KCl i halm

Nye metoder til bestemmelse af KCl i halm RESUME for Eltra PSO-F&U projekt nr. 3136 Juli 2002 Nye metoder til bestemmelse af KCl i halm Indhold af vandopløselige salte som kaliumchlorid (KCl) i halm kan give anledning til en række forskellige

Læs mere

Præanalytiske fejlkilder ved brug af POC udstyr

Præanalytiske fejlkilder ved brug af POC udstyr Præanalytiske fejlkilder ved brug af POC udstyr LKO temadag 2012 POC udstyr hvor der anvendes Kuvette/Kasette/Strips/Kapillærrør Fyldning af kuvetter/strips/kapillærrør Skal fyldes helt op, der må ikke

Læs mere

STUDIEPLAN Modul 4 Bioanalytikeruddannelsen Bioanalytisk kvalitetssikring Odense, UCL

STUDIEPLAN Modul 4 Bioanalytikeruddannelsen Bioanalytisk kvalitetssikring Odense, UCL litteratur Analyser og analyseprincipper på biomolekylært niveau Analyser og analyseprincipper på celle- og vævsniveau Analyser og analyseprincipper på organniveau 8,5 ECTS viden om eksemplarisk udvalgte

Læs mere

Kvantitativ bestemmelse af reducerende sukker (glukose)

Kvantitativ bestemmelse af reducerende sukker (glukose) Kvantitativ bestemmelse af reducerende sukker (glukose) Baggrund: Det viser sig at en del af de sukkerarter vi indtager med vores mad er hvad man i fagsproget kalder reducerende sukkerarter. Disse vil

Læs mere

U n d e r s ø g e l s e a f F o l a t - a n a l y s e m å l t p å A u t o D e l f i a o g A r c h i t e c t i 2 0 0 0 SR

U n d e r s ø g e l s e a f F o l a t - a n a l y s e m å l t p å A u t o D e l f i a o g A r c h i t e c t i 2 0 0 0 SR U n d e r s ø g e l s e a f F o l a t - a n a l y s e m å l t p å A u t o D e l f i a o g A r c h i t e c t i 2 0 0 0 SR a. ) E r c s - F o l a t e r o g P - F o l a t m å l t p å A u t o D e l f i a b.

Læs mere

Metodeblad for P- Proinsulin C-peptid

Metodeblad for P- Proinsulin C-peptid List Metodeblad for P- Proinsulin C-peptid C2 Ensure and Monitor Customer and Stakeholder Satisfaction Metodeblad for P-Proinsulin C-peptid;stofk Indikation Forberedelse af patient Præanalytiske fejlkilder

Læs mere

Holdbarhed på udvalgte kemiske og immunkemiske analyser

Holdbarhed på udvalgte kemiske og immunkemiske analyser Holdbarhed på udvalgte kemiske og immunkemiske analyser Analyseret i Lithium Heparin rør med og uden gel på Cobas 8000 Natacha Fischer 60081005 og Maria Mejnborg Hansen 60081009 Modul 14 Bachelorprojekt

Læs mere

S4-S5 statistik Facitliste til opgaver

S4-S5 statistik Facitliste til opgaver S4-S5 statistik Facitliste til opgaver Opgave 1 Middelværdien angiver det bedste bud på serummets sande værdi, mens spredningen angiver analyseusikkerheden. 95%-Konfidensinterval = Ja Standardafvigelsen

Læs mere

Kemiøvelse 2 C2.1. Buffere. Øvelsens pædagogiske rammer

Kemiøvelse 2 C2.1. Buffere. Øvelsens pædagogiske rammer Kemiøvelse 2 C2.1 Buffere Øvelsens pædagogiske rammer Sammenhæng Denne øvelse er tilpasset kemiundervisningen på modul 3 ved bioanalytikeruddannelsen. Kemiundervisningen i dette modul indeholder blandt

Læs mere

Validation of f-calprotectin assay by ELISA

Validation of f-calprotectin assay by ELISA - As well as comparison of collection- and extraction procedures. Karina Jensen BEP 2000 Advance ScheBo Quick-prep Quantum Blue Validation of f-calprotectin assay by ELISA - As well as comparison of collection-

Læs mere

ScanGel Monoclonal ABO/RH1/K 86495 48 kort 86485 288 kort

ScanGel Monoclonal ABO/RH1/K 86495 48 kort 86485 288 kort ScanGel Monoclonal ABO/RH1/K 86495 48 kort 86485 288 kort GELER INDEHOLDENDE MONOKLONALE REAGENSER AF MURIN ELLER HUMAN OPRINDELSE ABO1, ABO2, RH1, KEL1 Ag BESTEMMELSE IVD Alle de af Bio-Rad producerede

Læs mere

Reflektometrisk cholesterolmåling

Reflektometrisk cholesterolmåling cq1.1 Reflektometrisk cholesterolmåling Øvelsens pædagogiske rammer Sammenhæng Denne øvelse indgår på modul 9 ved Bioanalytikeruddannelsen i et undervisningsforløb der er sammensat af kemi og patofysiologi.

Læs mere

Hvad influerer på analyseresultaterne? Efterår 2015

Hvad influerer på analyseresultaterne? Efterår 2015 Hvad influerer på analyseresultaterne? En træt patient hos den praktiserende læge En 6 årig mandlig patient klager over træthed. Der måles B- hæmoglobin hos den praktiserende læges og resultatet siger:

Læs mere

PRO Datablade.doc Bispebjerg Hospital / Forfatter: Ingelise Marcussen Dokumentansvarlig: Henrik Jørgensen

PRO Datablade.doc Bispebjerg Hospital / Forfatter: Ingelise Marcussen Dokumentansvarlig: Henrik Jørgensen DATABLADE Godkendt til ikrafttrædelse Dato: 2010-06-18 Godkendt udskrift nr. Underskrift: 1. INDLEDNING... 2 2. FORMÅL... 2 3. DEFINITIONER OG ANSVARSOMRÅDER... 2 4. ANVENDELSE OG FREMGANGSMÅDE... 2 4.1

Læs mere

Laboratorieprotokol for manuel isolering af DNA fra 0,5 ml prøve

Laboratorieprotokol for manuel isolering af DNA fra 0,5 ml prøve Laboratorieprotokol for manuel isolering af DNA fra 0,5 ml prøve Til isolering af genomisk DNA fra indsamlingssætserierne Oragene - og ORAcollect. Du kan finde flere sprog og protokoller på vores webside

Læs mere

Rapport December Miljøstyrelsen. BOD 5 på lavt niveau. Evaluering af BOD 5 metoder til anvendelse på detektionsgrænseniveau i spildevand

Rapport December Miljøstyrelsen. BOD 5 på lavt niveau. Evaluering af BOD 5 metoder til anvendelse på detektionsgrænseniveau i spildevand Rapport December 2000 Miljøstyrelsen BOD 5 på lavt niveau Evaluering af BOD 5 metoder til anvendelse på detektionsgrænseniveau i spildevand Agern Allé 11 2970 Hørsholm Tel: 4516 9200 Fax: 4516 9292 E-mail:

Læs mere

2014 Professionshøjskolen Metropol

2014 Professionshøjskolen Metropol 2014 Professionshøjskolen Metropol Udarbejdet af: Diana Maarouf 020388-2920 Studienr: 60080560 Bachelorperioden : 17/03/14-20/06/14 Vejledere: Henriette Lorenzen Lektor Bioanaltikeruddannelsen København

Læs mere

Thyreoidea hormoner, frie i forhold til index målt på ADVIA Centaur

Thyreoidea hormoner, frie i forhold til index målt på ADVIA Centaur Thyreoidea hormoner, frie i forhold til index målt på ADVIA Centaur Figur 1 Her ses ADVIA Centaur [1] Lisa Skotte 220387 studie nr. 60080100 Projekt periode fra den. 19. marts til den 7. juni 2012 Bachelorprojekt

Læs mere

Validering af fæces-calprotectin, på BEP 2000 Advance

Validering af fæces-calprotectin, på BEP 2000 Advance Validering af fæces-calprotectin, på BEP 2000 Advance - med undersøgelse af en udskiftning af ekstraktionsmetode og afprøvning af Quantum Blue på klinisk biokemisk afdeling, Køge Mia Kühl Laursen 03-01-2014

Læs mere

1.trimester doubletest analyseret og afprøvet på Immulite 2500 med henblik på overførsel fra Delfia Xpress

1.trimester doubletest analyseret og afprøvet på Immulite 2500 med henblik på overførsel fra Delfia Xpress 1.trimester doubletest analyseret og afprøvet på Immulite 2500 med henblik på overførsel fra Delfia Xpress eller 7. semester bachelorprojekt Afsluttet januar 2009 Udarbejdet af: Gülcan Kutluca Yilmaz Klinisk

Læs mere

Fyraftensmøde for Almen Praksis

Fyraftensmøde for Almen Praksis Fyraftensmøde for Almen Praksis Opgaver Praktiske ting Laboratoriekonsulent Tina Skov Larsen og Hanne Lise Pedersen Klimaskab Global 8 C Leveres ultimo september af firmaet Vibocold Datoer er tilsendt

Læs mere

Øvelse med tarmkræftceller i kultur.

Øvelse med tarmkræftceller i kultur. Øvelse med tarmkræftceller i kultur. Baggrund Hver 3. dansker bliver ramt af kræft, inden de er blevet 75 år. Tyktarmskræft er den 3. hyppigste kræftform hos både mænd og kvinder, hvor henholdsvis 7.3

Læs mere

ELISA Kvantitativ bestemmelse af human IgA i brystmælk Elevvejledning.

ELISA Kvantitativ bestemmelse af human IgA i brystmælk Elevvejledning. ELISA Kvantitativ bestemmelse af human IgA i brystmælk Elevvejledning. Professionshøjskolen University College Nordjyland Laborantafdelingen 2012 Side 1 Indledning En kvinde føder og bliver mor til sit

Læs mere

Nordjysk Praksisdag 2014

Nordjysk Praksisdag 2014 Nordjysk Praksisdag 2014 - Skæve laboratorieværdier Case En 55 årig kvinde som er træt, kommer i klinikken til en screening Lidt kataralsk, lidt hoste, føler sig lidt varm men har ikke haft feber Får ingen

Læs mere

Læring af test. Rapport for. Aarhus Analyse Skoleåret

Læring af test. Rapport for. Aarhus Analyse  Skoleåret Læring af test Rapport for Skoleåret 2016 2017 Aarhus Analyse www.aarhus-analyse.dk Introduktion Skoleledere har adgang til masser af data på deres elever. Udfordringen er derfor ikke at skaffe adgang

Læs mere

Metodeblad for P-Insulin

Metodeblad for P-Insulin List Metodeblad for P-Insulin C2 Ensure and Monitor Customer and Stakeholder Satisfaction Metodeblad for P-Insulin;stofk. Indikation Forberedelse af patient Præanalytiske fejlkilder Prøvemateriale Vurdering

Læs mere

En intro til radiologisk statistik. Erik Morre Pedersen

En intro til radiologisk statistik. Erik Morre Pedersen En intro til radiologisk statistik Erik Morre Pedersen Hypoteser og testning Statistisk signifikans 2 x 2 tabellen og lidt om ROC Inter- og intraobserver statistik Styrkeberegning Konklusion Litteratur

Læs mere

Mettler analysevægt 2,34 3,05 5,20 6,20 8,15 10,32 11,01 11,72 12,27 12,88 14,83 15,23 17,64

Mettler analysevægt 2,34 3,05 5,20 6,20 8,15 10,32 11,01 11,72 12,27 12,88 14,83 15,23 17,64 Opgave 1 (s1 opgave 38) To forskellige laboratorievægte ønskes sammenlignet. Man afvejer derfor en række prøver på begge vægte med følgende resultater (alle i gram): Sartorius analysevægt 2,36 3,05 5,19

Læs mere

Studieplan Biostatistik Semester 2

Studieplan Biostatistik Semester 2 OMRÅDET FOR SUNDHEDSUDDANNELSER Studieplan Biostatistik Semester 2 Bioanalytikeruddannelsen i Odense Forår 2017 Semester 2 Indhold 1. Fagets fokus og emner... 3 2. Lektionsplan... 4 3. Litteraturliste...

Læs mere

Metodeblad for Hemoglobin A1C (HbA1C) på DCA Vantage

Metodeblad for Hemoglobin A1C (HbA1C) på DCA Vantage Quality Sheet Metodeblad for Hemoglobin A1C (HbA1C) på DCA Vantage C2 Ensure and Monitor Customer and Stakeholder Satisfaction Indikation Forberedelse af patient Præanalytiske fejlkilder Prøvemateriale

Læs mere

Bestemmelse af kroppens fysiske tilstand

Bestemmelse af kroppens fysiske tilstand Bestemmelse af kroppens fysiske tilstand Forsøg udført af Nicolaj Seistrup, Christian Starcke, Kim, mark og Henrik Breddam Rapport skrevet af Henrik Breddam den 2006-10-25 Rapport længde 7 sider Side 1

Læs mere

SOP #1, HÅNDTERING AF BLOD

SOP #1, HÅNDTERING AF BLOD Introduktion Følgende standard operating procedure (SOP) beskriver arbejdsgangen i forbindelse med indsamling og håndteringen af blod til opbevaring i (DRB). Blod tappes fra reumatologiske patienter én

Læs mere

Udvikling og validering af ELISA test til bestemmelse af Newcastle Disease antistoffer i serum og æg

Udvikling og validering af ELISA test til bestemmelse af Newcastle Disease antistoffer i serum og æg Udvikling og validering af ELISA test til bestemmelse af Newcastle Disease antistoffer i serum og æg Rapport over forsøg finansieret af Fjerkræafgiftsfonden i projektåret 2007/2008 Forfattere: Lis Olesen,

Læs mere

ELISA Immuno Explorer TM Kit

ELISA Immuno Explorer TM Kit - 1 - ELISA Immuno Explorer TM Kit Katalog nummer 166-2400EDU Til læreren Dette kit er lavet for at lette og illustrere immunologiundervisningen og kan give en øget forståelse af antigen-antistof interaktionen,

Læs mere

Vejledning til indkøb på aftalen for basis apparatur og instrumenter

Vejledning til indkøb på aftalen for basis apparatur og instrumenter Vejledning til indkøb på aftalen for basis apparatur og instrumenter Indkøb af basis apparatur og instrumenter til brug på AU s laboratorier, foretages på nærværende aftale. Aftalen indeholder 11 delaftaler

Læs mere

Teknisk anvisning for marin overvågning

Teknisk anvisning for marin overvågning NOVANA Teknisk anvisning for marin overvågning 2.3 Klorofyl a Britta Pedersen H Afdeling for Marin Økologi Miljøministeriet Danmarks Miljøundersøgelser 2.3-1 Indhold 2.3 Klorofyl-a 2.3-3 2.3.1 Formål 2.3-3

Læs mere

Produktinformation. Brugervejledning. Blodprøvetagning / aflæsning Opbevaring Sikkerhedshensyn Rengøring af stativer. Vedr.: VT+ESRV og RA+ESRV

Produktinformation. Brugervejledning. Blodprøvetagning / aflæsning Opbevaring Sikkerhedshensyn Rengøring af stativer. Vedr.: VT+ESRV og RA+ESRV Blodprøvetagning / aflæsning Opbevaring Sikkerhedshensyn Rengøring af stativer 1 Blodprøvetagning: Følg trin for trin vejledning på side 3 Ved brug af sommerfugle tages evt. andre rør eller dummy først

Læs mere

Naturstyrelsens Referencelaboratorium for Kemiske og Mikrobiologiske Miljømålinger NOTAT

Naturstyrelsens Referencelaboratorium for Kemiske og Mikrobiologiske Miljømålinger NOTAT Naturstyrelsens Referencelaboratorium for Kemiske og Mikrobiologiske Miljømålinger NOTAT Til: Følgegruppen for Naturstyrelsens Referencelaboratorium cc: Fra: Ulla Lund Dato: 6. juni 2016 QA: Emne: Maj-Britt

Læs mere

Neonatal screeningsalgoritme for cystisk fibrose

Neonatal screeningsalgoritme for cystisk fibrose Neonatal screeningsalgoritme for cystisk fibrose Forslag til dansk screeningsalgoritme for CF 1. First tier: Alle nyfødte får målt immunoreaktiv trypsinogen (IRT) i den etablerede filterpapirblodprøve,

Læs mere

En undersøgelse af hæmolytisk interferens på analyserne Folat, vitamin B12 og Lactat dehydrogenase på Architect fra Abbott.

En undersøgelse af hæmolytisk interferens på analyserne Folat, vitamin B12 og Lactat dehydrogenase på Architect fra Abbott. En undersøgelse af hæmolytisk interferens på analyserne Folat, vitamin B12 og Lactat dehydrogenase på Architect fra Abbott. Professionsbachelorprojekt Udarbejdet af: Maria Dam Jensen, 142598 Antal tegn:

Læs mere

En intro til radiologisk statistik

En intro til radiologisk statistik En intro til radiologisk statistik Erik Morre Pedersen Hypoteser og testning Statistisk signifikans 2 x 2 tabellen og lidt om ROC Inter- og intraobserver statistik Styrkeberegning Konklusion Litteratur

Læs mere

Blodprøvetagning - Venepunktur

Blodprøvetagning - Venepunktur Blodprøvetagning - Venepunktur Klargøring til venepunktur Følgende genstande skal være tilgængelige inden prøvetagning: Prøvetagningsblanket (PTB) (Manuel rekvisitionsblanket benyttes kun ved nedbrud af

Læs mere

Jernindhold i fødevarer bestemt ved spektrofotometri

Jernindhold i fødevarer bestemt ved spektrofotometri Bioteknologi 4, Tema 8 Forsøg www.nucleus.dk Linkadresserne fungerer pr. 1.7.2011. Forlaget tager forbehold for evt. ændringer i adresserne. Jernindhold i fødevarer bestemt ved spektrofotometri Formål

Læs mere

Biotechnology Explorer ELISA Immuno Explorer Kit. Instruktionsmanual

Biotechnology Explorer ELISA Immuno Explorer Kit. Instruktionsmanual Biotechnology Explorer ELISA Immuno Explorer Kit Instruktionsmanual Katalognummer 166-2400EDU explorer.bio-rad.com Delene i dette kit er sendt i separate æsker. Opbevar posen med reagenser i køleskab indefor

Læs mere

Metodevalidering af højsensitiv C-reaktive Protein

Metodevalidering af højsensitiv C-reaktive Protein Metodevalidering af højsensitiv C-reaktive Protein Afsluttende eksamensprojekt Udarbejdet af Shagufta Amin Projektperiode på Bioanalytikeruddannelsen København Klinisk Biokemi Københavns Praktiserende

Læs mere

Akut sikkerhedsmeddelelse

Akut sikkerhedsmeddelelse ADVIA Centaur ADVIA Centaur XP ADVIA Centaur FSH analysesensitivitet Akut sikkerhedsmeddelelse 10813374 August 2012 Det fremgår af vores systemer, at I har modtaget ADVIA Centaur system kalibrator B listet

Læs mere

Spm. 1.: Hvis den totale koncentration af monomer betegnes med CT hvad er så sammenhængen mellem CT, [D] og [M]?

Spm. 1.: Hvis den totale koncentration af monomer betegnes med CT hvad er så sammenhængen mellem CT, [D] og [M]? DNA-smeltetemperaturbestemmelse KemiF2-2008 DNA-smeltetemperaturbestemmelse Introduktion Oligonucleotider er ofte benyttet til at holde nanopartikler sammen med hinanden. Den ene enkeltstreng er kovalent

Læs mere

Holdbarhed af prøvemateriale for HbA1c analysen & Præcisionsbestemmelse for HbF analysen på Variant TM II Turbo

Holdbarhed af prøvemateriale for HbA1c analysen & Præcisionsbestemmelse for HbF analysen på Variant TM II Turbo Holdbarhed af prøvemateriale for HbA1c analysen & Præcisionsbestemmelse for HbF analysen på Variant TM II Turbo Professionsbachelorprojekt af Valentina Knezic Kokanovic (205405 BIOLYT) Periode: 17.03.2014.

Læs mere

Præanalytisk håndtering af blodprøver En undersøgelse af lys- og tidsforhold for folat og cobalamin

Præanalytisk håndtering af blodprøver En undersøgelse af lys- og tidsforhold for folat og cobalamin Præanalytisk håndtering af blodprøver En undersøgelse af lys- og tidsforhold for folat og cobalamin Udarbejdet af: Rikke Vissing Olesen Studienummer: 99813 K-vejleder: Gitte Hamann, Bioanalytikerunderviser,

Læs mere

Følgende tabel (fra Fisher) giver forøgelsen af sovetiden i timer fra et eksperiment med 10 patienter vedrørende 2 sovemidler A og B.

Følgende tabel (fra Fisher) giver forøgelsen af sovetiden i timer fra et eksperiment med 10 patienter vedrørende 2 sovemidler A og B. Modul 7: Exercises 7.1 Sovemidler......................... 1 7.2 Egetræer.......................... 2 7.3 Stofs trækstyrke..................... 3 7.4 Laboranters titreringsusikkerhed............ 5 7.5

Læs mere

Kvælstofreducerende tiltags effekt på kvælstofprognosen

Kvælstofreducerende tiltags effekt på kvælstofprognosen 1 Kvælstofreducerende tiltags effekt på kvælstofprognosen Finn P. Vinther og Kristian Kristensen, Institut for Agroøkologi, Aarhus Universitet NaturErhvervstyrelsen (NEST) har d. 12. juli bedt DCA Nationalt

Læs mere

Validering af hæmolysegrænsen for B12 vitamin, folat og LD på Architect

Validering af hæmolysegrænsen for B12 vitamin, folat og LD på Architect Validering af hæmolysegrænsen for B12 vitamin, folat og LD på Architect Connie Dam Lund Vilhelmsen Studienummer: 142599 Periode: 07/10-18/12 2013 K-vejleder: Bioanalytikerunderviser Anne Jaritz-Nielsen

Læs mere

Naturstyrelsens Referencelaboratorium for Kemiske og Mikrobiologiske Miljømålinger NOTAT

Naturstyrelsens Referencelaboratorium for Kemiske og Mikrobiologiske Miljømålinger NOTAT Naturstyrelsens Referencelaboratorium for Kemiske og Mikrobiologiske Miljømålinger NOTAT Til: Følgegruppen for Naturstyrelsens Referencelaboratorium cc: Fra: Maj-Britt Fruekilde Dato: 25. november 2014

Læs mere

Dialyse og carbamidanalyse

Dialyse og carbamidanalyse C.12.1 Dialyse og carbamidanalyse Formål: Ved dialyse af en vandig opløsning af proteinet albumin og det lavmolekylære stof carbamid trænes forskellige laboratorieprocedurer (afpipettering, tidtagning,

Læs mere

Naturstyrelsens Referencelaboratorium for Kemiske Miljømålinger NOTAT

Naturstyrelsens Referencelaboratorium for Kemiske Miljømålinger NOTAT Naturstyrelsens Referencelaboratorium for Kemiske Miljømålinger NOTAT Til: Brugere af Bekendtgørelse om kvalitetskrav til miljømålinger udført af akkrediterede laboratorier, certificerede personer mv.

Læs mere

Spørgsmål og svar. Spørgsmål. Spg. modtaget. Spg. besvaret

Spørgsmål og svar. Spørgsmål. Spg. modtaget. Spg. besvaret Spørgsmål og svar Spg. modtaget Spg. besvaret Spørgsmål 6/10-09 8/10-09 Vil der blive anvendt en yderligere differentieret vægtning af underkriterier end de i udbudet oplyste procentsatser for tildelingskriterierne

Læs mere

Som substrat i forsøgene anvender vi para nitrophenylfosfat, der vha. enzymet omdannes til paranitrofenol

Som substrat i forsøgene anvender vi para nitrophenylfosfat, der vha. enzymet omdannes til paranitrofenol Enzymkinetik Introduktion I disse forsøg skal I arbejde med enzymet alkalisk fosfatase. Fosfataser er meget almindelige i levende organismer og er enzymer med relativt bred substrat specificitet. De katalyserer

Læs mere

QIAsymphony SP-protokolark

QIAsymphony SP-protokolark Februar 2017 QIAsymphony SP-protokolark circdna_2000_dsp_v1 og circdna_4000_dsp_v1 Dette dokument er QIAsymphony circdna_2000_dsp_v1 og circdna_4000_dsp_v1 protokolark, version 1, R1 Sample to Insight

Læs mere

Sammenligning af metoder til bestemmelse af klor

Sammenligning af metoder til bestemmelse af klor Sammenligning af metoder til bestemmelse af klor Miljøstyrelsens Referencelaboratorium Miljøstyrelsen Rapport December 2006 Sammenligning af metoder til bestemmelse af klor Strandesplanaden 110 DK-2665

Læs mere

Stofskiftets afhængighed af temperatur og aktivitet hos vekselvarme dyr

Stofskiftets afhængighed af temperatur og aktivitet hos vekselvarme dyr Stofskiftets afhængighed af temperatur og aktivitet hos vekselvarme dyr Besøget retter sig primært til elever med biologi på B eller A niveau Program for besøget Hvis besøget foretages af en hel klasse,

Læs mere

Validering og implementering af en ELISA analyse, til screening af donorer for IgA mangel

Validering og implementering af en ELISA analyse, til screening af donorer for IgA mangel Validering og implementering af en ELISA analyse, til screening af donorer for IgA mangel Christine Marie Rasmussen Michael Lassen Schou Hussein Atallah Alhadidi Daniel Rodriguez Jensen Side 1 af 53 Professionsbachelorprojekt

Læs mere

Regnskovens hemmeligheder

Regnskovens hemmeligheder Center for Undervisningsmidler, afdeling København Regnskovens hemmeligheder Øvelsesvejledning Formål Et gen for et kræfthelbredende protein er blevet fundet i nogle mystiske blade i regnskoven. Forskere

Læs mere

Måling af ph i syrer og baser

Måling af ph i syrer og baser Kemiøvelse 1 1.1 Måling af ph i syrer og baser Øvelsens pædagogiske rammer Sammenhæng Denne øvelse er tilpasset kemiundervisningen på modul 1 ved bioanalytikeruddannelsen. Øvelsen skal betragtes som en

Læs mere

Mikroorganismers patogene egenskaber

Mikroorganismers patogene egenskaber Mikrobiologi 3 ECTS viden om smitterisici, sikkerhedsregler og hygiejne, som sætter den studerende i stand til at håndtere mikrobiologisk materiale. viden om bakteriel identifikation på baggrund af bakteriers

Læs mere

Beregning af SCOP for varmepumper efter En14825

Beregning af SCOP for varmepumper efter En14825 Antal timer Varmebehov [kw] Udført for Energistyrelsen af Pia Rasmussen, Teknologisk Institut 31.december 2011 Beregning af SCOP for varmepumper efter En14825 Følgende dokument giver en generel introduktion

Læs mere

Klinisk Biokemisk Afdeling, KB 3-01-1 Diagnostisk Center P(fPt)-Glucose; stofk. (Diagn.)(mmol/l) Udgave 1. Analysevejledning

Klinisk Biokemisk Afdeling, KB 3-01-1 Diagnostisk Center P(fPt)-Glucose; stofk. (Diagn.)(mmol/l) Udgave 1. Analysevejledning Analysevejledning 083-216 P(fPt) Glucose; stofk. (Diagn.)(mmol/l) DNK35842 Roche/Hitachi Modular P Initialer Navn Dato Udarbejdet af: KK, MSa Karin Knudsen, Michele Saldo 4. feb. 2003 Sidst revideret af:

Læs mere

Biomarkører. Anja Hviid Simonsen Post Doc Nationalt Videnscenter for Demens

Biomarkører. Anja Hviid Simonsen Post Doc Nationalt Videnscenter for Demens Biomarkører Anja Hviid Simonsen Post Doc Nationalt Videnscenter for Demens Hvad er en biomarkør? En biomarkør er: En karakteristik, som måles objektivt og vurderes som indikator for normale biologiske

Læs mere