Estradiol. system. Symbolforklaring. Estradiol

Transkript

1 system da Estradiol 7K72 B7K726 G4-3524/R05 Estradiol Læs markerede ændringer Revideret i juli 2013 Kundeservice: Kontakt den lokale Abbott-repræsentant, eller find landespecifikke kontaktoplysninger på Anvisningerne i denne brugsanvisning skal følges nøje. Hvis anvisningerne ikke følges, kan testresultaternes pålidelighed ikke garanteres. Symbolforklaring Bestillingsnummer Medicinsk udstyr til in vitrodiagnostik Lotnummer Serienummer Prøvekopper Gummimembran Udløbsdato Opbevares ved 2-8 C Se brugsanvisningen Fabrikant Kalibrator (A-F) Lav, mellem, høj kontrol (L, M, H) RV-celler Ekstra skruelåg Reagenslot Advarsel: Kan forårsage allergisk reaktion Indeholder natriumazid. Udvikler meget giftig gas ved kontakt med syre. Miljøfare Globalt varenummer Produceret i Irland Oplysningerne gælder kun for USA Se afsnittet REAGENSER for nærmere oplysninger om de enkelte reagenssymboler. 1

2 NAVN ARCHITECT Estradiol ANVENDELSE ARCHITECT Estradiol-analysen er en kemiluminescens mikropartikelimmunanalyse (CMIA) til kvantitativ bestemmelse af estradiol i humant serum og plasma. RESUME OG ANALYSEFORKLARING Estradiol er det kraftigste naturligt forekommende østrogen i mennesker. Det regulerer den reproduktive funktion hos kvinder og fastholder sammen med progesteron svangerskabet. Hos ikke-gravide kvinder secerneres størstedelen af estradiol fra ovarierne; hos mænd secerneres mindre mængder fra testiklerne og hos både kvinder og mænd fra binyrebarken. Under svangerskabet producerer placenta størstedelen af det cirkulerende estradiol. Estradiol og østron interkonverteres in vivo. Hos raske ikke-gravide kvinder udgør det syntetiserede estradiol fra ovarierne hovedkilden af både østron og østriol. Næsten alt cirkulerende estradiol er proteinbundet. Associationskonstanterne for estradiol med kønshormonbindende globulin og serumalbumin er henholdsvis 6,8 x 10 8 og 6 x Som følge af denne binding må betingelserne for, at dette steroid kan frigøres kvantitativt fra sine bindingspartnere, være til stede i analyser til bestemmelse af estradiol i serum. Mængden af og forholdet mellem proteinbundet og frit estradiol varierer alt efter køn og hos kvinder alt efter svangerskab og menstruationsfase. 1 Hos raske kvinder er estradiolniveauet lavest under menstruationen og tidligt i follikulærfasen (25-75 pg/ml), hvorefter det stiger i den sidste del af follikulærfasen til en maks. værdi på pg/ml lige inden den hurtige LH-stigning, der normalt straks efterfølges af ovulation. Samtidig med at der sker en hurtig LH-stigning, begynder estradiolniveauet at falde, før der igen sker en stigning i lutealfasen ( pg/ml). Hvis der ikke sker nogen befrugtning, vil estradiolniveauet falde yderligere, indtil det når sit laveste niveau, og menstruationen vil begynde kort tid efter. 2-5 I tilfælde af befrugtning vil estradiolniveauet fortsætte med at stige til et niveau på pg/ml i første trimester og pg/ml i andet trimester for til sidst at nå op på pg/ml i tredje trimester. 6-8 Fra menopausens indtræden vil estradiolniveauet forblive lavt. 2 Eftersom størstedelen af estradiol hos raske kvinder produceres i ovarierne, vil ovariefunktionen af og til kunne bedømmes ud fra bestemmelsen af estradiol. 9 Overvågning af estradiolniveauet spiller desuden en vigtig rolle ved bedømmelse af amenoré, for tidlig pubertet og menopausens indtræden samt af infertilitet hos både mænd og kvinder. Overvågning af estradiolniveauet er desuden afgørende ved in vitro-befrugtning, fordi tidspunktet for udtagning af ægcellen afhænger af folliklens udvikling, som igen afhænger af estradiolniveauet. ANALYSEPRINCIP ARCHITECT Estradiol-analysen er en forsinket ettrinsimmunanalyse til bestemmelse af forekomsten af estradiol i humant serum og plasma og er baseret på teknologien for kemiluminescensmikropartikelimmunanalyser (CMIA) med fleksible analyseprotokoller, kaldet Chemiflex. I første trin blandes prøvemateriale, prøvefortyndingsopløsning og analyse fortyndingsopløsning med paramagnetiske mikropartikler, der er coatet med anti-estradiol (kanin, monoklonal). Estradiol i prøven bindes til de anti-estradiolcoatede mikropartikler. Efter inkubation tilsættes acridinmærket estradiolkonjugat i reaktionsblandingen. Efter endnu en inkubation og vask tilsættes reaktionsblandingen prætrigger- og triggeropløsning. Den efterfølgende kemiluminescensreaktion måles i form af relative lysenheder (RLU). Mængden af estradiol i prøven er omvendt proportional med mængden af RLU, som ARCHITECT i Systems optik påviser. For yderligere oplysninger om systemet og analyseteknologien henvises til kapitel 3 i ARCHITECT-brugermanualen. REAGENSER Reagenssæt, 100 test BEMÆRK: Nogle reagenspakninger kan ikke fås i alle lande eller til anvendelse på alle ARCHITECT i Systems. Kontakt den lokale forhandler. ARCHITECT Estradiol Reagent Kit (7K72) 1 eller 4 flasker (8,3 ml) mikropartikler, der er coatet med anti-estradiol (kanin, monoklonalt), i TRIS/BIS-TRIS-buffer med kaninproteinstabilisatorer. Minimumskoncentration: 0,0657% tørstof. Konserveringsmiddel: ProClin. 1 eller 4 flasker (5,9 ml) acridinmærket med estradiolkonjugat i citratbuffer med surfaktantstabilisatorer. Minimumskoncentration: 63,36 ng/ml. Konserveringsmiddel: ProClin. 1 eller 4 flasker (5,9 ml) estradiolanalyse fortyndingsopløsning indeholdende surfaktant i citratbuffer. Konserveringsmiddel: ProClin. 1 eller 4 flasker (10,0 ml) estradiol prøvefortyndings opløsning indeholdende TRIS-buffer med okse proteinstabilisatorer. Konserveringsmiddel: natriumazid. Andre reagenser ARCHITECT i Pre-Trigger Solution Prætriggeropløsning 1,32% (w/v) hydrogenperoxid. ARCHITECT i Trigger Solution Triggeropløsning med 0,35 N natriumhydroxid. ARCHITECT i Wash Buffer BEMÆRK: Flaskens størrelse afhænger af reagenssættets størrelse. Vaskebuffer med fosfatbuffer. Konserveringsmiddel: antimikrobielle midler. VIGTIGE FORHOLDSREGLER Til in vitro-diagnostisk brug Anvisningerne i denne brugsanvisning skal følges nøje. Hvis anvisningerne ikke følges, kan testresultaternes pålidelighed ikke garanteres. Sikkerhedsforanstaltninger VIGTIGT: Dette produkt kræver håndtering af humane prøver. Det anbefales, at alle prøver af human oprindelse betragtes som potentielt smittefarlige og håndteres i overensstemmelse med det amerikanske arbejdsmiljøinstitut OSHA s standard Bloodborne Pathogens. 10 Biosafety Level 2 11 eller andre gældende sikkerhedsforanstaltninger for biologisk materiale 12,13 bør anvendes ved håndtering af materiale, der indeholder eller mistænkes for at indeholde smittefarlige stoffer. Følgende advarsler og forholdsregler gælder for disse komponenter: Mikropartikler Konjugat Analysefortyndingsopløsning ADVARSEL: Indeholder methylisothiazoloner. H317 Kan forårsage allergisk hudreaktion. Forebyggelse P261 Undgå indånding af tåge/damp/spray. P272 Tilsmudset arbejdstøj bør ikke fjernes fra arbejdspladsen. P280 Bær beskyttelseshandsker/beskyttelsestøj/øjenbeskyttelse/ansigtsbeskyttelse. Reaktion P302+P352 VED KONTAKT MED HUDEN: Vask med rigeligt sæbe og vand. P333+P313 Ved hudirritation eller udslæt: Søg lægehjælp. P363 Tilsmudset tøj skal vaskes, før det kan anvendes igen. Materialet og dets beholder skal bortskaffes på en sikker måde. Følgende advarsler og forholdsregler gælder for prøve fortyndingsopløsningen: Indeholder natriumazid. EUH032 Udvikler meget giftig gas ved kontakt med syre. H412 Skadelig for vandlevende organismer, med langvarige virkninger. Forebyggelse P273 Undgå udledning til miljøet. Materialet og dets beholder skal bortskaffes på en sikker måde. Sikkerhedsdatablade er til rådighed på eller kan fås ved henvendelse til kundeservice. For oplysninger om sikker bortskaffelse af natriumazid og for nærmere oplysninger om sikkerhedsforanstaltninger under drift henvises til kapitel 8 i ARCHITECT-brugermanualen. Forholdsregler ved anvendelse Anvend ikke reagenssæt, hvor udløbsdatoen er overskredet. Bland ikke reagenser fra forskellige reagenssæt. 2

3 Før ARCHITECT Estradiol-reagenssættet placeres i systemet første gang, skal flasken med mikropartikler blandes grundigt for at resuspendere mikropartikler, som har bundfældet sig under transporten. For anvisninger vedrørende blanding af mikropartikler henvises til afsnittet Blandingsvejledning i denne brugsanvisning. Gummimembran SKAL anvendes for at undgå fordampning og kontaminering og for at sikre reagensernes holdbarhed. Hvis ikke gummimembran anvendes som anført i denne brugsanvisning, kan testresultaternes pålidelighed ikke garanteres. Gummimembran med bestillingsnummer 4D18-02 eller højere skal anvendes til ARCHITECT Estradiol-analysen. Brug rene handsker for at undgå kontaminering, når der sættes gummimembran på en åben reagensflaske. Når den åbne reagensflaske er forsynet med en gummimembran, må flasken ikke vendes, da dette vil medføre udsivning af reagenserne, hvilket vil kunne have indflydelse på analyse-resultaterne. Med tiden vil tilbagebleven væske kunne tørre fast på gummimembranen. Der vil typisk være tale om indtørrede salte, der ikke har nogen betydning for analysen. For nærmere oplysninger om forholdsregler ved anvendelse henvises til kapitel 7 i ARCHITECT-brugermanualen. Blandingsvejledning Før ARCHITECT Estradiol-reagenssættet anbringes i systemet første gang, skal mikropartiklerne blandes, for at resuspendere mikropartikler, som har bundfældet sig under transporten: Vend flasken med mikropartikler 30 gange. Kontrollér, at mikropartiklerne er resuspenderet i flasken. Hvis der stadig sidder mikropartikler fast i flasken, skal flasken vendes, indtil mikropartiklerne er helt resuspenderet i flasken. ANVEND IKKE mikropartiklerne, hvis de ikke kan resuspenderes i opløsningen. Kontakt Abbotts kundeservice Skru låget af, når mikropartiklerne er resuspenderet, og kassér det. Tag en gummimembran ud af indpakningsposen. Brug handsker. Sæt forsigtigt gummimembranen fast på flaskeåbningen. ARCHITECT Estradiol-kalibratorer og -kontroller skal blandes inden brug ved forsigtigt at vende flaskerne. Opbevaring ARCHITECT Estradiol-reagenssættet skal opbevares ved 2-8 C og kan anvendes, straks efter at det er fjernet fra køl. Reagenserne er holdbare indtil udløbsdatoen, når de opbevares og håndteres efter forskrifterne. ARCHITECT Estradiol-reagenssættet kan opbevares i ARCHITECT i System i maks. 30 dage, hvorefter det skal kasseres. For oplysninger om styring af reagensholdbarhed i systemet henvises til kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen. Reagenserne kan opbevares i eller uden for ARCHITECT i System. Hvis reagenserne fjernes fra systemet, bør de opbevares ved 2-8 C (med gummimembran og nyt skruelåg) i oprejst stilling. Det anbefales i så fald at placere dem i de originale bakker og æsker, hvori de står oprejst og beskyttet mod lys i længere tid. Hvis en eller flere af reagensflaskerne ikke står oprejst (forsynet med gummimembran) på køl (2-8 C) uden for systemet, skal reagenssættet bortskaffes. Når reagenserne fjernes fra systemet, skal en skanning foretages for at opdatere systemets holdbarhedstimer. Indikation af reagenshenfald Hvis en kontrolværdi ligger uden for det specificerede område, kan dette være et tegn på reagenshenfald eller procedurefejl. Testresultater kan være ugyldige, og retestning kan være påkrævet. Rekalibrering kan være påkrævet. Se kapitel 10 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om fejlfinding. INSTRUMENTPROCEDURE For at kunne køre ARCHITECT Estradiol-analysen er det vigtigt, at ARCHITECT i Trigger Solution ikke har været opbevaret i systemet i mere end 10 dage. Skriv udløbsdato for opbevaring i systemet på flasken med triggeropløsning (installationsdato plus 10 dage er lig med udløbsdato for opbevaring i systemet). BEMÆRK: Triggeropløsningen kan anvendes på udløbsdatoen for opbevaring i systemet. Dog må denne dato ikke overskride den udløbsdato, der er angivet på flasken med ARCHITECT i Trigger Solution. 3 Installer _Estradiol-analysefilen fra ARCHITECT i Assay CD-ROM på ARCHITECT i System, før analysen køres. Se kapitel 2 i ARCHITECTbrugermanualen for nærmere oplysninger om installation af analysefil samt om visning og ændring af analyseparametre. Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om udskrivning af analyseparametre. Se ARCHITECT-brugermanualen for en detaljeret beskrivelse af systemprocedurer. Standardresultatenheden for ARCHITECT Estradiol-analysen er pg/ml. Se afsnittet RESULTATER i denne brugsanvisning for oplysninger om andre resultatenheder. PRØVETAGNING OG KLARGØRING Både humant serum (herunder serum udtaget i separatorrør) og plasma udtaget i glas- eller plastikrør med litiumheparin (herunder plasma udtaget i separatorrør) eller kalium-edta kan anvendes til ARCHITECT Estradiol-analysen. Ingen andre antikoagulanser er valideret til anvendelse med ARCHITECT Estradiol-analysen. Følg både fabrikantens brugervejledning for serum- og plasmaprøvetagningsrør og denne brugsanvisning for oplysninger om prøvetagning og klargøring. Se i øvrigt CLSI s (Clinical and Laboratory Standards Institute, tidligere NCCLS) retningslinjer H18-A2 for yderligere oplysninger. 14 System kontrollerer ikke prøvetypen. Det er brugerens opgave at kontrollere, at den korrekte prøvetype anvendes til ARCHITECT Estradiol-analysen. Vær forsigtig ved håndtering af patientprøver for at undgå krydskontaminering. Det anbefales at bruge engangspipetter eller -pipettespidser. Undersøg alle prøver for bobler for at få de bedst mulige resultater. Fjern alle bobler med en rørepind, inden analysen påbegyndes. Anvend en ny rørepind til hver prøve for at undgå krydskontaminering. For at opnå optimale resultater bør serum- og plasmaprøverne være fri for fibrin, røde blodlegemer eller udfældninger. Kontrollér, at prøven er fuldstændig koaguleret inden centrifugering. Nogle prøvers koagulationstid er forlænget, især hvis de er udtaget fra patienter i antikoagulant eller trombolytisk behandling. Hvis prøven centrifugeres før fuldstændig koagulation, kan forekomsten af fibrin medføre fejlagtige resultater. Hvis testningen udsættes i mere end 24 timer, bør serum og plasma fjernes fra koaglet, gelen eller de røde blodlegemer og opbevares ved 2-8 C. Prøver kan opbevares i op til 7 dage ved 2-8 C inden testning. Hvis testningen først foretages efter 7 dage, bør prøverne opbevares ved -20 C eller koldere. 15 Gentagne nedfrysninger og optøninger bør undgås. For at sikre ensartede resultater skal prøver blandes GRUNDIGT efter optøning, enten ved at vortexe dem ved LAV hastighed eller ved forsigtigt at vende dem, og centrifugeres før brug for at fjerne røde blodlegemer eller udfældninger. Afpipetter prøvematerialet fra den midterste del af prøverøret for at undgå udfældninger, der har samlet sig nederst eller øverst i prøverøret. Anvend ikke varmeinaktiverede prøver. Analysens ydeevne er ikke blevet valideret for prøver, der er udtaget post-mortem, eller for andre kropsvæsker end humant serum eller plasma. Anvend ikke prøver, der er tydeligt mikrobielt kontamineret. Ved forsendelse skal prøverne pakkes og mærkes i overensstemmelse med gældende nationale og internationale regler for transport af kliniske prøver og smittefarlige stoffer. Prøverne skal forsendes nedfrosset på tøris. Det anbefales at separere prøvematerialet fra koaglet, gelen eller de røde blodlegemer inden forsendelsen. Prøvevolumen Prøvekoppens minimumsvolumen beregnes af systemet og fremgår af bestillingsudskriften (Orderlist report). Der må maks. udføres 9 gentagelser fra samme prøvekop. For at reducere følgen af fordampning kontrolleres, at der er nok prøvemateriale i prøvekoppen, inden testen køres. Hasteprøver: 200 µl til den første Estradiol-test plus 150 µl til hver yderligere Estradiol-test fra samme prøvekop. 3 timer i systemet: 200 µl til den første Estradiol-test plus 150 µl til hver yderligere Estradiol-test fra samme prøvekop. > 3 timer i systemet: Yderligere prøvemængde er nødvendig. Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om fordampning af prøvemateriale og prøvemængder. Ved brug af primære og sekundære rør bør prøvemåler anvendes for at sikre, at der er nok prøvemateriale

4 PROCEDURE Medfølgende produkter 7K72 ARCHITECT Estradiol Reagent Kit Nødvendigt tilbehør og udstyr System ARCHITECT Estradiol-analysefilen fra: System e-assay CD-ROM, som findes på eller Assay CD-ROM 7K72-01 ARCHITECT Estradiol Calibrators 7K72-10 ARCHITECT Estradiol Controls 7K72-50 ARCHITECT Estradiol Manual Diluent bestillingsnummer 4D18-02 eller højere Se kapitel 9 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om nødvendigt udstyr til brug ved vedligeholdelsesprocedurer. Pipetter eller pipettespidser (valgfrit) til at dispensere de mængder, der er specificeret på patientprøve- og kontrolbestillingsskærmbilledet. Analyseprocedure For at kunne køre ARCHITECT Estradiol-analysen er det vigtigt, at ARCHITECT i Trigger Solution ikke har været opbevaret i systemet i mere end 10 dage. Skriv udløbsdato for opbevaring i systemet på flasken med triggeropløsning (installationsdato plus 10 dage er lig med udløbsdato for opbevaring i systemet). BEMÆRK: Triggeropløsningen kan anvendes på udløbsdatoen for opbevaring i systemet. Dog må denne dato ikke overskride den udløbsdato, der er angivet på flasken med ARCHITECT i Trigger Solution. Bestil testene. Anbring ARCHITECT Estradiol-reagenssættet i ARCHITECT i System. Kontrollér, at alle nødvendige reagenser forefindes. Kontrollér, at alle reagensflasker er forsynet med en gummimembran. Reagenskarrusellen er forsynet med farvede ringe, der passer til farvestriberne på reagensflaskernes etiket. Farvestriberne på reagensflaskens etiketter er mærket med #1 eller #2. Ved isætning af reagenser henvises til tegningen på indersiden af reagenskarrusellens låg og tegningen nedenfor. Anbring flasken med den gule farvestribe #1 (analysefortyndingsopløsning) i den gule ring i karrusellen. Anbring flasken med den lyserøde farvestribe #1 (mikropartikler) i den lyserøde ring i karrusellen. Anbring flasken med den grønne farvestribe #1 (prøvefortyndingsopløsning) i den grønne ring i karrusellen. Anbring flasken med den gule farvestribe #2 (konjugat) i den gule ring i karrusellen til venstre for flasken, der mærket med #1. BEMÆRK: Estradiol-reagenssættet indeholder ikke flasker med en grøn eller en lyserød farvestribe, der er mærket med #2. Anbring ikke Estradiol-reagensflasker, der er mærket med #1, i reagenskarrusellens position 25 og reagensflasker, der er mærket med #2, i reagenskarrusellens position 1. ARCHITECT Estradiol-kalibratorer og -kontroller bør blandes forsigtigt ved at vende flaskerne, før de tages i brug. For at opnå de anbefalede mængder af ARCHITECT Estradiolkalibratorer og -kontroller holdes flaskerne lodret, og 15 dråber (400 µl) af hver kalibrator eller 10 dråber (250 µl) af hver kontrol dispenseres ned i de respektive prøvekopper. Luk låget tæt til efter brug. Sæt flaskerne tilbage i æskerne, hvori de er beskyttet mod lys, og opbevar kalibratorer og kontroller ved 2-8 C. Isæt prøverne. Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om isætning af prøver. Tryk på RUN. ARCHITECT i System udfører følgende funktioner: Skubber prøven hen til aspirationspositionen. Transporterer en RV-celle ind i det indre analyseringsområde. Aspirerer og overfører prøvematerialet til RV-cellen. Rykker RV-cellen én position frem og overfører prøvefortyndingsopløsning, mikropartikler og analysefortyndingsopløsning til RVcellen. Blander, inkuberer og vasker reaktionsblandingen. Tilsætter konjugat i RV-cellen. Blander, inkuberer og vasker reaktionsblandingen. Tilsætter prætrigger- og triggeropløsning. Måler emissionen af kemiluminescens for at bestemme estradiolmængden i prøven. Aspirerer indholdet i RV-cellen og overfører det direkte til afløbet, mens RV-cellen overføres til beholderen med fast affald. Beregner resultatet. Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om bestilling af patientprøver, kalibratorer og kontroller samt generelle betjeningsprocedurer. For at opnå optimal ydeevne er det vigtigt at følge procedurerne for rutinevedligeholdelse, som er beskrevet i kapitel 9 i ARCHITECTbrugermanualen. Hvis hyppigere vedligeholdelse kræves ifølge laboratoriets procedurer, bør disse følges. Prøvefortyndingsprocedurer Prøver med en estradiolværdi, der er højere end pg/ml, markeres med koden >1000 og kan fortyndes automatisk. Hvis den automatiske fortyndingsfunktion anvendes, fortynder systemet prøven i forholdet 1:5 og beregner automatisk koncentrationen af den ufortyndede prøve og afgiver resultatet. Prøver med en estradiolværdi, der er højere end pg/ml, markeres med koden >5000, når den automatiske fortyndingsfunktion anvendes. Sådanne prøver kan fortyndes manuelt. Manuelle fortyndinger bør foretages som følger: Den anbefalede fortynding for estradiol er 1:10. Tilsæt f.eks. 20 µl patientprøve til 180 µl ARCHITECT Estradiol Manual Diluent. Det er brugerens opgave at indtaste fortyndingsfaktoren på patientprøve- og kontrolbestillingsskærmbilledet. Systemet anvender denne fortyndingsfaktor til automatisk at beregne prøvens koncentration før fortynding. Dette resultat vil blive afgivet. Koncentrationen af den fortyndede prøve (dvs. før anvendelse af fortyndingsfaktoren) bør være større end 100 pg/ml. Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om bestilling af fortyndinger. Kalibrering For at udføre en ARCHITECT Estradiol-kalibrering skal kalibrator A til F dobbeltbestemmes. Alle estradiolkontrolniveauer skal enkeltbestemmes for at validere analysekalibreringen. Kontrollér, at kontrolværdierne ligger inden for de koncentrationsområder, der er anført i brugsanvisningen til kontrollerne. Kalibratorer bør håndteres som hasteprøver. Kalibreringsområde: pg/ml Når en ARCHITECT Estradiol-kalibrering er godkendt og lagret, kan alle efterfølgende prøver testes uden yderligere kalibrering, medmindre: Et reagenssæt med et nyt lotnummer tages i brug Kontrollerne ligger uden for området Se kapitel 6 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om udførelse af kalibrering. 4

5 PROCEDURER FOR KVALITETSKONTROL For at overholde kontrolkravene til ARCHITECT Estradiol-analysen bør alle kontrolniveauerne enkeltbestemmes én gang i døgnet på kørselsdage. Hvis laboratoriets procedurer for kvalitetskontrol kræver hyppigere brug af kontroller til verifikation af testresultater, bør disse procedurer følges. Kontrollér, at kontrolværdierne ligger inden for de koncentrationsområder, der er specificeret i brugsanvisningen til kontrollerne. ARCHITECT ARCHITECT Estradiol-profil Profile under During normal the menstruationscyklus Normal Menstrual Cycle Verifikation af analysens dokumenterede egenskaber Se appendiks B i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om fremgangsmåde til verificering af analysens dokumenterede egenskaber. ARCHITECT Estradiol-analysen hører til metodegruppe 1. Estradiolkoncentration (pg/ml) Dag i cyklus RESULTATER Til beregning af kalibreringskurven anvender ARCHITECT Estradiolanalysen en logistisk 4-parameterdatareduktionsmetode til kurvetilpasning (4PLC, Y-vægtet). Andre resultatenheder Standardresultatenheden for ARCHITECT Estradiol-analysen er pg/ml. Hvis resultatenheden pmol/l vælges, benytter systemet omregningsfaktor 3,67. Hvis resultatenheden nmol/l vælges, benytter systemet omregningsfaktor 0, Omregningsformel: (koncentration i pg/ml) x (3,67) = pmol/l Omregningsformel: (koncentration i pg/ml) x (0,00367) = nmol/l Flag Nogle resultater kan indeholde oplysninger i flagfeltet. For en beskrivelse af de flag, der kan forekomme i dette felt, henvises til kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen. PROCEDUREBEGRÆNSNINGER Til diagnostisk brug bør resultaterne sammenholdes med andre data, f.eks. symptomer, resultater fra andre analyser, kliniske indtryk osv. Hvis estradiolresultaterne ikke stemmer overens med den kliniske udredning, anbefales det at teste yderligere for at konfirmere resultatet. Heterofile antistoffer i humant serum kan reagere med reagensimmunglobulin og dermed interferere med in vitro-immunanalyser. 16 Prøver fra patienter, som ofte er i kontakt med dyr eller serumprodukter fra dyr, kan have tendens til denne interferens, og afvigende værdier kan ses. Yderligere oplysninger kan være nødvendige til diagnosticering. FORVENTEDE VÆRDIER Det forventede referenceområde for ARCHITECT Estradiol-analysen fremkom ved at analysere patientprøver fra 101 mænd, 72 postmenopausale kvinder og normalt menstruerende kvinder. Prøverne fra de normalt menstruerende kvinder (36) blev taget gennem hele cyklussen, og der blev taget i alt 956 prøver. Variationer i cykluslængden blev tilpasset, således at den dag, hvor LH-værdien toppede blev defineret som dag 0 (samme dag som FSH-værdien toppede, og samme dag eller dagen efter, at estradiolværdien toppede). For at kunne fastlægge cyklusspecifikke 5 referenceområder blev prøverne opdelt i følgende kategorier: follikulærfasen, midtcyklusfasen og lutealfasen. Follikulærfasen blev defineret som perioden fra 15. til 2. dagen før (-15 til -2) det tidspunkt, hvor gonadotropin frigøres i midtcyklussen (dag -1 til +1). Lutealfasen blev defineret som +2 dage til +15 dage. 17 Samtlige cykler, der blev anvendt til etablering af referenceområder, var ovulationscykler. Resultaterne er opstillet i følgende tabel.* Estradiolkoncentrationsværdi Median (pg/ml) Centralt 95% område (pg/ml) Population n Normalt menstruerende kvinder Follikulærfase Midtcyklusfase Lutealfase Postmenopausale kvinder uden 50 <10 <10-28 hormontilskud (HRT) Postmenopausale kvinder med < hormontilskud (HRT)** Mænd ** For n=22 er det centrale 95%-område det samme som intervallet fra minimum til maksimum. Det anbefales, at laboratoriet selv fastsætter sig eget referenceområde, som, afhængigt af geografiske, patientrelaterede, ernærings- og miljømæssige faktorer, kan være unikt for den pågældende population.

6 YDEEVNE Præcision ARCHITECT Estradiol-analysens præcision er 5 pg/ml (total SD) for koncentrationer inden for den lave kontrols område (fastlagt 45 pg/ml) og 7% (total CV) for koncentrationer inden for mediumkontrollens (fastlagt 190 pg/ml) og den høje kontrols (fastlagt 600 pg/ml) område. Der blev udført et studie af ARCHITECT Estradiol-analysen baseret på retningslinjerne i CLSI s protokol EP5-A. 18 Tre kontrolniveauer (lav, medium og høj) blev analyseret i dobbeltbestemmelse to gange om dagen i 20 dage på to instrumenter med tre reagenslot. Data fra dette studie er opstillet nedenfor.* Middel- Reagensloment Instru- konc.- værdi Intraseriel kørsel Total Kontrol n (pg/ml) SD %CV SD %CV Lav ,6 5,5 3,3 6,7 Lav ,4 5,0 2,8 6,0 Lav ,9 6,4 3,3 7,4 Lav ,1 4,6 2,6 5,6 Lav ,7 6,0 3,0 6,6 Lav ,3 4,8 3,3 7,1 Medium ,5 1,9 4,0 2,1 Medium ,6 1,9 4,3 2,3 Medium ,2 2,3 4,6 2,4 Medium ,3 1,7 4,3 2,3 Medium ,7 2,0 4,5 2,5 Medium ,0 1,5 4,3 2,3 Høj ,5 1,8 10,5 1,8 Høj ,5 1,4 10,6 1,8 Høj ,8 1,6 11,5 1,9 Høj ,3 1,7 10,9 1,8 Høj ,9 1,8 13,7 2,3 Høj ,7 1,8 15,2 2,6 Den analytiske sensitivitet ARCHITECT Estradiol-analysens analytiske sensitivitet er 10 pg/ml. Den analytiske sensitivitet defineres som koncentrationen ved to standardafvigelser fra den gennemsnitlige RLU-værdi af ARCHITECT Estradiolkalibrator A (0 pg/ml) og udgør den lavest målbare estradiolkoncentration, som er forskellig fra nul. Funktionel sensitivitet ARCHITECT Estradiol-analysens funktionelle sensitivitet er 25 pg/ml. Den funktionelle sensitivitet defineres som den laveste koncentration, der kan måles med en variationskoefficient (CV), der er mindre end eller lig med 20%. Humane panelprøver, hvis fastlagte koncentration lå mellem 0 og 70 pg/ml, blev benyttet i en undersøgelse på to instrumenter og med tre reagenslot, hvor panelprøverne blev testet tre gange over fem dage, dvs. i alt 15 gange pr. kombination af panelprøve, instrument og lot. Middelværdien og %CV blev beregnet for hver af de 15 gentagelser. Den beregnede %CV blev for hvert instrument plottet ind over for den tilsvarende middelværdi for alle panelprøver og alle tre reagenslot. En reciprok kurve (Y=a+b/X) blev tilpasset gennem dataene, og den funktionelle sensitivitet blev skønnet som værende den koncentration, der svarer til 20% CV-niveauet af den tilpassede kurve. Nedenstående oversigt viser den funktionelle sensitivitet:* Instrument Funktionel sensitivitet A 13 pg/ml B 14 pg/ml Den præcisionsprofil, der svarer til instrument A s funktionelle sensitivitet, er vist nedenfor. 20% CV Tilpasset kurve Gennemsnitlig estradiol (pg/ml) 95%-konfidensgrænser i tilpasset kurve Specificitet ARCHITECT Estradiol-analysens specificitet blev bestemt ved at undersøge nedenstående stoffer med eller uden estradiolforekomst og efter retningslinjerne i CLSI s protokol EP7-A. 19 Tabel A* Syntetiske prøver uden nogen væsentlig rest af estradiol blev tilsat potentielle krydsreaktanter i nedenstående koncentrationer og testet for estradiol. Den procentvise krydsreaktivitet fremgår af oversigten nedenfor: Krydsreaktantens Krydsreaktant koncentration Krydsreaktivitet i % 17β-estradiol 3-sulfat 50 ng/ml 0,1% Østron 1500 pg/ml 0,7% Nedenstående stoffers krydsreaktivitet kunne ikke påvises ved de anførte koncentrationer: Krydsreaktantens Krydsreaktant koncentration Aldosteron 10 µg/ml 5α-androstan-3β,17β-diol 10 ng/ml 5α-androstandion 10 ng/ml Androstenedion 100 ng/ml Clomiphencitrat 60 ng/ml Corticosteron 570 ng/ml Cortison 500 ng/ml Deoxycorticosteronacetat 500 ng/ml 11-deoxycortisol 500 ng/ml 6

7 Krydsreaktantens Krydsreaktant koncentration Dexamethason ng/ml DHEA 120 ng/ml DHEAS 8 µg/ml 5β-dihydrocorticosteron 500 ng/ml DHT (dihydrotestosteron) 2 ng/ml Equilin 0,6 ng/ml Equilinsulfat 5 ng/ml Østetrol 2,4 ng/ml 17α-estradiol 0,3 ng/ml 17β-estradiol-3-glucuronid 4,8 ng/ml 17β-estradiol 17-valerat 1 ng/ml 17β-estradiol 17-propionat 1 ng/ml 17β-estradiol 3-sulfat17-glucuronid 50 ng/ml Østriol 2500 pg/ml Østriol 16α-(β-D-glucuronid) 106 ng/ml Østriol 3-sulfat 300 ng/ml Østriol 3-(β-D-glucuronid) 106 ng/ml Østron 3-sulfat 0,4 ng/ml Ethynodioldiacetat 1 µg/ml Ethynylestradiol 0,4 ng/ml Hydrocortison 500 ng/ml 16α-hydroxyestron 1 ng/ml 17α-hydroxypregnanolon 480 ng/ml 17α-hydroxyprogesteron 1200 ng/ml Medroxyprogesteron 12,3 ng/ml Mestranol 0,4 ng/ml Norethindron 16 ng/ml Norethindronacetat 14 ng/ml (Norethisteronacetat) Pregnanolon 59 ng/ml Progesteron 500 ng/ml Tamoxifen 183 ng/ml Testosteron 20 ng/ml Tabel B* ARCHITECT Estradiol-analysens genfindelse ved forekomst af nedenstående stoffer er 100 ± 40% ved de anførte koncentrationer: Der blev udført et studie, hvor syntetiske prøver med estradiol (600 pg/ml) blev tilsat potentielt interfererende stoffer i de angivne koncentrationer og testet for estradiol. Den procentvise genfindelse fremgår af nedenstående oversigt: Interfererende stofs Interfererende stof koncentration Genfindelse i % Equilin 1,2 ng/ml 98,4 Equilinsulfat 10 ng/ml 92,6 Ethynylestradiol 0,8 ng/ml 88,6 Mestranol 0,8 ng/ml 100,5 Norethindron 32 ng/ml 76,9 Norethindronacetat 28 ng/ml 99,5 (Norethisteronacetat) ARCHITECT Estradiol-analysens genfindelse ved forekomst af nedenstående stoffer er 100 ± 10% ved de nedenfor anførte koncentrationer: Der blev udført et studie, hvor syntetiske prøver med estradiol (600 pg/ml) blev tilsat potentielt interfererende stoffer i de angivne koncentrationer og testet for estradiol. Den procentvise genfindelse fremgår af nedenstående oversigt: Interfererende stofs Genfindelse Interfererende stof koncentration i % Aldosteron 10 µg/ml 100,1 5α-androstan-3β,17β-diol 10 ng/ml 98,6 5α-androstandion 10 ng/ml 99,6 Androstenedion 100 ng/ml 100,1 Clomiphencitrat 60 ng/ml 98,8 Corticosteron 570 ng/ml 99,1 Cortison 500 ng/ml 98,4 Deoxycorticosteronacetat 500 ng/ml 98,9 11-deoxycortisol 500 ng/ml 100,4 Dexamethason ng/ml 100,5 DHEA 120 ng/ml 99,8 DHEAS 8 µg/ml 100,2 5β-dihydrocorticosteron 500 ng/ml 100,9 DHT (dihydrotestosteron) 2 ng/ml 100,9 Østetrol 2,0 ng/ml 93,0 17α-estradiol 0,3 ng/ml 100,7 17β-estradiol-3-glucuronid 4,8 ng/ml 98,8 17β-estradiol 17-valerat 1 ng/ml 100,4 17β-estradiol 17-propionat 1 ng/ml 100,1 17β-estradiol 3-sulfat 50 ng/ml 105,1 17β-estradiol 3-sulfat17-glucuronid 50 ng/ml 99,6 Østriol 16α-(β-D-glucuronid) 106 ng/ml 101,3 Østriol 3-sulfat 300 ng/ml 97,9 Østriol 3-(β-D-glucuronid) 106 ng/ml 100,1 Østron 3-sulfat 0,4 ng/ml 100,1 Ethynodioldiacetat 1 µg/ml 97,7 Hydrocortison 500 ng/ml 99,4 16α-hydroxyestron 1 ng/ml 100,2 17α-hydroxypregnanolon 480 ng/ml 100,0 17α-hydroxyprogesteron 1200 ng/ml 98,9 Medroxyprogesteron 12,3 ng/ml 99,1 Pregnanolon 59 ng/ml 100,2 Progesteron 500 ng/ml 100,5 Tamoxifen 183 ng/ml 100,9 Testosteron 20 ng/ml 98,1 Tabel C* ARCHITECT Estradiol-analysens genfindelse ved forekomst af nedenstående stoffer er 100 ± 10% ved de nedenfor anførte koncentrationer: Der blev udført et studie, hvor syntetiske prøver med estradiol (i nedenstående koncentrationer) blev tilsat potentielt interfererende stoffer i de angivne koncentrationer og testet for estradiol. Den procentvise genfindelsesprocent fremgår af denne oversigt: Interfererende Interfererende stof Estradiolkoncentration stofs koncentration Genfindelse i % Østron 750 pg/ml 300 pg/ml 93,9 Østron 4000 pg/ml 1500 pg/ml 92,8 Østriol 4000 pg/ml 1500 pg/ml 98,4 Østriol 150 pg/ml 2500 pg/ml 92,1 7

8 Interferens ARCHITECT Estradiol-analysen er blevet undersøgt for potentiel interferens fra hæmoglobin, bilirubin, triglycerider, protein og kolesterol. Den potentielle interferens er 10% ved de niveauer, der er anført nedenfor. Interferensundersøgelsen blev udført efter retningslinjerne i CLSI s protokol EP7-A. 19 Hæmoglobin ved 500 mg/dl Bilirubin ved 20 mg/dl Triglycerider ved 1000 mg/dl Protein ved 4 og 12 g/dl Kolesterol ved 240 mg/dl Metodesammenligning ARCHITECT Estradiol-analysens hældning sammenlignet med isotopfortynding-gaskromatografi/massespektrometri (ID-GCMS) 20 er 1,00 ± 0,10 fra 10 til pg/ml og 1,00 ± 0,15 fra 10 til pg/ml. Korrelationskoefficienten er 0,95 for begge områder. Der blev udført et studie i henhold til retningslinjerne i CLSI s EP9-A2. 21 ARCHITECT Estradiol-analysen blev sammenlignet med isotopfortyndinggaskromatografi/massespektrometri (ID-GCMS). Prøver med kendte GCMS-koncentrationer blev testet med ARCHITECT Estradiol-analysen. På grund af det begrænsede antal GCMS-prøver blev hver prøve testet med tre forskellige reagenslot, dvs. 1 bestemmelse pr. lot. Middel værdien for de tre gentagelser af hver prøve blev beregnet. Den beregnede middelværdi blev anvendt til den puljede regressionsanalyse. Derudover blev korrelationskoefficienten af hver gentagelse beregnet i forhold til GCMS og regressions statistikken fra hvert reagenslot. Regressions analysen blev foretaget med både mindste kvadraters metode og Passing-Bablok. 22 Data fra denne undersøgelse fremgår af nedenstående oversigt.* Abbott ARCHITECT Estradiol vs. ID-GCMS (individuelle prøver) Min. GCMS- Maks. GCMS- Korrelations- Område n konc. konc. koefficient 10 til 1000 pg/ml ,3 945,2 0,99 10 til 5000 pg/ml ,3 4269,2 0,99 Regressionsmetode n Puljet skæring Puljet hældning Hældning pr. lot (lot 1, lot 2, lot 3) 10 til 1000 pg/ml Mindste kvadrater ,03 0,99; 1,03; 1,08 Passing-Bablok** ,02 0,98; 1,02; 1,06 10 til 5000 pg/ml Mindste kvadrater ,09 1,08; 1,08; 1,12 Passing-Bablok** ,04 1,00; 1,03; 1,07 ** En lineær regressionsmetode uden nogen specielle forudsætninger vedr. fordeling af prøver og målefejl. BIBLIOGRAFI 1. Dunn JF, Nisula BC, and Rodbard D. Transport of Steroid Hormones: Binding of 21 Endogenous Steroids to Both Testosterone-Binding Globulin and Corticosteroid-Binding Globulin in Human Plasma. J. Clin Endocrin. Metab. 1981;53: Ross GT. Disorders of the Ovary and Female Reproductive Tract. In: Wilson JD, Foster DW, editors. Williams Textbook of Endocrinology. Philadelphia: WB Saunders Co. 1985: Ryan KJ. Placental Synthesis of Steroid Hormones. In: Tulchinsky D, Ryan KJ, editors. Maternal-Fetal Endocrinology. Philadelphia: WB Saunders Co. 1980: Saxena BB. The Menstrual Cycle. In: Caplan RM, editor. Principles of Obstetrics. Baltimore: Williams and Wilkins. 1982: Speroff L, Glass RH, Kase NG. Regulation of the Menstrual Cycle. In: Clinical Gynecologic Endocrinology and Infertility, 3rd ed. Baltimore: Williams and Wilkins. 1983: Speroff L, Glass RH, and Kase NG. The Endocrinology of Pregnancy. In: Mitchell C, editor. Clinical Gynecologic Endocrinology and Infertility, 5th ed. Baltimore: Williams and Wilkins. 1994; Fritz MA, Speroff L. The Endocrinology of the Menstrual Cycle: The Interaction of Folliculogenesis and Neuroendocrine Mechanisms. In: Wallach EE, Kempers RD, editors. Modern Trends in Infertility and Conception Control. Birmingham: The American Fertility Society, 1985: Lauritzen C, Klopper A. Estrogens and Androgens, In: Fuchs F, Klopper A, editors. Endocrinology of Pregnancy. Philadelphia: Harper and Row, 1983: Whitley RJ, Meikle AW, and Watts NB in Burtis CA and Ashwood ER. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, Second Edition. Philadelphia: W.B. Saunders Company (1994): US Department of Labor, Occupational Safety and Health Administration, 29 CFR Part , Bloodborne pathogens. 11. US Department of Health and Human Services. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. 5th ed. Washington, DC: US Government Printing Office; December World Health Organization. Laboratory Biosafety Manual. 3rd ed. Geneva: World Health Organization; Clinical and Laboratory Standards Institute. Protection of Laboratory Workers from Occupationally Acquired Infections: Approved Guideline Third Edition. CLSI Document M29-A3. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; National Committee for Clinical Laboratory Standards. Procedures for the Handling and Processing of Blood Specimens; Approved Guideline- Second Edition. NCCLS Document H18-A2. Wayne, PA: NCCLS, Tietz N. In: Pruden EL, McPherson RA, Fuhrman SA,editors. Clinical Guide to Laboratory Tests, Third Edition. Philadelphia, Pa: W.B. Saunders Company 1995: Boscato LM and Stuart MC. Heterophilic Antibodies: A Problem for All Immunoassays. Clin Chem 1988; 34: Crowley WF, Filicori M, Santoro NF. GnRH Secretion across the Normal Menstrual Cycle. In: Crowley WF, Hofler JG, editors. The Episodic Secretions of Hormones. New York. John Wiley and Sons, 1987: National Committee for Clinical Laboratory Standards, Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices; Approved Guideline. NCCLS Document EP5-A. Wayne, PA: NCCLS, National Committee for Clinical Laboratory Standards, Interference Testing in Clinical Chemistry; Approved Guideline. NCCLS Document EP7-A. Wayne, PA: NCCLS, Wu H, Ramsay C, Ozaeta P, et al. Serum estradiol quantified by isotope dilution-gas chromatography/mass spectrometry. Clin Chem, 2002;48: National Committee for Clinical Laboratory Standards, Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples; Approved Guideline. NCCLS Document EP9-A2. Wayne, PA: NCCLS, Passing H, Bablok W. A New Biometrical Procedure for Testing the Equality of Measurements from Two Different Analytical Methods. J Clin Chem. Clin Biochem. 1983; 21: ARCHITECT og Chemiflex er varemærker tilhørende Abbott Laboratories i visse jurisdiktioner. ProClin tilhører den respektive ejer. Abbott Ireland Diagnostics Division Lisnamuck, Longford Co. Longford Ireland Distribueret af Abbott Laboratories Abbott Park, IL 60064, USA og ABBOTT Wiesbaden, Germany Juli , 2013 Abbott Laboratories 8