Valideringsprotokol NPU03230 P-Kalium-ion,stofk. NPU03787 U-Kalium-ion,stofk.

Transkript

1 Valideringsprotokol NPU03230 P-Kalium-ion,stofk. NPU03787 U-Kalium-ion,stofk. Kortnavne hhv. Kalium;P og Kalium;U Klinisk Biokemi, Sygehus Syd Niveau 2 Dokumentnummer VP_002_2006 Udarbejdet af Palle Pedersen Klinisk ansvarlig Pal Bela Szecsi Ansvar for AMV og APV Sikkerhedsrepræsentant for FBE-Klinisk Biokemi Godkendt af Dato Formål At formulere krav til validering af analysen på Cobas 6000 Konklusion Analysevalideringen kan igangsættes. Distributionsliste Original indscannes og opbevares på G drev. Den originale papirudgave opbevares i Nykøbing. Tillæg til protokol Tillægsnummer Dato/initialer Kapitel og afsnit G:\Kvalitetssikring\Klinisk biokemi\valideringsprotokoller\godkendte\ P/U-Kalium.pdf Side 1 af 10

2 1 Formål At formulere krav til validering af analysen på Cobas Metodebeskrivelse Samlet beskrivelse af alle væsentlige parametre i metoder herunder analyseprincip, apparatur, kalibratorer samt referenceinterval. 2.1 Identifikation IUPAC-nr. - NPU03230 P-Kalium-ion,stofk. - NPU03787 U-Kalium-ion,stofk. Kortnavn Enhed - Kalium;P - Kalium;U - mmol/l 2.2 Metrologisk sporbarhed Er sporbar overfor flammefotometri 2.3 Analyseprincip Ionselektiv elektrode (ISE) assay (for kalium, ref. Applikationsrapport fra Roche for Kalium (ISE) for plasma, serum og urin) 2.4 Apparatur og udstyr Tidligere udstyr: Dimension RxL clinical chemistry (Dade Behring) Nyt udstyr: Cobas 6000e (Roche) Serienumre: Enhed : Core c501 e601 Næstved Sygehus: Nykøbing Sygehus: AF AA AD AF AA AD AF AA AD AF AA AD Kalibratorer Kalibratorerne består af ISE Standard Low og ISE Standard High (se bilag) 2.6 Reagenser ISE Standard low ISE Standard High ISE Compensator ISE reference elektrolyte ISE internal standard Gen. 2 ISE Cleaning solution G:\Kvalitetssikring\Klinisk biokemi\valideringsprotokoller\godkendte\ P/U-Kalium.pdf Side 2 af 10

3 Ref. pakkeinsert for "ISE indirect Na, K, Cl for Gen. 2" for Cobas, Roche 2.7 Prøvemateriale Hæmolysefrit serum eller lithiumheparin plasma kan anvendes. Døgnuriner uden tilsætningstoffer kan anvendes. Det skal bemærkes at brug af serum og plasma ikke er ligegyldig. Roche anfører at de har målt op til 25 afvigelse mellem målinger på de to typer blodprøver. Der er ikke angivet specifikationer for hhv. EDTA-, Ammonium-Heparin-, Citrat-, Fluorid/Oxelat-glas. Serum gelglas er ikke testet da de blev brugt som referenceblodprøvetagningsglas. K-EDTA skal dog undgås. 2.8 Referenceinterval/terapeutisk område Fra alder Til alder Referenceinterval Reference 7 D 12 mdr. 3,2-6,1 mmol/l Gentoftefolderen 1 år 18 år 3,3-4,6 mmol/l modificeret 18 år 3,6-4,6 mmol/l NORIP 2.9 Måleområde I Serum/Plasma I Urin 1,5-10,0 mmol/l 1,0-100,0 mmol/l Ref. Applikationsrapport fra Roche for Kalium (ISE) for plasma, serum og urin. 3 Valideringsparametre Egne undersøgelser i forbindelse med valideringen udføres under følgende betingelser: Prøver til metodesammenligning er indsamlet i perioden september maj Der anvendes serum/gelglas materiale. Serum afpippeteres, analyseres på nuværende udstyr, nedfryses samme dag og opbevares ved -20 C indtil analyse på Cobas. Prøvene analyseres indenfor 7 timer på nuværende udstyr og Cobas. Prøverne kasseres efter analyse. Under valideringen anvendes samme reagens/kalibrator lot nummer, afvigelse herfra noteres. Kontroller anvendt til valideringen: Interne kontrolprøver: ISE Standard low og ISE Standard High fra Roche. Acceptgrænserne er angivet af Roche. G:\Kvalitetssikring\Klinisk biokemi\valideringsprotokoller\godkendte\ P/U-Kalium.pdf Side 3 af 10

4 3.1 Korrekthed Analysemetodens korrekthed er vurderet ved genfinding af 3 af Roches egne kontroller og 17 kontroller fra konkurrerende firmaer. Analysen er udført i triplikat. Ref.: Applikationsrapport fra Roche for Kalium (ISE) for plasma, serum og urin Precipath U. Precinorm U og ISE Compensator er alle accepterede jvf. kvalitetskravet om recovery på 100 % ± 5 % er opfyldt. Egne undersøgelser: Som stikprøve analyseres HK fra DEKS i mindst 10 tilfælde (baseret på erfaringer fra Elecsys). FHK analyseres som dobbeltbestemmelse ved næste udsendelse. Acceptabel total fejl: 5,8 % Bias: 1,8 % jvf. Westgard 3.2 Metodesammenligning Analysen er sammenlignet med flammefotometri. Forholdet mellem plasmaprøver er: y(c501) = x(flamme)*0,983-0,026; r = 0,998 Forholdet mellem urinprøver er: y(c501) = x(flamme)*0,982-0,323; r = 0,999 (ref. Applikationsrapport fra Roche for Kalium (ISE) for plasma, serum og urin). Egne undersøgelser: Som stikprøve sammenlignes ca. 40 patientprøver. Så vidt muligt 10 under referenceniveau. 20 i referenceniveau og 10 over referenceniveau. Der udføres regressionstest. Krav til stikprøven: Hældning af linien skal ligge i niveauet 0,90-1,10, interceptet skal være 0 ± 0,1, og korrelationen skal være r 2 0, Præcision G:\Kvalitetssikring\Klinisk biokemi\valideringsprotokoller\godkendte\ P/U-Kalium.pdf Side 4 af 10

5 Roche har opgivet følgende intraasseay precision (CV%) for hhv. plasma og urin analyseret på både kontroller og prøvemateriale. Intermediær CV for analysen: 1,1 % (Labquality kvalitetsspecifikationer, gælder for prøver i referenceområdet) Egne undersøgelser: Der udføres intermediær præcision på ca. 20 kontroller; fordelt over 10 dage. Krav til denne stikprøve: CV 10 % på ISE standard High, CV 10 % på ISE standard Low. (OBS kontroller CV% på kontroller!!!!!!!!) 3.4 Måleområde Roche opgiver for serum og plasma et måleområde på Roche opgiver for urin et måleområde på 1,5-10,0 mmol/l mmol/l I området 1,5 til 10,0 er der et lineært forhold med en afvigelse fra linien mindre end 5 %. Dette accepteres uden yderligere tiltag Detektionsgrænse Serum/Plasma 1,5 mmol/l Urin 1 mmol/l Dette accepteres uden yderligere tiltag. G:\Kvalitetssikring\Klinisk biokemi\valideringsprotokoller\godkendte\ P/U-Kalium.pdf Side 5 af 10

6 3.4.2 Kvantificeringsgrænse (Funktionelle grænse) Kvantificeringsgrænse ikke oplyst. Dette accepteres uden yderligere tiltag. 3.5 Linearitet For forskellige fortyndinger af en høj koncentreret plasma-prøve angiver Roche i Applikationsrapport fra Roche for Kalium (ISE) for plasma, serum og urin For forskellige fortyndinger af en højkoncentræret urin-prøve angiver Roche i Applikationsrapport fra Roche for Kalium (ISE) for plasma, serum og urin Dette accepteres uden yderligere tiltag. G:\Kvalitetssikring\Klinisk biokemi\valideringsprotokoller\godkendte\ P/U-Kalium.pdf Side 6 af 10

7 4 Specificitet og interferens (selektivitet) Hæmolyse: Hæmoglbinkoncentrationer > 100 mg/dl (60 μmol/l) øger kaliumkoncentrationen signifikant da koncentrationen af kalium er 25 gange større i erytrocytter end i normalt plasma. Undgå hæmolycerede prøver. Lægemidelpanelet som Roche har undersøgt er (Plasma): Lægemidler i urin er følgende: G:\Kvalitetssikring\Klinisk biokemi\valideringsprotokoller\godkendte\ P/U-Kalium.pdf Side 7 af 10

8 Konklusion ingen af ovenstående lægemidler giver interferens op til de angivne koncentrationer (ref. Applikationsrapport fra Roche for Kalium (ISE) for plasma, serum og urin). Dette accepteres uden yderligere tiltag. 5 Afsmitning Roche oplyser at prøveafsmitning er ikke forekommende, idet der anvendes engangs spidser og kuvetter. Der foretages intet for at eftervise dette. 6 Præanalytiske forhold Holdbarhed C 14 dage 2-8 C 14 dage Ref. Pakkeinsert: ISE NA, K, Cl for Gen. 2, Cobas Hæmolyse: Hæmoglbinkoncentrationer > 100 mg/dl (60 μmol/l) øger kaliumkoncentrationen signifikant da koncentrationen af kalium er 25 gange større i erytrocytter end i normalt plasma. Undgå hæmolycerede prøver. 7 Robusthed G:\Kvalitetssikring\Klinisk biokemi\valideringsprotokoller\godkendte\ P/U-Kalium.pdf Side 8 af 10

9 Krydsreaktivitet er ikke bestemt af Roche. High-dose Hook effekt ikke er relevant i forhold til det snævre område hvori patienter normalt ligger. Robustheden på Cobas 6000 valideres samtidig med metodesammenligningen. 8 Arbejdssikkerhed og arbejdsmiljø (APB) APV for apparatet udarbejdes af Sikkerhedsrepræsentant for FBE Klinisk biokemi 9 Andet Valideringen, som den er beskrevet i denne protokol fortages på primær apparatet. Tilsvarende apparatur valideres ved parallelanalysering over 3 serier med ca. 10 prøver i relevante niveauer (som punkt 3). Afvigelsen mellem resultaterne bør være < 10% i gennemsnit. Er afvigelsen større vurderes situationen individuelt. 10 Økonomi Er vurderet i forbindelse med anskaffelse af Cobas Konklusion Validering kan iværksættes 12 Litteratur Roche Applikationsrapport fra Roche for Kalium (ISE) for plasma, serum og urin Pakkeinsert: ISE NA, K, Cl for Gen. 2, Cobas Børne referenceinterval "Gentofte folderen" (internet link) Westgard:Desirable Specifications for Total Error, Imprecision, and Bias, Derived from Biologic Variation (internet link). 13 Bilag Roche Applikationsrapport fra Roche for Kalium (ISE) for plasma, serum og urin G:\Kvalitetssikring\Klinisk biokemi\valideringsprotokoller\godkendte\ P/U-Kalium.pdf Side 9 af 10

10 Pakkeinsert: ISE NA, K, Cl for Gen. 2, Cobas G:\Kvalitetssikring\Klinisk biokemi\valideringsprotokoller\godkendte\ P/U-Kalium.pdf Side 10 af 10