1. prøve på 5. semester S5 - hold 36. Tirsdag 4. maj kl til onsdag 5. maj 2010 kl

Transkript

1 Skriftlig tværfaglig mappe-eksamen 1. prøve på 5. semester S5 - hold 36 Tirsdag 4. maj kl til onsdag 5. maj 2010 kl Væsentligste hjælpemidler: Mappen, Dansk Laboratoriemedicin, Databog i fysik og kemi og lommeregner. Sættet indeholder i alt 7 nummererede sider inklusiv forsiden og bilag. Kontrollér venligst med det samme om alle sider er der. Alle sider i eksamensbesvarelsen skal forsynes med navn, studienummer og hold nr. Opgavebesvarelserne angives med tydelig opgavenummer og må max. fylde 5 normalsider. Kun normalside 1-5 rettes. Generelle retningslinier for besvarelse af opgavesættet: Se eksamensregler for 1. Prøve på 5. Semester. Aflevering: Besvarelsen inklusive bilag afleveres samlet i plastlomme i skolens reception. NAVN: HOLD: DATABOG UDGAVE: 1

2 Case En 50 årig kvinde henvender sig til sin praktiserende læge på grund af smerter ved vandladning (dysuri). Patienten har let forhøjet temperatur. Ved undersøgelse af urinen findes bakterier og hæmaturi. Journalen viser en historie med årlige urinvejsinfektioner. Den kliniske undersøgelse påviser bl.a. lette ødemer i patientens ben. Patienten henvises til nyrefunktionsundersøgelse p.gr.a. hæmaturi. Opgaver Opgave 1 Hvorfor fører hæmaturi til, at hun får undersøgt sin nyrefunktion? Opgave 2 Måling af S-Cystatin C anbefales ifølge Dansk Laboratorie Medicin til bestemmelse af nyrefunktion. Vil man forvente en nedsat eller en øget mængde af S-Cystatin C ved nedsat glomerulær filtrations rate (GFR)? Opgave 3 Til kvantitering af præcipitations og agglutinationsreaktioner kan turbidometri anvendes. Til måling af Cystatin C koncentration i blod findes et kit fra firmaet Diazyme. Dette Cystatin C assay er baseret på latex enhanced immunoturbidimetri. Analyseprincippet i denne metode er beskrevet nedenfor, og ligeledes er det beskrevet hvorledes Cystatin C koncentrationen bestemmes ud fra den turbidometriske måling. Diazyme Cystatin C assay is based on a latex enhanced immunoturbidimetric assay. Cystatin C in the sample binds to anti-cystatin C antibody, which is coated on latex particles, and causes agglutination. The degree of the turbidity caused by agglutination can be measured optically and is proportional to the amount of Cystatin C in the sample. The instrument calculates the Cystatin C concentration of a patient specimen by interpolation of the obtained signal on a 6-point calibration curve. a) Fremstil en tegning med tilhørende figurtekst, der illustrerer og beskriver princippet i analysen. b) Hvorledes bestemmes koncentrationen af Cystatin C i en prøve ud fra den turbidometriske måling? c) En direkte sandwich ELISA vil i teorien også kunne anvendes til at bestemme Cystatin C koncentrationen i blod. Skitser princippet i opbygningen af en direkte sandwich ELISA til bestemmelse af cystatin C. d) Hvad er forskellen mellem en direkte - og en indirekte ELISA? e) Anvendelse af indirekte ELISA rummer både fordele og ulemper i forhold til direkte ELISA. Nævn to fordele ved indirekte ELISA i forhold til direkte ELISA. Opgave 4 Patienten viste sig at have en moderat nedsat glomerulær filtrations rate (GFR). 2

3 Hos patienter med nedsat GFR bør man være opmærksom på blodtrykkets størrelse. Diskuter hvordan blodtrykket påvirkes af nyrens funktion, herunder hvordan størrelsen af blodtryk målt ved nedsat GFR vil være i forhold til et normalt blodtryk Opgave 5 Beskriv hvordan måling af blodtryk bør udføres, og reflekter herunder over præanalytiske faktorer af betydning for resultatet. Opgave 6 Forklar hvorfor patientens syre/base status kan være påvirket af den nedsatte nyrefunktion. Angiv herunder hvordan syre/base status forventes ændret i forhold til normalt. Opgave 7 Patientens syre/basestatus måles. ab-ph måles til 7,2 og ab-pco 2 måles til 3,1 kpa. a) Hvilket prøvemateriale vil du anvende til målingerne? b) Beregn P- [HCO 3 ], idet det oplyses, at Henry-konstanten v. 37 C er K H = 23,0 mm/bar = 0,23 mm/kpa c) Hvordan ligger patientens ab-ph, ab-pco 2 og P-[HCO 3 ] i forhold til referenceintervallet? d) Er der overensstemmelse mellem svaret i opgave 6 og de fundne resultater i opgave 7? Opgave 8 Ved eksamination af en nyrebiopsi fra patienten konstateres fokale histologiske forandringer forenelige med kronisk pyelonefritis. Der ses bl.a. destruerede og atrofiske tubuli med svind af epitelceller og fortykkede tubulære basalmembraner, mens glomeruli er relativt uberørte med velbevaret kapillærnøgle. I bindevævet (interstitiet) ses et betændelsesinfiltrat bestående af lymfocytter, plasmaceller og makrofager. Diskuter, hvordan et betændelsesinfiltrat kan medvirke til at afgøre, om en inflammation er akut eller kronisk. Inddrag også andre histologiske karakteristika, som bidrager til at skelne mellem akut og kronisk inflammation i et væv/organ. Opgave 9 Reflekter i forhold til sygehistorien med de gentagne urinvejsinfektioner over, hvorfor patientens tubuli er destruerede eller atrofiske, mens glomeruli er relativt uberørte? Opgave 10 Som led i den histologiske eksamination af nyrebiopsien er nogle præparater farvet med PAS og andre med Massons Trichrome som supplement til de Hematoxylin-Eosin farvede præparater. Se bilag 1 for beskrivelse af forventede farveresultater med Massons Trichrome Reflekter over hvordan disse to specialfarvninger bidrager til diagnostikken? Opgave 11 Inflammation er vigtig for bekæmpelse af alle infektioner. Beskriv hvordan de immunologiske celler finder vej til et inficeret område. 3

4 Opgave 12 Ved en kronisk nyredysfunktion kan ses en påvirkning af hæmatokritværdien. Forklar hvorfor og diskuter hvor hurtigt en sådan tilstand vil indtræffe. Opgave 13 En forhøjet albuminkoncentration i urinen kan indikere en skade på glomeruli. På et apparat, der anvendes til måling af albuminkoncentration i urin, medtages i hver måleserie en kontrolprøve med kendt indhold af albumin. Der føres kontrolkort over målingerne. Kontrolprøven har et indhold af albumin på 0,25 μmol/l og standardafvigelsen er fastsat til 0,02 μmol/l på baggrund af et meget stort antal målinger. De seneste 15 målinger på kontrolprøven viste følgende resultater. dato μmol/l , , , , , , , , , , , , , , ,24 4

5 a) Konstruér kontrolkortet ud fra ovennævnte oplysninger og indtegn de opnåede resultater for de 15 målinger på kontrolprøven. De 5 mest almindelige Westgaard-regler anvendes til at foretage en vurdering af apparatet. b) Begrund, om der er tegn på, at der er problemer med målingernes præcision og/eller akkuratesse. Der foretages en kvantitativ måling af den i indledningen omtalte patients albuminindhold i en døgnurinprøve, prøven viste et resultat på 3,05 μmol/l urin. Der blev opsamlet 2,0 L urin /døgn. c) Prøven blev målt d Begrund ud fra kontrolkortet om patientens måleresultat er pålideligt. d) Beregn prøven indhold af albumin/døgn e) Find referenceintervallet for albumin i urin i Dansk laboratoriemedicin og angiv om patienten lider af albuminuri. Opgave 14 På et mikrobiologisk laboratorium vil man gerne indføre en agglutinationstest til påvisning af LPS (= lipopolysaccharid), som findes i cellevæggen hos g-negative stave, der ses meget hyppigt ved urinvejsinfektioner. Laboratoriet er i besiddelse af en del g-negative bakterier, som har LPS i cellevæggen (LPS-positive) og nogle g-positive bakterier, som ikke har LPS i cellevæggen (LPS-negative). Disse bakterier, både de g- negative og de g-positive undersøges med agglutinationsmetoden for indhold af LPS. Der undersøges i alt 500 bakterier. Resultatet af undersøgelsen viste: LPS påvist med agglutinationsmetoden LPS ikke påvist med agglutinationsmetoden I alt LPS -positive LPS-negative 255 I alt a) Udfyld de tommer felter i skemaet. b) Beregn sensitivitet og specificitet for agglutinationsmetoden. c) Hvor mange personer ud af 100 undersøgte vil være syge, selvom de har fået et negativt svar ved undersøgelse med agglutinationstesten? 5

6 Opgave 15 En anden metode, der kan bruges til at påvise tilstedeværelse af bakterier f.eks. E.coli, er PCR. Herunder er et udsnit af en DNA sekvens fra E.coli. Beliggenheden af en mulig forward (sense) primer og reverse (antisense) primer er angivet med fed skrifttype og understreget. 841 gtgaattcat ctccgggggt agagcactgt ttcggcaagg gggtcatccc gacttaccaa 901 cccgatgcaa actgcgaata ccggagaatg ttatcacggg agacacacgg cgggtgctaa 961 cgtccgtcgt gaagagggaa acaacccaga ccgccagcta aggtcccaaa gtcatggtta 1021 agtgggaaac gatgtgggaa ggcccagaca gccaggatgt tggcttagaa gcagccatca 1081 tttaaagaaa gcgtaatagc tcactggtcg agtcggcctg cgcggaagat gtaacggggc a) Angiv sekvensen for forward primer med angivelse af 5 og 3 ende: b) Angiv sekvensen for reverse primer med angivelse af 5 og 3 ende: c) Hvor langt bliver PCR produktet (bp)?: d) Hvilke kontroller bør medtages ved opsætning af en PCR analyse? e) Hvordan vil du undersøge, om prøven er positiv? Opgave 16 Til behandling af E. coli bruges ofte antimikrobielle midler af sulfonamid typen f.eks. sulfametizol, der hovedsagelig udskilles over nyrene i uændret form. a) Hvilken betydning har den nedsatte nyrefunktion for halveringstiden af sulfametizol? b) En bakteries resistensmønster overfor eksempelvis sulfametizol kan afgøres med en E-test. Redegør for princippet i resistensbestemmelse af bakterier ved hjælp af E-test. 6

7 Bilag 1 Protokol for Massons trichrome samt forventede farveresultater kan bl.a. findes her: og her 7