BACTEC 12B Mycobacteria Culture Vials Middlebrook 7H12

Transkript

1 BACTEC 12B Mycobacteria Culture Vials Middlebrook 7H12 PP116JAA 2007/06 Dansk TILSIGTET BRUG Det kvalitative BACTEC 12B Mycobacteria Medium (mykobakteriemedie) anbefales til dyrkning og opsamling af mykobakterier fra kliniske præparater, spyt, maveprøver, urin, væv, pusholdige prøver, andre kropsvæsker og andre respirationssekretioner, differentiering af Mycobacterium tuberculosis komplekset fra andre mykobakterier og undersøgelse af medikamentfølsomhed af M. tuberculosis. RESUMÉ OG FORKLARING BACTEC radiometrisk teknik er meget brugt til hurtig indsamling af mykobakterier fra spyt og andre kliniske præparater. 1-4 Alle slags kliniske præparater, fra luftvejene såvel som uden for luftvejene, kan behandles til BACTEC primær isolation på en måde, som ligner den, hvor der benyttes konventionelle procedurer. 2,5-7 Yderligere oplysninger findes i CDC-håndbogen under Isoleringsprocedure og Identifikation af mykobakterier. 3 Den prøves, som skal testes, inokuleres i et eller flere 12B Mycobacteria Medium-glas, med en sprøjte gennem gummimembranen, og inkuberes. Dyrkningsglasset indsættes periodevist i BACTEC 460TB-systeminstrumentet til testning, som består af aspiration af gassen i toprummet og analyse af dets radioaktive indhold. En positiv aflæsning angiver tilstedeværelsen af levedygtige mikroorganismer i glasset. PROCEDURENS PRINCIPPER BACTEC 12B Mycobacteria Medium er en beriget Middlebrook 7H9-bouillonbasis. Hvis der findes mikroorganismer i den testprøve, der inokuleres i BACTEC-glasset, bruger de et 14 C-mærket substrat (fedtsyre), der findes i mediet, og afgiver 14 CO 2 i atmosfæren over mediet. Når glassene testes på BACTEC 460TBsysteminstrumentet, aspireres gassen fra glasset, og 14 CO 2 radioaktiviteten fastlægges kvantitativt i form af tal på en skala fra 0 til 999. Disse tal specificeres som vækstindekset (GI Growth Index). GI-tallene vises af BACTEC 460TB-systeminstrumentet og udskrives også sammen med identificerende stativ- og flaskenummer (100 GI enheder er cirka lig med 0,025 µci). Den daglige forøgelse i GI-tallet er direkte proportional med hastigheden og mængden af vækst i mediet. Hvis der introduceres et hæmmende stof i mediet, angives inhibition af stofskifte af reduceret produktion af 14 CO 2, når det sammenlignes med en kontrol, hvor der ikke er tilsat et hæmmende stof. Dette grundlæggende princip anvendes ved undersøgelse af medikamentfølsomhed og i differentiering af M. tuberculosis komplekset fra andre mykobakterier. BACTEC 460TB-systeminstrumentet skal bruges med et specielt TB-skab, når det anvendes til mykobakteriologi. TB-skabet giver mikrofiltreret luft og undertryk i testområdet. Derudover er TB-skabet udstyret med en ultraviolet lyskilde i testområdet. Enheden er udviklet til automatisk testning af glas og må ikke bruges til inokulering eller videredyrkning i stedet for et biologisk skab. REAGENSER BACTEC 12B Medium-dyrkningsglassene indeholder følgende reaktive ingredienser (inden behandling): Mængde tilsat pr. liter behandlet vand 7H9 bouillon ,7 g Caseinhydrolysat ,0 g Bovint serumalbumin ,0 g Catalase enheder 14C-substrat µci Sammensætningen kan være blevet justeret for at overholde specifikke krav. Advarsler og forholdsregler: Til in vitro diagnostik. Dette produkt indeholder tørt naturgummi. Patogene mikroorganismer, deriblandt hepatitisvira og HIV, kan forekomme i kliniske prøver. Standard forholdsregler 8-11 og institutionelle retningslinier skal overholdes ved håndtering af alle emner, der er kontamineret med blod og andre kropsvæsker. Udfør alle procedurer, inklusive behandling af præparater, klargøring af udstrygninger, klargøring af podestof, fortyndinger, inokuleringer af medier, videredyrkning, osv., i et egnet biologisk sikkerhedsskab i et rum med et passende ventilationssystem som anbefalet af CDC. 3 Benyt passende beskyttelseskittel, maske og handsker, mens der håndteres præparater og kulturer af potentielle patogener. Følg CDC- og OSHA-anbefalingerne. Inden brug skal hvert glas undersøges for tegn på beskadigelse, nedbrydning eller kontaminering såsom uklarhed, opsvulmet eller indsunket membran. Hvis et dyrkningsglas viser tegn på kontaminering MÅ DET IKKE BRUGES. Et kontamineret glas kan indeholde overtryk. Kontaminering af glasset er ikke nødvendigvis umiddelbart synlig. Dyrkningsglas, der udviser uklarhed, kontaminering eller misfarvning (mørkfarvning), må ikke bruges. Dyrkningsglas, som viser tegn på beskadigelse, bør kasseres før inokulering. I sjældne tilfælde kan glasflaskerne være revnet, og halsen kan gå i stykker, når hætten fjernes eller under håndtering. I sjældne tilfælde kan et

2 dyrkningsglas være utilstrækkeligt forseglet. I begge tilfælde kan glassets indhold løbe ud især hvis glasset vendes om. Hvis dyrkningsglasset er blevet inokuleret, skal det spildte produkt behandles med varsomhed, da det kan indeholde patogene organismer/stoffer. Sterilisér alle inokulerede dyrkningsglas vha. autoklavering, inden de kasseres. Positive dyrkningsglas til videredyrkning eller farvning, osv.: Inden prøvetagning er det nødvendigt at frigøre gas, som kan samle sig på grund af det mikrobielle stofskifte. Inokulering og prøveudtagning skal foretages i et biologisk skab, og der skal bæres passende beskyttelsestøj inkl. handsker og maske. Se afsnittet Procedure for at få yderligere oplysninger om videredyrkning. For at minimere risikoen for udslip under inokuleringen af præparatet i dyrkningsglas skal der bruges sprøjter med fastmonterede kanyler eller Luer-Lok-spidser. Gummimembranen på et dyrkningsglas bør desinficeres, hver gang man foretager indføring i glasset. Rens toppen af hvert glas med desinfektionsmiddel, efterfulgt af 70 % alkohol. Brug et passende desinfektionsmiddel til rengøring af arbejdsområdet og pensling af glasmembranen og andre overflader. CDC meddeler: Med så mange disponible desinfektionsmidler er det vigtigt at konsultere produktbrochurerne for at sikre, at desinfektionsmidlet er bakteriedræbende for mykobakterier. 12 Arbejde med en sprøjte og kanyle kræver særlig opmærksomhed og sikkerhedsforanstaltninger. Brug sprøjter med permanent fastmonterede kanyler eller fastgjorte Luer-Lok-spidser. Håndtér sprøjter med passende forsigtighed. Sæt ikke hætten tilbage på kanylen efter brug. Kassér sprøjter i en beholder til skarpe objekter og vær forsigtig ved håndtering af deponeringsbeholdere. Se NCCLS godkendte retningslinier M29, Protection of Laboratory Workers from Occupationally Acquired Infections. 8 Opbevaringsinstruktioner BACTEC 12B Mycobacteria-glas skal opbevares ved 2 25 C et tørt sted. Medieglassene er stabile ved de anbefalede opbevaringstilstande, indtil den angivne udløbsdato. Det er en god praksis at isolere radioaktivt materiale ved at opbevare det i et skab, som kun autoriseret personale kan få adgang til. Skabet skal være mærket med ordene Forsigtig: Radioktive materialer. Mediet må ikke udsættes for direkte klart lys. Start altid med at teste hvert 12B-glas på BACTEC 460TBsysteminstrumentet for at etablere 5 10 % CO 2 atmosfæren i glasset og for at sortere glas med høje baggrundsaflæsninger fra. Hvis et glas har en GI-aflæsning på GI 20 eller mere ved den første screening, skal det kasseres. PRØVEINDSAMLING Prøveindsamling og håndtering bør udføres ifølge de standardmetoder, som er fyldestgørende gennemgået i CDC-håndbogen 3 og i BACTEC 460TB System Product and Procedure Manual (MA-0029). PROCEDURE Vedlagte materialer: BACTEC 12B Medium Nødvendige materialer, der ikke er vedlagt: BACTEC PANTA PLUS Kit BACTEC NAP Differentiation Kit BACTEC 460TB Instrument Tuberkulinsprøjte med permanent fastmonteret kanyle Desinfektionsmiddel 70 % isopropylalkohol serviet Steril kanyle med filter Behandling af prøven: Der er blevet anbefalet adskillige procedurer for gæring og dekontaminering, og disse følges i diverse laboratorier. Visse procedurer er kendt for kun at være kompatible med æggebaserede medier og ikke egnede til brug med BACTEC-metoden. Natriumhydroxid (NaOH) og N-acetyl-L-cystein-NaOH (NALC) metoder anbefales til BACTEC 460TB-systemet. Andre metoder kan være kompatible med BACTEC-proceduren, men der er ikke nok disponible data til at demonstrere dette på afgørende vis. Det er ikke nødvendigt med nogen dekontamineringsprocdure for prøver, der er blevet indsamlet sterilt. Yderligere oplysninger findes i BACTEC 460TB System Product and Procedure Manual. Inokulering af 12B-medie: Fjern hætten på BACTEC-glasset, og kontrollér det for revner, kontaminering, uklarheder og opsvulmet eller indsunken membran, før brug. MÅ IKKE ANVENDES, hvis der observeres nogen defekter. Test alle 12B-medieglas på BACTEC 460TB-systeminstrumentet for at eliminere glas med høje baggrundsaflæsninger (GI 20) og for at etablere en CO 2 -beriget atmosfære i glasset. 12B-mediet kan bruges som et selvstændigt medie til indsamling af mykobakterier. Til maksimal indsamling af mykobakterier kan der dog også inokuleres, sammen med 12B-glasset, et glas Lowenstein-Jensen (LJ), andre modifikationer af LJ-mediet, eller 7H10/7H11 (almindelig plade eller bi-plade). 13 Beslutningen om at bruge 12Bmediet alene eller med yderligere konventionelle medier bør tages efter at have gennemgået hver institutions egen erfaring og krav, såvel som efter gennemgang af offentliggjorte data. 4-7,14,15 Kontaminering kan reduceres ved at supplere mediet med en blanding af antimikrobielle stoffer før inokulering. 16 PANTA Supplement, som indeholder polymyxin B, amphotericin B, nalidixicsyre, trimethoprim og azlocillin er disponibel i en frysetørret form (yderligere oplysninger findes i BACTEC 460TB System Product and Procedure Manual). Inokulering af præparatet skal udføres inden for 2 timer af tilsættelsen af PANTA til 12Bmedieglasset. Rekonstitueringsvæsken indeholder en vækstfremmende substans POES (polyoxyethylenstearat). 17 2

3 Derfor anbefales det, at når der ikke bruges PANTA, tilsættes der 0,1 ml af rekonstitueringsvæske alene til 12Bmediet før inokulering af præparatet. Inokulér 0,5 ml af det godt blandede prøvekoncentrat i hvert 12B-medieglas ved brug af en steril sprøjte med en permanent monteret kanyle eller Luer-Lok-spids for hver prøve. En højere volumen vil forstyrre ph-værdien på mediet på grund af den høje ph-værdi i podestoffet. Prøver, der er indsamlet sterilt, og som ikke er dekontamineret, kan dog inokuleres med så meget som 1,0 ml. Større mængder end 1,0 ml vil fortynde mediet og kan påvirke væksten. Desinficér gummimembranen på hvert glas med et passende desinfektionsmiddel efter inokulering eller efter prøveudtagning af afmålinger fra et inokuleret glas efterfulgt af rensning med en serviet med 70 % alkohol. Inokulerede dyrkningsglas skal inkuberes ved 37 C ± 1 C uden rystelse og skal testes på et BACTEC 460TBsysteminstrument ved brug af 5 % 10 % CO 2 i luft. Test dyrkningsglassene hver anden eller tredje dag i de første to uger og ugentligt derefter i en periode på seks uger i alt. Testningsplanen kan variere alt efter laboratoriets arbejdsbyrde. Hvis et præparat formodes at indeholde mykobakterier, som kræver en anden optimal temperatur end 37 C, (dvs. M. marinum og M. chelonae kræver 30 C), bør der inokuleres to sæt medier, et sæt til inkubation ved 37 C og det andet sæt ved en mere optimal temperatur. Klargør en udstrygning fra et BACTEC 12B-medieglas ved GI Hvis den er positiv for AFB, skal denne kultur rapporteres som positiv afventende identifikation. Videredyrk til et fast medie. Inkubér videredyrkningen ved 37 C ± 1 C. TB-differentiering: Når et 12B-medieglas GI når 50, skal BACTEC NAP-testen udføres ifølge den anbefalede procedure. Denne procedure vil differentiere TB-komplekset fra mykobakterier ud over dem, der er tuberkulose (MOTT). Artsdannelse af mykobakterier skal udføres ved brug af de konventionelle teknikker, som er anbefalet af Centers for Disease Control and Prevention. 3 Videredyrkning: Inden prøvetagning, videredyrkning eller farvning skal glasset placeres lodret, og en serviet med alkohol skal placeres over membranen. For at udligne trykket i dyrkningsglasset skal der stikkes en steril kanyle med et passende filter eller tampon gennem den alkoholvædede serviet og membranen. Kanylen skal fjernes, når trykket er udlignet, og inden der udtages prøver fra glasset til videredyrkning. Indsætningen og fjernelsen af kanylen skal foretages med en lige bevægelse uden drejende bevægelser. Undersøgelse af medikamentfølsomhed: Enhver undersøgelse af medikamentfølsomhed for M. tuberculosis kan opstilles ved GI ekstra dags inkubation eller GI 500 (se BACTEC 460TB System Product and Procedure Manual for at få yderligere oplysninger). KVALITETSKONTROL BRUG IKKE glas efter deres udløbsdato. BRUG IKKE glas med revner eller fejl. Kassér glasset på passende vis. Kvalitetskontrolcertifikater er vedlagt hver pakke med vækstmedier. Kvalitetskontrolcertifikaterne viser testorganismer, inkl. ATCC-kulturer som specificeret i NCCLS-standarden, Quality Assurance for Commercially Prepared Microbiological Culture Media. 18 Som en del af den daglige vedligeholdelsesplan, skal funktionstestglas (BACTEC Performance Test Kit) testes på BACTEC-instrumentet. Hvis aflæsningerne er lave, selvom funktionstestglassene blev testet korrekt, kan dette tilkendegive mulige problemer med instrumentet (se BACTEC PTK indlægsseddel PP-046JAA). Krav til kvalitetskontrol skal udføres i overensstemmelse med gældende lokale, statslige og/eller nationale regulativer eller akkrediteringskrav og Deres laboratoriums standardkvalitetskontrolprocedurer. Det anbefales, at brugeren læser de relevante NCCLS-retningslinier og CLIA-regulativer for passende kvalitetskontrolpraksis. RESULTATER Instrumentet udlæser direkte på en skala fra kaldt et vækstindeks. Det er ikke nødvendigt med beregninger. Vækstindekset et et mål af den 14 CO 2 radioaktivitet, der aspireres i iontanken, og er direkte proportional med mængden af aktiv vækst i glasset. Nuværende forbundsregulativer (CLIA 88) kræver, at instrumentudskrifter af testresultater skal være associeret med den relevante patientprøve. Disse udskrifter skal bevares i en periode på mindst to år. Lokale og statsregulativer kan være mere restriktive end forbundskravene. Læs venligst disse regulativer for at få oplysninger om yderligere krav, der skal overholdes. Når først GI-værdien når 10 eller mere, skal kulturen betragtes som sandsynligvis H-positiv, X og glasset skal testes dagligt. AFB-udstrygningen er vigtig til bekræftelse af tilstedeværelse af mykobakterier. Når først der observeres AFB på den udstrygning, som er lavet fra et positivt dyrkningsglas, kan præparatet rappporteres som dyrkningspositiv for AFB (identifikation anmeldt). Negative kulturer skal rapporteres efter seks ugers inkubation. Registreringstiden for en positiv kultur varierer betydeligt på grund af sådanne faktorer som præparattypen, antal organismer til stede i præparatet, patientens behandlingsstatus og inkubationstemperaturen. Procedureforskelle, især dekontamineringsmetoden, kan spille en vigtig rolle i registreringstiden. Den gennemsnitslige registreringstid for M. tuberculosis fra kliniske præparater (udstrygningsnegative og udstrygningspositive) er rapporteret til at være 7 til 12 dage. MOTT-baciller registreres generelt to til tre dage tidligere end M. tuberculosis. 4,6,7,14,15 Forekomsten af kontaminering varierer fra laboratorie til laboratorie, alt efter den anvendte dekontamineringsprocedure. Kontaminering i 12B-isolationsglasset er normalt lavere end dem, der rutinemæssigt observeres i konventionelle medier, hvor en kontamineringsgrad på op til 5 % er acceptabel. Før en kontamineringsfortegnelse og udregn kontamineringsgraden periodevis. Gennemgå behandlingsprotokollen og juster den om nødvendigt. Et kontamineret 12B-medieglas kan behandles igen. Se BACTEC 460TB System Product and Procedure Manual for at få oplysninger om proceduren. 3

4 PROCEDURENS BEGRÆNSNINGER Der skal udvises omhu for at forhindre, at prøven kontamineres under prøvetagningen og inokuleringen i BACTEC-glasset. En kontamineret prøve vil give en positiv aflæsning, men vil ikke angive en klinisk relevant positiv prøve. En sådan afgørelse skal foretages af brugeren baseret på sådanne faktorer som den isolerede organismetype, forekomst af den samme organisme i flere dyrkninger, sygdomsforløbet, passende udstyrskontrol, osv. Kontaminering kan også være et resultat af forkert vedligeholdelse af BACTEC-kanyler og slanger, dårlig rensning af membran eller funktionsfejl i BACTEC-kanylevarmelegemet (se BACTEC 460TB Operation and Maintenance Manual). GI-niveauet reflekterer den grad og mængde vækst, som forekommer i mediet, men kan ikke kvantificeres så nøjagtigt som af kolonitællinger på faste medier. Kolonimorfologi og pigmenteringskarakteristika kan kun bestemmes på faste medier. På grund af de biologiske materialers beskaffenhed i medieprodukter og den iboende varians blandt organismer skal brugeren være opmærksom på potentielt varierende resultater i opsamlingen af visse organismer. FUNKTIONSDATA I en undersøgelse udført af Tortoli et al. blev opsamling af mykobakterier sammenlignet i to automatiske systemer og et manuelt system. BACTEC 460-systemet ved brug af 12B Mycobacteria Medium gav 201 isolater i sammenligning med 190 isolater med BACTEC MGIT 960-systemet og 167 isolater med Lowenstein-Jensen medie. Gennemsnitstiden for registrering ved brug af BACTEC 460 og 12B-mediet var 14,8 dage. 19 TABLE 1. Opsamling af mykobakterier af individuelle systemer og kombinationer af systemer a Totalt antal (%) opsamlet Mykobakterie Alle medier BACTEC MGIT BACTEC 460 Lowenstein-Jensen BACTEC MGIT 960 BACTEC 460 eller præparat 960 system system medie system + system + Lowenstein-Jensen Lowenstein-Jensen medie medie Alle (80) 201 (85) 167 (71) 212 (90) 225 (95) M. tuberculosis kompleks (88) 153 (92) 124 (74) 158 (94) 160 (95) M. xenopi (54) 11 (46) 17 (71) 21 (87) 22 (92) M. avium kompleks (95) 22 (100) 16 (73) 21 (95) 22 (100) Anden MOTT b 21 7 (33) 15 (71) 10 (48) 12 (57) 21 (100) Udstrygning positiv (53) 121 (53) 103 (45) 125 (55) 127 (56) Udstrygning negativ (63) 80 (74) 64 (59) 87 (80) 98 (91) a Mere hyppigt forekommende taksionomiske grupper betragtes separat, såvel som udstrygningspositive og -negative præparater. b MOTT, mykobakterier andet end M. tuberculosis. BESTILLING Kat. nr. Beskrivelse BACTEC 12B Medium, 4 ml, 100 pr. karton BACTEC PANTA Plus Kit, frysetørret antimikrobielt supplement (PANTA), 5 glas; rekonstitueringsvæske, 10 ml, 5 glas BACTEC NAP Differentiation Kit, 5 µg NAP pr. glas, 10 glas pr. karton BACTEC 460TB System Instrument BACTEC SIRE Drug Kit (100 tester) BACTEC Diluting Fluid (10 tester) Isoniazid, 1 glas PZA Test Medium (5 tester) PZA Drug/Reconstituting Fluid Kit (50 tester) LITTERATUR 1. Middlebrook, G. et al. Automated radiometric detection of growth of Mycobacterium tuberculosis in selective media. Am. Rev. Respir. Dis. 115: , Bannister, E.R. et al. Comparison of detection, identification and drug susceptibility testing of mycobacteria by using the BACTEC radiometric method and conventional methods. Abstract C260, A.S.M. Annual Meeting, Las Vegas, Kent, P.T. et al. Public health mycobacteriology, a guide for the level III laboratory. Centers for Disease Control, Division of Laboratory Training and Consultation. Atlanta, GA, Roberts, G.D. et al. Evaluation of BACTEC radiometric method for recovery of mycobacteria and drug susceptibility testing of Mycobacterium tuberculosis from acid-fast smear-positive specimens. J. Clin. Microbiol. 18: , Fadda, G. et al. Recovery and susceptibility testing of Mycobacterium tuberculosis from extrapulmonary specimens by the BACTEC radiometric method. J. Clin. Microbiol. 19: , Morgan, M.A. et al. Comparison of a radiometric method (BACTEC) and conventional culture media for recovery of mycobacteria from smear-negative specimens. J. Clin. Microbiol. 18: , Takahashi, H. et al. Detection and recovery of mycobacteria by a radiometric procedure. J. Clin. Microbiol. 17: ,

5 8. National Committee for Clinical Laboratory Standards Approved Guideline M29-A2. Protection of laboratory workers from occupationally acquired infections, 2nd ed. NCCLS, Wayne, PA. 9. Garner, J.S Hospital Infection Control Practices Advisory Committee, U.S. Department of Health and Human Services, Centers for Disease Control and Prevention. Guideline for isolation precautions in hospitals. Infect. Control Hospital Epidemiol. 17: U.S. Department of Health and Human Services Biosafety in microbiological and biomedical laboratories, HHS Publication (CDC) 4th ed. U.S. Government Printing Office, Washington, D.C. 11. Directive 2000/54/EC of the European Parliament and of the Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work (seventh individual directive within the meaning of Article 16(1) of Directive 89/391/EEC). Official Journal L262, 17/10/2000, p Kent, P.T. et al. Public health mycobacteriology: Centrifugal efficiency and digestant toxicity. Abstract U-2. A.S.M. Annual Meeting, St. Louis, MO, Libonati, J.P. et al. The role of solid media in the BACTEC system for mycobacterial isolation and identification. Abstract U-71. A.S.M. Meeting, Atlanta, GA, Kirihara, J. M. et al. Improved detection times of Mycobacterium avium complex and M. tuberculosis with the BACTEC radiometric system. J. Clin. Microbiol. 22: , Park, C.H. et al. Rapid recovery of mycobacteria from clinical specimens using automated radiometric technique. Am. J. Clin. Path. 81: , Siddiqi, S.H. et al. A new antimicrobial mixture (polymyxin B, amphotericin B, nalidixic acid, trimethoprim and azlocillin) for effective suppression of non-mycobacterial contamination during primary isolation of mycobacteria. Abstract U-35. A.S.M. Meeting, Washington, D.C., Siddiqi, S.H. Studies to further enhance mycobacterial growth in radiometric 7H12 Medium. Abstract U-46. A.S.M. Annual Meeting, Las Vegas, NV, National Committee for Clinical Laboratory Standards Approved Standard M22-A2, Quality assurance for commercially prepared microbiological culture media, 2nd ed., NCCLS, Wayne, PA. 19. Tortoli, E., P. Cinchero, C. Piersimoni, M.T. Simonetti, G. Gesu, and D. Nista Use of BACTEC MGIT 960 for recovery of mycobacteria for clinical specimens: multicenter study. J. Clin Microbiol. 37:

6 6

7 Becton, Dickinson and Company 7 Loveton Circle Sparks, Maryland USA BENEX Limited Bay K 1a/d, Shannon Industrial Estate Shannon, County Clare, Ireland Tel: Fax: ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection. BD, BD Logo, BACTEC, Luer-Lok, MGIT and PANTA are trademarks of Becton, Dickinson and Company BD.