UREA/BUN. Kinetisk UV-analyse til carbamid/carbamid-nitrogen (BUN) Ordreinformation

Transkript

1 Ordreinformation REF CONTENT Indikerer det eller de analyseinstrument(er), hvor kittet/kittene kan anvendes Kinetic UV assay for urea/urea nitrogen ([1] 6 x 66 ml, [2] 6 x 43 ml) Roche/Hitachi MODULAR P Kinetic UV assay for urea/urea nitrogen ([1] 6 x 186 ml) Kinetic UV assay for urea/urea nitrogen ([2] 6 x 118 ml) Kinetic UV assay for urea/urea nitrogen (4 x 470 ml) Kinetic UV assay for urea/urea nitrogen (4 x 293 ml) Roche/Hitachi MODULAR P, MODULAR D Roche/Hitachi MODULAR D Kinetic UV assay for urea/urea nitrogen ([1] 6 x 40 ml, [2] 3 x 49 ml) Roche/Hitachi Calibrator f.a.s. (12 3 ml) Kode Precinorm U (20 5 ml) Kode Precinorm U plus (10 3 ml) Kode Precipath U (20 5 ml) Kode Precipath U plus (10 3 ml) Kode PreciControl ClinChem Multi 1 (20 x 5 ml) Kode PreciControl ClinChem Multi 1 (4 x 5 ml) Kode PreciControl ClinChem Multi 2 (20 x 5 ml) Kode PreciControl ClinChem Multi 2 (4 x 5 ml) Kode Skorstene Nogle instrumenter og nogle kits kan muligvis ikke fås i alle lande. Kontakt Deres lokale Roche Diagnostics repræsentant for yderligere systemapplikationer. Dansk Systeminformation Til Roche/Hitachi MODULAR P/MODULAR D analyseinstrumenter: Urea ACN 418, ACN 419; BUN ACN 421, ACN 427. Anvendelse Enzymatisk in vitro analyse til kvantitativ bestemmelse af carbamid/carbamid-nitrogen i humant serum, plasma og urin på Roche automatiserede klinisk kemiske analyseinstrumenter. Resumé 1,2,3,4,5,6,7,8,9 Bestemmelsen af carbamid er den hyppigst anvendte analyse til evaluering af nyrefunktion. Testen anvendes ofte sammen med bestemmelse af kreatinin til differentialdiagnose af prerenal hyperuræmi (hjerteinsufficiens, væskemangel, øget proteinkatabolisme), renal hyperuræmi (glomerulonephritis, kronisk nephritis, polycystisk nyre, nefrosklerose, tubulær nekrose) og postrenal hyperuræmi (obstruktionsanuri). Carbamid er slutnedbrydningsproduktet ved protein- og aminosyremetabolisme. I proteinkatabolisme nedbrydes proteinerne til aminosyrer og deamineres. Den ammoniak, som dannes ved denne proces, syntetiseres til carbamid i leveren. Dette er den vigtigste kataboliske proces til eliminering af overskydende nitrogen i kroppen. I 1913 introducerede Marshall en analyse baseret på enzymet urease til bestemmelse af carbamid i blodet. Den ammoniak, som blev frigjort fra carbamid af urease, blev målt titrimetrisk. Adskillige andre teknikker er siden blevet anvendt til at måle den producerede ammoniak. Inklusive Berthelot s indophenoltest og ammoniaks reaktion med Nessler s reagens. Efterfølgende modifikationer er offentliggjort af Fawcett og Scott samt af Chaney og Marbach. I 1965 publicerede Talke og Schubert en totalenzymatisk procedure til bestemmelse af carbamid ved hjælp af det koblede enzymsystem urease/glutamatdehydrogenase (GLDH). Roche carbamid/bun-testen er baseret på Talke og Schuberts metode og er optimeret for instrumenter, som tillader kinetiske (fixed time) målinger. Denne metode giver større linearitet og udvidet reagensholdbarhed. Analyseprincip Kinetisk UV-analyse Prøve og tilsætning af R1 Tilsætning af R2 og start af reaktion: Carbamid hydrolyseres fra urease og danner CO 2-3 og ammoniak. 1 / 5 urease carbamid + H 2 O 2 NH CO 3 2- Den dannede ammoniak reagerer derefter med α ketoglutarat og NADH ved tilstedeværelse af GLDH og frembringer glutamat og NAD +. α ketoglutarat + NH NADH GLDH L glutamat + NAD + + H 2 O Absorbansreduktionen, forårsaget af NADH-forbruget, måles kinetisk. Reagenser - arbejdsopløsninger R1 R2 CAPSO a) buffer: 5 mmol/l, ph 9.65; NADH (gær) 0.23 mmol/l; konserveringsmiddel BICIN b) buffer: 1000 mmol/l, ph 7.6; urease (jackbønne) 120 µkat/l; GLDH (bovin lever) 15.0 µkat/l; α ketoglutarat 8.3 mmol/l; konserveringsmiddel a) CAPSO = 3 [cyclohexylamino] 2 hydroxy 1 propansulfonsyre b) BICIN = N,N bis(2 hydroxyethyl) glycin Forholdsregler og advarsler Til in vitro-diagnostisk brug. Udvis de normale forholdsregler, der kræves ved håndtering af alle laboratoriereagenser. Bortskaffelse af alt affaldsmateriale skal ske i overensstemmelse med lokale retningslinjer. Sikkerhedsdatablad kan rekvireres. Reagenshåndtering R1: Klar til brug R2: Klar til brug Dette kit kræver anvendelse af farvekodede skorstene, som reducerer reagensernes optagelse af atmosfærisk NH3. De såkaldte skorstene skal placeres direkte i de(n) rette reagensflaske(r): hvid = R1. Skorstenene kan genanvendes til reagensflasker i det samme kit. For at undgå kontaminering af reagenset med detergent eller fortynding af reagenset med vand må man ikke vaske skorstenene før genbrug. Skorstene anvendes på alle systemer. Opbevaring og holdbarhed Uåbnede kitkomponenter: Indtil udløbsdatoen ved 2 8 C R1: 4 uger åbnet og kølet på instrumentet

2 R2: 4 uger åbnet og kølet på instrumentet Prøvetagning og -forberedelse Benyt kun egnede prøvetagningsrør til prøvetagning og -forberedelse. Kun de nedennævnte prøvematerialer er testet og fundet acceptable. Plasma: Li heparin-, Na heparin- eller K EDTA-plasma. Brug ikke ammoniumheparin. Holdbarhed: 10 7 dage ved C 7 dage ved 2 8 C 1 år ved (-15) (-25) C : opsamles uden brug af konserveringsmidler Holdbarhed: 10 2 dage ved C 7 dage ved 2 8 C 4 uger ved (-15) (-25) C Roche/Hitachi MODULAR analyseinstrumenter: prøver fortyndes automatisk med 0.9 % NaCl eller destilleret/deioniseret vand på instrumentet. Der vil blive taget højde for de respektive fortyndinger ved beregning af resultaterne. Roche/Hitachi-instrumenter uden automatisk prøvefortynding: Fortynd urinprøver manuelt med 0.9 % NaCl eller destilleret/deioniseret vand (f.eks ). Multiplicér resultatet med fortyndingsfaktoren (f.eks. 11). De angivne prøvetyper blev testet med et udvalg af prøvetagningsrør, som var kommercielt tilgængelige på testtidspunktet, dvs. at ikke alle tilgængelige rør fra alle producenter blev testet. Prøvetagningssystemer fra forskellige producenter kan indeholde forskellige materialer, som kan påvirke testresultaterne i visse tilfælde. Hvis prøver analyseres i primærrør (prøvetagningssystemer), skal instruktionerne fra producenten af disse rør følges. Centrifugér prøver indeholdende udfældninger før udførelse af analysen. Leverede materialer Se venligst afsnittet "Reagenser - arbejdsopløsninger" m.h.t. reagenser. Nødvendige (men ikke inkluderede) materialer Se afsnittet Ordreinformation 0.9 % NaCl Almindeligt laboratorieudstyr Analyse Hvis analysen skal udføres optimalt, skal anvisningerne for det aktuelle analyseinstrument følges. Se venligst den aktuelle brugermanual for instrumentspecifikke analyseinstruktioner. Performance af applikationer, der ikke er valideret af Roche, kan ikke garanteres og må defineres af brugeren. Kalibrering Sporbarhed: Denne metode er standardiseret over for SRM c) 909b. /urin S1: 0.9 % NaCl S2: C.f.a.s. (Calibrator for automated systems) Kalibreringshyppighed 2 punktskalibrering anbefales: hver 42. dag efter skift af reagenslot som krævet ifølge kvalitetskontrolprocedurerne c) SRM = Standard Reference Material Kvalitetskontrol /urin Anvend det kontrolmateriale, der er angivet i afsnittet "Ordreinformation", til kvalitetskontrol. Derudover kan andre egnede kontrolmaterialer anvendes. Kontrolintervallerne og -grænserne bør tilpasses det enkelte laboratoriums individuelle krav. De opnåede værdier skal ligge inden for de definerede grænser. Hvert laboratorium bør etablere egne korrektionsprocedurer, som skal anvendes, hvis en værdi falder uden for de definerede grænser. Følg de gældende offentlige regulativer og lokale retningslinjer for kvalitetskontrol. Beregning Instrumentet beregner automatisk analytkoncentrationen i hver prøve. Omregningsfaktorer: mg/dl carbamid x = mmol/l carbamid mmol/l carbamid x = mg/dl carbamid mg/dl carbamid-nitrogen x = mmol/l carbamid mg/dl carbamid x = mg/dl carbamid-nitrogen Hvis der anvendes døgnurin som prøvemateriale, multipliceres resultatet med døgnmængden for at opnå værdier i g eller mmol/døgn. Begrænsninger - interferens Kriterium: Genfinding inden for ± 10 % af initial værdi. /plasma Icterus: 11 Ingen signifikant interferens op til et I-indeks på 60 for konjugeret bilirubin og ukonjugeret bilirubin (bilirubinkoncentration (konjugeret og ukonjugeret) på ca µmol/l eller 60 mg/dl). Hæmolyse: 11 Ingen signifikant interferens op til et H-indeks på 1000 (hæmoglobinkoncentration på ca. 621 µmol/l eller 1000 mg/dl). Lipæmi (Intralipid): 11 Ingen signifikant interferens op til et L-indeks på Der er ringe korrelation mellem L-indekset (svarende til turbiditet) og triglyceridkoncentrationen. Ammoniak, som er produceret i kuvetten under bestemmelse af GLDH, interfererer med carbamid/bun-analysen. Carbamid/BUN-reagenset må derfor ikke anbringes på instrumenterne sammen med reagenser til GLDHanalysen. Endogene ammoniumioner interfererer med carbamid/bunanalysen i urin. Forhøjede koncentrationer kan forekomme under sure betingelser (f.eks. acidose). Lægemidler: Der sås ikke interferens ved terapeutiske koncentrationer ved anvendelse af almindelige lægemiddelpaneler. 12,13 Der må tages forholdsregler for at forhindre ammoniakkontamination af de prøver og kalibratorer, som anvendes i carbamid/carbamid-nitrogen (BUN)- analysen. I meget sjældne tilfælde kan gammopati, især type IgM (Waldenströms makroglobulinæmi), give unøjagtige resultater. 14 Lægemidler: Der sås ikke interferens ved terapeutiske koncentrationer ved anvendelse af almindelige lægemiddelpaneler. 13 Til diagnostiske formål skal resultaterne altid sammenholdes med patientens anamnese, kliniske undersøgelser og andre resultater. NØDVENDIG HANDLING Speciel vaskeprogrammering: Brugen af specielle vasketrin er obligatorisk, når visse testkombinationer udføres på Roche/Hitachi analyseinstrumenter. Se den seneste version af listen over tests med risiko for carry over samt brugermanualen for yderligere vejledning. Hvor det er nødvendigt, skal speciel programmering til vask/forhindring af carry over udføres, før der rapporteres resultater med denne test. Grænser og områder Måleområde /plasma mmol/l (5 400 mg/dl carbamid eller mg/dl carbamidnitrogen) Roche/Hitachi MODULAR P/MODULAR D analyseinstrumenter: Reanalysér prøver med højere koncentrationer ved hjælp af reanalyseringsfunktionen. Prøverne fortyndes 1:1.5 ved hjælp af reanalyseringsfunktionen. Resultater fra prøver fortyndet ved hjælp af reanalyseringsfunktionen multipliceres automatisk med en faktor 1.5. På instrumenter uden reanalyseringsfunktion fortyndes prøverne manuelt med 0.9 % NaCl eller destilleret/deioniseret vand (f.eks ). Multiplicér resultatet med fortyndingsfaktoren (f.eks. 2). 2 / 5

3 Roche/Hitachi 902 analyseinstrument mmol/l ( mg/dl carbamid eller mg/dl carbamidnitrogen) På instrumenter uden reanalyseringsfunktion fortyndes prøverne manuelt med 0.9 % NaCl eller destilleret/deioniseret vand (f.eks ). Multiplicér resultatet med fortyndingsfaktoren (f.eks. 3). Reanalysér prøver med koncentrationer lavere end den tekniske grænse på 66.6 mmol/l (400 mg/dl carbamid eller 186 mg/dl carbamid-nitrogen) ufortyndet. Roche/Hitachi MODULAR P analyseinstrumenter: mmol/l ( mg/dl carbamid eller mg/dl carbamidnitrogen) Reanalysér prøver med højere koncentrationer ved hjælp af reanalyseringsfunktionen. Prøverne fortyndes 1:1.5 ved hjælp af reanalyseringsfunktionen. Resultater fra prøver fortyndet ved hjælp af reanalyseringsfunktionen multipliceres automatisk med en faktor 1.5. Reanalysér prøver med koncentrationer lavere end den tekniske grænse på 66.6 mmol/l (400 mg/dl carbamid eller 186 mg/dl carbamid-nitrogen) ved hjælp af reanalyseringsfunktionen. Prøverne måles ufortyndet. Måleområdets nedre grænse Testens nedre detektionsgrænse /plasma Detektionsgrænse: 0.83 mmol/l (5 mg/dl carbamid eller 2 mg/dl carbamidnitrogen (BUN)) Detektionsgrænse: 1.0 mmol/l (6 mg/dl carbamid eller 2.8 mg/dl carbamidnitrogen (BUN)). Den nedre detektionsgrænse repræsenterer det lavest målbare niveau, som kan skelnes fra nul. Den beregnes som den værdi, der ligger 3 standardafvigelser over den laveste standard (standard SD, repetérbarhed, n = 21). Referenceintervaller (carbamid) /plasma mmol/l ( mg/dl) Døgnurin mmol/døgn ( g/døgn), svarende til mmol/l ( g/dl) Baseret på en gennemsnitlig urinmængde på l/døgn. Referenceintervaller (carbamid-nitrogen (BUN)) /plasma Voksne (18 60 år): mmol/l (6 20 mg/dl) Voksne (60 90 år): mmol/l (8 23 mg/dl) Spædbørn (< 1 år): mmol/l (4 19 mg/dl) Spædbørn/børn: mmol/l (5 18 mg/dl) Døgnurin: mmol/døgn (12 20 g/døgn) carbamid-nitrogen (BUN) svarende til mmol/l ( mg/dl) d) d) Baseret på en gennemsnitlig urinmængde på l/døgn Hvert laboratorium bør undersøge muligheden for at overføre referenceintervallerne til egne patientgrupper og om nødvendigt fastsætte egne referenceintervaller. Testspecifikke performance-data Repræsentative performance-data på instrumenterne angives nedenfor. Resultaterne kan variere fra laboratorium til laboratorium. Præcision Carbamid Humant serum Precinorm U Precipath U Humant serum Humant serum Humant serum Carbamid-nitrogen (BUN) Humant serum Precitrol N Precitrol A (2 afmålte mængder pr. kørsel, 1 kørsel pr. dag, 10 dage). Følgende Human urin Kontrolurin Kontrolurin Metodesammenligning Carbamid En sammenligning af den nye bølgelængdekombination 700/340 nm (y) med den tidligere kombination 405/340 nm (x) ved anvendelse af Roche flydende reagenser til carbamid på Roche/Hitachi 717 analyseinstrumentet gav følgende korrelation (mg/dl carbamid): y = 1.01x y = 1.02x τ = r = 1.00 Antal målte prøver: 85 Prøvekoncentrationerne lå mellem 4.84 og 57.3 mmol/l (29 og 343 mg/dl) carbamid. 3 / 5

4 En sammenligning af den nye bølgelængdekombination 700/340 nm (y) med den tidligere kombination 376/340 nm (x) ved anvendelse af Roche flydende reagenser til carbamid på Roche/Hitachi 911 analyseinstrumentet gav følgende korrelation (mg/dl carbamid): y = 0.99x y = 1.00x τ = r = Antal målte prøver: 53 Prøvekoncentrationerne lå mellem 15.4 og 271 mmol/l (92 og 1625 mg/dl) carbamid. Carbamid nitrogen (BUN) En sammenligning af carbamid nitrogen (BUN)-bestemmelsen ved anvendelse af Roche Diagnostics Germany og Roche Diagnostics Corporation reagens til carbamid nitrogen (BUN) på Roche/Hitachi 917 analyseinstrumentet gav følgende korrelation (mg/dl carbamid nitrogen (BUN)): y = 0.992x y = 0.982x τ = r = 1.00 Antal målte prøver: 51 Prøvekoncentrationerne lå mellem 3.21 og 51.4 mmol/l (9 og 144 mg/dl) carbamid nitrogen (BUN). En sammenligning af carbamid nitrogen (BUN)-bestemmelsen ved anvendelse af Roche Diagnostics Germany og Roche Diagnostics Corporation reagens til carbamid nitrogen (BUN) på Roche/Hitachi 917 analyseinstrumentet gav følgende korrelation (mg/dl carbamid nitrogen (BUN)): y = 0.975x y = 0.958x τ = r = Antal målte prøver: 30 Prøvekoncentrationerne lå mellem 35.0 og 451 mmol/l (98 og 1262 mg/dl) carbamid nitrogen (BUN). Referencer 1 Tietz NW, ed. Fundamentals of Clinical Chemistry Philadelphia, PA: WB Saunders Company 1976; Marshall EK Jr. A new method for the determination of urea in blood. J Biol Chem 1913;15: Berthelot MPE. Repert Chim Appl 1859; Gentzkow CJ. An accurate method for the determination of blood urea nitrogen by direct Nesslerization. J Biol Chem 1942;143: Fawcett JK, Scott JE. A rapid and precise method for the determination of urea. J Clin Path 1960;13: Chaney AL, Marbach EP. Modified reagents for determination of urea and ammonia. Clin Chem 1962;8: Talke H, Schubert GE. Enzymatische Harnstoffbestimmung im Blut und im optischen Test nach Warburg. Klin Wschr 1965;43: Tietz NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. Philadelphia, PA: WB Saunders Company 1995; Neumann U, Ziegenhorn J. Scand J Clin Lab Invest 1977;37:Supplement 147: Abstract Use of Anticoagulants in Diagnostic Laboratory Investigations. WHO Publication WHO/DIL/LAB/99.1 Rev Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation. Clin Chem 1986;32: Breuer J. Report on the Symposium Drug effects in Clinical Chemistry Methods. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996;34: Sonntag O, Scholer A. Drug interference in clinical chemistry: recommendation of drugs and their concentrations to be used in drug interference studies. Ann Clin Biochem 2001;38: Bakker AJ, Mücke M. Gammopathy interference in clinical chemistry assays: mechanisms, detection and prevention. Clin Chem Lab Med 2007;45(9): Löhr B, El-Samalouti V, Junge W, et al. Reference Range Study for Various Parameters on Roche Clinical Chemistry Analyzers. Clin Lab 2009;55: Wu AHB, ed. Tietz Clinical Guide to Laboratory Tests, 4th edition. St. Louis (MO): Saunders Elsevier 2006; Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11): Instrumentindstillinger Brugere af Roche/Hitachi MODULAR analyseinstrumenter: Indlæs applikationsparametrene via barkodearket. Roche/Hitachi 902 analyseinstrument No. <Chemistry> 1 Test Name UREA 2 Assay Code (Mthd) 2 Point Kin. 3 Assay Code (2. Test) 0 4 Reaction Time 5 5 Assay Point Assay Point Assay Point Assay Point Wavelength (SUB) Wavelength (MAIN) Sample Volume R1 Volume R1 Pos R1 Bottle Size Large 15 R2 Volume R2 Pos R2 Bottle Size Large 18 R3 Volume 0 19 R3 Pos R3 Bottle Size Small 21 Calib. Type (Type) Linear 22 Calib. Type (Wght) 0 23 Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc / 5

5 34 Calib. Pos S1 ABS 0 36 K Factor K2 Factor K3 Factor K4 Factor K5 Factor A Factor 0 42 B Factor 0 43 C Factor 0 44 SD Limit Duplicate Limit Sens. Limit S1 Abs. Limit (L) S1 Abs. Limit (H) Abs. Limit Abs. Limit (D/I) Decrease 51 Prozone Limit 0 52 Proz. Limit (Upp/Low) Lower 53 Prozone (Endpoint) Expect. Value (L) Expect. Value (H) Instr. Fact. (a) 1 57 Instr. Fact. (b) 0 58 Key setting Data indtastes af brugeren For yderligere oplysninger henvises til brugermanualen til det pågældende analyseapparat, de aktuelle applikationsark og metodeblade til alle nødvendige komponenter. I dette metodeblad anvendes altid punktum som skilletegn for at markere grænsen mellem hele tal og decimaler i et decimaltal. Skilletegn for tusinder anvendes ikke. Symboler Roche Diagnostics anvender nedenstående tegn og symboler ud over dem, der er angivet i ISO standarden. CONTENT Indhold i pakning Reagens Kalibrator Mængde efter rekonstituering eller blanding Væsentlige tilføjelser eller ændringer er vist ved en streg i margenen. 2013, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D Mannheim 5 / 5