MDNII. ONLINE DAT Methadone II Ordreinformation DAT. Analyseinstrumenter, hvor cobas c pack kan anvendes COBAS INTEGRA 400 plus COBAS INTEGRA 800

Transkript

1 ONLINE Methadone II Ordreinformation ONLINE Methadone II (200 tests) System-ID Preciset Plus I CAL 1-6 (6 5 ml) C.f.a.s. Qualitative Plus (6 5 ml) C.f.a.s. Qualitative Plus Clinical (3 5 ml) Control Set I PreciPos Set I (2 10 ml) PreciNeg Set I (2 10 ml) Control Set Clinical PreciPos Clinical (2 10 ml) PreciNeg Clinical (2 10 ml) Analyseinstrumenter, hvor cobas c pack kan anvendes COBAS INTEGRA 400 plus COBAS INTEGRA 800 Dansk Systeminformation Test MD3S2, test ID til semikvantitativ analyse Test MD3Q2, test ID til kvalitativ analyse Test MD3QC, test ID til kvalitativ analyse ved brug af C.f.a.s. Qualitative Plus Clinical Anvendelse Methadone II () er en in vitro-diagnostisk test til semikvantitativ og kvalitativ påvisning af metadon i human urin ved en cutoff-koncentration på 300 på COBAS INTEGRA systemer. Semikvantitative analyseresultater gør det muligt for laboratorierne at anvende analysen som en del af et kvalitetskontrolprogram. Semikvantitative analyser er beregnet til bestemmelse af en egnet fortynding af prøver til konfirmation ved hjælp af en konfirmatorisk metode som f.eks. gaskromatografi/massespektrometri (GC/MS). Methadone II giver kun et foreløbigt analyseresultat. Der skal anvendes en mere specifik alternativ kemisk metode for at få et konfirmeret analyseresultat. GC/MS er den foretrukne konfirmatoriske metode. 1 Kliniske betragtninger og professionelle vurderinger skal anvendes ved alle analyseresultater for misbrugsstoffer, især når der er tale om foreløbigt positive resultater. Resumé Metadon er et syntetisk difenylpropylamin, der anvendes til afgiftning og midlertidig vedligeholdelse af narkotisk afhængighed samt til behandling af akut og kronisk smerte. Metadon har mange af morfins farmakologiske egenskaber, og dets smertestillende effekt er den samme. Til forskel fra morfin har gentagen indgift af metadon en markant sedativ effekt på grund af ophobning i kroppen. Metadons seponeringssymptomer svarer kvalitativt til morfins, men afviger ved, at de udvikles langsommere, er mindre intense og varer længere. 2 Derfor anvendes metadon til kontrol af narkotisk afhængighed, idet man forhåbentlig kan eliminere behovet for ulovlige opiater. Overdoser af metadon er karakteriseret ved stupor, respirationsdepression, kold og klam hud, hypotension, koma og kredsløbskollaps. 3 Metadon gives intramuskulært til smertestillende formål og oralt til metadonvedligeholdelsesbehandling. Efter indtagelse absorberes stoffet let fra mavetarmkanalen og fordeles til lever, lunge, nyrer, milt, blod og urin. Metadons kumulative virkning kan forklares ved evnen til stærk binding til vævsproteiner. 4 Metadon metaboliseres hovedsageligt ved mono- og di N demethylering. Spontan ringslutning af de herved dannede ustabile forbindelser danner hovedmetabolitterne, 2 ethyliden1,5 dimethyl-3,3 difenylpyrrolidin (EDDP) og 2 ethyl-5 methyl-3,3 difenylpyrrolin (EMDP). Begge hydrolyseres delvist med efterfølgende glucuronidering. 5,6 Hos patienter i vedligeholdelsesbehandling kan udskillelsen af uforandret metadon udgøre 5 til 50 % af dosis. Andelen af udskilt, uforandret metadon påvirkes af urinens ph, mængden af urin, dosis og personens stofskifte. 7,8 Analyseprincip Kinetisk interaktion af mikropartikler i en opløsning (KIMS) 9,10 målt ved ændringer i lystransmissionen. I en prøve uden misbrugsstoffer binder det opløselige misbrugsstofkonjugat sig til antistofbundne mikropartikler, hvilket fører til dannelse af partikelaggregater. I en prøve uden misbrugsstoffer fortsætter aggregatreaktionen, og absorbansen øges. I en urinprøve med det pågældende misbrugsstof konkurrerer dette misbrugsstof med misbrugsstofderivatkonjugatet om det mikropartikelbundne antistof. Antistoffer, som er bundet til det stof, der findes i prøven, er ikke længere til rådighed til dannelse af partikelaggregater, hvorfor den efterfølgende dannelse af partikelkompleks hæmmes. Ved en prøve indeholdende misbrugsstoffer reduceres stigningen i absorbans i forhold til koncentrationen af misbrugsstof i prøven. Indholdet af misbrugsstof i en prøve sammenholdes med den værdi, der er fundet for en kendt cutoffkoncentration af misbrugsstof. 11 Reagenser - arbejdsopløsninger R1 SR Konjugatreagens Konjugeret metadonderivat i buffer med BSA og 0.09 % natriumazid. Antistof/mikropartikelreagens Mikropartikler bundet til monoklonalt metadonantistof (mus) i buffer med BSA og 0.09 % natriumazid. R1 er i position B, og SR er i position C. Forholdsregler og advarsler Vær opmærksom på alle advarsler og forholdsregler i kapitel 1, Indledning, i denne metodemanual. I USA: Kun til den foreskrevne brug. Reagenshåndtering COBAS INTEGRA 400 plus analyseinstrument Før nye (ikke gennembrudte) cobas c packs placeres på instrumentet, skal de mixes i 1 minut på kassettemixeren. Alle cobas c packs i brug skal ligeledes blandes på denne måde én gang om ugen. COBAS INTEGRA 800 analyseinstrument Klar til brug. Reagenset blandes automatisk i 1 minut, efter at cobas c pack er gennembrudt, og i et halvt minut under daglig opstart (Begin of Day (BOD)). Opbevaring og holdbarhed Holdbarhed ved 2 8 C: COBAS INTEGRA 400 plus analyseinstrument I brug på instrumentet ved C COBAS INTEGRA 800 analyseinstrument I brug på instrumentet ved 8 C Se udløbsdatoen på etiketten på cobas c pack 12 uger 12 uger Reagenserne må ikke fryses. Reagenser, som har været frosne, skal kasseres. Prøvetagning og -forberedelse Kun de nedennævnte prøvematerialer er testet og fundet acceptable. 1 / 5

2 ONLINE Methadone II Urin: Opsaml urinprøver i rene glas- eller plastbeholdere. Friske urinprøver kræver ikke speciel håndtering eller forbehandling, men de afpipetterede prøver bør dog ikke indeholde større mængder bundfald. Prøver bør ligge inden for det normale fysiologiske ph-område på 5 8. Additiver eller konserveringsmidler er ikke nødvendige. Det anbefales at opbevare urinprøver ved 2 8 C og analysere dem inden for 5 dage efter opsamling. 12 Ved længere opbevaring anbefales frysning af prøverne. Centrifugér meget uklare prøver før analysering. Forfalskning eller fortynding af prøven kan give fejlagtige resultater. Ved mistanke om forfalskning skal der tages en ny prøve. Kontrol af prøvers validitet er nødvendig for prøver taget i henhold til Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs. 13 Vigtigt: Prøvefortyndinger bør kun anvendes som estimering til GC/MS og er ikke beregnet til patientværdier. Hvis der anvendes fortyndingsprocedurer, skal de valideres. Leverede materialer Se venligst afsnittet "Reagenser - arbejdsopløsninger" m.h.t. reagenser. Analyse Hvis analysen skal udføres optimalt, skal anvisningerne for det aktuelle analyseinstrument følges. Se venligst den aktuelle brugermanual for instrumentspecifikke analyseinstruktioner. Applikation til urin COBAS INTEGRA 400 plus testdefinitioner Semikvantitativ Kvalitativ Målemetode Absorbans Absorbans Abs. beregningsmetode Endpoint Endpoint Reaktionsmetode R1-S-SR R1-S-SR Reaktionsretning Stigende Stigende Reaktionsstart SR SR Bølgelængde A 651 nm 651 nm Måleområde med postdilution Postdilution factor 10 anbefales a) Nej Calc. first/last 35/47 35/47 Enhed a) Ved estimering af koncentrationen til brug ved GC/MS-analyse. Afpipetteringsparametre Diluent (H 2 O) R1 100 µl 10 µl Prøve 2 µl 8 µl SR 35 µl 2 µl Totalvolumen 157 µl COBAS INTEGRA 800 testdefinitioner Semikvantitativ Kvalitativ Målemetode Absorbans Absorbans Abs. beregningsmetode Endpoint Endpoint Reaktionsmetode R1-S-SR R1-S-SR Reaktionsretning Stigende Stigende Reaktionsstart SR SR Bølgelængde A 651 nm 651 nm Måleområde med postdilution Postdilution factor 10 anbefales b) Nej Calc. first/last 45/78 45/78 Enhed b) Ved estimering af koncentrationen til brug ved GC/MS-analyse. Afpipetteringsparametre Diluent (H 2 O) R1 100 µl 10 µl Prøve 2 µl 8 µl SR 35 µl 2 µl Totalvolumen 157 µl Kalibrering Kalibratorer Semikvantitativ applikation MD3S2, Preciset Plus I kalibratorer, CAL 1 5 0, 150, 300, 600, 2000 d,l metadon (S1, system ID ) Kvalitative applikationer MD3Q2, Preciset Plus I kalibratorer, CAL 1 0 eller deioniseret vand og Preciset Plus I kalibratorer, CAL 3 c) eller C.f.a.s. Qualitative Plus 300 (Q1, system ID ) MD3QC, Preciset Plus I eller II d) kalibratorer, CAL 1 0 eller deioniseret vand og C.f.a.s. Qualitative Plus Clinical 300 (Q5, system ID ) Til kvalitative applikationer er cutoff-værdien sat til c) Anvend ikke Preciset Plus I, CAL 3, til kalibrering af analysen Opiates 300/2000 kvalitativ 2000 (test OP2QL, test ID 0 410) d) Preciset Plus II, CAL 1, som normalt ikke er nødvendig til kalibrering af Methadone IIanalysen, kan anvendes som en alternativ 0 -kalibrator til Q5, system ID Kalibreringsmetode Kalibreringsbestemmelse Kalibreringsinterval Semikvantitativ applikation Logit/log 4 Kvalitative applikationer Lineær regression Dobbeltbestemmelse anbefales COBAS INTEGRA 400 plus analyseinstrument: Hvert lot, hver 4. uge, eller som krævet ifølge kvalitetskontrolprocedurerne. COBAS INTEGRA 800 analyseinstrument: Hvert lot, hver 4. uge, eller som krævet ifølge kvalitetskontrolprocedurerne. Der fremstilles en kalibreringskurve ved hjælp af kalibratorerne. Kalibratorerne skal anbringes med den højeste koncentration først og den laveste sidst på CAL/QC-racket. Denne kurve gemmes i hukommelsen i COBAS INTEGRA systemerne og kan kaldes frem igen på et senere tidspunkt. Sporbarhed: Denne metode er standardiseret over for en primær referencemetode (GC/MS). Kvalitetskontrol Kvalitetskontrol Control Set I 2 / 5

3 ONLINE Methadone II Kontrolrækkefølge Kontrol efter kalibrering PreciPos Set I (1P, system ID ) PreciNeg Set I (1N, system ID ) eller Control Set Clinical PreciPos Clinical (CP, system ID ) PreciNeg Clinical (CN, system ID ) Brugerdefineret Anbefales Anvend det kontrolmateriale, der er angivet i afsnittet Ordreinformation, til kvalitetskontrol. Derudover kan andre egnede kontrolmaterialer anvendes. Stofkoncentrationerne i Control Set I og Clinical er verificeret med GC/MS. Kontrolintervallerne og -grænserne bør tilpasses det enkelte laboratoriums individuelle krav. De opnåede værdier skal ligge inden for de definerede grænser. Hvert laboratorium bør etablere egne korrektionsprocedurer, som skal anvendes, hvis en værdi falder uden for de definerede grænser. Følg de gældende offentlige regulativer og lokale retningslinjer for kvalitetskontrol. Resultater COBAS INTEGRA systemerne rapporterer resultater med følgende testmarkeringer: Semikvantitativ resultatrapportering Markering COBAS INTEGRA Værdiområde Ingen markering Negativ < 300 <TEST RNG Negativ < 0 >TEST RNG Positiv > 2000 POS 300 Positiv 300 De ovennævnte værdier er baseret på en cutoff-værdi på 300. Kvalitativ resultatrapportering Markering COBAS INTEGRA Værdiområde Ingen markering Negativ < 1000 <TEST RNG Negativ < 0 >TEST RNG Positiv > 3000 POS 1000 Positiv 1000 De ovennævnte værdier er baseret på tildeling af en værdi på 1000 til cutoff-værdien på 300. Semikvantitativ resultatrapportering Semikvantificeringen af foreløbigt positive resultater bør kun anvendes af laboratorierne til at bestemme en egnet fortynding af prøver til konfirmation ved hjælp af en konfirmatorisk metode som f.eks. GC/MS. Laboratoriet kan også fastsætte kvalitetskontrolprocedurer og vurdere kontrolfunktionen. Bemærk: Ved brug af post-dilution-funktionen (1:10 fortynding) for at sikre, at prøven ikke fortyndes for meget, skal resultatet for fortyndingen være mindst halvdelen af cutoff-værdien for analyten gange 10. Hvis resultatet for fortyndingen ligger under halvdelen af cutoff-værdien gange 10, skal prøven analyseres igen i en mindre fortynding. En fortynding med et resultat tæt på cutoff for analyten giver den mest nøjagtige værdi. For at beregne koncentrationen af den foreløbigt positive prøve skal resultatet multipliceres med fortyndingsfaktoren. Fortyndinger bør kun anvendes som en estimering ved GC/MS. Begrænsninger - interferens Se afsnittet "Testspecifikke performance-data" i dette dokument vedrørende oplysninger om substanser, der er testet med denne analyse. Andre stoffer og/eller faktorer kan muligvis interferere med testen og give fejlagtige resultater (f.eks. tekniske eller proceduremæssige fejl). Et foreløbigt positivt resultat med denne analyse indikerer tilstedeværelse af metadon i urinen. Det afspejler ikke graden af intoksikation. Til diagnostiske formål skal resultaterne altid sammenholdes med patientens anamnese, kliniske undersøgelser og andre resultater. Interfererende stoffer blev tilsat til stoffri urin i en koncentration, der var den dobbelte af den nedenfor angivne. Disse prøver blev derefter beriget med en metadon-stamopløsning på 600 til 300. Prøverne blev analyseret, og følgende resultater blev opnået: Substans Testet koncentration % metadongenfinding Acetone 1 % 98 Askorbinsyre 1.5 % 100 Bilirubin 0.25 mg/ml 86 Kreatinin 5 mg/ml 100 Ethanol 1 % 99 Glukose 2 % 101 Hæmoglobin 0.1 g/l 101 Hæmoglobin 1 g/l 98 Hæmoglobin 7.5 g/l 100 Humant albumin % 101 Humant albumin 0.05 % 103 Humant albumin 0.5 % 101 Oxalsyre 2 mg/ml 102 Natriumklorid 0.5 M 97 Natriumklorid 1 M 95 Carbamid 6 % 103 NØDVENDIG HANDLING Speciel vaskeprogrammering: Brugen af specielle vasketrin er obligatorisk, når visse testkombinationer udføres på COBAS INTEGRA analyseinstrumenter. For yderligere vejledning og for den seneste version af listen over ekstra vaskecykler henvises til metodebladet til CLEAN. Hvor det er nødvendigt, skal speciel programmering til vask/forhindring af carry-over udføres, før der rapporteres resultater med denne test. Testspecifikke performance-data Repræsentative performance-data på COBAS INTEGRA analyseinstrumenter angives nedenfor. Resultaterne kan variere fra laboratorium til laboratorium. Præcision Præcisionen blev bestemt i en intern protokol ved at udføre en række metadon-kalibratorer og -kontroller på 20 analyser én gang om dagen i 5 dage. Der blev opnået nedenstående resultater på et COBAS INTEGRA 700 analyseinstrument. Semikvantitativ præcision Repetérbarhed Middel SD Niveau 1 (225 ) Niveau 2 (300 ) Niveau 3 (375 ) Intermediær præcision Middel SD Niveau 1 (225 ) Niveau 2 (300 ) Niveau 3 (375 ) CV % CV % 3 / 5

4 ONLINE Methadone II Kvalitativ præcision Cutoff (x) Antal testet Korrekte resultater Konfidensniveau 0.75x > 95 % negativt resultat 1.25x > 95 % positivt resultat Testens nedre detektionsgrænse 15 Den nedre detektionsgrænse repræsenterer det lavest målbare niveau, som kan skelnes fra nul. Det beregnes som den værdi, som ligger 2 standardafvigelser over nulkalibratoren (nulkalibrator + 2 SD, repetérbarhed, n = 21). Akkuratesse 100 urinprøver fra et klinisk laboratorium, hvor de blev screenet negative for et panel af misbrugsstoffer med en anden teknologi, blev analyseret for metadon på et COBAS INTEGRA 700 analyseinstrument. Alle 100 kliniske prøver var negative ved en cutoff på urinprøver fra et klinisk laboratorium, hvor de blev screenet foreløbigt positive med et kommercielt tilgængeligt enzymimmunoassay og konfirmeret positive for metadon med GC/MS, blev ligeledes analyseret på et COBAS INTEGRA 700 analyseinstrument. Alle 55 prøver var positive med COBAS INTEGRA Methadone II-analysen ved en cutoff på 300. Derudover blev 10 prøver fortyndet til en metadonkoncentration på % af cutoff-koncentrationen, og 10 prøver blev fortyndet til en metadonkoncentration på % af cutoff-koncentrationen. Data fra ovennævnte studier, som lå i området omkring cutoff, blev sammenholdt med data fra de fortyndede positive urinprøver. Følgende resultater blev opnået med Methadone II på et COBAS INTEGRA 700 analyseinstrument sammenlignet med GC/MS-værdierne: Methadone II klinisk korrelation (cutoff = 300 ) COBAS INTEGRA 700 analyseinstrument Negative prøver GC/MS-værdier () Nær cutoff Analytisk specificitet Specificiteten af COBAS INTEGRA Methadone II-analysen for strukturelt lignende forbindelser blev bestemt ved at fremstille hæmningskurver for hver af de nævnte forbindelser og bestemme den omtrentlige koncentration af hver forbindelse, der svarer til analysereaktiviteten af cutoff på 300 for metadonanalysen. Det er vigtigt, at resultater af klientprøver indeholdende strukturelt beslægtede forbindelser med en krydsreaktivitet på mere end 0.5 % fortolkes med forsigtighed. Forbindelse e) Omtrentlig konc. i svarende til 300 metadon Omtrentlig procent krydsreaktivitet Hydroxymetadon Cyamemazin Methotrimeprazin (levomepromazin) Vortioxetin Lu AA Thiothixen Chlorpromazin Promazin Clomipramin Thioridazin Chlorprothixen Forbindelse e) Omtrentlig konc. i svarende til 300 metadon Omtrentlig procent krydsreaktivitet Promethazin l-α-metadol Trimipramin Cyclobenzaprin Orphenadrin l-α-acetylmetadol HCl (LAAM) Diphenhydramin Perphenazin Meperidin Imipramin Cyproheptadin Doxepin e) Indrykkede forbindelser er metabolitter af det foranstående stof Desuden blev følgende forbindelser testet i en koncentration på i en human urinpool. Krydsreaktiviteten var under 0.05 %: Amitriptylin Benzphetamin Carbamazepin Chlorpheniramin Desipramin Dextromethorphan Disopyramid Doxylamin EDDP EMDP Fluoxetin Maprotilin Mianserin Nordoxepin Nortriptylin d-propoxyfen Protriptylin d,l-verapamil Prøver fra brugere af Seroquel (quetiapinfumarat) er screenet positive for metadon. Stofinterferens Følgende forbindelser blev tilsat til afmålte mængder af en pool af normal human urin i en koncentration på Ingen af disse forbindelser gav værdier med analysen, som var lig med eller større end 0.2 % krydsreaktivitet. Acetaminophen Acetylsalicylsyre Aminopyrin Amobarbital d-amfetamin l-amfetamin Ampicillin Askorbinsyre Aspartam Atropin Benzocain Benzoylecgonin (kokainmetabolit) Butabarbital Koffein Calciumhypochlorit Chlordiazepoxid Lidocain LSD MDA MDMA Melanin d-methamfetamin l-methamfetamin Metakvalon Methylphenidat Methyprylon Morfinsulfat Naloxon Naltrexon Naproxen Niacinamid Nikotin Nordiazepam 4 / 5

5 ONLINE Methadone II Chloroquin Kokain Codein Kotinin Diazepam Diphenylhydantoin Dopamin Ecgonin Ecgoninmethylester Ephedrin d-ephedrin l-ephedrin Epinephrin Erythromycin Østriol Fenoprofen Furosemid Gentisinsyre Glutethimid Guaiacolglycerolether Haloperidol Hydrochlorthiazid Ibuprofen Isoproterenol Ketamin Norethindron l-norpseudoephedrin Oxazepam Penicillin G Pentobarbital β-phenethylamin Phencyclidin Phenobarbital Phenothiazin Phentermin Phenylbutazon Phenylpropanolamin d-fenylpropanolamin Procain d-pseudoephedrin l-pseudoephedrin Chinidin Kinin Secobarbital Sulindac Tetracyclin Δ 9 THC-9-carboxylsyre Tetrahydrozolin Trifluoperazin Tyramin Krydsreaktiviteten for tramadol i en koncentration på var 0.3 %. Krydsreaktiviteten for ofloxacin i en koncentration på blev analyseret med Methadone II. Det opnåede resultat var 0.2 %. 10 Armbruster DA, Schwarzhoff RH, Hubster EC, et al. Enzyme immunoassay, kinetic microparticle immunoassay, radioimmunoassay, and fluorescence polarization immunoassay compared for drugs-ofabuse screening. Clin Chem 1993;39: Bates M, Brandle J, Casaretto E, et al. An Abuscreen immunoassay for opiates in urine on the COBAS MIRA automated analyzer. Amer Acad Forensic Sci. Abstract 1991;37(6): Toxicology and Drug Testing in the Clinical Laboratory; Approved Guideline. 2nd ed. (C52-A2). Clinical and Laboratory Standards Institute 2007;27: Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs. Fed Regist 2008 Nov 25;73: I dette metodeblad anvendes altid punktum som skilletegn for at markere grænsen mellem hele tal og decimaler i et decimaltal. Skilletegn for tusinder anvendes ikke. Symboler Roche Diagnostics anvender nedenstående tegn og symboler ud over dem, der er angivet i ISO standarden: GTIN Indhold i pakning Mængde efter rekonstituering eller blanding Global Trade Item Number Tilføjelser, sletninger eller ændringer er vist ved en streg i margenen. 2016, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D Mannheim Distribution i USA af: Roche Diagnostics, Indianpolis, IN US Customer Technical Support Eventuelle modifikationer af instrumentet beskrevet heri skal valideres af laboratoriet. Referencer 1 Karch SB, ed. Drug Abuse Handbook. Boca Raton, FL: CRC Press LLC Council Reports: Treatment of morphine-type dependence by withdrawal methods. JAMA 1972;219(12): Smialek JE, Monforte JR, Aronow R, et al. Methadone deaths in children: A continuing problem JAMA 1977;238(23): Garriott JC, Sterner WQ, Mason MF. Toxicologic findings in six fatalities involving methadone. Clin Toxicol 1973;6: Sullivan HR, Due SL, McMahon RE. The identification of three new metabolites of methadone in man and in the rat. J Am Chem Soc 1972;94(11): Baselt RC, Bickelt MH. Biliary excretion of methadone by the rat: identification of a para-hydroxylated major metabolite. Biochem Pharm 1973;22: Baselt RC, Casarett LJ. Urinary excretion of methadone in man. Clin Pharmacol Ther 1972 Jan-Feb;13(1): Bellward GD, Warren PM, Howald W, et al. Methadone maintenance: Effect of urinary ph on renal clearance in chronic high and low doses. Clin Pharmacol Ther 1977;22(1): Armbruster DA, Schwarzhoff RH, Pierce BL, et al. Method comparison of EMIT II and ONLINE with RIA for drug screening. J Forensic Sci 1993;38: / 5