B I O K E M I REGULATORISKE MEKANISMER I ENERGISTOFSKIFTET

Størrelse: px
Starte visningen fra side:

Download "B I O K E M I REGULATORISKE MEKANISMER I ENERGISTOFSKIFTET"

Transkript

1 1 B I O K E M I Vejledning til biokemiøvelse i organkursus 5 på 5. semester (2. udgave forår 2003) REGULATORISKE MEKANISMER I ENERGISTOFSKIFTET 1. Målinger af metabolitter i muskelbiopsier fra rotter. 2. Non-invasive 31 P-NMR spektroskopiske målinger af ATP omsætning i muskler på forsøgspersoner. Bjørn Quistorff, Susanne Johannessen Institut for Medicinsk Biokemi & Genetik Det Sundhedsvidenskabelige Fakultet Panum Instituttet Københavns Universitet

2 2 INDHOLD Øvelsens opbygning og formål 3 1. dag: måling af metabolitkoncentrationer i biopsier fra muskelvæv dag: NMR spektroskopiske målinger 14 Rapport 17 Appendix 1 Beregningsvejledning for NMR data 19 Appendix 2 Oversigtsartikel: 31 P magnetic resonance spectroscopy in vivo in a medical context 22

3 3 ØVELSENS OPBYGNING OG INDHOLD Øvelsen belyser energistofskiftet i muskler, og demonstrerer samtidig nogle teknikker, der er generelt anvendelige ved stofskifteundersøgelser in vivo. Det ene af øvelsens momenter (måling af metabolitkoncentrationer i væv) udføres på rotter, mens det andet, phosphor kernemagnetiskresonans-spektroskopi ( 31 PMRS) udføres med de studerende som forsøgspersoner. NMR undersøgelsesmetoden anvendes i udstrakt grad på hospitalerne (hvor den betegnes magnetisk resonans, (MR)). Såfremt nogle simple sikkerhedsforskrifter overholdes, er det en målemetode helt uden bivirkninger eller helbredsrisici. Øvelsen strækker sig over 2 øvelsesdage à hhv. 4 og 3 timer. Den ene dag udføres metabolitmålinger på muskelbiopsier, den anden dag udføres NMR spektroskopiske målinger. Herudover er der 2 x 1 times forberedelse, hvor øvelsens principper og formål gennemgås samt 1 times efterbehandling af de opnåede data. Hvert hold á 24 studerende opdeles i 2 grupper á 12 studenter. Til hver gruppe er knyttet én lærer. Rapporten afleveres senest 1 uge efter efterbehandlingstimen. Den enkelte gruppe må gerne aflevere én samlet rapport.

4 4 1. dag: MÅLING AF METABOLITKONCENTRATIONER I MUSKELVÆVSBIOPSIER. Baggrund og teori: Den levende tilstand er karakteriseret ved et konstant energiforbrug til opretholdelse af iongradienter og elektriske potentialer over membraner. Hertil kommer en række cellulære funktioner såsom muskelkontraktion, fordøjelses- og sekretionsprocesser samt syntese af makromolekyler, f.eks. proteiner og glycogen. Alle disse processer betjener sig af ATP som energikilde. ATP leverer den nødvendige energi ved spaltning af den terminale syreanhydridbinding under dannelse af ADP og uorganisk fosfat, P i. I muskler, hjerte og hjerne findes desuden den energirige forbindelse fosfocreatin, PCr, som i en reaktion katalyseret af creatinkinase, CK, kan fosforylere ADP til ATP under samtidig dannelse af creatin, Cr: PCr + ADP + H + ATP + Cr Aktiviteten af creatinkinase er høj, specielt i skeletmuskler, og processen antages at være i eller nær ligevægt under fysiologiske omstændigheder. Derved kommer fosfocreatin til at fungere som en "energibuffer" under muskelarbejde. Et kortvarigt (sekunder), hårdt muskelarbejde bliver hovedsageligt udført med PCr som energikilde. I hvile er PCr koncentrationen så høj som mm, svarende til en fri energi på ca. 1.5 kj/kg muskel. De enkelte vævs iltforbrug via oxidativ fosforylering reguleres svarende til behovet for ATP. På isolerede mitochondrier kan det vises, at ADP koncentrationen er den afgørende regulator af iltforbrugets størrelse, dvs. spaltningshastigheden af ATP til ADP styrer iltforbruget. I det intakte væv er forholdene imidlertid mere komplicerede og på visse punkter endnu ikke fuldt afklarede. ADP synes dog at være den væsentligste regulator for iltforbruget i skeletmuskulatur (steady-state aerobt arbejde), hvorimod koncentrationen af uorganisk fosfat i leveren spiller en langt større rolle end ADP. For hjertet tyder den nyeste forskning, primært baseret på anvendelse af in vivo NMR spektroskopisk teknik, på at tilbuddet af reduktionsækvivalenter (NADH) til respirationskæden er den væsentligste regulerende faktor for dette vævs iltforbrug. Det er derfor vigtigt at kunne måle metabolitkoncentrationer in vivo nøjagtigt, specielt koncentrationen af de ovenfor omtalte energirige fosfatforbindelser og uorganisk fosfat. Imidlertid vil selv kortvarig hypoxi medføre betydelige ændringer i koncentrationen af disse stoffer, og man må derfor tage særlige forholdsregler for at opnå måleresultater, som afspejler den "sande" in vivo situation og ikke er ændret af prøveudtagningen og den efterfølgende prøvebehandling. Klipper man f.eks. et stykke lever ud og lader det ligge ved stuetemperatur, vil koncentrationen af ATP falde ca. 50% indenfor sekunder. Det drejer sig derfor om at få inaktiveret de enzymatiske processer som forbruger ATP så hurtigt som muligt efter at vævsprøven (biopsien) er udtaget. En meget anvendt metode hertil er lynfrysning af den udtagne biopsi med efterfølgende syre- eller basefældning af proteiner og deraf følgende inaktivering af metaboliske processer samt ekstraktion af lavmolekylære, syre- eller baseopløselige metabolitter. Vi har i denne øvelse valgt at demonstrere måling af ATP, ADP, AMP og PCr målt på muskelbiopsier udtaget fra rotte.

5 5 FREMGANGSMÅDE Laboranten udfører biopsitagningen som demonstration for hele holdet. Studenterne vejer og ekstraherer de frosne biopsier som beskrevet i vejledningen med følgende arbejdsfordeling: Gruppe 1 arbejder med biopsierne "0-min" og 5 min Gruppe 2 med biopsierne "2-min" og 15 min. Hver gruppe opdeles i 6 delhold (hold A-F) á 2 studenter. Hvert delhold måler på alle 4 biopsier. Delhold A, C og E måler på ADP/AMP Delhold B, D og F måler på ATP/PCr Målingerne af ADP/AMP og ATP/PCr foregår på Shimadzu spektrofotometrene. To delhold arbejder ved samme instrument og koordinerer målingerne (forklares af lærer eller laborant). Læs den fremlagte instruktion for instrumenterne før målingerne begyndes. Biopsiudtagning, vejning og ekstraktion Biopsiudtagningen udføres af laboranten som demonstration for hele holdet, mens vejning og ekstraktionen udføres af studenterne. Forsøgene udføres på Wistar rotter, hvor der tages biopsier (vævsprøver) fra muskel (begge m. quadriceps femoris). Den bedøvede rotte anbringes på "operationsbordet" og lårmusklen blottes, idet man sørger for ikke at klippe store blodkar over. Musklen klippes fri, og en del af musklen ( muskel-0 ) fryses så hurtigt som muligt ved presning mellem to aluminium blokke, kølet i flydende kvælstof til -196 C (freeze-clamping). Det frosne væv anbringes i flydende kvælstof i en isolerende flamingoskumbakke. Proceduren gentages efter 2, 5 og 15 min ( muskel-2, muskel-5 og muskel-15 ). Studenterne overtager herefter det videre arbejde. De frosne vævsstykker vejes på en grovvægt (2 decimaler), idet man forinden har tareret den lille flamingoskumbakke, som de frosne vævsstykker anbringes i under vejningen. Efter vejningen lægges vævsstykkerne øjeblikkeligt tilbage i flydende kvælstof.

6 6 Næste trin er syreekstraktion af vævet med det formål at fælde proteiner (stoppe enzymatiske processer) og ekstrahere metabolitter fra vævet. Inden ekstraktionen påbegyndes afpipetteres den beregnede mængde 2M perchlorsyre (PCA) i mærkede centrifugeglas (50 ml plastrør), således at der opnås et 10% ekstrakt, f.eks. 1 gram væv plus 9 ml PCA. Glassene holdes på is. Vævsstykket pulveriseres i en porcelænsmorter, som ligeledes er kølet i flydende kvælstof. Ved brug af ske og tragt (kølet i flydende kvælstof) overføres vævspulveret så hurtigt som muligt til centrifugeglasset med iskold 2M PCA. Centrifugeglasset er anbragt i isbakke under denne proces. Vævspulveret homogeniseres straks med UltraThurax RXT25 ved rpm i 3 x 20 sekunder med 15 sekunders pause. Under hele homogeniseringen holdes centrifugeglasset i isvand. Homogenatet centrifugeres herefter ved 4 C, rpm i 10 min i Beckman centrifuge. Prøverne fra begge grupper skal med i samme centrifugering. Efter centrifugering afpipetteres 6.00 ml supernatant i mærket 50 ml centrifugeglas, anbragt på is. PCA-ekstraktet neutraliseres ved tilsætning af 7.80 ml iskold 1.33 M K0H med 0.05 M TEA. Bland grundigt på Vortex-mixer og kontrollér med ph-papir at ph er ca. 7. Hvis dette ikke er tilfældet, skal der neutraliseres yderligere. Notér volumen af det i alt tilsatte PCA og/eller KOH. Glassene henstår herefter på is i 5 min før de centrifugeres ved 4 C, rpm i 10 min i Beckman centrifuge. Begge grupper centrifugerer samtidigt. Der udtages 12 x 1 ml supernatant i udleverede, mærkede 3 ml plastrør, som anbringes på isbakke. Hvert delhold får ét glas af hvert vævsekstrakt.

7 7 Metabolitmålinger: ADP/AMP ASSAY Princip: Følgende reaktioner indgår i assayet AMP + ATP ADP + PEP + H + Pyruvat + NADH + H + adenylatkinase,ak pyruvatkinase,pk 2ADP ATP + Pyruvat lactatdehydrogenase,ldh + Lactat + NAD Reaktionsblandingen indeholder LDH før start af målingerne. Ved efterfølgende tilsætning af PK måles ADP, og endelig ved tilsætning af AK måles AMP. Fremgangsmåde: I 6 semimikrocuvetter afpipetteres følgende: 800 µl assay-mix* 300 µl prøve (hhv. muskel-0, muskel-2, muskel-5, muskel-15, standard (0.1/0.1 mm ADP/AMP) og blind (destilleret vand)) Cuvetterne anbringes i spektrofotometeret og indholdet blandes med dem fremlagte omrører (se den fremlagte vejledning!). Absorbansen A 1 aflæses for alle cuvetter, herefter tilsættes 10 µl PK, 0.5 mg/ml Der omrøres igen og efter 20 min henstand i stativ ved stuetemperatur aflæses absorbansen A 2. Herefter tilsættes 10 µl AK, 0.25 mg/ml Der omrøres igen og efter 30 min henstand i stativ ved stuetemperatur aflæses Absorbansen A 3. * Assay-mix, som er fremstillet af laboranten, indeholder en blanding af reaktanter som angivet i reagenslisten. Fordelen ved at anvende en assay-mix er, at man undgår at skulle afpipettere de

8 8 enkelte komponenter hver gang i hver enkelt cuvette. Beregninger: Udregning af ADP og AMP koncentrationerne sker på basis af de målte absorbansdifferencer (A 1 - A 2 ) og (A 2 - A 3 ), korrigeret for blindcuvettens absorbansdifferencer. Absorptionskoefficienten for NADH er 6300 M -1 cm -1. De fundne koncentrationer korrigeres herefter for de i forbindelse med vævsekstraktionen foretagne fortyndinger. Reagenser: Assay-mix med 100 mm Triethanolamin buffer, ph mm KCl 20 mm MgS0 4 1 mm Phosphoenolpyruvat 0.22 mm NADH 0.05 mm ATP 1 U/ml Lactatdehydrogenase

9 9 ATP/PHOSPHOCREATIN ASSAY Princip: Følgende reaktioner indgår i assayet PCr + ADP + H + ATP + Glucose creatinkinase,ck hexokinase,hk Creatin + ATP ADP + Glucose-6-P Glucose-6-P + NADP + glu cose 6 PDH,G6PDH + 6-P-Gluconolacton + NADPH + H Reaktionsblandingen indeholder G6PDH før start af målingerne. Ved efterfølgende tilsætning af HK måles ATP, og endelig ved tilsætning af CK måles phosphocreatin (PCr). Fremgangsmåde: NB! Inden afpipettering fortyndes 0.5 ml af hvert muskelekstrakt 1:1 med vand. I 6 semimikrocuvetter afpipetteres: 650 µl Tris-buffer, 50 mm, ph µl DTE (dithioerythritol), 20 mm 25 µl MgCl 2, 40 mm 25 µl Glucose, 40 mm 25 µl NADP +, 20 mm 250 µl prøve (hhv. fortyndet muskel-0, muskel-2, muskel-5, muskel-15, standard (0.2/0.2 mm ATP/PCr), og blind (destilleret vand)) 10 µl G6PDH, mg/ml Cuvetterne anbringes i spektrofotometeret og indholdet blandes med dem fremlagte omrører (se den fremlagte vejledning!). Absorbansen A 1 aflæses for alle cuvetter, og der tilsættes 10 µl Hexokinase, 0.2 mg/ml Der omrøres igen og efter 15 min henstand i stativ ved stuetemperatur aflæses Absorbansen A 2. Herefter tilsættes 50 µl Creatinkinase (1 mg/ml)/adp (10 mm)

10 10 Der omrøres igen, og efter 30 min henstand i stativ ved stuetemperatur aflæses Absorbansen A 3. Beregninger: Udregning af ATP og PCr koncentrationerne sker på basis af de målte absorbansdifferencer (A 2 - A 1 ) og (A 3 - A 2 ), korrigeret for blindværdiens absorbansdifferencer. Den molære absorptionskoefficient for NADPH er 6300 M -1 cm -1. De fundne koncentrationer korrigeres herefter for de i forbindelse med vævsekstraktionen foretagne fortyndinger.

11 11 Resultatskemaer Følgende skema anvendes til resultatoptegning under forsøget: Biopsi Muskel-0 Muskel-2 Muskel-5 Muskel-15 Vægt, g ml PCA ml KOH til 6.00 ml sup. Fortyndingsfaktorer ATP-PCr Muskel-0 Muskel-2 Muskel 5 Muskel-15 Standard Blind A 1 A 2 A 3 A 2 -A 1 A 3 -A 2 (A 2 -A 1 )-blind* (A 3 -A 2 )-blind* ADP-AMP A 1 A 2 A 3 A 1 -A 2 A 2 -A 3 (A 1 -A 2 )-blind* (A 2 -A 3 )-blind* * hhv. (A 2 -A 1 ), (A 3 -A 2 ), (A 1 -A 2 ) og (A 2 -A 3 ) for blindprøven.

12 12 RESULTATSKEMA, In vivo metabolitter Delhold Målte metabolitkoncentrationer, µmol/g våd vægt. Muskel 0 min Muskel 2 min Muskel 5 min Muskel 15 min ATP PCr ADP AMP

13 13 REFERENCER Dawson, M.J. (1982) Quantitative analysis of metabolite levels in normal human subjects by 31-P-MRS. Biosci. Rep. 2, Hems, D.A. & Brosnan, J.T. (1970) Effects of ischemia on content of metabolites in rat liver and kidney. Biochem. J. 120, Kiviluoma, K.T. et al. (1988) Acetate-induced changes in cardiac energy metabolism and hemodynamics in the rat. Basic Res. Cardiol. 83, Lowry, O.H. & Passonneau, J.V. (1972) A Flexible System of Enzymatic Analysis. Academic Press, New York. Quistorff, B., Poulsen, H. & Chance, B. (1980) Simple technique for freeze-clamping. Anal. Biochem. 108,

14 14 2. dag: NMR spektroskopiske målinger: Øvelsen belyser en række regulationsmekanismer i energistofskiftet og viser specielt koblingen mellem muskelkontraktion og ATP omsætning, hvor ATP dannelsen sker på 3 måder: ved PCr nedbrydning, ved glycogen (og glucose) nedbrydning til pyruvat eller lactat og ved komplet oxidation af glucose til CO 2 og H 2 O. Der henvises i øvrigt til lærebogen for en uddybende beskrivelse af energistofskiftet. Baggrund, teori: Den NMR spektroskopiske metode udnytter det forhold, at visse atomkerner i et stærkt magnetfelt kan bringes til at absorbere radiofrekvens (RF) energi ved en specifik bølgelængde (den såkaldte resonansfrekvens). For at en atomkerne skal kunne absorbere RF energi er det nødvendigt at den besidder et magnetisk spin. Det udelukker kerner hvor både massetal og atom nr er et lige tal (f.eks. 12 C og 16 O). De biologisk vigtige kerner, som har et NMR signal, er 1 H, (protonen), 13 C, 19 F, 17 O og 31 P. Ved et magnetfelt på 2.35 Tesla (svarende til Gauss; Jordens magnetfelt er ved jordoverfladen ca 0.5 Gauss) er resonansfrekvenserne for ovennævnte kerner henholdsvis 100, 25.1, 94.1, 13.6 og 40.5 MHz. I øvelsen vil målingerne i en magnet med en styrke på 2.9 Tesla og der måles på fosfor ( 31 P, så man kan se fosforholdige metabolitter som ATP, PCr og Pi). Målefrekvensen for 31 P ved 2.9 Tesla er 49.3 MHz. I praksis placerer forsøgspersonen sin arm eller sit ben i magneten. Målingen foregår ved at der anbringes en antenne (både sender og modtager) på muskeloverfladen og ved at sende et RF signal med frekvensen 49.3 MHz vil alle fosforkerner i området omkring antennen absorbere RF energi. I løbet af nogle sekunder relakserer kernerne tilbage til ligevægt og udsender herved et signal svarende til den absorberede RF. Dette signal opfanges i antennen, forstærkes og omformes, således at man kan se signalets enkelte frekvens komponenter, som vist nedenfor i Fig. 1. Alle fosforatomer har naturligvis nøjagtig samme resonansfrekvens, men da de hver især er placeret i forskellige molekylære strukturer vil intramolekylære forhold, såsom elektronkonfigurationen i molekylet, bevirke at det enkelte fosforatom reelt udsættes for lidt forskellige magnetfelter. Da resonansfrekvensen er proportional med magnetfeltstyrke, vil fosforatomerne have tilsvarende små forskelle i resonansfrekvens og et stof som ATP vil af denne grund vise tre og ikke kun én fosforresonanser (se Fig. 1 nedenfor). Denne effekt kaldes chemical shift og er basis for at NMR teknikken kan anvendes til med stor præcision at identificere forskellige kemiske strukturer. Når man afbilder et spektrum af en prøve vil enheden på x-aksen være frekvens. Som vist nedenfor vil de tre fosforatomer i ATP (α, β og γ) være separeret med ca 5 ppm for (α-γ) og ca 8 ppm for (α - β). Ppm står for parts per million og angives i forhold til centerfrekvensen for optagelsen af spektret (her 50 MHz), d.v.s. 1 ppm = 50 Hz.

15 15 Figur 1: 31PMRS spektrum af human skeletmuskulatur, A: i hvile B: I hvile og under submaximal kontraktion.

16 16 Som det fremgår af figurerne observeres i et muskelspektrum in vivo signaler fra følgende komponenter, nævnt fra venstre mod højre i spektret: Fosfomonoestre (PME, såsom AMP, IMP, glucose-6- P og lignende), uorganisk fosfat, en stor PCr top, samt tre toppe for ATP svarende til de tre fosforatomer i ATP molekylet. I Fig. 1B ses de forandringer, som sker når musklen arbejder. Der ses en stor stigning i P i og et tilsvarende fald i PCr, mens ATP signalet er uændret. Herudover ses en lille stigning i PME, svarende til en stigning i specielt glucose-6-p koncentrationen. Det praktiske NMR eksperiment, fremgangsmåde: Ved dette eksperiment ønsker vi at bestemme den maximale ATP omsætning i musklen både ved aerobe og ved anaerobe processer. Aerob ATP produktion sker ved oxidativ fosforylering i mitochondrierne mens anaerob ATP produktion foregår dels fra PCr (PCr + ADP! Cr + ATP) dels ved glycogenolyse til lactat (glycogen + 3 ADP + 3 Pi! 2 lactat + 3 ATP). Der udføres en maximal kontraktion med to muskelgrupper, dels underarmens flexorgruppe, dels tibialis anterior under optagelse af NMR spektra for hver 10 sek. Samtidig registreres kontraktionskraft. Kontraktionen afsluttes efter 60 sek og restitutionsprocessen i musklen følges over 10 min. Detaljerne omkring selve målingen gives der instruktion om i forbindelse med øvelsen. Den ene gruppe udfører spektroskopi mens den anden bliver instrueret i hvordan spektrene fortolkes og hvordan selve beregningerne af ATP omsætning kan gennemføres. Udregninger til NMR-øvelsen: I øvelsen er opnået følgende resultater, som skal anvendes ved rapportudarbejdelsen: 1. Et hvilespektrum 2. Et plot over udviklingen af PCr koncentrationen som funktion af tiden under forsøget, d.v.s. under hvile (konstant), arbejde (faldende) og restitution (stigende til hvile niveau). 3. Herudover anvendes bestemmelsen af V O2 max fra fysiologiøvelsen i OK5. Ad 1. Udregn følgende parametre (for detaljer se appendix 1) Ad 2) a) PCr/ ATP ratio i hvile (arealerne af PCr og γ-atp resonanserne er anført på spektret). b) [PCr] i hvile. c) Intracellulært ph i hvile. d) Den fri ADP koncentration i hvile. Udregn a) Den fri ADP koncentration til tidspunktet hvor muskelarbejdet ophører. b) Den maximale aerobe ATP syntesehastighed, V Max (µmol ATP/g s), ud fra PCr koncentrations forløbet i restitutionsfasen under antagelse af Michaelis-Menten kinetik, hvor v = den initiale værdi af d PCr/dt (anført på PCr plottet) og K m = 23 µm. c) Konstruer en graf over sammenhængen mellem den NMR bestemte og den 'cykel-

17 17 ergometer' bestemte V max (for sidstnævnte se nedenfor). Grafen konstrueres på basis af alle holdets data. Ad 3) Omregn alle resultater til µmol ATP produktion/ gram aktiv muskelmassse / s Den aktive muskelmasse under ergometer-cykelarbejde antages at være 15% af kropsvægten. Rapport: Der udarbejdes en samlet rapport for de to del-øvelser, metabolitmålinger og NMR bestemmelse af ATP turnover, hvor de opnåede resultater beskrives, set i forhold til de opstillede mål for øvelsen. Hver gruppe må gerne aflevere én samlet rapport. Øvelsen om metabolitmålinger på muskelbiopsier havde følgende mål: 1. At demonstrere en meget anvendt metode til at skaffe information om metabolitkoncentrationer i det levende væv. 2. At illustrere de faktisk forekommende koncentrationer af de centrale metabolitter i energistofskiftet. 3. At vise effekten af hypoxi i en muskel i hvile. NMR-øvelsen havde følgende mål: 1. At lære hvordan man med en simpel 31 PMRS måling bliver i stand til at kvantitere både aerob og anaerob ATP turnover i musklen, i.e. aerob og anaerob Vmax, udtrykt som µmol ATP omsat per sek. per g muskel. 2. At måle intracellulær ph i en muskel i hvile og under arbejde. 3. At sammenholde ekstraktmålinger og NMR målinger udtrykt som PCr/ATP ratio. 4. At sammenholde de NMR spektroskopiske resultater med de resultater I har opnået under fysiologiøvelsen umiddelbart inden. I fysiologiøvelsen målte I den maximale energiomsætning i musklerne under ergometercykling i form af den maximale iltoptagelse (l ilt per min per person). Her i NMR øvelsen måler I den maximale energiomsætning i musklerne i form af ATP omsætningen (µmol ATP omsat per sek per g muskel). Målet er derfor at omsætte de fysiologiske iltoptagelsesmålinger til ATP omsætning i samme enhed som udregnet ved NMR øvelsen (µmol ATP/g s). I rapporten diskuteres resultaterne i relation til de opstillede mål, f.eks. Den anvendte metodes betydning for at opnå metabolitmålinger, som repræsenterer "sande" in vivo koncentrationer, herunder at sammenholde biopsi og NMR målingerne. Effekten af hypoxi på en hvilende muskel. Muskel ph under arbejde

18 18 Phosphocreatins rolle i musklens energistofskifte. Den maximale aerobe og anaerobe ATP syntesekapacitet, herunder at sammenholde resultaterne fra fysiologiøvelsen med de her opnåede resultater. Rapporten afleveres til gruppelærerne senest 1 uge efter resultatbehandlingstimen, underskrevet af alle bidragydere.

19 19 Appendix 1: Panum NMR Center, nov Calculation instruction for the 31 P-NMR lab course on 5. semester concerning muscle energy metabolism 1) Intracellular ph ph = log δ δ where δ = chemical shift (in ppm) btw. P i and PCr 2) Free [ADP] from the creatine kinase (CK) reaction PCr + ADP - + H + ATP + Cr Assumptions: K eq = M -1 [ATP rest ] 5.5 mm, equal to the peak area of the γ-atp peak. [PCr rest ] = (PCr/ATP area-ratio x 5.5) mm [Cr rest ] 0.2 [PCr rest ] mm [PCr t ] = PCr conc. at time t. PCr = [PCr rest ] - [PCr t ] [Cr t ] = [Cr rest ] + PCr [ADP rest ] = (Cr rest ATP)/ (PCr rest 10 -ph rest K eq ) [ADP t ] = PCr r PCr ATP r ATP r PCr t ph ATP r = 0.2 PCr r + PCr ( ) 5.5 PCr t 10 ph ( µm)

20 20 3) Anaerobic ATP turnover is calculated from ph and PCr changes as: ATP = PCr 3 2 (β ph + k PCr) where PCr is (PCr r - PCr t per sec) converted to concentration as explained above. The units become µmol g -1 sec -1 = mm sec -1 The buffer capacity, β, is estimated as β = [P i ] + 15 ( Slykes = µmol H + / ph ) where [Pi] = 5.5 x the peak area ratio (P i /ATP rest ), 1 and k = ( ; (pk ph 675. A for P i = 6.75) ( ) ) (mm) 4) Aerobic V max (Maximal rate of aerobic ATP synthesis) is calculated from the initial rate of PCr resynthesis, v, (mm sec -1 ), assuming Michaelis-Menten kinetics, where [ADP] is the regulatory component, with K m(adp) = 23 µm v = V ADP max [ ] K + [ ADP] m, V max = v (K m +[ADP]) [ADP] ( µmol g -1 sec -1 ) (Note on the calculation procedure: The time course of PCr recovery is fitted to the monoexponential function: y(t) = a (1-exp(-b t)) + c where y = (a + c) is the asymptote ( a + c = PCr rest when PCr is

21 21 fully recovered ), t is the time, b is the time constant of the function, and c the initial value of y(t), i.e. the end-excercise PCr concentration. The initial rate of PCr recovery is obtained as dy/dt for t=0, by differentiation of y(t), i.e. dy/dt = - a exp(-b t) (-b) + 0 = a b exp(-b t) = a b for t = 0).

22 22 Appendix 2: 31 P magnetic resonance spectroscopy in vivo in a medical context Bjørn Quistorff, Department of Medical Biochemistry and Genetics, The Medical School, University of Copenhagen. Panum Institute, 3 Blegdamsvej, 2200 Copenhagen, Denmark.. ( From Magnetic resonance materials in physics, biology and medicine vol. 14(2), Syllabus ESMRMB 2002, 33-37, 2002.) The phosphorous spectrum of living systems is usually quite simple compared to for example natural abundance 13 C spectra. This is due to the fact that the majority of phosphorous compounds in living cells are present in concentrations, which are normally below the detection level of in vivo spectroscopy. In addition several phosphorous compounds will display very broad lines because of restricted mobility of the large molecular structures in which they are incorporated. Such compounds, as for example phospholipids in bio-membranes, will therefore be NMR invisible. Several introductory texts to NMR spectroscopy are available. The one by Gadian is recommended for this course (1). The resonances of the in vivo 31 P-spectrum. Phosphocreatine (PCr) is the largest peak in tissues like heart, brain and in particular in skeletal muscle, where the concentration is mm in the resting state. For that reason PCr is often assigned 0 ppm in the 31 P-spectrum. Otherwise 80% phosphoric acid is used to define 0 ppm which puts PCr at 1.2 ppm. In liver, however, there is no PCr since the enzyme creatine kinase is not expressed in this organ. Thus in the liver the γ ATP peak at 5 ppm may be used as the chemical shift reference. The following resonances may be observed in living tissues as shown schematically in Figure 1 (modified from (1)): Phosphomono esters (like glucose-6-p, AMP and IMP), inorganic phosphate, phospho-diesters (like glycerolphosphoryl-cholin or glycerolphosphorol-serine), pyrophosphate, diand tri-nucleotides (primarily ADP and

23 23 ATP) and di-phospho-diesters (like NAD and NADP). In the liver the 0-6 ppm region may be particularly crowded and assignment can be complicated. For example the resonances of P i, glucose- 1-P and ribose-1-p may coincide depending upon ph (2). Normally, however, this is not a problem, since the concentration of these two sugar-phosphates are quite low. Another complication is that the shift of all the phosphomonoesters change with ph as discussed below, while phosphodiesters do not change shift in the physiological range of ph. Effects of ph. The ph effects on the chemical shift observed in the 31 P-spectrum are due to different degree of protonation of the phosphorous atoms. Thus there is a shift difference of about 2.4 ppm between H 2 PO - 4 and HPO 2-4, allowing ph to be determined by the equation ph = pk A + log [(σ - σ1)/ (σ2 - σ)] eq. 1 where σ is the observed chemical shift of the P i peak while σ1 and σ2 represents the shifts of the HPO 4 2- and H 2 PO 4 - species, respectively. Based on titration studies of tissue extracts the pk A is assumed to be 6.75 while σ1 and σ2 was determined to 3.27 and 5.69, respectively (3). Since these values are dependent upon ionic strength and in particular on the free Mg 2+ concentration which may cange with different physiological condition, it may be argued that Mg 2+ should be accounted for in the equation. A detailed account on this procedure has been given by (4). Since the pk A of different phosphorous species (e.g. AMP and P- cholin) may be different, ph changes in the organ during the experiment may complicate the interpretation of the spectrum considerably as illustrated in Figure 2 showing that some resonances in the PME region may even switch place as ph changes (2). A further complication arises from the

24 24 fact that intra- and various extracellular compartments under physiological conditions have different ph (see below). Examples of some application of 31 PMRS in medical research. 1. Evaluation of fiber type composition in human skeletal muscle. Skeletal muscle contains two main fiber types, the so called fast twitch ( white ) and slow twitch ( red ) fibers. The fast fibers have a higher glycolytic potential, i.e. greater capacity to generate ATP from glycogen during high intensity contraction, while the slow fibers have more mitochondria and a higher potential for oxidative ATP generation. In order to investigate fiber composition a muscle biopsy is normally taken and the fiber of different types counted after suitable staining (5). It was however observed that during intense muscle exercise two or three peaks within the P i -region appeared (e.g. 3,6) as illustrated in Figure 3. Based on the kinetics and size of these peaks during suitable exercise protocols it was concluded that the more acidic peak reflected the fast fibers of the muscle group observed, while the less acidic peak reflected the slow fibers (6,7). Such data are shown in Figure 4. The acidic P i component had a much slower recovery and in particular the ph recovery of this component was much slower in agreement with the known behaviour of fast twitch fibers (7). As an additional test of the P i peak assignment the subjects were partly curarized, a procedure known to primarily paralyse the fast fibers (8). This experiment indeed confirmed that on curarized subjects the high ph component corresponding to the slow twitch fibers was much smaller than the low ph component. Finally, muscle biopsies were taken in the same location as the MRS data was sampled and subsequently tested for fibertype composition. The data confirmed that a high percentage of slow (type 1) fibers as determined histochemically correlated strongly with the size of the high-ph

25 25 component determined by NMR during exercise (8). 2. Energy turnover during muscle contraction. Energy turnover in skeletal mucle may be studied in detail by 31 PMRS. During ischaemic conditions the absolute ATP turnover may be obtained, while during aerobic conditions usually the lack of knowledge of the actual oxygen consumption complicate the quantitative evaluation. During anaerobic conditions the sole source of ATP generation for muscle contraction is hydrolysis of PCr and anaerobic glycogenolysis. While the first parameter may be followed directly from the PCr peak in the spectrum, the rate of glycogenolysis may be estimated indirectly from the acidification of the muscle since it can be assumed that no lactate leaves the muscle during ischaemic conditions. The calculation, however, requires knowledge of the buffer capacity. The equation usually used for the estimation of ATP turnover is: ATP = - PCr -3/2[β ph + k PCr] eq. 2 (9) where β is the buffer capacity (Slykes), and k is the proportionality factor providing the contribution from the creatine kinase reaction to H + generation, estimated as k = 1/[ (ph-6.75) ] eq 3 (9) It may be argued that since the free magnesium concentration may change during heavy exercise the pk A of the CK reaction will also change and should be taken into the calculation (4,15). Applying equation 2 we, and several other groups, have estimated ATP turnover in skeletal muscle with different types of exercise protocols in normal and diseased muscle (e.g. 10,11,12). Aerobic ATP turn over in muscle cannot be evaluated directly as mentioned above. However, making the following assumptions it is possible to obtain a measure of the maximal aerobic ATP turn over capacity of a muscle by a simple in-magnet exercise protocol: During dynamic exercise the PCr concentration makes excursions down and up with each contraction and subsequent recovery and it may be argued that the rate at which the PCr recovers between contractions can be taken as a

26 26 measure of the maximal mitochondrial ATP turnover rate (10). This argument assumes that ATP production during initial recovery is used only for PCr resynthesis and that glycolytic ATP generation is negligible. The first assumption is of course incorrect, since certainly reuptake of calcium in the sarcoplasmic reticulum in recovery and also other processes in the resting muscle cell are energy consuming. The second assumption is probably correct since several studies have shown that glycolysis turns on and off with contraction (13, and references therein). With these reservations, however, the estimation of aerobic V max may be carried out as follows: The initial PCr recovery rate, v, is obtained by fitting the PCr recovery time course to a monoexponential and calculating the first derivative at time 0. Since ADP can be assumed to be the controlling chemical for muscle respiration the free ADP concentration at time 0 is calculated, assuming CK equilibrium and an equilibrium constant of (14). Here again it may be argued that since free magnesium can change during exercise the actual magnesium concentration should be taken into account, modifying the CK equilibrium constant (15,16). Assuming Michaelis-Menten kinetics for the oxidative phosphorylation with ADP as the main controller, V max may be calculated as: V max = v (K m + ADP)/ADP eq. 4 We have applied these calculations to three groups of young healthy males who were either long term sprint- or endurance trained while the third group was age matched untrained subjects. As shown in Table 1 the two trained groups had similar V max of about 0.75 mmol ATP per sec per kg muscle, which was, however, almost 2 fold higher than the untrained control group. Furthermore it was obvious that the sprint trained subjects possessed a much higher capacity for anaerobic glycogenolysis, while the rate of PCr hydrolysis was only slightly (albeit significantly) higher than the two other groups. Table 1 PCr hydrolysis and glycogenolytic ATP production ( Glyc. ATP ) during 30 sec max contraction of the gastrocnemius muscle. Data are given as mmol ATP equivalents per kg muscle over the 30 sec max contraction. V max was calculated as described in the text and are given as mmol ATP per kg muscle per sec. Mean± SEM are given, n=6. (Data taken from (17)). Untrained Sprint-trained Endurance-trained PCr hydrolysis 9.9±1.3* 13.5± ±1.1 * Glyc. ATP 17.6±2.9* 40.4± ±2.1 * Aerobic V max 0.33±0.07 # 0.74± ±0.10

27 27 * significantly different from ST # significantly different from ST and ET References: 1. Gadian,DG, NMR and its application to living systems. Oxford University Press, 2.ed.,Oxford Quistorff,B, Pedersen,EJ, McCully,K & Chance,B.: Metabolic effects of alcohol studied by 31PMRS in rat and human. In: NMR spectroscopy in drug research (Eds. Jarozewsky et al.) pp Munksgaard, Copenhagen Taylor,D, Bore,P., Styles,P, Gadian,D. and Radda,G. Bioenergetics of intact human muscle. A 31PMRS study. Mol.Biol.Med. 1: 77-94, Iotti S, Frassineti C, Alderighi L, Sabatini A, Vacca A, Barbiroli B. In vivo (31)P-MRS assessment of cytosolic [Mg(2+)] in the human skeletal muscle in different metabolic conditions. Magn.Res. Imaging 18: , Saltin,B. and Gollnick,PL. Skeletal muscle adaptability. In Handbook of Physiology; Skeletal Muscle. Am. Physiol. Sci., sect. 10, chapt. 19, Park, JH, Brown, CR, Mcully,K, Cohen,M, Haselgrove,J and Chance,B. Functional pools of oxidative and glycolytic fibers in human muscle observed by 31PMRS during exercise. Proc.Natl.Acad. Sci. 84: , Mizuno, M., Secher, N. H., and Quistorff, B.: 31 PMRS, rsemg, and histochemical fibertypes of human wrist flexor muscles. J.Appl. Physiol., 76: , Mizuno, M., Horn, A., Secher, N. H., and Quistorff, B.: Exercise-induced 31 P-nmr metabolic response of human wrist flexor muscles during partial neuromuscular blockade. Am. J. Physiol., 267, R408-14, Kemp, GJ and Radda,GK Magn.Res. Quaterly 10: 43-63, Blei,ML, Conley,KE, and Kushmeric,MJ Separate measures of ATP utilization and recovery in human skeletal muscle. J. Physiol. 465: , Ratkevicius,A., Mizuno,M, Povilonis,E and Quistorff,B. Energy metabolism of the gastrocnemius and soleus muscles during isometric voluntary and electrically induced contractions in man. J. Physiol. 507: , Vissing,J., Gansted,U. and Quistorff,B. Exercise intolerance mitochondrial Myopathy is not related to lactic acidosis. Ann.Neurol. 49: 672-6, Quistorff,B., Johansen,L. and Sahlin,K. Absence of PCr resynthesis in human calf muscle during ischaemic recovery. Biochem J. 291: 681-6, Lawson, R.J and Veech, RL, Effects of ph and free Mg2+ on the Keq of the creatine kinase reaction and other phosphate hydrolyses and phosphate transfer reactions.

28 28 J. Biol. Chem. 254: , Iotti, S., Sabatini,A., Vacca,A. and Frassineti,C. Magn.Res. Materials Phys. Biol. Med. 14, Kushmeric,MJ, Multiple equilibria og H, and Mg with ATP, PCr, ADP and Pi in muscle bioenergetics. Am.J.Physiol. 272: C , Johansen,L. and Quistorff,B. 31 PMRS characterization of sprint and endurance trained athletes. Intn. J. Sports Med. In Press.

Regulatoriske mekanismer i energistofskiftet

Regulatoriske mekanismer i energistofskiftet Regulatoriske mekanismer i energistofskiftet Del A Formål: Måling af metabolitkonc. i biopsier fra muskelvæv (rotter). Fremgangsmåde: se øvelsesvejleding Vi målte på ATP og PCr. Herudover var der andre

Læs mere

Regulatoriske mekanismer i energistofskiftet

Regulatoriske mekanismer i energistofskiftet Regulatoriske mekanismer i energistofskiftet Regulatoriske mekanismer i energistofskiftet Resultatskemaer: Biopsi Muskel- 0 Muskel- 1 Muskel- 2 Muskel- 3 Vægt [g] 1,32 1,82 1,35 1,58 PCA tilsat [ml] 12,42

Læs mere

Basic statistics for experimental medical researchers

Basic statistics for experimental medical researchers Basic statistics for experimental medical researchers Sample size calculations September 15th 2016 Christian Pipper Department of public health (IFSV) Faculty of Health and Medicinal Science (SUND) E-mail:

Læs mere

Generalized Probit Model in Design of Dose Finding Experiments. Yuehui Wu Valerii V. Fedorov RSU, GlaxoSmithKline, US

Generalized Probit Model in Design of Dose Finding Experiments. Yuehui Wu Valerii V. Fedorov RSU, GlaxoSmithKline, US Generalized Probit Model in Design of Dose Finding Experiments Yuehui Wu Valerii V. Fedorov RSU, GlaxoSmithKline, US Outline Motivation Generalized probit model Utility function Locally optimal designs

Læs mere

B i o k e m i ø v e l s e 1 Regulatoriske mekanismer i det intermediære stoftskifte Udarbejdet af: Matilda Lantz og Elif Bayram

B i o k e m i ø v e l s e 1 Regulatoriske mekanismer i det intermediære stoftskifte Udarbejdet af: Matilda Lantz og Elif Bayram Regulatoriske mekanismer i det intermediære stoftskifte Udarbejdet af: Matilda Lantz og Elif Bayram Dato: 20. November 2011 Underskrifter: Godkendt: Dato Regulatoriske mekanismer i det intermediære stofskifte

Læs mere

Special VFR. - ved flyvning til mindre flyveplads uden tårnkontrol som ligger indenfor en kontrolzone

Special VFR. - ved flyvning til mindre flyveplads uden tårnkontrol som ligger indenfor en kontrolzone Special VFR - ved flyvning til mindre flyveplads uden tårnkontrol som ligger indenfor en kontrolzone SERA.5005 Visual flight rules (a) Except when operating as a special VFR flight, VFR flights shall be

Læs mere

Statistical information form the Danish EPC database - use for the building stock model in Denmark

Statistical information form the Danish EPC database - use for the building stock model in Denmark Statistical information form the Danish EPC database - use for the building stock model in Denmark Kim B. Wittchen Danish Building Research Institute, SBi AALBORG UNIVERSITY Certification of buildings

Læs mere

Resource types R 1 1, R 2 2,..., R m CPU cycles, memory space, files, I/O devices Each resource type R i has W i instances.

Resource types R 1 1, R 2 2,..., R m CPU cycles, memory space, files, I/O devices Each resource type R i has W i instances. System Model Resource types R 1 1, R 2 2,..., R m CPU cycles, memory space, files, I/O devices Each resource type R i has W i instances. Each process utilizes a resource as follows: request use e.g., request

Læs mere

Anvendt BioKemi: Struktur. Anvendt BioKemi: MM3. 1) MM3- Opsummering. Forholdet mellem Gibbs fri energi og equilibrium (ligevægt) konstant K

Anvendt BioKemi: Struktur. Anvendt BioKemi: MM3. 1) MM3- Opsummering. Forholdet mellem Gibbs fri energi og equilibrium (ligevægt) konstant K Anvendt BioKemi: Struktur 1) MM1 Intro: Terminologi, Enheder Math/ biokemi : Kemiske ligninger, syre, baser, buffer Små / Store molekyler: Aminosyre, proteiner 2) MM2 Anvendelse: Blod som et kemisk system

Læs mere

X M Y. What is mediation? Mediation analysis an introduction. Definition

X M Y. What is mediation? Mediation analysis an introduction. Definition What is mediation? an introduction Ulla Hvidtfeldt Section of Social Medicine - Investigate underlying mechanisms of an association Opening the black box - Strengthen/support the main effect hypothesis

Læs mere

DoodleBUGS (Hands-on)

DoodleBUGS (Hands-on) DoodleBUGS (Hands-on) Simple example: Program: bino_ave_sim_doodle.odc A simulation example Generate a sample from F=(r1+r2)/2 where r1~bin(0.5,200) and r2~bin(0.25,100) Note that E(F)=(100+25)/2=62.5

Læs mere

Gusset Plate Connections in Tension

Gusset Plate Connections in Tension Gusset Plate Connections in Tension Jakob Schmidt Olsen BSc Thesis Department of Civil Engineering 2014 DTU Civil Engineering June 2014 i Preface This project is a BSc project credited 20 ECTS points written

Læs mere

Privat-, statslig- eller regional institution m.v. Andet Added Bekaempelsesudfoerende: string No Label: Bekæmpelsesudførende

Privat-, statslig- eller regional institution m.v. Andet Added Bekaempelsesudfoerende: string No Label: Bekæmpelsesudførende Changes for Rottedatabasen Web Service The coming version of Rottedatabasen Web Service will have several changes some of them breaking for the exposed methods. These changes and the business logic behind

Læs mere

Trolling Master Bornholm 2012

Trolling Master Bornholm 2012 Trolling Master Bornholm 1 (English version further down) Tak for denne gang Det var en fornøjelse især jo også fordi vejret var med os. Så heldig har vi aldrig været før. Vi skal evaluere 1, og I må meget

Læs mere

Evaluating Germplasm for Resistance to Reniform Nematode. D. B. Weaver and K. S. Lawrence Auburn University

Evaluating Germplasm for Resistance to Reniform Nematode. D. B. Weaver and K. S. Lawrence Auburn University Evaluating Germplasm for Resistance to Reniform Nematode D. B. Weaver and K. S. Lawrence Auburn University Major objectives Evaluate all available accessions of G. hirsutum (TX list) for reaction to reniform

Læs mere

Project Step 7. Behavioral modeling of a dual ported register set. 1/8/ L11 Project Step 5 Copyright Joanne DeGroat, ECE, OSU 1

Project Step 7. Behavioral modeling of a dual ported register set. 1/8/ L11 Project Step 5 Copyright Joanne DeGroat, ECE, OSU 1 Project Step 7 Behavioral modeling of a dual ported register set. Copyright 2006 - Joanne DeGroat, ECE, OSU 1 The register set Register set specifications 16 dual ported registers each with 16- bit words

Læs mere

BILAG 3: UDKAST TIL FREKVENSTILLADELSE

BILAG 3: UDKAST TIL FREKVENSTILLADELSE BILAG 3: UDKAST TIL FREKVENSTILLADELSE Foreløbigt udkast til frekvenstilladelse til en DAB-blok 1 senderettighed Kontor/afdeling Center for Tele Dato Kundenummer: Tilladelse [tilladelsesnummer] til anvendelse

Læs mere

Subject to terms and conditions. WEEK Type Price EUR WEEK Type Price EUR WEEK Type Price EUR WEEK Type Price EUR

Subject to terms and conditions. WEEK Type Price EUR WEEK Type Price EUR WEEK Type Price EUR WEEK Type Price EUR ITSO SERVICE OFFICE Weeks for Sale 31/05/2015 m: +34 636 277 307 w: clublasanta-timeshare.com e: roger@clublasanta.com See colour key sheet news: rogercls.blogspot.com Subject to terms and conditions THURSDAY

Læs mere

Vina Nguyen HSSP July 13, 2008

Vina Nguyen HSSP July 13, 2008 Vina Nguyen HSSP July 13, 2008 1 What does it mean if sets A, B, C are a partition of set D? 2 How do you calculate P(A B) using the formula for conditional probability? 3 What is the difference between

Læs mere

Skriftlig Eksamen Kombinatorik, Sandsynlighed og Randomiserede Algoritmer (DM528)

Skriftlig Eksamen Kombinatorik, Sandsynlighed og Randomiserede Algoritmer (DM528) Skriftlig Eksamen Kombinatorik, Sandsynlighed og Randomiserede Algoritmer (DM58) Institut for Matematik og Datalogi Syddansk Universitet, Odense Torsdag den 1. januar 01 kl. 9 13 Alle sædvanlige hjælpemidler

Læs mere

Appendiks 1. I=1/2 kerner. -1/2 (højere energi) E = h ν = k B. 1/2 (lav energi)

Appendiks 1. I=1/2 kerner. -1/2 (højere energi) E = h ν = k B. 1/2 (lav energi) Appendiks NMR-teknikken NMR-teknikken baserer sig på en grundlæggende kvanteegenskab i mange atomkerner, nemlig det såkaldte spin som kun nogle kerner besidder. I eksemplerne her benyttes H og 3 C, som

Læs mere

Report on examination of the catalogues on the freezers in the MP archive, room 14.01.15

Report on examination of the catalogues on the freezers in the MP archive, room 14.01.15 Annex 3.2.3.2 Report on examination of the catalogues on the freezers in the MP archive, room 14.01.15 11 April 2012 the Panel inspected the freezers in the MP archive, including the then newly found -

Læs mere

Bilag. Resume. Side 1 af 12

Bilag. Resume. Side 1 af 12 Bilag Resume I denne opgave, lægges der fokus på unge og ensomhed gennem sociale medier. Vi har i denne opgave valgt at benytte Facebook som det sociale medie vi ligger fokus på, da det er det største

Læs mere

Department of Oncology Dedicated Magnetic Resonance Imaging in radiation therapy at Herlev Hospital

Department of Oncology Dedicated Magnetic Resonance Imaging in radiation therapy at Herlev Hospital Department of Oncology Dedicated Magnetic Resonance Imaging in radiation therapy at Herlev Hospital Faisal Mahmood MR och Strålterapi, Varberg 12. november 2013 Overview MRI projects in radiation therapy

Læs mere

Stofskiftets afhængighed af temperatur og aktivitet hos vekselvarme dyr

Stofskiftets afhængighed af temperatur og aktivitet hos vekselvarme dyr Stofskiftets afhængighed af temperatur og aktivitet hos vekselvarme dyr Besøget retter sig primært til elever med biologi på B eller A niveau Program for besøget Hvis besøget foretages af en hel klasse,

Læs mere

Frequency Dispersion: Dielectrics, Conductors, and Plasmas

Frequency Dispersion: Dielectrics, Conductors, and Plasmas 1/23 Frequency Dispersion: Dielectrics, Conductors, and Plasmas Carlos Felipe Espinoza Hernández Professor: Jorge Alfaro Instituto de Física Pontificia Universidad Católica de Chile 2/23 Contents 1 Simple

Læs mere

SKRIFTLIG EKSAMEN I NUMERISK DYNAMIK Bygge- og Anlægskonstruktion, 7. semester Torsdag den 19. juni 2003 kl Alle hjælpemidler er tilladt

SKRIFTLIG EKSAMEN I NUMERISK DYNAMIK Bygge- og Anlægskonstruktion, 7. semester Torsdag den 19. juni 2003 kl Alle hjælpemidler er tilladt SKRIFTLIG EKSAMEN I NUMERISK DYNAMIK Bygge- og Anlægskonstruktion, 7. semester Torsdag den 9. juni 23 kl. 9.-3. Alle hjælpemidler er tilladt OPGAVE f(x) x Givet funktionen f(x) x, x [, ] Spørgsmål (%)

Læs mere

Linear Programming ١ C H A P T E R 2

Linear Programming ١ C H A P T E R 2 Linear Programming ١ C H A P T E R 2 Problem Formulation Problem formulation or modeling is the process of translating a verbal statement of a problem into a mathematical statement. The Guidelines of formulation

Læs mere

To the reader: Information regarding this document

To the reader: Information regarding this document To the reader: Information regarding this document All text to be shown to respondents in this study is going to be in Danish. The Danish version of the text (the one, respondents are going to see) appears

Læs mere

Unitel EDI MT940 June 2010. Based on: SWIFT Standards - Category 9 MT940 Customer Statement Message (January 2004)

Unitel EDI MT940 June 2010. Based on: SWIFT Standards - Category 9 MT940 Customer Statement Message (January 2004) Unitel EDI MT940 June 2010 Based on: SWIFT Standards - Category 9 MT940 Customer Statement Message (January 2004) Contents 1. Introduction...3 2. General...3 3. Description of the MT940 message...3 3.1.

Læs mere

Anvendt BioKemi: MM4. Anvendt BioKemi: Struktur. 1) MM4- Opsummering. Små molekyler: fedtsyre. Store molekyler: fedt, lipids, lipoproteiner

Anvendt BioKemi: MM4. Anvendt BioKemi: Struktur. 1) MM4- Opsummering. Små molekyler: fedtsyre. Store molekyler: fedt, lipids, lipoproteiner Anvendt BioKemi: Struktur 1) MM1 Intro: Terminologi, Enheder Math/ biokemi : Kemiske ligninger, syre, baser, buffer Små / Store molekyler: Aminosyre, proteiner 2) MM2 Anvendelse: blod som kemiske systemer

Læs mere

Reexam questions in Statistics and Evidence-based medicine, august sem. Medis/Medicin, Modul 2.4.

Reexam questions in Statistics and Evidence-based medicine, august sem. Medis/Medicin, Modul 2.4. Reexam questions in Statistics and Evidence-based medicine, august 2013 2. sem. Medis/Medicin, Modul 2.4. Statistics : ESSAY-TYPE QUESTION 1. Intelligence tests are constructed such that the average score

Læs mere

PARALLELIZATION OF ATTILA SIMULATOR WITH OPENMP MIGUEL ÁNGEL MARTÍNEZ DEL AMOR MINIPROJECT OF TDT24 NTNU

PARALLELIZATION OF ATTILA SIMULATOR WITH OPENMP MIGUEL ÁNGEL MARTÍNEZ DEL AMOR MINIPROJECT OF TDT24 NTNU PARALLELIZATION OF ATTILA SIMULATOR WITH OPENMP MIGUEL ÁNGEL MARTÍNEZ DEL AMOR MINIPROJECT OF TDT24 NTNU OUTLINE INEFFICIENCY OF ATTILA WAYS TO PARALLELIZE LOW COMPATIBILITY IN THE COMPILATION A SOLUTION

Læs mere

Vores mange brugere på musskema.dk er rigtig gode til at komme med kvalificerede ønsker og behov.

Vores mange brugere på musskema.dk er rigtig gode til at komme med kvalificerede ønsker og behov. På dansk/in Danish: Aarhus d. 10. januar 2013/ the 10 th of January 2013 Kære alle Chefer i MUS-regi! Vores mange brugere på musskema.dk er rigtig gode til at komme med kvalificerede ønsker og behov. Og

Læs mere

Glycolysis. Content. Martin Gyde Poulsen Page 1 of 5 GLYCOLYSIS... 1

Glycolysis. Content. Martin Gyde Poulsen Page 1 of 5 GLYCOLYSIS... 1 Content Glycolysis GLYCOLYSIS... 1 NOTES... 2 REFERENCES... 2 ENERGY INPUT AND OUTPUT... 3 INVESTMENT AND PAYOFF PHASE... 3 NET OF GLYCOLYSIS... 3 THE 10 STEPS OF GLYCOLYSIS... 4 ENERGY INVESTMENT PHASE

Læs mere

Appendix 1 Properties of Fuels

Appendix 1 Properties of Fuels Appendix 1 Properties of Fuels S. McAllister et al., Fundamentals of Combustion Processes, Mechanical Engineering Series, DOI 10.1007/978-1-4419-7943-8, # Springer Science+Business Media, LLC 2011 243

Læs mere

applies equally to HRT and tibolone this should be made clear by replacing HRT with HRT or tibolone in the tibolone SmPC.

applies equally to HRT and tibolone this should be made clear by replacing HRT with HRT or tibolone in the tibolone SmPC. Annex I English wording to be implemented SmPC The texts of the 3 rd revision of the Core SPC for HRT products, as published on the CMD(h) website, should be included in the SmPC. Where a statement in

Læs mere

Sport for the elderly

Sport for the elderly Sport for the elderly - Teenagers of the future Play the Game 2013 Aarhus, 29 October 2013 Ditte Toft Danish Institute for Sports Studies +45 3266 1037 ditte.toft@idan.dk A growing group in the population

Læs mere

The X Factor. Målgruppe. Læringsmål. Introduktion til læreren klasse & ungdomsuddannelser Engelskundervisningen

The X Factor. Målgruppe. Læringsmål. Introduktion til læreren klasse & ungdomsuddannelser Engelskundervisningen The X Factor Målgruppe 7-10 klasse & ungdomsuddannelser Engelskundervisningen Læringsmål Eleven kan give sammenhængende fremstillinger på basis af indhentede informationer Eleven har viden om at søge og

Læs mere

Træningsfysiologi. Aquaclinic 2017 A A R H U S U N I V E R S I T E T. Ph.d.

Træningsfysiologi. Aquaclinic 2017 A A R H U S U N I V E R S I T E T. Ph.d. Træningsfysiologi Aquaclinic 2017 A A R H U S U N I V E R S I T E T Insitut for Biomedicin - Fysiologi og Biofysik Frank de Paoli, Cand.med. Ph.d. Idræt er ikke videnskab men videnskab kan forbedre idrætudøverens

Læs mere

Measuring Evolution of Populations

Measuring Evolution of Populations Measuring Evolution of Populations 2007-2008 5 Agents of evolutionary change Mutation Gene Flow Non-random mating Genetic Drift Selection Populations & gene pools Concepts a population is a localized group

Læs mere

Anvendt BioKemi: Blod som et kemisk system, Struktur af blod

Anvendt BioKemi: Blod som et kemisk system, Struktur af blod Anvendt BioKemi: Struktur 1) MM1 Intro: Terminologi, Enheder Math/ biokemi : Kemiske ligninger, syre, baser, buffer Små / Store molekyler: Aminosyre, proteiner 2) MM2 Anvendelse: blod som kemiske systemer

Læs mere

ATEX direktivet. Vedligeholdelse af ATEX certifikater mv. Steen Christensen stec@teknologisk.dk www.atexdirektivet.

ATEX direktivet. Vedligeholdelse af ATEX certifikater mv. Steen Christensen stec@teknologisk.dk www.atexdirektivet. ATEX direktivet Vedligeholdelse af ATEX certifikater mv. Steen Christensen stec@teknologisk.dk www.atexdirektivet.dk tlf: 7220 2693 Vedligeholdelse af Certifikater / tekniske dossier / overensstemmelseserklæringen.

Læs mere

Portal Registration. Check Junk Mail for activation . 1 Click the hyperlink to take you back to the portal to confirm your registration

Portal Registration. Check Junk Mail for activation  . 1 Click the hyperlink to take you back to the portal to confirm your registration Portal Registration Step 1 Provide the necessary information to create your user. Note: First Name, Last Name and Email have to match exactly to your profile in the Membership system. Step 2 Click on the

Læs mere

Aktivering af Survey funktionalitet

Aktivering af Survey funktionalitet Surveys i REDCap REDCap gør det muligt at eksponere ét eller flere instrumenter som et survey (spørgeskema) som derefter kan udfyldes direkte af patienten eller forsøgspersonen over internettet. Dette

Læs mere

Hydrogen Burning in Stars-II

Hydrogen Burning in Stars-II ydrogen Burning in Stars-II ydrogen in induced reaction have lowest oulomb barrier highest reaction rate Reaction chain with lowest Z elements are the -chains -chains limited by weak interaction based

Læs mere

Selection of a Laser Source for Magnetic Field Imaging Using Magneto-optical Films

Selection of a Laser Source for Magnetic Field Imaging Using Magneto-optical Films Selection of a Laser Source for Magnetic Field Imaging Using Magneto-optical Films Jennifer Talmadge ECE 355 Final Project Presentation November 28, 2001 Motivation Potential for non-invasive imaging of

Læs mere

The test can be performed on the following devices. In addition, the required cuvette and the absorption range of the photometer are indicated.

The test can be performed on the following devices. In addition, the required cuvette and the absorption range of the photometer are indicated. Formaldehyde 10 M. L 1.00-5.00 mg/l HCHO H 2 SO 4 / Chromotropic acid 175 Instrument specific information The test can be performed on the following devices. In addition, the required cuvette and the absorption

Læs mere

28 April 2003 Retrospective: Semicore Visit

28 April 2003 Retrospective: Semicore Visit 28 April 2003 Retrospective: Semicore Visit What is highest growth Industry? Rebuild versus remanufacture Importance of Documentation, blueprinting, spares What are barriers to high uptime? Review Homeworks

Læs mere

F o r t o l k n i n g e r a f m a n d a l a e r i G I M - t e r a p i

F o r t o l k n i n g e r a f m a n d a l a e r i G I M - t e r a p i F o r t o l k n i n g e r a f m a n d a l a e r i G I M - t e r a p i - To fortolkningsmodeller undersøgt og sammenlignet ifm. et casestudium S i g r i d H a l l b e r g Institut for kommunikation Aalborg

Læs mere

Brug sømbrættet til at lave sjove figurer. Lav fx: Få de andre til at gætte, hvad du har lavet. Use the nail board to make funny shapes.

Brug sømbrættet til at lave sjove figurer. Lav fx: Få de andre til at gætte, hvad du har lavet. Use the nail board to make funny shapes. Brug sømbrættet til at lave sjove figurer. Lav f: Et dannebrogsflag Et hus med tag, vinduer og dør En fugl En bil En blomst Få de andre til at gætte, hvad du har lavet. Use the nail board to make funn

Læs mere

DONG-område Resten af landet

DONG-område Resten af landet TDC A/S regulering@tdc.dk Fremsendes alene via mail Tillægsafgørelse vedrørende fastsættelse af priser for BSA leveret via TDC s fibernet 1 Indledning traf fredag den 15. april 2011 LRAIC-prisafgørelse

Læs mere

[BESØGSSERVICE INSTITUT FOR MOLEKYLÆRBIOLOGI OG GENETIK, AU]

[BESØGSSERVICE INSTITUT FOR MOLEKYLÆRBIOLOGI OG GENETIK, AU] Enzymkinetik INTRODUKTION Enzymer er biologiske katalysatorer i alle levende organismer som er essentielle for liv. Selektivt og effektivt katalyserer enzymerne kemiske reaktioner som ellers ikke ville

Læs mere

Dendrokronologisk Laboratorium

Dendrokronologisk Laboratorium Dendrokronologisk Laboratorium NNU rapport 14, 2001 ROAGER KIRKE, TØNDER AMT Nationalmuseet og Den Antikvariske Samling i Ribe. Undersøgt af Orla Hylleberg Eriksen. NNU j.nr. A5712 Foto: P. Kristiansen,

Læs mere

On the complexity of drawing trees nicely: corrigendum

On the complexity of drawing trees nicely: corrigendum Acta Informatica 40, 603 607 (2004) Digital Object Identifier (DOI) 10.1007/s00236-004-0138-y On the complexity of drawing trees nicely: corrigendum Thorsten Akkerman, Christoph Buchheim, Michael Jünger,

Læs mere

Kvant Eksamen December 2010 3 timer med hjælpemidler. 1 Hvad er en continuous variable? Giv 2 illustrationer.

Kvant Eksamen December 2010 3 timer med hjælpemidler. 1 Hvad er en continuous variable? Giv 2 illustrationer. Kvant Eksamen December 2010 3 timer med hjælpemidler 1 Hvad er en continuous variable? Giv 2 illustrationer. What is a continuous variable? Give two illustrations. 2 Hvorfor kan man bedre drage konklusioner

Læs mere

Listen Mr Oxford Don, Additional Work

Listen Mr Oxford Don, Additional Work 57 (104) Listen Mr Oxford Don, Additional Work Listen Mr Oxford Don Crosswords Across 1 Attack someone physically or emotionally (7) 6 Someone who helps another person commit a crime (9) 7 Rob at gunpoint

Læs mere

Energi, Enzymer & enzymkinetik.metabolisme

Energi, Enzymer & enzymkinetik.metabolisme (gruppeopgaver i databar 152 (og 052)) Energi, Enzymer & enzymkinetik.metabolisme Tirsdag den 17. september kl 13-14.15 (ca) Auditorium 53, bygning 210 Susanne Jacobsen sja@bio.dtu.dk Enzyme and Protein

Læs mere

Anvendt BioKemi: MM2. Anvendt BioKemi: Struktur. 1) MM2- Opsummering. Aminosyrer og proteiner som buffere

Anvendt BioKemi: MM2. Anvendt BioKemi: Struktur. 1) MM2- Opsummering. Aminosyrer og proteiner som buffere Anvendt BioKemi: Struktur 1) MM1 Intro: Terminologi, Enheder Math/ biokemi : Kemiske ligninger, syre, baser, buffer Små / Store molekyler: Aminosyre, proteiner 2) MM2 Anvendelse: blod som et kemisk system

Læs mere

Molio specifications, development and challenges. ICIS DA 2019 Portland, Kim Streuli, Molio,

Molio specifications, development and challenges. ICIS DA 2019 Portland, Kim Streuli, Molio, Molio specifications, development and challenges ICIS DA 2019 Portland, Kim Streuli, Molio, 2019-06-04 Introduction The current structure is challenged by different factors. These are for example : Complex

Læs mere

Mandara. PebbleCreek. Tradition Series. 1,884 sq. ft robson.com. Exterior Design A. Exterior Design B.

Mandara. PebbleCreek. Tradition Series. 1,884 sq. ft robson.com. Exterior Design A. Exterior Design B. Mandara 1,884 sq. ft. Tradition Series Exterior Design A Exterior Design B Exterior Design C Exterior Design D 623.935.6700 robson.com Tradition OPTIONS Series Exterior Design A w/opt. Golf Cart Garage

Læs mere

Vomfyldekorrektion i tidlig laktation

Vomfyldekorrektion i tidlig laktation Vomfyldekorrektion i tidlig laktation Resultater fra projektet vægt på fodereffektivitet i praksis Udarbejdet af: Vivi M. Thorup, Auning Data vmt@thorupconsult.dk Vomfyldekorrektion i tidlig laktation

Læs mere

Intensitetskategorier i svømning med udgangspunkt i masters

Intensitetskategorier i svømning med udgangspunkt i masters Intensitetskategorier i svømning med udgangspunkt i masters A1 A2 En1 En2 An1 An2 SP Intention, Definition, Indikation, Arbejdskrav, Træningsvilkår (ex serier, pauser, vejrtrækninger), Kapacitetsanalyse,

Læs mere

Observation Processes:

Observation Processes: Observation Processes: Preparing for lesson observations, Observing lessons Providing formative feedback Gerry Davies Faculty of Education Preparing for Observation: Task 1 How can we help student-teachers

Læs mere

Dendrokronologisk Laboratorium

Dendrokronologisk Laboratorium Dendrokronologisk Laboratorium NNU rapport 8, 2001 BRO OVER SKJERN Å, RINGKØBING AMT Skjern Å Projektet/Oxbøl Statsskovdistrikt/RAS. Indsendt af Torben Egeberg og Mogens Schou Jørgensen. Undersøgt af Aoife

Læs mere

FACULTY OF SCIENCE :59 COURSE. BB838: Basic bioacoustics using Matlab

FACULTY OF SCIENCE :59 COURSE. BB838: Basic bioacoustics using Matlab FACULTY OF SCIENCE 01-12- 11:59 COURSE BB838: Basic bioacoustics using Matlab 28.03. Table Of Content Internal Course Code Course title ECTS value STADS ID (UVA) Level Offered in Duration Teacher responsible

Læs mere

Black Jack --- Review. Spring 2012

Black Jack --- Review. Spring 2012 Black Jack --- Review Spring 2012 Simulation Simulation can solve real-world problems by modeling realworld processes to provide otherwise unobtainable information. Computer simulation is used to predict

Læs mere

The River Underground, Additional Work

The River Underground, Additional Work 39 (104) The River Underground, Additional Work The River Underground Crosswords Across 1 Another word for "hard to cope with", "unendurable", "insufferable" (10) 5 Another word for "think", "believe",

Læs mere

Statistik for MPH: 7

Statistik for MPH: 7 Statistik for MPH: 7 3. november 2011 www.biostat.ku.dk/~pka/mph11 Attributable risk, bestemmelse af stikprøvestørrelse (Silva: 333-365, 381-383) Per Kragh Andersen 1 Fra den 6. uges statistikundervisning:

Læs mere

Det er muligt at chekce følgende opg. i CodeJudge: og

Det er muligt at chekce følgende opg. i CodeJudge: og Det er muligt at chekce følgende opg. i CodeJudge:.1.7 og.1.14 Exercise 1: Skriv en forløkke, som producerer følgende output: 1 4 9 16 5 36 Bonusopgave: Modificer dit program, så det ikke benytter multiplikation.

Læs mere

Quantum Biochemistry. Jan H. Jensen Department of Chemistry University of Copenhagen. Slides can be found at: DOI: /m9.figshare.

Quantum Biochemistry. Jan H. Jensen Department of Chemistry University of Copenhagen. Slides can be found at: DOI: /m9.figshare. Quantum Biochemistry Jan H. Jensen Department of Chemistry University of Copenhagen Slides can be found at: DOI:10.6084/m9.figshare.912548 Dias 1 Computational Chemistry Schrödinger Equation (1926) i t

Læs mere

Den nye Eurocode EC Geotenikerdagen Morten S. Rasmussen

Den nye Eurocode EC Geotenikerdagen Morten S. Rasmussen Den nye Eurocode EC1997-1 Geotenikerdagen Morten S. Rasmussen UDFORDRINGER VED EC 1997-1 HVAD SKAL VI RUNDE - OPBYGNINGEN AF DE NYE EUROCODES - DE STØRSTE UDFORDRINGER - ER DER NOGET POSITIVT? 2 OPBYGNING

Læs mere

Trolling Master Bornholm 2014

Trolling Master Bornholm 2014 Trolling Master Bornholm 2014 (English version further down) Den ny havn i Tejn Havn Bornholms Regionskommune er gået i gang med at udvide Tejn Havn, og det er med til at gøre det muligt, at vi kan være

Læs mere

Skriftlig Eksamen Beregnelighed (DM517)

Skriftlig Eksamen Beregnelighed (DM517) Skriftlig Eksamen Beregnelighed (DM517) Institut for Matematik & Datalogi Syddansk Universitet Mandag den 7 Januar 2008, kl. 9 13 Alle sædvanlige hjælpemidler (lærebøger, notater etc.) samt brug af lommeregner

Læs mere

Statistik for MPH: oktober Attributable risk, bestemmelse af stikprøvestørrelse (Silva: , )

Statistik for MPH: oktober Attributable risk, bestemmelse af stikprøvestørrelse (Silva: , ) Statistik for MPH: 7 29. oktober 2015 www.biostat.ku.dk/~pka/mph15 Attributable risk, bestemmelse af stikprøvestørrelse (Silva: 333-365, 381-383) Per Kragh Andersen 1 Fra den 6. uges statistikundervisning:

Læs mere

USERTEC USER PRACTICES, TECHNOLOGIES AND RESIDENTIAL ENERGY CONSUMPTION

USERTEC USER PRACTICES, TECHNOLOGIES AND RESIDENTIAL ENERGY CONSUMPTION USERTEC USER PRACTICES, TECHNOLOGIES AND RESIDENTIAL ENERGY CONSUMPTION P E R H E I S E L BERG I N S T I T U T F OR BYGGERI OG A N L Æ G BEREGNEDE OG FAKTISKE FORBRUG I BOLIGER Fra SBi rapport 2016:09

Læs mere

WIO200A INSTALLATIONS MANUAL Rev Dato:

WIO200A INSTALLATIONS MANUAL Rev Dato: WIO200A INSTALLATIONS MANUAL 111686-903 Rev. 1.01 Dato: 10.01.2013 Side 1 af 14 Contents Contents... 2 Introduction... 3 Pin assignment of the terminal box connector for customer... 4 Pin assignment of

Læs mere

Engineering of Chemical Register Machines

Engineering of Chemical Register Machines Prague International Workshop on Membrane Computing 2008 R. Fassler, T. Hinze, T. Lenser and P. Dittrich {raf,hinze,thlenser,dittrich}@minet.uni-jena.de 2. June 2008 Outline 1 Motivation Goal Realization

Læs mere

Cross-Sectorial Collaboration between the Primary Sector, the Secondary Sector and the Research Communities

Cross-Sectorial Collaboration between the Primary Sector, the Secondary Sector and the Research Communities Cross-Sectorial Collaboration between the Primary Sector, the Secondary Sector and the Research Communities B I R G I T T E M A D S E N, P S Y C H O L O G I S T Agenda Early Discovery How? Skills, framework,

Læs mere

DENCON ARBEJDSBORDE DENCON DESKS

DENCON ARBEJDSBORDE DENCON DESKS DENCON ARBEJDSBORDE Mennesket i centrum betyder, at vi tager hensyn til kroppen og kroppens funktioner. Fordi vi ved, at det er vigtigt og sundt jævnligt at skifte stilling, når man arbejder. Bevægelse

Læs mere

Bachelorprojekt. Forår 2013 DMD10

Bachelorprojekt. Forår 2013 DMD10 + Bachelorprojekt Forår 2013 DMD10 +! 1. Om at skrive bachelorprojekt! 2. Typer af bachelorprojekter! 3. To eksempler på DMD-projekter! 4. Overvejelser over samarbejdsformer, proces, sprog! 5. ITUs generelle

Læs mere

LED STAR PIN G4 BASIC INFORMATION: Series circuit. Parallel circuit. www.osram.com 1. HOW CAN I UNDERSTAND THE FOLLOWING SHEETS?

LED STAR PIN G4 BASIC INFORMATION: Series circuit. Parallel circuit. www.osram.com 1. HOW CAN I UNDERSTAND THE FOLLOWING SHEETS? BASIC INFORMATION: 1. HOW CAN I UNDERSTAND THE FOLLOWING SHES? Compatibility to OSRAM s: -Series Circuit... Page 2 -Parallel Circuit... Page 3 Compatibility to OTHER s : -Series Circuit... Page 4 -Parallel

Læs mere

Dumped ammunition - an environmental problem for sediment management?

Dumped ammunition - an environmental problem for sediment management? 5th International SedNet Conference, 27th-29th May 2008, Oslo, Norway Dumped ammunition - an environmental problem for sediment management? Jens Laugesen, Det Norske Veritas Harald Bjørnstad, Forsvarsbygg

Læs mere

Wander TDEV Measurements for Inexpensive Oscillator

Wander TDEV Measurements for Inexpensive Oscillator Wander TDEV Measurements for Inexpensive Oscillator Lee Cosart Symmetricom Lcosart@symmetricom.com Geoffrey M. Garner SAMSUNG Electronics (Consultant) gmgarner@comcast.net IEEE 802.1 AVB TG 2009.11.02

Læs mere

De tre høringssvar findes til sidst i dette dokument (Bilag 1, 2 og 3). I forlængelse af de indkomne kommentarer bemærkes følgende:

De tre høringssvar findes til sidst i dette dokument (Bilag 1, 2 og 3). I forlængelse af de indkomne kommentarer bemærkes følgende: NOTAT VEDR. HØRINGSSVAR København 2018.10.26 BAGGRUND: Kommunalbestyrelsen i Frederiksberg Kommune vedtog den 18. april 2016 at igangsætte processen omkring etablering af et fælles gårdanlæg i karré 41,

Læs mere

BILAG 8.1.B TIL VEDTÆGTER FOR EXHIBIT 8.1.B TO THE ARTICLES OF ASSOCIATION FOR

BILAG 8.1.B TIL VEDTÆGTER FOR EXHIBIT 8.1.B TO THE ARTICLES OF ASSOCIATION FOR BILAG 8.1.B TIL VEDTÆGTER FOR ZEALAND PHARMA A/S EXHIBIT 8.1.B TO THE ARTICLES OF ASSOCIATION FOR ZEALAND PHARMA A/S INDHOLDSFORTEGNELSE/TABLE OF CONTENTS 1 FORMÅL... 3 1 PURPOSE... 3 2 TILDELING AF WARRANTS...

Læs mere

Evaluering af Master in Leadership and Innovation in Complex Systems

Evaluering af Master in Leadership and Innovation in Complex Systems Evaluering af Master in Leadership and Innovation in Complex Systems På masteruddannelsen i Leadership and Innovation in Complex Systems blev der i efteråret 2009 udbudt undervisning i følgende to moduler:

Læs mere

UNISONIC TECHNOLOGIES CO.,

UNISONIC TECHNOLOGIES CO., UNISONIC TECHNOLOGIES CO., 3 TERMINAL 1A NEGATIVE VOLTAGE REGULATOR DESCRIPTION 1 TO-263 The UTC series of three-terminal negative regulators are available in TO-263 package and with several fixed output

Læs mere

Analyseinstitut for Forskning

Analyseinstitut for Forskning Analyseinstitut for Forskning CIS3 The Danish Non-response Analysis Peter S. Mortensen Notat 2003/1 fra Analyseinstitut for Forskning The Danish Institute for Studies in Research and Research Policy Finlandsgade

Læs mere

Sand ell survey December/November 2009

Sand ell survey December/November 2009 Technical University of Denmark Danish Institute for Fisheries Research Survey Cruise leader Date of depart Date of arrival NS Sandeel-survey Dirk C. Tijssen 12/11-2009 05/12-2009 Sand ell survey December/November

Læs mere

How consumers attributions of firm motives for engaging in CSR affects their willingness to pay

How consumers attributions of firm motives for engaging in CSR affects their willingness to pay Bachelor thesis Institute for management Author: Jesper Andersen Drescher Bscb(sustainability) Student ID: 300545 Supervisor: Mai Skjøtt Linneberg Appendix for: How consumers attributions of firm motives

Læs mere

RoE timestamp and presentation time in past

RoE timestamp and presentation time in past RoE timestamp and presentation time in past Jouni Korhonen Broadcom Ltd. 5/26/2016 9 June 2016 IEEE 1904 Access Networks Working Group, Hørsholm, Denmark 1 Background RoE 2:24:6 timestamp was recently

Læs mere

Chlorine dioxide 50 T mg/l ClO 2 DPD / Glycine

Chlorine dioxide 50 T mg/l ClO 2 DPD / Glycine Chlorine dioxide 50 T 0.05-1 mg/l ClO 2 DPD / Glycine 119 Instrument specific information The test can be performed on the following devices. In addition, the required cuvette and the absorption range

Læs mere

GUIDE TIL BREVSKRIVNING

GUIDE TIL BREVSKRIVNING GUIDE TIL BREVSKRIVNING APPELBREVE Formålet med at skrive et appelbrev er at få modtageren til at overholde menneskerettighederne. Det er en god idé at lægge vægt på modtagerens forpligtelser over for

Læs mere

Engelsk. Niveau C. De Merkantile Erhvervsuddannelser September 2005. Casebaseret eksamen. www.jysk.dk og www.jysk.com.

Engelsk. Niveau C. De Merkantile Erhvervsuddannelser September 2005. Casebaseret eksamen. www.jysk.dk og www.jysk.com. 052430_EngelskC 08/09/05 13:29 Side 1 De Merkantile Erhvervsuddannelser September 2005 Side 1 af 4 sider Casebaseret eksamen Engelsk Niveau C www.jysk.dk og www.jysk.com Indhold: Opgave 1 Presentation

Læs mere

to register

to register www.livebidding.com.au to register ON ON PROPERTY RAM SALE LIST THURSDAY 15TH SEPTEMBER 2016 Inspection 9.30 Sale 1pm Glenwood 39R Dilladerry Rd Dubbo Matthew & Cherie Coddington 0438 877286 68877286 rpmerinos@bigpond.com

Læs mere

Exercise 6.14 Linearly independent vectors are also affinely independent.

Exercise 6.14 Linearly independent vectors are also affinely independent. Affine sets Linear Inequality Systems Definition 6.12 The vectors v 1, v 2,..., v k are affinely independent if v 2 v 1,..., v k v 1 is linearly independent; affinely dependent, otherwise. We first check

Læs mere

Coimisiún na Scrúduithe Stáit State Examinations Commission. Leaving Certificate Marking Scheme. Danish. Higher Level

Coimisiún na Scrúduithe Stáit State Examinations Commission. Leaving Certificate Marking Scheme. Danish. Higher Level Coimisiún na Scrúduithe Stáit State Examinations Commission Leaving Certificate 2017 Marking Scheme Danish Higher Level Note to teachers and students on the use of published marking schemes Marking schemes

Læs mere

Midlertidig ændring af vandstand som redskab til vedligeholdelse af lobeliesøer

Midlertidig ændring af vandstand som redskab til vedligeholdelse af lobeliesøer Lake Skærsø, Denmark Midlertidig ændring af vandstand som redskab til vedligeholdelse af lobeliesøer Anna-Marie Klamt, Kasper Reitzel, Frede Ø. Andersen, Henning S. Jensen CLEAR temadag 24 May 2016 Syddansk

Læs mere

Som substrat i forsøgene anvender vi para nitrophenylfosfat, der vha. enzymet omdannes til paranitrofenol

Som substrat i forsøgene anvender vi para nitrophenylfosfat, der vha. enzymet omdannes til paranitrofenol Enzymkinetik Introduktion I disse forsøg skal I arbejde med enzymet alkalisk fosfatase. Fosfataser er meget almindelige i levende organismer og er enzymer med relativt bred substrat specificitet. De katalyserer

Læs mere