[BESØGSSERVICE INSTITUT FOR MOLEKYLÆRBIOLOGI OG GENETIK, AU]
|
|
- Jette Aagaard
- 6 år siden
- Visninger:
Transkript
1 Enzymkinetik INTRODUKTION Enzymer er biologiske katalysatorer i alle levende organismer som er essentielle for liv. Selektivt og effektivt katalyserer enzymerne kemiske reaktioner som ellers ikke ville kunne forløbe med den fornødne hastighed ved de temperaturer værtsorganismerne har. Udover at spille en afgørende rolle for levende organismers stofomsætning er der stor fokus på enzymkatalyserede reaktioner såvel som enzymfremstilling i den industrielle produktion. Formålet med denne øvelse er at illustrere hvorledes undersøgelser af den hastighed hvormed et enzym katalyserer en bestemt biokemisk reaktion kan gribes an. I disse forsøg undersøges enzymet alkalisk fosfatase. For mange af cellens funktioner er balancen mellem fosforylering af udvalgte molekyler via kinaser og defosforylering af molekylerne via fosfataser et afgørende regulatorisk trin. En meget udbredt måde hvorpå proteiners aktivitet kan påvirkes er f.eks. fosforylering af serin,tyrosin og threonin i proteinerne idet mange proteiner har forskellig aktivitet alt efter fosforyleringsstatus. Fosfataser er meget almindelige i levende organismer og alt efter substratspecificitet katalyserer de ikke kun defosforyleringen af proteiner men også af små organiske molekyler f.eks. nukleotider. Alkalisk fosfatase som skal anvendes i denne øvelse har en meget bred substratspecificitet og katalyserer reaktioner af typen: RO PO H 2 O ROH + HOPO 3 2 Når man skal udføre enzymkinetiske forsøg har man brug for at kunne måle enten på forbruget af en af reaktanterne eller dannelsen af et af produkterne i den biokemiske reaktion. I disse forsøg katalyserer alkalisk fosfatase fraspaltningen af fosfat fra et substrat (para nitrophenylfosfat), således at der dannes et produkt (para nitrophenol), der absorberer lys i et bestemt bølgelængdeinterval. Dannelsen af produktet kan altså følges spektrofotometrisk som funktion af tiden. 1
2 Indenfor enzymkinetikken beskrev Michaelis og Menten i 1913 en model hvor omdannelsen af et substrat (S) til et produkt (P) sker i to trin hvor det første trin er karakteriseret ved en binding mellem enzym (E) og substrat og dannelsen af et enzym substratkompleks (ES) mens det andet trin er omdannelsen af substratet til produktet og dissociationen mellem produkt og enzym. Dette kan udtrykkes på følgende måde, hvor k 1, k 1 og k 2 er reaktionernes hastighedskonstanter (k 2 bortfalder da modellen er udledt i starttidspunktet, altså før der er noget produkt): k1 k 2 E + S ES kompleks E + P k 1 Ovenstående kan, sammen med antagelsen om at mængden af ES kompleks er konstant, føre til udledning af følgende ligning kaldet Michaelis Menten ligningen: K M kaldes Michaelis konstanten og er givet ved: V max og K M kan bestemmes ud fra et Michaelis Menten eller et Lineweaver Burke plot: I forsøgene skal følgende undersøges: Forsøg 1: Reaktionens tidsforløb a) med enzym og b) uden enzym Forsøg 2: Påvirkning af enzymaktiviteten med EDTA Forsøg 3: Reaktionshastighedens afhængighed af enzym koncentrationen Forsøg 4: Reaktionshastighedens afhængighed af substrat koncentrationen samt bestemmelse af V max og K M Forsøg 5: Enzymaktivitetens afhængighed af ph 2
3 ARBEJDSREGLER Der skal anvendes kittel i laboratoriet. Der anvendes engangs handsker ved kontakt med kemikalier. Skift tips hver gang der pipetteres en ny opløsning for at undgå kontaminering. Overtøj og tasker er ikke tilladt i laboratoriet men skal efterlades i garderoben eller seminarrummet. Indtagelse af mad og drikke i laboratoriet er strengt forbudt. Sorte affaldssække bruges til almindeligt affald mens affald med kemikalierester såsom pipettespidser og plastik kuvetter kommes i de små affaldsbeholdere på bordene (mærket H waste). UDSTRYR I Mol X Lab bruges der 3 slags pipetter: P20 dækker volumenområdet 2 20µL P200 dækker volumenområdet µL P1000 dækker volumenområdet µL I Mol X Lab anvendes UV 1600PC spektrofotometre. Et spektrofotometer består grundlæggende af en lyskilde hvor bølgelængden af det indgående lys kan kontrolleres, en kuvetteholder og en detektor. Lyskilden sender lys med én bestemt bølgelængde gennem en kuvette, indeholdende den opløsning hvoraf absorbansen ønskes bestemt, og detektoren måler hvor stor en del af det indgående lys der absorberes i prøven. Absorbansen af en opløsning er proportional med opløsningens molare koncentration (c) samt lysvejen (l) og er givet ved Lambert Beers lov: Spektrofotometeret måler lysabsorptionen givet ved A=log(I 0 /I) A=Ɛ λ c l Ɛ λ : ekstinktionskoefficienten (M 1 cm 1 ) Det vil sige at for en prøve hvor 50% af lyset absorberes vil A=log(100/50)= % af lyset absorberes vil A=log(100/10)= % af lyset absorberes vil A=log(100/1)=2.000 I 0 : Lysintensitet efter passage af referenceopløsning I: Lysintensitet efter passage af opløsning med absorberende stof MATERIALER Buffer (0.1M Tris ph 8.3), alkalisk fosfatase (0.25mg/ml), para nitrophenylfosfat (5mM i alle forsøg desuden også 0.5mM i forsøg 4, Mw=371 g / mol )), EDTA (0.1M). Til forsøg 5 anvendes yderligere 0.1M Tris buffer med ph på henholdsvis ph 6.0, ph 7.1 samt ph
4 FORKORTELSER ALP (alkaline phosphatese=alkalisk fosfatase), NPP (nitrophenylphosphate=nitrophenylfosfat) (absorbansen ved 410 nm) FREMGANGSMÅDE Inden forsøgene startes Som forberedelse til øvelsen indstilles spektrofotometret til måling ved 410 nm og nulstilles (tryk på knappen zero ) med 1000µL referenceopløsning (Tris buffer ph 8.3). Desuden skal der bruges mange 2x2cm stykker parafilm i øvelsen så det er en god idé at starte med at klippe en betragtelig mængde af disse. Forsøg 1a: Tidsforløb af reaktion med enzym Pipetter 880µL Tris buffer ph 8.3 ned i en plast kuvette og dernæst 100µL NPP. Dæk mundingen af kuvetten med et stykke parafilm, sæt tommelfingeren på så parafilmen slutter tæt til kuvetten og vend den 4 5 gange for at blande indholdet. Sæt kuvetten i spektrofotometeret uden parafilm, luk låget og mål absorbansen ved 410 nm (). Noter resultatet i skema 1a ved Før 20µL ALP. Den ene person på holdet pipetterer nu 20µL ALP ned i den samme kuvette, sætter parafilm på, blander som før, sætter kuvetten i spektrofotometeret og lukker låget. Med lidt øvelse kan dette gøres på under 15 sekunder. I det øjeblik ALP pipetteres ned i kuvetten starter den anden person på holdet stopuret. Nu er enzymreaktionen i gang og efter 30s tages den første aflæsning af. Målingerne fortsættes hvert 15. sekund de første 2 min. Derpå hvert minut frem til 10 min. Skema 1a Tris buffer 880µL NPP (5mM) 100µL ALP 20µL Tid Før 20µL ALP Tid (efter ALP) 30s 45s 60s 75s 90s 105s 120s 3 min 4 min 5 min 6 min 7 min 8 min 9 min 10 min 4
5 Forsøg 1b: Tidsforløb af reaktion uden enzym Forsøget udføres som forsøg 1a (i en ny kuvette), men i stedet for at tilsætte 20µL ALP tilsættes 20µL Tris buffer ph 8.3 og der tages kun målinger de første 2 min. Skema 1b Tris buffer 880µL NPP (5mM) 100µL Tris buffer 20µL Tid Før 20µL Tris 30s 45s 60s 75s 90s 105s 120s Forsøg 2: Påvirkning af enzymaktiviteten med EDTA EDTA er en forbindelse, der kan binde divalente metalioner, såsom Zn 2+, meget kraftigt. Det vil sige at EDTA kan fjerne Zn 2+ fra enzymer der har en sådan cofaktor bundet. Forsøget udføres ved først at blande Tris buffer ph 8.3 og EDTA i en kuvette. Først derefter tilsættes ALP og blandingen tillades nu at reagere i mindst 10 min, hvorefter måles. Noter resultatet i skema 2 ved Før NPP. Så tilsættes NPP (5mM), kuvetten vendes med parafilm og aflæses som i de andre forsøg. Følg skemaet nedenfor. Her kan forsøg 3 med fordel påbegyndes/laves i ventetiden på minimum 10 minutter. Skema 2 Tris buffer 780µL EDTA 100µL ALP 20µL NPP (5mM) 100µL Tid Før NPP 30s 45s 60s 75s 90s 105s 120s V( /min) 5
6 Forsøg 3: Reaktionshastighedens afhængighed af enzymets koncentration Forsøget udføres som i forsøg 1. Der måles i 120s på tre separate blandinger med varierende ALP koncentration og med Tris buffer ph 8.3. Se mængder i tabellen nedenfor. Skema Tris buffer 880µL Tris buffer 890µL Tris buffer 895µL NPP (5mM) 100µL NPP (5mM) 100µL NPP (5mM) 100µL ALP 20µL ALP 10µL ALP 5µL Tid Tid Tid 30s 30s 30s 45s 45s 45s 60s 60s 60s 75s 75s 75s 90s 90s 90s 105s 105s 105s 120s 120s 120s [ALP] (µg/ml) [ALP] (µg/ml) [ALP] (µg/ml) V( /min) V( /min) V( /min) 6
7 Forsøg 4: Reaktionshastighedens afhængighed af substratets koncentration Inden forsøget startes skal der laves en 1:10 fortynding af NPP så der haves både 5mM NPP (den udleverede) og 0.5mM NPP. Der laves 100µL 0.5mM NPP ved at overføre 10µL 5mM NPP over i nyt eppendorf rør mærket 0.5mM NPP hvortil der tilsættes 90µL Tris buffer ph 8.3 og blandes ved at pipettere op og ned et par gange. Forsøget udføres som i forsøg 1. Der måles også her i 120s, men på 8 forskellige blandinger med varierende substratkoncentration. Tris bufferen har ph 8.3. Skema 4 5 mm NPP 0.5 mm NPP Tris buffer 880µL 930µL 955µL 970µL 955µL 970µL 975µL 978µL NPP(5mM) 100µL 50µL 25µL 10µL 1:10 NPP 25µL 10µL 5µL 2µL (0.5mM) ALP 20µL 20µL 20µL 20µL 20µL 20µL 20µL 20µL Tid 30s 45s 60s 75s 90s 105s 120s [NPP] (µg/ml) V( /min) 7
8 Forsøg 5: Enzymaktivitetens afhængighed af ph Absorbansen for p nitrophenol varierer med ph og for at undgå påvirkning af målingerne fra p nitrophenol/p nitrophenolate balancen kan målingerne foretages under basiske forhold således at alt p nitrophenol er deprotoneret til p nitrophenolate. Der tilsættes i dette forsøg så meget NaOH at alt p nitrophenol er deprotoneret og reaktionen samtidig stoppes, da enzymet hæmmes. Forsøget udføres praktisk næsten som forsøg 1 men i eppendorf rør i stedet for direkte i kuvetten. Pipetter 880µL Tris buffer med relevant ph ned i et eppendorf rør og tilsæt dernæst 100µL NPP. Den ene person på holdet pipetterer nu 20µL ALP ned i eppendorf røret, og i det øjeblik ALP pipetteres ned i røret starter den anden person på holdet stopuret. Sørg for at blande godt ved at pipettere op og ned flere gange, luk låget på eppendorf røret og lad reaktionen stå på bordet i 2 minutter. Ved t=2minutter tilsættes 250µL 1M NaOH (husk at bruge handsker) og husk at blande ved at pipettere op og ned et par gange hvorved reaktionen stoppes. Overfør 1 ml af den stoppede reaktion til en kuvette og mål absorbansen (). Alternativt kan man udføre alle fire reaktioner og dernæst måle absorbansen. Når NaOH er tilsat er reaktionen stoppet og der sker derfor ikke noget hvis der går lidt tid inden målingerne foretages. Ifald man ønsker at nulstille spektrofotometret kan dette gøres med Tris buffer ph 8.3 det er den samme buffer som er brugt i forsøg 1 4. Skema 5 Tris buffer ph ph 6.0 ph 7.1 ph 8.3 ph 9.3 Tris buffer 880µL 880µL 880µL 880µL NPP (5mM) 100µL 100µL 100µL 100µL ALP 20µL 20µL 20µL 20µL V( /min) 8
9 DATABEHANDLING Databehandling til forsøg 1: Tidsforløb af reaktion med enzym Afbild som funktion af tiden. Lav kurverne for forsøg 1a og 1b i samme koordinatsystem. Databehandling til forsøg 2: Påvirkning af enzymaktiviteten med EDTA Afbild som funktion af tiden for dette forsøg. I samme koordinatsystem indtegnes for de første 120s fra forsøg 1a Beregn reaktionshastigheden V for både forsøg 1a og for forsøg 2 som forskellen mellem værdierne ved 90s og 30s. Dette kan udtrykkes som /min. Databehandling til forsøg 3: Reaktionshastighedens afhængighed af enzymets koncentration Afbild de tre måleserier i det samme koordinatsystem med som funktion af tiden. Beregn reaktionshastigheden V som forskellen mellem værdierne ved 90s og 30s ( /min). Beregn enzymkoncentrationerne (c enz ) i de tre prøver. Her beregnes først m enz (m enz = c stam v stam = c før v før ) og dernæst koncentrationen i kuvettens totale volumen (c enz = m enz /V total = m enz /V efter ). Afbild reaktionshastigheden som funktion af enzymkoncentrationen. Databehandling til forsøg 4: Reaktionshastighedens afhængighed af substratets koncentration Beregn reaktionshastigheden V for alle prøver. Beregn substratkoncentrationen i hver prøve. Her beregnes først stofmængden (n) af tilsat substrat (n sub = c stam v stam ) og dernæst koncentrationen i kuvettens totale volumen (c sub = n sub /V total ). Følger reaktionen Michaelis Menten kinetik? Lav et Lineweaver Burk plot og bestem herfra de to konstanter K M og V max. Databehandling til forsøg 5: Enzymaktivitetens afhængighed af ph Beregn reaktionshastigheden V for alle ph værdier 9
[BESØGSSERVICE INSTITUT FOR MOLEKYLÆRBIOLOGI OG GENETIK, AU]
Enzymkinetik INTRODUKTION Enzymer er biologiske katalysatorer i alle levende organismer som er essentielle for liv. Selektivt og effektivt katalyserer enzymerne kemiske reaktioner som ellers ikke ville
Læs mereSom substrat i forsøgene anvender vi para nitrophenylfosfat, der vha. enzymet omdannes til paranitrofenol
Enzymkinetik Introduktion I disse forsøg skal I arbejde med enzymet alkalisk fosfatase. Fosfataser er meget almindelige i levende organismer og er enzymer med relativt bred substrat specificitet. De katalyserer
Læs meremens mange enzymkatalyserede reaktioner er to-substrat reaktioner (2):
KemiF2 Enzymkinetik Trypsin er en serinproteinase, der katalyserer hydrolyse af peptid- og esterbindinger, hvor Arg eller Lys leverer carbonylgruppen. Ved øvelsen bestemmes de kinetiske parameterværdier,
Læs mereBIOZYMER ØVELSE 1 ENZYMKINETIK
BIZYME ØVELE 1 EZYMKIETIK FAGLIG BAGGUD Det forudsættes, at teorien bag enzymer og enzymkinetik er bekendt. ertil kan bl.a. henvises til kapitlet om antibiotika og resistens i Bioteknologiske orisonter,
Læs mereKemi F2- Laboratorieøvelse nr. 9 Ulla Christensen, Biofysisk Kemi ENZYMKINETIK
1 Kemi F2- Laboratorieøvelse nr. 9 Ulla Christensen, Biofysisk Kemi ENZYMKINETIK Formål: Steady state hastighedsmålinger og kinetisk analyse til undersøgelse af enzymkatalyseret reaktion. Der gøres rede
Læs mereMatematiske modeller Forsøg 1
Matematiske modeller Forsøg 1 At måle absorbansen af forskellige koncentrationer af brilliant blue og derefter lave en standardkurve. 2 ml pipette 50 og 100 ml målekolber Kuvetter Engangspipetter Stamopløsning
Læs mereForsøgene udføres ved betingelserne: ph 7.6, 0.1 M phosphatpuffer, ved stuetemperatur.
KemiF2 nzymkinetik Trypsin er en serinproteinase, der katalyserer hydrolyse af peptid- og esterbindinger, hvor Arg eller Lys leverer carbonylgruppen. Ved øvelsen bestemmes de kinetiske parameterværdier,
Læs mereAmalie Avnborg 2.y SRO 18/3-12
Side 1 af 23 SRO for 2. y 2012 Opgaveformulering: Med udgangspunkt i enzymet catecholase, som du har lavet to forsøg med, skal du lave enzymkinetiske undersøgelser. Du skal redegøre for centrale begreber
Læs mereKvantitativ bestemmelse af reducerende sukker (glukose)
Kvantitativ bestemmelse af reducerende sukker (glukose) Baggrund: Det viser sig at en del af de sukkerarter vi indtager med vores mad er hvad man i fagsproget kalder reducerende sukkerarter. Disse vil
Læs mereTitel: OPLØSELIGHEDEN AF KOBBER(II)SULFAT. Litteratur: Klasse: Dato: Ark 1 af. Helge Mygind, Kemi 2000 A-niveau 1, s. 290-292 8/9-2008/OV
Fag: KEMI Journal nr. Titel: OPLØSELIGHEDEN AF KOBBER(II)SULFAT Navn: Litteratur: Klasse: Dato: Ark 1 af Helge Mygind, Kemi 2000 A-niveau 1, s. 290-292 8/9-2008/OV Formålet er at bestemme opløseligheden
Læs mereProduktion af biodiesel fra rapsolie ved en enzymatisk reaktion
Produktion af biodiesel fra rapsolie ved en enzymatisk reaktion produceres fra rapsolie som består af 95% triglycerider (TG), samt diglycerider (DG), monoglycerider (MG) og frie fedtsyrer (FA). Under reaktionen
Læs mereBaggrundsmateriale til Minigame 7 side 1 A + B C + D
Baggrundsmateriale til Minigame 7 side 1 Indhold Kernestof... 1 Supplerende stof... 1 1. Differentialligninger (Baggrundsmateriale til Minigame 3)... 1 2. Reaktionsorden (Nulte-, første- og andenordensreaktioner)...
Læs mereKemiF2 Enzymkinetik. Ved en overfladisk beskrivelse af denne type enzymkatalyseret reaktion, angives reaktionen som (4):
KemiF2 nzymkinetik Trypsin er en serinproteinase, der katalyserer hydrolyse af peptid- og esterbindinger, hvor Arg eller Lys leverer carbonylgruppen. Ved øvelsen bestemmes de kinetiske parameterværdier,
Læs mereFra spild til penge brug enzymer
Fra spild til penge brug enzymer Køreplan 01005 Matematik 1 - FORÅR 2010 Denne projektplan er udarbejdet af Per Karlsson og Kim Knudsen, DTU Matematik, i samarbejde med Jørgen Risum, DTU Food. 1 Introduktion
Læs mereKvantitativ bestemmelse af glukose
Kvantitativ bestemmelse af glukose Baggrund: Det viser sig at en del af de sukkerarter, vi indtager med vores mad, er, hvad man i fagsproget kalder reducerende sukkerarter. Disse vil i en stærk basisk
Læs mereSpm. 1.: Hvis den totale koncentration af monomer betegnes med CT hvad er så sammenhængen mellem CT, [D] og [M]?
DNA-smeltetemperaturbestemmelse KemiF2-2008 DNA-smeltetemperaturbestemmelse Introduktion Oligonucleotider er ofte benyttet til at holde nanopartikler sammen med hinanden. Den ene enkeltstreng er kovalent
Læs mereØvelse: Analyse af betanin i rødbede
Forløb: Smagen af frugt og grønt: Kemimateriale modul 2-8 Aktivitet: Øvelse: Analyse af betanin i rødbede Fag: Kemi Klassetrin: 1. g, 2. g, 3. g Side: 1/14 Øvelse: Analyse af betanin i rødbede Forfattere:
Læs mereØvelse: Chlorofylindholdet i spinat
Forløb: Smagen af frugt og grønt: Kemimateriale modul 2-8 Aktivitet: Øvelse: Chlorofylindholdet i spinat Fag: Kemi Klassetrin: 1. g, 2. g, 3. g Side: 1/6 Øvelse: Chlorofylindholdet i spinat Forfattere:
Læs mereJernindhold i fødevarer bestemt ved spektrofotometri
Bioteknologi 4, Tema 8 Forsøg www.nucleus.dk Linkadresserne fungerer pr. 1.7.2011. Forlaget tager forbehold for evt. ændringer i adresserne. Jernindhold i fødevarer bestemt ved spektrofotometri Formål
Læs mereBilag til Kvantitativ bestemmelse af glucose
Bilag til Kvantitativ bestemmelse af glucose Det synlige formål med øvelsen er at lære, hvorledes man helt præcist kan bestemme små mængder af glucose i en vandig opløsning ved hjælp af målepipetter, spektrofotometer
Læs mereB i o k e m i ø v e l s e 1 Regulatoriske mekanismer i det intermediære stoftskifte Udarbejdet af: Matilda Lantz og Elif Bayram
Regulatoriske mekanismer i det intermediære stoftskifte Udarbejdet af: Matilda Lantz og Elif Bayram Dato: 20. November 2011 Underskrifter: Godkendt: Dato Regulatoriske mekanismer i det intermediære stofskifte
Læs mereDNA origami øvelse 2013. DNA origami øvelse
DNA origami øvelse Introduktion I denne øvelse bruger vi DNA origami teknikken til at samle en tavle af DNA med dimensioner på 70 nm x 100 nm. Tavlen dannes af et langt enkeltstrenget DNA molekyle, der
Læs mereAlgedråber og fotosyntese
Algedråber og fotosyntese Fotosyntesen er en utrolig kompleks proces, som kan være svær at forstå. Heldigvis kan fotosyntesen illustreres på en måde, så alle kan forstå, hvad der helt præcist foregår i
Læs mereTest Canvas: Eksamen i BMB502 Januar 2012
BMB502, Enzymer og membraner, efterår 11. f Tests, Surveys and Pools Tests Test Canvas : Eksamen i BMB502 Januar 2012 Edit Mode is: Test Canvas: Eksamen i BMB502 Januar 2012 Create Reuse Upload s Settings
Læs mereEnergi, Enzymer & enzymkinetik.metabolisme
(gruppeopgaver i databar 152 (og 052)) Energi, Enzymer & enzymkinetik.metabolisme Tirsdag den 17. september kl 13-14.15 (ca) Auditorium 53, bygning 210 Susanne Jacobsen sja@bio.dtu.dk Enzyme and Protein
Læs mereAbstract:... 1. Indledning til opgaven... 3. Introduktion til emnet... 4. Katalase generelt:... 6. Enzymers strukturelle opbygning...
Abstract: This study has been made to describe enzymes, especially their kinetics and structures, and is based on the enzyme catalase. The kinetics has been explained by the Michaelis-Menten-equation and
Læs mere2. del. Reaktionskinetik
2. del. Reaktionskinetik Kapitel 10. Matematisk beskrivelse af reaktionshastighed 10.1. Reaktionshastighed En kemisk reaktions hastighed kan afhænge af flere forskellige faktorer, hvoraf de vigtigste er!
Læs mereDNA origami øvelse. Introduktion. DNA origami øvelse 3 timer 2018
DNA origami øvelse Introduktion I denne øvelse bruger vi DNA origami teknikken til at samle en tavle af DNA med dimensioner på 70 nm x 100 nm. Tavlen dannes af et langt enkeltstrenget DNA molekyle, der
Læs mereBestemmelse af koffein i cola
Bestemmelse af koffein i cola 1,3,7-trimethylxanthine Koffein i læskedrikke Læs følgende links, hvor der blandt andet står nogle informationer om koffein og regler for hvor meget koffein, der må være i
Læs mereEnzymkemi H. C. Ørsted Ungdomslaboratorium Kemisk Institut Københavns Universitet august 2001
Enzymkemi H.. Ørsted Ungdomslaboratorium Kemisk Institut Københavns Universitet august 2001 2 Indholdsfortegnelse Enzymkinetik Indledning...2 Teori:...2 Mekanismen...2 Reaktionshastigheden:...5 Fremgangsmåde:...7
Læs mereDNA origami øvelse DNA origami øvelse
DNA origami øvelse Introduktion I denne øvelse bruger vi DNA origami teknikken til at samle en tavle af DNA med dimensioner på 70 nm x 100 nm. Tavlen dannes af et langt enkeltstrenget DNA molekyle, der
Læs mereDNA origami øvelse DNA origami øvelse
DNA origami øvelse Introduktion I denne øvelse bruger vi DNA origami teknikken til at samle en tavle af DNA med dimensioner på 70 nm x 100 nm. Tavlen dannes af et langt enkeltstrenget DNA molekyle, der
Læs merePCR (Polymerase Chain Reaction): Opkopiering af DNA
PCR (Polymerase Chain Reaction): Opkopiering af DNA PCR til at opkopiere bestemte DNA-sekvenser i en prøve er nu en af genteknologiens absolut vigtigste værktøjer. Peter Rugbjerg, Biotech Academy PCR (Polymerase
Læs mereDialyse og carbamidanalyse
C.12.1 Dialyse og carbamidanalyse Formål: Ved dialyse af en vandig opløsning af proteinet albumin og det lavmolekylære stof carbamid trænes forskellige laboratorieprocedurer (afpipettering, tidtagning,
Læs mereKemi A. Højere teknisk eksamen
Kemi A Højere teknisk eksamen htx111-kem/a-2-19052011 Torsdag den 19. maj 2011 kl. 9.40-14.40 Side 1 af 6 sider Kemi A Ved bedømmelsen lægges der vægt på eksaminandens evne til at løse opgaverne korrekt
Læs mereTemaøvelse i differentialligninger Biokemiske Svingninger
Temaøvelse i differentialligninger Biokemiske Svingninger Rev. 12. november 2009 I denne temaøvelse studerer vi en simpel model for gærglykolyse. Vi starter i Del 1 med at beskrive modellen. Denne model
Læs mereØVELSE 3 ENZYMMÅLINGER OG ENZYMKINETISKE UNDERSØGELSER
27023, Forår 2013 ØVELSE 3 ENZYMMÅLINGER OG ENZYMKINETISKE UNDERSØGELSER Lærer: Maher Abou Hachem, maha@bio.dtu.dk, Tlf. 45252732, Bygning 224, 122 Indholdsfortegnelse: INTRODUKTION... 3 1. Enzymer - definition
Læs mereSkriftlig eksamen i Kemi F2 (Fysisk kemi)
Skriftlig eksamen i Kemi F2 (Fysisk kemi) Tirsdag d. 7 April 2009 Læs først denne vejledning! Du får udleveret to eksemplarer af dette opgavesæt. Kontroller først, at begge hæfter virkelig indeholder 9
Læs mereStudienummer: MeDIS Exam 2015. Husk at opgive studienummer ikke navn og cpr.nr. på alle ark, der skal medtages i bedømmelsen
MeDIS Exam 2015 Titel på kursus: Uddannelse: Semester: Videregående biokemi og medicinudvikling Bachelor i Medis 5. semester Eksamensdato: 26-01-2015 Tid: kl. 09.00-11.00 Bedømmelsesform 7-trin Vigtige
Læs mereØvelse med tarmkræftceller i kultur.
Øvelse med tarmkræftceller i kultur. Baggrund Hver 3. dansker bliver ramt af kræft, inden de er blevet 75 år. Tyktarmskræft er den 3. hyppigste kræftform hos både mænd og kvinder, hvor henholdsvis 7.3
Læs mereOprensning af fructofuranosidase fra gær. Matematik. Kemi. LMFK-bladet, nr. 3, maj
Oprensning af fructofuranosidase fra gær Formål Øvelsens formål er at demonstrere, hvordan et enzym kan ekstraheres fra gær og groft oprenses via gelfiltrering. Desuden bestemmes enzymets aktivitet og
Læs mereAnvendelse af Enzymer i Fødevarer
SRP-øvelse ved Det Natur- og Biovidenskabelige Fakultet, Københavns Universitet Anvendelse af Enzymer i Fødevarer Øvelsesvejledning 2013 Henriette Erichsen, Anni Bygvrå Hougaard, Karsten Olsen og Jeanette
Læs mereBiologisk rensning Fjern opløst organisk stof fra vand
Spildevandscenter Avedøre Biologisk rensning Fjern opløst organisk stof fra vand Øvelse I Formål: På renseanlægget renses et mekanisk, biologisk og kemisk. I den biologiske rensning på renseanlægget benyttes
Læs mereDiffusionsbegrænset reaktionskinetik
Diffusionsbegrænset reaktionskinetik Bimolekylære reaktioner Ved en bimolekylær elementarreaktion afhænger hastigheden såvel af den hyppighed (frekvens), hvormed reaktantmolekylerne kolliderer, som af
Læs mereKemi A. Højere teknisk eksamen
Kemi A Højere teknisk eksamen htx131-kem/a-31052013 Fredag den 31. maj 2013 kl. 9.00-14.40 Kemi A Ved bedømmelsen lægges der vægt på eksaminandens evne til at løse opgaverne korrekt begrunde løsningerne
Læs mereSkriftlig eksamen i Kemi F2 (Fysisk kemi)
Skriftlig eksamen i Kemi F2 (Fysisk kemi) Fredag d 29 januar 2010 Læs først denne vejledning! Du får udleveret to eksemplarer af dette opgavesæt. Kontroller først, at begge hæfter virkelig indeholder 6
Læs mereReaktionskinetik - 1 Baggrund. lineære og ikke-lineære differentialligninger. Køreplan
Reaktionskinetik - lineære og ikke-lineære differentialligninger Køreplan 1 Baggrund På 2. eller 4. semester møder kemi/bioteknologi studerende faget Indledende Fysisk Kemi (26201/26202). Her behandles
Læs mereOlfaktometrisk titrering
Side: 1/8 Olfaktometrisk titrering Forfattere: Henrik Parbo Redaktør: Morten Christensen, Thomas Brahe Faglige temaer: Olfaktometri, ph, Titrering, Thioler Kompetenceområder: Introduktion: Titrering med
Læs mereUndervisningsbeskrivelse
Undervisningsbeskrivelse Stamoplysninger til brug ved prøver til gymnasiale uddannelser Termin Institution Uddannelse Fag og niveau Lærer(e) Termin hvori undervisningen afsluttes: maj-juni 2010 Københavns
Læs mereAlkalisk fosfatase i undervisningen
Alkalisk fosfatase i undervisningen Lars Bjarne Nielsen, Brøndby Gymnasium, Marianne Schou Nielsen og Marie Eiland, Køge Gymnasium Kendskab til metoder og teorier inden for bioteknologi fylder mere og
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Navn: Forsøgsvejledning Side 1 af 8 Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA
Læs mereOpgave 1 Slankemidler
Opgave 1 Slankemidler Overvægt er et stigende problem i den vestlige verden, og der er derfor udviklet forskellige slankemidler. Et eksempel på et slankemiddel er Orlistat. Den kemiske struktur af Orlistat
Læs mereEksamensopgaver i kemi b uden bilag (med forbehold for censors godkendelse)
Eksamensopgaver i kemi b uden bilag (med forbehold for censors godkendelse) Jern korrosion 1 redoxreaktioner 1. Metallers generelle egenskaber. Stikord: malm, tilstandsform, formbarhed, bindingstype, kuglepakning,
Læs mereSkriftlig eksamen i Kemi F2 (Fysisk kemi)
Skriftlig eksamen i Kemi F2 (Fysisk kemi) Onsdag 23 Januar 2008 kl. 900 1300 Læs først denne vejledning! Du får udleveret to eksemplarer af dette opgavesæt. Kontroller først, at begge hæfter virkelig indeholder
Læs mereReaktionsmekanisme: 3Br 2 + 3H 2 O. 5Br - + BrO 3 - + 6H + Usandsynligt at alle 12 reaktantpartikler støder sammen samtidig. ca.
Reaktionsmekanisme: 5Br - + BrO 3 - + 6H + 3Br 2 + 3H 2 O Usandsynligt at alle 12 reaktantpartikler støder sammen samtidig ca. 10 23 partikler Reaktionen foregår i flere trin Eksperimentel erfaring: Max.
Læs mereLaboratorieforsøg: Phosphats binding i jord
Laboratorieforsøg: Phosphats binding i jord Karina Knudsmark Jessing, ph.d. studerende Jordbunds-og Miljøkemi, Institut for Grundvidenskab Assistent: ph.d. studerende Karin Cederkvist Dias 1 Oversigt over
Læs mereEnzymer og katalysatorer
Enzymer og katalysatorer Niveau: 8. klasse Varighed: 6 lektioner Præsentation: I forløbet Enzymer og katalysatorer arbejdes der med, hvordan den naturlige reaktionshastighed kan ændres ved hjælp af enzymer
Læs mereEr der flere farver i sort?
Er der flere farver i sort? Hvad er kromatografi? Kromatografi benyttes inden for mange forskellige felter og forskningsområder og er en anvendelig og meget benyttet analytisk teknik. Kromatografi bruges
Læs mereSpm. 1.: Hvis den totale koncentration af monomer betegnes med CT hvad er så sammenhængen mellem CT, [D] og [M]?
DNA-smeltetemperaturbestemmelse KemiF2-2008 DNA-smeltetemperaturbestemmelse Introduktion Oligonucleotider er ofte benyttet til at holde nanopartikler sammen med hinanden. Den ene enkeltstreng er kovalent
Læs mereRikke Lund, 3.f Studieretningsprojekt 21/ Reaktionskinetik
Rikke Lund,.f Studieretningsprojekt / Abstract Reaktionskinetik This paper examines the subject reaction kinetics and the factors that can affect the speed of the reaction. We investigate how the reaction
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Navn: Forsøgsvejledning Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA sekvens,
Læs mereVerniers spektrofotometer SPRT-VIS USB 650
Verniers spektrofotometer SPRT-VIS USB 650 Bølgelængdeinterval: 350 nm 1000 nm, nøjagtighed: < 1 nm. Brug Logger Pro s nyeste udgaver (3.6.0 eller 3.6.1). Hent evt. opdateringer fra Verniers hjemmeside
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Forsøgsvejledning Navn: Side 1 af 7 Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA
Læs mereAnalyse af proteiner Øvelsesvejledning
Center for Undervisningsmidler, afdeling København Analyse af proteiner Øvelsesvejledning Formål At separere og analysere proteiner i almindelige fødevarer ved brug af gelelektroforese. Teori Alle dele
Læs mereTeknisk anvisning for marin overvågning
NOVANA Teknisk anvisning for marin overvågning 2.3 Klorofyl a Britta Pedersen H Afdeling for Marin Økologi Miljøministeriet Danmarks Miljøundersøgelser 2.3-1 Indhold 2.3 Klorofyl-a 2.3-3 2.3.1 Formål 2.3-3
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Navn: Forsøgsvejledning Side 1 af 8 Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA-sekvens,
Læs mereForsøgsundervisning i bioteknologi ved gymnasiale uddannelser
Forsøgsundervisning i bioteknologi ved gymnasiale uddannelser Enzymkinetik Nordsjællands biotek fond 24 Forfattere Hans hr. Jensen, Lektor, Frederikssund Gymnasium Ulla hristensen, Kemisk Institut, Københavns
Læs mereKemi A. Studentereksamen. Onsdag den 4. juni 2014. 130512.indd 1 26/02/14 14.00
Kemi A Studentereksamen 2stx141-KEM/A-04062014 nsdag den 4. juni 2014 kl. 9.00-14.00 130512.indd 1 26/02/14 14.00 Side 1 af 10 sider pgavesættet består af 4 opgaver med i alt 16 spørgsmål samt 3 bilag
Læs mereKemi A. Studentereksamen
Kemi A Studentereksamen 1stx101-KEM/A-26052010 nsdag den 26. maj 2010 kl. 9.00-14.00 pgavesættet består af 4 opgaver med i alt 18 spørgsmål samt 3 bilag i 2 eksemplarer. Svarene på de stillede spørgsmål
Læs mereKemi A. Studentereksamen
Kemi A Studentereksamen stx123-kem/a-12122012 nsdag den 12. december 2012 kl. 9.00-14.00 pgavesættet består af 5 opgaver med i alt 17 spørgsmål samt 3 bilag i 2 eksemplarer. Svarene på de stillede spørgsmål
Læs mere1: Kemisk kinetik 1. Du skal gøre rede for kemiske reaktioners hastighed, herunder begrebet reaktionsorden.
1: Kemisk kinetik 1. Du skal gøre rede for kemiske reaktioners hastighed, herunder begrebet reaktionsorden. Du skal gøre rede for eksperimentet: Krystalviolet. Du skal inddrage nogle af stikordene: Reaktionshastighed;
Læs mereForsøgsprotokol til larveforsøg: Tilsætning af 3 dage gamle larver til gødning inficeret med patogene bakterier
Forsøgsprotokol til larveforsøg: Tilsætning af 3 dage gamle larver til gødning inficeret med patogene bakterier Formål: at undersøge udviklingen i mængden af tilsatte patogene bakterier til hønsegødning.
Læs mereSide 1 af 8. Undervisningsbeskrivelse. Stamoplysninger til brug ved prøver til gymnasiale uddannelser. Termin. Maj 2013.
Undervisningsbeskrivelse Stamoplysninger til brug ved prøver til gymnasiale uddannelser Termin Institution Uddannelse Fag og niveau Lærer(e) Maj 2013 Skive Tekniske Gymnasium HTX Kemi B Helle Ransborg
Læs mereBIOZYMER ØVELSE 2 OPRENSNING AF PROTEINER
BIOZYMER ØVELSE 2 OPRENSNING AF PROTEINER FAGLIG BAGGRUND Det forudsættes, at den grundlæggende teori bag rekombinant protein ekspression og proteinopresning er bekendt. For dette henvises til undervisningsmateriale
Læs mereBIOTEKNOLOGI HØJT NIVEAU
STUDETEREKSAME 2006 2006-BT-2 BIOTEKOLOGI HØJT IVEAU Onsdag den 16. august 2006 kl. 9.00 14.00 Sættet består af 1 stor og 2 små opgaver. Alle hjælpemidler tilladt. STOR OPGAVE 1. Myoglobin A. Den røde
Læs mereOpholdstidsfordeling i Kemiske Reaktorer
Opholdstidsfordeling i Kemiske Reaktorer Køreplan 01005 Matematik 1 - FORÅR 2005 Introduktion Strømningsmønsteret i kemiske reaktorer modelleres ofte gennem to ydertilfælde, Ideal stempelstrømning, hvor
Læs mereNitratudvaskning i landbrugsafgrøder
Om forsøget I forsøget skal I analysere jordvand taget op fra jorden under forskellige afgrøder i sædskiftet hos Forsker for en dag. Gennem såkaldte sugeceller, som ligger permanent nedgravet under afgrødernes
Læs mere0 Indhold. Titel: Klorofyl a koncentration. Dokumenttype: Teknisk anvisning. Version: 1
Titel: Klorofyl a koncentration Dokumenttype: Teknisk anvisning Forfattere: Stiig Markager og Henrik Fossing TA henvisninger TA. nr.: M07 Version: 1 Oprettet: 20.12.2013 Gyldig fra: 20.12.2013 Sider: 10
Læs mereDNA smeltepunktsbestemmelse
DNA smeltepunktsbestemmelse Troels Linnet Christine Hartmann Mads Topp 29. november 2006 Resumé DNA smeltepunktet bestemmes teoretisk og praktisk til sammenligning. Ved opvarmning forventes et højere smeltepunkt
Læs mereFysiologi Louise Andersen 1.3, RTG 29/10 2007
Fysiologi Louise Andersen 1.3, RTG 29/10 2007 Indholdsfortegnelse Introduktion Metode... 3 Teori Steptesten... 4 Hvorfor stiger pulsen?... 4 Hvordan optager vi ilten?... 4 Respiration... 4 Hvad er et enzym?...
Læs merekatalysatorer f i g u r 1. Livets undfangelse på et celluært plan.
Fra det øjeblik vi bliver undfanget i livmoderen til vi lukker øjnene for sidste gang, er livet baseret på katalyse. Livets undfangelse sker gennem en række komplicerede kemiske reaktioner og for at disse
Læs mereNoter til kemi A-niveau
Noter til kemi A-niveau Grundlæggende kemi til opgaveregning 2.0 Af Martin Sparre INDHOLD 2 Indhold 1 Kemiske ligevægte 3 1.1 En simpel kemisk ligevægt.................... 3 1.2 Forskydning af ligevægte.....................
Læs mereForsøgene udføres ved betingelserne: ph 7.6, 0.1 M phosphatpuffer, ved stuetemperatur.
KemiF2 nzymkinetik Trypsin er en serinproteinase, der katalyserer hydrolyse af peptid- og esterbindinger, hvor Arg eller Lys leverer carbonylgruppen. Ved øvelsen bestemmes de kinetiske parameterværdier,
Læs mereVejledning. Prøven Opgavesættet består af 4 opgaver med i alt 16 delopgaver. Alle hjælpemidler er tilladt.
Vejledning Prøven Opgavesættet består af 4 opgaver med i alt 16 delopgaver. Alle hjælpemidler er tilladt. Opgavebesvarelsen Din opgavebesvarelse skal afleveres i et samlet dokument. Kildehenvisning Du
Læs mereBIOTEKNOLOGI HØJT NIVEAU
STUDENTEREKSAMEN 2007 2007-BT-1 BITEKNLGI HØJT NIVEAU Torsdag den 31. maj 2007 kl. 9.00 14.00 Sættet består af 1 stor og 2 små opgaver samt 1 bilag i 2 eksemplarer. Det ene eksemplar af bilaget afleveres
Læs mereAtomic force mikroskopi på blodceller
1 Atomic force mikroskopi på blodceller Problemstilling: Problemstillingen eleven bliver sat overfor er: Hvad er atomic force mikroskopi, og hvordan kan det bruges til at studere blodceller på nanometerskala?
Læs mereNitrat sticks AquaChek 0-50 Bilag 3 Nitrat sticks
Notat SEGES P/S SEGES Planter & Miljø Test af måleudstyr til måling af nitrat i drænvand Ansvarlig KRP Oprettet 12-10-2016 Projekt: [3687, TReNDS] Side 1 af 5 Test af måleudstyr til måling af nitrat i
Læs mereTeori Hvis en aminosyre bringes til at reagere med natriumhydroxid, dannes et natriumsalt: NH 2
Øvelser om aminosyrer og peptider Øvelse 2 Identifikation af et aminosyrehydrochlorid Formål Forsøgets formål er at undersøge et af tre forskellige aminosyrehydrochlorider, som udleveres til klassen. Identifikationen
Læs mereKapitel 1 Genteknologi (1/6)
Kapitel 1 Genteknologi (1/6) Transformation FOTO: SØREN LUNDBERG FORMÅL At isolere plasmider fra plasmidbærende bakterier og overføre dem til andre bakterier. TEORI Transformation er den teknik, hvor generne
Læs mereELISA Kvantitativ bestemmelse af human IgA i brystmælk Elevvejledning.
ELISA Kvantitativ bestemmelse af human IgA i brystmælk Elevvejledning. Professionshøjskolen University College Nordjyland Laborantafdelingen 2012 Side 1 Indledning En kvinde føder og bliver mor til sit
Læs mereUNDERSØGELSE AF JORDRESPIRATION
UNDERSØGELSE AF JORDRESPIRATION Formål 1. At bestemme omsætningen af organisk stof i jordbunden ved at måle respirationen med en kvantitative metode. 2. At undersøge respirationsstørrelsen på forskellige
Læs mereMælkesyrebakterier og holdbarhed
Mælkesyrebakterier og holdbarhed Navn: Forsøgsvejledning Mælkesyrebakterier og holdbarhed Formål med forsøget Formålet med denne øvelse er at undersøge mælkesyrebakteriers og probiotikas evne til at øge
Læs mere[H 3 O + ] = 10 ph m [OH ] = 10 poh m K s = 10 pks m K b = 10 pk b. m ph + poh = 14 [H 3 O + ][OH ] = m 2 pk s + pk b = 14 K s K b = m 2
ph = -log [H 3 O + ] poh = -log [OH ] pk s = -log K s pk b = -log K b [H 3 O + ] = 10 ph m [OH ] = 10 poh m K s = 10 pks m K b = 10 pk b m ph + poh = 1 [H 3 O + ][OH ] = 10 1 m 2 pk s + pk b = 1 K s K
Læs mereUndervisningsbeskrivelse
Undervisningsbeskrivelse Stamoplysninger til brug ved prøver til gymnasiale uddannelser Termin Institution Uddannelse Fag og niveau Termin hvori undervisningen afsluttes: maj-juni 2011 Københavns Tekniske
Læs mereUndervisningsbeskrivelse
Undervisningsbeskrivelse Stamoplysninger til brug ved prøver til gymnasiale uddannelser Termin Skoleåret 10/11 Institution Herningsholm Gymnasium, Lillelund vej 21, 7400 Herning Uddannelse Fag og niveau
Læs mereSerietest LCW 510 Klor/Ozon
VIGTIGT NYT! Det aktuelle udgavenummer er nu angivet ved analyseproceduren eller aflæsning. Se venligst punktet Bemærk (se nedenfor). Serietest Princip Oxidationsmidler reagerer med diethyl-p-phenylendiamin
Læs mereForsøg med enzymer. Forsøg med enzymer 1
Forsøg med enzymer 1 Forsøg med enzymer Metabolismen er de levende cellers stofomsætning. De mange processer er oftest katalyseret af enzymer. Nogle af processerne er nedbrydende (biolytiske eller kataboliske),
Læs mereUndervisningsbeskrivelse
Undervisningsbeskrivelse Termin Maj-juni 2014-2016 Institution Erhvervsgymnasiet Grindsted Uddannelse Fag og niveau Lærer(e) Htx Kemi B Anders Mejer Kristensen Hold 23615 Oversigt over gennemførte undervisningsforløb
Læs mereLEKTION 2_ TEKST_ BIOLUMINESCENS. Bioluminescens. Alger der lyser i mørket
Bioluminescens Alger der lyser i mørket Alger bruges som sagt allerede i dag til at producere værdifulde stoffer, der indgår i mange af de produkter, vi køber i supermarkeder, på apoteker og tankstationer.
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Navn: Forsøgsvejledning Side 1 af 8 Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA-sekvens,
Læs mere