DiaSorin S.p.A. Via Crescentino snc Saluggia (VC) - Italy Tel LIAISON HSV-1/2 IgG ([REF] )

Transkript

1 DiaSorin S.p.A. Via Crescentino snc Saluggia (VC) - Italy Tel Ændringer: 4, 6, 11; Sletninger: - LIAISON HSV-1/2 IgG ([REF] ) 1. ANVENDELSE LIAISON HSV-1/2 IgG analysen benytter sig af kemiluminescens immunoassay (CLIA) teknologi til kvalitativ bestemmelse af specifikke IgG antistoffer mod Herpes simplex virus type 1 og/eller 2 (HSV-1 og/eller HSV-2) i humane serum- eller plasmaprøver. Analysen skal foretages på på analyseinstrumenter i LIAISON Analyzer-serien. 2. RESUME AF OG REDEGØRELSE FOR TESTEN Herpes simplex virus (HSV) er et indkapslet virus med et DNA, som rent morfologisk ligner de andre medlemmer af Herpetoviridae familien. Der findes to typer HSV, med forskellige biologiske og epidemiologiske karakteristikker, som kan identificeres med restriktionsenzymer eller antigenanalyser. Begge virustyper forårsager infektioner hos mennesker, som i sværhedsgrad varierer fra lette hudlæsioner til encephalitis. HSV type 1 (HSV-1) rammer normalt øjets slimhinder, munden og ansigtets slimhindesammenføjninger, og det er også den mest almindelige årsag til alvorlig sporadisk encephalitis hos voksne. HSV type 2 (HSV-2) associeres normalt med genitale slimhindelæsioner: Herpes genitalis er i dag den mest udbredte kønssygdom. Forbindelsen mellem infektionsstedet og den involverede HSV type er dog ikke absolut. Efter infektionen forbliver HSV latent i de sensitive ganglier, hvorfra den kan reaktiveres, og på forskellige stimuli forårsage gentagne infektioner, som eventuelt kan resultere i kliniske læsioner. Hyppig reaktivering af HSV infektionen ses tit hos immunkompromitterede patienter. Derfor mener man, at både de cirkulerende antistoffer og celleimmuniteten medvirker til helbredelsen. Kvinder, som smittes med herpes genitalis under graviditeten, har to til tre gange større sandsynlighed for spontan abort eller for tidlig fødsel end gravide kvinder, som ikke er smittet. Aktiv virussekretion i vaginaludflod hos gravide kan forårsage alvorlig kongenit infektion, når barnet passerer vagina. Hvis der er HSV læsioner under fødslen, får 40 til 60% af de nyfødte infektionen. Ved overførsel af HSV infektion til den nyfødte ses høj sygelighed og høj dødelighed, hvis infektionen ikke behandles med det samme. Hos 35% af børn på 5 år og hos 80% voksne på 25 år findes antistoffer mod HSV-1. Da HSV-1 og HSV-2 har fælles determinerende antigener, kan antistoffer mod en virustype give krydsreaktioner med den anden type. Recidive infektioner med begge virustyper ses ofte på trods af cirkulerende antivirale antistoffer. En hurtig og nøjagtig diagnose er uundværlig for at kunne starte en specifik antiviral kemoterapi, og minimisere sygdommens udbredelse. Det første humorale immunsvar på infektionen er syntese af specifikke HSV IgM antistoffer, som kan måles en uge efter infektionen. Det er normalt bevis for nylig eller recidiv infektion. Specifikke IgG antistoffer findes normalt fra to til tre uger efter den primære infektion, men deres titer kan mindske progressivt i løbet af nogle måneder. Ofte har patienter med tilbagefald af sygdommen ikke en forhøjet antistof-titer. Bestemmelse af IgG antistoffer fastsætter patientens immuntilstand og giver serologisk bevis på tidligere HSV smitte. Det kan være en hjælp ved diagnosticering af en nylig HSV infektion (primær eller recidiv), hvis man i senere udtagne prøver finder serumkonversion til HSV-1 eller HSV-2 antistoffer. 3. PROCEDUREPRINCIP Metoden til kvalitativ bestemmelse af specifikke IgG antistoffer mod HSV er et indirekte kemiluminescens immunoassay (CLIA). HSV rekombinante proteiner bruges til coating af de magnetiske partikler (fast fase), og et musemonoklonalt antistof er bundet til et isoluminol-derivat (konjugatet antistof-isoluminol). Under første inkubation bindes antistoffer mod HSV, som findes i kalibratorer, prøver eller kontroller, til den faste fase. Under anden inkubation reagerer det sammensatte antistof med HSV IgG allerede bundet til den faste fase. Efter hver inkubation bliver alt det ubundne materiale fjernet under vaskeproceduren. Derefter tilføjes starter reagenser, som starter en kemiluminescens reaktion. Lyssignalet, og det vil sige mængden af konjugatet antistof-isoluminol, måles med en fotomultiplikator i relative lysenheder (RLU, relative light units), og viser den HSV IgG koncentration, som findes i kalibratorer, prøver eller kontroller. januar 13, :43 am 73 / 80 DA - 200/ ,

2 4. MATERIALER Reagensintegral Magnetiske partikler (2,3 ml) Kalibrator 1 (2,5 ml) Kalibrator 2 (2,5 ml) [SORB] [CAL 1] [CAL 2] Magnetiske partikler coated med HSV rekombinante proteiner, okse serum albumin (BSA), fosfatbuffer, < 0,1% natriumazid. Humant serum/plasma som indeholder lave HSV IgG niveauer, okse serum albumin (BSA), fosfatbuffer, 0,2% ProClin 300 og et gult inert farvestof. Humant serum/plasma som indeholder høje HSV IgG niveauer, okse serum albumin (BSA), fosfatbuffer, 0,2% ProClin 300 og et blåt inert farvestof. Buffer C (2,3 ml) [BUF C] Okse serum albumin (BSA), fosfatbuffer, 0,2% ProClin 300. Prøve fortynding [DIL SPE] Okse serum albumin (BSA), fosfatbuffer, 0,2% ProClin 300 og et gult inert farvestof. (28 ml) Konjugat (23 ml) [CONJ] Musemonoklonale antistoffer mod humant IgG konjugeret med et isoluminol-derivat, okse serum albumin (BSA), fosfatbuffer, 0,2% ProClin 300, konserveringsmidler. Antal test 100 Alle reagenser leveres klar til brug. Reagensernes rækkefølge afspejler beholdernes sammensætning i reagensintegralen. Nødvendige materialer, der ikke medfølger (systemrelaterede) LIAISON XL Analyzer LIAISON Analyzer LIAISON XL Cuvettes ([REF] X0016). LIAISON Module ([REF] ). LIAISON XL Disposable Tips ([REF] X0015). LIAISON XL Starter Kit ([REF] ). LIAISON Starter Kit ([REF] ) eller LIAISON XL Starter Kit ([REF] ). LIAISON Light Check ([REF] ) eller LIAISON Light Check 12 ([REF] ). LIAISON Wash/System Liquid ([REF] ). LIAISON Wash/System Liquid ([REF]F ). LIAISON XL Waste Bags ([REF] X0025). LIAISON Waste Bags ([REF] ). LIAISON Cleaning Kit ([REF] ). Andre påkrævede materialer Kontroller LIAISON HSV-1/2 IgG (negativ og positiv) ([REF] ). 5. ADVARSLER Kun til brug ved in vitro-diagnostik. Alt serum og plasma, som er brugt til fremstilling af kittets komponenter, er blevet undersøgt og har ikke reageret på HBsAg, anti-hcv, anti-hiv-1 og anti-hiv-2. Men da ingen metode med absolut sikkerhed kan udelukke tilstedeværelse af patogene mikroorganismer, bør alt humant materiale betragtes som potentielt inficeret og håndteres som sådant. 6. SIKKERHEDSREGLER Der må ikke spises, drikkes, ryges eller lægges makeup under udførelsen af analysen. Afpipettér ikke med munden. Undgå direkte kontakt med potentielt inficeret materiale ved at bære laboratorietøj, beskyttelsesbriller og engangshandsker. Vask hænderne omhyggeligt efter hver analyse. Undgå at forårsage sprøjt eller aerosol. Alle dråber af biologisk reagens skal fjernes med en opløsning af natriumhypochlorit med 0,5% aktivt chlor, og de anvendte midler skal behandles som inficeret affald. Alle prøver og reagenser med biologisk materiale, som er blevet brugt til analysen, skal betragtes som potentielt smittefarlige. Affaldet skal håndteres forsigtigt og bortskaffes i overensstemmelse med laboratoriets retningslinjer og de lovmæssige bestemmelser, der gælder i hvert land. Alle genbrugelige materialer skal steriliseres på passende vis i overensstemmelse med gældende lovgivning og gængs praksis. Kontroller effektiviteten af sterilisations-/dekontamineringscyklussen. Brug ikke kit eller komponenter efter udløbsdatoen på etiketten. januar 13, :43 am 74 / 80 DA - 200/ ,

3 I henhold til EF-forordning 1272/2008 (CLP) skal farlige reagenser klassificeres og mærkes på følgende måde: REAGENSER: KLASSIFICERING: SIGNALORD: SYMBOLER/PIKTOGRAMMER: [CAL 1], [CAL 2], [BUF C], [DIL SPE], [CONJ] Skin sens. 1 H317 Advarsel GHS07 Udråbstegn FARESÆTNINGER: SIKKERHEDSSÆTNINGER: INDEHOLDER: (kun stoffer fastsat i medfør af artikel 18 i EF-forordning 1272/2008). H317 Kan forårsage allergisk hudreaktion. P261 Undgå indånding af pulver/røg/gas/tåge/damp/ spray. P280 Bær beskyttelseshandsker/beskyttelsestøj/øjenbeskyttelse/ansigtsbeskyttelse. P363 Tilsmudset tøj skal vaskes, før det kan anvendes igen. reaktionsmasse af: 5-chloro-2-methyl-4-isothiazolin-3-one [EF nr ] og 2-methyl-2H -isothiazol-3-one [EF nr ] (3:1) (ProClin 300). I medfør af EF-forordning 1272/2008 (CLP) er [SORB] mærket som EUH210 Sikkerhedsdatablad kan på anmodning rekvireres. Få mere at vide om sikkerhedsdatablade på 7. FORBEREDELSE AF REAGENSINTEGRALEN Følgende vigtige forholdsregler skal nøje overholdes ved håndtering af reagenserne: Resuspension af de magnetiske partikler De magnetiske partikler skal være helt opblandet, før integralen placeres i analyseinstrumentet. Nedenstående fremgangsmåde skal følges for at sikre fuldstændig opblanding af partiklerne: Før forseglingen fjernes fra beholderen, skal det lille kamhjul, som sidder under beholderen med magnetiske partikler, drejes frem og tilbage, indtil suspensionen har skiftet farve til brun. Reagensintegralen rystes forsigtigt og med megen omhu i vandret retning for at sikre opblanding af de magnetiske partikler (undgå skumdannelse). Beholderens bund skal undersøges visuelt for at sikre, at alle sedimenterede magnetiske partikler er opblandet. Hver skillevæg skal tørres omhyggeligt, så al væske fjernes. Hvis det er nødvendigt, kan processen gentages, indtil de magnetiske partikler er fuldstændigt opblandet. Skumdannelse i reagenserne For at sikre optimal ydeevne af integralen, anbefales det at undgå skumdannelse i reagenserne. Det anbefales at anvende følgende fremgangsmåde for at undgå skumdannelse: Før integralen tages i brug, skal reagenserne kontrolleres visuelt, især kalibratorerne (placeret i anden og tredje position i integralen, efter beholderen med magnetiske partikler), for at udelukke forekomst af skum. Hvis der er skum efter opblanding af de magnetiske partikler, skal integralen placeres i instrumentet, mens skummet opløses. Integralen er klar til brug efter lidt tid i instrumentet; de magnetiske partikler bliver omrystet automatisk, mens skummet forsvinder. Placering af integralen i instrumentets reagensområde LIAISON Analyzer Reagensintegralen placeres i instrumentets reagensområde med stregkode etiketten mod venstre, og lad den stå der i 30 min. før den tages i brug. I løbet af denne tid bliver de magnetiske partikler automatisk blandet, og en fuldstændig opblanding opnås. Der henvises til analyseinstrumentets manual ved påfyldning af prøverne og til start af analysen. LIAISON XL Analyzer LIAISON XL Analyzer er udstyret med en intern magnetisk enhed, der sikrer dispersion af mikropartiklerne, før placering af reagensintegralen i instrumentets reagensområde. Der henvises til analyseinstrumentets manual for de tekniske detaljer. a. Reagensintegralen placeres i den specielle holder. b. Lad reagensintegralen stå i den magnetiske enhed i mindst 30 sek. (op til flere minutter). Proceduren gentages, hvis det er nødvendigt. Reagensintegralen placeres i instrumentets reagensområde med etiketten mod venstre, og lad den stå der i 15 min. før den tages i brug. I løbet af denne tid bliver de magnetiske partikler automatisk blandet, og en fuldstændig opblanding opnås. Der henvises til analyseinstrumentets manual ved påfyldning af prøverne og til start af analysen. 8. OPBEVARING OG STABILITET AF REAGENSINTEGRALEN Når reagensintegralen modtages, skal den hele tiden opbevares i lodret stilling for at lette resuspension af de magnetiske partikler. Hvis integralen opbevares forseglet og i lodret stilling, er reagenserne stabile ved 2-8 C indtil udløbsdatoen. Må ikke nedfryses. Reagensintegralen må ikke bruges efter den udløbsdato, som står på kittets etikette og på integralen. Når forseglingen er fjernet, er reagensintegralen stabil i otte uger, hvis den opbevares nedkølet ved 2-8 C eller i analyseinstrumentets reagensområde. januar 13, :43 am 75 / 80 DA - 200/ ,

4 9. INDSAMLING OG FORBEREDELSE AF PRØVERNE Analysen kan foretages på humant serum eller plasma. Som antikoagulans kan man bruge citrat, EDTA og heparin. Udtag venøst blod, lad det koagulere og adskil med det samme serum fra koagel. Prøver med lipæmi, erytrocytrester, opalagtig eller opslæmmet materiale, renses før analysen ved filtrering eller centrifugering. Brug ikke prøvemateriale som er stærkt hæmolyseret eller med udtalt lipæmi, eller prøver med opslæmmet materiale eller klar mikrobiel kontamination. Fjern eventuelle luftbobler inden analysen starter. Hvis analysen foretages indenfor syv dage efter udtagningen, kan prøvematerialet opbevares ved 2-8 C. I modsat fald skal det deles i aliquoter og nedfryses ved 20 C eller en lavere temperatur. Hvis prøvematerialet har været frosset ned, skal det vendes grundigt, før det analyseres. Ni prøver med forskellig reaktivitet er blevet opbevaret i syv dage ved 2-8 C og udsat for fem nedfrysnings- og optøningskredsløb. Resultaterne viste ikke afgørende forskelle. Den nødvendige minimale prøvemængde er 190 μl (40 μl prøvemateriale μl dødvolumen). 10. KALIBRERING Ved test af analyse-specifikke kalibratorer kan værdierne af de fundne relative lysenheder (RLU) justere master kurven. Med hver kalibratoropløsning kan der udføres fire kalibreringen. Rekalibrering i triplikat er obligatorisk, når mindst én af følgende tilstande opstår: Hver gang der bruges et nyt lot (reagensintegral eller starter reagenser). Forrige kalibrering blev foretaget fire uger før. Efter hvert serviceeftersyn af analyseinstrumentet. Hvis kontrolværdierne ligger uden for det forventede grænseområde. LIAISON Analyzer: Kalibratorværdier dokumenteres på stregkoderne på integralens etikette. LIAISON XL Analyzer: Kalibratorværdier dokumenteres i Radio Frequency IDentification transponder (RFID Tag). 11. TESTPROCEDURE For at opnå optimale analyseresultater skal instrumentets manual nøje følges. LIAISON Analyzer. Alle analyseparametrene identificeres ved hjælp af stregkoderne på reagensintegralets etikette. Hvis stregkodeetiketten ikke kan læses af analyseapparatet, kan integralet ikke anvendes. Kasser ikke reagensintegralet, men kontakt DiaSorins lokale tekniske support for at få vejledning. LIAISON XL Analyzer. Alle analyseparametrene identificeres ved hjælp af oplysninger, der er indkodet i reagensintegralets RFID-kode (Radio Frequency IDentification). Hvis RFID-koden ikke kan læses af analyseapparatet, kan integralet ikke anvendes. Kasser ikke reagensintegralet, men kontakt DiaSorins lokale tekniske support for at få vejledning. Analyseinstrumentets arbejdsfunktioner: 1. Distribuere kalibratorer, kontroller eller prøver i reaktionsmodulet. 2. Distribuere coatede magnetiske partikler. 3. Distribuere buffer C. 4. Distribuere prøve fortynding. 5. Inkubere. 6. Vaske med vaskevæsken. 7. Distribuere konjugat i reaktionsmodulet. 8. Inkubere. 9. Vaske med vaskevæsken. 10. Tilsætte starter reagenser og måle det udsendte lys. 12. KVALITETSKONTROL LIAISON kontroller skal analyseres enkeltvis for at vurdere analyseresultaterne. Kvalitetskontrollen skal udføres ved at analysere med LIAISON HSV-1/2 IgG kontroller (a) mindst én gang for hver arbejdsdag, (b) når man bruger en ny reagensintegral, (c) når kittet kalibreres, (d) hver gang der bruges et nyt lot af starter reagenser, (e) ved præstationskontrol af en reagensintegral der har været åben i mere end otte uger, eller i overensstemmelse med de lokale eller krediterede organisationers gældende normer. Kontrolværdierne skal befinde sig indenfor de forventede grænseområder: hver gang én eller begge kontroller ligger uden for disse grænser, skal kalibreringen gentages, og kontrollerne analyseres på ny. Hvis kontrolværdierne efter kalibrering igen ligger uden for de fastsatte grænser, skal analysen gentages med en ny (ubrudt!) kontrolflakon. Hvis kontrolværdierne ligger uden for de forventede grænser, skal patientresultaterne ikke rapporteres. Andre kontrollers resultater skal vurderes m.h.t. kompatibilitet med denne analyse, før de bruges. Det er nødvendigt at fastsætte reference intervallerne på de materialer, som er brugt til kvalitetskontrollen. januar 13, :43 am 76 / 80 DA - 200/ ,

5 13. TOLKNING AF RESULTATER Analyseinstrumentet beregner automatisk HSV IgG niveauerne udtrykt i indeksværdi og klassificerer resultaterne. Der henvises til analyseinstrumentets manual for en mere detaljeret information. Kalibratorer og kontroller kan give forskellige værdier af de fundne relative lysenheder (RLU) eller koncentrationsresultater på LIAISON og LIAISON XL, men patientresultaterne for de to instrumenter svarer til hinanden. Den grænseværdi, som skelner mellem tilstedeværelse og fravær af HSV IgG, har indeksværdien 1. Prøvernes resultater skal tolkes således: Prøver med HSV IgG niveauer under indeksværdien 0,9 klassificeres som negative. Prøver med HSV IgG niveauer mellem indeksværdien 0,9 og 1,1 klassificeres som tvivlsomme. Det anbefales at genanalysere de tvivlsomme prøver, for at få det første resultat bekræftet. Hvis en prøve er positiv ved anden test, skal den betragtes som positiv. Hvis en prøve er negativ ved anden test, skal den betragtes som negativ. Man skal udtage og analysere en anden prøve efter mindst en uge, hvis resultatet fortsat er tvivlsomt. Prøver med HSV IgG niveauer lig med eller over en indeksværdi på 1,1, klassificeres som positive. Et negativt resultat indikerer normalt, at der ikke har fundet smitte sted, men det udelukker ikke med sikkerhed en akut HSV infektion. Man må huske på, at IgG niveauerne er negative de første to til tre uger efter infektionen. Hvis man trods et negativt resultat har mistanke om smitte med HSV, skal man udtage og analysere en anden prøve efter mindst en uge. Serokonversion fra en negativ til en positiv prøve indikerer nylig eller aktuel infektion eller indgivelse af immunglobuliner mod HSV. Ved recidiv herpesinfektion findes der ikke signifikative variationer af antistoftitrene, hverken for HSV-1 virus eller for HSV-2 virus. Et positivt resultat indikerer normalt, at individet er blevet smittet med HSV virus, eller indgivelse af immunglobuliner mod HSV. Testresultaterne rapporteres kvalitativt som positive eller negative for tilstedeværelse af HSV IgG. En diagnose på en infektionssygdom kan ikke formuleres på basis af et enkelt analyseresultat, men skal vurderes sammen med det kliniske billede, diagnoseprocedure og lægens vurdering. LIAISON HSV-1/2 IgG analysen er værdifuld til fastsættelse af voksne seksuelt aktive individers eller gravides immuntilstand mod Herpes simplex virus. Testen kan bruges sammen med analysen LIAISON HSV-2 IgG til at skelne individer med isoleret HSV-1 infektion fra individer med HSV-1 og/eller HSV-2 infektion, som illustreret i følgende tabel. HSV-1/2 IgG resultat HSV-2 IgG resultat Tolkning negativ negativ Ikke smittede individer, negative for HSV-1 IgG og HSV-2 IgG. positiv negativ Isoleret HSV-1 infektion. positiv positiv Isoleret HSV-2 infektion eller associerede HSV-1 og HSV-2 infektioner. 14. BEGRÆNSNINGER VED PROCEDUREN For at få pålidelige resultater skal alle instruktioner nøje overholdes, og man skal rent teknisk håndtere alt korrekt. Bakteriel kontamination af prøverne eller inaktivering med varme kan påvirke analysens resultater. Samme integral må ikke anvendes til begge typer analyseinstrumenter (LIAISON og LIAISON XL). Når integralen er blevet anvendt til én type analyseinstrument, må den kun anvendes til det analyseinstrument, indtil den er brugt op. Af hensyn til sporbarhed som følge af denne anvisning, skal patient follow-up foretages på samme type analyseinstrument (LIAISON eller LIAISON XL) uden at der foretages ændringer eller omrokeringer. 15. KITTETS KARAKTERISTIKA Analytisk specificitet Den analytiske specificitet defineres som metodens evne til alene at bestemme analytten sammen med faktorer, som potentielt interfererer i prøvematricen (f.eks. antikoagulanter, hæmolyse, effekt fra håndtering af prøven) eller krydsreaktioner med potentielt interfererende antistoffer. Interferens. Undersøgelser, som er kontrolleret på potentielt interfererende faktorer, har vist at analysen ikke påvirkes af antikoagulanter (natriumcitrat, EDTA, heparin), hæmolyse (op til 1000 mg/dl hæmoglobin), lipæmi (op til 3000 mg/dl triglycerider) og bilirubinæmi (op til 20 mg/dl bilirubin) eller af gentagen nedfrysning og optøning af prøvematerialet. Krydsreaktioner. Det er en regel, at potentielt krydsreaktive antistoffer ikke interfererer i analysen. De undersøgte antistoffer var: (a) immunglobuliner rettet mod forskellige smitsomme organismer så som hcmv, EBV, VZV, rubella virus, Toxoplasma gondii (b) reumatoide faktor (immunglobuliner mod Fc) Præcision ved brug af LIAISON Analyzer Prøvens repeterbarhed og reproducerbarhed (intra-analysevariation og inter-analysevariation) er fastsat ved hjælp af referenceprøver med forskellige analytkoncentrationer. Den påviste variabilitet har ikke forårsaget fejlagtig klassificering af prøverne. Repeterbarhed A B C D Antal bestemmelser Middel (indeksværdi) 0,16 0,26 5,10 9,70 Standarddeviation 0,023 0,006 0,163 0,233 Variationskoefficient (%) 14,6 2,3 3,2 2,4 Reproducerbarhed B A C D Antal bestemmelser Middel (indeksværdi) 0,14 0,26 3,70 6,10 Standarddeviation 0,014 0,018 0,170 0,329 Variationskoefficient (%) 10,2 7,0 4,6 5,4 januar 13, :43 am 77 / 80 DA - 200/ ,

6 15.3. Præcision ved brug af LIAISON XL Analyzer Prøvens repeterbarhed og reproducerbarhed (intra-analysevariation og inter-analysevariation) er fastsat ved hjælp af referenceprøver med forskellige analytkoncentrationer. Den påviste variabilitet har ikke forårsaget fejlagtig klassificering af prøverne. Repeterbarhed. Repeterbarheden blev vurderet ved at analysere tyve replikanter i samme analysesektion. Repeterbarhed Positiv kontrol Antal bestemmelser Middel (indeksværdi) 0,423 2,06 8,10 10,2 Standarddeviation 0,021 0,076 0,30 0,28 Variationskoefficient (%) 4,9 3,7 3,7 2,8 Minimums værdi (indeksværdi) 0,380 1,93 7,49 9,87 Maksimums værdi (indeksværdi) 0,458 2,26 8,53 10,8 Reproducerbarhed. Der er blevet foretaget tyve replikanter på forskellige datoer (et eller to analysesektioner om dagen), for at vurdere reproducerbarheden. Reproducerbarhed Positiv kontrol Antal bestemmelser Middel (indeksværdi) 0,437 2,00 7,69 9,88 Standarddeviation 0,072 0,11 0,63 0,32 Variationskoefficient (%) 16,4 5,5 8,2 3,3 Minimums værdi (indeksværdi) 0,362 1,70 5,47 9,36 Maksimums værdi (indeksværdi) 0,647 2,19 8,42 10, Diagnostisk specificitet og sensitivitet Diagnostisk specificitet og sensitivitet er blevet vurderet gennem analyse af 268 prøver, som er udvalgt fra forskellige populationer: individer som aldrig var smittet med HSV-1 og HSV-2, patienter med andre infektiøse sygdomme med lignende symtomatologi, individer positive for HSV-1 IgG og negative for HSV-2 IgG, individer negative for HSV-1 IgG og positive for HSV-2 IgG, individer positive for IgG mod HSV-1 og HSV-2. Prøverne er blevet undersøgt med forskellige metoder, og konsensus mellem dem og de tilgængelige kliniske og serologiske data blev brugt til at fastsætte de forventede resultater. I den forventet negative population var 2 prøver positive, en prøve var tvivlsom og 92 prøver negative - diagnostisk specificitet: 96,84% (95% konfidensinterval: 91,05-99,34%). I den forventet positive population var én prøve negativ og 172 prøver var positive - diagnostisk sensitivitet: 99,42% (95% konfidensinterval: 96,82-99,99%). januar 13, :43 am 78 / 80 DA - 200/ ,

7 Ændringer: 2, 4; Sletninger: - LIAISON Control HSV-1/2 IgG ([REF] ) 1. ANVENDELSE LIAISON HSV-1/2 IgG kontroller (negativ og positiv) skal bruges ved LIAISON kemiluminescens immunoassay (CLIA) for at kontrollere analysernes pålidelighed. LIAISON HSV-1/2 IgG kontrollernes præstations karakteristikker er ikke blevet fastsat til andre analyser og instrumentplatforme end LIAISON og LIAISON XL. LIAISON Analyzer. Analysecertifikatet indeholder specifikke oplysninger om lottet af kontroller, der skal indtastes manuelt i analyseinstrumentets program, før kontrolflakonerne indsættes i instrumentet. Der henvises til analyseinstrumentets manual for en mere detaljeret information. LIAISON XL Analyzer. Analysecertifikatets stregkode indeholder specifikke oplysninger om lottet af kontroller. Koden skal aflæses af LIAISON XL Analyzer manuale stregkode læser, før kontrolflakonerne indsættes i instrumentet. Der henvises til analyseinstrumentets manual for en mere detaljeret information. 2. MATERIALER Negativ kontrol (2 x 1,3 ml) Positiv kontrol (2 x 1,3 ml) [CONTROL -] [CONTROL +] Humant serum/plasma ikke reaktivt overfor HSV IgG antistoffer, stabiliseret i PBS buffer, okse serum albumin (BSA), 0,2% ProClin 300. Humant serum/plasma reaktivt overfor HSV IgG antistoffer, stabiliseret i PBS buffer, okse serum albumin (BSA), 0,2% ProClin 300 og et gult inert farvestof. Alle reagenser leveres klar til brug. Det forventede reference interval for hver kontrol står i analysecertifikatet og viser de grænser, der er fastsat af DiaSorin for de mulige kontrolværdier, fundet ved analysering på pålidelig vis. Hvert enkelt laboratorium er ansvarligt for brug af andre grænser for at tilfredsstille specielle behov. 3. ADVARSLER Kun til brug ved in vitro-diagnostik. Kontrollerne er ikke kit lot specifikke. De kan analyseres med lots fra forskellige reagensintegraler. Alle materialer, som er brugt til fremstilling af kittets komponenter, er blevet undersøgt og har ikke reageret på HBsAg, anti-hcv, anti-hiv-1 og anti-hiv-2. Men da ingen metode med absolut sikkerhed kan udelukke tilstedeværelse af patogene mikroorganismer, bør alt humant materiale betragtes som potentielt inficeret og håndteres som sådant. Tag de normale nødvendige forholdsregler ved håndtering af alle laboratoriereagenser. Alt affald skal fjernes i overensstemmelse med de lokale normer. 4. SIKKERHEDSREGLER Der må ikke spises, drikkes, ryges eller lægges makeup under udførelsen af analysen. Afpipettér ikke med munden. Undgå direkte kontakt med potentielt inficeret materiale ved at bære laboratorietøj, beskyttelsesbriller og engangshandsker. Vask hænderne omhyggeligt efter hver analyse. Undgå at forårsage sprøjt eller aerosol. Alle dråber af biologisk reagens skal fjernes med en opløsning af natriumhypochlorit med 0,5% aktivt chlor, og de anvendte midler skal behandles som inficeret affald. Alle prøver og reagenser med biologisk materiale, som er blevet brugt til analysen, skal betragtes som potentielt smittefarlige. Affaldet skal håndteres forsigtigt og bortskaffes i overensstemmelse med laboratoriets retningslinjer og de lovmæssige bestemmelser, der gælder i hvert land. Alle genbrugelige materialer skal steriliseres på passende vis i overensstemmelse med gældende lovgivning og gængs praksis. Kontroller effektiviteten af sterilisations-/dekontamineringscyklussen. Brug ikke kit eller komponenter efter udløbsdatoen på etiketten. I henhold til EF-forordning 1272/2008 (CLP) skal farlige reagenser klassificeres og mærkes på følgende måde: REAGENSER: KLASSIFICERING: SIGNALORD: SYMBOLER/PIKTOGRAMMER: [CONTROL -], [CONTROL +] Skin sens. 1 H317 Advarsel GHS07 Udråbstegn FARESÆTNINGER: SIKKERHEDSSÆTNINGER: INDEHOLDER: (kun stoffer fastsat i medfør af artikel 18 i EF-forordning 1272/2008). H317 Kan forårsage allergisk hudreaktion. P261 Undgå indånding af pulver/røg/gas/tåge/damp/ spray. P280 Bær beskyttelseshandsker/beskyttelsestøj/øjenbeskyttelse/ansigtsbeskyttelse. P363 Tilsmudset tøj skal vaskes, før det kan anvendes igen. reaktionsmasse af: 5-chloro-2-methyl-4-isothiazolin-3-one [EF nr ] og 2-methyl-2H -isothiazol-3-one [EF nr ] (3:1). (ProClin 300). Få mere at vide om sikkerhedsdatablade på HSV-g-da.fm LIAISON Control HSV-1/2 IgG ([REF] ) januar 13, :43 am 79 / 80 DA - 200/ ,

8 5. OPBEVARING OG STABILITET Når kontroller modtages, skal de opbevares ved 2-8 C og stilles lodret, så opløsningen ikke kommer i berøring med flakonhætten. De må ikke nedfryses. Hvis kontroller opbevares forseglet i lodret stilling er de stabile ved 2-8 C indtil udløbsdatoen. Når forseglingen er fjernet er kontrollerne stabile i otte uger, hvis de opbevares nedkølet ved 2-8 C mellem to på hinanden følgende brug. Undgå kontamination med bakterier. Kontroller må ikke bruges efter den udløbsdato, som står på flakonernes etikette. 6. REAGENSFORBEREDELSE Placer kontrolflakonerne i C-rack'et på analyseinstrumentet. Med hver kontrolopløsning kan der udføres mindst 20 analyser. Det nødvendige minimumvolumen er 440 μl (40 μl kontrol μl dødvolumen). Når kontrollerne skal bruges, bringes de til stuetemperatur (20-25 C), før de åbnes. De må kun stå i analyseinstrumentets prøveområde, den tid det tager at udføre kvalitetskontrollen. Efter brug skal kontrolflakoner lukkes korrekt hurtigst muligt og opbevares lodret ved 2-8 C. Når kontrollerne håndteres, skal de rette forholdsregler tages, så man undgår mikrobiel kontamination af kontrollerne. 7. HÅNDTERING Der henvises til analyseinstrumentets manual for korrekt håndtering. 8. FORVENTEDE VÆRDIER Kontrollernes HSV IgG koncentrationers områder står i analysecertifikatet. De er blevet fastsat efter vurdering af analyseforløbets variabilitet i forhold til den opmagasinerede masterkurve, så man sikrer analyseresultaterne nøjagtighed og får indikationer vedrørende reagensernes stabilitet eller forringelse. Hvis kontrollernes værdier gentagne gange ligger uden for det forventede område, er det meget sandsynligt, at analysen er udført forkert. HSV-g-da.fm LIAISON Control HSV-1/2 IgG ([REF] ) januar 13, :43 am 80 / 80 DA - 200/ ,