Oprensning af fructofuranosidase fra gær. Matematik. Kemi. LMFK-bladet, nr. 3, maj
|
|
- Vilhelm Sørensen
- 6 år siden
- Visninger:
Transkript
1 Oprensning af fructofuranosidase fra gær Formål Øvelsens formål er at demonstrere, hvordan et enzym kan ekstraheres fra gær og groft oprenses via gelfiltrering. Desuden bestemmes enzymets aktivitet og proteinmængden både før og efter oprensningen. Teori Enzymet -fructofuranosidase kaldes også invertase, saccharase, sucrase, -fructosidase, -D-fructofuranosidase eller -D-fructofuranosidfructohydrolase. Mange enzymer har mange navne, men de har også et unikt nummer, så man entydigt kan tale om dem. -fructofuranosidase har nummeret E Nummeret fremkommer således: E. 3 ydrolaser, hydrolyserer bindinger. E.3.2 Glycosylaser, virker på glycosidbinding, bindinger fra en glucoseenhed. E Glycosidaser, virker på bindinger fra et O-atom på en glucoseenhed. E fructofuranosidase, virker på bindinger fra fructofuranose. Enzymet katalyserer bl.a. hydrolysen af saccharose, almindeligt sukker, hvorved der dannes glucose og fructose, se figuren øverst næste side. Enzymet findes vidt udbredt i naturen, og det kan let isoleres fra gær, hvor det sidder i cellevæggen uden for plasmamembranen. Det er et glycoprotein med en molvægt på ca D. D et står for Dalton, som er en vægtenhed, der er meget tæt på g/mol. LMFK-bladet, nr. 3, maj
2 2 O O O O 2 O O 2 2 O O + O 2 O O 2 -D-fructofuranosyl- -D-glucopyranosid = Saccharose -D-glucopyranose = glucose -D-fructofuranose = fructose For at få fat i -fructofuranosidase homogeniserer vi gærcellerne omhyggeligt i en pufferopløsning og lader dem stå ved 40 i et døgn. erved sker der autolyse, hvor cellerne nedbrydes af deres egne enzymer. ellerester kan så centrifugeres fra, og de vandopløselige enzymer kan herefter findes i bufferen. Enzymoprensning består normalt af mange oprensningstrin for at få et rent produkt. Vi foretager dog kun et enkelt trin, nemlig gelfiltrering. For at oprense enzymet vil vi anvende gelfiltrering på Sephadex geler, hvor molekyler adskilles efter størrelse. Sephadex er fremstillet af stærkt forgrenede polysaccharider kaldet dextraner. Dextranerne er kemisk krydsbundet vha. epoxidet af allylchlorid, hvorved der dannes porøse kugler. G-10 og G-25 geler anvendes typisk til afsaltning af proteinopløsninger, mens G-50 til G200 geler anvendes til separation af større molekyler. Enhver geltype har et karakteristisk separationsområde, f.eks. kan en G-25 separere molekyler med molvægt større en D og mindre end D. Forbindelser med molvægt større eller mindre end dette separeres ikke: Separation af molekyler med forskellige molvægte (M w ). A: Alle stoffer med M w > øvre grænse. B1 og B2: stoffer med M w inden for separationsområdet. : Alle stoffer med M w < nedre grænse. I øvelsen anvender vi Sephadex G-75 med separationsområde D. Det betyder, at -fructofuranosidase vil befinde sig i fraktion A. Separationen skyldes, at små molekyler trænger langt ind i porerne, mens de store molekyler slet ikke kan trænge ind. Man kan f.eks. illustrere det som vist på følgende figur. Brudstykke af Sephadex struktur, hvor man kan se, hvordan krydsbindinger er dannet. Krydsbindingsgraden angives med tal fra G-10 til G-200, hvor det mindste tal angiver den største krydsbindingsgrad og dermed de mindste porer. Model af en Sephadex kugle 40 LMFK-bladet, nr. 3, maj 2009
3 Sephadexkuglerne pakkes i en søjle. Når en blanding af små og store molekyler påsættes søjlen, vil de store molekyler, der ikke trænger ind i kuglerne, elueres (udvaskes) først, mens de små molekyler, der forsinkes ved passagen gennem gelporerne, vil elueres senere. Eluering af en gelfiltreringssøjle Protein- og aktivitetsbestemmelse Enzymaktiviteten og proteinmængden måles før og efter gelfiltreringen. Generelt bør proteinmængden falde for hvert oprensningstrin, mens enzymaktiviteten helst skal være konstant som tegn på, at enzymet ikke tabes, men andre proteiner bliver skilt fra. Man kan få et mål for proteinmængden ved at måle opløsningens absorbans ved 280 nm. er absorberer de aromatiske aminosyrer. Da indholdet af disse aminosyrer varierer fra protein til protein, kan det være vanskeligt at bestemme en præcis koncentration. I dette forsøg er vi imidlertid blot interesseret i at finde ud af, om proteinindholdet falder ved oprensningen. Enzymaktiviteten bestemmes også spektrofotometrisk. Enzymet får lov til at virke på saccharose i en passende tid. Den dannede mængde monosaccharid kan bestemmes ved reduktion af 3,5-dinitrosalicylat til en farvet forbindelse, der absorberer ved 540 nm. For glucose ser reaktionen ud, som vist på figuren nederst på siden: Fructose reducerer også reagenset, men reaktionen er mere kompliceret. Ud fra standardopløsninger med kendte mængder glucose og fructose kan man lave en standardkuve, der kan bruges til at bestemme enzymaktivteten i en ukendt prøve. For at kunne regne med resultatet er det vigtigt, at enzymet arbejder med maksimal hastighed. vis substratkoncentrationen er for lav, får man en for lav værdi for enzymaktivteten. vis substratkoncentrationen er for høj, kan det imidlertid hæmme enzymet. Man må altså lave flere forsøg med varierende enzym/substratforhold for at være sikker på at ramme et optimalt forhold. Enzymaktiviteten udtrykkes som den mængde substrat, der kan omdannes pr. tid. Det betyder, at den får enheden mol/s. Det kaldes også katal eller blot kat. Enzymets renhedsgrad kaldes også den specifikke enzymaktivitet. Det udtrykkes som den mængde substrat, der kan omdannes pr.. tid i forhold til proteinmængden. Dvs. den får enheden kat/kg eller oftere kat/mg. Den specifikke enzymaktivitet bør øges gennem oprensningen af enzymet. Materialer Udstyr Gelfiltreringssøjle Sephadex G75 Varmeplade Bægerglas Reagensglas med propper Pipetter Finpipetter Spektrofotometer Kuvetter Kvartskuvette Blender O O - 2 O O - + O N N O O O O Reaktion mellem glucose og 3,5-dinitrosalicylat. - 2 O- O O + 2 N O O - O - N O O LMFK-bladet, nr. 3, maj
4 entrifuge Måleglas Vandbad 40 Vat kalier 0,1 M acatatpuffer p 4,8 0,5 M saccharose opløsning Frisk 3,5-dinitrosalicylatreagens. Den laves af 1,0 g 3,5-dinitrosalicylsyre, 1,0 g natriumkaliumtartrat og 100 ml 0,4 M Na. Der kan være problemer med, at koncentrationen er for lav til et synligt resultat. Det skyldes formentlig gamle kemikalier. Stamopløsning af 2,5 mm fructose og 2,5 mm glucose. Metode Fremstilling af råekstrakt (fælles) Skal ske mindst 24 timer før selve forsøget g gær blendes omhyggeligt i 50 0,1 M acetatpuffer p 4,8. 2. Tilsæt yderligere 50 ml acetatpuffer og hæld det i en konisk kolbe. Luk med en vattot og anbring kolben i vandbad ved 40 i 24 timer til autolyse. 3. Suspensionen centrifugeres ved 3000 rpm i 30 min for at fjerne cellerester. Supernatanten (den ovenstående væske) dekanteres straks fra og opbevares i en brun flaske. 4. Råekstraktet kan gemmes ved 4 og er holdbar i ca. 3 uger. Gelfiltrering, kan evt. laves i fællesskab af to grupper 1. Der anvendes en Sephadex G-75 søjle på ca. 15 cm, lavet i en burette og ækvilibreret med 0,1 M acetatpuffer p 4,8. Dvs. søjlematerialet er omgivet af acetatbuffer. 2. Der påsættes forsigtigt 2 råekstrakt med en pipette. Elueringshastigheden skal være 1,1 pr. minut, hvilket ca. svarer til den hastighed, væsken naturligt siver igennem med. 3. Der opsamles fraktioner på 3 i små reagensglas. Opsaml ca. 20 fraktioner. Sørg for hele tiden forsigtigt at tilsætte acetatbuffer til søjlen, så den ikke løber tør. Proteinbestemmelse 4. Mål absorptionen ved 280 nm på alle fraktioner. Brug acetatpuffer som reference. Brug en kvartskuvette. Pas på den, da den er meget dyr. Smid ikke prøverne ud bagefter! 5. Mål absorptionen ved 280 nm på råekstraktet. vis målingen er meget over 1 må prøven fortyndes med acetatpuffer. Fremstilling af standardkurve. Skal foregå i stinkskab 1. Lav et vandbad og opvarm til kogning. 2. Bland stamopløsning, vand og saccharose i 6 reagensglas ifølge nedenstående skema. Vent med 3,5-dinitrosalicylat reagens til sidst. Bland godt efter hver tilsætning. Se tabel Efter tilsætning af 3,5-dinitrosalicylat reagens anbringes glassene på kogende vandbad i 5 minutter. Reaktionsblandingen skal være helt dækket af vandbadet. 4. Tilsæt 5 vand til hvert glas, og afkøl det hurtigt under den kolde hane. Omryst godt. 5. Mål absorbansen ved 540 nm på spektrofotometeret. Brug almindelige plastikkuvetter. Genbrug kuvetten, men skyl med demineraliseret vand mellem hver måling. Nulstil på referenceglasset. Aktivitetsbestemmelse på råekstrakt. Skal foregå i stinkskab 1. Lav et vandbad og opvarm til kogning μl råekstrakt fortyndes med 5,00 vand. 3. Bland råekstrakt, vand og acetatpuffer i 4 regensglas efter nedenstående skema. Bland godt og lad glassene stå i 5 minutter ved stuetemperatur. Se tabel Start reaktionen med 30 sekunders interval ved tilsætning af 1,00 0,50 M saccharose til de fire glas. Ryst godt og inkuber ved stuetemperatur i præcis 15 minutter. 5. Reaktionen stoppes straks ved tilsæt ning af 2,00 3,5-dinitrosalicylatreagens og omrystning. 6. Sæt reagensglassene på kogende vand bad i 5 minutter. Reaktionsblandingen skal være helt dækket af vandet. 42 LMFK-bladet, nr. 3, maj 2009
5 Glas Stamopløsning l Vand Saccharose 0,5 M 3,5-dinitrosalicylat reagens Stofmængde Glucose + fructose Ref , ,00 1, ,00 2, ,00 3, ,00 4, ,00 5,0 Tabel 1 Glas Fort. råekstrakt Enzymopløsning Vand Acetatpuffer Substrat Saccharose 0,5 M Ref. 0 2,00 1,00 1, ,80 1,00 1, ,60 1,00 1, ,40 1,00 1,00 Tabel 2 Enzymopløsning Substrat Fort. fraktion Vand Acetatpuffer Saccharose Glas Fraktion 0,5 M 1 Reference 0 2,00 1,00 1, Eget valg 600 1,40 1,00 1,00 Tabel 3 7. Stop reaktionen ved at tilsætte 3,00 vand og afkøl under den kolde hane. Omryst godt. 8. Mål absorbansen ved 540 nm. Brug almindelige plastikkuvetter. Genbrug kuvetten, men skyl med demineraliseret vand mellem hver måling. Nulstil på referencen. Gem referencen til nulstilling senere. Aktivitetsbestemmelse på den oprensede ekstrakt. Skal foregå i stinkskab 1. Lav vandbad og opvarm til kogning. 2. Udvælg fem af de første fraktioner hvor der er absorbans ved 280 nm. Udtag 500 og fortynd med 9,50 vand. Ryst godt. 3. Fyld fem reagensglas med fortyndet frak tion, vand og acetatpuffer. Se tabel 3. LMFK-bladet, nr. 3, maj
6 Glas nr. 2,5 mm fructose + 2,5 mm glucoese l Standardkurve Stofmængde Fructose + glucose mol Blind 0 0 Målt absorbans , , , , ,0 Tabel 4 Bestemmelse af enzymaktivitet i råekstrakt Glas nr. l fortyndet råekstrakt Målt absorbans Aflæst konc. af dannet fruktose + glucose mol/ Konc. af dannet fruktose + glucose i ufortyndet råekstrakt mol/ Enzym aktivitet i ufortyndet råekstrakt kat/ Specifik enzym aktivitet kat// protein mængde Ref , , ,818 Tabel 5 4. Fremgangsmåden er herefter som beskrevet under aktivitetsbestemmelse på råekstrakt. Resultater og resultatbehandling Tegn en kurve, der viser absorptionen ved 280 nm som funktion af fraktionerne. Koncentrationen af dannet fruktose + glucose i ufortyndet råekstrakt findes således: Aflæs koncentrationen på standardkurven. Koncentrationen af dannet glucose og fructose findes vha. formlen: 7 c fruktose + glucose = c aflæst V 25 fortyndet råekstrakt Der ganges med 0,007, da det er volumenet af de målte prøver. Der ganges med 25, da prøverne er fortyndet 25 gange. Der divideres med volumenet af det fortyndede råekstrakt i Enzymaktiviteten i μkat pr. (mol omdannet substrat pr. s pr. ) fås således: μkat = ½ c fruktose + glucose 15 min 60 s min Substratkoncentrationen (koncentrationen af sakkarose) er det halve af koncentrationen af fruktose + glucose, derfor ganges der med ½. 44 LMFK-bladet, nr. 3, maj 2009
7 Bestemmelse af enzymaktivitet på udvalgte fraktioner Fraktion nr. Målt absorbans Aflæst konc. af dannet fruktose + glucose mol/ Konc. af dannet fruktose + glucose i ufortyndet frakton mol/ Enzymaktivitet i ufortyndet fraktion kat/ Tabel 6 Den specifikke enzymaktivitet i μkat pr. pr. enzym mængde findes ved at dividere enzymaktiviteten med den målte absorbans ved 280 nm. Koncentrationen findes således: Aflæs koncentrationen på standardkurven. Koncentrationen af dannet glucose + fructose findes vha. formlen: c fruktose + glucose = c aflæst 7 0,6 20 Der ganges med 7, da det er volumenet af de målte prøver. Der divideres med 0,6 da det er volumenet af fortyndet fraktioner. Der ganges med 20, da prøverne er fortyndet 20 gange. Enzymaktiviteten i μkat pr. (mol omdannet substrat pr. s pr. ) fås således: Substratkoncentrationen (koncentrationen af sakkarose) er det halve af koncentrationen af fruktose + glucose, derfor ganges der med ½. Den specifikke enzymaktivitet i μkat pr. pr enzymmængde findes ved at dividere enzymaktiviteten med den målte absorbans ved 280 nm. Diskussion Kommenter alle resultater. Forklar gelfiltrering med egne ord, og forklar, hvordan det virker i vores tilfælde. Forklar hvordan du finder enzymaktiviteten og den specifikke enzymaktivitet (renhedgraden). Forklar også, hvad de er et udtryk for. LMFK-bladet, nr. 3, maj
Kvantitativ bestemmelse af reducerende sukker (glukose)
Kvantitativ bestemmelse af reducerende sukker (glukose) Baggrund: Det viser sig at en del af de sukkerarter vi indtager med vores mad er hvad man i fagsproget kalder reducerende sukkerarter. Disse vil
Læs mereKvantitativ bestemmelse af glukose
Kvantitativ bestemmelse af glukose Baggrund: Det viser sig at en del af de sukkerarter, vi indtager med vores mad, er, hvad man i fagsproget kalder reducerende sukkerarter. Disse vil i en stærk basisk
Læs mereJernindhold i fødevarer bestemt ved spektrofotometri
Bioteknologi 4, Tema 8 Forsøg www.nucleus.dk Linkadresserne fungerer pr. 1.7.2011. Forlaget tager forbehold for evt. ændringer i adresserne. Jernindhold i fødevarer bestemt ved spektrofotometri Formål
Læs mereBilag til Kvantitativ bestemmelse af glucose
Bilag til Kvantitativ bestemmelse af glucose Det synlige formål med øvelsen er at lære, hvorledes man helt præcist kan bestemme små mængder af glucose i en vandig opløsning ved hjælp af målepipetter, spektrofotometer
Læs mereSom substrat i forsøgene anvender vi para nitrophenylfosfat, der vha. enzymet omdannes til paranitrofenol
Enzymkinetik Introduktion I disse forsøg skal I arbejde med enzymet alkalisk fosfatase. Fosfataser er meget almindelige i levende organismer og er enzymer med relativt bred substrat specificitet. De katalyserer
Læs mereDNA origami øvelse 2013. DNA origami øvelse
DNA origami øvelse Introduktion I denne øvelse bruger vi DNA origami teknikken til at samle en tavle af DNA med dimensioner på 70 nm x 100 nm. Tavlen dannes af et langt enkeltstrenget DNA molekyle, der
Læs mereGæringsprocessen ved fremstillingen af alkohol tager udgangspunkt i glukose molekylet (C
Molekyler af alkohol Byg molekylerne af forskellige alkoholer, og tegn deres stregformler Byg alkoholmolekyler med 1, 2 og 3 C atomer og 1 OH gruppe. Tegn deres stregformler her og skriv navnet ved. Byg
Læs mereDialyse og carbamidanalyse
C.12.1 Dialyse og carbamidanalyse Formål: Ved dialyse af en vandig opløsning af proteinet albumin og det lavmolekylære stof carbamid trænes forskellige laboratorieprocedurer (afpipettering, tidtagning,
Læs mere[BESØGSSERVICE INSTITUT FOR MOLEKYLÆRBIOLOGI OG GENETIK, AU]
Enzymkinetik INTRODUKTION Enzymer er biologiske katalysatorer i alle levende organismer som er essentielle for liv. Selektivt og effektivt katalyserer enzymerne kemiske reaktioner som ellers ikke ville
Læs mereDNA origami øvelse DNA origami øvelse
DNA origami øvelse Introduktion I denne øvelse bruger vi DNA origami teknikken til at samle en tavle af DNA med dimensioner på 70 nm x 100 nm. Tavlen dannes af et langt enkeltstrenget DNA molekyle, der
Læs mereRegnskovens hemmeligheder
Center for Undervisningsmidler, afdeling København Regnskovens hemmeligheder Øvelsesvejledning Formål Et gen for et kræfthelbredende protein er blevet fundet i nogle mystiske blade i regnskoven. Forskere
Læs mereTitel: OPLØSELIGHEDEN AF KOBBER(II)SULFAT. Litteratur: Klasse: Dato: Ark 1 af. Helge Mygind, Kemi 2000 A-niveau 1, s. 290-292 8/9-2008/OV
Fag: KEMI Journal nr. Titel: OPLØSELIGHEDEN AF KOBBER(II)SULFAT Navn: Litteratur: Klasse: Dato: Ark 1 af Helge Mygind, Kemi 2000 A-niveau 1, s. 290-292 8/9-2008/OV Formålet er at bestemme opløseligheden
Læs mereFremstilling af bioethanol
Bioteknologi 3, Tema 6 Forsøg www.nucleus.dk Linkadresserne fungerer pr. 1.7.2011. Forlaget tager forbehold for evt. ændringer i adresserne. Fremstilling af bioethanol Nedenstående fermenteringsforsøg
Læs mereMatematiske modeller Forsøg 1
Matematiske modeller Forsøg 1 At måle absorbansen af forskellige koncentrationer af brilliant blue og derefter lave en standardkurve. 2 ml pipette 50 og 100 ml målekolber Kuvetter Engangspipetter Stamopløsning
Læs mereIsolering af DNA fra løg
Isolering af DNA fra løg Formål: At afprøve en metode til isolering af DNA fra et levende væv. At anvende enzymer.. Indledning: Isolering af DNA fra celler er første trin i mange molekylærbiologiske undersøgelser.
Læs mereDNA origami øvelse. Introduktion. DNA origami øvelse 3 timer 2018
DNA origami øvelse Introduktion I denne øvelse bruger vi DNA origami teknikken til at samle en tavle af DNA med dimensioner på 70 nm x 100 nm. Tavlen dannes af et langt enkeltstrenget DNA molekyle, der
Læs mereLaboratorieforsøg: Phosphats binding i jord
Laboratorieforsøg: Phosphats binding i jord Karina Knudsmark Jessing, ph.d. studerende Jordbunds-og Miljøkemi, Institut for Grundvidenskab Assistent: ph.d. studerende Karin Cederkvist Dias 1 Oversigt over
Læs mereFORSØG ØL verdens første svar på anvendt
FORSØG ØL verdens første svar på anvendt bioteknologi Biotech Academy BioCentrum-DTU Søltofts Plads DTU - Bygning 221 2800 Kgs. Lyngby www.biotechacademy.dk bioteket@biocentrum.dtu.dk INDHOLDSFORTEGNELSE
Læs mereKemi Kulhydrater og protein
Kemi Kulhydrater og protein Formål: Formålet med forsøget er at vise hvordan man kan påvise protein, fedtstof, simple sukkerarter eller stivelse i forskellige fødevarer. Samtidig kan man få en fornemmelse
Læs mereOpgave 1.1 1 KemiForlaget
Opgave 1.1 Byg et monosaccharid Kulhydrat-molekylerne består af tre forskellige atomer : arbon, (sorte); ydrogen, (hvide), og Oxygen,O (røde). 1. Lav en ring af 5 -atomer og et O-atom. 2. Byg en gruppe
Læs mere[BESØGSSERVICE INSTITUT FOR MOLEKYLÆRBIOLOGI OG GENETIK, AU]
Enzymkinetik INTRODUKTION Enzymer er biologiske katalysatorer i alle levende organismer som er essentielle for liv. Selektivt og effektivt katalyserer enzymerne kemiske reaktioner som ellers ikke ville
Læs mereBestemmelse af koffein i cola
Bestemmelse af koffein i cola 1,3,7-trimethylxanthine Koffein i læskedrikke Læs følgende links, hvor der blandt andet står nogle informationer om koffein og regler for hvor meget koffein, der må være i
Læs mereØvelser 10. KlasseCenter Vesthimmerland Kaj Mikkelsen
Indholdsfortegnelse Indholdsfortegnelse... 1 Bygning af et glucosemolekyle... 2 Bygning af et poly- sakkarid.... 3 Påvisning af glukose (1)... 4 Påvisning af glucose (2)... 5 Påvisning af disakkarider....
Læs mereKOSMOS. 7.1 Spaltning af sukker. Materialer MADENS KEMI KEMISKE STOFFER I MADEN DISACCHARIDER
KEMISKE STOFFER I MADEN DISACCHARIDER 7.1 Spaltning af sukker I skal undersøge, hvordan sukker spaltes ved kontakt med en syre. Almindelig hvidt sukker er et disaccharid. Det kan spaltes i to monosaccharider:
Læs mereØvelse 2 Mest mættede olier
Øvelse 2 Mest mættede olier Formål Formålet med denne øvelse er at foretage en kvalitativ undersøgelse af mængden af dobbeltbindinger i forskellige olier for at undersøge hvilke der er mest mættede. Teori
Læs mereAnalyse af proteiner Øvelsesvejledning
Center for Undervisningsmidler, afdeling København Analyse af proteiner Øvelsesvejledning Formål At separere og analysere proteiner i almindelige fødevarer ved brug af gelelektroforese. Teori Alle dele
Læs mereBiotechnology Explorer
Biotechnology Explorer Oprensning af genomisk DNA fra plantemateriale Manual Katalog nr. 166-5005EDU explorer.bio-rad.com Oversat og bearbejdet af Birgit Sandermann Justesen, Nærum Gymnasium, februar 2009
Læs mereØvelse 4.2 1/5 KemiForlaget
KST G ERNÆRING Benthe Schou ØVELSE 4. Øvelse: Iodtal for fedtstoffer Indledning Et fedtstofs ernæringsmæssige sundhed bestemmes af hvilke fedtsyrer, der indgår i fedtstoffet. Fedtstoffets sundhed er stærkt
Læs mereTask 1. Gær til hverdag og fest. DM i Science for 1.g Finale 2015 Onsdag 25.februar 2015 kl. 14-17.
Task 1 Gær til hverdag og fest DM i Science for 1.g Finale 2015 Onsdag 25.februar 2015 kl. 14-17. Opgave 1: Opgave 2: Opgave 3: Opgave 4: 25 point 29 point 31 point 29 point Gær kan bruges til lidt af
Læs merePuffere. Øvelsens pædagogiske rammer. Sammenhæng. Formål. Arbejdsform: Evaluering
1 Puffere Øvelsens pædagogiske rammer Sammenhæng Denne øvelse er tilpasset kemiundervisningen på modul 3 ved bioanalytikeruddannelsen. Kemiundervisningen i dette modul indeholder blandt andet syrebaseteori
Læs mereBIOZYMER ØVELSE 2 OPRENSNING AF PROTEINER
BIOZYMER ØVELSE 2 OPRENSNING AF PROTEINER FAGLIG BAGGRUND Det forudsættes, at den grundlæggende teori bag rekombinant protein ekspression og proteinopresning er bekendt. For dette henvises til undervisningsmateriale
Læs mereDNA origami øvelse DNA origami øvelse
DNA origami øvelse Introduktion I denne øvelse bruger vi DNA origami teknikken til at samle en tavle af DNA med dimensioner på 70 nm x 100 nm. Tavlen dannes af et langt enkeltstrenget DNA molekyle, der
Læs mereUNDERSØGELSE AF JORDRESPIRATION
UNDERSØGELSE AF JORDRESPIRATION Formål 1. At bestemme omsætningen af organisk stof i jordbunden ved at måle respirationen med en kvantitative metode. 2. At undersøge respirationsstørrelsen på forskellige
Læs mereUNDERVISNINGS MINISTERIET KVALITETS- OG TILSYNSSTYRELSEN. KeiTii A. Studenterel<saTilen. Onsdag den 3.juni 2015 kl. 9.00-14.00
- UNDERVISNINGS MINISTERIET KVALITETS- OG TILSYNSSTYRELSEN KeiTii A Studenterel
Læs mereBIOTEKNOLOGI HØJT NIVEAU
STUDENTEREKSAMEN 2007 2007-BT-1 BITEKNLGI HØJT NIVEAU Torsdag den 31. maj 2007 kl. 9.00 14.00 Sættet består af 1 stor og 2 små opgaver samt 1 bilag i 2 eksemplarer. Det ene eksemplar af bilaget afleveres
Læs mereRoskilde Tekniske Gymnasium Klasse 2,5 Kemi Jonas Kalmark, Daniel Blankenstejner & Ticho Nielsen. Organisk kemi for dummies
Organisk kemi for dummies 1 Indholdsfortegnelse Projektets formål:... 2 Målgruppe:... 4 Resume af interviewet:... 5 Teori:... 6 forsøg:... 6 Indledning:... 6 Materialer... 7 kalier:... 8 Fremgangs måde:...
Læs mereNitrat sticks AquaChek 0-50 Bilag 3 Nitrat sticks
Notat SEGES P/S SEGES Planter & Miljø Test af måleudstyr til måling af nitrat i drænvand Ansvarlig KRP Oprettet 12-10-2016 Projekt: [3687, TReNDS] Side 1 af 5 Test af måleudstyr til måling af nitrat i
Læs mere0 Indhold. Titel: Klorofyl a koncentration. Dokumenttype: Teknisk anvisning. Version: 1
Titel: Klorofyl a koncentration Dokumenttype: Teknisk anvisning Forfattere: Stiig Markager og Henrik Fossing TA henvisninger TA. nr.: M07 Version: 1 Oprettet: 20.12.2013 Gyldig fra: 20.12.2013 Sider: 10
Læs mereKædens længde kan ligger mellem 10 og 14 carbonatomer; det mest almindelige er 12.
Kemi laboratorieforsøg 9.2 Anioniske surfaktanter Anioniske surfaktanter er vaskeaktive stoffer, der har en hydrofob ende og en hydrofil ende. Den hydrofile ende er negativt ladet, dvs. en anion. Da der
Læs mereProduktion af biodiesel fra rapsolie ved en enzymatisk reaktion
Produktion af biodiesel fra rapsolie ved en enzymatisk reaktion produceres fra rapsolie som består af 95% triglycerider (TG), samt diglycerider (DG), monoglycerider (MG) og frie fedtsyrer (FA). Under reaktionen
Læs mereKemiøvelse 2 1. Puffere
Kemiøvelse 2 1 Puffere Øvelsens pædagogiske rammer Sammenhæng Denne øvelse er tilpasset kemiundervisningen på modul 3 ved bioanalytikeruddannelsen. Kemiundervisningen i dette modul indeholder blandt andet
Læs mereØvelse: Analyse af betanin i rødbede
Forløb: Smagen af frugt og grønt: Kemimateriale modul 2-8 Aktivitet: Øvelse: Analyse af betanin i rødbede Fag: Kemi Klassetrin: 1. g, 2. g, 3. g Side: 1/14 Øvelse: Analyse af betanin i rødbede Forfattere:
Læs mereFORSØG ØL verdens første svar på anvendt
FORSØG ØL verdens første svar på anvendt bioteknologi Biotech Academy BioCentrum-DTU Søltofts Plads DTU - Bygning 221 2800 Kgs. Lyngby www.biotechacademy.dk bioteket@biocentrum.dtu.dk INDHOLDSFORTEGNELSE
Læs mereKemi F2- Laboratorieøvelse nr. 9 Ulla Christensen, Biofysisk Kemi ENZYMKINETIK
1 Kemi F2- Laboratorieøvelse nr. 9 Ulla Christensen, Biofysisk Kemi ENZYMKINETIK Formål: Steady state hastighedsmålinger og kinetisk analyse til undersøgelse af enzymkatalyseret reaktion. Der gøres rede
Læs mereOpgave 1 Slankemidler
Opgave 1 Slankemidler Overvægt er et stigende problem i den vestlige verden, og der er derfor udviklet forskellige slankemidler. Et eksempel på et slankemiddel er Orlistat. Den kemiske struktur af Orlistat
Læs mereKonkurrence mellem to bakteriearter
1 Biologi-forsøg: Populationsbiologi/evolution Konkurrence mellem to bakteriearter Forsøget undersøger, hvordan en ydre miljøfaktor (temperatur) påvirker konkurrencen mellem to forskellige arter. I dette
Læs mereAnvendelse af Enzymer i Fødevarer
SRP-øvelse ved Det Natur- og Biovidenskabelige Fakultet, Københavns Universitet Anvendelse af Enzymer i Fødevarer Øvelsesvejledning 2013 Henriette Erichsen, Anni Bygvrå Hougaard, Karsten Olsen og Jeanette
Læs mereDenne forordning er bindende i alle enkeltheder og gælder umiddelbart i hver medlemsstat.
10.2.2010 Den Europæiske Unions Tidende L 37/21 KOMMISSIONENS FORORDNING (EU) Nr. 118/2010 af 9. februar 2010 om ændring af forordning (EF) nr. 900/2008 om fastlæggelse af de analysemetoder og andre bestemmelser
Læs mereIntro5uktion: I'" Acetylsalicylsyre. Salicylsyre
Intro5uktion: H'11t frem til omkring 1850 var alle tilgængelige smertestillende midler "naturstoffer", dvs oftest ekstrakter fra planter eller dyr. Det første syntetisk fremstillede smertestillende stof
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Navn: Forsøgsvejledning Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA sekvens,
Læs mereELISA Kvantitativ bestemmelse af human IgA i brystmælk Elevvejledning.
ELISA Kvantitativ bestemmelse af human IgA i brystmælk Elevvejledning. Professionshøjskolen University College Nordjyland Laborantafdelingen 2012 Side 1 Indledning En kvinde føder og bliver mor til sit
Læs mereStudienummer: MeDIS Exam 2015. Husk at opgive studienummer ikke navn og cpr.nr. på alle ark, der skal medtages i bedømmelsen
MeDIS Exam 2015 Titel på kursus: Uddannelse: Semester: Videregående biokemi og medicinudvikling Bachelor i Medis 5. semester Eksamensdato: 26-01-2015 Tid: kl. 09.00-11.00 Bedømmelsesform 7-trin Vigtige
Læs mereBIOZYMER ØVELSE 1 ENZYMKINETIK
BIZYME ØVELE 1 EZYMKIETIK FAGLIG BAGGUD Det forudsættes, at teorien bag enzymer og enzymkinetik er bekendt. ertil kan bl.a. henvises til kapitlet om antibiotika og resistens i Bioteknologiske orisonter,
Læs mereAlgedråber og fotosyntese
Algedråber og fotosyntese Fotosyntesen er en utrolig kompleks proces, som kan være svær at forstå. Heldigvis kan fotosyntesen illustreres på en måde, så alle kan forstå, hvad der helt præcist foregår i
Læs mereMælkesyrebakterier og holdbarhed
Mælkesyrebakterier og holdbarhed Navn: Forsøgsvejledning Mælkesyrebakterier og holdbarhed Formål med forsøget Formålet med denne øvelse er at undersøge mælkesyrebakteriers og probiotikas evne til at øge
Læs mereB i o k e m i ø v e l s e 1 Regulatoriske mekanismer i det intermediære stoftskifte Udarbejdet af: Matilda Lantz og Elif Bayram
Regulatoriske mekanismer i det intermediære stoftskifte Udarbejdet af: Matilda Lantz og Elif Bayram Dato: 20. November 2011 Underskrifter: Godkendt: Dato Regulatoriske mekanismer i det intermediære stofskifte
Læs mereSpektrofotometrisk bestemmelse af kobberindhold i metaller
Spektrofotometrisk bestemmelse af kobberindhold i metaller Formål: Øvelsens formål er at bestemme indholdet af kobber i metallegeringer, fx i smykker eller i mønter. Dette gøres ved hjælp af spektrofotometri.
Læs mereBiologisk rensning Fjern opløst organisk stof fra vand
Spildevandscenter Avedøre Biologisk rensning Fjern opløst organisk stof fra vand Øvelse I Formål: På renseanlægget renses et mekanisk, biologisk og kemisk. I den biologiske rensning på renseanlægget benyttes
Læs mereE 10: Fremstilling af PEC-solceller
E 10: Fremstilling af PEC-solceller Formål Formålet med forsøget er at fremstille PEC (Photo Electro Chemical) solceller ud fra vinduesruder, plantesaft, hvid maling og grafit fra en blyant. Apparatur
Læs mereØvelse 29. Studieportalen.dk Din online lektieguide Sara Hestehave Side 1 08-05-2007 Kemi Aflevering 2m KE2 Herning Gymnasium
Sara Hestehave Side 1 08-05-2007 Øvelse 29 Forsøget er lavet d. 6/4-2006 Forsøget er udført i samarbejde med; Jacob Haurum Rapporten er skrevet af Sara Hestehave Kristensen 2.x Sara Hestehave Side 2 08-05-2007
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Forsøgsvejledning Navn: Side 1 af 7 Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA
Læs mereAndrostenon-indol-skatol-protokol.
Androstenon-indol-skatol-protokol. Indholdsfortegnelse: 1. Formål side 2 2. Teori side 2 2. Prøvebehandling side 2 3. Materialer side 2 3.1 Apparatur side 2 3.2 Kemikalier side 3 3.3 Reagenser side 3 4.
Læs mereBrugsvejledning for 7827.10 dialyseslange
Brugsvejledning for 7827.10 dialyseslange 14.06.07 Aa 7827.10 1. Præsentation Dialyseslangen er 10 m lang og skal klippes i passende stykker og blødgøres med vand for at udføre forsøgene med osmose og
Læs mereProtokol for genetisk bestemmelse af ABO blodtyper
Page1 Udarbejdet i samarbejde mellem: Kåre Lehmann, Annabeth Høgh Petersen, Anne Rusborg Nygaard og Jørn M. Clausen Page2 VIGTIGT: SKIFT PIPETTE SPIDSER/TIPS EFTER HVER GANG!! Så undgår du at forurene
Læs mereEr dit reaktionsskema afstemt? Dvs. undersøg for hvert grundstof, om der er lige mange atomer af grundstoffet før reaktionen som efter reaktionen.
7.12 Bagning med hjortetaksalt I skal undersøge, hvilke egenskaber bagepulveret hjortetaksalt har. Hjortetaksalt bruges i bagværk som kiks, klejner, brunkager m.m. Saltet giver en sprødhed i bagværket.
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Navn: Forsøgsvejledning Side 1 af 8 Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA
Læs mereForsøg med enzymer. Forsøg med enzymer 1
Forsøg med enzymer 1 Forsøg med enzymer Metabolismen er de levende cellers stofomsætning. De mange processer er oftest katalyseret af enzymer. Nogle af processerne er nedbrydende (biolytiske eller kataboliske),
Læs mereKemi A. Studentereksamen indd 1 26/02/
Kemi A Studentereksamen 1stx141-KEM/A-22052014 Torsdag den 22. maj 2014 kl. 9.00-14.00 130291.indd 1 26/02/14 14.06 Side 1 af 10 sider pgavesættet består af 4 opgaver med i alt 17 spørgsmål samt 3 bilag
Læs mereKEMI HØJT NIVEAU. Tirsdag den 18. maj 2004 kl. 9.00-13.00. (De stillede spørgsmål indgår med lige vægt i vurderingen)
STUDENTEREKSAMEN MAJ 2004 2004-10-1 MATEMATISK LINJE KEMI ØJT NIVEAU Tirsdag den 18. maj 2004 kl. 9.00-13.00 (De stillede spørgsmål indgår med lige vægt i vurderingen) pgavesættet består af 3 opgaver og
Læs mereFind enzymer til miljøvenligt vaskepulver
Find enzymer til miljøvenligt vaskepulver Enzymer, der er aktive under kolde forhold, har adskillige bioteknologiske anvendelsesmuligheder. Nye smarte og bæredygtige produkter kan nemlig blive udviklet
Læs mereNa + -selektiv elektrode
C.11.1 Na + -selektiv elektrode Formål: Øvelsens formål er at kalibrere en Na + -ISE (ionselektiv elektrode) finde elektrodens linearitetsområde anvende elektroden til koncentrationsbestemmelse belyse
Læs mereFormål: At undersøge nogle egenskaber ved CO 2 (carbondioxid). 6 CO 2 + 6 H 2 O C 6 H 12 O 6 + 6 O 2
ØVELSE 2.1 SMÅ FORSØG MED CO 2 At undersøge nogle egenskaber ved CO 2 (carbondioxid). Indledning: CO 2 er en vigtig gas. CO 2 (carbondioxid) er det molekyle, der er grundlaget for opbygningen af alle organiske
Læs mereFra spild til penge brug enzymer
Fra spild til penge brug enzymer Køreplan 01005 Matematik 1 - FORÅR 2010 Denne projektplan er udarbejdet af Per Karlsson og Kim Knudsen, DTU Matematik, i samarbejde med Jørgen Risum, DTU Food. 1 Introduktion
Læs mereKemiøvelse 2 C2.1. Puffere. Øvelsens pædagogiske rammer
Kemiøvelse 2 C2.1 Puffere Øvelsens pædagogiske rammer Sammenhæng Denne øvelse er tilpasset kemiundervisningen på modul 3 ved bioanalytikeruddannelsen. Kemiundervisningen i dette modul indeholder blandt
Læs mereØvelse: Chlorofylindholdet i spinat
Forløb: Smagen af frugt og grønt: Kemimateriale modul 2-8 Aktivitet: Øvelse: Chlorofylindholdet i spinat Fag: Kemi Klassetrin: 1. g, 2. g, 3. g Side: 1/6 Øvelse: Chlorofylindholdet i spinat Forfattere:
Læs mereØvelse med tarmkræftceller i kultur.
Øvelse med tarmkræftceller i kultur. Baggrund Hver 3. dansker bliver ramt af kræft, inden de er blevet 75 år. Tyktarmskræft er den 3. hyppigste kræftform hos både mænd og kvinder, hvor henholdsvis 7.3
Læs mereAnalyse af benzoxazinoider i brød
Analyse af benzoxazinoider i brød Øvelsesvejledning til kemi-delen af øvelsen. Af Stine Krogh Steffensen, Institut for Agroøkologi, AU Eleven har forberedt før øvelsen: 1. Eleven har udfyldt skemaet herunder
Læs mere2UJDQLVNHýVWRIJUXSSHUýLýSODQWHIU
3ODQWHI\VLRORJL,QWURGXNWLRQ 2UJDQLVNHýVWRIJUXSSHUýLýSODQWHIU I et plantefrø findes bl.a. anlægget til en ny plante i form af det såkaldte kimanlæg. Dette anlæg skal kunne udvikle sig til en ny plante under
Læs mereElevforsøg i 10. klasse Alkohol
Fysik/kemi Viborg private Realskole 2016-17 Elevforsøg i 10. klasse Alkohol Model af et alkohol-molekyle Formål At illustrere hvordan forskellige alkohol-molekyler er opbygget At bygge modeller af alkohol
Læs mereMåling af ph i syrer og baser
Kemiøvelse 1 1.1 Måling af ph i syrer og baser Øvelsens pædagogiske rammer Sammenhæng Denne øvelse er tilpasset kemiundervisningen på modul 1 ved bioanalytikeruddannelsen. Øvelsen skal betragtes som en
Læs mereKEMISK IN STITUT ENHAVNS UNIVERS ITET KØB. estere. samt. ved GC
H..C.ØRSTEDS UNGDMSLABRATRIUM KEMISK IN STITUT KØB ENHAVNS UNIVERS ITET Syntese og ekstraktion af naturlige estere samt identifikation ved GC Af Marc Cedenius Indhold Gran... 2 Syntese af Eddikesyre( )bornylester...
Læs mereEt fedtstofs iodtal. Problemstilling. Kapitel 2: Uorganisk kemi (iodometri) R 1 CH 2 O C R 2 O R 3. H + Br Br C C Br Br
Et fedtstofs iodtal Kapitel 2: Uorganisk kemi (iodometri) Problemstilling Additionsreaktionen til dobbeltbindinger mellem -atomer, 8?7, kan vises ved addition af dibrom til et fedtstof. Reaktionen benyttes
Læs mereMadkemi Kulhydrater: er en gruppe af organiske stoffer der består af kul, hydrogen og oxygen (de sidste to i forholdet 2:1, ligesom H 2
Madkemi Kulhydrater: er en gruppe af organiske stoffer der består af kul, hydrogen og oxygen (de sidste to i forholdet 2:1, ligesom H 2 O); derfor navnet kulhydrat (hydro: vand (græsk)). fælles for sukkermolekylerne
Læs mereMælkesyrebakterier og holdbarhed
Mælkesyrebakterier og holdbarhed Formål Formålet med denne øvelse er at undersøge mælkesyrebakteriers og probiotikas evne til at øge holdbarheden af kød ved at: 1. Undersøge forskellen på bakterieantal
Læs mereDet store energikørekort
Blik- og Rørarbejderforbundet - i forbund med fremtiden El- og Vvs-branchens Uddannelsessekretariat - Højnæsvej 71-2610 Rødovre - tlf.: 36 72 64 00 www.vvs-uddannelse.dk/folkeskole - E-mail: folkeskole@vvsu.dk
Læs mereLaboratorieprotokol for manuel isolering af DNA fra 0,5 ml prøve
Laboratorieprotokol for manuel isolering af DNA fra 0,5 ml prøve Til isolering af genomisk DNA fra indsamlingssætserierne Oragene - og ORAcollect. Du kan finde flere sprog og protokoller på vores webside
Læs mereAmalie Avnborg 2.y SRO 18/3-12
Side 1 af 23 SRO for 2. y 2012 Opgaveformulering: Med udgangspunkt i enzymet catecholase, som du har lavet to forsøg med, skal du lave enzymkinetiske undersøgelser. Du skal redegøre for centrale begreber
Læs mereUdbytteberegning ved fermentering
Bioteknologi 2, Tema 3 Opgave www.nucleus.dk 6 Udbytteberegning ved fermentering Opgaven bygger videre på Bioteknologi 2, side 11-18. Ved fermenteringsprocesser er det af stor teknisk og økonomisk betydning
Læs mereForsøgene udføres ved betingelserne: ph 7.6, 0.1 M phosphatpuffer, ved stuetemperatur.
KemiF2 nzymkinetik Trypsin er en serinproteinase, der katalyserer hydrolyse af peptid- og esterbindinger, hvor Arg eller Lys leverer carbonylgruppen. Ved øvelsen bestemmes de kinetiske parameterværdier,
Læs mereKonkurrence mellem to bakteriearter
1 Biologi-forsøg: Populationsbiologi/evolution Konkurrence mellem to bakteriearter Forsøget undersøger, hvordan en ydre miljøfaktor (temperatur) påvirker konkurrencen mellem to forskellige arter. I dette
Læs mereDette er en kladde til et genoptryk af Eksperimentel Genteknologi fra 1991. Ideer, rettelser og forslag modtages gerne. Kh Claudia.
Transformation af E.coli K 12 Version 3. marts 2009 (C) Claudia Girnth-Diamba og Bjørn Fahnøe Dette er en kladde til et genoptryk af Eksperimentel Genteknologi fra 1991. Ideer, rettelser og forslag modtages
Læs mereKemi A. Studentereksamen. Onsdag den 4. juni 2014. 130512.indd 1 26/02/14 14.00
Kemi A Studentereksamen 2stx141-KEM/A-04062014 nsdag den 4. juni 2014 kl. 9.00-14.00 130512.indd 1 26/02/14 14.00 Side 1 af 10 sider pgavesættet består af 4 opgaver med i alt 16 spørgsmål samt 3 bilag
Læs mereNitratudvaskning i landbrugsafgrøder
Om forsøget I forsøget skal I analysere jordvand taget op fra jorden under forskellige afgrøder i sædskiftet hos Forsker for en dag. Gennem såkaldte sugeceller, som ligger permanent nedgravet under afgrødernes
Læs mereVejledning. Prøven Opgavesættet består af 4 opgaver med i alt 16 delopgaver. Alle hjælpemidler er tilladt.
Vejledning Prøven Opgavesættet består af 4 opgaver med i alt 16 delopgaver. Alle hjælpemidler er tilladt. Opgavebesvarelsen Din opgavebesvarelse skal afleveres i et samlet dokument. Kildehenvisning Du
Læs mereIdeer til halv-åbne opgaver
Ideer til halv-åbne opgaver - for mere lukkede opgaver henvises til de angivne trykte læremidler samt til fx til opgaver hentet på EMU: http://tinyurl.com/emu-alkohol I filerne digitale kilder og trykte
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Navn: Forsøgsvejledning Side 1 af 8 Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA-sekvens,
Læs mereØvelser 10. KlasseCenter Vesthimmerland Kaj Mikkelsen
Indholdsfortegnelse Indholdsfortegnelse... 1 Ethanol kan brænde... 2 Gæringsprocessen på molekyle- niveau... 3 Fremstilling af alkohol vha. gæring... 4 Destillering... 5 Bestemmelse af alkoholprocent...
Læs mereEkstraktion af proteiner fra kød, æg og mælkeprodukter
Ekstraktion af proteiner fra kød, æg og mælkeprodukter Udarbejdet af Lektor Lars Haastrup Pedersen, forskningsadjunkt Claus Gyrup Nielsen, Phd. Anders Bundgaard Sørensen, Phd. Malene Bredal Brohus samt
Læs mereTag dine gener om halsen. Isoler dit eget DNA, og lav et halssmykke ud af det.
Samarbejde mellem gymnasier og Aarhus Universitet Bioteknologiske eksperimenter Tag dine gener om halsen. Isoler dit eget DNA, og lav et halssmykke ud af det. Denne øvelse er baseret på øvelseskittet:
Læs mereBiotechnology Explorer. Protein Fingerprinting
Biotechnology Explorer Protein Fingerprinting Instruktionsmanual Katalognummer 166-0100EDU explorer.bio-rad.com Delene i dette kit er sendt i seperate æsker. Opbevar proteinstandarderne i fryseren, ved
Læs mere