Laboratorieprotokol for manuel isolering af DNA fra 0,5 ml prøve
|
|
- Kirsten Brøgger
- 8 år siden
- Visninger:
Transkript
1 Laboratorieprotokol for manuel isolering af DNA fra 0,5 ml prøve Til isolering af genomisk DNA fra indsamlingssætserierne Oragene - og ORAcollect. Du kan finde flere sprog og protokoller på vores webside Følgende protokol beskriver trin for trin, hvordan man isolerer DNA fra en alikvot på 500 µl af en prøve. Medfølgende reagenter prepit L2P (katalog #: PT-L2P) Udstyr og reagenter Mikrocentrifuge med en kapacitet på g 1.5 ml pipettespidser (f.eks. Axygen #MCT-150-C) Luft- eller vandinkubator på 50 C Ethanol ( %) ved stuetemperatur Ethanol (70 %) ved stuetemperatur Dna-opbevaringsbuffer: TE (10 mm Tris-HCl, 1 mm EDTA, ph 8,0) eller tilsvarende opløsning Procedure Isolering trin for trin 1. Bland prøven i DNA-Genotek-sættet ved at vende og ryste den blidt i et par sekunder. 2. Prøven inkuberes ved 50 C i en vandinkubator i mindst 1 time eller i en luftinkubator i mindst 2 timer. Bemærk: En luftinkubator kan være at foretrække, da prøverørene kan flyde i et vandbad. Hvis det er nødvendigt at anvende et vandbad, skal man sikre sig, at den del af røret, som indeholder prøven, til stadighed er neddykket i vand. 3. Overfør 500 µl af den blandede prøve til et 1,5 ml mikrocentrifugerør. 4. For hver 500 µl prøve tilsættes 20 µl (1/25 mængde) PT-L2P til mikrocentrifugerøret. Blandes ved vortex i nogle sekunder. Dette sikrer, at tyktflydende prøver bliver ordentligt blandet. Denne varmebehandling er vigtig for at sikre, at DNA en frigøres korrekt, og at nucleaser inaktiveres permanent. Dette inkubationstrin kan gennemføres på et hvilket som helst tidspunkt efter indsamling af prøven og før isolering. Hele prøven skal inkuberes i det originale indsamlingsrør, før den opdeles, for at sikre homogenitet i prøven. Prøven kan inkuberes ved 50 C natten over, hvis det er mest praktisk. Inkubation i luftinkubator kræver længere tid, fordi temperaturudligningen sker langsommere end i en vandinkubator. Resten af prøven kan opbevares ved stuetemperatur eller fryses ned (-15 C til -20 C). Prøven vil blive uklar, idet urenheder og inhibitorer udfældes. C V
2 Isolering trin for trin 5. Inkuberes på is i 10 minutter. Inkubation ved stuetemperatur kan også anvendes, men vil være lidt mindre effektiv med hensyn til at fjerne urenheder. 6. Centrifugeres ved stuetemperatur i 5 minutter ved g. 7. Med pipette overføres den klare supernatant til et nyt mikrocentrifugerør. Kassér pelleten med urenheder. 8. Til 500 µl supernatant tilsættes 600 µl % ethanol ved stuetemperatur. Blandes forsigtigt ved 10 gange inversion. 9. Lad prøven stå ved stuetemperatur i 10 minutter, så DNA en udfældes helt. 10. Placér røret i mikrocentrifugen i en kendt orientering. Centrifugeres ved stuetemperatur i 2 minutter ved g. 11. Fjern omhyggeligt supernatanten med en pipettespids, og kassér den. Pas på ikke at ødelægge DNA-pelleten. 12. Ethanolvask: Tilsæt forsigtigt 250 µl 70 % ethanol. Lad det stå ved stuetemperatur i 1 minut. Fjern ethanolen fuldstændigt uden at ødelægge pelleten. En længere centrifugeringsperiode (op til 15 minutter) kan være gavnlig med hensyn til at mindske uklarheden (høj A 320 ) i den endelige DNA-opløsning. Pelleten indeholder uklare urenheder. Hvis den ødelægges ved et uheld, bør røret centrifugeres igen. Under blandingen med ethanol vil DNA en blive udfældet. Dette kan vise sig som en klump af DNA-fibre eller som et fint præcipitat, afhængigt af mængden af DNA i prøven. Selv om der ikke er nogen synlig klump, vil der blive fundet DNA, når de følgende skridt udføres omhyggeligt. Inkubation ved -20 C anbefales ikke, idet urenheder da kan udfældes sammen med DNA en. Placér f.eks. hvert rør i mikrocentrifugen, så hættens hængsel peger væk fra rotorens centrum. Efter centrifugeringen kan pelletens position lokaliseres (selv hvis den er for lille til at kunne ses). Den vil befinde sig i bunden af røret under hængslet. Denne pellet indeholder DNA. Hvis pelleten går tabt, går DNA tabt. Hvis røret drejes, så pelleten befinder sig på den øvre del af væggen, kan man uden risiko bevæge en pipettespids langs den nederste del af væggen og fjerne supernatanten fuldstændigt. Supernatanten kan indeholde urenheder og bør fjernes så fuldstændigt som muligt. Overdreven tørring af pelleten kan gøre det vanskeligere at opløse DNA en. Det er vigtigt at fjerne al ethanol fra prøven. Rester af ethanol kan påvirke analysens nøjagtighed. Pas på ikke at ødelægge DNA-pelleten. DNA-pelleten kan være lille. Hvis pelleten skulle gå i opløsning, centrifugeres prøven i 5 minutter ved g. Når 70 %-ethanolen er fjernet, kan røret pulscentrifugeres for at gøre det muligt at fjerne ethanolrester. 2
3 Isolering trin for trin 13. Tilsæt 100 µl TE-opløsning (se side 1) for at opløse DNA-pelleten. Vortex i mindst 5 sekunder. 14. For at sikre fuldstændig rehydrering af DNA en (pellet og smear) inkuberes ved stuetemperatur natten over, fulgt af vortex, eller ved 50 C i 1 time med lejlighedsvis vortex. 15. Muligheder for opbevaring af den fuldstændigt rehydrerede DNA: a) Anbefalet: i TE, i alikvoter ved -20 C til langtidsopbevaring, eller b) i TE ved 4 C i op til 2 måneder. Hvis der ønskes en højere koncentration af DNA, anvendes 50 µl TE. Bemærk: Store mængder DNA med høj molekylvægt kan være langsomme at hydrere (opløse) fuldstændigt. Ufuldstændig hydrering af DNA en er årsag til unøjagtighed ved vurdering af DNA-koncentrationen og til fejl i senere anvendelser, såsom PCR. Ufuldstændig rehydrering af DNA en er årsag til unøjagtighed ved vurdering af DNAkoncentrationen og til potentielle fejl i senere anvendelser, såsom PCR. Hvis renset DNA fryses i TE, vil DNA udfældes. Ved optøning af en prøve af frosset, renset DNA skal man være omhyggelig med rehydreringen som beskrevet i trin 14. Mængdebestemmelse af DNA Fluorescensmetoden Analyser, hvor der anvendes fluorescerende farvestoffer, er mere specifikke end absorbans ved 260 nm til bestemmelse af mængden af dobbeltstrenget DNA (ds-dna) i en DNA-prøve. Vi anbefaler anvendelse af fluorescerende farver, som f.eks. PicoGreen eller SYBR Green I, til at bestemme mængden af ds-dna, da der optræder mindre interferens af forurenende RNA. En billig protokol med anvendelse af SYBR Green I er beskrevet i PD-PR-075, DNA quantification using SYBR Green I Dye and a micro-plate reader 1. Alternativt kan der anvendes sæt, som fås i handelen, f.eks. Invitrogen s Quant-iT PicoGreen dsdna Assay Kit (kat. no. Q-33130). Uanset hvilken protokol, der anvendes, anbefaler vi, at den rensede DNA opløses i forholdet 1:50 med TE-væske, og at der anvendes 5 µl i mængdebestemmelse analysen. Absorbansmetoden Hvis man ønsker at mængdebestemme DNA ved hjælp af absorbans, anbefaler vi, at den rensede prøve først behandles med RNase for at fjerne forurenende RNA, hvorefter RNA-fragmenterne fjernes ved ethanoludfældning af DNA en. En detaljeret protokol findes i PD-PR-040, RNA removal by double-rnase digestion 2. Bemærk, at DNA fra en oral prøve typisk indeholder betydeligt mere RNA end blodprøver. Sørg for, at alkoholudfældet DNA er helt opløst, før absorbansen aflæses. Omregningsfaktor: En absorbans på 1,0 ved 260 nm svarer til en koncentration på 50 ng/µl (50 µg/ml) for ren ds-dna. Sørg for, at absorbansværdierne ligger inden for spektrofotometerets lineære skala. Prøver, som falder uden for den lineære skala, skal genopløses og genmåles. Find yderligere oplysninger i dokumentationen til dit instrument. 3
4 Metode: 1. Opløs en 10 µl alikvot renset RNase-behandlet DNA med 90 µl TE (1/10 opløsning). Blandes ved forsigtigt at føre pipetten op og ned. Vent til boblerne er forsvundet. 2. Brug TE i referencecellen (blank). 3. Mål absorbansen ved 320 nm, 280 nm og 260 nm. 4. Beregn de korrigerede A og A 260 -værdier ved at trække absorbansen ved 320 nm (A 320 ) fra A og A 260 -værdierne. 5. DNA-koncentration i ng/µl = korrigeret A (opløsningsfaktor) 50 (omregningsfaktor). 6. A 260 /A 280 -forhold: Dividér korrigeret A 260 med korrigeret A 280. Eksempel 1. Vi antager, at den målte A 320 = 0,025, A 280 = 0,175 og A 260 = 0, DNA-koncentrationen af den ufortyndede prøve vil være: (A A 320 ) 10 [fortyndingsfaktor] 50 [omregningsfaktor] = (0,295-0,025) = 0, = 135 ng/μl eller 135 μg/ml 3. Det korrigerede A 260 -/A 280 -forhold vil være: (A A 320 ) (A A 320 ) = (0,296-0,025) (0,175-0,025) = 0,270 0,150 = 1,80 Referencer 1 Bestemmelse af mængden af DNA ved anvendelse af fluorescens/dnase (F/D)-analyse. Erstattet af mængdebestemmelse af DNA med anvendelse af SYBR Green I farve og en mikropladelæser. DNA Genotek. PD-PR Fjernelse af RNA ved dobbelt RNase-digestion. DNA Genotek. PD-PR-040. Teknisk support har åbent mandag til fredag ( EST): Ring gratis (Nordamerika): , option 6 Alle andre lande: , option 6 support@dnagenotek.com Oragene DNA og ORAcollect DNA sælges ikke i USA. Oragene DISCOVER er kun beregnet til forskningsbrug, ikke til anvendelse i diagnostiske procedurer. Nogle DNA Genotek-produkter fås muligvis ikke i alle geografiske regioner. Oragene, prepit og ORAcollect er registrerede varemærker tilhørende DNA Genotek Inc. Alle andre mærker og navne indeholdt heri er de respektive ejeres ejendom. Alle DNA Genotek-protokoller, -hvidbøger og -anvendelsesnoter findes på vores webside under support. 4
5 Kortfattet vejledning: Laboratorieprotokol for manuel rensning af DNA fra 0,5 ml prøve Isoleringstrin 1. Bland prøven i DNA-Genotek-sættet ved at vende og ryste den blidt i et par sekunder. 2. Prøven inkuberes ved 50 C i en vandinkubator i mindst 1 time eller i en luftinkubator i mindst 2 timer. 3. Overfør 500 af prøven til et mikrocentrifugerør. 4. Tilsæt 20 PT-L2P og bland ved vortex i et par sekunder. 5. Inkuberes på is i 10 minutter. 6. Centrifugeres ved stuetemperatur i 5 minutter ved g. 7. Med pipette overføres størstedelen af den klare supernatant til et nyt mikrocentrifugerør. Kassér pelleten. 8. Tilsæt 600 RT % ethanol til den klare supernatant. Blandes forsigtigt ved 10 gange inversion. 9. Lad prøven stå ved stuetemperatur i 10 minutter, så DNA en udfældes helt. 10. Placér røret i mikrocentrifugen i en kendt orientering. Centrifugeres ved stuetemperatur i 2 minutter ved g. 11. Fjern forsigtigt supernatanten med pipette og kassér den. Pas på ikke at ødelægge DNA-pelleten. 12. Tilsæt % ethanol, og lad det stå ved stuetemperatur i 1 minut. Fjern ethanolen fuldstændigt uden at ødelægge pelleten. 13. Tilsæt 100 TE-opløsning, og vortex prøven i mindst 5 sekunder. 14. Inkubér natten over ved stuetemperatur eller ved 50 C i en time med lejlighedsvis vortex. 15. Opbevaring: I alikvoter ved -20 C for langtidsopbevaring (anbefalet) eller ved 4 C i op til 2 måneder. 5
Biotechnology Explorer
Biotechnology Explorer Oprensning af genomisk DNA fra plantemateriale Manual Katalog nr. 166-5005EDU explorer.bio-rad.com Oversat og bearbejdet af Birgit Sandermann Justesen, Nærum Gymnasium, februar 2009
Læs mereTissue_LC_200_V7_DSP og Tissue_HC_200_V7_DSP
August 2015 QIAsymphony SPprotokolark Tissue_LC_200_V7_DSP og Tissue_HC_200_V7_DSP Dette dokument er Tissue_LC_200_V7_DSP og Tissue_HC_200_V7_DSP QIAsymphony SPprotokolark, R2, til kitversion 1. QIAsymphony
Læs mereRegnskovens hemmeligheder
Center for Undervisningsmidler, afdeling København Regnskovens hemmeligheder Øvelsesvejledning Formål Et gen for et kræfthelbredende protein er blevet fundet i nogle mystiske blade i regnskoven. Forskere
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Forsøgsvejledning Navn: Side 1 af 7 Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA
Læs mereAppendix 1: Udregning af mængde cellesuspention til udsåning. Faktor mellem total antal celler og antal celler der ønskes udsås:
Appendix Appendix 1: Udregning af mængde cellesuspention til udsåning Fortyndingsfaktor: Efter trypsinering og centrifugering af celler fra cellestokken, opblandes cellerne i 1 ml medie. For at lave en
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Navn: Forsøgsvejledning Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA sekvens,
Læs mereProtokol for genetisk bestemmelse af ABO blodtyper
Page1 Udarbejdet i samarbejde mellem: Kåre Lehmann, Annabeth Høgh Petersen, Anne Rusborg Nygaard og Jørn M. Clausen Page2 VIGTIGT: SKIFT PIPETTE SPIDSER/TIPS EFTER HVER GANG!! Så undgår du at forurene
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Navn: Forsøgsvejledning Side 1 af 8 Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Navn: Forsøgsvejledning Side 1 af 8 Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA-sekvens,
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Navn: Forsøgsvejledning Side 1 af 8 Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA-sekvens,
Læs mereGreen Fluorescent Protein (GFP) Oprensning af GFP
1 Green Fluorescent Protein (GFP) Oprensning af GFP Katalognummer 166-0005EDU www.biorad.com Oversat og bearbejdet af Birgit Sandermann Justesen, Nærum Gymnasium Revideret februar 2010. Kontakt: Birgitjustesen@gmail.com
Læs mereQIAsymphony SP-protokolark
Februar 2017 QIAsymphony SP-protokolark circdna_2000_dsp_v1 og circdna_4000_dsp_v1 Dette dokument er QIAsymphony circdna_2000_dsp_v1 og circdna_4000_dsp_v1 protokolark, version 1, R1 Sample to Insight
Læs mereAdnaTest ProstateCancerSelect
AdnaTest ProstateCancerSelect Berigelse af tumorceller fra blod fra prostatacancerpatienter til genekspressionsanalyse Til in vitro-diagnostisk brug Vejledning T-1-520 Indhold Bestillingsinformation...
Læs mereTissue_LC_200_V7_DSP og Tissue_HC_200_V7_DSP (brugervalideret til QIAsymphony DSP DNA Mini-kit)
August 2015 QIAsymphony SP-protokolark Tissue_LC_200_V7_DSP og Tissue_HC_200_V7_DSP (brugervalideret til QIAsymphony DSP DNA Mini-kit) Dette dokument er Tissue_LC_200_V7_DSP og Tissue_HC_200_V7_DSP (brugervalideret
Læs mereLeucosep rør LTK.615 INDLÆGSSEDDEL. Til diagnostisk anvendelse in vitro PI-LT.615-DK-V3
Leucosep rør LTK.615 INDLÆGSSEDDEL Til diagnostisk anvendelse in vitro PI-LT.615-DK-V3 Vejledende information Tilsigtet anvendelse Leucosep rørene er beregnet til anvendelse i forbindelse med indsamling
Læs mereBiotechnology Explorer
Biotechnology Explorer Green Fluorescent Protein (GFP) Oprensnignskit Katalognummer 166-0005-EDU www.bio-rad.com For teknisk service bedes du ringe til dit lokale Bio-Rad kontor Office or in the U.S. Call
Læs mereGAPDH PCR modul Manual
GAPDH PCR modul Manual Katalog nr. 166-5010EDU explorer.bio-rad.com Kopiering kun tilladt til undervisningsbrug Bemærk: Kittet indeholder temperaturfølsomme dele. Åbn derfor straks kassen og læg de pågældende
Læs mereQIAsymphony SP Protokolside
QIAsymphony SP Protokolside Cellfree500_V3_DSP protokol Generel information Til in vitro-diagnostisk brug. Kit Prøvemateriale Protokolnavn QIAsymphony DSP Virus/Pathogen Midi-kit Plasma, serum og CSF Cellfree500_V3_DSP
Læs mereBiotechnology Explorer. Regnskovens hemmelighed
Biotechnology Explorer Regnskovens hemmelighed Katalognummer 166-0006-EDU explorer.bio-rad.com For teknisk service bedes du ringe til dit lokale Bio-Rad kontor Office or in the U.S. Call 1-800-4BIORAD
Læs mereDNA origami øvelse DNA origami øvelse
DNA origami øvelse Introduktion I denne øvelse bruger vi DNA origami teknikken til at samle en tavle af DNA med dimensioner på 70 nm x 100 nm. Tavlen dannes af et langt enkeltstrenget DNA molekyle, der
Læs mereKRIMINALDETEKTIVEN GERNINGSSTEDETS GÅDE PCR
KRIMINALDETEKTIVEN GERNINGSSTEDETS GÅDE Elevvejledning PCR PCR trin for trin PCR involverer en række gentagne cykler, der hver består af følgende tre trin: Denaturering, primer påsætning og forlængelse
Læs mereMælkesyrebakterier og holdbarhed
Mælkesyrebakterier og holdbarhed Formål Formålet med denne øvelse er at undersøge mælkesyrebakteriers og probiotikas evne til at øge holdbarheden af kød ved at: 1. Undersøge forskellen på bakterieantal
Læs mereKapitel 1 Genteknologi (1/6)
Kapitel 1 Genteknologi (1/6) Transformation FOTO: SØREN LUNDBERG FORMÅL At isolere plasmider fra plasmidbærende bakterier og overføre dem til andre bakterier. TEORI Transformation er den teknik, hvor generne
Læs mereKædens længde kan ligger mellem 10 og 14 carbonatomer; det mest almindelige er 12.
Kemi laboratorieforsøg 9.2 Anioniske surfaktanter Anioniske surfaktanter er vaskeaktive stoffer, der har en hydrofob ende og en hydrofil ende. Den hydrofile ende er negativt ladet, dvs. en anion. Da der
Læs mereQIAsymphony SP Protokolside
QIAsymphony SP Protokolside Cellfree200_V5_DSP protokol Generel information Til in vitro-diagnostisk brug. Kit Prøvemateriale Protokolnavn QIAsymphony DSP Virus/Pathogen Mini-kit Plasma, serum og CSF Cellfree200_V5_DSP
Læs mereBiotechnology Explorer
Biotechnology Explorer Genes in a Bottle Kit DNA Extraction Module Lav et halssmykke med dit eget DNA Katalognr.: 166-2000EDU Dertil kan man købe ekstradele, hvis der skal laves halskæder til eleverne.
Læs mereAnalyse af proteiner Øvelsesvejledning
Center for Undervisningsmidler, afdeling København Analyse af proteiner Øvelsesvejledning Formål At separere og analysere proteiner i almindelige fødevarer ved brug af gelelektroforese. Teori Alle dele
Læs mereDNA-smykke Simpel ekstraktion af DNA fra kindceller fra mennesket, som er velegnet til at bruge i et halssmykke
145678 John Schollar and Dean Madden National Centre for Biotechnology Education, University of Reading Science and Technology Centre, Earley Gate, Reading RG6 6BZ UK E: J.W.Schollar@reading.ac.uk Simpel
Læs mereMælkesyrebakterier og holdbarhed
Mælkesyrebakterier og holdbarhed Navn: Forsøgsvejledning Mælkesyrebakterier og holdbarhed Formål med forsøget Formålet med denne øvelse er at undersøge mælkesyrebakteriers og probiotikas evne til at øge
Læs mereDNA origami øvelse. Introduktion. DNA origami øvelse 3 timer 2018
DNA origami øvelse Introduktion I denne øvelse bruger vi DNA origami teknikken til at samle en tavle af DNA med dimensioner på 70 nm x 100 nm. Tavlen dannes af et langt enkeltstrenget DNA molekyle, der
Læs mereAndrostenon-indol-skatol-protokol.
Androstenon-indol-skatol-protokol. Indholdsfortegnelse: 1. Formål side 2 2. Teori side 2 2. Prøvebehandling side 2 3. Materialer side 2 3.1 Apparatur side 2 3.2 Kemikalier side 3 3.3 Reagenser side 3 4.
Læs mere0 Indhold. Titel: Klorofyl a koncentration. Dokumenttype: Teknisk anvisning. Version: 1
Titel: Klorofyl a koncentration Dokumenttype: Teknisk anvisning Forfattere: Stiig Markager og Henrik Fossing TA henvisninger TA. nr.: M07 Version: 1 Oprettet: 20.12.2013 Gyldig fra: 20.12.2013 Sider: 10
Læs mereDNA origami øvelse 2013. DNA origami øvelse
DNA origami øvelse Introduktion I denne øvelse bruger vi DNA origami teknikken til at samle en tavle af DNA med dimensioner på 70 nm x 100 nm. Tavlen dannes af et langt enkeltstrenget DNA molekyle, der
Læs mereBrugsanvisning IVD Matrix HCCA-portioned
Brugsanvisning IVD Matrix HCCA-portioned Rendyrket matrixsubstans til matrix-assisteret-laser-desorption-ionisering time-of-flight-massespektrometri (MALDI-TOF-MS). CARE- produkterne er designet til at
Læs mereQIAsymphony SP-protokolark
QIAsymphony SP-protokolark PC_AXpH_HC2_V1_DSP-protokol Tilsigtet anvendelse Til in vitro-diagnostisk brug. Denne protokol er udviklet til brug sammen med cervikalprøver, der opbevares i PreservCyt -opløsning,
Læs mereSOP #1, HÅNDTERING AF BLOD
Introduktion Følgende standard operating procedure (SOP) beskriver arbejdsgangen i forbindelse med indsamling og håndteringen af blod til opbevaring i (DRB). Blod tappes fra reumatologiske patienter én
Læs mereKvantitativ bestemmelse af reducerende sukker (glukose)
Kvantitativ bestemmelse af reducerende sukker (glukose) Baggrund: Det viser sig at en del af de sukkerarter vi indtager med vores mad er hvad man i fagsproget kalder reducerende sukkerarter. Disse vil
Læs mereMatematiske modeller Forsøg 1
Matematiske modeller Forsøg 1 At måle absorbansen af forskellige koncentrationer af brilliant blue og derefter lave en standardkurve. 2 ml pipette 50 og 100 ml målekolber Kuvetter Engangspipetter Stamopløsning
Læs mereIsolering af DNA fra løg
Isolering af DNA fra løg Formål: At afprøve en metode til isolering af DNA fra et levende væv. At anvende enzymer.. Indledning: Isolering af DNA fra celler er første trin i mange molekylærbiologiske undersøgelser.
Læs mereDette er en kladde til et genoptryk af Eksperimentel Genteknologi fra 1991. Ideer, rettelser og forslag modtages gerne. Kh Claudia.
Transformation af E.coli K 12 Version 3. marts 2009 (C) Claudia Girnth-Diamba og Bjørn Fahnøe Dette er en kladde til et genoptryk af Eksperimentel Genteknologi fra 1991. Ideer, rettelser og forslag modtages
Læs mereQIAsymphony SP protokolark
QIAsymphony SP protokolark Tissue_LC_200_V7_DSP og Tissue_HC_200_V7_DSP Generel information Til in vitro-diagnostisk brug. Disse protokoller er til oprensning af totalt DNA fra væv og formalinfikseret,
Læs mereMaxwell 16 Blood DNA Purification System
Teknisk vejledning Maxwell 16 Blood DNA Purification System Forsigtig - håndter kassettene med omhu, kanterne på forsejlingen kan være skarpe. 2800 Woods Hollow Rd. Madison, WI USA In vitro diagnostisk
Læs mereEn forsker har lavet et cdna insert vha PCR og har anvendt det følgende primer sæt, som producerer hele den åbne læseramme af cdna et:
F2011-Opgave 1. En forsker har lavet et cdna insert vha PCR og har anvendt det følgende primer sæt, som producerer hele den åbne læseramme af cdna et: Forward primer: 5 CC ATG GGT ATG AAG CTT TGC AGC CTT
Læs mereBilag til Kvantitativ bestemmelse af glucose
Bilag til Kvantitativ bestemmelse af glucose Det synlige formål med øvelsen er at lære, hvorledes man helt præcist kan bestemme små mængder af glucose i en vandig opløsning ved hjælp af målepipetter, spektrofotometer
Læs merePlasmidoprensning med kogemetode Oprensning af plasmid DNA med kogemetode for brug til transformation og restriktionsanalyse
www.volvoxdk.dk C. Girnth-Diamba og B. Fahnøe, 2010 Claudia Girnth-Diamba og Bjørn Fahnøe Solrød Gymnasium, Solrød Center 2 DK 2680 Solrød Strand, Denmark E: sgcg@solgym.dk og sgbf@solgym.dk Plasmidoprensning
Læs mereSOP for håndtering af standardsæt blod Regionernes Bio- og GenomBank
SOP for håndtering af standardsæt blod Regionernes Bio- og GenomBank Introduktion Følgende standard operating procedure (SOP) beskriver arbejdsgangen i forbindelse med indsamling og håndteringen af blod
Læs mereKombucha INSTRUKTIONER. Inden du begynder
INSTRUKTIONER Inden du begynder Kombucha-moderen er tørret og skal aktiveres. Opbevar kombucha-moderen i køleskab indtil aktivering. Aktiveringsprocessen tager 10-28 dage. Se instruktionerne herunder.
Læs mereØvelse med tarmkræftceller i kultur.
Øvelse med tarmkræftceller i kultur. Baggrund Hver 3. dansker bliver ramt af kræft, inden de er blevet 75 år. Tyktarmskræft er den 3. hyppigste kræftform hos både mænd og kvinder, hvor henholdsvis 7.3
Læs mereDNA origami øvelse DNA origami øvelse
DNA origami øvelse Introduktion I denne øvelse bruger vi DNA origami teknikken til at samle en tavle af DNA med dimensioner på 70 nm x 100 nm. Tavlen dannes af et langt enkeltstrenget DNA molekyle, der
Læs mereJernindhold i fødevarer bestemt ved spektrofotometri
Bioteknologi 4, Tema 8 Forsøg www.nucleus.dk Linkadresserne fungerer pr. 1.7.2011. Forlaget tager forbehold for evt. ændringer i adresserne. Jernindhold i fødevarer bestemt ved spektrofotometri Formål
Læs mereRegnskovens hemmelighed
1 Regnskovens hemmelighed Katalognummer 1660006-EDU www.bio-rad.com Oversat og bearbejdet af Birgit Sandermann Justesen, Nærum Gymnasium Revideret februar 2010. Kontakt: Birgitjustesen@gmail.com Brugen
Læs mereIVD Bacterial Test Standard
Brugsanvisning IVD Bacterial Test Standard Standard for massekalibrering, som viser en typisk Escherichia coli DH5- alfapeptid- og -proteinprofil plus yderligere proteiner. Til anvendelse ved matrix-assisteret-laser-desorption-ionisering
Læs mereGerningsstedets gåde Den usynlige sandhed - DNA PCR Basics Kit. Katalog nr. 166-2600EDU
1 Gerningsstedets gåde Den usynlige sandhed - DNA PCR Basics Kit Katalog nr. 166-2600EDU Bemærk: Kittet indeholder temperaturfølsomme dele. Åbn derfor straks pakken og læg de dele, der er mærket med -20
Læs mere[BESØGSSERVICE INSTITUT FOR MOLEKYLÆRBIOLOGI OG GENETIK, AU]
Enzymkinetik INTRODUKTION Enzymer er biologiske katalysatorer i alle levende organismer som er essentielle for liv. Selektivt og effektivt katalyserer enzymerne kemiske reaktioner som ellers ikke ville
Læs mereAptima Multitest Swab Specimen Collection Kit
Multitest Swab Specimen Collection Kit Aptima Tilsigtet anvendelse Aptima Multitest Swab Specimen Collection Kit (Aptima Multitest prøvetagningskit til podning) er til brug med Aptima assays. Aptima Multitest
Læs mereFind enzymer til miljøvenligt vaskepulver
Find enzymer til miljøvenligt vaskepulver Enzymer, der er aktive under kolde forhold, har adskillige bioteknologiske anvendelsesmuligheder. Nye smarte og bæredygtige produkter kan nemlig blive udviklet
Læs mereSpm. 1.: Hvis den totale koncentration af monomer betegnes med CT hvad er så sammenhængen mellem CT, [D] og [M]?
DNA-smeltetemperaturbestemmelse KemiF2-2008 DNA-smeltetemperaturbestemmelse Introduktion Oligonucleotider er ofte benyttet til at holde nanopartikler sammen med hinanden. Den ene enkeltstreng er kovalent
Læs mereTeknisk anvisning for marin overvågning
NOVANA Teknisk anvisning for marin overvågning 2.3 Klorofyl a Britta Pedersen H Afdeling for Marin Økologi Miljøministeriet Danmarks Miljøundersøgelser 2.3-1 Indhold 2.3 Klorofyl-a 2.3-3 2.3.1 Formål 2.3-3
Læs mereMaxwell CSC Blood RNA Kit
TEKNISK VEJLEDNING Maxwell CSC Blood RNA Kit Brugsanvisning for produktet AS1410 Forsigtig: Håndter cartridges forsigtigt; kanterne af forseglingen kan være skarpe. BRUGSANVISNING FOR PRODUKTET AS1410
Læs merePAXgene Blood RNA Kit-håndbog
PAXgene Blood RNA Kit-håndbog Februar 2019 Version 2 50 (katalog nr. 762174) R3 1115879DK 762174 PreAnalytiX GmbH Feldbachstrasse, CH-8634 Hombrechtikon Fremstillet af QIAGEN GmbH for PreAnalytiX Varemærker:
Læs mereTag dine gener om halsen. Isoler dit eget DNA, og lav et halssmykke ud af det.
Samarbejde mellem gymnasier og Aarhus Universitet Bioteknologiske eksperimenter Tag dine gener om halsen. Isoler dit eget DNA, og lav et halssmykke ud af det. Denne øvelse er baseret på øvelseskittet:
Læs mereBiologisk rensning Fjern opløst organisk stof fra vand
Spildevandscenter Avedøre Biologisk rensning Fjern opløst organisk stof fra vand Øvelse I Formål: På renseanlægget renses et mekanisk, biologisk og kemisk. I den biologiske rensning på renseanlægget benyttes
Læs merePAXgene Blood RNA Kit-håndbog
PAXgene Blood RNA Kit-håndbog Version 2 PAXgene Blood RNA-systemet indeholder et rør til blodprøvetagning (PAXgene Blood RNA-rør) og et kit (PAXgene Blood RNA-kit) til oprensning af nukleinsyrer. Systemet
Læs mereOprensning af fructofuranosidase fra gær. Matematik. Kemi. LMFK-bladet, nr. 3, maj
Oprensning af fructofuranosidase fra gær Formål Øvelsens formål er at demonstrere, hvordan et enzym kan ekstraheres fra gær og groft oprenses via gelfiltrering. Desuden bestemmes enzymets aktivitet og
Læs mereSom substrat i forsøgene anvender vi para nitrophenylfosfat, der vha. enzymet omdannes til paranitrofenol
Enzymkinetik Introduktion I disse forsøg skal I arbejde med enzymet alkalisk fosfatase. Fosfataser er meget almindelige i levende organismer og er enzymer med relativt bred substrat specificitet. De katalyserer
Læs mereKvantitativ bestemmelse af glukose
Kvantitativ bestemmelse af glukose Baggrund: Det viser sig at en del af de sukkerarter, vi indtager med vores mad, er, hvad man i fagsproget kalder reducerende sukkerarter. Disse vil i en stærk basisk
Læs mereForsøgsprotokol til larveforsøg: Tilsætning af 3 dage gamle larver til gødning inficeret med patogene bakterier
Forsøgsprotokol til larveforsøg: Tilsætning af 3 dage gamle larver til gødning inficeret med patogene bakterier Formål: at undersøge udviklingen i mængden af tilsatte patogene bakterier til hønsegødning.
Læs mereBrugsanvisning IVD Matrix HCCA-portioned
Brugsanvisning IVD Matrix HCCA-portioned Rendyrket matrixsubstans til matrix-assisteret-laser-desorption-ionisering time-of-flight-massespektrometri (MALDI-TOF-MS). CARE- produkterne er designet til at
Læs mereTitel: OPLØSELIGHEDEN AF KOBBER(II)SULFAT. Litteratur: Klasse: Dato: Ark 1 af. Helge Mygind, Kemi 2000 A-niveau 1, s. 290-292 8/9-2008/OV
Fag: KEMI Journal nr. Titel: OPLØSELIGHEDEN AF KOBBER(II)SULFAT Navn: Litteratur: Klasse: Dato: Ark 1 af Helge Mygind, Kemi 2000 A-niveau 1, s. 290-292 8/9-2008/OV Formålet er at bestemme opløseligheden
Læs mereProteinelektroforese af GFP Suppleringskit til pglo
Proteinelektroforese af GFP Suppleringskit til pglo Katalognummer nr. 166 0013EDU www.bio rad.com Oversat og bearbejdet af Birgit Sandermann Justesen, Nærum Gymnasium, Nærum Hovedgade 30, 2850 Nærum Birgitjustesen@gmail.com
Læs mereElevvejledning pglo transformation
Introduktion til transformation Elevvejledning pglo transformation I denne øvelse skal du lære fremgangsmåden ved genetisk transformation. Husk på, at et gen er et stykke DNA, der indeholder informationer
Læs mereBanan DNA 1/6. Formål: Formålet med øvelsen er at give eleverne mulighed for at se DNA strenge med det blotte øje.
Banan DNA Formål: Formålet med øvelsen er at give eleverne mulighed for at se DNA strenge med det blotte øje. Baggrundsviden: Om vi er mennesker, dyr eller planter, så har alle organismer DNA i deres celler.
Læs mereBestemmelse af celletal
Bioteknologi 2, Tema 3 Forsøg 4 Bestemmelse af celletal Mange klassiske mikrobiologiske metoder har til formål at undersøge hvor mange mikroorganismer man har i sin prøve. Det undersøger man gennem forskellige
Læs mereLigerings- og transformationsmodul inklusiv plasmidoprensning og restriktionsanalyse
Biotechnology Explorer Ligerings- og transformationsmodul inklusiv plasmidoprensning og restriktionsanalyse Katalog nr. 166-5015EDU explorer.bio-rad.com Kopiering kun tilladt til undervisningsbrug Bemærk:
Læs mereSæt eksperimentet op i din baghave. Hjælp forskerne MYREJAGTEN. VEJLEDNING For hele familien. Deltag i konkurrencen
Hjælp forskerne Sæt eksperimentet op i din baghave MYREJAGTEN VEJLEDNING For hele familien Deltag i konkurrencen VELKOMMEN TIL MYREJAGTEN Tak fordi du deltager i eksperimentet og hjælper os med at gøre
Læs mereFormål At analysere for myosin i muskelvæv fra fisk ved brug af western blotting
Center for Undervisningsmidler, afdeling København Western blotting Øvelsesvejledning Formål At analysere for myosin i muskelvæv fra fisk ved brug af western blotting Teori Proteomik er studiet af celleproteiners
Læs mereScanGel ReverScan A1, B 86790 2 x 5 ml ReverScan A1, A2, B, O 86795 4 x 5 ml
ScanGel ReverScan A1, B 86790 2 x 5 ml ReverScan A1, A2, B, O 86795 4 x 5 ml HUMANE TESTERYTHROCYTER TIL ABO-SERUMKONTROL IVD Alle de af Bio-Rad producerede og markedsførte produkter gennemgår fra modtagelse
Læs mereMaxwell CSC RNA FFPE Kit
TEKNISK VEJLEDNING Maxwell CSC RNA FFPE Kit Brugsanvisning for produktet AS1360 Forsigtig: Håndter cartridges forsigtigt; kanterne af forseglingen kan være skarpe. BRUGSANVISNING FOR PRODUKTET AS1360 2800
Læs mereHåndbog til artus HSV 1/2 QS- RGQ-kit
Oktober 2014 Håndbog til artus HSV 1/2 QS- RGQ-kit Version 1 24 Kvalitativ in vitro-diagnostik Til brug sammen med QIAsymphony SP/AS- og Rotor-Gene Q-instrumenter 4500363 1062626DA QIAGEN GmbH, QIAGEN
Læs mereOpdateret d. 17. august Biosensor. Niveau 1. Øvelsesvejledning
Opdateret d. 17. august 2017 Biosensor Niveau 1 Øvelsesvejledning Vigtig information om brug af Biosensor-kittet for undervisere Før øvelsen startes er det vigtigt, at underviseren har læst følgende erklæring
Læs mereAlgedråber og fotosyntese
Algedråber og fotosyntese Fotosyntesen er en utrolig kompleks proces, som kan være svær at forstå. Heldigvis kan fotosyntesen illustreres på en måde, så alle kan forstå, hvad der helt præcist foregår i
Læs mereBRUGSANVISNING CAL J250
BRUGSANVISNING CAL J250 Automatisk vanddybde måling Vandsensoren registrerer vand kontakt og starter måling af vanddybde automatisk. Maksimal vanddybde indikation Du kan se den maksimal vanddybde for sidste
Læs mereSÅDAN GØR DU, NÅR DU KOMMER HJEM
Du skal i gang med at måle CRP på apparatet Quik Read Go. Det er fødeafdelingen, der fortæller dig, hvor ofte du skal foretage CRP-måling og lave de øvrige undersøgelser, som du skal gennemføre på dig
Læs mereHjemmelavet ost. Hvis man ikke har prøvet det før, kan det måske være lidt svært at overskue at gå igang med at lave sin egen hjemmelavede ost, så...
Hvis man ikke har prøvet det før, kan det måske være lidt svært at overskue at gå igang med at lave sin egen hjemmelavede ost, så... Her er lidt hjælp En skridt for skridt opskrift til en af de nemmeste
Læs mereE 10: Fremstilling af PEC-solceller
E 10: Fremstilling af PEC-solceller Formål Formålet med forsøget er at fremstille PEC (Photo Electro Chemical) solceller ud fra vinduesruder, plantesaft, hvid maling og grafit fra en blyant. Apparatur
Læs mereBrugsanvisning, oversættelse
Brugsanvisning, oversættelse Funktionsbeskrivelse Top 1. Display (LCD) 2. Read =tryk for Aflæsning 3. Zero =Nulstil 4. ON/Off Tænd/ sluk 5. Primær display 6. Sekundær display 7. Rustfri stål brønd til
Læs mereBIOZYMER ØVELSE 2 OPRENSNING AF PROTEINER
BIOZYMER ØVELSE 2 OPRENSNING AF PROTEINER FAGLIG BAGGRUND Det forudsættes, at den grundlæggende teori bag rekombinant protein ekspression og proteinopresning er bekendt. For dette henvises til undervisningsmateriale
Læs mere7900003 24 analyser Circulating Tumor Cell Control Kit
7900003 24 analyser Circulating Tumor Cell Control Kit 1 TILSIGTET ANVENDELSE Til in vitro-diagnostisk brug CELLSEARCH -kontrolkit til cirkulerende tumorceller er beregnet til brug som analysekontrol for
Læs mereMaxwell CSC DNA FFPE Kit
TEKNISK VEJLEDNING Maxwell CSC DNA FFPE Kit Brugsanvisning for produktet AS1350 Forsigtig: Håndter cartridges forsigtigt; kanterne af forseglingen kan være skarpe. BRUGSANVISNING FOR PRODUKTET AS1350 2800
Læs mereQIAsymphony SP Protokolside
QIAsymphony SP Protokolside Complex400_V3_DSP protokol Generel information Til in vitro-diagnostisk brug. Kit Prøvemateriale Protokolnavn QIAsymphony DSP Virus/Pathogen Midi-kit Luftvejs- og urogenitale
Læs mereI både nationale love, såsom arbejdsmiljøloven, samt Det Europæiske Kemikalieagenturs REACH, finder du substitutionskrav.
SUBSTITUTION SÅDAN ERSTATTER DU FARLIGE KEMIKALIER ECOONLINE Indledning Substitution betyder udskiftning. Med andre ord, når man taler om substitution af kemikalier, handler det om at erstatte stoffer
Læs mereAptima prøvetagningskit til multitestpodning
Tilsigtet brug Aptima prøvetagningskit til multitestpodning er til brug med Aptima assays. Aptima prøvetagningskit til multitestpodning er beregnet til vaginale podningsprøver taget af klinikeren eller
Læs mereELISA Kvantitativ bestemmelse af human IgA i brystmælk Elevvejledning.
ELISA Kvantitativ bestemmelse af human IgA i brystmælk Elevvejledning. Professionshøjskolen University College Nordjyland Laborantafdelingen 2012 Side 1 Indledning En kvinde føder og bliver mor til sit
Læs mereHåndbog til QIAamp DSP DNA FFPE Tissue-kit
Februar 2017 Håndbog til QIAamp DSP DNA FFPE Tissue-kit Version 1 50 Til in vitro-diagnostisk brug 60404 QIAGEN GmbH, QIAGEN Strasse 1, 40724 Hilden, TYSKLAND R3 1062689DA Sample to Insight Håndbog til
Læs mereMercodia C-peptide ELISA
Mercodia C-peptide ELISA Brugsanvisning 10-1136-01 REAGENS TIL 96 BESTEMMELSER Til in vitro-diagnosticering Fremsstillet af Mercodia AB Sylveniusgatan 8A SE-754 50 Uppsala Sverige FORKLARING AF SYMBOLER
Læs mereB i o k e m i ø v e l s e 1 Regulatoriske mekanismer i det intermediære stoftskifte Udarbejdet af: Matilda Lantz og Elif Bayram
Regulatoriske mekanismer i det intermediære stoftskifte Udarbejdet af: Matilda Lantz og Elif Bayram Dato: 20. November 2011 Underskrifter: Godkendt: Dato Regulatoriske mekanismer i det intermediære stofskifte
Læs mereLTK.615 INDLÆGSSEDDEL
LTK.615 INDLÆGSSEDDEL Til diagnostisk brug in vitro PI-LT.615-DK-V4 Brugsvejledning Tilsigtet anvendelse Leucosep-glas er beregnet til indsamling og separation af perifere, enkernede blodceller (PBMC er)
Læs mereanalyser Circulating Tumor Cell Control Kit
7900003 24 analyser Circulating Tumor Cell Control Kit 1 TILSIGTET ANVENDELSE Til in vitro-diagnostisk brug CELLSEARCH -kontrolkit til cirkulerende tumorceller er beregnet til brug som analysekontrol for
Læs mereBestemmelse af koffein i cola
Bestemmelse af koffein i cola 1,3,7-trimethylxanthine Koffein i læskedrikke Læs følgende links, hvor der blandt andet står nogle informationer om koffein og regler for hvor meget koffein, der må være i
Læs mereEnVision FLEX, High ph, (Dako Autostainer/Autostainer Plus)
EnVision FLEX, High ph, (Dako Autostainer/Autostainer Plus) Kode K8010 5. udgave Sættet indeholder reagenser til 400 600 analyser. Til Dako Autostainer/Autostainer Plus. Valgfri reagenser: Kode Produktnavn
Læs mere