ELISA Kvantitativ bestemmelse af human IgA i brystmælk Elevvejledning.
|
|
- Susanne Lauritsen
- 7 år siden
- Visninger:
Transkript
1 ELISA Kvantitativ bestemmelse af human IgA i brystmælk Elevvejledning. Professionshøjskolen University College Nordjyland Laborantafdelingen 2012 Side 1
2 Indledning En kvinde føder og bliver mor til sit barn. På fødeafdelingen anbefales kvinden at amme sit barn, og det er der mange gode grunde til. Dels er det en nem, bekvem og billig måde at give barnet mad på, dels får amningen kvindens livmoder til at trække sig sammen til normal størrelse, og endelig giver modermælken barnet antistoffer der beskytter barnet mod infektioner, indtil barnet opbygget sit eget immunforsvar. Hvis barnet ikke udvikler sit eget immunforsvar, vil det ikke kunne leve en normal tilværelse, da det ustandseligt vil blive sygt og ikke selv være i stand til at komme over de forskellige sygdomme. Immunforsvaret er på en måde barnets indre læge. Barnet vil igennem sin tilværelse blive udsat for mange sygdomsfremkaldende mikroorganismer og afhængigt af immunforsvarets effektivitet, vil barnet forblive rask eller sygt.(fysiologibogen- den levende krop) Sikkerhed: Biologisk smittefare: da der arbejdes med humant serum og kropsvæsker (brystmælk) skal eleverne arbejde med handsker hele tiden. Væskerne der arbejdes med er dog meget fortyndede og dermed er risiciene reduceret. Human serum protein calibrator: produktet indeholder natrium azid, NaN 3. Skyl efter med rigeligt vand for at undgå metal-azid ophobning i afløb. Affaldsbehandling: Indtil pkt. 2.7 i øvelsesvejledningen (tilsætning af enzymsubstrat til brøndene) kan vaskeaffaldet blot skylles ud i vasken og behøver ikke blive opsamlet. Efter at enzymsubstratet er tilsat brøndene skal væsken opsamles i passende og tilgængelig affaldsbeholder. Der medfølger en affaldsbeholder, som affaldet kan sendes retur i, hvis skolen ikke Side 2
3 selv ønsker at bortskaffe affaldet. Den opsamlede væske skal bortskaffes som affald af katagori H (OPD er et organisk molekyle) Tips og tricks: 1) Eleverne skal forsøge i videst muligt omfang at holde overfladen af titerpladen tør således, at de kan påklistre plastfolien uden, at der trækkes væske ud under folien. Derved kan man kontaminere brøndene. 2) Eleverne instrueres grundigt i brugen at pipetterne og understreg kraftigt, at pipetterne ikke må vendes på hovedet, når der er væsker i pipettespidsen. Herved løber væsken ind i pipettens mekanik og beskadiger denne. 3) Det er vigtigt, at man ikke kontaminerer brøndene ved at få væske fra en brønd ført over i en anden. Side 3
4 1. Princip Der opstilles et enzym immun assay kaldet direkte sandwich ELISA. Fortyndinger af prøver og standarder udføres i en titerplades brønde, som i forvejen er coatede med specifikt antistof, Kanin Anti-Human IgA. Prøvens/standardens antigener bindes til det coatede antistof. Ubundet materiale fjernes ved vask af brønden. Herefter tilsættes endnu et antistof med et tilknyttet enzym, Kanin Anti-Human IgA/HRP (HRP = Horseradish Peroxidase). Efter inkubation fjernes overskydende enzymkonjugat ved vask. Mængden af bundet enzymkonjugat bestemmes ved at tilsætte et substrat, OPD (1,2-phenylendiamin dihydrogenchlorid) med H 2 O 2, som sammen med stopreagens (0,5 M H 2 SO 4 ) udvikler en orange farve. Farvesignalet aflæses spektrofotometrisk. Denne farveudvikling er direkte proportional med den oprindelige mængde af IgA i prøven. S = enzymsubstratet OPD+H 2 O 2 Kanin Anti-Human IgA/HRP (Dako A0262) IgA fra prøve eller standard (Dako X0908) Kanin Anti-Human IgA (Dako P0216) Figur 1 Princippet i en ELISA-test. Blokering med casein Figur 1 viser en brønd med antistoffer og antigen bundet til hinanden. Side 4
5 2. Fremgangsmåde: 1. BLOK. SIKKERHED!! Da der arbejdes med humant serum, benyttes handsker gennem hele analyseforløbet Coatning af titerplade Koncentrationen af antistof i den medfølgende coatningsbuffer er ca. 10 mg/l protein (Dako A 0262). Brøndene fyldes med coatningsbuffer, dette gøres med en 8-kanals pipette. Der kommes i alt 320 µl coatningsbuffer i hver brønd (det kan være en fordel af putte lidt mindre i hver brønd eks. 300 µl coatningsbuffer, da det kan være svært ikke at få det til at skumme og flyde over i andre brønde). Titerpladen dækkes med plastfilm, og sættes ved 4 0 C natten over (pladen kan godt stå et par dage i køleskab). Efter coatning vaskes titerpladen på den måde som beskrives i det følgende. 2. BLOK: 2.2. Vaskeprocedure Der vaskes med vaskebuffer og alle brøndene skal vaskes 5 gange. Vaskeren suger, når der ikke trykkes på den sorte knap og vaskeren fylder buffer i brøndene, når der trykkes på den sorte knap. Vask de 8 brønde i kolonne 1 fem gange først, vask dernæst de 8 brønde i kolonne 2 fem gange o.s.v. Sørg for IKKE at få væske fra brøndene i én kolonne med over i den næste kolonne ved at trække væske fra forrige brønde hen over titerpladen Blokering af titerplade Brøndene fyldes med blokeringsbuffer (opvarmet til stuetemperatur). Titerpladen dækkes med plastfilm, og inkuberes under omrystning (200 rpm) i 15 min. ved stuetemperatur. Efter blokering gentages vaskeproceduren i pkt Standardrække Der fremstilles en standardrække ved fortynding af Human Serum Protein Calibrator (Dako X 0908) med IgA-koncentrationen 385 ng/ml. Herfra udtages 280 µl og overføres til brønd A1-A4. Se figur af nedenstående titerplade. Side 5
6 Figur 2 Billedet viser en ubrugt titerplade. I kolonne 1-4, række B-H afpipetteres 120 µl fortyndingsbuffer (se figur 2). Det er nu muligt at foretage en fortynding af standardrækken ned gennem titerpladen, ved at udtage 160 µl fra brønd A1 og overføre det til brønd B1, herefter udtages 160 µl fra brønd B1 og overføres til brønd C1, således fortsættes det ned gennem kolonnen, samt i kolonne 2, 3 og 4. Husk! at udtage 160 µl til spild ved den sidste brønd i hver kolonne. Dermed bliver koncentrationen af IgA 7,7 ng/ml i brønd H1-H Prøve Prøven (brystmælk) er fortyndet 1200 gange for at kunne lave en fortynding ned gennem titerpladen. Den samlede fortynding bliver gange i brøndene i række H. Der er mulighed for at køre to forskellige prøver i denne analyse, ved at anvende brønd A5, A6 og A7 til én prøve (brystmælk) og brønd A8, A9 og A10 til en anden prøve. Den anden prøve kan fx være modermælkserstatning eller rå komælk, fortyndet på samme måde som brystmælk. Fra den fortyndede prøve udtages 280 µl og overføres til brønd A5-A10. I kolonne 5-10 række B-H afpipetteres 120 µl fortyndingsbuffer. Det er nu muligt at foretage en fortynding af prøven ned gennem titerpladen, ved at udtage 160 µl fra brønd A5 og overføre det til brønd B5, herefter udtages 160 µl fra brønd B5 og overføres til brønd C5, således fortsættes det ned gennem kolonnen, samt i kolonne Husk! at udtage 160 µl til spild ved den sidste brønd i hver kolonne. Side 6
7 Kolonnerne 11 og 12 bruges til henholdsvis negativ kontrol og substrat-blind. I kolonne 11 afpiptteres 120 µl fortyndingsbuffer, således dette er den negative kontrol. Kolonne 12, som er substrat blind, forbliver tom indtil pkt Efter påsætning af standardrække og prøver dækkes titerpladen med plastfilm og inkuberes under omrystning (200 rpm) i 2 timer ved stuetemperatur. Alternativt kan der i stedet inkuberes natten over ved 4 0 C (uden omrystning). 3. BLOK: Herefter gentages vaskeproceduren pkt Enzymkonjugat Enzymkonjugatet (Dako P 0216) er fortyndet 4000 gange. Der afpipetteres 200 µl enzymkonjugat-fortynding til brøndene, undtagen substrat blind. Der inkuberes under omrystning (200 rpm) i op til 90 min. ved stuetemperatur (70 min kan gå an, hvis man er tidspresset). Herefter gentages vaskeproceduren pkt BLOK: 2.7. Enzymsubstrat Der afpipetteres 100 µl enzymsubstrat til brøndene (også til substrat blind). Tilsætning af enzymsubstrat foretages med faste intervaller, fx. med 30 sek s interval. Der vil ske en farvereaktion, således at en gul farve vil opstå i standardrækken og i prøver der indeholder IgA. Der tilsættes stopreagens efter en reaktionstid på ca. 7 min. Måden det tilsættes på er beskrevet i det følgende Stopreagens Der afpipetteres 100 µl stopreagens til alle brøndene (også til substrat blind). Tilsætning af stopreagens sker efter samme tidsinterval som anvendt i pkt Der vil ske en farve ændring fra gul til orange. Der inkuberes få sekunder i ryster for at sikre at enzymsubstrat reaktionen stoppes helt Spektrofotometrisk måling (ELISA-reader) Titerpladen aftørres grundigt på undersiden med en kleenex. Der måles på ELISA-readeren ved 450 nm. Side 7
8 O.B.S. Efter målingen på ELISA-readeren skal væsken i brøndene bortskaffes som affald af katagori X?. Det hældes i den opstillede og afmærkede affaldsbeholder. Titerpladen og pipettespidser kan bortkastes i affaldsspand. 3. Resultatbehandling Data eksporteret fra ELISA-readeren kopieres over i Excel, og der tegnes en graf med log koncentration af IgA som abcisse (x-aksen) og gennemsnit af de målte absorbanser som ordinat (y-aksen). IgA-koncentrationen i alle standarderne skal beregnes ud fra stamopløsningens koncentration og fortyndingsfaktoren. Find de punkter som udgør en ret linje og angiv måleområdet. Lav lineær regression og angiv linjens ligning. Beregn prøvens koncentration af IgA ud fra linjens ligning. Det er desværre ikke altid at standardkurven er så pæn, men hvis den er god nok til videre beregning, så kan det anbefales at man kun beregner resultat for prøverne ved den fortynding med højest absorbans indenfor standardkurvens område. Hvis man beregner prøvens koncentration ud fra alle fortyndingerne stemmer resultaterne sandsynligvis ikke overens, da fejlen pga. fortynding bliver større og større ned gennem fortyndingsrækken. Figur 3 Et eksempel på hvordan en titerplade kan se ud, når den er færdigbehandlet. Her er der påført to prøver. Én prøve i kolonne 5-7 og en anden prøve i kolonne Side 8
9 4. Reagensliste Man bør være opmærksom på sikkerheden ved at arbejde med serum, samt ved anvendelse af konc. HCl, konc. H 2 O 2, OPD tabletter og konc. H 2 SO 4. Til alle reagenser anvendes frisk destilleret milliporevand. Alle reagenser opbevares ved 4 0 C ml coatningsbuffer ph 9,6 Der afvejes følgende: 4,29 g Na 2 CO 3 10 H 2 O 2,93 g NaH CO 3 Opløs i ca. 800 ml vand og juster ph til 9,6 med 0,1 M NaOH/HCl. Fyld op til 1000 ml mærket ml 1M tris/hcl ph 7,8 Der afvejes følgende: 60,55 g tris Opløs i ca. 400 ml vand og juster ph til 7,8 med ca. 30 ml konc. HCl. Fyld op til 500 ml mærket ml vaskebuffer (tris-tween) ph 7,8 Der afvejes/afmåles følgende: 100 ml 1M tris/hcl ph 7,8 25,0 g tween-20 Opløs i ca ml vand og juster ph til 7,8 med 1 m NaOH/HCl. Fyld op til 5000 ml mærket. OBS! Der bruges ca. 1 Liter pr. plade ml blokeringsbuffer ph 7,4 Der afvejes følgende: 60,55 g tris 2,5 g casein Opløs i ca. 400 ml vand og juster ph med ca. 35 ml konc. HCl. Fyld op til 500 ml mærket. Side 9
10 ml fortyndingsbuffer ph 7,4 Der afvejes følgende: 60,55 g Tris 0,5 g casein Opløs i ca. 400 ml vand og juster ph med ca. 35 ml konc. HCl. Fyld op til 500 ml mærket ml enzymsubstrat Der afmåles følgende: 4 OPD tabletter 12 ml vand 5 µl konc. H 2 O 2 Tabletterne opløses i vandet inden der tilsættes H 2 O 2. Vær opmærksom på at enzymsubstratet skal bruges indenfor én time. Bemærk indlægsseddel for OPD tabletter ml stopreagens 0,5M H 2 SO 4 Der afmåles følgende: Ca. 80 ml vand 2,8 ml konc. H 2 SO 4 Fyldes op til 100 ml mærket Immunreagenser Kanin Anti-human IgA HRP-konjugeret Kanin Anti-Human IgA Human Serum Protein Calibrator Dako A0262 Dako P0216 Dako X0908 Immunreagenserne opbevares i køleskab. Side 10
ELISA Immuno Explorer TM Kit
- 1 - ELISA Immuno Explorer TM Kit Katalog nummer 166-2400EDU Til læreren Dette kit er lavet for at lette og illustrere immunologiundervisningen og kan give en øget forståelse af antigen-antistof interaktionen,
Læs mereELISA metoden, til bestemmelse af den genetiske profil i høns.
ELISA metoden, til bestemmelse af den genetiske profil i høns. 1 Formål: Formålet med denne øvelse er at demonstrere brugen af antistoffer i diagnostisk eller forskningsøjemed. Dvs. til at undersøge om
Læs mereBiotechnology Explorer ELISA Immuno Explorer Kit. Instruktionsmanual
Biotechnology Explorer ELISA Immuno Explorer Kit Instruktionsmanual Katalognummer 166-2400EDU explorer.bio-rad.com Delene i dette kit er sendt i separate æsker. Opbevar posen med reagenser i køleskab indefor
Læs mereKvantitativ bestemmelse af reducerende sukker (glukose)
Kvantitativ bestemmelse af reducerende sukker (glukose) Baggrund: Det viser sig at en del af de sukkerarter vi indtager med vores mad er hvad man i fagsproget kalder reducerende sukkerarter. Disse vil
Læs mereElevguide Forsøg I: Tjekliste Materialer pr. gruppe.
Elevguide Forsøg I: Opsporing af sygdomsudbrud en sygdoms smitteveje. I dette forsøg skal I prøve at kortlægge smittevejene for koppe-virus. For at stoppe sygdommens fremmarch mest muligt, ønsker man at
Læs mereKvantitativ bestemmelse af glukose
Kvantitativ bestemmelse af glukose Baggrund: Det viser sig at en del af de sukkerarter, vi indtager med vores mad, er, hvad man i fagsproget kalder reducerende sukkerarter. Disse vil i en stærk basisk
Læs mereJernindhold i fødevarer bestemt ved spektrofotometri
Bioteknologi 4, Tema 8 Forsøg www.nucleus.dk Linkadresserne fungerer pr. 1.7.2011. Forlaget tager forbehold for evt. ændringer i adresserne. Jernindhold i fødevarer bestemt ved spektrofotometri Formål
Læs mereKemiøvelse 2 1. Puffere
Kemiøvelse 2 1 Puffere Øvelsens pædagogiske rammer Sammenhæng Denne øvelse er tilpasset kemiundervisningen på modul 3 ved bioanalytikeruddannelsen. Kemiundervisningen i dette modul indeholder blandt andet
Læs mereAnalyse af proteiner Øvelsesvejledning
Center for Undervisningsmidler, afdeling København Analyse af proteiner Øvelsesvejledning Formål At separere og analysere proteiner i almindelige fødevarer ved brug af gelelektroforese. Teori Alle dele
Læs mereØvelse med tarmkræftceller i kultur.
Øvelse med tarmkræftceller i kultur. Baggrund Hver 3. dansker bliver ramt af kræft, inden de er blevet 75 år. Tyktarmskræft er den 3. hyppigste kræftform hos både mænd og kvinder, hvor henholdsvis 7.3
Læs merePuffere. Øvelsens pædagogiske rammer. Sammenhæng. Formål. Arbejdsform: Evaluering
1 Puffere Øvelsens pædagogiske rammer Sammenhæng Denne øvelse er tilpasset kemiundervisningen på modul 3 ved bioanalytikeruddannelsen. Kemiundervisningen i dette modul indeholder blandt andet syrebaseteori
Læs mereKemiøvelse 2 C2.1. Puffere. Øvelsens pædagogiske rammer
Kemiøvelse 2 C2.1 Puffere Øvelsens pædagogiske rammer Sammenhæng Denne øvelse er tilpasset kemiundervisningen på modul 3 ved bioanalytikeruddannelsen. Kemiundervisningen i dette modul indeholder blandt
Læs mere[BESØGSSERVICE INSTITUT FOR MOLEKYLÆRBIOLOGI OG GENETIK, AU]
Enzymkinetik INTRODUKTION Enzymer er biologiske katalysatorer i alle levende organismer som er essentielle for liv. Selektivt og effektivt katalyserer enzymerne kemiske reaktioner som ellers ikke ville
Læs mereMælkesyrebakterier og holdbarhed
Mælkesyrebakterier og holdbarhed Formål Formålet med denne øvelse er at undersøge mælkesyrebakteriers og probiotikas evne til at øge holdbarheden af kød ved at: 1. Undersøge forskellen på bakterieantal
Læs mereMælkesyrebakterier og holdbarhed
Mælkesyrebakterier og holdbarhed Navn: Forsøgsvejledning Mælkesyrebakterier og holdbarhed Formål med forsøget Formålet med denne øvelse er at undersøge mælkesyrebakteriers og probiotikas evne til at øge
Læs mereAppendix 1: Udregning af mængde cellesuspention til udsåning. Faktor mellem total antal celler og antal celler der ønskes udsås:
Appendix Appendix 1: Udregning af mængde cellesuspention til udsåning Fortyndingsfaktor: Efter trypsinering og centrifugering af celler fra cellestokken, opblandes cellerne i 1 ml medie. For at lave en
Læs mereMercodia C-peptide ELISA
Mercodia C-peptide ELISA Brugsanvisning 10-1136-01 REAGENS TIL 96 BESTEMMELSER Til in vitro-diagnosticering Fremsstillet af Mercodia AB Sylveniusgatan 8A SE-754 50 Uppsala Sverige FORKLARING AF SYMBOLER
Læs mereTitel: OPLØSELIGHEDEN AF KOBBER(II)SULFAT. Litteratur: Klasse: Dato: Ark 1 af. Helge Mygind, Kemi 2000 A-niveau 1, s. 290-292 8/9-2008/OV
Fag: KEMI Journal nr. Titel: OPLØSELIGHEDEN AF KOBBER(II)SULFAT Navn: Litteratur: Klasse: Dato: Ark 1 af Helge Mygind, Kemi 2000 A-niveau 1, s. 290-292 8/9-2008/OV Formålet er at bestemme opløseligheden
Læs mereKædens længde kan ligger mellem 10 og 14 carbonatomer; det mest almindelige er 12.
Kemi laboratorieforsøg 9.2 Anioniske surfaktanter Anioniske surfaktanter er vaskeaktive stoffer, der har en hydrofob ende og en hydrofil ende. Den hydrofile ende er negativt ladet, dvs. en anion. Da der
Læs mereEnVision FLEX, High ph, (Dako Autostainer/Autostainer Plus)
EnVision FLEX, High ph, (Dako Autostainer/Autostainer Plus) Kode K8010 5. udgave Sættet indeholder reagenser til 400 600 analyser. Til Dako Autostainer/Autostainer Plus. Valgfri reagenser: Kode Produktnavn
Læs mereNa + -selektiv elektrode
C.11.1 Na + -selektiv elektrode Formål: Øvelsens formål er at kalibrere en Na + -ISE (ionselektiv elektrode) finde elektrodens linearitetsområde anvende elektroden til koncentrationsbestemmelse belyse
Læs mereOprensning af fructofuranosidase fra gær. Matematik. Kemi. LMFK-bladet, nr. 3, maj
Oprensning af fructofuranosidase fra gær Formål Øvelsens formål er at demonstrere, hvordan et enzym kan ekstraheres fra gær og groft oprenses via gelfiltrering. Desuden bestemmes enzymets aktivitet og
Læs mereKemiøvelse 2 C2.1. Buffere. Øvelsens pædagogiske rammer
Kemiøvelse 2 C2.1 Buffere Øvelsens pædagogiske rammer Sammenhæng Denne øvelse er tilpasset kemiundervisningen på modul 3 ved bioanalytikeruddannelsen. Kemiundervisningen i dette modul indeholder blandt
Læs mereMercodia Proinsulin ELISA
Mercodia Proinsulin ELISA Brugsanvisning 10-1118-01 REAGENS TIL 96 BESTEMMELSER Til in vitro-diagnosticering Fremstillet af Mercodia AB, Sylveniusgatan 8A, SE-754 50 Uppsala, Sverige FORKLARING AF SYMBOLER
Læs mereELISA PeliClass human IgG subclass kit REF M1551
Sanquin Reagents Plesmanlaan 5 0 CX Amsterdam The Netherlands Phone: +.0.5.599 Fax: +.0.5.570 Email: reagents@sanquin.nl Website: www.sanquinreagents.com M55/ November 007 ELISA PeliClass human IgG subclass
Læs mereDialyse og carbamidanalyse
C.12.1 Dialyse og carbamidanalyse Formål: Ved dialyse af en vandig opløsning af proteinet albumin og det lavmolekylære stof carbamid trænes forskellige laboratorieprocedurer (afpipettering, tidtagning,
Læs mereBiotechnology Explorer
Biotechnology Explorer Oprensning af genomisk DNA fra plantemateriale Manual Katalog nr. 166-5005EDU explorer.bio-rad.com Oversat og bearbejdet af Birgit Sandermann Justesen, Nærum Gymnasium, februar 2009
Læs mereForsøgsprotokol til larveforsøg: Tilsætning af 3 dage gamle larver til gødning inficeret med patogene bakterier
Forsøgsprotokol til larveforsøg: Tilsætning af 3 dage gamle larver til gødning inficeret med patogene bakterier Formål: at undersøge udviklingen i mængden af tilsatte patogene bakterier til hønsegødning.
Læs mereMåling af ph i syrer og baser
Kemiøvelse 1 1.1 Måling af ph i syrer og baser Øvelsens pædagogiske rammer Sammenhæng Denne øvelse er tilpasset kemiundervisningen på modul 1 ved bioanalytikeruddannelsen. Øvelsen skal betragtes som en
Læs mereSom substrat i forsøgene anvender vi para nitrophenylfosfat, der vha. enzymet omdannes til paranitrofenol
Enzymkinetik Introduktion I disse forsøg skal I arbejde med enzymet alkalisk fosfatase. Fosfataser er meget almindelige i levende organismer og er enzymer med relativt bred substrat specificitet. De katalyserer
Læs mereMercodia Iso-Insulin ELISA
Mercodia Iso-Insulin ELISA Brugsanvisning 10-1128-01 REAGENS TIL 96 BESTEMMELSER Til in vitro-diagnosticering Fremstillet af Mercodia AB, Sylveniusgatan 8A, SE-754 50 Uppsala, Sverige FORKLARING AF SYMBOLER
Læs mereKemiøvelse 2 C2.1. Puffere. Øvelsens pædagogiske rammer
Kemiøvelse 2 C2.1 Puffere Øvelsens pædagogiske rammer Sammenhæng Denne øvelse er tilpasset kemiundervisningen på modul 3 ved bioanalytikeruddannelsen. Kemiundervisningen i dette modul indeholder blandt
Læs mereBilag til Kvantitativ bestemmelse af glucose
Bilag til Kvantitativ bestemmelse af glucose Det synlige formål med øvelsen er at lære, hvorledes man helt præcist kan bestemme små mængder af glucose i en vandig opløsning ved hjælp af målepipetter, spektrofotometer
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Navn: Forsøgsvejledning Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA sekvens,
Læs mereFormål At analysere for myosin i muskelvæv fra fisk ved brug af western blotting
Center for Undervisningsmidler, afdeling København Western blotting Øvelsesvejledning Formål At analysere for myosin i muskelvæv fra fisk ved brug af western blotting Teori Proteomik er studiet af celleproteiners
Læs mereVestsjællands Amtssygehus Klinisk Biokemisk Afdeling Centralsygehuset i Slagelse
Bilag D Vestsjællands Amtssygehus Klinisk Biokemisk Afdeling Centralsygehuset i Slagelse INTERN RAPPORT Afprøvning af Immunofixation af M-komponenter (Bestemmelse af immunoglobulin-klasse og -type) på
Læs mereFind enzymer til miljøvenligt vaskepulver
Find enzymer til miljøvenligt vaskepulver Enzymer, der er aktive under kolde forhold, har adskillige bioteknologiske anvendelsesmuligheder. Nye smarte og bæredygtige produkter kan nemlig blive udviklet
Læs mereMatematiske modeller Forsøg 1
Matematiske modeller Forsøg 1 At måle absorbansen af forskellige koncentrationer af brilliant blue og derefter lave en standardkurve. 2 ml pipette 50 og 100 ml målekolber Kuvetter Engangspipetter Stamopløsning
Læs mereLegionella Urine Antigen EIA 96 807600 Enzyme-Immunoassay for in-vitro påvisning af Legionella antigen i urin
Legionella Urine Antigen EIA 96 807600 Enzyme-Immunoassay for in-vitro påvisning af Legionella antigen i urin 1. PÅTÆNKT ANVENDELSE Legionær sygdommen er forårsaget af Legionella pneumophila og er en akut
Læs mereKonkurrence mellem to bakteriearter
1 Biologi-forsøg: Populationsbiologi/evolution Konkurrence mellem to bakteriearter Forsøget undersøger, hvordan en ydre miljøfaktor (temperatur) påvirker konkurrencen mellem to forskellige arter. I dette
Læs mereRegnskovens hemmeligheder
Center for Undervisningsmidler, afdeling København Regnskovens hemmeligheder Øvelsesvejledning Formål Et gen for et kræfthelbredende protein er blevet fundet i nogle mystiske blade i regnskoven. Forskere
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Navn: Forsøgsvejledning Side 1 af 8 Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA
Læs mereØvelse: Analyse af betanin i rødbede
Forløb: Smagen af frugt og grønt: Kemimateriale modul 2-8 Aktivitet: Øvelse: Analyse af betanin i rødbede Fag: Kemi Klassetrin: 1. g, 2. g, 3. g Side: 1/14 Øvelse: Analyse af betanin i rødbede Forfattere:
Læs mereBIOTEKNOLOGI HØJT NIVEAU
STUDENTEREKSAMEN 2007 2007-BT-1 BITEKNLGI HØJT NIVEAU Torsdag den 31. maj 2007 kl. 9.00 14.00 Sættet består af 1 stor og 2 små opgaver samt 1 bilag i 2 eksemplarer. Det ene eksemplar af bilaget afleveres
Læs mereNitrat sticks AquaChek 0-50 Bilag 3 Nitrat sticks
Notat SEGES P/S SEGES Planter & Miljø Test af måleudstyr til måling af nitrat i drænvand Ansvarlig KRP Oprettet 12-10-2016 Projekt: [3687, TReNDS] Side 1 af 5 Test af måleudstyr til måling af nitrat i
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Navn: Forsøgsvejledning Side 1 af 8 Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA-sekvens,
Læs mereFremstilling af ferrofluids
Fremstilling af ferrofluids Eksperiment 1: Fremstilling af ferrofluids - Elevvejledning Formål I dette eksperiment skal du fremstille nanopartikler af magnetit og bruge dem til at lave en magnetisk væske,
Læs mereDNA origami øvelse. Introduktion. DNA origami øvelse 3 timer 2018
DNA origami øvelse Introduktion I denne øvelse bruger vi DNA origami teknikken til at samle en tavle af DNA med dimensioner på 70 nm x 100 nm. Tavlen dannes af et langt enkeltstrenget DNA molekyle, der
Læs mereBestemmelse af koffein i cola
Bestemmelse af koffein i cola 1,3,7-trimethylxanthine Koffein i læskedrikke Læs følgende links, hvor der blandt andet står nogle informationer om koffein og regler for hvor meget koffein, der må være i
Læs mereScreening af thrombocytter for HPA-1a antigener
Resume 1.0 På klinisk immunologisk afdeling, Hillerød Hospital, ønskes der at opsætte en screening af donorer for HPA-1 antigener. Til dette formål, er der ved et tidligere 6. Semester projekt, afprøvet
Læs mereAlgedråber og fotosyntese
Algedråber og fotosyntese Fotosyntesen er en utrolig kompleks proces, som kan være svær at forstå. Heldigvis kan fotosyntesen illustreres på en måde, så alle kan forstå, hvad der helt præcist foregår i
Læs mere0 Indhold. Titel: Klorofyl a koncentration. Dokumenttype: Teknisk anvisning. Version: 1
Titel: Klorofyl a koncentration Dokumenttype: Teknisk anvisning Forfattere: Stiig Markager og Henrik Fossing TA henvisninger TA. nr.: M07 Version: 1 Oprettet: 20.12.2013 Gyldig fra: 20.12.2013 Sider: 10
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Forsøgsvejledning Navn: Side 1 af 7 Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Navn: Forsøgsvejledning Side 1 af 8 Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA-sekvens,
Læs mereLaboratorieforsøg: Phosphats binding i jord
Laboratorieforsøg: Phosphats binding i jord Karina Knudsmark Jessing, ph.d. studerende Jordbunds-og Miljøkemi, Institut for Grundvidenskab Assistent: ph.d. studerende Karin Cederkvist Dias 1 Oversigt over
Læs mereProtokol for genetisk bestemmelse af ABO blodtyper
Page1 Udarbejdet i samarbejde mellem: Kåre Lehmann, Annabeth Høgh Petersen, Anne Rusborg Nygaard og Jørn M. Clausen Page2 VIGTIGT: SKIFT PIPETTE SPIDSER/TIPS EFTER HVER GANG!! Så undgår du at forurene
Læs mereValidering og implementering af en ELISA analyse, til screening af donorer for IgA mangel
Validering og implementering af en ELISA analyse, til screening af donorer for IgA mangel Christine Marie Rasmussen Michael Lassen Schou Hussein Atallah Alhadidi Daniel Rodriguez Jensen Side 1 af 53 Professionsbachelorprojekt
Læs mereELISA Human Mannose Binding Lectin ELISA kit REF M1990
Sanquin Reagents Plesmanlaan 125 1066 CX Amsterdam The Netherlands Phone: +31.20.512.3599 Fax: +31.20.512.3570 E-mail: reagents@sanquin.nl Website: www.sanquinreagents.com M1990 / January 2011 ELISA Human
Læs mereScanGel Monoclonal ABO/RH1/K 86495 48 kort 86485 288 kort
ScanGel Monoclonal ABO/RH1/K 86495 48 kort 86485 288 kort GELER INDEHOLDENDE MONOKLONALE REAGENSER AF MURIN ELLER HUMAN OPRINDELSE ABO1, ABO2, RH1, KEL1 Ag BESTEMMELSE IVD Alle de af Bio-Rad producerede
Læs mereHæld 25 ml NaOH(aq) op i et bægerglas. Observer væsken. Er den gennemsigtig? Hvilke ioner er der i ionsuppen?
Fældningsreaktion (som erstatning for titrering af saltvand) Opløs 5 g CuSO 4 i 50 ml vand Opløses saltet? Følger det teorien? Hvilke ioner er der i ionsuppen? Hæld 25 ml NaOH(aq) op i et bægerglas. Observer
Læs mereLaboratorieprotokol for manuel isolering af DNA fra 0,5 ml prøve
Laboratorieprotokol for manuel isolering af DNA fra 0,5 ml prøve Til isolering af genomisk DNA fra indsamlingssætserierne Oragene - og ORAcollect. Du kan finde flere sprog og protokoller på vores webside
Læs mere[BESØGSSERVICE INSTITUT FOR MOLEKYLÆRBIOLOGI OG GENETIK, AU]
Enzymkinetik INTRODUKTION Enzymer er biologiske katalysatorer i alle levende organismer som er essentielle for liv. Selektivt og effektivt katalyserer enzymerne kemiske reaktioner som ellers ikke ville
Læs mereEr der gift i vandet?
Er der gift i vandet? Hvordan måler man giftighed? Og hvordan fastsætter man grænseværdier? Introduktion I pressen ser man ofte overskrifter som Gift fundet i grundvandet eller Udslip af farlige miljøgifte
Læs mereInstructions for use
Instructions for use Sanquin Reagents B.V. Plesmanlaan 125 1066 CX Amsterdam The Netherlands Phone: +31 20 5123599 Fax: +31 20 5123570 biologics@sanquin.nl www.sanquin.org/biologics MabTrack level infliximab
Læs mereSommereksamen 2012 Med korte, vejledende svar
1 Sommereksamen 2012 Med korte, vejledende svar Titel på kursus: Uddannelse: Semester: ksamensdato: Tid: Bedømmelsesform Det hæmatologiske system og immunsystemet Bacheloruddannelsen i Medicin/Medicin
Læs mereDNA origami øvelse 2013. DNA origami øvelse
DNA origami øvelse Introduktion I denne øvelse bruger vi DNA origami teknikken til at samle en tavle af DNA med dimensioner på 70 nm x 100 nm. Tavlen dannes af et langt enkeltstrenget DNA molekyle, der
Læs mereDNA origami øvelse DNA origami øvelse
DNA origami øvelse Introduktion I denne øvelse bruger vi DNA origami teknikken til at samle en tavle af DNA med dimensioner på 70 nm x 100 nm. Tavlen dannes af et langt enkeltstrenget DNA molekyle, der
Læs mereELISA test til kvantitativ bestemmelse af opløselig urokinase plasminogen aktivator receptor (supar) i human plasma og serum IVD
ELISA test til kvantitativ bestemmelse af opløselig urokinase plasminogen aktivator receptor (supar) i human plasma og serum Kode nr. E001 suparnostic AUTO Flex ELISA Der findes oplysninger på andre sprog
Læs mereAnvendelse af Enzymer i Fødevarer
SRP-øvelse ved Det Natur- og Biovidenskabelige Fakultet, Københavns Universitet Anvendelse af Enzymer i Fødevarer Øvelsesvejledning 2013 Henriette Erichsen, Anni Bygvrå Hougaard, Karsten Olsen og Jeanette
Læs mereEnVision FLEX+, Mouse, High ph, (Link)
EnVision FLEX+, Mouse, High ph, (Link) Kode K8002 5. udgave Sættet indeholder reagenser til 400 600 analyser. Til Autostainer Link-instrumenter. Valgfri reagenser Kode Produktnavn Analyser K8004 EnVision
Læs mereBIOZYMER ØVELSE 3 BEKÆMP DIN β-lactamase - TEST DIN EGEN MEDICIN!
BIZYMER ØVELSE 3 BEKÆMP DIN β-lactamase - TEST DIN EGEN MEDICIN! FAGLIG BAGGRUND For at få det maksimale udbytte af denne øvelse er det en forudsætning, at teorien bag enzymer, enzymkinetik og resistensmekanismer
Læs mereBestemmelse af celletal
Bioteknologi 2, Tema 3 Forsøg 4 Bestemmelse af celletal Mange klassiske mikrobiologiske metoder har til formål at undersøge hvor mange mikroorganismer man har i sin prøve. Det undersøger man gennem forskellige
Læs meremens mange enzymkatalyserede reaktioner er to-substrat reaktioner (2):
KemiF2 Enzymkinetik Trypsin er en serinproteinase, der katalyserer hydrolyse af peptid- og esterbindinger, hvor Arg eller Lys leverer carbonylgruppen. Ved øvelsen bestemmes de kinetiske parameterværdier,
Læs mereBiotechnology Explorer
Biotechnology Explorer Genes in a Bottle Kit DNA Extraction Module Lav et halssmykke med dit eget DNA Katalognr.: 166-2000EDU Dertil kan man købe ekstradele, hvis der skal laves halskæder til eleverne.
Læs mereDako REAL EnVision Detection System, Peroxidase/DAB+, Rabbit/Mouse
Dako REAL EnVision Detection System, Peroxidase/DAB+, Rabbit/Mouse Kode K5007 3. udgave Til brug sammen med automatiske Dako instrumenter til immunfarvning. Sættet indeholder reagenser til 500 analyser.
Læs mereKemi F2- Laboratorieøvelse nr. 9 Ulla Christensen, Biofysisk Kemi ENZYMKINETIK
1 Kemi F2- Laboratorieøvelse nr. 9 Ulla Christensen, Biofysisk Kemi ENZYMKINETIK Formål: Steady state hastighedsmålinger og kinetisk analyse til undersøgelse af enzymkatalyseret reaktion. Der gøres rede
Læs mereKRIMINALDETEKTIVEN GERNINGSSTEDETS GÅDE PCR
KRIMINALDETEKTIVEN GERNINGSSTEDETS GÅDE Elevvejledning PCR PCR trin for trin PCR involverer en række gentagne cykler, der hver består af følgende tre trin: Denaturering, primer påsætning og forlængelse
Læs mereDette er en kladde til et genoptryk af Eksperimentel Genteknologi fra 1991. Ideer, rettelser og forslag modtages gerne. Kh Claudia.
Transformation af E.coli K 12 Version 3. marts 2009 (C) Claudia Girnth-Diamba og Bjørn Fahnøe Dette er en kladde til et genoptryk af Eksperimentel Genteknologi fra 1991. Ideer, rettelser og forslag modtages
Læs mereKuvettetest LCK 381 TOC Total organisk kulstof
VIGTIGT NYT! Det aktuelle udgavenummer er nu angivet ved analyseproceduren eller aflæsning. Kuvettetest Princip Total kulstof () og total uorganisk kulstof () bliver gennem oxidation () eller forsuring
Læs mereEnVision FLEX+, Mouse, High ph, (Dako Autostainer/Autostainer Plus)
EnVision FLEX+, Mouse, High ph, (Dako Autostainer/Autostainer Plus) Kode K8012 6. udgave Sættet indeholder reagenser til 400 600 analyser. Til Dako Autostainer/Autostainer Plus. Valgfri reagenser: Kode
Læs mereRENISCHEM En test til kvantitativ bestemmelse af human L-FABP i urin REF KZ-001
PRODUKTVEJLEDNING Revideret August 2012 RENISCHEM En test til kvantitativ bestemmelse af human L-FABP i urin REF KZ-001 Til in vitro-diagnostisk brug ANVENDELSE Denne test anvendes til kvantitativ bestemmelse
Læs mereInstructions for use
Instructions for use Sanquin Reagents B.V. Plesmanlaan 125 1066 CX Amsterdam The Netherlands Phone: +31 20 5123599 Fax: +31 20 5123570 biologics@sanquin.nl www.sanquin.org/biologics MabTrack level adalimumab
Læs mereMercodia Insulin ELISA
Mercodia Insulin ELISA Brugsanvisning 10-1113-01 REAGENS TIL 96 BESTEMMELSER 10-1113-10 REAGENS TIL 10 x 96 BESTEMMELSER Til in vitro-diagnosticering Fremstillet af Mercodia AB Sylveniusgatan 8A SE-754
Læs mereOpgave 1 Listeria. mørkviolette bakteriekolonier, se figur 1a. og b. 1. Angiv reaktionstypen for reaktion. 1 vist i figur 1b.
Opgave 1 Listeria Bakterien Listeria monocytogenes kan være sygdomsfremkaldende for personer, der i forvejen er svækkede. For at identificere Listeria kan man anvende indikative agarplader. Her udnyttes
Læs mereUNDERSØGELSE AF JORDRESPIRATION
UNDERSØGELSE AF JORDRESPIRATION Formål 1. At bestemme omsætningen af organisk stof i jordbunden ved at måle respirationen med en kvantitative metode. 2. At undersøge respirationsstørrelsen på forskellige
Læs mereBiologisk rensning Fjern opløst organisk stof fra vand
Spildevandscenter Avedøre Biologisk rensning Fjern opløst organisk stof fra vand Øvelse I Formål: På renseanlægget renses et mekanisk, biologisk og kemisk. I den biologiske rensning på renseanlægget benyttes
Læs mereIDAP manual Emission
IDAP manual Emission Dato: 08-06-2005 16:32:35 Indhold INDHOLD... 1 1 EMISSION... 2 1.1 KURVER... 2 1.2 RAPPORTER... 5 1.3 DATA REDIGERING... 6 1.3.1 Masse redigering... 7 1.3.2 Enkelt redigering... 10
Læs mereSC5b-9 Plus OPSUMMERING OG FORKLARING. MicroVue SC5b-9 Plus EIA Sammendrag PROCEDURENS PRINCIP TILSIGTET ANVENDELSE
SC5b-9 Plus En enzymimmunanalyse til kvantificering af det SC5b-9 kompleks, der findes I humant plasma eller serum MicroVue SC5b-9 Plus EIA Sammendrag Klargøring af Reagens og Prøveeksemplar Fortynd vaskeopløsningskoncentrat
Læs mereTeknisk anvisning for marin overvågning
NOVANA Teknisk anvisning for marin overvågning 2.3 Klorofyl a Britta Pedersen H Afdeling for Marin Økologi Miljøministeriet Danmarks Miljøundersøgelser 2.3-1 Indhold 2.3 Klorofyl-a 2.3-3 2.3.1 Formål 2.3-3
Læs mereBiokemisk oxygenforbrug over 5 døgn (BOD 5 ) på lavt niveau med tilsætning af N-allylthiourea
1. Omfang og anvendelsesområde Biokemisk oxygenforbrug over 5 døgn (BOD 5 ) på lavt niveau med tilsætning af N-allylthiourea 2. udgave Godkendt: 28-05-2019 Denne metode beskriver måling af biokemisk oxygenforbrug
Læs mereFlaskeernæring til børn
Flaskeernæring til børn Information til forældre Juliane Marie Centret Rigshospitalet At skulle give sit barn modermælkserstatning på sutteflaske er for nogle det oplagte valg, for andre er det en nødvendighed,
Læs mereGAPDH PCR modul Manual
GAPDH PCR modul Manual Katalog nr. 166-5010EDU explorer.bio-rad.com Kopiering kun tilladt til undervisningsbrug Bemærk: Kittet indeholder temperaturfølsomme dele. Åbn derfor straks kassen og læg de pågældende
Læs mereENZYMIMMUN OPSAMLINGSMETODE TIL KVALITATIV BESTEMMELSE AF
PLATELIA CMV IgM 96 TESTS 72681 ENZYMIMMUN OPSAMLINGSMETODE TIL KVALITATIV BESTEMMELSE AF IgM-ANTISTOFFER MOD CYTOMEGALOVIRUS I HUMANT SERUM Dansk 1/10 INDHOLDSFORTEGNELSE 1. FORMÅL 2. OPSUMMERING OG FORKLARING
Læs mereOpgave i Produktion af Butan-1-oI
Bioteknologi A Terminsprøve 2018 HoId3z Lærer: Karen Nitschke Af opgaverne i og 2 skal begge opgaver besvares. Af opgaverne 3 og 4 skal en og kun en af opgaverne besvares. Torsdag d. 12. april 2018 Kl.
Læs mereMetodevalidering af High Sensitive C- Reaktive Protein
2013/- 2014 Metodevalidering af High Sensitive C- Reaktive Protein BACHELOROPGAVE UGE 41/2013 TIL UGE 01/2014 PH METROPOL KØBENHAVN BIOANALYTIKER UDDANNELSE HEIDI RAVN FØDT: 090277-1972 HOVEDVEJLEDER:
Læs merePræanalytiske fejlkilder ved brug af POC udstyr
Præanalytiske fejlkilder ved brug af POC udstyr LKO temadag 2012 POC udstyr hvor der anvendes Kuvette/Kasette/Strips/Kapillærrør Fyldning af kuvetter/strips/kapillærrør Skal fyldes helt op, der må ikke
Læs mereRENGØRINGSPROCEDURE FOR INSTRUMENTER SKAL NØJE FØLGES FØR NOGET INDGREB FRA OPERATØR
Side : 1/5 I. INDLEDNING Denne vejledning betragtes som anbefalinger: Alle øvrige vejledninger er udelukkende slutbrugerens ansvar. Disse anbefalinger har relation til inficerede og potentielt inficerede
Læs mereProduktion af biodiesel fra rapsolie ved en enzymatisk reaktion
Produktion af biodiesel fra rapsolie ved en enzymatisk reaktion produceres fra rapsolie som består af 95% triglycerider (TG), samt diglycerider (DG), monoglycerider (MG) og frie fedtsyrer (FA). Under reaktionen
Læs mereFra spild til penge brug enzymer
Fra spild til penge brug enzymer Køreplan 01005 Matematik 1 - FORÅR 2010 Denne projektplan er udarbejdet af Per Karlsson og Kim Knudsen, DTU Matematik, i samarbejde med Jørgen Risum, DTU Food. 1 Introduktion
Læs mereSerietest LCW 510 Klor/Ozon
VIGTIGT NYT! Det aktuelle udgavenummer er nu angivet ved analyseproceduren eller aflæsning. Se venligst punktet Bemærk (se nedenfor). Serietest Princip Oxidationsmidler reagerer med diethyl-p-phenylendiamin
Læs mere