Case 1: Normal KM LST

Transkript

1 Case 1: Normal KM LST Åbn Infinicyt File: open: Case 1_Normal BM LST.fcs Lav populationstræ udvid med nucleated cells, leukocytes osv på CD45/SSC plottet Fjern eosinofile Gate neutrophils Hvor mange %? Fjern neutrophils Gate monocytes Hvor mange %? Fjern monocytes Forstør diagram: ctrl + Formindsk diagram: ctrl Fortryd handling: ctrl z Flyt gate: marker gaten m firkanter i hjørnerne, flyt med venstre museknap Fjern gate: marker gaten m firkanter i hjørnerne, delete Åbn/luk gaten: tryk på i populationstræet udfor den relevante population Arranger diagrammer: diagrams: tile Gate lymphocytes Hvad er andelen af lymfocytter? Hvilke lymfocytter er der flest af? Fjern alle celler undtagen lymfocytter Lav et diagram med CD3+/SSC (diagrams: new diagram: dot plot) Gate T-lymfocytes på CD3+ Definer CD4+ og CD8+. Ratio? (Add function: definer funktionen CD4/CD8 ratio) Gate B-lymfocytter på CD19+ Definer kappa og lambda. Ratio? (Add function). Hvad er andelen af B- celler i normal KM? 1

2 Case 2: Normal perifert blod Samme princip som for case 1. Forskelle? File: open: Case 2_Normal PB LST.fcs Lav populationstræ udvid med nucleated cells, leukocytes osv på CD45/SSC plottet Fjern eosinofile Gate neutrophils Hvor mange %? Fjern neutrophils Gate monocytes Hvor mange %? Fjern monocytes Forstør diagram: ctrl + Formindsk diagram: ctrl Fortryd handling: ctrl z Flyt gate: marker gaten m firkanter i hjørnerne, flyt med venstre museknap Fjern gate: marker gaten m firkanter i hjørnerne, delete Åbn/luk gaten: tryk på i populationstræet udfor den relevante population Arranger diagrammer: diagrams: tile Gate lymphocytes Hvad er andelen af lymfocytter? Hvilke lymfocytter er der flest af? Fjern alle celler undtagen lymfocytter Lav et diagram med CD3+/SSC (diagrams: new diagram: dot plot) Gate T-lymfocytes på CD3+ Definer CD4+ og CD8+. Ratio? (Add function: definer funktionen CD4/CD8 ratio) Gate B-lymfocytter på CD19+ Definer kappa og lambda. Ratio? (Add function). Hvad er andelen af B- celler i normal PB? 2

3 Case 3: B-celle sygdom Kliniske oplysninger: 87 årig mand henvist grundet Lymfocytose, stabil gennem 9 mnd. Marginal nedsat Hb, stabilt. Ingen B- symptomer. PS. 0 File: Open: Case 3_43622 B-Lim Merge.fcs på CD45/SSC plottet Gate lymphocytes Gate T-celler (CD3/SSC) Fjern T-cells Gate B-celler på CD19/SSC-diagram Hvor mange %? Check CD19/CD20-plot. Flyt gaten rundt. Hvilke celler er syge? Hvilken population har letkæderestriktion? (lav kappa/lambda-diagram og definer populationerne). Hvad er ratio? (add function!). Hvor stor er den syge population i %?? Hvilke markører udtrykker de syge celler og hvilke er vigtige?? CD5? CD10? Er det et modent eller umodent lymfom? Store eller små celler? Sikker diagnose? Brug evt. hjælp fra B-celle panel (vejledende flowchart for B-celle sygdomme) 3

4 File: open: Case 4_Normal BM AML 1-4 merge.fcs Gate neutrofile Gate monocytter Gate lymphocytter Case 4: Normal KM AML panel Gate en blastregion hvordan vil du se de blastære celler? Lav evt ekstra diagrammer (f.eks. CD34/CD117, CD117/HLA-DR) Åbn blastgaten og flyt den rundt, mens du ser i de andre gates. Luk gaten når du er sikker på at alle relevante celler er med. NB: Blastgate = det område hvori blasterne befinder sig, ikke = blaster. Gate i dit blastdiagram og bemærk hvor cellerne ligger i CD45/SSC-diagrammet. Hvor stor er andelen af CD34+ blastære celler? I % af hvad? Har blasterne aberrante markører? 4

5 Case 5: Akut leukæmi (AML panel) Kliniske oplysninger: 52-årig mand henvist fra egen læge mhp. vurdering af leukopeni (normal Hgb og Thromb). For 2 år siden kirurgisk behandlet renalcelle carcinom. Aktuelt hoste gn 1,5 mdr.. File: Open: Case 5_38881 AML 1-4 Merge.fcs Husk: Diagrams: tile Gate neutrofile Gate monocytter Gate lymphocytter Gate blast region Hvilken slags blaster er det??? Gate på/lav et relevant diagram til at fange blasterne Er blasterne homogene eller er der flere syge populationer? Hvordan definerer du bedst blasterne? Hvilke aberrante markører udtrykkes? Hvor stor er blastandelen? Hvordan ser de øvrige myeloide populationer ud? Diagnose? Hvilken under-type tror du? 5

6 Case 6: Akut leukæmi Kliniske oplysninger: 55årig kvinde tidl rask. Over en 2 uger træthed, forkølelse og hjertebanken. Lægevagt konstaterer biokemi med hgb 3,3 L 33,3 T 11. File: Open: Case 6_37298 B-ALL Merge.fcs Husk: Diagrams: tile Gate blast region Hvilken slags blaster er det?? Gate på/lav et relevant diagram til at fange blasterne Lav et nyt slags diagram, der hedder parameter band. Sæt antal af parameter højt, så du får det hele med. Hvilke aberrante markører ser du? Sammenlign evt med lymfocytterne (gate lymfocytterne. Sæt v i visibility for blastceller og lymfocytter). Hvor stor er blastprocenten%? af hvad?? 6