Artisan Masson s Trichrome Stain Kit Kode AR173 Tilsigtet anvendelse Anvendes til in vitro diagnostik. Masson s Trichrome Stain Kit er beregnet til anvendelse i laboratorier til at identificere bindevæv og muskel i vævsprøver ved hjælp af lysmikroskopi. 1-3 Rutinemæssigt behandlede prøver (paraffinindstøbte) kan anvendes. Det foretrukne fiksativ er neutral bufferet formalin. Den kliniske fortolkning af enhver farvning eller mangel på samme skal suppleres med morfologiske undersøgelser og korrekte kontroller og evalueres under hensyn til patientens kliniske forhistorie og andre diagnostiske prøver af en kvalificeret patolog. Alle reagenser i Masson s Trichrome Stain Kit er optimalt klargjorte til brug på Dakos Artisan Staining System og skal ikke blandes eller fortyndes. Resumé og forklaring Masson s Trichrome Stain Kit anvendes til identifikation af muskel, kollagenfibre, fibrin og erythrocytter i vævssnit. 1-3 Masson s Trichrome anvendes ofte til at påvise forhøjet kollagenaflejring, som er associeret med forandringen af funktionelt væv til arvæv. Dette er nyttigt i forbindelse med diagnosticering af leversclerose, hvor fortykket kollagen erstatter det normale væv og forårsager leversvigt. Masson s Trichrome er også bedre til at påvise muskel end hæmatoxylin- og eosinfarvning. Princip for proceduren Kollagenfibre og fibrin farver ikke med hæmatoxylin- og eosinfarvning. Masson s Trichrome Stain Kit er baseret på Massons oprindelige procedure. 1-3 Bindevæv er et tredimensionelt netværk af protein. Disse netværk kan bestå af forskellige proteiner, som bibringer forskellige fysiske egenskaber. Proteinnetværkets struktur og tæthed kan relateres direkte til vævskomponenternes farvningsreaktioner. 2 Masson s Trichrome Stain Kit er optimeret til brug på Artisan Staining System. Alle farvningstrin efterfølges af vasketrin. Efter farvningen tages de lufttørrede objektglas ud af instrumentet, renses med xylen eller xylenerstatning og monteres med et egnet monteringsmedie. Resultaterne fortolkes ved hjælp af et standardlysmikroskop. Kontrolvæv: Uterus, tyndtarm, lever, appendix eller salpinx. Leverede reagenser Masson s Trichrome Stain Kit består af otte brugsklare doseringsbeholdere, der indeholder: Bouin s Solution 0,9 % picrinsyre, 23,8 % formaldehyd og 4,8 % eddikesyre i deioniseret vand Weigert s Hematoxylin A 1 % hæmatoxylin, 95 % alkohol Weigert s Hematoxylin B 1,16 % ferrichlorid og 1 % saltsyre i deioniseret vand Biebrich Scarlet Acid Fuchsin 0,1 % syrefuchsin, 0,9 % Biebrich Scarlet og 1 % eddikesyre i deioniseret vand med 1 % Triton X-100 Phosphotungstic Phosphomolybdic Acid- 2 Packs 2,5 % fosforwolframatsyre og 2,5 % fosformolybdænsyre i deioniseret vand Aniline Blue 2,5 % anilinblåt og 2 % eddikesyre i deioniseret vand med 1 % Triton X-100 (127369-001) P04012DK_01/AR173/2015.04 s. 1/5
Acetic Acid 3% Eddikesyre i deioniseret vand Dako leverer disse reagenser i en optimal formulering til brug i henhold til den medfølgende vejledning til farvning af klargjorte vævssnit. Enhver afvigelse fra anbefalede testprocedurer kan gøre erklærede forventede resultater ugyldige. Nødvendige materialer, der ikke medfølger 1. Objektglas 2. Artisan Staining System 3. Wash Solution (kode AR102) Forholdsregler 1. Må kun anvendes af uddannet personale. 2. Hvis Bouins opløsning er udtørret, kan der forekomme eksplosiv nedbrydning ved stød eller temperaturstigning. 3. Minimér mikrobiel kontaminering af reagenser, da der i modsat fald kan forekomme en øget uspecifik farvning. 4. Reagensbeholderne kan indeholde overskydende opløsning efter udførelse af det angivne antal analyser. 5. Andre inkubationstider eller temperaturer end de angivne kan medføre fejlbehæftede resultater. Brugeren skal bekræfte enhver ændring, der foretages i den anbefalede procedure. 6. Opbevar reagensbeholderne i opret stilling, når de ikke anvendes i instrumentet. 7. Reagensbeholderne må ikke opbevares i direkte sollys eller i nærheden af varmekilder. 8. Som hovedregel må personer under 18 år ikke arbejde med dette produkt. Brugeren skal være grundigt instrueret i arbejdets procedurer, farlige egenskaber ved produktet og de nødvendige sikkerhedsforanstaltninger. Læs sikkerhedsdatabladet for at få yderligere information. 9. Brug egnet personligt beskyttelsesudstyr for at undgå kontakt med øjne og hud. 10. Ubrugt opløsning skal bortskaffes i henhold til lokale, nationale og EU bestemmelser. 11. Sikkerhedsdatablade til professionelle brugere kan rekvireres. Fare Bouin s Solution: 10-30% Formaldehyde, 1-5% Acetic acid, 0.1-1% 2,4,6-Trinitrophenol H302 + H312 + Farlig ved indånding, hudkontakt eller indånding. H332 H314 Forårsager svære forbrændinger af huden og øjenskader. H317 Kan forårsage allergisk hudreaktion. H350 Kan fremkalde kræft. H341 Mistænkt for at forårsage genetiske defekter. H335 Kan forårsage irritation af luftvejene. P201 Indhent særlige anvisninger før brug. P202 Anvend ikke produktet, før alle advarsler er læst og forstået. P281 Anvend de påkrævede personlige værnemidler. P271 Brug kun udendørs eller i et rum med god udluftning. P261 Undgå indånding af damp. P270 Der må ikke spises, drikkes eller ryges under brugen af dette produkt. P272 Tilsmudset arbejdstøj bør ikke fjernes fra arbejdspladsen. P308 + P313 VED eksponering eller mistanke om eksponering: Søg lægehjælp. P304 + P340 + VED INDÅNDING: Flyt personen til et sted med frisk luft og sørg for, at vedkommende hviler i en stilling, som letter vejrtrækningen. Ring omgående til en GIFTINFORMATION eller en læge. P301 + + P330 + P331 I TILFÆLDE AF INDTAGELSE: Ring omgående til en GIFTINFORMATION eller en læge. Skyl munden. Fremkald IKKE opkastning. P303 + P361 + P353 + P363 + VED KONTAKT MED HUDEN (eller håret): Alt tilsmudset tøj tages straks af. Skyl/brus huden med vand. Tilsmudset tøj skal vaskes, før det kan anvendes igen. Ring omgående til en GIFTINFORMATION eller en læge. P302 + P352 + P312 VED KONTAKT MED HUDEN: Vask forsigtigt med rigeligt sæbe og vand. I tilfælde af ubehag, ring til en GIFTINFORMATION eller en læge. P333 + P313 Ved hudirritation eller udslet: Søg lægehjælp. + Ring omgående til en GIFTINFORMATION eller en læge. (127369-001) P04012DK_01/AR173/2015.04 s. 2/5
Fare Weigert s Hematoxylin A: 60-100% Ethanol, 1-5% Methanol H225 Meget brandfarlig væske og damp. H360 Kan skade forplantningsevnen eller det ufødte barn. H371 Kan forårsage organskader. H335 Kan forårsage irritation af luftvejene. H336 Kan forårsage sløvhed eller svimmelhed. H373 Kan forårsage organskader ved længerevarende eller gentagen eksponering. P201 Indhent særlige anvisninger før brug. P202 Anvend ikke produktet, før alle advarsler er læst og forstået. P281 Anvend de påkrævede personlige værnemidler. P210 Holdes væk fra varme, varme overflader, gnister, åben ild og andre antændelseskilder. Rygning forbudt. P241 Anvend eksplosionssikkert elektrisk, ventilations-, lys- og alt andet materialehåndteringsudstyr. P242 Anvend kun værktøj, som ikke frembringer gnister. P243 Træf foranstaltninger mod statisk elektricitet. P233 Hold beholderen tæt lukket. P271 Brug kun udendørs eller i et rum med god udluftning. P260 Indånd ikke damp. P270 Der må ikke spises, drikkes eller ryges under brugen af dette produkt. P314 Søg lægehjælp ved ubehag. P309 + P311 VED eksponering eller ubehag: Ring til en GIFTINFORMATION eller en læge. P304 + P340 + P312 VED INDÅNDING: Flyt personen til et sted med frisk luft og sørg for, at vedkommende hviler i en stilling, som letter vejrtrækningen. I tilfælde af ubehag, ring til en GIFTINFORMATION eller en læge. P303 + P361 + VED KONTAKT MED HUDEN (eller håret): Alt tilsmudset tøj tages straks af. Skyl/brus huden med vand. P353 P403 Opbevares på et godt ventileret sted. P235 Opbevares køligt. Weigert s Hematoxylin B: 1-3% Iron chloride (FeCl3), hexahydrate, 0.1-1% Hydrochloric acid H315 Forårsager hudirritation. P302 + P352 + P362-2 + P363 VED KONTAKT MED HUDEN: Vask forsigtigt med rigeligt sæbe og vand. Alt tilsmudset tøj tages af. Tilsmudset tøj skal vaskes, før det kan anvendes igen. P332 + P313 Ved hudirritation: Søg lægehjælp. Biebrich Scarlet Acid Fuchsin: 0.1-1% Poly(oxy-1,2-ethanediyl),.alpha.-[4-(1,1,3,3-tetramethylbutyl)phenyl]-.omega.-hydroxy- (127369-001) P04012DK_01/AR173/2015.04 s. 3/5
Fare Phosphotungstic Phosphomolybdic Acid: 1-5% Phosphotungstic phosphomolybdic acid H314 Forårsager svære forbrændinger af huden og øjenskader. P304 + P340 + VED INDÅNDING: Flyt personen til et sted med frisk luft og sørg for, at vedkommende hviler i en stilling, som letter vejrtrækningen. Ring omgående til en GIFTINFORMATION eller en læge. P301 + + I TILFÆLDE AF INDTAGELSE: Ring omgående til en GIFTINFORMATION eller en læge. Skyl munden. Fremkald IKKE P330 + P331 opkastning. P303 + P361 + VED KONTAKT MED HUDEN (eller håret): Alt tilsmudset tøj tages straks af. Skyl/brus huden med vand. Tilsmudset tøj P353 + P363 + skal vaskes, før det kan anvendes igen. Ring omgående til en GIFTINFORMATION eller en læge. + Ring omgående til en GIFTINFORMATION eller en læge. Aniline Blue: 1-5% Acetic acid, 0.1-1% Polyoxyethylene octyl phenyl ether Opbevaring Alle komponenter skal opbevares ved den temperatur, som er angivet på etiketten. Må ikke anvendes efter udløbsdatoen. Hvis reagenserne opbevares under andre betingelser end de specificerede, skal betingelserne verificeres af brugeren. Der er ingen synlige tegn på, at produktet kan være ustabilt. Der skal derfor anvendes egnet kontrolvæv til verificering. Kontakt Dakos tekniske serviceafdeling, hvis der observeres uventet farvning, som ikke kan forklares med variationer i laboratorieprocedurer eller ukorrekt opbevaring. Instrument-/ farvningsprocedure Indledende kommentarer Se Artisan User Guide (Artisan-brugervejledningen) angående yderligere anvisninger. Priming af reagensbeholdere Inden farvningen begyndes, skal reagensbeholderne primes og kontrolleres for lækager. Kontrollér primingen af hver enkelt reagensbeholder, når et nyt sæt tages i brug og inden dagens første farvningskørsel. 1. Hold reagensbeholderens doseringsenhed over et papirhåndklæde, og fjern det røde eller sorte forsendelseslåg (hvis der er et sådant) ved forsigtigt at trække ned på låget. 2. For at prime en reagensbeholder, når den først bliver modtaget, holdes den med doseringsenheden pegende nedad, og der bankes let på siden af reagensbeholderen 2-3 gange for at frigøre alle luftbobler, der eventuelt findes i doseringsenheden. 3. Stemplet trykkes sammen og slippes 3-4 gange hurtigt efter hinanden, idet der passes på at al uddreven væske opsuges i et papirhåndklæde, absorberende gaze eller lignende materiale, indtil der opnås en stabil strøm. 4. Undgå at dosere overdrevne mængder reagens under priming. Overdreven priming vil resultere i spild af reagens, hvilket kan medføre, at reagensbeholderen løber tør for væske, inden det angivne antal tests er foretaget. 5. Inden hver anvendelse kan reagensbeholderne primes 1-2 gange, idet der hver gang kontrolleres for en stabil strøm. 6. Hold reagensbeholderen i den ene hånd, og lad monteringsskinnen på bagsiden af reagensbeholderen glide ind i rillerne på reagenskarrusellen, indtil beholderen sidder helt på plads. Procedure Der henvises til afsnittet Procedure Reports i Artisan Host Software for detaljerede oplysninger om de anbefalede procedurer. Når farvningen er gennemført, er objektglassene tørre. Dyp objektglassene i xylen eller xylenerstatning, og montér dem permanent. Fortolkning af farvning Muskelfibre:... Rød Fibrin:... Pink Kollagen:... Blå Kerner:... Blå eller sort Erythrocytter:... Rød (127369-001) P04012DK_01/AR173/2015.04 s. 4/5
Præstationskarakteristika Reproducerbarhed En reproducerbarhed inden for kørsler på 100 % blev fastlagt ved farvning af 12 objektglas med samme kontrolvæv på ét instrument. En reproducerbarhed mellem kørsler på 100 % blev fastlagt ved farvning af 12 objektglas med samme kontrolvæv på tre forskellige instrumenter. Fejlfinding Se afsnittet Maintenance and Troubleshooting i Artisan User Guide, eller kontakt vores tekniske serviceafdeling. Referencer 1. Bancroft JD, Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques, 4th edition, Churchill Livingstone Inc., New York, New York, 1996 2. Luna LG. Manual of Histologic Staining Methods of the AFIP, 3rd edition. McGraw-Hill Book Company, New York, New York, 1968 3. Luna LG. Histopathological Methods and Color Atlas of Special Stains and Tissue Artifacts, 1st edition, American Histolabs, Inc., Gaithersburg, MD, 1992 Udgave 04/15 (127369-001) P04012DK_01/AR173/2015.04 s. 5/5