Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning Oversat fra engelsk
Den side er bevidst efterladt blank
Indholdsfortegnelse Indholdsfortegnelse 1 Indledning... 1.1 Om denne manual... 1.2 Vigtig brugerinformation... 1.3 Forskriftsmæssige oplysninger... 1.4 Tilhørende dokumentation... 2 Sikkerhedsinstruktioner... 2.1 Sikkerhedsforanstaltninger... 2.2 Mærkater... 2.3 Nødprocedurer... 2.4 Oplysninger om genanvendelse... 3 Systembeskrivelse... 3.1 Illustrationer af Ettan IPGphor 3... 3.2 Ettan IPGphor 3-instrument... 3.3 Ettan IPGphor 3 Control Software... 3.4 Strimmelholdere... 4 Installation... 4.1 Krav til installationsstedet... 4.2 Udpakning og transport... 4.3 Opsætning... 4.4 Installation af software til isoelektrisk fokuseringsproces... 5 Betjening... 5.1 Forberedelser inden start... 5.1.1 Brug af strimmelholdere... 5.1.2 Brug Ettan IPGphor-kop-isætningsmanifolden... 5.2 Opstart af instrumentet... 5.3 Udfør en kørsel fra kontrolpanelet... 5.3.1 Ettan IPGphor 3 kontrolpanelfunktioner... 5.3.2 Protokolparametre... 5.3.3 Indstilling af protokolparametre... 5.3.4 Isoelektrisk fokusering fra kontrolpanelet... 5.3.5 Protokolpause eller- stop... 5.4 Kør en forprogrammeret protokol fra PC'en... 5.4.1 Indstilling af en kørsel... 5.4.2 Udførelse af en kørsel... 6 Vedligeholdelse... 6.1 Rengøring af Ettan IPGphor 3... 6.2 Udskiftning af sikringer... 7 Fejlfinding... 5 6 7 9 12 13 14 20 22 24 25 26 30 32 33 35 36 38 39 43 44 45 46 57 64 66 67 71 73 81 87 88 89 95 100 101 105 107 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC 3
Indholdsfortegnelse 8 Referencedata... 8.1 Sundheds- og sikkerhedserklæringsformular... 8.2 Tekniske specifikationer... 8.3 Bestillingsoplysninger... Indeks... 109 110 112 114 116 4 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC
1 Indledning 1 Indledning Om dette kapitel Dette kapitel indeholder oplysninger om denne betjeningsvejledning, vigtige brugeroplysninger, oplysninger om regler og bestemmelser samt lister med tilhørende dokumentation. I dette kapitel Afsnit 1.1 Om denne manual 1.2 Vigtig brugerinformation 1.3 Forskriftsmæssige oplysninger 1.4 Tilhørende dokumentation Se side 6 7 9 12 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC 5
1 Indledning 1.1 Om denne manual 1.1 Om denne manual Formålet med denne betjeningsvejledning Betjeningsvejledningen giver dig de anvisninger, der er nødvendige for at installere, betjene og vedligeholde Ettan IPGphor 3 Isoelectric Focusing System på sikker vis. Rammerne for denne manual Dette dokument indeholder nødvendige instruktioner til anvendelse af Ettan IPGphor 3 Isoelectric Focusing System sammen med Ettan IPGphor 3. Typografiske konventioner Ting, der har med softwaren at gøre, er letgenkendelige i teksten, da de er fremhævet med fed kursiv tekst. Der anvendes kolon til at adskille menuniveauer: File:Open refererer således til kommandoen Open i File-menuen. Ting, der relaterer til hardwaren, er letgenkendelige i teksten, da de er fremhævet med fed tekst (f.eks. Power-knap). 6 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC
1 Indledning 1.2 Vigtig brugerinformation 1.2 Vigtig brugerinformation Læs denne information, før du begynder at bruge Ettan IPGphor 3 Alle brugere skal læse hele betjeningsvejledningen for Ettan IPGphor 3 før instrumentet installeres, tages i brug eller vedligeholdes. Hold altid betjeningsvejledningen ved hånden, når Ettan IPGphor 3 er i brug. Ettan IPGphor 3 bør kun betjenes i overensstemmelse med det i brugerdokumentationen foreskrevne. I modsat fald kan det medføre potentielt farlige situationer, der kan resultere i personskade eller beskadigelse af udstyret. Tilsigtet anvendelse Ettan IPGphor 3 Isoelectric Focusing System udfører trinnet: første-dimensions isoelektrisk fokusering (IEF) i 2-dimensional (2-D) elektroforese. Systemet omfatter GEs Ettan IPGphor 3 sammen med separate strimmelholdere eller en manifold. Der er to typer manifolder tilgængelige: den keramiske manifold og den lette manifold. IEF-separationsprotokollerne programmeres, køres og styres fra betjeningspanelet på Ettan IPGphor 3 eller fra en PC med Ettan IPGphor 3 Control Software installeret. Ettan IPGphor 3 er beregnet til at blive brugt som laboratorieudstyr til forskningsformål. Ettan IPGphor 3 må ikke anvendes til kliniske procedurer og diagnostiske formål. Ved større prøvevolumener understøtter Ettan IPGphor 3-kop-isætningsmanifolden papirbro- og gel-rehydrering-isætning. Se nærmere oplysninger i Ettan IPGphor Cup Loading Manifold User Manual. Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC 7
1 Indledning 1.2 Vigtig brugerinformation Sikkerhedsbemærkninger Denne brugerdokumentation indeholder ADVARSLER, anvisninger om at udvise FORSIG- TIGHED samt NOTATER, der alle vedrører sikker brug af produktet. Se definitionerne nedenfor. Advarsler ADVARSEL ADVARSEL angiver en farlig situation, som, hvis ikke undgået, kan resultere i død eller alvorlig skade. Det er essentielt ikke at fortsætte, indtil samtlige nævnte betingelser er opfyldt og forstået. Forsigtighedsregler FORSIGTIG FORSIGTIG angiver en farlig situation, som, hvis den ikke undgås, kan resultere i mindre eller moderat skade. Det er essentielt ikke at fortsætte, indtil samtlige nævnte betingelser er opfyldt og forstået. Noter NOTE NOTE - giver brugeren instrukser, der skal følges med henblik på at undgå at beskadige produktet eller andet udstyr. Bemærkninger og tips Bemærk: Tip: Dokumentationen anvender Kommentarer til at videregive vigtig information, der bidrager til at gøre brugen af produktet problemfri og optimal. Tips indeholder nyttige oplysninger, der kan hjælpe dig med at forbedre eller optimere dine procedurer. 8 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC
1 Indledning 1.3 Forskriftsmæssige oplysninger 1.3 Forskriftsmæssige oplysninger Indledning Dette afsnit beskriver de direktiver og standarder, som Ettan IPGphor 3 Isoelectric Focusing System overholder. Produktionsoplysninger Nedenstående tabel angiver de påkrævede produktionsoplysninger. Se EU-overensstemmelseserklæringen for at få yderligere oplysninger. Krav Producentens navn og adresse Indhold GE Healthcare Bio-Sciences AB, Björkgatan 30, SE 751 84 Uppsala, Sweden Overensstemmelse med EU-direktiver Dette produkt opfylder de europæiske direktiver, der er angivet i skemaet, ved at opfylde de tilsvarende harmoniserede standarder. Direktiv 2006/42/EØF 2004/108/EØF 2006/95/EØF Navn Maskindirektivet (MD) Direktivet vedrørende elektromagnetisk kompatibilitet (EMC) Lavspændingsdirektivet (LVD) Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC 9
1 Indledning 1.3 Forskriftsmæssige oplysninger CE-mærke CE-mærkningen og den tilsvarende EU-overensstemmelseserklæring gælder for instrumentet, når det: anvendes som en enkeltstående enhed, eller er tilsluttet til andre produkter, der er anbefalet eller beskrevet i brugerdokumentationen, og anvendes i samme stand, som det blev leveret fra GE, bortset fra ændringer, der er beskrevet i brugerdokumentationen. Internationale standarder Standard EN/ IEC 61010-1, CAN/CSA-C22.2 nr. 61010-1 EN/IEC 61326-1 (emission i henhold til CISPR 11, gruppe 1, klasse A) EN ISO 12100 Betegnelse Sikkerhedskrav til elektrisk udstyr, der anvendes til måling, kontrol og laboratoriebrug Elektrisk udstyr, der anvendes til måling, kontrol og laboratoriebrug - EMCkrav Maskiners sikkerhed. Generelle principper for design. Risikovurdering og risikoreduktion. Bemærkninger EN standard harmoniseret med EU-direktivet 2006/95/EF EN standard harmoniseret med EU-direktivet 2004/108/EF EN ISO standard er harmoniseret med EU-direktiv 2006/42/EF FCC-erklæring Dette udstyr overholder del 15 i FCC-reglerne. Udstyret betjenes i henhold til følgende to betingelser: (1) Udstyret må ikke skabe skadelig interferens, og (2) udstyret skal acceptere modtaget interferens, herunder interferens, som kan forårsage, at udstyret ikke kan betjenes som ønsket. Bemærk: Brugeren er advaret om, at enhver ændring, der ikke er udtrykkeligt godkendt af GE, kan ugyldiggøre brugerens myndighed til at betjene udstyret. 10 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC
1 Indledning 1.3 Forskriftsmæssige oplysninger Udstyret er testet og overholder grænserne for en digital enhed af klasse A i henhold til del 15 i FCC-reglerne. Grænserne er designet til at yde en rimelig grad af beskyttelse mod skadelig interferens, når udstyret betjenes i kommercielle omgivelser. Udstyret genererer, bruger og kan udstråle radiofrekvensenergi og kan give skadelig interferens i forhold til radiokommunikation, hvis det ikke installeres og bruges i overensstemmelse med instruktionsmanualen. Ved betjening af udstyret i et boligområde kan det potentielt forårsage skadelig interferens, i hvilket tilfælde brugeren skal afhjælpe interferensen for egen regning. Tilsluttet udstyrs overholdelse af lovkrav Enhver form for udstyr, der tilsluttes Ettan IPGphor 3 Isoelectric Focusing System bør overholde sikkerhedskravene i EN 61010-1/IEC61010-1 eller relevante harmoniserede standarder. I den Europæiske Union skal tilsluttet udstyr være CE-mærket. Miljøoverensstemmelse Dette produkt overholder følgende miljøbestemmelser. Krav 2011/65/EU 2012/19/EU ACPEIP Bestemmelse (EF) Nr. 1907/2006 Navn RoHS-direktivet om begrænsning af anvendelsen af visse farlige stoffer i elektrisk og elektronisk udstyr WEEE-direktivet om affald af elektrisk og elektronisk udstyr Administration on the Control of Pollution Caused by Electronic Information Products, Det kinesiske direktiv, China Restriction of Hazardous Substances (RoHS) Registrering, vurdering og godkendelse af samt begrænsninger for kemikalier (REACH) Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC 11
1 Indledning 1.4 Tilhørende dokumentation 1.4 Tilhørende dokumentation Indledning Dette afsnit beskriver tilhørende dokumentation, og hvordan man finder tilknyttet litteratur, som kan downloades eller bestilles fra GE. Ettan IPGphor Brugervejledningen for kop-isætningsmanifold indeholder vejledning vedrørende første-dimensions isoelektrisk fokusering af proteiner på IPG-strimler. Brugervejledning for Ettan IPGphor 3-kontrolsoftware 2-D elektroforese - principper og metodeguide Der følger en vejledning med hver pakke Immobiline DryStrip. 12 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC
2 Sikkerhedsinstruktioner 2 Sikkerhedsinstruktioner Om dette kapitel Dette kapitel beskriver sikkerhedsforanstaltninger og nødlukningsprocedurer for Ettan IPGphor 3 Isoelectric Focusing System. Mærkaterne på systemet og information om genanvendelse beskrives også. I dette kapitel Afsnit 2.1 Sikkerhedsforanstaltninger 2.2 Mærkater 2.3 Nødprocedurer 2.4 Oplysninger om genanvendelse Se side 14 20 22 24 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC 13
2 Sikkerhedsinstruktioner 2.1 Sikkerhedsforanstaltninger 2.1 Sikkerhedsforanstaltninger Indledning Inden instrumentet betjenes, skal du være opmærksom på farerne, der beskrives i brugerdokumentationen. Følg anvisningerne for at undgå personskade og beskadigelse af udstyret. Sikkerhedsforanstaltningerne i dette afsnit er inddelt i følgende kategorier: Generelle forholdsregler, på side 14 Personlig beskyttelse, på side 15 Anvendelse af brandfarlige væsker, på side 16 Vedligeholdelse, på side 19 Betjening af systemet, på side 17 Vedligeholdelse, på side 19 Generelle forholdsregler ADVARSEL Udfør en risikovurdering for enhver risiko som følge af processen eller procesmiljøet. Vurdér de påvirkninger, som systemet og de processer, hvori det anvendes, har på klassificeringen af det farlige område. Processen kan måske føre til, at området skal udvides eller, at zoneklassificeringen skal ændres. Implementér de tiltag, der er nødvendige for at reducere risikoen, herunder anvendelse af personligt beskyttelsesudstyr. ADVARSEL Kunden skal sørge for, at al installation, vedligeholdelse, betjening og eftersyn udføres af kvalificeret personale med passende oplæring. Personalet skal forstå og overholde de lokale bestemmelser og betjeningsvejledningerne samt have et grundigt kendskab til produktet og hele processen. 14 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC
2 Sikkerhedsinstruktioner 2.1 Sikkerhedsforanstaltninger ADVARSEL Ettan IPGphor 3 må ikke betjenes på anden måde end beskrevet i Operating Instructions. ADVARSEL Betjening og brugervedligeholdelse af Ettan IPGphor 3 bør kun udføres af medarbejdere med den korrekte uddannelse. ADVARSEL Der bør kun anvendes dele og tilbehør, der er godkendt eller leveret af GE, til vedligeholdelse eller reparation af systemet. Personlig beskyttelse ADVARSEL Brug altid passende personligt beskyttelsesudstyr under installation, betjening, inspektion, vedligeholdelse og rengøring af Ettan IPGphor 3. ADVARSEL Når der arbejdes med farlige kemikalier og biologiske agenser, skal der tages alle relevante beskyttende forholdsregler, f.eks. beskyttelsesbriller og handsker, der er resistente over for de brugte substanser. Lokale og/eller nationale bestemmelser for sikker drift og vedligeholdelse af systemet skal overholdes. ADVARSEL Operatøren skal tage alle nødvendige forholdsregler for at undgå spredning af farlige biologiske agenser til området omkring instrumentet. Institutionen skal overholde nationale bestemmelser for biosikkerhed. Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC 15
2 Sikkerhedsinstruktioner 2.1 Sikkerhedsforanstaltninger ADVARSEL Ettan IPGphor 3 er et klasse A produkt. Dette produkt kan skabe radiointerferens i et almindeligt husholdningsmiljø, hvorfor brugeren kan blive nødt til at tage passende forholdsregler. Anvendelse af brandfarlige væsker ADVARSEL Kontrollér systemet for lækager, inden det startes. ADVARSEL Der skal være installeret emhætte eller et tilsvarende ventilationssystem, når der anvendes brandfarlige eller skadelige substanser. Installation ADVARSEL Sørg for, at forsyningsspændingen i stikkontakten og mærkningen på instrumentet modsvarer hinanden, inden strømkablet tilsluttes. ADVARSEL Ettan IPGphor 3 skal altid være tilsluttet en stikkontakt med jordforbindelse. ADVARSEL Anvend kun strømkabler, der leveres eller anbefales af GE. 16 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC
2 Sikkerhedsinstruktioner 2.1 Sikkerhedsforanstaltninger ADVARSEL Bag- og sidepanel på Ettan IPGphor 3 må ikke blokeres. Tænd/slukknappen skal til enhver tid være lettilgængelig. Det skal altid være nemt at frakoble strømkablet. NOTE Alle computere, der bruges sammen med udstyret, skal overholde IEC 60950 og være installeret og anvendes i henhold til producentens anvisninger. Betjening af systemet ADVARSEL Ettan IPGphor 3 er i stand til at producere flere tusinde volt. Sørg for at læse og fuldt ud forstå betjeningsvejledningen og alle advarsler, før Ettan IPGphor 3 betjenes. ADVARSEL Kontrollér, at højspændingen er slået fra, før åbning af sikkerhedslåget. Indikatoren HV ON på frontpanelet bør ikke lyse. ADVARSEL Ettan IPGphor 3 må aldrig benyttes, hvis én af sikkerhedsfunktionerne ikke er i orden. Kontakt GE-serviceudbyderen for yderligere oplysninger. ADVARSEL Ettan IPGphor 3 er et højspændingsinstrument, der kan give livsfarlige elektriske stød, hvis sikkerhedsfunktionerne er deaktiveret. Sikkerhedsdækslet skal lukkes korrekt før start af en protokol. Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC 17
2 Sikkerhedsinstruktioner 2.1 Sikkerhedsforanstaltninger ADVARSEL I tilfælde, hvor der er risiko for personskade, skal instrumentet slukkes ved at slå hovedkontakten (placeret på bagsiden) til indstilling 0. Fejl skal rettes, før Ettan IPGphor 3 Isoelectric Focusing System genstartes. ADVARSEL Ventilationshullerne foran, bagpå og i bunden af Ettan IPGphor 3 må ikke blokeres. Luften skal kunne cirkulere for at køleren kan fungere korrekt. Der skal være mindst 10 cm friplads bag ved instrumentets bagpanel. ADVARSEL Undgå at spilde væsker på instrumentet. Hvis der er trængt store mængder væske gennem instrumenthuset, og væsken er kommet i kontakt med de elektriske komponenter, skal instrumentet øjeblikkeligt slukkes, og en autoriseret tekniker tilkaldes. FORSIGTIG Bær altid beskyttelseshandsker, når der arbejdes med rehydreringsopløsning. FORSIGTIG Bær altid handsker ved håndtering af IPG-strimler og udstyr, der kommer i kontakt med dem. Det bidrager til at reducere proteinkontamination, der kan føre til artefaktpletter i plettede 2-D-gelmønstre. FORSIGTIG Sikkerhedslåget skal være lukket til, før strømmen tilsluttes. 18 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC
2 Sikkerhedsinstruktioner 2.1 Sikkerhedsforanstaltninger Vedligeholdelse ADVARSEL Sluk for strømmen. Sluk altid for strømmen til instrumentet, inden der udføres nogen form for vedligeholdelse. ADVARSEL Ettan IPGphor 3 dækslerne må ikke åbnes af brugeren. De skjuler elektriske kredsløb, der kan afgive dødeligt elektrisk stød. Service og planlagt vedligeholdelse må udelukkende foretages af personale, der er godkendt af GE. ADVARSEL Hoveddækslet må ikke fjernes. Instrumentet indeholder ingen komponenter, der kan serviceres af brugeren, og du kan blive udsat for højspænding. ADVARSEL Afbryd altid strømmen til instrumentet, og kobl strømkablet fra inden udskiftning af sikringer. FORSIGTIG Brug ikke nogen form for organiske opløsningsmidler under rengøring. Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC 19
2 Sikkerhedsinstruktioner 2.2 Mærkater 2.2 Mærkater Indledning Dette afsnit beskriver systemmærkaten og sikkerhedsmærkater på Ettan IPGphor 3. Systemmærke-illustration Illustrationen nedenfor viser et eksempel på en systemmærkat. XX-XXXX-XX XXXXX TM Sample Code no: XXXXXXXX Serial no: XXXXXXX Mfg Year: 2014 Voltage: IXI-XXX/XXX-XXX VAC Frequency: XX-XX Hz Max Power: XXX VA Fuse: XX X XXAL 250 V Protection Class: XXXX GE Healthcare Bio-Sciences AB Made in Sweden 751 84 Uppsala Sweden Conforms to ANSI/UL Std. 61010-1. Cert. to CAN/CSA Std. C22.2 No. 61010-1. 4001767 Systemmærke-beskrivelse Mærkat Product name Code no Serial no Mfg Year Voltage Frequency Max Power Fuse Betegnelse Produktnavn Instrumentets monteringsnummer Instrumentets serienummer Fremstillingsår Spænding Frekvens Maks. nominel belastning Fuse 20 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC
2 Sikkerhedsinstruktioner 2.2 Mærkater Mærkat Betegnelse Advarsel! Læs brugerdokumentationen, inden du anvender systemet. Åbn aldrig dæksler eller udskift dele, medmindre det udtrykkeligt er nævnt i brugerdokumentationen. Dette symbol indikerer, at elektrisk og elektronisk udstyr ikke må bortskaffes som usorteret husholdningsaffald og skal indsamles separat. Kontakt venligst en af producenten autoriseret repræsentant for oplysninger om bortskaffelse af udstyret efter endt drift. Dette symbol indikerer, at produktet indeholder farlige materialer, som overstiger grænserne i den kinesiske standard SJ/T11363-2006 Requirements for Concentration Limits for Certain Hazardous Substances in Electronics. Systemet overholder gældende EU-direktiver. Se venligst Overensstemmelse med EU-direktiver, på side 9. Systemet overholder kravene vedrørende elektromagnetisk stråling (EMC) i Australien og på New Zealand. Dette symbol angiver at, Ettan IPGphor er blevet certificeret af et nationalt anerkendt testlaboratorium (NRTL). NRTL betyder en organisation, som er anerkendt af den amerikanske sikkerheds- og sundhedsstyrelse, OSHA, som værende i overensstemmelse med lovkravene i afsnit 29 i de føderale regler (29 CFR), del 1910.7. Sikkerhedsmærke-beskrivelse Der er sat sikkerhedsmærkater (se figuren nedenfor) på både lysbeskyttelsesdækslet og det gennemsigtige låg på sikkerhedslåget. Sikkerhedsmærkaten advarer brugeren om risiko for personskade. Fortsæt ikke, før instrukserne er helt forstået, og alle ovennævnte betingelser er opfyldt. Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC 21
2 Sikkerhedsinstruktioner 2.3 Nødprocedurer 2.3 Nødprocedurer Indledning Dette afsnit beskriver, hvordan en nødlukning af Ettan IPGphor 3 udføres samt resultatet af et strømsvigt. Nødnedlukning Sluk for strømmen til instrumentet ved at trykke Power switch til indstilling 0 (1). Frakobl om nødvendigt strømkablet (2). Kørslen afbrydes øjeblikkeligt. Dette sikrer, at strømmen straks afbrydes, selv ved anvendelse af en uafbrudt strømforsyning (UPS). 1 / 2 Strømsvigt I tilfælde af systemstop pga. strømsvigt, nødstop eller procesafbrydelse, skal fejl afhjælpes, før Ettan IPGphor 3 startes igen. Følgerne af et strømsvigt afhænger af, hvilken enhed strømsvigtet påvirkede. Strømsvigt til... Ettan IPGphor 3-instrument resulterer i... Alle igangværende forsøg standses. Stoptidspunktet vil blive registreret af instrumentet. Kørslen afbrydes i udefineret tilstand. 22 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC
2 Sikkerhedsinstruktioner 2.3 Nødprocedurer Strømsvigt til... Computer resulterer i... Ettan IPGphor-computeren lukker ned. Eventuelle igangværende forsøg vil fortsætte til fuldførelse. Scannede billeder kan gemmes og overføres til computeren, når forbindelsen til computeren er genoprettet. Bemærk: En UPS kan forebygge datatab under og efter et strømsvigt, og giver mulighed for kontrolleret nedlukning af Ettan IPGphor 3. Genstart efter nødstop/strømsvigt Når strømmen vender tilbage vil forsøg, der kørte på tidspunktet for nødstop, ikke blive genoptaget. Fortsæt som følger: Trin 1 2 3 Handling Start instrumentet. Se Tænd for strømmen, og kør diagnosticeringsprogrammet, på side 64. Genstart softwaren. Når systemet er tilsluttet, vil log-hændelsen blive gemt i systemloggen. Hvis du ønsker at fortsætte en kørsel, skal et nyt forsøg opstilles og køres med passende/resterende trin for at fuldføre kørslen på bedste vis. Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC 23
2 Sikkerhedsinstruktioner 2.4 Oplysninger om genanvendelse 2.4 Oplysninger om genanvendelse Indledning Dette afsnit indeholder oplysninger om, hvordan Ettan IPGphor 3 sættes ud af drift. Dekontaminering Ettan IPGphor 3 skal dekontamineres, inden systemet tages ud af drift, og alle lokale regler skal følges med hensyn til skrotning af udstyret. Bortskaffelse, generelle instruktioner Når Ettan IPGphor 3 tages ud af drift, skal de enkelte dele og materialer bortskaffes i henhold til lokal og national miljølovgivning. Genanvendelse af farlige substanser Ettan IPGphor 3 indeholder farlige substanser. Kontakt din GE-repræsentant for at få detaljerede oplysninger. Bortskaffelse af elektriske komponenter Elektrisk og elektronisk affald må ikke bortskaffes via den kommunale dagrenovation, men skal indsamles og bortskaffes separat. Kontakt venligst en af producenten autoriseret repræsentant for oplysninger om bortskaffelse af udstyret efter endt drift. 24 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC
3 Systembeskrivelse 3 Systembeskrivelse Om dette kapitel Dette afsnit omfatter en beskrivelse af Ettan IPGphor 3 Isoelectric Focusing System og en oversigt over dens komponenter. I dette kapitel Dette kapitel omfatter de følgende afsnit: Afsnit 3.1 Illustrationer af Ettan IPGphor 3 3.2 Ettan IPGphor 3-instrument 3.3 Ettan IPGphor 3 Control Software 3.4 Strimmelholdere Se side 26 30 32 33 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC 25
3 Systembeskrivelse 3.1 Illustrationer af Ettan IPGphor 3 3.1 Illustrationer af Ettan IPGphor 3 Ettan IPGphor 3 Isoelectric Focusing System 1 2 Del 1 2 Bemærk: Funktion Ettan IPGphor 3 Control Software Ettan IPGphor 3-instrument Ettan IPGphor 3 instrumentet bruges sammen med separate strimmelholdere eller en manifold. Der er to typer manifolder tilgængelige: den keramiske manifold og den lette manifold. Ettan IPGphor 3 Isoelectric Focusing System omfatter også Immobiline DryStripgelestrimler, der indeholder en immobiliseret ph-gradient (IPG). Se Ettan IPGphor Cup Loading Manifold User Manual for mere information om manifoldene. 26 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC
3 Systembeskrivelse 3.1 Illustrationer af Ettan IPGphor 3 Ettan IPGphor 3 Platform 1Safety lid 2 Positive (anode) electrode area Negative (cathode) electrod area 3 4 Control panel Del 1 2 3 4 Funktion Sikkerhedslåg Positivt (anode) elektrodeområde Negativt (katode) elektrodeområde Kontrolpanel Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC 27
3 Systembeskrivelse 3.1 Illustrationer af Ettan IPGphor 3 Ettan IPGphor 3-kontrolpanel Ettan IPGphor 3 styres fra et membrantastatur med 7 taster. Instrumentet status vises på LCD-skærmen. 1 2 3 4 5 6 9 7 8 Del 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Funktion Knappen START Knappen STOP LCD-skærm (Hovedmenu) Venstre piletast Pil op-tast Højre piletast Pil ned-tast Knappen EDIT Indikatorlampen HV ON 28 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC
3 Systembeskrivelse 3.1 Illustrationer af Ettan IPGphor 3 Ettan IPGphor 3 bagpanel Elektriske forbindelser og kommunikationsforbindelser sidder bag på Ettan IPGphor 3. / 1 2 3 4 Del 1 2 3 4 Funktion Power switch Sikringsholder RS232 til tilslutning til computer Strømtilslutning Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC 29
3 Systembeskrivelse 3.2 Ettan IPGphor 3-instrument 3.2 Ettan IPGphor 3-instrument Platform Platformen kan rumme en manifold til Første dimension isoelektrisk fokusering (IEF)- kørslen. Op til 12 fastlængde-strimmelholdere kan placeres på platformen for rehydrering og IEF. Det integrerede elektrodeområder leverer den elektriske forbindelse mellem strimmelholder eller manifoldelektroder og en integreret højspændings DC-strømforsyningen, der leverer op til 10 kv. Platformtemperaturen styres af Peltier termoelektriske moduler. Begge elektrodeområder består af forgyldt kobber. Placering af en manifold eller strimmelholder, så den forbinder begge elektrodeområder, slutter det elektriske kredsløb (når sikkerhedslåget er på plads). Beskyttelsesdæksel Ved analyse af proteiner, der er mærkede med lysfølsomme pletter som f.eks. CyDye benyttes et let beskyttelsesdæksel. Dækslet holdes magnetisk på plads, men er nemt at fjerne delvist for at kontrollere isoelektrisk fokusering, især migration af det bromphenolblå sporingsstof ved start. Spændingen frakobles, når sikkerhedslåget åbnes. 30 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC
3 Systembeskrivelse 3.2 Ettan IPGphor 3-instrument Lågadapter til strimmelholdere Ved brug af Ettan IPGphor 3 standard strimmelholdere, skal en lågadapter anvendes, så det korrekte tryk påføres lågene på Ettan IPGphor 3-strimmelholderne. Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC 31
3 Systembeskrivelse 3.3 Ettan IPGphor 3 Control Software 3.3 Ettan IPGphor 3 Control Software Kontrolsoftware Ettan IPGphor 3 Control Software bruges til at styre Ettan IPGphor 3 Isoelectric Focusing System. Softwaren leverer datapræsentation, datalagring og protokolhåndtering. PC'en er tilsluttet Ettan IPGphor 3 via et serielt kabel eller en USB-omformer. Ettan IPGphor 3 Control Software styrer op til fire Ettan IPGphor 3-systemer på én gang, der hver kører forskellige parametersæt. Softwaren muliggør programmering, og anbefalede protokoller genereres ved angivelse af instrumentkonfiguration, IPG-strimmellængde og ph-gradient. Softwaren registrerer kørselsparametrene over tid og præsenterer data som grafer og logfiler. Data gemmes eller kan eksporteres til Microsoft Excel. 32 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC
3 Systembeskrivelse 3.4 Strimmelholdere 3.4 Strimmelholdere To strimmelmanifold-modeller IPG-strimmelmanifolds fås i to modeller: Én, der er fremstillet af keramisk materiale, som giver større temperaturensartethed Én, der er fremstillet af et let polymert materiale til mindre kritiske eksperimenter Begge er designede til analytisk analyse med kop-anvendelse og klargøringskørsler, ved at smøre prøven på gelen under rehydreringstrinnet eller via ilægning af papirbroen. Strimmelholder Strimmelholderne er fremstillede af aluminiumoxid-keramik med elektroder af platin på titanium. Keramikken er meget skør, hvorfor holderne er skrøbelige, og skal håndteres forsigtigt. Keramikken er behandlet med en særlig belægning for at minimere proteinbinding og må kun rengøres med den medfølgende Ettan IPGphor Cleaning Solution, for at bibeholde belægningen. Hver fastlængde-strimmelholderbase kan holde en enkelt IPG-strimmel under rehydrering og isoelektrisk fokusering. En holder i tilsvarende længde er til rådighed for hver størrelse strimmel. Alle strimler (og holdere), der anvendes på én gang, skal være af samme længde. Der tilbydes fem strimmelholderlængder: 7, 11, 13, 18 og 24 cm, én for hver IPG-strimmellængde samt et antal ph-områder, flere lineære og ikke-lineære. Se Afsnit 8.3 Bestillingsoplysninger, på side 114. 24 cm 18 cm 13 cm 11 cm 7 cm Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC 33
3 Systembeskrivelse 3.4 Strimmelholdere Del Prøveapplikationsbrønde Dæksel Funktion Hver af de to brønde kan indeholde 15 μl prøvemateriale (7,5 μl på begge sider af strimlen) udover rehydreringsmængden (dvs. maks. 30 μl for begge brønde). Indfør prøven gennem brøndene, hvis den ikke er indeholdt i rehydreringsopløsningen. Dækslet er fremstillet af akryl og beskytter IPG-strimlen under rehydrering. Formen på undersiden af dækslet sikrer elektrisk forbindelse under IEF ved at trykke strimlen mod elektroden, samtidig med at elektrolysegasserne kan slippe ud. Rehydrerings- og separationsprocessen kan overvåges visuelt gennem det klare dæksel. Strimmelholderdæksel Dækslet er fremstillet af akryl og beskytter IPG-strimlen under rehydrering. Formen på undersiden af dækslet sikrer elektrisk forbindelse under IEF ved at trykke strimlen mod elektroden, samtidig med at elektrolysegasserne kan slippe ud. Rehydrerings- og separationsprocessen kan overvåges visuelt gennem det klare dæksel. 2 1 3 4 Del 1 2 3 4 Funktion Trykblok Dæksel Base Prøveapplikationsvægge 34 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC
4 Installation 4 Installation Indledning Dette kapitel indeholder oplysninger om sikker installation af Ettan IPGphor 3 Isoelectric Focusing System. I dette kapitel Dette kapitel omfatter de følgende afsnit: Afsnit 4.1 Krav til installationsstedet 4.2 Udpakning og transport 4.3 Opsætning 4.4 Installation af software til isoelektrisk fokuseringsproces Se side 36 38 39 43 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC 35
4 Installation 4.1 Krav til installationsstedet 4.1 Krav til installationsstedet Pladskrav Parameter Laboratoriebordets minimumsstørrelse (B D) Specifikation 480 670 mm Mål og vægt for Ettan IPGphor 3 Parameter Dimensioner (h b d) Vægt Specifikation 160 278 471 mm 8,3 kg Driftsmiljø Parameter Driftssted Højde Omgivende temperatur Relativ luftfugtighed Forureningsgrad Støjemission Specifikation Indendørs brug Maksimalt 2.000 m 15 til 32 0 % til 70 % 1 2 <80 db A 1 Høj relativ luftfugtighed kan medføre dannelse af kondensat på platformoverfladen. Kørsler, der fortages ved en platformtemperatur på 20 C og en relative luftfugtighed på under 70 %, vil almindeligvis ikke medføre kondensering. Platformtemperaturer højere end 20 C giver mulighed for højere relativ luftfugtighed uden kondensering. Miljøer, hvor der dannes kondensat på platformoverfladen, kan variere. Hvis der opstår kondensering, kan det være nødvendigt med et airconditionanlæg for at reducere temperatur og relativ luftfugtighed. 36 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC
4 Installation 4.1 Krav til installationsstedet Strømkrav Parameter netspænding Frekvens Strømforbrug Forbigående overspændinger Specifikation 100-240 V AC ±10% 50/60 Hz 230 VA Overspænding kategori II Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC 37
4 Installation 4.2 Udpakning og transport 4.2 Udpakning og transport Udpakning Pak omhyggeligt alle leverede varer ud, og sørg for, at alle elementer er til stede ved at sammenligne indholdet med følgesedlen. Hvis der er dele, der mangler, bedes du kontakte det lokale GE-salgskontor. Undersøg alle komponenter. Hvis en elle flere dele er beskadiget, skal du kontakte fragtmanden øjeblikkeligt. Behold al emballage, som også skal bruges, hvis beskadigede dele skal returneres til reparation eller udskiftning. Efterse udstyret for fejl og skader, inden samling og installation påbegyndes. Dokumentér skader, og kontakt den lokale GE-afdeling. Fjern stropper og emballage, og placér udstyret i opret stilling, inden installationen påbegyndes. Transport Før systemet flyttes: Frakobl alle kabler. Løft instrumentet ved at tage fat i grundenheden. 38 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC
4 Installation 4.3 Opsætning 4.3 Opsætning Placér instrumentet ADVARSEL Ventilationshullerne foran, bagpå og i bunden af Ettan IPGphor 3 må ikke blokeres. Luften skal kunne cirkulere for at køleren kan fungere korrekt. Der skal være mindst 10 cm friplads bag ved instrumentets bagpanel. Trin 1 2 Handling Ettan IPGphor 3 skal placeres et sted, hvor der er mulighed for adgang til hovedafbryder på bagsiden af instrumentet. Placér instrumentet på en plan overflade med libellen i midten. Drej hævefødderne, så instrumentet står plant og stabilt. Strømtilslutning ADVARSEL Sørg for, at forsyningsspændingen i stikkontakten og mærkningen på instrumentet modsvarer hinanden, inden strømkablet tilsluttes. ADVARSEL Anvend kun strømkabler, der leveres eller anbefales af GE. ADVARSEL Ettan IPGphor 3 skal altid være tilsluttet en stikkontakt med jordforbindelse. Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC 39
4 Installation 4.3 Opsætning ADVARSEL Bag- og sidepanel på Ettan IPGphor 3 må ikke blokeres. Tænd/slukknappen skal til enhver tid være lettilgængelig. Det skal altid være nemt at frakoble strømkablet. Der medfølger to strømkabler: ét med nordamerikansk (UL817) 3-benet stik til 115 V ACstrøm og et centraleuropæisk (CEE7/VII) stik til 230 V AC-strøm. Trin 1 2 Handling Vælg kablet med egnet stik til stikkontakterne i dit laboratorium. Hvis ingen af disse kabler er velegnede til dine stikkontakter, skal du tilvejebringe et aftageligt kabel med IEC/ 320/C13-udgang (CEE22/V). Slut stikkene til indgangen på bagpanelet og en jordforbundet stikkontakt. Tænd for strømmen, og kør diagnosticeringsprogrammet Tænd instrumentet, og kør et diagnosticeringsprogram i følge beskrivelsen i Afsnit 5.2 Opstart af instrumentet, på side 64. Seriel-portstik til tilslutning af computer NOTE Alle computere, der bruges sammen med udstyret, skal overholde IEC 60950 og være installeret og anvendes i henhold til producentens anvisninger. RS232 seriel-porten til tilslutning af computer er placeret på bagsiden af Ettan IPGphor 3. Den påkrævede kabeltype (afskærmet lige seriel eller afskærmet nullmodem) afhænger af enhedstypen (DTE eller DCE), der er tilsluttet: Hvis computeren er konfigureret til at modtage data på pin 2 og sende fra pin 3, kræves et almindeligt lige seriel-kabel. For enhver anden konfiguration kræves et nullmodem-kabel. Oplysninger om tildeling af pin-nummer og opsætning af enhed er anført nedenfor: 40 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC
4 Installation 4.3 Opsætning Ettan IPGphor 3 Tildeling af RS232-signal og pin-nummer Ben 2 Ben 3 Ben 5 Andre pin-positioner Sende Modtage Jord Ikke tilsluttet Ettan IPGphor 3 kræver disse enhedsindstillinger for at modtage data Baudhastighed Databit Stopbit Startbit Paritet Strømningsstyring 9600 8 1 1 Ingen Ingen Indstil baudhastighed Følg vejledningen nedenfor for at indstille baudhastigheden på LCD-skærmen. Trin 1 2 3 Handling Tryk samtidig på pil op og pil ned for at åbne Baud-menuen. Brug pil op eller pil ned for at indstille baudhastigheden. Brug højre piletast for at vende tilbage til hovedmenuen. S e r i a l P o r t S e t u p B a u d R a t e : 9 6 0 0 S e t U p o r D n E x i t > Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC 41
4 Installation 4.3 Opsætning Samling Følgende dele skal monteres på Ettan IPGphor 3, før instrumentet kan anvendes: Strimmelholder eller manifold Strimler Buffer og prøvevæsker Reservedele og tilbehør Se opdaterede oplysninger om reservedele og tilbehør på: www.gelifesciences.com 42 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC
4 Installation 4.4 Installation af software til isoelektrisk fokuseringsproces 4.4 Installation af software til isoelektrisk fokuseringsproces Indledning Se Ettan IPGphor 3 Control Software-brugervejledningen for at installere Ettan IPGphor 3 Control Software. Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC 43
5 Betjening 5 Betjening Indledning Dette kapitel angiver, hvorledes man anvender Ettan IPGphor 3 Isoelectric Focusing System. Før du starter Ettan IPGphor 3 Isoelectric Focusing System, rehydreres prøverne i henhold til den valgte metode, enten med Ettan IPGphor 3-strimmelholdere af fast længde eller med Ettan IPGphor Cup Loading Manifold. I dette kapitel Dette kapitel omfatter de følgende afsnit: Afsnit 5.1 Forberedelser inden start 5.2 Opstart af instrumentet 5.3 Udfør en kørsel fra kontrolpanelet 5.4 Kør en forprogrammeret protokol fra PC'en Se side 45 64 66 88 44 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC
5 Betjening 5.1 Forberedelser inden start 5.1 Forberedelser inden start Indledning Dette afsnit indeholder vejledning i, hvordan du kan klargøre strimmelholderne eller manifoldene, før systemet startes. Forholdsregler NOTE Opløsninger, der indeholder urea kan kortvarigt opvarmes. Opvarm ikke opløsninger, der indeholder urea, til over 30-40 ºC, da isocyanat, som er et nedbrydningsprodukt af urea, karbamylerer proteinerne i prøven, hvilket ændrer deres isoelektriske punkter. NOTE Alle kemikalier skal være af den størst mulige renhed. Der skal anvendes dobbelt destilleret vand. Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC 45
5 Betjening 5.1 Forberedelser inden start 5.1.1 Brug af strimmelholdere 5.1.1 Brug af strimmelholdere Indledning Ettan IPGphor 3 Isoelectric Focusing System-fastlængde-strimmelholdere muliggør rehydrering af IPG-strimler samt ilægning af prøver i ét trin, før der automatisk fortsættes til separation. IPG-strimlerne er 3 mm bredde og 0,5 mm tykke efter rehydrering. Forholdsregler ADVARSEL Kontrollér, at højspændingen er slået fra, før åbning af sikkerhedslåget. Indikatoren HV ON på frontpanelet bør ikke lyse. Klargøring af strimmelholder(e). NOTE Håndtér keramiske holdere med forsigtighed, da de er skøre og skrøbelige. Trin 1 2 3 4 Handling Vælg den/de strimmelholder(e), der svarer til den valgte IPG-strimmellængde (7, 11, 13, 18 eller 24 cm). Vask hver holder med den medfølgende strimmelholderopløsning for at fjerne proteinrester. Skyl grundigt med dobbeltdestilleret vand. Brug en vatpind eller en fnugfri klud til at aftørre holderen, eller lad den lufttørre. Holderen skal være helt tør inden brug. 46 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC
Rehydrér Immobiline DryStrip'en Følg nedenstående anvisninger om rehydrering af Immobiline Drystrip. 5 Betjening 5.1 Forberedelser inden start 5.1.1 Brug af strimmelholdere Trin 1 2 Bemærk: Handling Klargør rehydreringsopløsningen, og rehydrér Immobiline DryStrip i strimmelholderen eller i rehydreringsbakken, hvis manifolden benyttes. Følg de anbefalede fremgangsmåder i vejledningen, der findes til hver Immobiline DryStrip-pakke. Se også 2-D elektroforese, Principper og metode-guide, der indeholder almindeligt anvendte opskrifter. Pipettering af rehydreringsopløsningen ADVARSEL Undgå at spilde væsker på instrumentet. Hvis der er trængt store mængder væske gennem instrumenthuset, og væsken er kommet i kontakt med de elektriske komponenter, skal instrumentet øjeblikkeligt slukkes, og en autoriseret tekniker tilkaldes. FORSIGTIG Bær altid handsker ved håndtering af IPG-strimler og udstyr, der kommer i kontakt med dem. Det bidrager til at reducere proteinkontamination, der kan føre til artefaktpletter i plettede 2-D-gelmønstre. NOTE Brug en passende mængde rehydreringsopløsning i forhold til IPGstrimmellængden. Følg nedenstående anvisninger om pipettering af en passende mængde rehydreringsopløsning til hver holder. Den korrekte mængde i forhold til hver strimmellængde kan ses i vejledningen, der sidder på hver Immobiline DryStrip-pakke. Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC 47
5 Betjening 5.1 Forberedelser inden start 5.1.1 Brug af strimmelholdere Trin 1 2 Handling Afpipettér opløsningen langsomt på et centralt punkt i strimmelholderkanalen, væk fra applikationsbrøndene. Fjern eventuelle større luftbobler. 48 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC
Placering af IPG-strimlen Følg nedenstående anvisninger om placering af en IPG strip. 5 Betjening 5.1 Forberedelser inden start 5.1.1 Brug af strimmelholdere Trin 1 2 3 Handling Fjern beskyttelsesdækslet fra IPG strip. Placér strimlen med gelésiden nedad og den spidse (anodisk) ende af strimlen vendt mod den spidse ende af strimmelholderen. Nedsænk derefter strimlen i opløsningen med den spidse ende først. Løft og sænke strimlen forsigtigt for at sikre, at den er fuldt belagt. Skub den frem og tilbage langs overfladen af opløsningen ved at vippe strimmelholderen let efter behov, for at sikre at strimlen er helt og aldeles vædet. 4 Sænk den katodiske (firkantede) ende af strimlen ned i kanalen, og sørg for, at IPG-gelen er i kontakt med strimmelholderelektroderne i hver ende. Gelen kan identificeres visuelt, efterhånden som rehydreringsopløsningen begynder at farve den. Pas på, at der ikke dannes luftbobler under strimlen. Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC 49
5 Betjening 5.1 Forberedelser inden start 5.1.1 Brug af strimmelholdere Anvendelse af Immobiline DryStrip -væske Følg nedenstående anvisninger om påføring af Immobiline DryStrip Cover Fluid, for at minimere fordampning og urea-krystallisering. Trin 1 2 Handling Pipettér dækvæsken dråbevis i den ene ende af strimmelholderen, indtil halvdelen af strimlen er dækket. Pipettér derefter dækvæsken dråbevis i den anden ende af strimmelholderen. Fortsæt indtil væsken helt dækker IPG-strimlen. Sæt strimmelholderdækslet på Dækslet anbringes på holderen. Trykblokke på undersiden af dækslet sikrer, at strimlen opretholder god kontakt med elektroderne, efterhånden som gelen rehydrerer. Rehydreringsprocedure Rehydrering kan foretages på et arbejdsbord eller på Ettan IPGphor 3s platform. Sørg for, at holderen er placeret på en jævn overflade. Rehydrering kræver mindst 10 timer. Det anbefales dog at rehydrere natten over. Alternativt kan rehydreringsperioden programmeres som det første trin i en Ettan IPGphor 3-protokol. Dette er især praktisk, hvis temperaturkontrol under rehydrering er vigtigt, eller hvis der rehydreres under lav spænding. Prøverehydrering under spænding (valgfrit) Følg nedenstående anvisninger om rehydrering under spænding. Hvis det ønskes, kan prøven absorberes af IPG-strimlen under lav spænding. Dette kan forbedre optagelsen af højmolekylære vægtproteiner. Trin 1 2 Handling Indstil rehydreringstiden til 0:00, og programmér Step 1 af protokollen til lav spænding (30 til 100 V) i 10 til 12 timer, seredigér trin eller gradient, på side77 Programmér yderligere trin efter behov for at opnå fuldstændig fokusering. 50 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC
5 Betjening 5.1 Forberedelser inden start 5.1.1 Brug af strimmelholdere Påfør elektrodepuder før IEF (valgfrit) Under visse betingelser, som fx langvarig fokusering, kan vand migrere mod den ene ende af strimlen, som kan føre til udtørring af den anden ende. Denne effekt kan minimeres ved at placere papirelektrodepuder mellem IPG strip og hver strimmelholderelektrode lige før IEF. Elektrodepuder kan også absorbere ioner, der ellers ville hobe sig op i enderne af IPG-strimlen og eventuelt forstyrre adskillelsen. Følg nedenstående anvisninger om påføring af elektrodepuder før IEF. Trin 1 2 Handling Skær to 3 mm brede elektrodepuder fra en IEF-elektrodestrimmel af papir (18-1004 -40). Læg dem på en ren, flad overflade, såsom en glasplade, og opblød dem i afioniseret vand. Overskydende vand fjernes ved at opsuge det med køkkenrulle eller lign. Bemærk: Elektrodepuderne skal være fugtige, ikke mættede eller dryppende. 3 4 Løft den ene ende af den rehydrerede IPG strip med en tang eller pincet. Anbring en elektrodepude over elektroden, og sænk derefter strimlen tilbage på plads. Gentag i den anden ende. Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC 51
5 Betjening 5.1 Forberedelser inden start 5.1.1 Brug af strimmelholdere Påfør prøve efter rehydrering (valgfrit) Hvis prøven ikke blev påført som en del af rehydreringsopløsningen, kan den påføres umiddelbart før IEF. Følg nedenstående anvisninger om påføring af elektrodepuder før IEF. Bemærk: Bagsiden af IPG-strimlen er uigennemtrængelig: Påfør ikke prøven på bagsiden af strimlen. Trin 1 2 Handling Klargør prøven i en opløsning svarende til sammensætningen af rehydreringsopløsningen. Pipettér prøven i enten en eller begge sidebrønde i begge ender af strimmelholderen. Indføring af prøven under dækvæsken. Der kan tilføres op til 7,5 μl prøveopløsning til hver side (dvs. 15 μl per brønd, eller maksimalt 30 μl, hvis begge sider af begge brønde anvendes). 52 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC
Placér strimmelholderne Ettan IPGphor 3s platform har to elektrodeområder: Det større område (3) er den positive elektrode (anoden) Det mindre område (4) er den negative elektrode (katoden). 5 Betjening 5.1 Forberedelser inden start 5.1.1 Brug af strimmelholdere Placér strimmelholderen på platformen som vist nedenfor: Nedre elektrodekontakter - én i hvert elektrodeområde (1). Den spidse ende af strimmelholderen (2) ligger over anoden (vender mod enhedens bagside) og den stumpe ende ligger over katoden. Retningspile langs siderne af platformen viser den omtrentlige placering for hver strimmelholderlængde (7, 11, 13, 18 og 24 cm). Electrode contacts underneath, one 1 in each electrode area 2 The pointed end of the strip holder is in the anodic electrodae area. 3 Anodic electrode area (+) 4 Cathodic electrode area ( ) Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC 53
5 Betjening 5.1 Forberedelser inden start 5.1.1 Brug af strimmelholdere Anvendelse af sikkerhedslåg NOTE Under isoelektrisk fokusering skal du være opmærksom på ikke at lægge din vægt på sikkerhedslåget, ikke at udsætte låget for stort tryk eller ulige vægtfordeling og ikke anbringe genstande på låget. Et sådant tryk kan beskadige lysbuen mellem strimmelholderens elektroder og elektrodeområderne og kan medføre beskadigelse af instrumentet. Når Ettan IPGphor standard strimmelholdere anvendes, skal der bruges en lågadapter, så det korrekte tryk påføres lågene på IPGphor-strimmelholderne. Trykket holder IPGstrimlen i kontakt med IPG-strimmelholderelektroderne. 54 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC
5 Betjening 5.1 Forberedelser inden start 5.1.1 Brug af strimmelholdere Lukning af sikkerhedslåget FORSIGTIG Sikkerhedslåget skal være lukket til, før strømmen tilsluttes. NOTE Overstigning den anbefalede strømbegrænsning på 50 µa per IPGstrimmel kan forårsage, at strimlen brænder og kan beskadige instrumentet. Følg nedenstående anvisninger om sikring af god elektrisk kontakt med fastlængdestrimmelholderen: Trin 1 Handling Anvend to låg adaptere (2) hele vejen over lågene på strimmelholderne, én over det anodiske område og en anden over der katodiske område. 1 2 3 2 3 Brug to eller flere strimmelholdere (3), og anbring dem med god afstand mellem hinanden, for at sikre, at lågadapterne kun hænger på én strimmelholder og ikke trykker ned på den anden. Luk forsigtigt sikkerhedslåget (1) ved at trykke let ned, mens du sørger for, at låsemekanismen låser låget på plads. Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC 55
5 Betjening 5.1 Forberedelser inden start 5.1.1 Brug af strimmelholdere Trin 4 Handling Kørslen kan overvåges uden behov for standsning ved at løfte lysbeskyttelsesdækslet. Light prot cover 5 Åbn sikkerhedslåget ved at trykke nedad, så låsen frigøres. Kørslen standses herved. Kørslen genoptages, når låget lukkes. 56 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC
5 Betjening 5.1 Forberedelser inden start 5.1.2 Brug Ettan IPGphor-kop-isætningsmanifolden 5.1.2 Brug Ettan IPGphor-kop-isætningsmanifolden Forholdsregler FORSIGTIG Bær altid beskyttelseshandsker, når der arbejdes med rehydreringsopløsning. Indledning Se venligst Brugervejledning for Ettan IPGphor-kop-isætningsmanifold for nærmere oplysninger. Rehydrering af Immobiline DryStrip i IPGbox Rehydrér IPG strips med gel-siden nedad med en passende mængde rehydreringsopløsning, med eller uden prøve, ved brug af IPGbox. Rehydrering i kopisætningsmanifolden anbefales ikke, fordi kanalen er for bred til at sikre korrekt rehydrering. Følg desuden instruktionerne, der fulgte med Immobiline DryStrips eller IPGbox. Luk låget på IPGbox, og lad strimlerne rehydrere natten over (10 til 20 timer). Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC 57
5 Betjening 5.1 Forberedelser inden start 5.1.2 Brug Ettan IPGphor-kop-isætningsmanifolden Placer manifolden på Ettan IPGphor 3 Følg nedenstående anvisninger ved placering af manifolden på Ettan IPGphor 3. Trin 1 2 Handling Rengør, og aftør Ettan IPGphor 3-platformen, før manifolden placeres på systemet. Placering af manifolden på Ettan IPGphor 3-platformen. Det lille T-formede fremspring passer ind i en udskæring på Ettan IPGphor 3-platformen nær låghængslet. 3 4 Sørg for, at manifolden er vandret ved at placere den runde libelle i midten af manifoldbakken, når den er placeret på Ettan IPGphor 3. Afmål 108 ml Immobiline DryStrip Cover Fluid (selv hvis færre end 12 strimler lægges i manifolden). Tilføj dækvæsken jævnt i de 12 manifoldkanaler. 58 Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC
Anbring IPG-strimler i manifolden 5 Betjening 5.1 Forberedelser inden start 5.1.2 Brug Ettan IPGphor-kop-isætningsmanifolden Følg nedenstående anvisninger om placering af IPG strips i manifolden. Trin 1 Handling Overfør strimlerne til Ettan IPGphor Cup Loading Manifold. 2 3 Anbring strimlerne under dækslet med væskesiden opad i bakken med den anodiske (+, spidse) ende af IPG-strimlen vendt mod Ettan IPGphor 3s anode. Centrér strimlen i manifoldkanalens længde. Fremspring langs siderne styrer strimlen mere eller mindre lige, selvom der kan kræves en vis manuel justering. Se også: Brugervejledning for Ettan IPGphor-kop-isætningsmanifold. Ettan IPGphor 3 Betjeningsvejledning 28-9635-51 AC 59