MÅLEUSIKKERHED MIKROBIOLOGI

Transkript

1 MÅLEUSIKKERHED MIKROBIOLOGI KIRSTEN KIRKEBY QA SUPERVISOR LABORATORIUM DANISH CROWN HERNING

2 Mikrobiologisk usikkerhed Den ekspanderede kombinerede usikkerhed U 2 x uc,abs.(log cfu/g) Den tilfældige analytiske variation (Reproducerbarhed). Den systematiske analytiske variation (Bias). Genbrug af tal som vi har i forvejen Beregnes som den absolutte usikkerhed

3 Mikrobiologisk usikkerhed Referencer: DANAK AB 13 Magnusson, B., Näykki, T., Hovind, H. & Krysell, M. Handbook for calculation of measurement uncertainty in environmental laboratories. Nordtest report TR 537. Approved Carl Aage Dahl Winther, Hans D. Jensen. Dansk Institut for Fundamental Metrologi. Usikkerhedsberegning. En introduktion NMKL-Procedure Nr. 8, 4. udgave (2008) DMRI

4 Mikrobiologisk usikkerhed Reproducerbarhed (u(r w )) Reproducerbarheden er beregnet på baggrund af referencematerialet (CRM), som er analyseret på laboratorierne i Herning og Horsens over tid med bemyndiget personale, godkendt udstyr, materialer etc. Der kan være brugt forskelligt referencemateriale (CRM), dvs. eventuelle biologiske variationer i referencematerialet vil indgå i usikkerheden u(r w ) bestemmes (sammen) ud fra standardafvigelsen S Rw,abs., som er beregnet ud fra resultaterne fra referencematerialet (CRM).

5 Mikrobiologisk usikkerhed Bias Forskellen mellem laboratoriets resultat og en accepteret referenceværdi (nominel værdi), eller den sande værdi, bestemt som resultatet fra en større testserie (certificeret kontrolmateriale) Bias er beregnet på baggrund af præstationsprøvninger fra HPA, Food and Environmental Proficiency Testing Unit (FEPTU). Det er foretaget over tid på laboratorierne i Herning og Horsens med bemyndiget personale, godkendt udstyr, materialer, etc.

6 Definitioner Var (X) S Rw abs. Standardafvigelsen på resultater fra kontroldata (matricestandarder) for min. 50 prøver eller over en given periode (kunne være 1 år). u(r w ) Reproducerbarhed inden for laboratoriet, bestemt ud fra kombineret standardafvigelsen S Rw abs

7 Definitioner U bias Metode og laboratoriebias RMS bias (metode) abs = u (Cref)abs. Usikkerhedsbidraget fra den certificerede eller nominelle værdi. u c Kombineret usikkerhed U Ekspanderede, kombinerede usikkerhed 2 x u c Dækningssansynlighed på 95% Det anbefales, at der indgår mindst 6 prøvninger inden for et passende tidsinterval i beregningen af usikkerheden på biaskomponenten.

8 Referencemateriale CRM (Reproducerbarhed / Intern kontrol) BioBall fra Biomerieux (Totalkim, e. coli, enterobacteriacea, coliforme, stafylococcer, lactobacillus) Angivet antal Fast procedure ATCC stammer (American Type Culture Collection) (Totalkim, e. coli, enterobacteriacea, coliforme, stafylococcer) Opformering Standardiseret procedure Forskelligt niveau CCUG stammer (Culture Collection, University of Göteborg) (lacobacillus) Opformering, standardiseret procedure Standardiseret procedure Forskelligt niveau

9 Intern kontrol Kontrol kvantitative mikrobiologiske analyser - Tempo Metode nr. Parameter Laboratorie Periode 31 Total Viable Count (TVC) Horsens Reference materiale Multi Shot nr Dato Prøve nr. Batch nr. Log (mv(aflæst cfu/g) Aflæst cfu/g Log aflæst cfu/g Dif. Log Øvre kontrol Nedre kontrol B1962 6, ,23 0,12 0,46-0, B1962 6, ,23 0,12 0,46-0, B1962 6, ,08-0,03 0,46-0, B1962 6, ,08-0,03 0,46-0, B1962 6, ,83-0,28 0,46-0, B1962 6, ,96-0,15 0,46-0, B1962 6, ,08-0,03 0,46-0, B1962 6, ,18 0,07 0,46-0, B1962 6, ,18 0,07 0,46-0, B1962 6, ,08-0,03 0,46-0, B1962 6, ,04-0,07 0,46-0, B1962 6, ,23 0,12 0,46-0, B1962 6, ,23 0,12 0,46-0, B1962 6, ,08-0,03 0,46-0, B1962 6, ,40 0,29 0,46-0, B1962 6, ,08-0,03 0,46-0, B1962 6, ,18 0,07 0,46-0, B1962 6, ,40 0,29 0,46-0, B1962 6, ,32 0,21 0,46-0, B1962 6, ,20 0,09 0,46-0, B1962 6, ,18 0,07 0,46-0, B1962 6, ,04-0,07 0,46-0, B1962 6, ,23 0,12 0,46-0, B1962 6, ,96-0,15 0,46-0, B2071 6, ,32 0,21 0,46-0, B2071 6, ,08-0,03 0,46-0, B2071 6, ,96-0,15 0,46-0, B2071 6, ,04-0,07 0,46-0, B2071 6, ,08-0,03 0,46-0,46 Afvigelses nr.

10 Dif. Log Intern kontrol TEMPO Referencetest - Total Viable Count (TVC) Øvre kontrol Nedre kontrol Dif. Log Lineær (Dif. Log ) 1,00 0,80 0,60 0,40 0,20 0,00-0,20-0,40-0,60-0,80-1, Dato

11 Intern kontrol Beregning, X antal enkeltbestemmelser, poolet spredning 1) Gns.,log/g 7,81 39 S Rw, Log/g U (R w) ) 0,15 SRw, log /g 0,17 I alt 99 Gns.,log/g 6,13 60 Dato Prøve nr. Batch nr. Log (mv(aflæst cfu/g) Aflæst cfu/g Log aflæst cfu/g Øvre Nedre Dif. Log kontrol kontrol Afvigelses nr. SRw, log /g 0, HER T ATCC , ,85 0,08 0,47-0, HER T ATCC , ,63-0,14 0,47-0, HER T ATCC , ,86 0,09 0,47-0, HER T ATCC , ,81 0,03 0,47-0,47 Mange flere rækker i alt HER T ATCC , ,64-0,13 0,47-0, HER T ATCC , ,59-0,18 0,47-0,47 Gns.,log/g 7, HER T ATCC , ,91 0,14 0,47-0,47 S Rw, log /g 0, HON T B1962 6, ,04-0,07 0,46-0, HON T B1962 6, ,08-0,03 0,46-0, HON T B1962 6, ,18 0,07 0,46-0,46 Mange flere rækker i alt HON T B1962 6, ,04-0,07 0,46-0, HON T B2353 6, ,08-0,03 0,46-0, HON T B2353 6, ,18 0,07 0,46-0,46 Gns.,log/g 6, HON T B2353 6, ,08-0,09 0,50-0,50 S Rw, log /g 0,14

12 Præstationsprøvning HPA Health Protection Agency - Food and Environmental Proficiency Testing Unit (FEPTU) Standard program Non Patogen Livsmiddelsverket, Sverige Andre udbydere

13 Resultater præstationsprøver

14 U Ekspanderet kombineret usikkerhed Metode 31 Total Viable Count TVC Antal test 26 Dato Test nr. Afdeling Nominel værdi DC bias S R Antal Friheds Kvadrat SR Kvadrat log/ g log/ g DC g/100g Lab. Lab. * Frihedsg bias DC marts 2012 np0121 Her 6,41 6,34-0,07 0,0049 marts 2012 np0121 Hor 6,41 6,65 0,24 0,0576 marts 2012 np0122 Her 6,25 6,20-0,05 0,0025 marts 2012 np0122 Hor 6,25 6,32 0,07 0,0049 marts 2012 np0123 Her 6,11 6,36 0,25 0,0625 marts 2012 np0123 Hor 6,11 6,23 0,12 0,0144 maj 2012 S0501 Her 3,02 3,20 0,18 0,0324 maj 2012 S0501 Hor 3,02 2,86-0,16 0,0256 maj 2012 S0502 Her 5,25 5,64 0,39 0,1521 maj 2012 S0502 Hor 5,25 5,48 0,23 0,0529 september 2012 S0509 Her 5,82 6,00 0,18 0,0324 september 2012 S0509 Hor 5,82 5,74-0,08 0,0064 september 2012 S0510 Her 4,05 4,20 0,15 0,0225 september 2012 S0510 Hor 4,05 4,18 0,13 0,0169 maj 2013 S0525 Her 4,73 4,76 0,03 0,0009 maj 2013 S0525 Hor 4,73 4,75 0,02 0,0004 maj 2013 S0526 Her 4,90 4,81-0,09 0,0081 maj 2013 S0526 Hor 4,90 4,83-0,07 0,0049 september 2013 np0136 Her 5,83 5,65-0,18 0,0324 september 2013 np0136 Hor 5,83 5,69-0,14 0,0196 september 2013 np0137 Her 4,94 5,20 0,26 0,0676 september 2013 np0137 Hor 4,94 4,93-0,01 0,0001 september 2013 np0138 Her 5,10 4,80-0,30 0,0900 september 2013 np0138 Hor 5,10 4,83-0,27 0,0729 september 2013 S0533 Her 4,70 4,63-0,07 0,0049 september 2013 S0534 Her 4,41 4,75 0,34 0,1156 Frihedsgrader Sum Poolet varians (HPA) Poolet spredning SR (HPA) Poolet varians bias DC 0,035 RMS bias (metode), abs. Kvad ( (biasi2))/n 0,187 u(cref), abs. SR/kvad (n) (HPA) Ubias Metode- og laboratorie bias,kvad (RMS bias(metoden) abs.)2 ) +( (u(cref), abs.)2) u(rw) Reproducerbarhed inden for laboratoriet : SRw, abs. Antal: 99 Kombineret usikkerhed, u c,abs. Kvad (u(rw)2+(u(bias))2 ) U Ekspanderet kombineret usikkerhed, 2* u c,abs.(log cfu/g)

15 U Ekspanderet kombineret usikkerhed Metode 31 Total Viable Count TVC Antal test 26 Dato Test nr. Afdeling Nominel værdi DC bias S R Antal Friheds Kvadrat SR Kvadrat log/ g log/ g DC g/100g Lab. Lab. * Frihedsg bias DC marts 2012 np0121 Her 6,41 6,34-0,07 0, ,7026 0,0049 marts 2012 np0121 Hor 6,41 6,65 0,24 0, ,7026 0,0576 marts 2012 np0122 Her 6,25 6,20-0,05 0, ,8704 0,0025 marts 2012 np0122 Hor 6,25 6,32 0,07 0, ,8704 0,0049 marts 2012 np0123 Her 6,11 6,36 0,25 0, ,4553 0,0625 marts 2012 np0123 Hor 6,11 6,23 0,12 0, ,4553 0,0144 maj 2012 S0501 Her 3,02 3,20 0,18 0, ,4100 0,0324 maj 2012 S0501 Hor 3,02 2,86-0,16 0, ,4100 0,0256 maj 2012 S0502 Her 5,25 5,64 0,39 0, ,3125 0,1521 maj 2012 S0502 Hor 5,25 5,48 0,23 0, ,3125 0,0529 september 2012 S0509 Her 5,82 6,00 0,18 0, ,8223 0,0324 september 2012 S0509 Hor 5,82 5,74-0,08 0, ,8223 0,0064 september 2012 S0510 Her 4,05 4,20 0,15 0, ,0207 0,0225 september 2012 S0510 Hor 4,05 4,18 0,13 0, ,0207 0,0169 maj 2013 S0525 Her 4,73 4,76 0,03 0, ,1096 0,0009 maj 2013 S0525 Hor 4,73 4,75 0,02 0, ,1096 0,0004 maj 2013 S0526 Her 4,90 4,81-0,09 0, ,3176 0,0081 maj 2013 S0526 Hor 4,90 4,83-0,07 0, ,3176 0,0049 september 2013 np0136 Her 5,83 5,65-0,18 0, ,0368 0,0324 september 2013 np0136 Hor 5,83 5,69-0,14 0, ,0368 0,0196 september 2013 np0137 Her 4,94 5,20 0,26 0, ,6848 0,0676 september 2013 np0137 Hor 4,94 4,93-0,01 0, ,6848 0,0001 september 2013 np0138 Her 5,10 4,80-0,30 0, ,6128 0,0900 september 2013 np0138 Hor 5,10 4,83-0,27 0, ,6128 0,0729 september 2013 S0533 Her 4,70 4,63-0,07 0, ,9808 0,0049 september 2013 S0534 Her 4,41 4,75 0,34 0, ,6350 0,1156 Frihedsgrader Sum 2901 Poolet varians (HPA) 0,040 Poolet spredning SR (HPA) 0,200 Poolet varians bias DC 0,035 RMS bias (metode), abs. Kvad ( (biasi2))/n 0,187 u(cref), abs. SR/kvad (n) (HPA) 0,004 Ubias Metode- og laboratorie bias,kvad (RMS bias(metoden) abs.)2 ) +( (u(cref), abs.)2) u(rw) Reproducerbarhed inden for laboratoriet : SRw, abs. Antal: 99 Kombineret usikkerhed, u c,abs. Kvad (u(rw)2+(u(bias))2 ) U Ekspanderet kombineret usikkerhed, 2* u c,abs.(log cfu/g)

16 U Ekspanderet kombineret usikkerhed Metode 31 Total Viable Count TVC Antal test 26 Dato Test nr. Afdeling Nominel værdi DC bias S R Antal Friheds Kvadrat SR Kvadrat log/ g log/ g DC g/100g Lab. Lab. * Frihedsg bias DC marts 2012 np0121 Her 6,41 6,34-0,07 0, ,1183 0,0049 marts 2012 np0121 Hor 6,41 6,65 0,24 0, ,1183 0,0576 marts 2012 np0122 Her 6,25 6,20-0,05 0, ,2032 0,0025 marts 2012 np0122 Hor 6,25 6,32 0,07 0, ,2032 0,0049 marts 2012 np0123 Her 6,11 6,36 0,25 0, ,0727 0,0625 marts 2012 np0123 Hor 6,11 6,23 0,12 0, ,0727 0,0144 maj 2012 S0502 Her 3,02 3,20 0,18 0, ,7500 0,0324 maj 2012 S0502 Hor 3,02 2,86-0,16 0, ,7500 0,0256 maj 2012 S0503 Her 5,25 5,64 0,39 0, ,6875 0,1521 maj 2012 S0503 Hor 5,25 5,48 0,23 0, ,6875 0,0529 september 2012 S0509 Her 5,82 6,00 0,18 0, ,0589 0,0324 september 2012 S0509 Hor 5,82 5,74-0,08 0, ,0589 0,0064 september 2012 S0510 Her 4,05 4,20 0,15 0, ,1901 0,0225 september 2012 S0510 Hor 4,05 4,18 0,13 0, ,1901 0,0169 maj 2013 S0525 Her 4,73 4,76 0,03 0, ,1941 0,0009 maj 2013 S0525 Hor 4,73 4,75 0,02 0, ,1941 0,0004 maj 2013 S0526 Her 4,90 4,81-0,09 0, ,4621 0,0081 maj 2013 S0526 Hor 4,90 4,83-0,07 0, ,4621 0,0049 september 2013 np0136 Her 5,83 5,65-0,18 0, ,3075 0,0324 september 2013 np0136 Hor 5,83 5,69-0,14 0, ,3075 0,0196 september 2013 np0137 Her 4,94 5,20 0,26 0, ,8800 0,0676 september 2013 np0137 Hor 4,94 4,93-0,01 0, ,8800 0,0001 september 2013 np0138 Her 5,10 4,80-0,30 0, ,3036 0,0900 september 2013 np0138 Hor 5,10 4,83-0,27 0, ,3036 0,0729 september 2013 S0533 Her 4,70 4,63-0,07 0, ,9808 0,0049 september 2013 S0534 Her 4,41 4,75 0,34 0, ,6350 0,1156 Frihedsgrader Sum 2901 Poolet varians (HPA) 0,040 Poolet spredning SR (HPA) 0,200 Poolet varians bias DC 0,035 RMS bias (metode), abs. Kvad ( (biasi2))/n 0,187 u(cref), abs. SR/kvad (n) (HPA) 0,004 Ubias Metode- og laboratorie bias,kvad (RMS bias(metoden) abs.)2 ) +( (u(cref), abs.)2) u(rw) Reproducerbarhed inden for laboratoriet : SRw, abs. Antal: 99 0,150 Kombineret usikkerhed, u c,abs. Kvad (u(rw)2+(u(bias))2 ) 0,239 U Ekspanderet kombineret usikkerhed, 2* u c,abs.(log cfu/g) 0,48 0,187

17 Mikrobiologisk usikkerhed Kunder Konservative værdier Løbende kontrol Intern kontrol i styring Præstationsprøvning i styring

18 Mikrobiologisk usikkerhed Tak for opmærksomheden Kirsten Kirkeby QA SUPERVISOR LABORATORIUM Danish Crown