PCR en test for mastitisbakterier via ydelseskontrolprøver

Transkript

1 Fra dyrkning Til teknologi PCR en test for mastitisbakterier via ydelseskontrolprøver Tema 11 Få maks. ud af din højteknologi Dansk Kvæg Kongres 24. februar 2009 Jørgen Katholm, Mejeriforeningen Side 1 / / pr-1

2 PCR Polymerase Chain Reaction Opkoncentration af DNA i prøven Kræver ikke levende bakterie Side 2 / / xxxxx

3 Før dyrkning af mastitisbakterier Prøveudtagning Ud strygning Dyrkning i timer Side 3 / / xxxxx

4 Før dyrkning af mastitisbakterier Koloni vækst hæmolyse mikroskopi Katalase test KOH test Aesculin CAMP-test Koagulase Side 4 / / xxxxx

5 Nu PCR på mastitisprøver 2 timers ekstraktion 2 timers maskinaflæsning Ct værdi eks B - streptokok Side 5 / / xxxxx

6 Fremtid Ydelseskontrolprøver Diagnose på infektion Malkning Ydelseskontrol Laboratorium Diagnose: Stafylokokkus aureus Side 6 / / xxxxx

7 Perspektiver Mulighed for udvælgelse af enkeltdyr til undersøgelse af ydelseskontrolprøver hos Eurofins (Para-tb, Salmonella, PCR). Mulighed for bestilling i dyreregistrering inden sommer tilfælde af yverbetændelse Over halvdelen milde tilfælde - nykælvere og høje celletal goldbehandlinger kræver ved lov d.d. dyrlægeudtagne mælkeprøver og påvist infektion Sanering / holdopdeling stafylokokkus aureus og B streptokokker 6% af mælkebesætninger har B-streptokokker Side 7 / / xxxxx

8 Påviste bakterier og resistensgen Stafylokokker 2 stammer Streptokokker 3 stammer E. Coli Samt 8 andre mastitis bakterier Beta lactamase - penicillin resistens gen - blaz MANGLER Gær Side 8 / / xxxxx

9 Vurdering af PCR-testen, Finland M. T. Koskinen et al. (in press) De 454 stammer fra klinisk mastitis og 149 resistensstammer (blaz gen) Andel af sand positive (Sensitivitet) 100% Andel af sand negative (Specificitet) 100% 79 prøver fra klinisk mastitis negative ved almindelig dyrkning Fundet positive ved PCR 34 prøver Side 9 / / xxxxx

10 Vurdering af PCR på ydelseskontrolprøver kontrolforening CanWest DHI (Canada) En besætning med 229 prøver 34 stafylokokkus aureus ved dyrkning heraf 32 positive på ydelseskontrol PCR samt 8 ekstra positive Godkendt til brug Ydelseskontrolprøver i Canada Ydelseskontrolprøver i Holland Side 10 / / xxxxx

11 Vurdering af PCR på ydelseskontrolprøver kontrolforening CanWest DHI (Canada) En besætning med 229 prøver 34 stafylokokkus aureus ved dyrkning heraf 32 positive på ydelseskontrol PCR samt 8 ekstra positive Godkendt til brug Ydelseskontrolprøver i Canada Til undersøgelse af kirtelprøver i Holland Side 11 / / xxxxx

12 Side 12 / / xxxxx

13 Opdelt i tre hold efter B-smitte 2007 Side 13 / / xxxxx

14 183 Ko-blandeprøver Side 14 / / xxxxx

15 181 Ydelseskontrol prøver Side 15 / / xxxxx

16 Dyrkning på 183 koprøver og PCR på 181 ydelseskontrolprøver Dyrkning Positiv Negativ Positiv PCR Negativ 6 144* Andel af sand positive 17/23 74% Andel af sand negative 144/158 91% *Ko 2583 korrekt negativ men havde B-streptokokker i to tørre kirtler Side 16 / / xxxxx

17 Dyrkning og PCR på 16 Ko-omprøver 14 kun PCR positive og 2 kun dyrknings positive Dyrkning Positiv Negativ Positiv 1** 0 PCR Negativ 1* 14*** *PCR positive ved første test. Kun 1 koloni på pladen **dyrknings positiv ved første test *** 2458 positiv PCR første test, negativ omprøve, B mastitis 14 dage senere 4 ønskede køer til omprøve kunne ikke undersøges da de var behandlet Side 17 / / xxxxx

18 Dyrkning og PCR på tankprøver (n=11) og koprøve (n=28) Dyrkning Positiv Negativ PCR Positiv 11 1* Negativ 0 27 *2458 kontrol efter behandling. Tidligere også PCR positiv og B-mastitis Side 18 / / xxxxx

19 16 januar 2009 Behandling og flytning af 24 køer Side 19 / / xxxxx

20 ko 2335 positiv B yverbetændelse 14 oktober 2007 positiv tankmælk Side 20 / / xxxxx

21 Ydelseskontrol 135 køer 2X8 Side 21 / / xxxxx

22 Besætning 2. Dyrkning på 135 koprøver og PCR på 135 ydelseskontrolprøver Dyrkning Positiv Negativ PCR Positiv 5 7 Negativ Andel af sand positive 5/5 100% Andel af sand negative 123/130 96% Side 22 / / xxxxx

23 Besætning 2. Omprøver af 12 køer 7 kun positive på PCR and 5 positive på PCR og dyrkning Dyrkning Positiv Negativ PCR Positiv 5 2 Negativ 0 5* *Ko 1855 positiv PCR og dyrkning ved første undersøgelse Side 23 / / xxxxx

24 Behandling 5 køer 10 feb Side 24 / / xxxxx

25 De næste måneder Beskrivelse af og reduktion af risiko for overslæb ved automatisk udtagne ydelseskontrolprøver Beskrivelse af forholdsregler for hygiejnisk håndtering af ydelseskontrolprøver Tilladelse fra myndighederne til at bruge ydelseskontrolprøver forud for antibiotikagoldning Side 25 / / xxxxx

26 Side 26 / / xxxxx