system da B12 7K61 B7K616 G3-3350/R08 B12 Læs markerede ændringer Revideret i februar 2013 Kundeservice: Kontakt den lokale Abbott-repræsentant, eller find landespecifikke kontaktoplysninger på www.abbottdiagnostics.com Anvisningerne i denne brugsanvisning skal følges nøje. Hvis anvisningerne ikke følges, kan testresultaternes pålidelighed ikke garanteres. Symbolforklaring Bestillingsnummer Medicinsk udstyr til in vitrodiagnostik Lotnummer Udløbsdato Opbevares ved 2-8 C. Se brugsanvisningen. Kalibrator A-F Serienummer Kontrolnummer Gummimembran Fabrikant Lav, medium, høj kontrol (L, M, H) RV-celler Prøvekopper Ekstra skruelåg Reagenslot Fare: Fare for reproduktionsskader Advarsel: Kan udløse allergisk reaktion. Indeholder natriumazid. Udvikler meget giftig gas ved kontakt med syre. Advarsel: Alvorligt lokalirriterende Globalt varenummer Produceret i Irland Se afsnittet REAGENSER for nærmere oplysninger om de enkelte reagenssymboler. 1
BETEGNELSE ARCHITECT B12 ANVENDELSE ARCHITECT B12-analysen er en intrinsic factor-kemiluminescensmikropartikelanalyse til kvantitativ bestemmelse af vitamin B12 i humant serum og plasma på ARCHITECT i System. RESUME OG ANALYSEFORKLARING Vitamin B12 (B12), der hører til corringruppen, er en kofaktor ved omdannelse af methylmalonylkoenzym-a (Co-A) til succinyl-coa. B12 er ligeledes en kofaktor ved syntesen af metionin ud fra homocystein og indgår i dannelsen af myelin og er sammen med folat nødvendig for DNA-syntese. 1,2 Efter binding til et protein kaldet intrinsic factor, der produceres i maven, absorberes B12 fra kosten. Årsagerne til vitamin B12-mangel kan opdeles i tre kategorier: ernæringsbetinget mangel, malabsorptionssyndromer og andre gastrointestinale årsager. B12-mangel kan forårsage megaloblastær anæmi (MA), skader på nervesystemet og degeneration af rygmarven. Selv i mild grad forårsager B12-mangel skader på myelinskeden, der omgiver og beskytter nerverne, hvilket kan føre til perifer neuropati. De nerveskader, som B12-mangel forårsager, kan blive permanent invaliderende, hvis den underliggende lidelse ikke behandles. Mennesker med intrinsic factordefekter, som ikke bliver behandlet, udvikler efterhånden en megaloblastær anæmi i form af perniciøs anæmi (PA). 2 Forholdet mellem B12-niveauet og megaloblastær anæmi står ikke altid klart, eftersom nogle patienter med megaloblastær anæmi har normalt B12- niveau, mens andre med B12-mangel ikke lider af megaloblastær anæmi. På trods af sådanne komplikationer lider patienter med megaloblastær anæmi (f.eks. forhøjet middelcellevolumen (MCV)) ofte af B12- eller folatmangel i serum. 2,3 Den reelle frekvens af B12-mangel i befolkningen som helhed er ukendt, men den stiger med alderen. I et studie 4 viste laboratorieundersøgelser, at 15% af alle voksne over 65 år lider af B12-mangel. Et B12-niveau i serum, der ligger under referenceområdet, kan være tegn på, at B12-depoterne i vævet er ved at være udtømt. Et B12-niveau i den lave ende af referenceområdet er imidlertid ikke ensbetydende med, at B12-niveauet er i orden, og patienter med symptomer bør udredes ved at teste for holotranscobalamin, 5 homocystein og methylmalonsyre. 6,7 Lavt B12-niveau i serum ses bl.a. hos personer med jernmangel, under normal graviditet tæt på fødselsterminen, hos vegetarer, ved partiel gastrektomi/skade på ileum, cøliaki, orale kontraceptiva, ved parasitær konkurrence, pancreasinsufficiens, epilepsiterapi og i fremskreden alder. 2,8-10,11 Lidelser, der forbindes med forhøjet B12-niveau i serum, er nyreinsufficiens, leversygdom og myeloproliferative sygdomme. 8,12 ANALYSEPRINCIP ARCHITECT B12-analysen er en totrinsanalyse med automatisk prøveforbehandling til bestemmelse af forekomsten af B12 i humant serum og plasma og er baseret på teknologien for kemiluminescensmikropartikel immunanalyser (CMIA) med fleksible analyseprotokoller, kaldet Chemiflex. Prøven, forbehandlingsreagens 1, forbehandlingsreagens 2 og forbehandlingsreagens 3 blandes. En mængde af den forbehandlede prøve aspireres og overføres til en ny RV-celle. Den forbehandlede prøve, analysefortyndings opløsningen og paramagnetiske mikropartikler, der er coatet med intrinsic factor, blandes. Den mængde B12, der findes i prøven, binder til mikropartiklerne, som er coatet med intrinsic factor. I andet trin efter udført vask tilsættes acridinmærket B12-konjugat. Derefter tilsættes prætrigger- og triggeropløsning i reaktionsblandingen. Den deraf følgende kemiluminescerende reaktion måles i form af relative lysenheder (RLU). Mængden af B12 i prøven og mængden af RLU, som optikken i ARCHITECT i System påviser, er omvendt proportional. Se kapitel 3 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om systemet og analyseteknologien. REAGENSER Reagenssæt, 100/500 test BEMÆRK: Nogle reagenssæt kan ikke fås i alle lande eller til anvendelse på alle ARCHITECT i Systems. Kontakt venligst Abbotts ordrekontor for nærmere oplysninger. ARCHITECT B12 Reagent Kit (7K61) 1 flaske (6,6 ml pr. flaske til 100 test/27,0 ml pr. flaske til 500 test) mikropartikler, der er coatet med intrinsic factor (svin), i borat buffer med okseproteinstabilisatorer. Minimumskoncentration: 0,1% tørstof. Konserverings middel: antimikrobielle midler. 1 flaske (5,9 ml pr. flaske til 100 test/26,3 ml pr. flaske til 500 test) acridinmærket B12-konjugat i MES-buffer. Minimumskoncentration: 0,7 ng/ml. Konserveringsmiddel: ProClin. 1 flaske (10,0 ml pr. flaske til 100 test/51,0 ml pr. flaske til 500 test) B12-analysefortyndingsopløsning indeholdende boratbuffer med EDTA. Konserveringsmiddel: antimikrobielle midler. 1 flaske (27,0 ml pr. flaske til 100 test/50,4 ml pr. flaske til 500 test) B12-forbehandlingsreagens 1 indeholdende 1,0 N natriumhydroxid med 0,005% kaliumcyanid. 1 flaske (5,5 ml pr. flaske til 100 test/25,9 ml pr. flaske til 500 test) B12-forbehandlingsreagens 2 indeholdende alfa-monothioglycerin og EDTA. 1 flaske (5,5 ml pr. flaske til 100 test/25,9 ml pr. flaske til 500 test) B12-forbehandlingsreagens 3 indeholdende cobinamiddicyanid i boratbuffer med protein stabilisatorer (fjerkræ). Konserveringsmiddel: natriumazid. Analysefortyndingsopløsning ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent (7D82-50) 1 flaske (100 ml) ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent indeholdende fosfatbufferopløsning. Konserveringsmiddel: antimikrobielt middel. Andre reagenser ARCHITECT i Pre-Trigger Solution Prætriggeropløsning indeholdende 1,32% (w/v) hydrogenperoxid. ARCHITECT i Trigger Solution Triggeropløsning indeholdende 0,35 N natriumhydroxid. ARCHITECT i Wash Buffer Vaskebuffer indeholdende fosfatbufferopløsning. Konserveringsmidler: antimikrobielle midler. VIGTIGE FORHOLDSREGLER Til in vitro-diagnostisk brug Anvisningerne i denne brugsanvisning skal følges nøje. Hvis anvisningerne ikke følges, kan testresultaternes pålidelighed ikke garanteres. Sikkerhedsforanstaltninger VIGTIGT: Brug af dette produkt kræver håndtering af humane prøver. Det anbefales, at alt materiale af human oprindelse betragtes som potentielt smittefarligt og håndteres i overensstemmelse med det amerikanske arbejdsmiljø institut OSHA's standard Bloodborne Pathogens. 13 Biosafety Level 2 14 eller andre gældende sikkerhedsforanstaltninger for biologisk materiale 15,16 bør anvendes ved håndtering af materiale, der indeholder eller mistænkes for at indeholde smittefarlige stoffer. 2
Følgende advarsler og forholdsregler gælder for disse komponenter: Mikropartikler Analysefortyndingsopløsning Forbehandlingsreagens 3 FARE: Indeholder natriumborat. H360 Mistænkt for at skade forplantningsevnen eller det ufødte barn. P201 Indhent særlige anvisninger før brug. P202 Anvend ikke produktet, før alle advarsler er læst og forstået. P281 Anvend de påkrævede personlige værnemidler. P308+P313 VED eksponering eller mistanke om eksponering: Søg lægehjælp. Følgende advarsler og foranstaltninger gælder for denne komponent: Forbehandlingsreagens 2 ADVARSEL: Indeholder monotioglycerin. H315 Forårsager hudirritation. H319 Forårsager alvorlig øjenirritation. P264 Vask hænderne grundigt efter brug. P280 Bær beskyttelseshandsker/ beskyttelsestøj/øjenbeskyttelse. P305+P351 +P338 P337+P313 P302+P352 P332+P313 P362 VED KONTAKT MED ØJNENE: Skyl forsigtigt med vand i flere minutter. Fjern eventuelle kontaktlinser, hvis dette kan gøres let. Fortsæt skylning. Ved vedvarende øjenirritation: Søg lægehjælp. VED KONTAKT MED HUDEN: Vask med rigeligt vand. Ved hudirritation eller udslæt: Søg lægehjælp. Forurenet tøj tages af og vaskes, før det bruges igen. Følgende advarsler og foranstaltninger gælder for denne komponent: Forbehandlingsreagens 1 FARE: Indeholder natriumhydroxid. H314 Forårsager svære forbrændinger af huden og øjenskader. H290 Kan ætse metaller. P234 Opbevares kun i den originale beholder. P260 Indånd ikke tåge/damp/spray. P264 Vask hænderne grundigt efter brug. P280 Bær beskyttelseshandsker/ beskyttelsestøj/øjenbeskyttelse. P301+P330 I TILFÆLDE AF INDTAGELSE: Skyl +P331 munden. Fremkald IKKE opkastning. P304+P340 VED INDÅNDING: Flyt personen til et sted med frisk luft og sørg for, at vedkommende hviler i en stilling, som letter vejrtrækningen. P305+P351 +P338 P303+P361 +P353 P363 P310 P390 VED KONTAKT MED ØJNENE: Skyl forsigtigt med vand i flere minutter. Fjern eventuelle kontaktlinser, hvis dette kan gøres let. Fortsæt skylning. VED KONTAKT MED HUDEN (eller håret): Tilsmudset tøj tages straks af/ fjernes. Skyl/brus huden med vand. Tilsmudset tøj skal vaskes, før det kan anvendes igen. Ring omgående til en GIFTINFORMATION eller en læge. Absorber udslip for at undgå materielskade. Følgende advarsler og foranstaltninger gælder for denne komponent: Konjugat ADVARSEL: Indeholder methylisothiazoloner. H317 Kan forårsage en allergisk hudreaktion. P261 Undgå indånding af tåge/damp/spray. P272 Tilsmudset arbejdstøj bør ikke fjernes fra arbejdspladsen. P280 Bær beskyttelseshandsker/ beskyttelsestøj/øjenbeskyttelse. P302+P352 VED KONTAKT MED HUDEN: Vask med rigeligt vand. P333+P313 Ved hudirritation eller udslæt: Søg lægehjælp. P363 Tilsmudset tøj skal vaskes, før det kan anvendes igen. Forbehandlingsreagens 3 indeholder natriumazid. Udvikler meget giftig gas ved kontakt med syre. Materialet og dets beholder skal bortskaffes på en Sikkerhedsdatablade er til rådighed på www.abbottdiagnostics.com eller kan fås ved henvendelse til kundeservice. Se kapitel 8 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om sikker bortskaffelse af natriumazid og en detaljeret beskrivelse af sikkerhedsforanstaltningerne ved brug. 3
Forholdsregler ved anvendelse Anvend ikke reagenssæt, hvor udløbsdatoen er overskredet. Bland ikke reagenser med andre reagenser fra samme eller andre reagenssæt. Før ARCHITECT B12-reagenssættet placeres i systemet første gang, skal flasken med mikropartikler blandes grundigt for at få mikropartikler, som har bundfældet sig under transporten, til at resuspendere. For anvisninger vedrørende blanding af mikropartikler henvises til afsnittet PROCEDURE, Analyseprocedure i denne brugsanvisning. Gummimembran SKAL anvendes for at undgå fordampning og kontaminering og for at sikre reagensernes holdbarhed. Hvis ikke gummimembran anvendes som anført i denne brugsanvisning, kan testresultaternes pålidelighed ikke garanteres. Hvis B12-forbehandlingsreagens 1 udsættes for længerevarende kontakt med luft, kan dette nedsætte ydeevnen. Brug rene handsker for at undgå kontaminering, når der sættes gummimembran på en åben reagensflaske. Når den åbne reagensflaske er forsynet med en gummimembran, må flasken ikke vendes, da dette vil medføre udsivning af reagens, hvilket vil kunne have indflydelse på testresultaterne. Med tiden vil tilbagebleven væske kunne tørre fast på gummimembranen. Der vil typisk være tale om indtørrede salte, der ikke har nogen betydning for analysen. Se kapitel 7 i ARCHITECT-brugermanualen for en nærmere beskrivelse af forholdsreglerne ved betjening af systemet. Opbevaring ARCHITECT B12-reagenssættet skal opbevares ved 2-8 C i oprejst stilling og kan anvendes, straks efter at det er fjernet fra køl (2-8 C). Reagenserne er holdbare indtil udløbsdatoen, hvis de opbevares og håndteres efter forskrifterne. ARCHITECT B12-reagenssættet kan opbevares i ARCHITECT i System i højst 30 dage, hvorefter det skal kasseres. Se kapitel 5 i ARCHITECTbrugermanualen for oplysninger om styring af reagensholdbarhed i systemet. Reagenserne kan opbevares i eller uden for ARCHITECT i System. Hvis reagenserne fjernes fra systemet, bør de opbevares oprejst ved 2-8 C (med gummimembran og nyt skruelåg). Det anbefales i så fald at placere dem i de originale bakker og æsker, hvori de står korrekt. Hvis flasken med mikropartikler ikke står oprejst (forsynet med gummimembran) på køl uden for systemet, skal reagenssættet bortskaffes. Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om udtagning af prøver. Indikation af reagenshenfald Hvis en kontrolværdi ligger uden for det specificerede område, kan dette være et tegn på reagenshenfald eller procedurefejl. Tilhørende test resultater er ugyldige, og prøverne skal testes igen. Rekalibrering kan være påkrævet. Se kapitel 10 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om fejlfinding. INSTRUMENTPROCEDURE ARCHITECT B12-analysefilen skal installeres på ARCHITECT i System fra en ARCHITECT i Assay CD-ROM, inden analysen udføres. Se kapitel 2 i ARCHITECT-brugermanualen for nærmere oplysninger om installation af analysefil samt om visning og ændring af analyseparametre. Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om udskrivning af analyseparametre. Se ARCHITECT-brugermanualen for en detaljeret beskrivelse af systemprocedurer. Standardresultatenheden for ARCHITECT B12-analysen er pg/ml. Det er muligt at vælge en anden resultatenhed, pmol/l. Dette gøres ved at ændre analyseparametret Result Concentration Units til pmol/l. Systemet benytter omregningsfaktor 0,7378. PRØVETAGNING OG KLARGØRING Følgende prøverørstyper blev verificeret til anvendelse med ARCHITECT B12-analysen: Glas Plastik Serum Serum Serumseparator Litiumheparinplasmaseparator Natriumheparin Dikalium-EDTA ARCHITECT i System kontrollerer ikke prøvetypen. Det er brugerens opgave at kontrollere, at den korrekte prøvetype anvendes til ARCHITECT B12-analysen. Forhod vedrørende prøvemateriale Anvend ikke prøver, der er: varmeinaktiverede puljede hæmolyserede tydeligt mikrobielt kontaminerede Ydeevnen er ikke fastlagt på baggrund af andre kropsvæsker end humant serum og plasma. For at opnå de mest præcise resultater bør serum- og plasmaprøver være fri for fibrin, røde blodlegemer og andre udfældninger. Serumprøver udtaget fra patienter i antikoagulant eller trombolytisk behandling kan indeholde fibrin på grund af ufuldstændig koagulation. Vær forsigtig ved håndtering af patientprøver for at undgå krydskontaminering. Det anbefales at bruge engangspipetter eller -pipettespidser. Undersøg alle prøver for bobler for at få de bedst mulige resultater. Fjern alle bobler med en rørepind, inden analysen påbegyndes. Anvend en ny rørepind til hver prøve for at undgå krydskontaminering. Klargøring Følg fabrikantens brugervejledning for serum- og plasmaprøvetagningsrør. Passiv separation ved henstand er ikke tilstrækkelig til prøveforberedelse. Bland optøede prøver grundigt ved at vortexe dem ved lav hastighed eller ved at vende dem 10 gange. Kontrollér prøverne visuelt. Hvis en lagdeling kan konstateres, skal prøverne vendes yderligere, indtil de er synligt homogene. For at sikre overensstemmende resultater skal prøver overføres til et centrifugerør og centrifugeres ved >10.000 RCF (relativ centrifugalkraft) i 10 minutter, inden analysen påbegyndes, hvis de indeholder fibrin, røde blodlegemer eller andre udfældninger de har været nedfrosset og optøet. Centrifugerede prøver med et lipidlag i overfladen skal overføres til en prøvekop eller et sekundært rør. Sørg for, at kun den klare del af prøven og ikke det lipæmiske materiale overføres. Overfør den klare del af prøven til en prøvekop eller et sekundært rør ved testning. Opbevaring Prøverne skal opbevares enten sammen med eller adskilt fra koaglet, de røde blodlegemer eller separatorgelen i op til 3 dage ved stuetemperatur eller op til 7 dage ved 2-8 C. Hvis testningen først udføres efter mere end 3 dage for prøver, der opbevares ved stuetemperatur, eller efter mere end 7 dage for prøver, der opbevares ved 2-8 C, skal serum eller plasma separeres fra koaglet, de røde blodlegemer eller separatorgelen og opbevares ved -20 C eller koldere. Undgå mere end tre nedfrysnings-/optøningscyklusser. Forsendelse Det anbefales at fjerne prøverne fra koaglet, gelen eller de røde blodlegemer inden forsendelse. Ved forsendelse skal prøverne pakkes og mærkes i overensstemmelse med gældende nationale og internationale regler for transport af kliniske prøver og smittefarlige stoffer. Prøverne kan forsendes frosset (på tøris) ved -20 C eller koldere. Der bør ikke afviges fra ovennævnte opbevaringsregler. 4
PROCEDURE Medfølgende produkter 7K61 ARCHITECT B12 Reagent Kit Nødvendigt tilbehør og udstyr System ARCHITECT B12-analysefilen fra: System e-assay CD-ROM, der findes på www.abbottdiagnostics.com System Assay CD-ROM 7K61-01 ARCHITECT B12 Calibrators 7K61-10 ARCHITECT B12 Controls 7D82-50 ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent Pipetter eller pipettespidser (valgfrit) Se kapitel 9 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om nødvendigt udstyr til brug ved vedligeholdelsesprocedurer. Analyseprocedure Før ARCHITECT B12-reagenssættet placeres i systemet første gang, skal flasken med mikropartikler blandes grundigt for at få mikropartikler, som har bundfældet sig under transporten, til at resuspendere. Når mikropartiklerne er blevet placeret i systemet første gang, er der ikke behov for yderligere blanding. Vend flasken med mikropartikler 30 gange. Kontrollér, at mikropartiklerne er resuspenderet i flasken. Hvis der stadig sidder mikropartikler fast i flasken, skal flasken vendes, indtil mikropartiklerne er helt resuspenderet. Skru låget af, når mikropartiklerne er resuspenderet, og kassér det. Tag en gummimembran ud af posen. Brug rene handsker. Sæt forsigtigt gummimembranen fast på flaskeåbningen. Hvis mikropartiklerne ikke kan resuspenderes, MÅ DE IKKE ANVENDES. Kontakt Abbotts kundeservice. Anbring ARCHITECT B12-reagenssættet i ARCHITECT i System. Kontrollér, at alle nødvendige reagenser forefindes. Kontrollér, at alle reagensflasker er forsynet med en gummimembran. Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om isætning af reagenser. Bestil evt. kalibrering. Se kapitel 6 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om bestilling af kalibrering. Bestil testene. Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om bestilling af patientprøver, kalibratorer og kontroller samt generelle betjeningsprocedurer. Prøvekoppens minimumsvolumen beregnes af systemet og fremgår af bestillingsudskriften (Order List Report). Der må højst udføres 10 gentagelser fra samme prøvekop. For at reducere følgen af fordampning skal det kontrolleres, at der er nok prøvemateriale i prøvekoppen, inden testen køres. Hasteprøver: 87 µl til den første B12-test plus 37 µl til hver yderligere B12-test fra samme prøvekop 3 timer i systemet: 150 µl til den første B12-test plus 37 µl til hver yderligere B12-test fra samme prøvekop > 3 timer i systemet: Udskift med en frisk prøve (patientprøver, kontroller og kalibratorer). Ved brug af primære og sekundære rør bør prøvemåler anvendes for at sikre, at der er nok prøvemateriale. Klargør kalibratorer og kontroller. Bland ARCHITECT B12-kalibratorer og -kontroller ved at vende dem forsigtigt inden anvendelse. For at opnå de nødvendige mængder af ARCHITECT B12- kalibratorer og -kontroller holdes flaskerne lodret, mens 3 dråber af hver kalibrator eller 3 dråber af hver kontrol dispenseres ned i de respektive prøvekopper. Isæt prøverne. Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om isætning af prøver. Tryk på RUN. 5 For at opnå optimal ydeevne er det vigtigt at følge procedurerne for rutinevedligeholdelse i kapitel 9 i ARCHITECT-brugermanualen. Udfør vedligeholdelsesprocedurerne hyppigere, hvis det kræves af laboratoriets procedurer. Prøvefortyndingsprocedurer Prøver med en B12-værdi, der overstiger 2000 pg/ml (1476 pmol/l), markeres med koden >2000, hvis der arbejdes med pg/ml ( >1476, hvis der arbejdes med pmol/l), og kan fortyndes ved hjælp af enten den automatiske eller den manuelle fortyndingsprocedure. Hvis den automatiske fortyndingsprocedure anvendes, udfører systemet en 1:3-fortynding af prøven. Systemet anvender denne fortyndingsfaktor til automatisk at beregne prøvens koncentration før fortynding. Dette resultat vil blive afgivet. Manuelle fortyndinger bør foretages som følger: Den anbefalede fortynding til B12 er 1:4. Til en 1:4-fortynding tilsættes 100 μl patientprøve til 300 μl ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent (7D82-50). Den anbefalede fortynding for prøver, der gentagne gange (2 eller flere) genererer fejlkoden 3350 Unable to process test-aspiration error for (Sample Pipettor) at (RV 24), er 1:2. Til en 1:2-fortynding tilsættes 100 μl patientprøve til 100 μl ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent (7D82-50). Det er brugerens opgave at indtaste fortyndingsfaktoren på skærmbilledet til bestilling af patientprøver eller kontroller. Systemet anvender denne fortyndingsfaktor til automatisk at beregne prøvens koncentration før fortynding. Dette resultat vil blive afgivet. Resultatet før anvendelse af fortyndingsfaktor skal være over 83 pg/ml (61 pmol/l). Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om bestilling af fortyndinger. Kalibrering For at udføre en ARCHITECT B12-kalibrering skal kalibratorerne A-F testes i dobbeltbestemmelse. Kalibratorer bør håndteres som hasteprøver. Kalibreringsområde: 0-2000 pg/ml (0-1476 pmol/l). En enkelt prøve af hvert kontrolniveau skal testes for at evaluere analysens kalibrering. Bestil kontroller som beskrevet ovenfor. Kontrollér, at kontrolværdierne ligger inden for de koncentrationsområder, der er anført i brugsanvisningen. Når en ARCHITECT B12-kalibrering er godkendt og gemt, kan alle efterfølgende prøver testes uden yderligere kalibrering, medmindre: Et reagenssæt med et nyt lotnummer tages i brug. Kontrollerne ligger uden for det specificerede område. PROCEDURER FOR KVALITETSKONTROL For at overholde kontrolkravene til ARCHITECT B12-analysen bør alle kontrolniveauerne testes i enkeltbestemmelse 1 gang i døgnet på kørselsdage. Der kan testes yderligere kontroller i henhold til lokale og/ eller nationale forskrifter, akkrediteringskrav og laboratoriets kvalitetskontrolprogram. Kontrolværdierne skal ligge inden for de områder, der er anført i brugsanvisningen til kontrollerne. Hvis et kontrolresultat ligger uden for det angivne område, skal alle testresultater, der er genereret siden de sidste acceptable kontrolresultater, evalueres for at fastslå, om testresultaterne er påvirket i negativ retning. Negativt påvirkede testresultater er ugyldige, og de pågældende prøver skal testes igen. Se kapitel 10 i ARCHITECTbrugermanualen for oplysninger om fejlfinding. Verifikation af analysens dokumenterede egenskaber Se appendiks B i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om fremgangsmåde til verifikation af analysens dokumenterede egenskaber. ARCHITECT B12-analysen tilhører metodegruppe 1. RESULTATER Til beregning af kalibreringskurven anvender ARCHITECT B12-analysen en logistisk 4-parameterdatareduktionsmetode (4PLC, Y-vægtet). Andre resultatenheder Standardresultatenheden for ARCHITECT B12-analysen er pg/ml. Hvis resultatenheden pmol/l vælges, benytter systemet omregningsfaktor 0,7378. Omregningsformel: (Koncentration i pg/ml) x (0,7378) = pmol/l (Koncentration i pmol/l) / (0,7378) = pg/ml
Flag Nogle resultater har meddelelser i flagfeltet. Se kapitel 5 i ARCHITECTbrugermanualen for en beskrivelse af de flag, der kan forekomme i dette felt. PROCEDUREBEGRÆNSNINGER Til diagnostisk brug bør resultaterne anvendes sammen med andre data, som f.eks. symptomer, resultater fra andre analyser, kliniske indtryk, osv. Diagnosen B12-mangel kan ikke udelukkende baseres på B12-niveauet i serum eller plasma. For patienter med hæmatologiske eller neurologiske symptomer anbefales det, at der foretages yderligere test for folinsyre, blokerende antistoffer mod intrinsic factor, holotranscobalamin, 5 homocystein og/eller methylmalonsyre. 6,7 Hvis B12-resultaterne ikke stemmer overens med den kliniske udredning, anbefales det at foretage yderligere test for at konfirmere resultatet. Det er påvist, at hæmolyse udviser negativ interferens i denne B12- analyse. Hæmolyserede prøver bør ikke analyseres. Prøver med høj proteinkoncentration kan gentagne gange (2 eller flere) generere fejlkoden 3350 Unable to process test-aspiration error for (Sample Pipettor) at (RV 24) og bør ved kvantitering fortyndes 1:2 med den automatiserede eller manuelle fortyndingsprocedure. Heterofile antistoffer og reumafaktor (RF) i humant serum kan reagere med reagensimmunglobuliner og dermed interferere med in vitro-immunanalyser. 17 Patienter, som ofte er i kontakt med dyr eller serumprodukter fra dyr, kan have tendens til denne interferens, og afvigende værdier kan ses. Yderligere oplysninger kan være påkrævet til diagnosticering. Analysen er beregnet til test af humant serum og plasma. Prøver, der er testet i andre matricer, giver muligvis ikke præcise resultater. Se afsnittet PRØVETAGNING OG KLARGØRING i denne brugsanvisning for oplysninger om prøvebegrænsninger. FORVENTEDE VÆRDIER Normale B12-værdier Det anbefales, at det enkelte laboratorium fastsætter sit eget referenceområde, som, afhængigt af geografiske, patientrelaterede, ernærings- og miljømæssige faktorer, kan være unikt for den pågældende population. Der blev foretaget et studie baseret på retningslinjerne i Clinical and Laboratory Standards Institutes (CLSI) dokument C28-A2. 18 Serumprøver fra 143 individer med normale middelcellevolumen-, homocystein- og folatværdier blev analyseret for B12 med ARCHITECT B12-analysen. B12-koncentrationsområdet for denne population var 141 til > 1218 pg/ ml (104 til > 899 pmol/l) med en middelværdi på 407 pg/ml (300 pmol/l). De centrale 95% af prøvepopulationen er defineret nedenfor: Forventet område 187-883 pg/ml (138-652 pmol/l) B12-gråzoneresultater Niveauer over 300 eller 400 pg/ml (221 eller 295 pmol/l) forbindes sjældent med hæmatologiske eller neurologiske sygdomme forårsaget af B12- mangel. Yderligere testning anbefales for symptomatiske patienter med B12-niveauer mellem 100 og 300 pg/ml (74 og 221 pmol/l) (hæmatologiske abnormiteter) og mellem 100 og 400 pg/ml (74 og 295 pmol/l) (neurologiske abnormiteter). 6,7 YDEEVNE Analyseresultater fra de enkelte laboratorier kan afvige fra dataene i følgende studier. Præcision ARCHITECT B12-analysen er udviklet til at have en total CV på 11% for koncentrationer, der svarer til kontrollerne Low, Medium og High (lav, medium, høj). Der blev gennemført et 20 dages præcisionsstudie af ARCHITECT B12-analysen baseret på retningslinjerne i CLSI's dokument EP5-A2. 19 Testningen blev gennemført hos Abbott Laboratories med tre ARCHITECT B12-analysereagenslot, to kalibratorlot, et kontrollot og to instrumenter. Fire niveauer af kontroller og paneler blev analyseret i tre gentagelser to gange om dagen i 20 dage. Dataene er vist i følgende tabel. Instrument Prøve n Middelværdi (pg/ml) Intraseriel kørsel Intern laboratoriepræcision (total) SD %CV SD %CV 1 Serumpanel 360 262 12,6 4,8 16,3 6,2 Lav kontrol 354 246 13,8 5,6 16,7 6,8 Mellemkontrol 355 424 14,3 3,4 16,8 4,0 Høj kontrol 359 890 36,0 4,0 38,9 4,4 2 Serumpanel 357 248 11,6 4,7 13,3 5,4 Lav kontrol 356 241 10,4 4,3 12,9 5,4 Mellemkontrol 352 408 13,3 3,3 15,5 3,8 Høj kontrol 355 885 23,9 2,7 29,7 3,4 Nøjagtighed i henhold til Verdenssundhedsorganisationen (WHO) Der blev gennemført et studie for at evaluere præcisionen af ARCHITECT B12-analysen ved hjælp af Verdenssundhedsorganisationens internationale standard 03/178 for B12. Analysen havde et udsving på -3,6% i forhold til målværdien på 480 pg/ml (354 pmol/l). Sensitivitet Sensitivitet defineres som blindværdigrænsen, detektionsgrænsen og kvantiterings grænsen for ARCHITECT B12-analysen. Analysen er udviklet til at have en kvantiteringsgrænse på 150 pg/ml ( 111 pmol/l). Et studie baseret på retnings linjerne i CLSI's dokument EP17-A 20 viste en blindværdigrænse på 83 pg/ ml (61 pmol/l), en detektionsgrænse på 125 pg/ml (92 pmol/l) og en kvantiterings grænse på 125 pg/ ml (92 pmol/l). Specificitet ARCHITECT B12-analysen er udviklet til at have en interferens (differens), der er mindre end analysens detektionsgrænse med cobinamid, som er et B12-analog stof. ARCHITECT B12-analysens specificitet blev bestemt ud fra undersøgelser af kryds reaktivitet med cobinamid. En human serum prøve på cirka 230 pg/ml (168 pmol/l) blev tilsat cobinamid med en koncentration på 9000 pg/ml, og den resulterende interferens blev målt til 4 pg/ml (3 pmol/l). Interferens Ved nedenstående koncentrationer gav bilirubin (konjugeret og ikkekonjugeret), total protein og triglycerider mindre end 10% interferens med ARCHITECT B12-analysen for lave prøver (koncentrationsområde: 150 pg/ml til 250 pg/ml (111 pmol/l til 184 pmol/l)) og høje prøver (koncentrationsområde: > 500 pg/ml (> 369 pmol/l)): Bilirubin < 25,1 mg/dl Total protein < 12 g/dl Triglycerider < 3325 mg/dl Hæmolyserede prøver bør ikke analyseres. Se afsnittet PROCEDUREBEGRÆNSNINGER i denne brugsanvisning. 6
Korrelationsdata Der blev gennemført et studie baseret på retningslinjerne i CLSI's dokument EP9-A2. 21 329 serumprøver blev testet for at bestemme B12 med ARCHITECT B12-analysen og et kommercielt tilgængeligt diagnostisk sæt. Prøvetestningen er vist i nedenstående tabel.* Abbott ARCHITECT B12 vs. AxSYM B12 Korrelationskoefficient Metode Antal prøver Skæring Hældning Lineær regression 329-2,05 1,01 0,99 ved mindste kvadraters metode Lineær Passing- 329 21,96 0,95 0,99 Bablok-regression 22 I denne evaluering lå de testede serumprøver i området 113 til 2769 pg/ ml (83 til 2043 pmol/l) med ARCHITECT B12-analysen og fra 93,5 til 2655,8 pg/ml (69,1 til 1959,5 pmol/l) med sammenligningsanalysen. * Repræsentative data. Resultater på de enkelte laboratorier kan afvige fra disse data. BIBLIOGRAFI 1. Lee DSC, Griffiths BW. Human Serum Vitamin B12 Assay Methods - A Review. Clin Biochem 1985; 18:261-6. 2. Chararin I. Megaloblastic Anemia, Cobalamin and Folate. J Clin Pathol 1987; 40:978-84. 3. Beuerlein FJ. Testing Strategies for Anemias. Lab Mgmnt 1988; Dec:23-9. 4. Pennypacker LC, Allen RH, Kelly JP et al. High Prevalence of Cobalamin Deficiency in Elderly Outpatients. J Am Geriatr Soc 1992;40:1197 204. 5. Obeid R, Herrmann W. Holotranscobalamin in laboratory diagnosis of cobalamin deficiency compared to total cobalamin and methylmalonic acid. Clin Chem Lab Med 2007; 45(12):1746-50. 6. Klee GC. Cobalamin and Folate Evaluation: Measurement of Methylmalonic Acid and Homocysteine vs. Vitamin B12 and Folate. Clin Chem 46; 2000:1277-83. 7. Snow CF. Laboratory Diagnosis of Vitamin B12 and Folate Deficiency: A Guide for the Primary Care Physician. Arch Intern Med. 1999; 159:1289-98. 8. Beck WS. Biological and Medical Aspects of Vitamin B12. In: Dolphin D, editor. B12 Volume 2, Biochemistry and Medicine. New York: Wiley Interscience, 1982. 9. Carethers M. Diagnosing Vitamin B12 Deficiency, A Common Geriatric Disorder. Geriatrics 1988; 43(3):89-112. 10. Herbert V. Five Possible Causes of All Nutrient Deficiency: Illustrated by Deficiencies of Vitamin B12 and Folic Acid. Am J Clin Nutr 1973; 26:77-86. 11. Dahele A, Ghosh S. Vitamin B12 Deficiency in Untreated Celiac Disease. Am J Gastroenterol. 2001; 96:745-50. 12. Pratt JJ, Woldring MG. Radioassay of Vitamin B12 and Other Corrinoids. Methods Enzymol 1982; 84:369-406. 13. US Department of Labor, Occupational Safety and Health Administration, 29 CFR Part 1910.1030, Bloodborne pathogens. 14. US Department of Health and Human Services. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. 5th ed. Washington, DC: US Government Printing Office; December 2009. 15. World Health Organization. Laboratory Biosafety Manual. 3rd ed. Geneva: World Health Organization; 2004. 16. Clinical and Laboratory Standards Institute. Protection of Laboratory Workers from Occupationally Acquired Infections: Approved Guideline Third Edition. CLSI Document M29-A3. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2005. 17. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988;34:27-33. 18. Clinical and Laboratory Standards Institute. How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline - Second Edition. CLSI Document C28-A2. Wayne, PA: CLSI, 2000. 19. Clinical and Laboratory Standards Institute. Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline-Second Edition. CLSI document EP5-A2. Wayne, PA: CLSI, 2004. 20. Clinical and Laboratory Standards Institute. Protocols for Determination of Limits of Detection and Limits of Quantitation: Approved Guideline. CLSI Document EP17-A. Wayne, PA:, CLSI, 2004. 21. Clinical and Laboratory Standards Institute. Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples; Approved Guideline- Second Edition. CLSI document EP9-A2. Wayne, PA: CLSI, 2002. 22. Passing H, Bablok W. A New Biometrical Procedure for Testing the Equality of Measurements from Two Different Analytical Methods. J Clin Chem Clin Biochem. 1983; 21:709-20. ARCHITECT, AxSYM og Chemiflex er varemærker tilhørende Abbott Laboratories i visse jurisdiktioner. ProClin tilhører den respektive ejer. Abbott Ireland Diagnostics Division Lisnamuck, Longford Co. Longford Ireland + 353-43-3331000 Februar 2013 2006, 2013 Abbott Laboratories 7