Directigen EZ RSV Til direkte påvisning af respiratorisk syncytialvirus (RSV) L009004JAA 2008/12 Dansk TILSIGTET BRUG Directigen EZ RSV test er et hurtigt kromatografisk immunoanalyse til direkte og kvalitativ påvisning af respiratorisk syncytialvirus (RSV) antigen i nasopharyngeale skylninger, nasopharyngeale aspirater, nasopharyngeale podepinde og nasopharyngeale podepinde/skylninger fra patienter med formodet viral luftvejsinfektion. Denne test er beregnet til diagnostisk brug in vitro for at hjælpe med at stille diagnosen af Respiratorisk Syncytialvirus (RSV) infektioner hos nyfødte og børn under 20 år. Det anbefales, at de negative testresultater bekræftes med celledyrkning. RESUMÉ OG FORKLARING Virale luftvejsinfektioner er ansvarlige for udbredte sygdomme. Respiratorisk syncytialvirus (RSV) er en førende årsag til infektioner i de nedre luftveje hos små børn i den kolde årstid. 1 RSV har også været impliceret i alvorlige luftvejsinfektioner hos ældre og personer med nedsat immunforsvar. 2,3 På det seneste er RSV blevet identificeret som værende årsag til 20 % af influenzalignende sygdom hos mennesker på 15 44 år. 4 Traditionelle metoder til påvisning af luftvejsvira har omfattet celledyrkning og direkte fluorescensantistof (DFA). 5-7 På det seneste har PCR vist klinisk nytte til påvisning af luftvejsvira inklusiv RSV. 8 Enzymimmunoanalyse (EIA) og hurtige manuelle systemer er tilgængelige for specifikke vira som f.eks. Influenza A/B og RSV. Hurtige test giver mulighed for en hurtig diagnose, således at patienter kan blive isoleret og behandlet relevant for at forebygge nosokomiel spredning af infektioner til andre patienter med svækket hjerte-, åndedræts- eller immunfunktioner. 9 Desuden hjælper hurtige tests med til valg af relevant antiviral behandling. De mest almindelige præparater, der tages til RSV testning omfatter nasopharyngeale skylninger, nasopharyngeale aspirater og nasopharyngeale podepinde. Nasopharyngeale skylninger og aspirater har vist sig at være bedre end podepinde, og er de foretrukne præparater. 10 Directigen EZ RSV antigen påvisningstest er en kromatografisk analyse, der kan påvise RSV antigener, som er ekstraheret fra forskellige præparater hos symptomatiske patienter. Hastigheden og arbejdsgangen for Directigen EZ RSV testen gør den anvendelig som en STAT RSV antigenpåvisningstest, der giver mulighed for hurtig og relevant information til hjælp ved antiviral intervention og andre kliniske afgørelser. PROCEDURENS PRINCIPPER Directigen EZ RSV testen er en kromatografisk analyse, der kvalitativt kan påvise RSV antigen i prøver, der er ekstraheret fra luftvejspræparater. Når ekstraherede præparater tilsættes testapparatet, bindes RSV A og/eller B antigener til guldkonjugatet af antistof-kolloid i teststrimlen og danner et antigen-antistofkompleks. Dette kompleks vandrer langs teststrimlen til reaktionsområdet, og fanges af linjen af RSV antistof på membranen. Overskydende konjugat binder til den næste linie, som består af inaktiveret RSV antigen, der virker som en funktionskontrol. Et positivt resultat indikeres ved tilsynekomsten af to rødlilla linier i aflæsningsvinduet, en linie ved siden af T (for test) og den anden ved siden af C (for control [kontrol]). Fravær af en rødlilla linie ved siden af T og tilstedeværelse af en rødlilla linie ved siden af C indikerer et negativt resultat. Testen betragtes som ikke-tolkelig, hvis der ikke er en synlig rødlilla linie ved siden af C. REAGENSER Følgende er vedlagt i Directigen EZ RSV-kittet. BD RSV apparater 30 Hvert apparat indeholder en kontrollinie med inaktiveret RSV antigen og en testlinie med monoklonalt RSV antistof på membranen. Ekstraktionsreagens E 4,0 ml Ekstraktion, mukolytisk stof og vaskemiddel med 0,2 % natriumazid (konserveringsmiddel). Control + 2,0 ml Positiv kontrol, vaskemiddel-behandlede RSV-inficerede celler med 0,1 % natriumazid (konserveringsmiddel). Control 2,0 ml Negativ kontrol, vaskemiddel-behandlede non-inficerede celler med 0,1 % natriumazid (konserveringsmiddel). DispensTube slanger 30 Slanger til præparatekstraktion og prøvelevering i apparatet. DispensTube spidser 30 Spidser til at filtrere prøven, når den leveres i apparatet. Nødvendige materialer, der ikke er vedlagt: Pipette (der kan levere mindst 250 µl), ur, vortex og transportmedium (se prøvetagning og håndtering). Advarsler og forholdsregler: Til in vitro diagnostik. 1. RSV Control + reagens og kontrollinien på BD RSV apparatet er præpareret med RSV-inficerede vævskulturceller, som er blevet inaktiveret med sæbebehandling og ultralyd, og derefter testet med bioanalyse procedurer. 2. Kittet må ikke anvendes, hvis Control + og Control ikke viser de passende resultater.
3. Patogene mikroorganismer, herunder hepatitisvira og humant immundefekt virus, kan forekomme i kliniske præparater. Standardforholdsregler 11-14 og institutionelle retningslinier skal overholdes ved håndtering af alle emner, der er kontamineret med blod og andre legemsvæsker. 4. Komponenterne i kittet må ikke anvendes efter udløbsdatoen. 5. Reagenser fra forskellige kit-lotnumre må IKKE blandes. Apparatet må ikke genbruges. 6. Reagenserne indeholder natriumazid, som er skadeligt ved indånding, ved kontakt med hud og ved indtagelse. Udvikler meget giftig gas ved kontakt med syrer. Hvis der forekommer kontakt med huden, skal der straks skylles med rigelige mængder vand. Natriumazid kan reagere med bly- og kobberrør og danne yderst eksplosive metalazider. Ved bortskaffelse skylles med rigeligt vand for at forhindre ophobning af azider. Opbevaring og håndtering: Kittene skal opbevares ved 2 30 C. MÅ IKKE NEDFRYSES. Reagenser og BD RSV apparatet skal have opnået stuetemperatur (15 30 C), når de bruges til testning. PRØVEINDSAMLING OG KLARGØRING Prøvetransport og opbevaring: Transportér friske præparater til laboratoriet så hurtigt som muligt i et egnet flydende transportsystem. Præparaterne skal bearbejdes så hurtigt som muligt efter prøvetagning. Præparater kan om nødvendigt opbevares ved 2 8 C i op til 72 h eller ved 20 C i op til syv dage efter prøvetagning. Det er yderst vigtigt, at præparaterne indsamles på korrekt vis, samt at klargøringsmetoderne overholdes. Undlad at centrifugere præparaterne inden brug med Directigen EZ RSV testen, da fjernelse af cellulært materiale vil forringe testens sensitivitet. Transportmedier: Følgende transportmedium er blevet testet og fundet kompatibelt med Directigen EZ RSV testen: Almindeligt saltvand Trypticase sojabouillon + 0,5 % gelatine* Saltvand med fosfatbuffer (PBS) Trypticase sojabouillon + 0,5 % BSA PBS + 0,5 % gelatine* Earle s Minimal Essential Medium (EMEM) PBS plus + 0,5 % okseserumalbumin (BSA) EMEM + 0,5 % BSA Kalveinfusionsbouillon (VIB) EMEM + 1 % BSA VIB + 0,5 % BSA EMEM + 0,5 % lactalbuminhydrolysat Hanks balancerede saltopløsning EMEM + 1,0 % lactalbuminhydrolysat M4 medium* Modificeret Stuarts (flydende) CultureSwab M4-RT media* Amies (flydende) CultureSwab M5 medium Starplex Multitrans* Bartels ViraTrans medium BD universelt virustransportmedium* Sucrosefosfat (2-SP) *Materialet indeholder gelatine. Prøvetagning og klargøring: Nasopharyngeale skylninger og aspirater har vist sig at være bedre end nasopharyngeale podepinde og er de foretrukne præparater. 9,10 Acceptable prøver til testning med Directigen EZ RSV test omfatter nasopharyngeale skylninger, nasopharyngeale aspirater, nasopharyngeale podepinde og nasopharyngeale podepinde/skylninger. BEMÆRK: Det anbefales at bruge polyester podepinde eller podepinde med rayonspids og aluminiumtråd til nasopharyngeale podninger (NPS). Flocked podepinde er testet analytisk og er fundet at være kompatible med Directigen EZ RSV testen. 15 Calcium podepind med alginatspids kan ikke accepteres til indsamling af virusprøver. 16 Procedure for nasopharyngeale skylninger og nasopharyngeale podepinde/skylninger: 1. Prøvemængder på 2 3 ml anbefales. 2. For store skyllemængder bør undgås, da de kan resultere i formindsket testsensitivitet. 3. Præparatet bearbejdes som beskrevet i Testprocedure. Procedure for nasopharyngeale podepinde: 1. Podepindspræparater kan tilsættes 350 µl 2 ml transportmedium. 2. Slyng podepind og transportmedium. 3. Fjern så megen væske fra podepinden som muligt. Bemærk: Alternativt kan podepinden efterlades i slangen. 4. Kassér podepinden på korrekt vis. 5. Præparatet bearbejdes som beskrevet i Testprocedure. Procedure for nasopharyngeale aspirater: 1. Præparater kan spredes i 1 3 ml transportmedium eller saltvand inden bearbejdningen. 2. Præparatet bearbejdes som beskrevet i Testprocedure. 2
PROCEDURE Testprocedure NOTER: Reagenser, præparater og BD RSV apparater skal have opnået stuetemperatur (15 30 C), når de bruges til testning. Bland alle præparater grundigt inden udtagelse af en afmåling til ekstraktion. Undlad at centrifugere præparaterne inden brug med Directigen EZ RSV, da fjernelse af cellulært materiale vil forringe testens sensitivitet. For at sikre korrekt levering skal DispensTube slanger og reagensflasker holdes lodrette (ca. 2,5 cm fra BD RSV apparatets prøvebrønd eller DispensTube), mens der forsigtigt dispenseres én dråbe ad gangen i hurtig rækkefølge. 1. Tag et BD RSV apparat ud af dets foliepose umiddelbart inden brug. 2. Afmærk et BD RSV apparatet og en DispensTube slange for kontrollen eller præparatet, der skal testes. 3. Anbring den afmærkede DispensTube i det angivne område på arbejdsstationen eller stativet. 4. Bland forsigtigt ekstraktionsreagens E ved invertering. Dispensér 3 dråber over i DispensTube. Hold reagensflasken lodret (ca. 2,5 cm fra DispensTube), mens dråber dispenseres. 5. Bland prøven eller kontrollen grundigt, og bearbejd som angivet herunder: a. For præparater: 1. Slyng eller bland præparatet grundigt. Må ikke centrifugeres. 2. Pipettér 250 µl præparat over i DispensTube. b. For kontroller: 1. Bland forsigtigt Control + og Control hætteglassene. 2. Tilsæt 6 dråber Control + til den korrekte DispensTube. 3. Tilsæt 6 dråber Control til den korrekte DispensTube. 6. Indsæt en DispensTube spids i hver DispensTube. BEMÆRK: Spidser fra andre Directigen produkter må ikke anvendes. 7. Slyng eller bland grundigt. 8. Invertér DispensTube og hold slangen på den øverste halvdel væk fra spidsen, tryk forsigtigt tre (3) dråber ekstraheret præparat over i den korrekt afmærkede BD RSV prøvebrønd. BEMÆRK: Sammentrykning af slangen tæt på spidsen kan resultere i udtrykning af spidsen og udsivning af indholdet fra slangen. 9. Afllæs resultater ved 15 min. eller op til 60 min. Positive resultater kan rapporteres allerede efter 5 min, så længe testen og kontrollinien er synlig. BEMÆRK: Ved anvendelse af et gelatineholdigt transportmiddel skal resultaterne aflæses efter 15 min. Se "Procedurens begrænsninger". 10. Aflæs resultatet i et velbelyst område og notér testresultaterne. 3
Kvalitetskontrol: Krav til kvalitetskontrol skal udføres i overensstemmelse med lokale, statslige og/eller nationale regulativer eller akkrediteringskrav og laboratoriets standard kvalitetskontrolprocedurer. Det anbefales, at brugeren læser CLSI (tidligere NCCLS) EP12-A 17 og 42 CFR 493.1202 (c) 18 med henblik på vejledning om relevant praksis for kvalitetskontrol. Hvert BD RSV apparat indeholder indbyggede kontroller. Indbyggede kontrolfunktioner omfatter: Intern kontrol: Tilsynekomsten af en rødlilla kontrollinie udløser en intern antigenkontrol (positiv intern kontrol), der tjener som en reagenskontrol for konjugatet og fanger antistof såvel som sikrer, at tilstrækkeligt kapillært flow fandt sted. Fravær af denne linie angiver en test, som ikke kan tolkes. Testmembrankontrol (negativ intern kontrol): Den ikke-reaktive membranoverflade, der omgiver den positive interne kontrol og testlinier står i kontrast til en positiv reaktion, og tjener derfor som en baggrundsreference for tolkning af reaktionsfarve. Eksterne positive og negative kontroller: Flydende Positive (Control +) og Negative (Control ) kontroller er også vedlagt hvert kit. Disse kontroller er omfattet som en metode til ekstra kvalitetskontrol for at demonstrere en positiv eller negativ reaktion. De eksterne kontroller bør køres som en kvalitetskontrolprocedure for hvert ny lot eller modtaget levering. Dannelsen af den rødlilla linie i aflæsningsvinduet ved siden af T når Control + anvendes, tyder yderligere på, at membranens RSV-antigenbindingsegenskab fungerer. Rapportér ikke resultater, hvis Control + og Control ikke giver passende resultater. Flydende kontroller kan også bruges til at demonstrere en svag positiv reaktion. En svagere positiv reaktion kan demonstreres ved fortynding af både Control + og Control sammen i den samme DispensTube (3 dråber Control + og 3 dråber Control ). Hvis forventede kontrolresultater ikke opnås, skal patientresultaterne ikke rapporteres. Kontakt den lokale BD repræsentant eller Teknisk service med henblik på assistance. TOLKNING AF RESULTATER Positiv test (antigen fundet) En rødlilla linie kommer til syne i aflæsningsvinduet ved siden af T (for test) og en rødlilla linie ved siden af C (for control (kontrol)). Dette betyder, at RSV antigen blev fundet i præparatet. Baggrunden bør være hvid til lys pink. Negativ test (antigen ikke fundet) Ingen rødlilla linie er synlig ved siden af T (for test). Dette betyder, at RSV antigen ikke blev fundet i præparatet. En rødlilla linie ved siden af C (for control (kontrol)) betyder korrekt funktion af testprocedure og reagenser. Baggrunden bør være hvid til lys pink. ikke-tolkelig Ikke-tolkelig test Hvis en rødlilla linie ved siden af C (for control (kontrol)) ikke er synlig, eller baggrundsfarven forårsager interferens med tolkning af testen eller kontrollinien, kan testen ikke tolkes. En ikke-tolkelig test skal gentages, et nyt præparat anskaffes og gentestes, eller præparatet sendes til det kliniske laboratorium til dyrkning med henblik på isolering. RAPPORTERING AF RESULTATER Positiv Positiv for tilstedeværelsen af RSV antigen. Et positivt resultat kan fremkomme ved fravær af levedygtigt virus. Negativ Negativ for tilstedeværelsen af RSV antigen. Infektion på grund af RSV kan ikke udelukkes, da antigenet, der findes i prøven, kan være under påvisningsgrænsen for testen. Dyrkningsbekræftelse af negative prøver anbefales. PROCEDURENS BEGRÆNSNINGER 1. Directigen EZ RSV testen er i stand til at påvise både levedygtige og ikke-levedygtige RSV partikler. Directigen EZ RSV testfunktionen afhænger af antigenmængden, og korrellerer muligvis ikke med vævsdyrkning, der foretages på samme præparat. Ætiologien af luftvejsinfektioner, der er forårsaget af andre mikroorganismer end den respiratoriske syncytialvirus, kan ikke fastlægges med denne test. 2. Utilstrækkelig præparatindsamling, forkert prøvehåndtering/transport eller lave virusniveauer kan give et falsk-negativt resultat. Derfor kan et negativt testresultat ikke eliminere muligheden for en RSV infektion. Som med alle diagnostiske procedurer skal resultater, der opnås med Directigen EZ RSV testen anvendes i forbindelse med anden klinisk information, som er til rådighed for lægen. 3. Ved kromatografiske immunoanalyser er det mest sandsynligt, at svagt synlige linier er falske positiver frem for de tydeligt synlige linier. Som med alle diagnostiske procedurer skal resultater, der opnås med Directigen EZ RSV testen anvendes i forbindelse med anden klinisk information, som er til rådighed for lægen. 4
4. Validiteten af Directigen EZ RSV testen er ikke blevet bevist for identifikation/bekræftelse af vævsdyrkningsisolater og bør ikke anvendes i denne kapacitet. 5. Transportmidlets indhold bør kontrolleres nøje, for at afgøre om det er gelatineholdigt. Anvendes et gelatineholdigt transportmiddel, skal resultater aflæses efter 15 min. Udvides tiden til over 15 min., kan der opstå svage linjer i aflæsningsvinduets test (T) position. 6. Amies Gel CultureSwab Plus medium er ikke kompatibelt med Directigen EZ RSV testen. Opbevaring af præparater i dette medium i længere tid kan forårsage et potentielt falskt negativt resultat. 7. Denne analyses krydsreaktivitet med human metapneumovirus er ikke blevet undersøgt. 8. Monoklonale antistoffer påviser måske ikke alle antigenvarianter eller nye stammer af RSV. 9. Directigen EZ RSV testen er ikke blevet evalueret med et tilstrækkeligt antal præparater fra de nedre luftveje, nedre nasale podepinde, næse/svælgpodepinde og pharyngeale podepinde for at skønne funktionsdata med disse præparattyper. FORVENTEDE VÆRDIER Hyppigheden af positiviteten observeret i RSV testing vil variere afhængigt af prøvetagningsmetoden, det anvendte håndterings-/transportsystem, den anvendte påvisningsmetode, årstid, patientens alder, geografisk placering, og vigtigst af alt, den lokale sygdomsprævalens. Prævalensen, der blev observeret med dyrkning under det kliniske forsøg, lå på mellem 4,2 46,5 %. FUNKTIONSDATA Funktionsdata for Directigen EZ RSV testen blev fastlagt i en multi-center undersøgelse, der foregik på syv kliniske centre i 2001-2002 RSV sæsonen. De kliniske centre lå i Canada og geografisk forskellige områder i USA. Alle præparater blev indsamlet og transporteret til laboratoriet ifølge hvert laboratoriums procedure. Hvert præparat blev evalueret med Directigen EZ RSV testen, celledyrkning og laboratoriets rutinemæssige metode (dvs. DFA, EIA). Resterende præparater blev arkiveret ved eller under 20 C. For celledyrkning blev en del af præparatet inokuleret i cellelinier, der er egnede til respiratorisk virusdyrkning, ifølge hvert laboratoriums procedure. Cellerne blev undersøgt for cytopatisk effekt (CPE). Inficerede celler blev bekræftet med RSV med immunfluorescens farvning. Præparater, der var negative for CPE efter fjorten dage, blev farvet for negativ bekræftelse med artspecifik immunfluorescensfarve. I alt 1176 præparater, bestående af nasopharyngeal skylning, nasopharyngealt aspirat, nasopharyngeal podepind og nasopharyngeal podepind/skylning fra patienter med formodet RSV blev evalueret med Directigen EZ RSV testen. Klinisk funktion: For alle de evaluerede præparater var den samlede sensitivitet og specificitet af Directigen EZ RSV testen for RSV henholdsvis 80 % og 91 %, ved sammenligning med dyrkning. Den samlede forekomst af ikke-tolkelige resultater var 0 %. Funktionsdata for Directigen EZ RSV sammenlignet med celledyrkning for hver præparattype vises i Tabel 1. Funktionsdata sammenlignet med celledyrkning efter klinisk sted vises i Tabel 2. Tabel 1: Oversigt over funktionen af Directigen EZ RSV (EZ) Test sammenlignet med dyrkning for alle præparattyper Dyrkning/EZ Præparattype n +/+ /+ a +/ / Sensitivitet (%) Specificitet (%) (95 % (95 % konfidensinterval) konfidensinterval) Nasopharyngeal 348 129 29 19 171 87,2 85,5 skylning (NPW) (80,7 92,1) (79,8 90,1) Nasopharyngealt 401 90 24 27 260 76,9 91,6 aspirat (NPA) (68,2 84,2) (87,7 94,5) Nasopharyngeal 160 28 6 11 115 71,8 95,0 podepind/skylning (NPSW) (55,1 85,0) (89,7 98,2) Nasopharyngeal 267 20 20 10 217 66,7 91,6 podepind (NPS) (47,2 82,7) (87,3 94,8) (+) = RSV positiv ( ) = RSV negativ a PCR metoden anvendt til at teste dyrkning negativ, Directigen EZ RSV positive præparater er ikke en metode, der er godkendt af FDA. Der var 79 præparater, der var dyrkning negative, Directigen EZ RSV test positive. PCR testning blev udført på 73 af de 79 præparater. I alt 46 af de 73 præparater var positive med PCR. 5
Tabel 2: Oversigt over funktionen af Directigen EZ RSV (EZ) test sammenlignet med dyrkning efter klinisk sted Dyrkning/EZ Sted Præparattype n +/+ /+ +/ / Sensitivitet (%) Specificitet (%) (95 % (95 % konfidensinterval) konfidensinterval) Sted 1 50% NPW 38 11 2 0 25 100 92,6 45% NPA (71,5 100) (83,8 99,4) 5%NPS Sted 2 100% NPW 173 56 18 15 84 78,9 82,4 (67,6 87,7) (73,6 89,2) Sted 3 59% NPA 195 79 24 13 79 85,9 76,7 37% NPW (77,1 92,3) (67,3 84,5) 4% NPS Sted 4 100% NPS 207 4 17 5 181 44,4 91,4 (13,7 78,8) (86,6 94,9) Sted 5 73% NPSW 219 46 8 15 150 75,4 94,9 24% NPS (62,7 85,5) (90,3 97,8) 2% NPW 1% NPA Sted 6 100% NPW 77 31 0 3 43 91,2 100 (76,3 98,1) (91,8 100) Sted 7 100% NPA 267 40 10 16 201 71,4 95,3 (57,8 82,7) (91,5 97,7) (+) = RSV positiv ( ) = RSV negativ Directigen EZ RSV positive testresultater var fordelt over et område af svagt synlige til klart synlige linier. Af de 70 Directigen EZ RSV positive præparater med svagt synlige linier var 39 dyrkning positive og i alt 58 var positive med en eller flere metoder (dvs. dyrkning, DFA, EIA eller PCR a ). Af de 170 Directigen EZ RSV positive præparater med synlige linier var 130 dyrkning positive, mens i alt 166 var positive med en eller flere metoder (dvs. dyrkning, DFA, EIA eller PCR a ). Af de 106 Directigen EZ RSV positive præparater med klart synlige linier var 98 dyrkning positive, mens i alt 106 var positive med en eller flere metoder (dvs. dyrkning, DFA, EIA eller PCR a ). a PCR metoden anvendt til at teste dyrkning negativ, Directigen EZ RSV positive præparater er ikke en metode, der er godkendt af FDA. Reproducerbarhed: Reproducerbarheden af Directigen EZ RSV testen blev evalueret på tre steder. Reproducerbarhedspanelet bestod af 12 simulerede RSV prøver og omfattede fire replikater af et lavt positivt niveau (nær påvisningsgrænse, [Limit of Detection, LOD]) og fire replikater af et moderat positivt niveau af RSV antigen udsået i den negative kontrolfortynder. Panelet omfattede også fire simulerede RSV negative prøver, der bestod af den ikke-udsåede negative kontrolfortynder. Den samlede reproducerbarhed for Directigen RSV EZ test var 99,1 %. Analytiske undersøgelser Analytisk sensitivitet (påvisningsgrænse) Påvisningsgrænsen (LOD) for Directigen EZ RSV testen blev ikke fastlagt for i alt fem RSV stammer; to RSV A og tre RSV B stammer. Type RSV Virusstamme LOD (TCID 50 )* A RSV (Lang) 3,95 x 10 3 A RSV (A-2) 7,9 x 10 3 B RSV (9320) 4,05 x 10 2 B RSV (Washington) 7,03 x 10 3 B RSV (Vildtype) 5,56 x 10 2 * TCID 50 = Vævsdyrkninginfektionsdosis hvor 50% af cellerne lyseres. Analytisk specificitet Directigen EZ RSV testen blev evalueret ved brug af i alt 99 mikroorganismer (58 bakterier, to gær og 39 viruser). Bakterier og gær blev testet ved koncentrationer på 10 8 CFU/mL. Mycoplasma orale blev testet ved >10 7 CFU/mL. Mycoplasma pneumoniae blev testet ved >10 6 CCU/mL (CCU farveændringsenheder). Mycobacterium tuberculosis blev testet ved 7,0 x 10 6 CFU/mL. Virusisolater blev testet ved titere fra 10 3,5 til 10 9,5 TCID 50 /0,20 ml. Influenza viruser blev testet ved titere fra 10 3,5 til 10 9,5 CEID 50 **/0,20 ml. Ingen af de angivne mikroorganismer gav et positivt resultat i Directigen EZ RSV testen. ** CEID 50 = Kyllingeembryinfektionsdosis, hvor 50% af kyllingeembryoerne er inficeret. 6
Acinetobacter baumannii (calcoaceticus) Actinobacillus suis Bacteriodes fragilis Bordetella pertussis Candida albicans Candida glabrata Cardiobacterium hominis Chlamydia psittaci Chlamydia trachomatis LGVII Corynebacterium diphtheriae Eikenella corrodens Enterococcus faecalis Enterococcus gallinarum Escherichia coli Fusobacterium nucleatum Gardnerella vaginalis Haemophilus aphrophilus Haemophilus influenzae Haemophilus parainfluenzae Haemophilus paraphrophilus Kingella kingae Bakterie- og gærpanel Klebsiella pneumoniae Lactobacillus casei Lactobacillus fermentum Lactobacillus plantarum Legionella pneumophila Listeria monocytogenes Moraxella catarrhalis Mycobacterium avium Mycobacterium intracellulare Mycobacterium tuberculosis Mycoplasma orale Mycoplasma pneumoniae Neisseria gonorrhoeae Neisseria meningitidis Neisseria mucosa Neisseria sicca Neisseria subflava Peptostreptococcus anaerobius Porphyromonas asaccharolyticus Prevotella oralis Proteus mirabilis Proteus vulgaris Pseudomonas aeruginosa Salmonella choleraesuis subsp minnesota Serratia marcescens Staphylococcus aureus Staphylococcus aureus- Cowan Staphylococcus epidermidis Streptococcus bovis II Gruppe D Streptococcus mutans Streptococcus oralis Streptococcus pneumoniae Streptococcus pyogenes Gruppe A Streptococcus sanguis Streptococcus sp. Gruppe B Streptococcus sp. Gruppe C Streptococcus sp. Gruppe F Streptococcus sp. Gruppe G Veillonella parvula Viruspanel Adenovirus, Type 3 Influenza B/GL/1739/54 Adenovirus, Type 5 Influenza B/Hong Kong/5/72 Adenovirus, Type 7 Influenza B/Lee/40 Adenovirus, Type 10 Influenza B/Allen/45 Adenovirus, Type 18 Influenza B/Maryland/1/59 Coronavirus Influenza B/Taiwan/2/62 Coxsackievirus Type A9 (Griggs) Influenza C/Taylor/1233/47 Coxsackievirus Type A9 (P.B. Bozek) Mæslingevirus Coxsackievirus Type B5 Fåresygevirus Coxsackievirus Type B6 Parainfluenza Type 1 Coxsackievirus Type A21 Parainfluenza Type 2 Cytomegalovirus Parainfluenza Type 3 Echovirus Type 2 Rhinovirus Type 1A Echovirus Type 3 Rhinovirus Type 2 Echovirus Type 6 Rhinovirus Type 13 Echovirus Type 11 Rhinovirus Type 15 Herpes Simplex Virustype 1 Rhinovirus Type 16 Herpes Simplex Virustype 2 Rhinovirus Type 37 Influenza A (H1N1) Varicella-Zoster Virus Influenza A (H3N2) Interfererende stoffer Forskellige substanser blev testet i Directigen EZ RSV testen, deriblandt fuldblod ved 2 %, lægemidler uden receptpligt (i håndkøb) samt lægemidler med receptpligt. Der blev ikke bemærket interferens i analysen for substanser ved de testede niveauer. 7
Lægemidler uden receptpligt (i håndkøb) Tre mundskyllemidler ved 25 % i håndkøb Tre halspastiller på 25 % i håndkøb Tre næsespray på 10 % i håndkøb 4-Acetamidophenol ved 10 mg/ml Acetylsalicylsyre ved 20 mg/ml Chlorpheniraminmaleat ved 5 mg/ml Dextromethorphan ved 10 mg/ml Lægemidler med receptpligt Zanamavir ved 1 mg/ml Amantadin ved 500 ng/ml Rimantadin ved 500 ng/ml Diphenhydramin HCl ved 5 mg/ml Pseudoephedrin HCl ved 20 mg/ml Guaiacol glycerol-ether ved 20 mg/ml Ibuprofen ved 10 mg/ml Oxymetazolin ved 0,05 mg/ml Phenylephrin ved 1 mg/ml Ribavirin ved 500 ng/ml Synagis ved 0,1 mg/ml Albuterol Sulfat ved 0,083 mg/ml BESTILLING Kat. Nr. Beskrivelse 256030 Directigen EZ RSV 30 Test Kit (Directigen EZ RSV 30 testkit) 220115 BBL CultureSwab Sterile Single Swab (steril enkelt podepind), pakke med 100 220131 BBL CultureSwab Liquid Amies (fleksibel aluminiumtråd), pakke med 50 220134 BBL CultureSwab Liquid Stuart (fleksibel aluminiumtråd), pakke med 50 220220 BD Universal Viral Transport (universel virustransport) 3 ml glas, 50 stk. 220250 Regular Flocked Swab (almindelig flocked podepind), sterile individuelt indpakkede, 100 stk. 220251 Minitip Flocked Swab (flocked podepind med minispids), sterile individuelt indpakkede, 100 stk. 220252 Flexible Minitip Flocked Swab (fleksibel flocked podepind med minispids), sterile individuelt indpakkede, 100 stk. LITTERATUR 1. CDC. 1999. Update: respiratory syncytial virus activity United States, 1998-1999 season. Morbid. Mortal. Weekly Rep. 48:1104-1115. 2. Falsey, A.R. and E. E. Walsh. 2000. Respiratory syncytial virus infection in adults. Clin. Microbiol. Rev. 13: 371-384. 3. Englund. J.A., P. A. Peidra, A. Jewell, K. Patel, B. B. Baxter and E. Whimbey. 1996. Rapid diagnosis of respiratory syncytial virus infections in immunocompromised adults. J. Clin. Microbiol. 34:1649-1653. 4. Crowcroft, N.S., F. Cutts and M.C. Zambon. 1999. Respiratory syncytial virus: an underestimated cause of respiratory infection, with prospects for a vaccine. Commun Dis Public Health. 2: 234-241. 5. Hughes, J.D., D. A. Mann and V. V. Hamparian. 1988. Detection of respiratory syncytial virus in clinical specimens by viral culture, direct and indirect immunofluorescence, and enzyme immunoassay. J.Clin. Microbiol. 226:588-591. 6. Ahluwalia, G.J., J. Embree, P. McNicol, B. Law and G. W. Hammond. 1987. Comparison of nasopharyngeal aspirate and nasopharyngeal swab specimens for respiratory syncytial virus diagnosis by cell culture, indirect immunofluorescence assay, and enzyme-linked immunosorbent assay. J. Clin. Microbiol. 25: 763-767. 7. Waner, J.L., N. J. Whitehurst, S. J. Todd, H. Shalaby and L. V. Wall. 1995. Comparison of Directigen RSV with viral isolation and direct immunofluorescence for the identification of respiratory syncytial virus. J. Clin. Microbiol. 25: 763-767. 8. Kehl, S.C., K. J. Henrickson, W. Hua and F. Jiang. 2001. Evaluation of the hexaplex assay for detection of respiratory viruses in children. J. Clin. Microbiol. 39:1696-1701. 9. Barenfanger, J., C. Drake, N. Leon, T. Mueller and T. Troutt. 2000. Clinical and financial benefits of rapid detection of respiratory viruses: an outcomes study. J. Clin. Microbiol. 38:2824-2828. 10. Heikkinen, T., J. Marttila, A. Salmi, and O. Ruuskanen. 2002. Nasal Swab versus Nasopharyngeal Aspirate for Isolation of Respiratory Viruses. J. Clin. Microbiol. 40:4337-4339. 11. Clinical and Laboratory Standards Institute. 2005. Approved Guideline M29-A3. Protection of laboratory workers from occupationally acquired infections. CLSI, Wayne, PA. 12. Garner, J. S. 1996. Hospital Infection Control Practices Advisory Committee, U. S. Department of Health and Human Services, Center for Disease Control and Prevention. Guideline for isolation precautions in hospitals. Infect. Control Hospital Epidemiol. 17:53-80. 13. U.S. Department of Health and Human Services. 2007. Biosafety in microbiological and biomedical laboratories, HHS Publication (CDC), 5th ed. U.S. Government Printing Office, Washington, D.C. 14. Directive 2000/54/EC of the European Parliament and of the Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work (seventh individual directive within the meaning of Article 16(1) of Directive 89/391/EEC). Official Journal L262, 17/10/2000, p. 0021-0045. 15. Data on file, BD Diagnostics. 16 Smith, T.F. 2000. Specimen requirements; selection, collection, transport, and processing In S. Spector, R.L. Hodinka, and S.A. Young (eds.), Clinical virology manual, 3rd ed., ASM Press, Washington, D.C. 8
17. Clinical and Laboratory Standards Institute (formerly NCCLS). 2002. Approved guideline: EP12-A. User protocol for evaluation of qualitative test performance, CLSI, Wayne, PA. 18. Federal Register. 2001. Quality control for tests of moderate complexity (including the subcategory), high complexity, or any combination of these tests. Code of Federal Regulations 42(3):493.1202. 9
Becton, Dickinson and Company 7 Loveton Circle Sparks, MD 21152 USA 800-638-8663 BENEX Limited Bay K 1 a/d, Shannon Industrial Estate Shannon, County Clare, Ireland Tel: 353-61-47-29-20 Fax: 353-61-47-25-46 ViraTrans is a trademark of Trinity Biotech, PLC. Multitrans is a trademark of Starplex Scientific, Inc. BD, BD Logo and all other trademarks are property of Becton, Dickinson and Company. 2008 BD. Made in China by BD.