: ªØ π πõ à ß Á å àºà πºπ ß àõß Õ «æÿπ μ «ÕàÕπ. ª ÿ «μ«æ» μ å. Èß Ë 10 ª ªï 2552 «ƒμ» : ª μ «Õß «Ÿà «

Størrelse: px

Starte visningen fra side:

Download ": ªØ π πõ à ß Á å àºà πºπ ß àõß Õ «æÿπ μ «ÕàÕπ. ª ÿ «μ«æ» μ å. Èß Ë 10 ª ªï 2552 «ƒμ» : ª μ «Õß «Ÿà «"

Sten Laursen
5 år siden
Visninger:

1 168 º μμ «ÕàÕπ «æÿπæ π ÿå â Á å à ß àºà π ßºπ ß àõß Õ ªØ π πõ à ß Embryo Production of Kao Lumpoon Cattle Using Ovum Pick-Up and In Vitro Fertilization Techniques àõ Õ ß 1 ß å È ß 1 Õππ å Õß π 1 «Ÿ å Ë ß«Ÿ 1 μ â 1 ÿ å μπå Á ª ß å2 Malee Apimeteetumrong 1 Narong Liengchareon 1 Anone Thuangsanthi 1 Viboon Yiengvisavakul 1 Keerati Thijae 1 Jureerat Sumretprasong 2 æ ËÕ» «ªìπ ª â π º μμ «ÕàÕπ «æÿπæ π ÿå â â π ªØ π πõ à ß à«á å àºà π ßºπ ß àõß Õ â à «æÿπ π«π 15 μ «Õ ÿ À«à ß 5-10 ªï Á å à ºà π ßºπ ß àõß Õ À ß ÀâŒÕ å π øõ μ Ÿ μ ß à à π π Á ª Àå «âπ ª Àå «3-5 μ «μ «4-6 Èß æ «à Á å à â «307 Õ å à Õ ß à«π π«π 216 π ª æ È ß ªØ π πõ à ß âõ μ àßμ «44% (88/200) Õ μ ß μ μå 27.27% (24/88) ËÕ π«πμ «ÕàÕπ Ë àßμ «11.11% (24/216) ËÕ π«π à Ëπ ª æ È ßÀ ß º À ß Ω μ «ÕàÕπ 6 πμ «3 μ «Ëß ªìπ π æ π ÿåº Ë ªìπ μ â«7 «π æ «à μ «μ Èß âõß 1 μ «μàõ Ÿ 1 μ «º» π È ß Àâ ÀÁπ«à «ªìπ ª â π º μμ «ÕàÕπ «æÿπ ªØ π πõ à ß â å à Ë Á ß àºà π ßºπ ß àõß Õ : ªØ π πõ à ß Á å àºà πºπ ß àõß Õ «æÿπ μ «ÕàÕπ 1 π π «æ º μª»ÿ μ«å ª»ÿ μ«å μ. ß Õ. Õß.ª ÿ π Bureau of Biotechnology in Animal Production, Department of Livestock Development. Pathumthani μ«æ» μ å À «ß À à. ß À à Faculty of Veterinary Medicine, Chiang Mai University. Chiang Mai

2 å 169 Abstract This study was carried out to explore the potential for production of embryos in Kao Lumpoon cattle using ovum pick up (OPU: transvaginal follicle aspiration) and in vitro fertilization techniques. A group of 15 cows, between 5 to 10 years of age, were used as oocyte donors. Oocyte recovery was performed using OPU, in FSH-stimulated donors, at every 2 weeks during 10-month intervals. Each donor cows was follicle aspirated for 4-6 sessions. A total of 307 oocytes were recovered. Out of the 216 oocytes (A, B and some C grades) were subjected to in vitro maturation and in vitro fertilization, 88 reached the 2-4 cell stage at day 2 post-fertilization, with a cleavage rate of 40.74% (88/216). Twenty four blastocysts were obtained at day 7 after culture in vitro, with a blastocyst rate of 27.27% and 11.11%, based on the numbers of the cleaved zygotes and cultured oocytes, respectively. Six embryos were transferred into 3 recipients at Day 7 post natural estrous. One recipient was pregnant and then gave one calf. This study demonstrates that it is possible to generate the in vitro blastocyst-stage embryos from Kao Lumpoon cattle, using oocytes collected by OPU technique. Keywords: in vitro fertilization, ovum pick-up, Kao Lumpoon cattle, embryo π «æÿπ ªìπ æ π ÿåæ Èπ Õß Ë Ëπ ËÕ Ÿà æ π Àπ Õ Õßª» à π Èπ Ëß ß à ß π æ πª»õ Ëπ æ æ π μ ßÀ«æŸπ ß À à «æÿπæ π ÿå â ªìπ Ë æ æ π ÿå Õ πμ «πμ æÿàà ß «Ÿ â æÿõàõπ Ÿª à ß Ÿß À à «ß «æÿπæ π ÿå â Ëºà π Õ Õ à ß Ë â«π ª â πæ æ æ æ π ß π «ªí ÿ π π«π «æÿπæ π ÿ â ßÕ à ßμàÕ π ËÕß (Yiengvisavakul, 1997) π ËÕß È ß æ ËÕ â ªìπ ßß π ß πõ π Èπ ß º â æ π ÿå «à «æÿπæ π ÿå â πâõ «à 1,000 μ «ß π«π ß ËÕ Ê ªìπμâÕßÀ «æ Ë π«π «æÿπ æ π ÿå âõ à ß àß à«πæ âõ Õπÿ åæ π ÿ π Ë «º μ Ÿ ªØ π πõ à ß â æ π ªÕ à ß π âõ à ß æ àà Èß æ ËÕ «ª ª ÿßæ π ÿå(hasler et al., 1995) Á å à æ ËÕπ ªØ π μ «Õ ÿ πàâõß Õß ºà π ß àõß Õ à«â ËÕßÕ μ «å (ultrasound-guided transvaginal ovum pick-up: OPU) â Ë π π π μ«å æ ËÕ Á Õ πμ À μ«å Õ Èß ß È âà Èß ß π π π ß à «ª ÿ μå â æ ËÕ Õπÿ å æ Èπ Õßª Ëπ (Bos indicus) πª»õ π Manik (2003) πªí ÿ π ß π«πª» Èπ Ë «º μμ «ÕàÕπ â π ªØ π πõ à ß à«á å àºà π ß àõß Õ à â ËÕßÕ μ «å Èß π π æ π ÿåæ Èπ Õß μâ Õ à ß Áμ ß à ß π π æ π ÿå «æÿπ «μ ÿª ß å Õß» π È æ ËÕ» «ªìπ ª â π º μμ «ÕàÕπ «æÿπæ π ÿå â â π ªØ π πõ à ß à«á å àºà π ß ºπ ß àõß Õ

3 170 «π π «μ«å Õß μ μ «μ«å à «æÿπæ π ÿå â Õ ÿ À«à ß 5-10 ªï πè Àπ ª π«π 15 μ «È ß Ë»Ÿπ å«æ π π â Ω μ «ÕàÕπ Õ.ª àõß.π π ß Õπ ªî Õ À Ë Àâ ªìπÕ À Õ Á 1.μàÕ«π Àâ«π ÈÕ À â Àâß 5-7.μàÕ«π àß Àâ«π 2 ÈÕ ÈßÀ Ÿ ª æ Õß à ß Àâ Ÿ å àõπ Ë Á å àª 1 Õπ âœõ å π FSH (Folltropin V, Ontario, Canada) μÿâπ Àâ ß à øõ æ âõ Ê πà π 100. μàõμ «àß ªìπ 2 ä à π Àà ß π 12. ( ÿ μ, 2547) ŒÕ å π Á ª 48. àõπ àõπ Á μ «Õ π øõ À æ «à π âπºà π»ÿπ å ß «à 1. À Õ Ë π À à Ë ÿ Àâ Èß àõπ π π Á å àà ß ŒÕ å π Á ÿ â Àâ Ë πà ß (2% π) πõ μ à«π 1. μàõπè Àπ 100. àõπ Á à μà μ «Ÿ π Á å à ª Àå 1 Èß ª Àå «âπ ª Àå ªìπ «μàõ π ËÕß 4-6 Èß â «π πß π Á å à «18 Èß À«à ß Õπ ÿπ π Æ 2551 Á å à ºà π ßºπ ß àõß Õ Á å àμ «Ë â ß π àõπàπâ π È Õß ß å (2547) â«ëõß Õ ÕßŒ å (Hill Aspirator, Mable Hill Embryos INC.) πè Ë â Á å à Õ PBS (Gibco, BRL, USA) μ â«fsh 1% (v/v) ªØ «π (penicillin-streptomycin) π Õ Áßμ «(50 Àπà«/. heparin) àõπ Á å à μ «π π«πøõ π ß à â«æ Õ μ «å π linear transducer (5 MHz) π Èπ π π Á μ ÈπμÕπ ß Ë ß π «â Õß ß å (2547) Á â«μ «Õ π«πøõ Ë ß àõ Èß â««àπ «àõπ μ «À å à Ë Á â ª π ÿ æ μâ âõß ÿ»πå μõ Õ ª π ÿ æμ Õß å «Ÿ Ë âõ Õ æ μ «Õß Hasler et al. (1995) ßπ È Õ (A grade) à Ë å «Ÿ âõ Õ Àπ πàπ μ Èß μà 4 Èπ Èπ ª (cumulus oocyte complexes) (B grade) à Ë å «Ÿ âõ Õ 1-3 ÈπÀ ÕÀ ÿ Õ ß à«π (partially denuded oocytes) (C grade) à Ë à å «Ÿ âõ Õ (denuded oocytes) (D grade) à Ë ºà Õß å «Ÿ (expanded oocytes) Õ å à æ Õ π ª π π μ ÈπμÕπ ªØ π πõ à ß (, 2548) ËÀâÕßªØ μ ªØ π πõ à ß π π «æ º μ ª»ÿ μ«å ª»ÿ μ«å μ. ß Õ. Õß.ª ÿ π º «å Table 1 Á å à â «307 â å à Ë ÿ ªìπ 41%» Èßπ È Á à Õ Ëß π ªªØ π πõ à ß â Õß ÿ μ «

4 171 Ëßμà ß ß π Õß Manik et al. (2003) Ë ß π π æ Èπ Õß ßμ «(Bos indicus) à â å à Õ À Õ π» Èßπ È â å à Õ «67.42% (207/307) â ß ß π Õß ß å (2547) Õß ÿ μ (2547) π æ Èπ Õß μâ (65% 56.8%) º º μμ «ÕàÕπ «æÿπ ªØ π πõ à ß â å à Ë Á â â Õ μ àßμ «40.74% (Table 1) Ëßπ «à ßμË ËÕ Ë ß π π π (Ward et al., 2000) Ë âª 60% À Õ π æ π ÿå π Õ (Reis et al., 2002) Ë â ß % μà ß Ÿß «à Ë ß π π æ Èπ Õß πª»õ π (33%) Õß Manik et al. (2003) ËÕæ à«π Õßμ «ÕàÕπ Ë π ß μ μå «π Ë 7 À ß æ È ß π«π μ «ÕàÕπ Ë àßμ «à Ëπ È ßÀ ßªØ π πõ à ß» π È Ë âº à 27.27% ( μ «ÕàÕπ Ë àßμ «) 11.11% ( å à Ë â) æ «à â à â ß (25% %) ß π Õß Reis et al. (2002) ß π π æ π ÿåæ Èπ Õß μà ªìπ Ÿ àõπ«æ π ÿå (Techakumphu et al., 1996) Ë âõ μ ß μ μ å μë «à 10% μà â à μë «à π æ Èπ Õß μâ (30% %) Õß ÿ μ (2547) Õ à ß Áμ ß π ß à «à ß π Ÿ Table 1 Summary on embryo production by ovum-pick up and in vitro fertilization techniques in Kao Lampoon cattle Categories Numbers No. of oocytes recovered (number of cows) 307 (15) No. of oocytes grade A (%) 81 (26.38) No. of oocytes grade B (%) 126 (41.04) No. of oocytes grade C (%) 87 (28.34) No. of oocytes grade D (%) 10 (3.26) No. of oocytes used for IVF (%) 216 (70.36) % Cleaved zygotes (n/oocytes used) (88/216) % Blastocysts at Day 7 (n/cleaved zygotes) (24/88) % Blastocysts at Day 7 (n/oocytes used) (24/216) No. of embryos transferred/no.recipient 6/3 No. recipient pregnant (%) 1 (33.33) No. calf born 1 À ß Ω μ «ÕàÕπ 6 πμ «3 μ «Ëß ªìπ π æ π ÿåº Ë ªìπ μ â«7 «π æ «à μ «μ Èß âõß 1 μ «μ «Ëμ Èß âõß Ω μ «ÕàÕπ 4 π ««Ÿ 1 μ «ËÕ Õπæƒ» π 2551 π ªìπ ß π Èß πª» Ë Ÿ «æÿπ π Á å à Ë Á ß àºà π ßºπ ß àõß Õ ªØ π πõ à ß

5 172 μμ ª» ºŸâ«Õ Õ ÿ π μ«æ åõ ÿ å À π ππ å ºŸâÕ π«π π «æ º μª»ÿ μ«å Ë π πÿπ π πß π æπ ß π Õß π œ»ÿπ å Ë à«àâ» Èßπ È Á â â«ß π«π È â π πÿπ π ß π «Ààß μ («.) Õ Õâ ßÕ ß ß å È ß Õππ å Õß π ÿ Ÿ» ÿ Õ ß Á Õ Õ μå æ Èπ Õß μâºà π ßºπ ß àõß Õ à â ËÕßÕ μ «å. ª ÿ π «ª»ÿ μ«å Èß Ë 19. «π Ë æƒ 2547 æ æ ±å μ æ μ ª ÿ π. Õ. Õ ß ß å È ß Õππ å Õß π ÿ å μπå Á ª ß å º Õß π ŒÕ å π Õø Õ Õ μàõª ÿ æ Õß Õ Õ μå Ë Á âºà π ßºπ ß àõß Õ à â ËÕßÕ μ «πå. ª ÿ π «ª»ÿ μ«å Èß Ë 20. «π Ë ßÀ 2548 ß å âπ å. ÿß æ À π. Õ. ÿ μ Õß Õ ß ß å È ß Õ ß º μμ «ÕàÕπ æ Èπ Õß μâ ( π) Á àõàõπ ß àºà π ß àõß Õ ªØ π πõ à ß. «μ«æ å 14 (3): Hasler, J.F., Henderson, W.B., Hurtgen, P.J., Jin, Z.Q., McCauley, A.D., Mower, S.A., Neely, B., Shuey, L.S., Stokes J.E. and Trimmer, S.A Production, freezing and transfer of IVF embryos and subsequent calving results. Theriogenology 43: Manik, R.S., Singla, S.K. and Palta, P Collection of oocytes through transvaginal ultrasound-guide aspiration of follicles in an Indian breed of cattle. Anim. Reprod. Sci. 76: Reis, A., Staines, M.E., Watt, R.G., Dolman, D.F. and McEvoy, T.G Embryo production using defined oocyte maturation and zygote culture media following repeated ovum pick-up (OPU) from FSH-stimulated Simmental heifers. Anim. Reprod. Sci. 72: Techakumphu, M., Tantasuparak, W. and Singlor, J Successful blastocyst production from Native Thai calf oocytes after in vitro fertilization. Thai J. Vet. Med. 26: Yiengvisavakul, V Country Reports: Thailand. Proceedings of the Second Regional Training Workshop on the Conservation of Domestic Animal Diversity and the Third National Coordinatorsû Meeting. FAO, Bangkok, March p.71. Ward, F.A., Lonergan, P., Enright, B.P. and Boland, M.P Factors affecting recovery and quality of oocytes for bovine embryo production in vitro using ovum pick-up technology. Theriogenology 54:

Relaterede dokumenter

» π åμ «Õß Áßª Ÿ «â«πè â Ÿ π ßÀ«âÕ ÕÁ. Abstract

Original Article» π åμ «Õß Áßª Ÿ «â«πè â Ÿ π ßÀ«âÕ ÕÁ Situation Analysis of Cervical Cancer Screening by Visual Inspection with Acetic Acid in Roi-Et Province æ πàß 1, ÿæ «π ππ å *2, ÿã å «π ππ å 1 Patchariya