Godaor - Møde. Hvad er PRV, herunder nuværende kendskab til udbredelse i verden? Silkeborg

Transkript

1 Godaor - Møde Hvad er PRV, herunder nuværende kendskab til udbredelse i verden? Silkeborg Godaor Title 1

2 Piscine Orthoreovirus -PRV Segmenteret dsrna virus non-enveloped RNA virus Reoviridae familie 10 RNA segmenter Ingen cellekultur til in vitro Title 2

3 Orthoreovirus replikation I pattedyr REOv- Respiratorisk Enterisk Orphan (ingen sygdom) I laksefiske, PRV Inficerer erytrocytter og (cardio)myocytes Sygdom i akvakultur Reovirus forårsage sygdom også i fjerkræ- Hvorfor? Godaor Title 3

4 Sygdom VS patogen detektion Vi har brugt patogen detektion som sygdom proxy i sager hvor patogener er meget virulent (VHSV i Rt, IHNV As) Hvordan håndterer man PRV som er overalt? Godaor Title 4

5 PRV or PRVs? Atlantic salmon Rainbow trout Pacific Salmon (Coho-Chinook-Sockeye) Brown trout PRV-1 HSMI N/A Jaundice (Chinook) N/A PRV-2 N/A N/A EIBS (Coho) N/A PRV-3 Experimental Pancarditis ** Jaundice (Coho) Pancarditis** (PDS?) HSMI described in 1999 PRV-1 causing HSMI 2017 PRV-1 detected 1977 EIBS described in 1977 and 1987 PRV-2 causing EIBS 2016 N/A RT disease described in 2013 PRV-3 causing HSMI-like 2018 PRV-3 detected in 1995 Hvorfor et gammelt vira som er overalt begynder at forårsage sygdom? Title 5

6 PRV-1 HSMI NVI * 194** * 184** * 187** * NVI and private laboratories Dr. Trygve Poppe Ingen i DK kun i laks (Salmo salar) mest i saltvand (nogen gange ferskvand) Kronisk sygdom med hjerte inflammation Vaccine prototype udviklet Laks genetisk resistente stammer Forbedret foder Stress håndtering Wessel et al Godaor Title 6

7 PRV-1 / HSMI Virus prevalens i saltvand i akvakultur laks er Norge 100% Virus er fundet i laks producerende lande (Canada, US, Færøerne, Skotland, Irland, Norge, Island) Virus er fundet i vildt laks INGEN SYGDOM HSMI sygdom i Norge, Skotland, Irland. Virulens markører? Godaor Title 7

8 Virulens markør i PRV Godaor Title 8

9 PRV-2 EIBS Dr. Tomomasa Matsuyama. Kun i Japan (?) I Coho laks mest i saltvand Akut sygdom med anæmi Temperatur påvirket (?) Meyers 2007 Title 9

10 Godaor Title 10

11 Title 11

12 Blod Hjerte 15 Injected tank 1 Injected tank 2,3 Cohabitants tank 2,3 15 Injected tank 2,3 Cohabitants tank 2,3 PRV-Om blood Ct values PRV-Om heart Ct values WPC Inj(n) 5/5 5/5 5/5 5/5 5/5 3/5 2/5 2/5 2/5 Cohab (n) 4/5 4/5 5/5 4/5 2/5 3/5 Contr (n) 0/10 0/5 0/5 40 WPC Inj (n) 5/5 5/5 3/5 2/5 2/5 1/5 Cohab (n) 2/5 4/5 5/5 5/5 4/5 4/5 Contr (n) 0/10 0/5 0/5 Mx - milt Viperin - milt Title 12

13 PRV-3 sygdomsrelaterede tegn Title 13

14 PRV-3 kausalitets forhold Kinetics of purified PRV-3 in Rainbow trout spleen 10 RT Purified PRV-3 SHED. RT Purified PRV-3 COHAB. 20 C t v a lu e w pc 2 w p c 4 w pc 6 wpc 8 wpc 10 w pc W PC Kinetics of purified PRV-3 in Rainbow trout heart 10 RT Purified PRV-3 SHED. RT Purified PRV-3 COHAB. 20 C t v a lu e w pc 2 w p c 4 w pc 6 w p c 8 w pc 10 w pc W PC Title 14

15 Hjerte Patologi Immune respons PRV-3 blod Shedders Oprenset PRV-3 PRV-3 blod Cohabitants Oprenset PRV-3 Pics. Anne Berit Olsen Title 15

16 Antigen detektering Antistoffer respons Oprenset PRV-3 PRV-3 inficeret blod m u1c Rainbow trout NEG Rainbow trout pure Rainbow trout blood M FI wpc 6 w pc 8 w pc 10 w pc Title 16

17 Seneste historie af PRV ⱱ 2017 ⱱ 2017 ⱱ 2017 ⱱ 2015 ⱱ ⱱ Title 17

18 PRV-3 Molekylær karakterisering Title 18

19 Sygdom Vs PRV-3 detektering Dambrugstype Fiske arter # dambrug testet # PRV-3 +ve Sygdom observeret Udsætning Bækørred Alv Regnbueørred Yngel Regnbueørred RAS Grow out Regnbueørred Title 19

20 - Påvirker regnbueørred i RAS - Neurologisk sygdom og gælle patologi - Svær anæmi Sygdom relateret til PRV-3 i Danmark - Kompleks sag med forskellige patogener (IPNV, BKD, F. psychr.) - Histopathologisk : Epicarditis, mildt i de fleste fisk. Many of the fish have multifocal granulomatous myocarditis and hepatitis indicative of BKD Pic Tine Iburg Pic Tine Iburg Title 20

21 PRV patogenese PRV-1 / HSMI PRV-2/ EIBS Dr. Trygve Poppe Dr. Tomomasa Matsuyama. Meyers 2007 Wessel et al.2015 Wessel et al.2012 Meyers 2007 Meyers 2007 Vedvarende infektion Kronisk sygdom Lav til moderat dødelighed Inflammatorisk cytotoxisk respons Hjerte patologi Salmo salar PRV-3? RT Akut infektion Akut sygdom med høj dødelighed, svær anæmi Onchoryncus nerka / Onchorynchys tshawytscha Godaor Title 21

22 PRV-3 pathogenesis in Rainbow trout PRV-1 / HSMI PRV-2/ EIBS PRV-3 Ved eksperimentielle forhold/gennemstrømsdambrug Akut infektion Kronisk sygdom Lav dødelighed Infl. Cytotoxisk respons Hjerte patologi Anæmi +/- Erytrocyt inklusioner PRV-3 i RAS Akut infektion Akut sygdom Moderat/høj dødelighed Anæmi Erytrocyt inklusioner Title 22

23 Tak for jeres opmærksomhed. Spørgsmål? Godaor Title

24 Godaor - Møde PRV-3 smitteforsøg i laboratoriet, hvad har vi lært? Silkeborg Godaor Title 24

25 PRV-3 Molecular characterization Title 25

26 1. forsøg Virulens sammenligning Virus oprformering 3 PRV-3 NO RT 4 PRV-3 DK RT 6 NK RT 3 PRV-3 RT 4 PRV-3 RT Udtaget prøver på 6 shedd. + 6 cohabs hver 2. uge. Milt hjerte CNS qpcr PRV-3 Organ pakke i formalin Blod i heparin Blod i heparin (første prøveudtagning mandag) problem: Fisk har F.psychr infektion Date DTU Title

27 2. forsøg Med PRV-3 inficeret blod fra 1. forsøg 3 PRV-3 NO RT 4 PRV-3 DK RT 6 NK RT Udtaget prøver på 6 shedd. + 6 cohabs hver 2. uge. Milt hjerte CNS qpcr PRV-3 Organ pakke i formalin Blod i heparin Date DTU Title

28 Hvad har vi brug for? - Ny Diagnostisk værktøj så kan vi tester både virus load og fisk immunforsvar i rutinen - Afhjælpende foranstaltninger - Temperatur påvirkning (se PRV-2) - Antistoffer immunforsvar kan reduceret sygdom? Date DTU Title

29 Tak for jeres opmærksomhed. Spørgsmål? Godaor Title