IVD kun til professionel TRACE Dato 05.04.2011 Betjeningsvejledning PAPP-A KRYPTOR er et registreret varemærke, der ejes af. Øvrige produktnavne i nærværende dokument anvendes til identifikationsformål, de kan være varemærker og/ eller registrerede varemærker, der ejes af deres pågældende virksomheder. Denne version erstatter alle tidligere versioner. Ændringer i forhold til tidligere version: licensoplysninger Neuendorfstr. 25 16761 Hennigsdorf TYSKLAND Omstilling Telefon: +49 3302 883-0 Fax: +49 3302 883-100 e-mail: info@brahms.de Kundeservice Telefon: +49 3302 883-300 Fax: +49 3302 883-388 e-mail: service@brahms.de Ordrer Telefon: +49 3302 883-600, -700, -800 Fax: +49 3302 883-666 e-mail: order@brahms.de Internet www.brahms.de www.procalcitonin.com www.kryptor.net www.copeptin.com 1 Tilsigtet PAPP-A KRYPTOR er et kit, som er beregnet til KRYPTOR's automatiske immunfluorescens-analyse af PAPP-A eller "Pregnancy Associated Plasma Protein-A" i serum eller hepariniseret plasma. Testen er beregnet til bestemmelse af PAPP-A til non-invasiv risikovurdering af kromosomanomalier hos fostre. XL665- KONJUGAT (5,6 ml) anti-papp-a monoklonalt antistof konjugeret med XL665, buffer, bovinalbumin, uspecifikke murine immunglobuliner, kaliumfluorid. 2 Instrumenter PAPP-A KRYPTOR kan es til: þ KRYPTOR þ KRYPTOR compact þ KRYPTOR compact PLUS Stregkodekort 1 Se ervejledningen til KRYPTOR/KRYP alle de nødvendige oplysninger til registrering af et nyt reagens-lot. 3 Indledning Sammen med andre biologiske og kliniske data udgør nedsatte værdier af PAPP-A en god prognoseværdi i forbindelse med påvisning af visse kromosomanomalier hos fosteret. I den såkaldte 1. trimester-screening, der udføres mellem 11. og 14. graviditetsuge, kan der opnås en påvisningsgrad af trisomi 21 på 90 % ved at kombinere maternel alder, nakkefoldsscanning og biokemisk bestemmelse af PAPP-A og frit βhcg [5]. På denne måde findes karakteristiske ændringmønstre i hver af de biokemiske værdier i tilfælde af graviditeter med trisomi 21, trisomi 18, trisomi 13 og triploidi sammenholdt med graviditeter, hvor kromosomerne ikke er patologiske. 4 4.1 Indhold Kit PAPP-A KRYPTOR 866.075 75 2 8 C CONT 4.2 Tilbehør PAPP-A KRYPTOR CAL 86691 2 8 C Tilsigtet : Til justering af den standardkurve, der er gemt i KRYP PAPP-A KRYPTOR CAL VIALS 6 (0,75 ml) Stregkodekort 1 CAL PAPP-A/proMBP-komplekser af human oprindelse, humant serum og natriumazid. Se ervejledningen til KRYPTOR/KRYP oplysninger vedrørende kalibrator-lottet samt dets koncentration. KRYPTAT- KONJUGAT (4,5 ml) anti-papp-a monoklonalt antistof konjugeret med europiumkryptat, buffer, bovinalbumin, uspecifikke murine immunglobuliner, kaliumfluorid. FORTYNDING SMIDDEL (9,0 ml) serum fra nyfødte kalve, præserveringsmiddel PAPP-A KRYPTOR Betjeningsvejledning (Version R16da) Side 1 Af 5
88192 2 8 C CONTROL Tilsigtet : Multiparametrisk kvalitetskontrol til prænatal screening med KRYP CONTROL 1 CONTROL 2 CONTROL 3 Stregkodekort 1 Se ervejledningen til KRYPTOR/KRYP oplysninger om kontrol-lottet, herunder målkoncentrationer, opnåede standardafvigelser og accepterede koncentrationsområder. Oplysningerne vises på KRYP TOR/KRYPTOR compact/ KRYPTOR compact PLUS skærmen i kvalitetskontrolområdet. 5 Forholdsregler Følg oplysningerne til eren i ervejledingen til KRYPTOR/KRYP PLUS og i dette dokument. Overhold erne, som fremgår af mærkatet. Reagenser fra forskellige reagenskits må ikke blandes. Elementerne fra en enhed må ikke opløses. Undgå mikroskopisk kontaminering af reagenser. De resultater, som opnås ved denne prøve, skal altid vurderes sammen med den kliniske undersøgelse, patientens medicinske historie og øvrige oplysninger, inden vigtige handlinger igangsættes. Kittet indeholder kaliumfluorid KF: Xn Sundhedsskadelig R20/21/22: Farlig ved indånding, ved hudkontakt og ved indtagelse. S22: Undgå indånding af støv. S24: Undgå kontakt med huden. Råmateriale med human oprindelse, som findes i reagenser, er testet med godkendte kits og fundet negative for anti-hiv 1-, anti-hiv 2-, anti-hcv-antistoffer og HBs-antigen. Dog er det ikke muligt fuldstændigt at garantere, at produkterne ikke overfører hepatitis, HIV-virus eller anden virusinfektion og således skal alt råmateriale med human oprindelse samt prøver, som der foretages assay af, behandles som potentielt infektiøst. De generelt accepterede sikkerhedsforanstaltninger og laboratorieteknikker skal følges ved håndtering af reagenser og patientprøver. Pipetering må ikke udføres med munden. Vask hænderne efter arbejdet. Stregkodeklist ermærker 20 til hver kontrol Stregkodemærkaterne es til at identificere kontrollerne ved analyse på KRYP TOR/KRYPTOR compact/ KRYPTOR compact PLUS. Brug beskyttelsestøj, beskyttelseshandsker og sikkerhedsbriller under arbejdet. 4.3 Andet nødvendigt udstyr KRYPTOR forsstoffer Navn Spis, drik og ryg ikke i områder, hvor der håndteres prøver eller kit-reagenser. KRYPTOR BUFFER 89970 KRYPTOR SOLUTION 1 89971 KRYPTOR SOLUTION 2 89972 KRYPTOR SOLUTION 3 89973 KRYPTOR SOLUTION 4 89974 KRYPTOR DILCUP 89975 KRYPTOR REACT 89976 KRYP PLUS forsstoffer Navn KRYPTOR BUFFER 89970 KRYPTOR compact SOLUTION 1 89981 KRYPTOR compact SOLUTION 2 89982 KRYPTOR compact SOLUTION 3 89983 KRYPTOR compact SOLUTION 4 89984 KRYPTOR compact DILCUP 89985 KRYPTOR compact REACT 89986 6 Princip Fjern snavs med papir med god sugeevne. Alt materiale, der anvendes til rengøring, skal bortskaffes som infektiøst laboratorieaffald. Undgå at det kommer i afløb, vand, jorden. Brugte reagensplader og reagenskits bortskaffes som potentielt infektiøst laboratorieaffald i henhold til de lokale bestemmelser Hver beholder skal returneres til den lokale gensstation. Måleprincippet for KRYPTOR/KRYPTOR compact/kryptor compact PLUS er baseret på den såkaldte TRACE Technology (Time-Resolved Amplified Cryptate Emission), som måler det signal, der udsendes fra et immunkompleks uden tidsforsinkelse. Grundlaget for TRACE Technology er en ikke-radiativ energioverførsel fra en donor (en kasseagtig struktur med et europiumion i midten [kryptat]) til en acceptor, som er en del af et kemisk modificeret lysopsamlende algalprotein (XL 665). Nærheden af donor (kryptat) og acceptor (XL 665), når de er en del af et immunokompleks og den spektrale overlapning mellem donoremission og acceptorabsorptionspektra på den anden side, forstærker det fluorescerende kryptatsignal og forlænger PAPP-A KRYPTOR Betjeningsvejledning (Version R16da) Side 2 Af 5
samtidig levetiden af acceptorsignalet, hvilket giver mulighed for måling af midlertidigt forsinket fluorescens. Præcis måling af analytkoncentration: Når prøven fremkaldes med en nitrogenlaser med 337 nm, udsender donoren (kryptat) et langvarigt fluorescerende signal i millisekunder ved 620 nm, mens acceptor (XL 665) genererer et kortvarigt signal i nanosekunder ved 665 nm. Når de to komponenter bindes i et immunokompleks, sker signalforstærkelsen og forlængelsen af acceptorsignalets levetid ved 665 nm, således at det kan måles i µ-sekunder. Det langvarige signal er proportionelt med koncentrationen af det analyt, der skal måles. Pålidelig overlapsforebyggelse: De ikke-specifikke signaler, fx signaler fra det kortvarige og ubundne acceptor XL 665 og mellem-specifikke interferenssignaler, der afhænger af den naturlige fluorescens i prøven, fjernes ved den midlertidige forsinkelse i fluorescensmålingen. Det signal, der genereres af kryptatet ved 620 nm, fungerer som en intern reference og måles samtidigt med det langvarige acceptorsignal ved 665 nm, som er det specifikke signal. En eventuel interferenspåvirkning, fx fra uklar sera, korrigeres automatisk ved hjælp af det internt beregnede styrkeforhold mellem bølgelængderne. 7 Vejledning Prøvevolumen... 50 µl Inkubationstid... 19 min Resultater angives i... mu/l Omregningsfaktor... mu/l 0,001 = IU/L Direkte måleområde... 0,004 6 IU/L Måleområde med automatisk fortynding... 0,004 90 IU/L Prøvetype... serum eller hepariniseret plasma Kitstabilitet i instrumentet... 4 uger Kalibrator... 1 punkt Kalibreringsstabilitet... 15 dage Analyseprincip... sandwich Hvis analysen skal udføres inden for 24 timer efter blodprøvetagningen, kan prøverne opbevares ved 2 8 C. Hvis ikke, bør de deles i alikvotter og opbevares nedfrosset ( 20 C). Gentagen nedfrysning og optøning anbefales ikke. Anvend ikke EDTA-plasma: der opnås drastisk sænkede PAPP-A-niveauer med denne type prøve som følge af uforligelighed mellem EDTA og PAPP-A/proMBP-komplekset. Citratplasma bør ikke anvendes. Anbring prøven i et reagensglas til i KRYPTOR/KRYP PLUS (11 17 mm i diameter). Dette kan være det primære reagensglas. Reagensglasset skal kunne rumme en tom volumen, som varierer afhængigt af reagensglassets diameter. Et reagensglas på 13 mm i diameter skal kunne rumme yderligere 150 µl prøve. Hvis der anmodes om fortynding, enten automatisk eller af eren, vil den påkrævede prøvevolumen være 50 µl som maksimum. Ikteriske, hæmolytiske eller hyperlipæmiske prøver eller prøver, som er uklare eller indeholder fibrin, kan give upræcise resultater. Sådanne prøver udløser et signal fra KRYPTOR/KRYPTOR compact/kryptor compact PLUS. Betjeningen og vedligeholdelsen af KRYPTOR/KRYPTOR compact/kryptor compact PLUS er beskrevet i den tilhørende ervejledning. Når reagensenheden er åbnet, kan den opbevares på sin plads i KRYP Hver reagensenhed er identificeret for sig (stregkode), og dens maksimale anvendelsesperiode efter åbning styres af instrumentet. Reagensenheden klargøres på følgende måde: Fjern garantibåndet fra kassen. Skub låget ind ved at trykke hårdt på det (se tegningen nedenfor). Sørg for at fjerne al folien. Åbning af kittet Bemærk: Reagensenheden skal altid behandles forsigtigt for at undgå, at der dannes skum eller bobler. Skum eller bobler kan kompromittere korrekt detektion og dispensering af reagensen. For at undgå skum og bobler anbefales det at lade kittet stå med KRYPTOR/KRYPTOR compact/ KRYPTOR compact PLUS i 5 10 minutter før. Det er ikke nødvendigt at oprette en standardkurve i KRYP Instrumentet husker de nødvendige oplysninger efter indlæsning af stregkoden fra reagenskortet. Der skal udføres en kalibrering for hvert nyt reagenslot og derefter med regelmæssige mellemrum. KRYPTOR/ KRYP PLUS angiver automatisk, når der er behov for kalibrering. Både den gemte og den omkalibrerede standardkurve kan vises på skærmen. Der udføres følgende: Konjugater og prøve dispenseres til reaktionspladen, og det udsendte signal måles periodisk. Prøver med en koncentration over det direkte måleområde identificeres i løbet af de første par minutters inkubation og fortyndes derefter automatisk, hvorefter de analyseres igen. Efter måling af fluorescenssignalet sammenlignes data hentet fra softwaren med den gemte standardkurve. Kalibrering CAL Kalibreringen skal udføres for hvert reagens kit-parti og gentages løbende, hvilket sker automatisk af KRYPTOR/KRYPTOR compact/kryptor compact PLUS for at justere standardkurven. Brug kun kalibratoren en gang. Efterlad ikke kalibratoren ved stuetemperatur eller på karrusellen i mere end 2 timer. Kalibratorens stregkodekort skal aflæses for hver nyt kalibrator-lot. Flere oplysninger fremgår af ervejledningen til KRYP Kontrol CONTROL Det anbefales, at der udføres kontrol dagligt og altid efter hver kalibrering. Et kontrolreagensglas behandles som et prøvereagensglas. Rekonstituer hvert hætteglas med en mængde destilleret vand (en konduktivitet på under 50 µs/cm anbefales), som fremgår af hætteglassets mærkat. Vent 15 min på at lyofilisatet er helt opløst. Ryst forsigtigt efter rekonstitutionen. Efter rekonstitutionen må hætteglasset ikke opbevares mere end 8 timer ved 18 25 C eller 24 timer ved 2 8 C. Det anbefales at indholdet af et rekonstitueret hætteglas deles i aliquotter, som kan nedfryses ved -20 C i maksimalt 1 måned. Brug straks et af reagensglassene til måling. Efter optøning af en aliquot, blandes den forsigtigt og es straks til måling. Når en kontrolaliquot er optøet, må den ikke fryses igen. Stregkodemærkaterne es til at identificere kontrollen ved assay-tagning med KRYPTOR/KRYP PLUS. Kontrolkittets stregkode skal indtastes for hver ny kontrol. Flere oplysninger fremgår af ervejledningen til KRYP PAPP-A KRYPTOR Betjeningsvejledning (Version R16da) Side 3 Af 5
8 Kvalitetskontrol God laboratoriepraksis stiller krav om løbende måling af kontrolprøver for at sikre kvaliteten af den opnåede resultater. Prøverne skal behandles præcist på samme måde som assayprøven og det anbefales, at resultaterne analyseres ved hjælp af en passende statistisk metode. Hvis det ønskes, kan KRYPTOR/KRYPTOR compact/kryp TOR compact PLUS automatisk kontrollere assaykvaliteten med et bestemt interval ved hjælp af statistisk analyse på grundlag af Levey Jennings-grafer. De gældende nationale retningslinjer for kvalitetssikring vedrørende kvantitativ prøvetagning i et medicinsk laboratorium skal overholdes. Eksempelvis skal testens nøjagtighed og præcision overvåges ved hjælp af et internt laboratorium og/eller kommercielt tilgængeligt kontrolmateriale. Hvis der opnås en uacceptabel kontrolværdi, skal man gøre som foreskrevet i standardproceduren for laboratoriediagnostik for at fastsætte årsagen og foretage korrigerende handling. 9 Referenceområde Normale personer bortset fra graviditet Et studie af 100 formodede raske mænd og ikke-gravide kvinder viste, at 95 % af prøverne lå under 0,014 IU/L. Medianværdien var 0,01 IU/L. Normale værdier i 1. trimester af graviditeten Et vedvarende studie udført af Fetal Medicine Foundation i England, som indledningsvist var baseret på 5 000 gravide kvinder og som efterfølgende blev bekræftet ud fra mere end 35 000 prøver, gav følgende resultat med af KRYPTOR PAPP-A-analysen: Gestationsalder (gennemførte uger) n 5. percentil Median 95. percentil 11+0 > 5 000 0,632 1,587 3,986 12+0 > 5 000 1,040 2,612 6,560 13+0 > 5 000 1,543 3,874 9,730 14+0 > 5 000 2,062 5,178 13,005 Beregning af resultater i 1. trimester: Den individuelle risiko for kromosomabnormaliteter beregnes ved at medtage alle parametre ved hjælp af passende software. Følgende programmer anbefales til dette formål: ViewPoint PIA Database eller Astraia (FMF UK algoritme) samt Fast Screen pre I plus og PRC software udviklet af FMF Germany. Bemærk: Det anbefales, at hvert laboratorium fastlægger sine egne referenceområder på grundlag af repræsentative patientoplysninger og/eller tester validiteten af producentens kommercielle testkitdata. Værdierne ovenfor er oprettet for serum og er kun vejledende. 10 Analysefunktion Detektionsgrænse Påvisningsgrænsen, som beregnes ved hjælp af unøjagtighedsprofilen, er vurderet til 0,004 IU/L med en sandsynlighed på 95 %. Sensitivitet Den funktionelle analyse-sensitivitet, som påvises ved en inter-analyse-præcision på 20 % CV, er vurderet til 0,01 IU/L. Specificitet De antistoffer, der anvendes i denne analyse, muliggør bestemmelse af PAPP-A/proMBP-kompleks og udviser ingen krydsreaktion med alpha2-makroglobulin og angiotensinogen ved de fysiologiske koncentrationer, som testes. Nøjagtighed/ Linearitet Prøver med høj koncentration blev fortyndet. De opnåede genfindingsprocenter lå mellem 90 % og 110 %. Præcision/ "High Dose Hook"-effekt Der observeres ingen "High Dose Hook"-effekt op til 90 IU/L. Præcision/ reproducerbarhed for intra-analyse CV IU/L Intra-analyse CV < 0,05 23 % 0,05-0,3 10 % 0,3-1,5 3 % 1,5-2,5 2 % 2,5-3,5 2 % > 3,5 2 % Præcision/ reproducerbarhed for inter-analyse CV Dag til dag-specifikation for laboratorier, defineret af Fetal Medicine Foundation (FMF): GM KRYPTOR Målværdi i IU/L Inter-analyse CV CONTROL 1 ~ 0,3 3,5 % CONTROL 2 ~ 1,5 3,5 % CONTROL 3 ~ 4,0 3,0 % Målværdierne er forskellige for hvert lot. Stregkodekortet til GM KRYPTOR -kittet indeholder de nøjagtige målkoncentrationer. Intra-analyse data opnået med 3 forskellige kit-lots, 2 forskellige kalibratorlots, adskillige kalibreringer samt måling på 2 forskellige instrumenter: IU/L Interferensfaktorer Faktor Hæmoglobin Bilirubin Triglycerider Sporbarhed Inter-analyse CV < 0,05 24 % 0,05-0,3 10 % 0,3-1,5 3 % 1,5-2,5 4 % 2,5-3,5 5 % > 3,5 5 % Beskrivelse 2,5 g/l 40 mg/dl 8 g/l PAPP-A-analysen er kalibreret i henhold til WHO IRP 78/610 for graviditetassocierede proteiner med en hældning på 1,03. 11 Analyt Bibliografi [1] Bohm H, Grudzinskas JG, Rosen S, Seppala M, Tatarinov YS, Chard T, Klopper A, Schultz-Larsen P, Sizaret P, Teisner B. Reference preparation for assay of some pregnancy and cancer associated proteins. Lancet. 1980 Oct 11;2 (8198):796. [2] Lin TM, Galbert SP, Kiefer D, Spellacy WN, Gall S. Characterization of four human pregnancy-associated plasma proteins. Am J Obstet Gynecol. 1974 Jan 15;118(2):223-36. [3] Oxvig C, Sand O, Kristensen T, Kristensen L, Sottrup-Jensen L. Isolation and characterization of circulating complex between human pregnancy-associated plasma protein-a and proform of eosinophil major basic protein. Biochim Biophys Acta. 1994 Dec 15;1201(3):415-23. PAPP-A KRYPTOR Betjeningsvejledning (Version R16da) Side 4 Af 5
[4] Oxvig C, Haaning J, Kristensen L, Wagner JM, Rubin I, Stigbrand T, Gleich GJ, Sottrup-Jensen L. Identification of angiotensinogen and complement C3dg as novel proteins binding the proform of eosinophil major basic protein in human pregnancy serum and plasma. J Biol Chem. 1995 Jun 9;270(23):13645-51. [5] Bindra R, Heath V, Liao A, Spencer K, Nicolaides K H. One-stop clinic for assessment of risk for trisomy 21 at 11-14 weeks: a prospective study of 15 030 pregnancies. Ultrasound Obstet Gynecol 2002; 20:219-225. [6] Von Kaisenberg C S, Gasiorek-Wiens A, Bielicki M, Bahlmann F, Meyberg H, Kossakiewicz A, Pruggmayer M, Kamin G, Fritzer E, Harris C, Arnold N. Screening for trisomy 21 by maternal age, fetal nuchal translucency and maternal serum biochemistry at 11-14 weeks: a German multicenter study. Journal of Maternal-Fetal and Neonatal Medicine 2002; 12:89-94. [7] Tul N, Spencer K, Noble P, Chan C, Nicolaides K. Screening for Trisomy 18 by fetal nuchal translucency and maternal serum free β-hcg and PAPP-A at 10-14 weeks of gestation. Prenatal Diagnosis 1999; 19:1035-1042. [8] Nicolaides K H. Screening for chromosomal defects. Ultrasound Obstet Gynecol 2003; 21: 313-321. Teknologi [A] Mathis G, Lehn JM.: Trace Another Story of Time. Isotopics 1995; Vol. 9. [B] Mathis G., Clin. Chem. 1993; 39:1953-9. [C] KRYPTOR/KRYP PLUS Brugervejledningen. [D] KRYPTOR/KRYP PLUS Vejledning. 12 Symboler Følgende symboler anvendes i vejledningen for og produktmærkning af KRYPTOR/KRYP PLUS-produkter. Symbol Anvendelse Symbol Anvendelse Symbol Anvendelse Reference til tiltænkt anvendelse af medicinsk udstyr IVD In vitro-diagnostisk medicinsk udstyr LOT Lotnummer CONT Indhold CAL Kalibrator CONTROL Kontrol BUF Buffer SOLN 1 KRYPTOR SOLUTI ON 1/ KRYPTOR compact SOLUTION 1 SOLN 2 KRYPTOR SOLUTI ON 2/ KRYPTOR compact SOLUTION 2 SOLN 3 KRYPTOR SOLUTI ON 3/ KRYPTOR compact SOLUTION 3 SOLN 4 KRYPTOR SOLUTI ON 4/ KRYPTOR compact SOLUTION 4 CONT BAGS Indeholdte poser BAGS Poser CONT PLATES Indeholdte plader PLATES Plader CONT VIALS Indeholdte hætteglas VIALS Hætteglas VIAL Hætteglas H 2 O Anvend den angivne mængde destilleret vand (der anbefales en konduktivitet på mindre end 50 µs/cm) til rekonstitution, fx 0,75 ml LYOPH Frysetørret RCNS Rekonstituer Producent Holdbar til Grønt mærke i henhold til tysk lov Registreret varemærke Varenummer/katalognummer Indeholder nok til (antal) tests, fx 50 Se sanvisning vedrørende anvendelse Se medfølgende CD Biologisk risiko Brug beskyttelseshandsker Brug beskyttelsesbriller Vask hænderne Generel regulatorisk markering Generel forbudsmarkering Rygning forbudt Mad og drikkevarer må ikke nydes Skadelig Irriterende Varemærke for TRACE-teknologi Temperaturbegrænsning CE overensstemmelsesmærkning i henhold til direktiv 98/79/EF om medicinsk udstyr til in vitro-diagnostik Må ikke genes CE overensstemmelseserklæring i henhold til direktiv 98/79/EF om medicinsk udstyr til in vitro-diagnostisk, bilag II med reg. nummer for anmeldte myndighed Advarsel, se de medfølgende dokumenter Foranstaltninger vedrørende tilfældig udløsning Affald Kun til vurdering af IVD-funktionen PAPP-A KRYPTOR Betjeningsvejledning (Version R16da) Side 5 Af 5