Fra dyrkning Til teknologi PCR en test for mastitisbakterier via ydelseskontrolprøver Tema 11 Få maks. ud af din højteknologi Dansk Kvæg Kongres 24 februar 2009 Jørgen Katholm, Mejeriforeningen Side 1 / 03-11-2009/ pr-1
PCR Polymerase Chain Reaction Opkoncentration af DNA i prøven Kræver ikke levende bakterie Side 2 / 03-11-2009/ xxxxx
Før dyrkning af mastitis bakterier Prøveudtagning Ud strygning Dyrkning i 24-48 timer Side 3 / 03-11-2009/ xxxxx
Før dyrkning af mastitis bakterier Koloni vækst hæmolyse mikroskopi Katalase test KOH test Aesculin CAMP-test Koagulase Side 4 / 03-11-2009/ xxxxx
Nu PCR på mastitis prøver 2 timers ekstraktion 2 timers maskinaflæsning Ct værdi eks B - streptokok Real Time PCR Side 5 / 03-11-2009/ xxxxx
Fremtid Ydelseskontrolprøver Diagnose på infektion Malkning Ydelseskontrol Laboratorium Diagnose: Stafylokokkus aureus Side 6 / 03-11-2009/ xxxxx
Perspektiver Mulighed for udvælgelse af enkeltdyr til undersøgelse af ydelseskontrolprøver hos Eurofins (Para-tb, Salmonella, PCR). Mulighed for bestilling i dyreregistrering inden sommer 2009. 200.000 tilfælde af yverbetændelse Over halvdelen milde tilfælde - nykælvere og høje celletal 50.000 Goldbehandlinger kræver ved lov d.d. dyrlægeudtagne mælkeprøver og påvist infektion Sanering / holdopdeling stafylokokkus aureus og B streptokokker 6% af mælkebesætninger har B-streptokokker Side 7 / 03-11-2009/ xxxxx
Påviste bakterier og resistensgen Stafylokokker 2 stammer Streptokokker 3 stammer E. Coli Samt 8 andre mastitis bakterier Beta lactamase - penicillin resistens gen - blaz MANGLER Gær Side 8 / 03-11-2009/ xxxxx
Vurdering af PCR-testen, Finland M. T. Koskinen et al. (in press) De 454 stammer fra klinisk mastitis og 149 resistensstammer (blaz gen) Andel af sand positive (Sensitivitet) 100% Andel af sand negative (Specificitet) 100% 79 prøver fra klinisk mastitis negative ved almindelig dyrkning Fundet positive ved PCR 34 prøver Side 9 / 03-11-2009/ xxxxx
Vurdering af PCR på ydelseskontrolprøver kontrolforening CanWest DHI (Canada) En besætning med 229 prøver 34 stafylokokkus aureus ved dyrkning heraf 32 positive på ydelseskontrol PCR samt 8 ekstra positive Godkendt til brug Ydelseskontrolprøver i Canada Til undersøgelse af kirtelprøver i Holland Side 10 / 03-11-2009/ xxxxx
Side 11 / 03-11-2009/ xxxxx
Opdelt i tre hold efter B-smitte 2007 Side 12 / 03-11-2009/ xxxxx
183 Ko-blandeprøver Side 13 / 03-11-2009/ xxxxx
181 Ydelseskontrol prøver Side 14 / 03-11-2009/ xxxxx
Dyrkning på 183 koprøver og PCR på 181 ydelseskontrolprøver Dyrkning Positiv Negativ Positiv 17 14 PCR Negativ 6 144* Andel af sand positive 17/23 74% Andel af sand negative 144/158 91% *Ko 2583 korrekt negativ men havde B-streptokokker i to tørre kirtler Side 15 / 03-11-2009/ xxxxx
Dyrkning og PCR på 16 Ko-omprøver 14 kun PCR positive og 2 kun dyrknings positive Dyrkning Positiv Negativ Positiv 1** 0 PCR Negativ 1* 14*** *PCR positive ved første test. Kun 1 koloni på pladen **dyrknings positiv ved første test *** 2458 positiv PCR første test, negativ omprøve, B mastitis 14 dage senere 4 ønskede køer til omprøve kunne ikke undersøges da de var behandlet Side 16 / 03-11-2009/ xxxxx
Dyrkning og PCR på tankprøver (n=11) og koprøve (n=28) Dyrkning Positiv Negativ PCR Positiv 11 1* Negativ 0 27 *2458 kontrol efter behandling. Tidligere også PCR positiv og B-mastitis Side 17 / 03-11-2009/ xxxxx
16 januar 2009 Behandling og flytning af 24 køer Side 18 / 03-11-2009/ xxxxx
ko 2335 positiv B yverbetændelse 14 oktober 2007 positiv tankmælk Side 19 / 03-11-2009/ xxxxx
Ydelseskontrol 135 køer 2X8 Side 20 / 03-11-2009/ xxxxx
Besætning 2. Dyrkning på 135 koprøver og PCR på 135 ydelseskontrolprøver Dyrkning Positiv Negativ PCR Positiv 5 7 Negativ 0 123 Andel af sand positive 5/5 100% Andel af sand negative 123/130 96% Side 21 / 03-11-2009/ xxxxx
Besætning 2. Omprøver af 12 køer 7 kun positive på PCR and 5 positive på PCR og dyrkning Dyrkning Positiv Negativ PCR Positiv 5 2 Negativ 0 5* *Ko 1855 positiv PCR og dyrkning ved første undersøgelse Side 22 / 03-11-2009/ xxxxx
Behandling 5 køer 10 feb. 2009 Side 23 / 03-11-2009/ xxxxx
De næste måneder Beskivelse af og reduktion af risiko for overslæb ved automatisk udtagne ydelseskontrolprøver Beskrivelse af forholdsregler for hygiejnisk håndtering af ydelseskontrolprøver Tilladelse fra myndighederne til at bruge ydelseskontrolprøver forud for antibiotikagoldning Side 24 / 03-11-2009/ xxxxx
Side 25 / 03-11-2009/ xxxxx