2015/12/02 A93A01304BDA A11A01667 56 ml 14 ml Pentra C400 Diagnostisk reagens til kvantitativ in vitro-bestemmelse af glucose ved hexokinasemetoden i serum, plasma og urin ved kolorimetri. QUAL-QA-TEMP-0846 Rev.9 Applikationsudgivelse Serum, plasma: GluK Urin: GluHK-U Tilsigtet anvendelse reagens er beregnet til kvantitativ, in vitro-diagnostisk bestemmelse af glucose i humant serum, plasma og urin ved brug af glucose hexokinasemetoden ved kolorimetri. Glucosemålinger anvendes til diagnosticering og behandling af kulhydratmetabolismesygdomme, inklusive diabetes mellitus, neonatal hypoglykæmi, idiopatisk reaktiv hypoglykæmi og ø-cellekarcinom i pancreas. Klinisk interesse (1) Glucose er den vigtigste energikilde for menneskets krop. Glucose fra mad konveretes enten i glycogen til oplagring i leveren eller i trigycerider til oplagring i fedtvæv. Indholdet af blodsukker reguleres af virkningen af forskellige hormoners, af hvilke to antagonismer er insulin og glucagon. Ved fysiologiske tilstande udskilles glucose ikke i urinen. Dosering af blodsukker bruges til diagnostiske påvirkninger af kulhydratmetabolismen såsom diabetes, neonatal og idiopatisk hypoglykæmi og pancreaspatologier. De væsentligste, fysiologiske problemer er forbundet med forekomst af hyperglykæmi (diabetes mellitus type I og II). Diabetes type I er insulinafhængig og forekommer primært inden 30-årsalderen. Diabetes type II er ikke insulinafhængig og forekommer primært efter 40- årsalderen. Men det kan forekomme tidligere hos fede personer. Andre diabetestyper kommer af sekundær oprindelse og forekommer efter endokrine sygdomme eller leversygdomme. Metode (1) Enzymatisk metode (hexokinase). Bestemmelse af glucose vha. følgende reaktioner: HK D-glucose + ATP > Glucose-6-phosphat + ADP G-6-PDH Glucose-6-phosphat + NAD + > D-gluconat-6-phosphat + NADH + H + (HK = hexokinase, G-6-PDH = glucose-6-phosphatdehydrogenase) Reagenser er klar til brug. Reagens 1: Pipes buffer, ph 7,60 NAD + ATP 100 3,8 2,2 Natriumazid < 0,1% Reagens 2: Hexokinase G-6-PDH Magnesiumsulfat 8500 U/L 8500 U/L 20 Natriumazid < 0,1% 1 / 6
skal anvendes i henhold til denne reagensvejledning. Producenten kan ikke garantere ydeevnen, hvis der anvendes andre fremgangsmåder. Håndtering 1. Tag begge hætter af kassetterne. 2. Hvis der er skum, skal det fjernes med en plastikpipette. 3. Placer kassetten i det afkølede Pentra C400- reagensrum. Kalibrator Til kalibrering skal der anvendes: Multical, ref. A11A01652 (medfølger ikke) 10 x 3 ml (frysetørret) Kontrol Til intern kvalitetskontrol skal der anvendes: N Control, ref. A11A01653 (medfølger ikke) 10 x 5 ml (frysetørret) P Control, ref. A11A01654 (medfølger ikke) 10 x 5 ml (frysetørret) Urine Control L/H, ref. A11A01674 (medfølger ikke) 1 x 10 ml + 1 x 10 ml Hver kontrol skal analyseres dagligt og/eller efter en kalibrering. Frekvensen af kontroller og konfidensintervallerne skal svare til laboratoriets retningslinjer og de landespecifikke forskrifter. Nationale og regionale bestemmelser bør følges ved testning af kvalitetskontrolmaterialer. Resultaterne skal ligge inden for de fastlagte konfidensgrænser. Hvert laboratorium skal etablere en procedure, som skal følges, hvis resultaterne overskrider konfidensgrænserne. Nødvendige materialer, der ikke er vedlagt Automatiseret klinisk kemi-analysator: Pentra C400 Kalibrator: Multical, ref. A11A01652 Kontroller: N Control, ref. A11A01653, og P Control, ref. A11A01654 Urine Control L/H, ref. A11A01674 Standardlaboratorieudstyr. Prøve (2, 3) Serum. Plasma i lithiumheparin. Urin. Andre antikoagulanter end de, der er angivet heri, er ikke blevet testet af HORIBA Medical og anbefales ikke til anvendelse sammen med denne analyse. Stabilitet: Stabiliteten af glucose i prøver afhænger af opbevaringstemperatur, bakteriel kontamination og glykolyse. Serum, plasma: I adskilt, ikke-hæmolyseret sterilt serum (2): Ved 25 C: 8 timer Ved 4 C: 72 timer Plasma- eller serumprøve uden konserveringsmiddel skal adskilles fra celler eller blodkoagel i en halv time efter prøvetagning. I ikke-centrifugeret blod ved stuetemperatur er det gennemsnitlige fald af glucose i serum ca. 7% pr. time (0,28 til 0,56 eller 5 til 10 ). Dette reducerer resultater af glykolyse. Urin: For døgnurin kan der tilsættes en 5 ml glacial eddikesyre til beholderen inden prøvetagning. Uden konserveringsmidler kan tab af glucose være -40% efter 24 timer ved stuetemperatur (3). Referenceområde Hvert laboratorium skal etablere sine egne referenceområder. De værdier, der angives her, er kun vejledende. Serum, plasma (4): 0,70-1,15 g/l 70-115 3,89-6,39 Urin (5, 6): < 0,84 (< 15 ) < 2,8 mmol/24 timer (0,5 g/24 timer) 2 / 6
Opbevaring og stabilitet Reagenser i uåbnede kassetter er stabile op til udløbsdatoen på etiketten, hvis de opbevares mellem 2-8 C. Stabilitet efter åbning: se afsnittet "Ydeevne på Pentra C400". Affaldshåndtering Der henvises til de lokale lovbestemmelser. Der henvises til de lokale lovbestemmelser. Dette reagens indeholder mindre end 0,1% natriumazid som konserveringsmiddel. Natriumazid kan reagere med bly og kobber og danne eksplosionsfarlige metalazider. Generelle forholdsregler a Dette reagens er kun beregnet til professionel in-vitrodiagnosticering. Kun efter ordination. Dette reagens er klassificeret som ufarligt i henhold til direktiverne (EF) nr. 1272/2008. Må ikke indtages. Undgå kontakt med hud og slimhinder. Overhold forholdsreglerne for standard laboratoriebrug. Reagenskassetterne er beregnet til engangsbrug og skal kasseres i overensstemmelse med lokale lovbestemmelser. Se sikkerhedsdatabladet, som følger med reagenset. Produktet må ikke anvendes, hvis der er synlige tegn på biologisk, kemisk eller fysisk forringelse. Det er brugerens ansvar at kontrollere, at dette dokument er relevant for det anvendte reagens. Ydeevne på Pentra C400 Nedenstående ydelsesdata er repræsentative for ydeevnen på HORIBA Medical systemer. Serum, plasma Antal test: 200 test b Hvis antallet af bestilte test er lavt, og Pentra C400 brugeren har til hensigt at bruge kassetten til maks. stabilitet efter isætning, anbefales det af HORIBA Medical at bruge forbrugsvaren XEC232 (kitmembran) til at opnå det antal test, der er angivet i denne vejledning. Reagensstabilitet efter isætning i instrumentet: Efter åbning er reagenskassetten, hvis den placeres i det afkølede Pentra C400 rum, stabil i 55 døgn. Prøvevolumen: 2 µl/test Detektionsgrænse: Detektionsgrænsen bestemmes i henhold til Valtecprotokollen (7) og er lig med 0,11 (1,98 ). Nøjagtighed og præcision: Repeterbarhed (inden for kørselspræcision) Tre prøver med lav, middel og høj koncentration og to kontroller er blevet testet 20 gange i henhold til anbefalingerne i Valtec-protokollen (7). Kontrolprøve 1 5,38 96,90 0,66 Kontrolprøve 2 13,99 251,90 0,81 Prøve 1 1,73 31,15 1,18 Prøve 2 5,24 94,35 0,52 Prøve 3 14,08 253,45 0,74 Reproducerbarhed (total præcision) 2 prøver (lave og høje niveauer) og 2 kontroller testes i duplikat i 20 dage (2 serier om dagen) i henhold til anbefalingerne i CLSI (NCCLS), EP5-A-protokollen (8). Kontrolprøve 1 5,45 98,18 2,00 Kontrolprøve 2 14,05 252,88 1,19 Prøve 1 5,55 99,86 2,03 Prøve 2 15,19 273,38 1,48 Måleområde: Analysen bekræftede målingsområdet fra 0,11 til 50,00 (1,98 til 900,0 ) med en automatisk efterfortynding på op til 150,00 (2700,0 ). a Modifikation: modifikation af generelle forholdsregler. b Modifikation: reference for kitmembran ændret. 3 / 6
Reagenslineariteten er blevet vurderet op til 50,00 (900,0 ) i henhold til anbefalingerne i CLSI (NCCLS), EP6-A-protokol (9). Korrelation: 103 patientprøver (serum) korreleres med et kommercielt reagens, der er taget som reference, i henhold til anbefalingerne i CLSI (NCCLS), EP9-A2 protokollen (10). Ligningen for den allometriske linje, der er opnået ved hjælp af Passing-Bablock-regressionsproceduren (11), er: Y = 0,93 X + 0,15 () Y = 0,93 X + 2,70 () med en korrelationskoefficient r 2 = 0,9958. Interferens: Hæmoglobin: Ingen signifikant påvirkning er observeret op til 290 µmol/l (500 ). Triglycerider: Ingen signifikant påvirkning er observeret op til en Intralipid koncentration (repræsentativ for lipæmi) på 7 (612,5 ). Total bilirubin: Ingen signifikant påvirkning er observeret op til 616 µmol/l (36 ). Direkte bilirubin: Ingen signifikant påvirkning er observeret op til 616 µmol/l (36 ). Andre begrænsninger gives af Young i form af en liste over stoffer og foranalysevariabler kendt for at påvirke denne metode (12, 13). Kalibreringsstabilitet: Reagenset blev kalibreret på dag 0. Kalibreringsstabiliteten er blevet kontrolleret ved at teste to kontrolprøver. Kalibreringsstabiliteten er 14 døgn. Bemærk: Rekalibreringen anbefales, når reagenslots ændrer sig, og når resultaterne af kvalitetskontrollen falder uden for det etablerede område. Applikationsudgivelse: Urin Antal test: 200 test b Hvis antallet af bestilte test er lavt, og Pentra C400 brugeren har til hensigt at bruge kassetten til maks. stabilitet efter isætning, anbefales det af HORIBA Medical at bruge forbrugsvaren XEC232 (kitmembran) til at opnå det antal test, der er angivet i denne vejledning. Reagensstabilitet efter isætning i instrumentet: Efter åbning er reagenskassetten, hvis den placeres i det afkølede Pentra C400 rum, stabil i 55 døgn. Prøvevolumen: 3 µl/test Kvantiteringsgrænse: Grænsen for kvantitering bestemmes i henhold til CLSI (NCCLS), EP17-A protokol (14), og er lig med 0,18 (3,3 ). Detektionsgrænse: Detektionsgrænsen bestemmes i henhold til CLSI (NCCLS), EP17-A protokol (14), og er lig med 0,16 (2,9 ). Nøjagtighed og præcision: Repeterbarhed (inden for kørselspræcision) 3 prøver med lav, middel og høj koncentration og 2 kontroller testes 20 gange i henhold til anbefalingerne i Valtec-protokollen (7). Kontrolprøve 1 1,61 29,0 1,25 Kontrolprøve 2 16,00 288,0 0,42 Prøve 1 1,04 18,8 2,56 Prøve 2 9,98 179,7 0,73 Prøve 3 29,65 533,7 0,76 Reproducerbarhed (total præcision) 5 prøver med lave, middel og høje niveauer og 2 kontroller testes i duplikat i 20 dage (2 serier om dagen) i henhold til anbefalingerne i CLSI (NCCLS), EP5-Aprotokollen (8). Kontrolprøve 1 1,64 29,4 3,57 Kontrolprøve 2 16,17 291,1 2,62 Prøve 1 0,81 14,6 4,82 Prøve 2 5,81 104,5 1,21 b Modifikation: reference for kitmembran ændret. 4 / 6
Prøve 3 9,72 175,0 2,96 Prøve 4 27,57 496,2 2,74 Prøve 5 46,04 828,7 1,59 Måleområde: Analysen bekræftede målingsområdet fra 0,22 til 50,00 (3,96 til 900,0 ) med en automatisk efterfortynding på op til 150,00 (2700,0 ). Reagenslineariteten er blevet vurderet op til 50,00 (900,0 ) i henhold til anbefalingerne i CLSI (NCCLS), EP6-A-protokol (9). Korrelation: 104 patientprøver (urin) korreleres med et kommercielt reagens, der er taget som reference, i henhold til anbefalingerne i CLSI (NCCLS), EP9-A2-protokol (10). Værdier fra 0,29 til 49,94 (5,22 til 898,92 ). Ligningen for den allometriske linje, der er opnået ved hjælp af Passing-Bablock-regressionsproceduren (11), er: Y = 0,96 X + 0,05 () Y = 0,96 X + 0,84 () med en korrelationskoefficient r 2 = 0,9970. Interferens: Hæmoglobin: Ingen signifikant påvirkning er observeret op til 290 µmol/l (500 ). Total bilirubin: Ingen signifikant påvirkning er observeret op til 500 µmol/l (29,3 ). Ascorbinsyre: Ingen signifikant påvirkning er observeret op til 350 µmol/l (6,16 ). Specifik massefylde: ph: Fra 1,005 til 1,035 er der ikke observeret nogen signifikant påvirkning. Fra 3,3 til 10,4, prøvens ph-værdi har ingen signifikant indvirkning. Andre begrænsninger gives af Young i form af en liste over stoffer og foranalysevariabler kendt for at påvirke denne metode (12, 13). Kalibreringsstabilitet: Reagenset blev kalibreret på dag 0. Kalibreringsstabiliteten er blevet kontrolleret ved at teste to kontrolprøver. Kalibreringsstabiliteten er 21 døgn. Bemærk: Rekalibreringen anbefales, når reagenslots ændrer sig, og når resultaterne af kvalitetskontrollen falder uden for det etablerede område. Applikationsudgivelse: Konverteringsfaktor: x 0,18 = g/l x 18 = Reference 1. Siest G, Henny J, Schiele F, Références en biologie clinique, chap.18. 2. TIETZ, Fundamentals of Clinical Chemistry, Fith Edition, Edited by C.A. Burtis, E.R. Ashwood, Part IV Analytes, Chapter 23 Carbohydrates, Specimen Collection and Storage, Measurement of Glucose in Body Fluids, 444. 3. Sacks D.B, M.B., Ch.B., F.R.C. Path., Carbohydrates, TIETZ Textbook of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics. 4 ème Ed., Burtis CA, Ashwood ER, Bruns DE (Elseviers Saunders eds., St Louis, USA), (2006): 869. 4. THOMAS L, Clinical Laboratory Diagnostics: Use and Assessment of Clinical Laboratory Results, 1 st ed. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellshaft, (1998): 132. 5. Thomas L. Ed. Clinical Laboratory Diagnostics. 1 st ed. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellshaft, (1998): 192-202. 6. Roberts WL, McMillin GA, Burtis CA, Bruns DE, Reference Information for the the Clinical Laboratory, TIETZ Textbook of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics. 4 ème Ed. Burtis C.A., Ashwood E.R., Bruns D.E., (Elsevier Saunders eds., St Louis, USA, (2006): 2270-2271. 7. Vassault A, Grafmeyer D, Naudin C et al. Protocole de validation de techniques (document B). Ann. Biol. Clin. (1986) 44: 686-745. 8. Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices. Approved Guideline, CLSI (NCCLS) document EP5-A (1999) 19 (2). 9. Evaluation of the Linearity of Quantitative Analytical Methods. Approved Guideline, CLSI (NCCLS) document EP6-A (2003) 23 (16). 10. Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples. Approved Guideline, 2 nd ed., CLSI (NCCLS) document EP9-A2 (2002) 22 (19). 11. Passing H, Bablock W. A new biometrical procedure for testing the equality of measurements from two different analytical methods. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. (1983) 21: 709-20. 12. Young DS. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests. 4 th Edition, Washington, DC, AACC Press (1997) 3: 143-163. 5 / 6
13. Young DS. Effects of Preanalytical Variables on Clinical Laboratory Tests. 2 nd Edition, Washington, DC, AACC Press (1997) 3: 120-132. 14. Protocols for determination of limits of detection and limits of quantitation. Approved Guideline, CLSI (NCCLS) document EP17-A (2004) 24 (34). 6 / 6