BACTEC PANTA PLUS Kit TILSIGTET BRUG BACTEC PANTA PLUS er et antimikrobielt supplement, som består af BACTEC PANTA Supplement og BACTEC Reconstituting Fluid (rekonstitueringsvæske). Det bruges primært med BACTEC 460TB-systeminstrumentet. BACTEC PANTA Supplement anbefales i tillæg til BACTEC 12B-mediet under den primære isolation af mykobakterier og direkte undersøgelse af medikamentfølsomhed fra kliniske præparater. 1,2 PANTA Supplement undertrykker normalflora, som er tilknyttet opløste og dekontaminerede kliniske præparater. RESUMÉ OG FORKLARING Eftersom BACTEC-systemet benytter et væskemedie, er det vigtigt at tilsætte et antimikrobielt supplement for at undertrykke vækst af forurenende mikroorganismer, som kan overleve dekontamineringsprocessen af præparater. Kontaminering kan reduceres ved at supplere mediet med en blanding af antimikrobielle stoffer før inokulering. PANTA Supplement, som indeholder polymyxin B, amphotericin B, nalidixicsyre, trimethoprim og azlocillin, stilles til rådighed i en frysetørret form. Koncentrationerne af antimikrobielle stoffer er blevet valgt efter en omhyggelig evaluering af deres virkning på væksten af mykobakterier og deres evne til at reducere ikke-mykobakteriel kontaminering. 1,3 Rekonstitueret PANTA tilsættes 12B-glas før inokulering af præparatet (inokulering af præparatet skal udføres inden for 2 timer af tilsættelsen af PANTA til 12B-glasset). PANTA-resten bør fryses ved -20 C eller koldere i op til 6 måneder. Tilsættelsen af PANTA skulle forbedre den primære isolation af mykobakterier fra kliniske præparater. Rekonstitueringsvæske indeholder en vækstfremmende substans POES (polyoxyethylenstearat). 4 Derfor anbefales det, at når der ikke bruges PANTA, i tilfældet med et sterielt indsamlet præparat, tilsættes der 0,1 ml af rekonstitueringsvæske alene til 12B-mediet før inokulering af præparatet. PROCEDURENS PRINCIPPER De fleste ikke-sterile kliniske præparater, som behandles for mykobakteriel inokulering, indeholder anden bakteriel flora end mykobakterier. Disse bakterier overlever til tider den dekontamineringsprocedure, som generelt bruges i et klinisk laboratorium. Eftersom mykobakterier vokser langsommere end de kontaminerende bakterier, kan disse bakterier udkonkurrere kulturen, især i flydende væskemedier. Omhyggeligt udvalgte antimikrobielle stoffer, som inhiberer grampositive bakterier, gramnegative bakterier og svamp, men som ikke inhiberer mykobakterier betydeligt, kan bruges til selektivt at inhibere kontaminering. Samtidigt tilsættes der en vækstfremmende substans, POES (polyoxyethylenstearat), som findes i rekonstitueringsvæsken, til mediet, hvilket minimerer den hæmmende virkning af de antimikrobielle stoffer på mykobakterier, såvel som fremmer væksten af mykobakterier, især på langsomt voksende Mycobacterium tuberculosis. REAGENSER BACTEC PANTA PLUS Kit-dyrkningsglassene indeholder følgende aktive ingredienser (inden behandling): BACTEC PANTA Supplement Frysetørret antimikrobielt supplement: hvert glas har følgende formular: Polymyxin B...10.000 enheder Amphotericin B...1.000 µg Nalidixinsyre...4.000 µg Trimethoprim...1.000 µg Azlocillin...1.000 µg BACTEC Reconstituting Fluid, 10 ml hvert Pr. ml behandlet vand: Polyoxyethylenstearat (POES)... 4 mg Advarsler og forholdsregler: Til in vitro diagnostik. Dette produkt indeholder tørt naturgummi. Patogene mikroorganismer, deriblandt hepatitisvira og HIV, kan forekomme i kliniske prøver. Standard forholdsregler 5-8 og institutionelle retningslinier skal overholdes ved håndtering af alle emner, der er kontamineret med blod eller andre kropsvæsker. PP115JAA 2010/07 Dansk
MÅ IKKE ANVENDES, hvis det frysetørrede produkt viser tegn på fugt. Inden brug skal hvert glas kontrolleres for tegn på beskadigelse, nedbrydning eller kontaminering. Hvis et dyrkningsglas viser tegn på kontaminering MÅ DET IKKE BRUGES. Dyrkningsglas, som viser tegn på beskadigelse, bør kasseres. I sjældne tilfælde kan glasflaskerne være revnet, og halsen kan gå i stykker, når hætten fjernes eller under håndtering. Positive 12B Mycobacteria Medium-dyrkningsglas til videredyrkning eller farvning, osv.: Inden prøvetagning er det nødvendigt at frigøre gas, som kan samle sig på grund af det mikrobielle stofskifte. Anvend konstant sterile teknikker og etablerede forholdsregler mod mikrobielle farer. Procedurer skal udføres i et egnet biologisk sikkerhedsskab i et rum med passende ventilationssystem som anbefalet af CDC. 9 Benyt passende beskyttelseskittel, maske og handsker, mens der håndteres præparater og kulturer af potentielle patogener. Følg CDC- og OSHA-anbefalingerne. 9 For at minimere risikoen for lækage under inokuleringen skal der bruges sprøjter med permanent fastmonterede kanyler eller fastgjorte Luer-Lok-spidser. Opbevaringsinstruktioner Før rekonstituering skal BACTEC PANTA Supplement-glas opbevares et koldt, 2 8 C, tørt sted uden for direkte sollys. Når først de er rekonstitueret, kan de opbevares ved 2 8 C i op til en uge. Brugere, som kun anvender små mængder, kan fryse små afmålinger ved -20 C eller koldere, således at et reagensglas kan optøs til hvert brug (op til 6 måneder). Må ikke fryses igen efter optøning. Beskyt mod lys. Udløbsdatoen gælder den uåbnede flaske med det frysetørrede produkt, når denne opbevares som anbefalet. PRØVEINDSAMLING Følg de procedurer, som er beskrevet på indlægssedlen til BACTEC 12B Mycobacteria Medium (PP-116JAA) og i BACTEC 460TB System Product and Procedure Manual (MA-0029). PROCEDURE Vedlagte materialer: BACTEC PANTA Supplement BACTEC Reconstituting Fluid Nødvendige materialer, der ikke er vedlagt: BACTEC 12B Medium BACTEC 460TB Instrument 5 ml sprøjte Tuberkulinsprøjte med permanent fastmonteret kanyle Desinfektionsmiddel 70 % isopropylalkohol serviet Tilsæt 5 ml af BACTEC Reconstituting Fluid til det frysetørrede PANTA Supplement. Bland indtil det er fuldstændig opløst. Tilsæt 0,1 ml af det rekonstituerede PANTA til hvert 12B Mycobacteria Medium-glas før inokulering af præparatet. Inokulering af præparatet skal udføres inden for 2 timer af tilsættelsen af PANTA til glasset. Sterilt indsamlede præparater kan inokuleres uden tilsættelse af PANTA i 12B Mycobacteria Medium. Visse laboratorier foretrækker at inokulere sådanne præparater i to 12B-medieglas, et med PANTA, og et uden PANTA. Før inokulering tilsættes 0,1 ml af BACTEC Reconstituting Fluid, men kun hvis et præparat er inokuleret uden PANTA, eller hvis der er lavet en videredyrkning i et 12B Mycobacteria Medium-glas. Kvalitetskontrol BRUG IKKE glas efter deres udløbsdato. BRUG IKKE glas med revner eller fejl. Kassér glasset på passende vis. Kvalitetskontrolcertifikater er vedlagt hvert PANTA PLUS Kit. Kvalitetskontrolcertifikater viser de testorganismer, der blev brugt til denne produkttype. BACTEC PANTA Supplement-glas, som viser tegn på nedbrydning eller fugt, og BACTEC Reconstituting Fluid-glas, der viser tegn på uklarhed, kontaminering eller misfarvning (mørkfarvning) må ikke bruges. Følg de procedurer, som er beskrevet på indlægssedlen til BACTEC 12B Mycobacteria Medium (PP-116JAA) og i BACTEC 460TB System Product and Procedure Manual (MA-0029). Som en del af den daglige vedligeholdelsesplan, skal funktionstestglas (BACTEC Performance Test Kit) testes på BACTEC 460TB-systeminstrumentet. Hvis aflæsningerne er lave, selvom funktionstestglassene blev testet korrekt, kan dette tilkendegive mulige problemer med instrumentet (se BACTEC PTK indlægsseddel, PP-046JAA). Krav til kvalitetskontrol skal udføres i overensstemmelse med gældende lokale, statslige og/eller nationale regulativer eller akkrediteringskrav og Deres laboratoriums standardkvalitetskontrolprocedurer. Det anbefales, at brugeren læser de relevante NCCLS-retningslinier og CLIA-regulativer for passende kvalitetskontrolpraksis. RESULTATER Efter tilføjelse af det rekonstituerede PANTA Supplement i 12B-mediet, undertrykkes kontamineringen, mens levedygtige mykobakterier, hvis disse findes i præparatet, vokser og kan registreres af BACTEC 460TBsysteminstrumentet. 2
PROCEDURENS BEGRÆNSNINGER BACTEC PANTA Supplement er blevet udviklet til at minimere tilgroning af kontaminerende flora. Når spytprøver er blevet utilstrækkeligt eller forkert dekontamineret, kan der dog forekomme tilgroning. Derudover kan ekstreme transporttider eller utilstrækkelige transportforhold for prøven påvirke prøvens kontamineringsgrad betydeligt. Det kan forekomme, at urenheder er modstandsdygtige overfor de antimikrobielle stoffer, der findes i PANTA-supplementet. Visse mykobakterielle stammer O (M. kansasii) kan til tider udvise hæmning af PANTA. På grund af de biologiske materialers beskaffenhed i medieprodukter og den iboende varians blandt organismer skal brugeren være opmærksom på potentielt varierende resultater i opsamlingen af visse organismer. FORVENTEDE VÆRDIER Kontamineringsgraden i BACTEC 12B-mediet for isolationen af mykobakterier fra kliniske præparater kan være lig den, der opleves med konventionelt fast medie. Hvis behandling af præparatet foretages ifølge CDCanbefalinger, 9 er kontamineringsgraden normalt inden for 5 % af det totale antal inokulerede glas som rapporteret i adskillige publikationer. 10-12 Hvis der observeres en højere kontamineringsgrad, bør proceduren for dekontaminering af præparatet gennemgås. Forøgelse af koncentrationen af natriumhydroxid (fra 4 % til 5 % med NALC) kan reducere kontamineringsgraden. Forøgelse af koncentrationen af PANTA ved at rehydrere den med 4 ml (i stedet for 5 ml) rekonstitueringsvæske kan også reducere den høje kontamineringsgrad. Se CDC-anbefalinger 9 for ændringer i processen. FUNKTIONSDATA Se indlægsseddel til BACTEC 12B Mycobacteria Medium (PP-116JAA) for at få yderligere oplysninger. BESTILLING Kat. nr. Beskrivelse 444764 BACTEC PANTA PLUS Kit, frysetørret antimikrobielt supplement (PANTA), 5 glas 442004 BACTEC 12B Medium, 4 ml, 100 pr. karton LITTERATUR 1. Libonati, J.P. et al. Effect of increased inoculum size on recovery rate of mycobacteria in BACTEC 7H12 Middlebrook Medium. Abstract C223, A.S.M. Annual Meeting, New Orleans, MO, 1984. 2. Libonati, J.P. et al. Identification and direct drug susceptibility testing of mycobacteria by the radiometric method. Abstract C300, A.S.M. Meeting, St. Louis, MO 1984. 3. Siddiqi, S.H. et al. A new antimicrobial mixture (polymyxin B, amphotericin B, nalidixic acid, trimethoprim and azlocillin) for effective suppression of non-mycobacterial contamination during primary isolation of mycobacteria. Abstract U-35. A.S.M. Meeting, Washington, D.C., 1986. 4. Siddiqi, S.H. Studies to further enhance mycobacterial growth in radiometric 7H12 Medium. Abstract U-46. A.S.M. Annual Meeting, Las Vegas, NV, 1985. 5. National Commitee for Clinical Laboratory Standards. 2001. Approved Guideline M29-A2. Protection of laboratory workers from occupationally acquired infections, 2nd ed. NCCLS, Wayne, PA. 6. Garner, J.S. 1996. Hospital Infection Control Practices Advisory Committee, U.S. Department of Health and Human Services, Centers for Disease Control and Prevention. Guideline for isolation precautions in hospitals. Infect. Control Hospital Epidemiol. 17:53-80. 7. U.S. Department of Health and Human Services. 1999. Biosafety in microbiological and biomedical laboratories, HHS Publication (CDC) 4 th ed. U.S. Government Printing Office, Washington, D.C. 8. Directive 2000/54/EC of the European Parliament and of the Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work (seventh individual directive within the meaning of Article 16(1) of Directive 89/391/EEC). Official Journal L262, 17/10/2000, p. 0021-0045. 9. Kent, P.T. et al. Public health mycobacteriology, a guide for the level III laboratory. Centers for Disease Control, Division of Laboratory Training and Consultation. Atlanta, GA, 1985. 10. Libonati, J.P. et al. Evaluation of the recovery and contamination rates of mycobacteria in the BACTEC system using increased media volume, increased inoculum size and new antimicrobial supplement (PANTA). Abstract U37, A.S.M. Meeting, Washington, D.C. 1986. 11. Roberts, G.D. et al. Evaluation of BACTEC radiometric method for recovery of mycobacteria and drug susceptibility testing of Mycobacterium tuberculosis from acid-fast smear-positive specimens. J. Clin. Microbiol. 1983, 18:689-696. 12. Takahashi, H. et al. Detection and recovery of mycobacteria by a radiometric procedure. J. Clin. Microbiol. 1983, 17:380-381. 3
4
Becton, Dickinson and Company 7 Loveton Circle Sparks, MD 21152 USA 800-638-8663 www.bd.com/ds Benex Limited Rineanna House Shannon Free Zone Shannon, County Clare, Ireland BBL, BD Logo, BACTEC, PANTA and Luer-Lok are trademarks of Becton, Dickinson and Company. 2010 BD.