11. Bilag Bilag 1

Transkript

1 11. Bilag Bilag 1

2

3 11.2. Bilag 2 HÆM-AN57 Hemoglobin F; stoffr Variant II Turbo 20, Biorad Aa Dato Initialer Titel Hb(B)-Hemoglobin F;stoffr Variant II Turbo 2,0 - Biorad Version: 2 Gældende for Dokumenttype Analyseforskrift Ledelsesansvarlig Afdelingsledelsen Fagligt ansvarlig Elsebet Møller Nielsen Udarbejdet af / dato Elsebet Møller Nielsen Godkendt af / dato Birthe Gaardahl og Elsebet Møller Nielsen Review ansvarlig / dato Elsebet Møller Nielsen Erstatter (B)Hb-Hemoglobin F;stoffr (1999) Version: 1 Ændringer i forhold til tidligere dokument Dokumentstatus Aktiv fra Nedlagt Antal papirkopier 1 Papirkopier placering Analysepladsen Hb(B)-Hemoglobin F; stoffr. Variant II Turbo 2,0 - Biorad NPUnr Prøvemateriale: Se analyseforskrift Hb(B)-Hemoglobin A1c stoffr; Variant II Turbo kit 2,0 - Biorad 2. Sikkerhed: Se analyseforskrift Hb(B)-Hemoglobin A1c stoffr; Variant II Turbo kit 2,0 - Biorad 3. Utensilier: Se analyseforskrift Hb(B)-Hemoglobin A1c stoffr; Variant II Turbo kit 2,0 Biorad 4. Fremgangsmåde: Se analyseforskrift Hb(B)-Hemoglobin A1c stoffr; Variant II Turbo kit 2,0 Biorad 5. Kontroller: Se analyseforskrift Hb(B)-Hemoglobin A1c stoffr; Variant II Turbo kit 2,0 - Biorad 6. Kalibrering: Se analyseforskrift Hb(B)-Hemoglobin A1c stoffr; Variant II Turbo kit 2,0 - Biorad 7. Beregning og svarafgivelse: HbF aflæses i % med 1 decimal i rubrikken Area %, f.eks. 5,1 % på kromatogram fra Turbo 2,0 ved F top (rubrikken Peak name). Afrundes til 0 decimaler. Gældende version findes i Q-Pulse eller i mappe på sekretærens kontor Side 1 af 3

4 HÆM-AN57 Hemoglobin F; stoffr Variant II Turbo 20, Biorad Aa Dato Initialer Svar afgives i fraktion, dvs. HbF i % (helt tal) divideret med 100, f.eks. aflæst 5% / 100 = 0,05. Svar <1% afleveres som <0,01. Se kurveeksempel på Bilag 1. Tryk analyseplads Tryk manuel resultatindtastning Tryk bruger Tryk pr. prøve Tryk prøvenummer i prøvenr. feltet Tryk søg Tryk indtast svar Skriv HbF svaret i fraktion som ovenfor beskrevet, f.eks (5%) 8. Referenceinterval: 0 30 dage 0,65 0, mdr. 0,30 0, mdr. 0,05 0, mdr. < 0,10 > 6 mdr. < 0,02 Præmature børn har en højere HbF fra fødslen. 9. Klinik: Se analyseforskrift Hb(B)-Hemoglobin A1c stoffr; Variant II Turbo kit 2,0 - Biorad 10. Fejlkilder: Se analyseforskrift Hb(B)-Hemoglobin A1c stoffr; Variant II Turbo kit 2,0 - Biorad 11. Dataopbevaring: Se analyseforskrift Hb(B)-Hemoglobin A1c stoffr; Variant II Turbo kit 2,0 Biorad 12. Tekniske bemærkninger/apparaturvejledning Se analyseforskrift Hb(B)-Hemoglobin A1c stoffr; Variant II Turbo kit 2,0 - Biorad 13. Referencer: Se analyseforskrift Hb(B)-Hemoglobin A1c stoffr; Variant II Turbo kit 2,0 - Biorad 14. Princip: Se analyseforskrift Hb(B)-Hemoglobin A1c stoffr; Variant II Turbo kit 2,0 - Biorad Gældende version findes i Q-Pulse eller i mappe på sekretærens kontor Side 2 af 3

5 HÆM-AN57 Bilag 1: Hemoglobin F; stoffr Variant II Turbo 20, Biorad Aa Bilag Dato Initialer Gældende version findes i Q-Pulse eller i mappe på sekretærens kontor Side 3 af 3

6 HHS juli Bilag 3 Vejledning til vurdering af prøvemateriales holdbarhed (eller andre præanalytiske forhold) Før holdbarhedsforsøget udføres I analysegruppen diskuteres den aktuelle problemstilling. De ønskede kriterier for holdbarhedsforsøget fastsættes, dette kan være timer, dage, stuetemp., køl, frys osv. Der vurderes om prøverne skal analyseres i dobbeltbestemmelser. Desuden tages der stilling til hvilke acceptkrav, der skal opstilles for at vurdere de opnåede resultater. Disse krav kan opstilles på flere måder, afhængigt af hvilken parameter, der skal vurderes: Krav til bias 1 og totalfejl (TEa% 2 ) ud fra den biologiske variation (Westgard). Evt. Andre kilder til Bias og TEa krav. Klinisk relevante præcisionskrav Analysens præcision på patientmateriale Holdbarhedsforsøget udføres Der analyseres 10 patientprøver fordelt jævnt over måleintervallet. Det anbefales at prøverne fordeler sig med 3-4 i det lave område, 3-4 i midten og 3-4 i den høje ende af måleområdet. Vægtningen afhænger af den aktuelle parameter og den rent praktiske mulighed for at opsamle prøvemateriale i de ønskede niveauer. Prøverne behandles på samme måde som rutineprøverne, og analyseres på vanlig vis for at bestemme udgangsværdien (Tid 0). Prøverne henstilles i den ønskede tid og ved den/de ønskede temperatur(er). Prøverne bør udportioneres i separate glas til de respektive analysetidspunkter. Evt. kan prøverne tilproppes eller dækkes med folie så fordampning undgås i opbevaringsperioden. Herefter vælges en af følgende muligheder: (1) Prøverne analyseres umiddelbart på de valgte tidspunkter 1 Bias % er defineret som: 0,25* + 2 Tea % er defineret som: 1,65* (0,5*CV intraindividuel )+Bias eller 1,65* CV analytisk +Bias

7 HHS juli 2013 (2) Hvis det er muligt, kan prøverne nedfryses til -80 C på de valgte tidspunkter og alle prøver optøs og analyseres i samme analyseserie til sidst. Dataindtastning Data for holdbarhedsforsøget indtastes i bilag 1(Se figur 1). Hvis prøverne er analyseret i dobbeltbestemmelser indtastes middelværdien. Figur 1 Eksempel. Skema til indtastning af resultater (Bilag1) I de røde felter noteres hvilken analyse det drejer sig om, enhed, temperaturforhold og dato. Krav til bias% og TEa% indtastes. (Evt. bruges Westgard). Er det ikke muligt eller relevant, at finde krav ud fra biologisk variation, og/eller er der i analysegruppen taget beslutning om andre krav, kan disse indtastes. Prøve-id. og måleresultater indtastes i de blå felter i det første skema. Der laves automatisk: Beregninger i skema 2

8 HHS juli 2013 Plot A og B, til vurdering af resultaterne, dannes automatisk. Bias og TEa krav bliver, hvis indtastet, også automatisk indsat. (Se eksempel bilag 2) Figur 2 Eksempel på skema til holdbarhedsforsøg PTH (Bilag 2) Vurdering af data: Plot A: Den første målings resultat, svarende til rutineanalysering, kaldes Tid 0 og fastsættes til 100%. De efterfølgende målingers resultater,tid 1-4, omregnes til procent af Tid 0. Disse indsættes automatisk i plot A hvor TEa% (hvis indtastet) ligeledes indtegnes automatisk. I dette plot er den enkelte måling, der vurderes på, med de usikkerheder det medfører. Ingen af resultaterne pr. tidsenhed må overskride grænsen for TEa%.

9 HHS juli 2013 Figur 3 Eksempel på plot A PTH(Bilag 2) Plot B: For hver tidsenhed(f.eks. for dag 1) beregnes gennemsnittet af alle prøver. Igen sættes gennemsnittet af Tid 0 til 100% og de efterfølgende gennemsnitsmålinger omregnes til procent af Tid 0. Der beregnes automatisk 90 % konfidensinterval (CI) omkring middelværdierne. Middelværdier med 90% CI indtegnes automatisk i plot B, hvor Bias%(hvis indtastet) ligeledes indtegnes automatisk. Ingen resultater pr. tidsenhed inkl. 90% CI må overskride grænsen for Bias%. Figur 4 Eksempel på Plot B PTH (Bilag 2) Både Tea% kravet i plot A og Bias% kravet i plot B skal være overholdt for at holdbarheden er ok. Hvis/når de indsatte grænser i plot A (TEa%) og/eller i plot B (Bias%)overskrides, er holdbarheden af prøvematerialet er overskredet. Er der usikkerhed omkring konklusionen kan forsøget evt. gentages med et større antal prøver.

10 HHS juli 2013 Vurdering af præcision på prøvematerialet Hvis prøverne analyseres i dobbeltbestemmelse, kan man få et billede af analysens præcision på patientmaterialet. Præcisionen vurderes i et X/Y plot med variationen (%) ad Y-aksen og middelværdien(konc) på dobbeltbestemmelsen ad X-aksen? Hvis der ses tydelig forskel i præcisionen over måleområdet, kan man dele prøverne op i to differensplot, f.eks. lavt og højt område inden holdbarheden vurderes. Er der en meget stor impræcision i f.eks. det lave område kan dette føre til overskridelse af de opsatte krav, uden at dette nødvendigvis er et udtryk for et holdbarhedsproblem. Kilde: Prøvematerialets holdbarhet kriterier og vurderinger A. Åsberg, K. Bodal Solem, G. Mikkelsen

11 11.4. Bilag 4 HÆM-AN56 Hemoglobin A1c Variant II Turbo 20, Biorad Aa Dato Initialer Hb(B)-Hemoglobin A1c stoffr. Variant II Turbo kit 2,0 Biorad Hb(B)-Hæmoglobin A1c(IFCC) NPU-nr.: P-Glucose, middel(fra HbA1c) NPU-nr.: Variant II Turbo kit 2,0 - BioRad Gældende version findes i Q-Pulse eller i mappe på sekretærens kontor Side 1 af 75

12 HÆM-AN56 Hemoglobin A1c Variant II Turbo 20, Biorad Aa Dato Initialer Indholdsfortegnelse 1. PRØVEMATERIALE: SIKKERHED: UTENSILIER: AFFALD...5 FREMGANGSMÅDE: PRØVEFORBEREDELSE/MANUEL FORTYNDING AF PRØVER START DAGENS SERIE OPSTART AF APPARATET PLACERING AF KONTROLLER PLACERING AF RACK AFSLUTNING AF SERIE START OG STOP AF APPARAT...7 START AF APPARATET EFTER INAKTIV...7 START AF APPARAT EFTER MANUEL...7 START AF APPARAT EFTER PAUSED PÅFYLDNING AF REAGENS SKIFT AF REAGENS KONTROLLER: KALIBRERING: BEREGNING, RESULTATVURDERING OG SVARAFGIVELSE: EKSEMPEL PÅ IDENTIFIKATIONSVINDUER(PEAK TABLE)...10 OMKØRSLER (PÅ GRUND AF AREAL)...11 HBA1C-KONCENTRATION KURVEVURDERING...12 SVAR AFLEVERING...13 SAMMENHÆNG MELLEM HBA1C VÆRDIER...14 AFLEVERING AF SVAR I LABKA II...14 OVERFØRSEL AF MISTEDE RESULTATER TIL LABKA VIA DATA...15 MANGELLISTE REFERENCEINTERVAL: KLINIK: DANNELSE AF HBA1C INTERFERENS OG FEJLKILDER: DATAOPBEVARING: TEKNISKE BEMÆRKNINGER: Gældende version findes i Q-Pulse eller i mappe på sekretærens kontor Side 2 af 75

13 HÆM-AN56 Hemoglobin A1c Variant II Turbo 20, Biorad Aa Dato Initialer 12.1 UDPRINT EN NY ARBEJDSLISTE UDPRINT AF ET PRØVESVAR ELLER SE OM PRØVERNE ER KØRT UDPRINT AF FLERE PRØVESVAR UDPRINT AF KALIBRERINGSRAPPORT INSTALLERING AF NY KOLONNE OG FORFILTER MED SAMME BATCHNR PROCEDURE VED SKIFT AF FORFILTER/PREFILTER OPDATERING AF NY FORFILTER/PREFILTER PROCEDURE VED SKIFT AF KOLONNE OPDATERING AF NY KOLONNE ISÆTNING AF KOLONNE OG/ELLER FORFILTER VARIANT II TURBO SÆTTES I AKTIV PRIMING OG KALIBRERING AF KOLONNE EFTER SKIFT AF KOLONNE FREMSTILLING AF PRIMER FREMSTILLING AF CALIBRATORER SKIFT TIL NYT BATCHNR VEDLIGEHOLDELSE...24 VEDLIGEHOLDELSE DAGLIGT...24 VEDLIGEHOLDELSE HVER 14. DAG...24 MÅNEDELIG VEDLIGEHOLDELSE...25 VEDLIGEHOLDELSE HVER 2. MÅNED...25 ½ ÅRLIG VEDLIGEHOLDELSE...26 VEDLIGEHOLDELSE VED LEJLIGHED FEJLMEDDELELSER...27 PROCEDURE1 VED LUFT ELLER PROBLEMER MED GRUNDLINJEN...27 PROCEDURE 2 VED LUFT ELLER PROBLEMER MED GRUNDLINJE OPSTARTSEKVENS EFTER STRØMSVIGT FREMGANGSMÅDE TIL NEDLUKNING AF SYSTEMET EFTER FUNKTONSMÅDEN FAULT (FEJL) ELLER MANUAL (MANUEL) REFERENCER: PRINCIP: APPARATBESKRIVELSE: RUTINE FOR HVER PRØVEANALYSE...30 PATIENTVEJLEDNING I PRØVETAGNING TIL HBA1C...31 REAGENSBLAD OVERSIGT OVER FREMSTILLING AF KONTROLLER, CALIBRATORER OG PRIMER BILAG 1 TØMNING AF DATABASE PÅ VARIANT II TURBO 2, BILAG 2 CHECK OG VEDLIGEHOLDELSESSKEMA HBA1C...40 BILAG 3 TABEL OVER SAMMENHÆNGEN HBA1C VÆRDIER...41 BILAG 4 PATIENT RAPPORTER...42 BILAG 5 FEJLKILDER...74 BILAG 6 BREVSKABELON... Gældende version findes i Q-Pulse eller i mappe på sekretærens kontor Side 3 af 75

14 HÆM-AN56 Hemoglobin A1c Variant II Turbo 20, Biorad Aa Dato Initialer 1. Prøvemateriale: Blod stabiliseret med EDTA. Citratblod og Li-Heparin kan anvendes. Kapillærblod opsamlet i Hemoglobin Capillary Collection System(HCCS). Holdbarhed: EDTA: 7 døgn ved 4 C. 2 døgn ved stuetemperatur (egne undersøgelser, tåler forsendelse) Hæmolysat med wash/diluent: 1 døgn ved stuetemperatur Hæmolysat fra Hemoglobin Capillary Collection System (HCCS): 2 uger ved stuetemperatur. 4 uger ved 2-8 C. 4 dage ved 42 C Hæmolysat: 3-12 måneder ved -80 C. Stabiliseret blod:minimum 12 måneder ved -80 C. Hæmolyse: Icterus: Lipæmi: Uden betydning. Uden betydning. Undersøgt op til Bil-T ca. 350 μmol/l. Uden betydning. Undersøgt op til triglycerider 6,8 mmol/l 2. Sikkerhed: Buffer A, Buffer B og Wash/Diluent Solution indeholder < 0,05 % Natrium Azid. Na-Azid er meget giftigt (LD mg/kg), mutagent og påvirker centralnervesystemet ved < 1 mg/kg. Brug egnede handsker og beskyttelsesbriller. Koncentrationen af azid er i APB dog vurderet til ikke at skulle have en APB. Na-Azid må ikke komme i kontakt med hud og øjne, sker dette skylles med vand. Ved bortskaffelse skylles efter med rigelig mængde vand. Må ikke blandes med syre. Der henvises til APB. Calibratorer og kontroller er af human oprindelse. Er testet og fundet negative for Hepatitis B, Hepatitis C og HIV-1, HIV-2 og Syfilis. Undgå kontakt med hud og øjne. Der henvises i øvrigt til APB mappe. 3. Utensilier: Finn-pipetter: 5-40 μl μl 1-5 ml 1,5 ml prøverør med prop (Biorad eller Roche) Adaptor til mikroprøverør. Adaptor til kontroller, calibratorer, blank og primer. Sysmex rack til primær EDTA-rør. Hemoglobin Capillary Collection System (HCCS) Gældende version findes i Q-Pulse eller i mappe på sekretærens kontor Side 4 af 75

15 HÆM-AN56 Hemoglobin A1c Variant II Turbo 20, Biorad Aa Dato Initialer 3.1.Affald Bliver opsamlet i affaldsdunk, tømmes efter behov. 4. Fremgangsmåde: Prøverne skal have stuetemperatur (15-30 C) inden analysering. Prøverør sættes direkte i Sysmex rack. Stregkodens placering er uden betydning. Prøver taget i Bio-Rad s kapillærprøvetagningsrør sættes op i adaptor med spalte. OBS: Etiketten må ikke gå under glassets nederste kant. Etiketten må IKKE kunne ses i hullet på adaptoren. Ved brug af adaptorer eller ved 7,5 ml prøverør fjernes indsatsen i rack-positionen. Venojekt og Vacuette placeres direkte. 4.1 Prøveforberedelse/manuel fortynding af prøver Hvis prøverør er af en type, der ikke kan sættes direkte i rack, eller der er for lidt blod i primær glas, må prøven fortyndes i 1,5 ml prøverør. Prøven fortyndes i Hemoglobin Capillary Collection System (HCCS): Prøverøret forsynes med tilklippet stregkode/nr. Etiketten må ikke gå under glassets nederste kant Kapillærrør 5 μl fyldes med blod. Overfør kapillærrøret til prøvetagningsglasset med hæmolysat fra Hemoglobin Capillary Collection System(lyseblå låg). Sæt låget på glasset, ryst glasset så alt blodet rystes ud af kapillærrøret. Glasset placeres i adaptor med spalte. (OBS: etiketten) Dødvolumen ca. 50 μl, opsugningsmængde ca. 400 μl. Eller der laves manuel fortynding: Prøverøret(lilla låg Biorad 1,5 ml glas) forsynes med tilklippet stregkode/nr. Etiketten må ikke gå under glassets nederste kant. 5 μl velblandet blod afpipetteres μl (2 X 750 µl) eller 1,5 ml wash/diluent tilsættes. Glasset tilproppes og blandes grundigt (rystes). Glasset placeres i adaptor med spalte. (OBS: etiketten) Dødvolumen ca. 50 μl, opsugningsmængde ca. 400 μl. 4.2 Start dagens serie Prøver fra foregående kørsel fjernes fra apparatet og placeres i stativer, mærket med dato, rack nummer, stativ nummer og apparaturnavn. 4.3 Opstart af apparatet Lav daglig vedligeholdelse i henhold til Logbog (HÆM-TI45,46,47): Sæt apparatet i Ready: Hvis apparatet er i inaktiv: Se punktet start af apparat efter INAKTIV punkt 4.7 Ved pause på mere end 30 minutter går apparatet i inaktiv. Gældende version findes i Q-Pulse eller i mappe på sekretærens kontor Side 5 af 75

16 HÆM-AN56 Dato Initialer Hemoglobin A1c Variant II Turbo 20, Biorad Aa Opsætning af prøver Tænd evt. for skærmen ved at bevæge musen. Tryk ok (der er ingen password). Kontrollér antal injektioner på kolonne og forkolonne. Tryk setup, tryk test, tryk cartridges (se vedligeholdelsesskema). Fyld papir i printeren. Kontrollér reagensmængder: 1 flaske buffer A ~ ca. 600 prøver. 1 flaske buffer B ~ ca prøver. 1 flaske Wash/diluent ~ ca. 600 prøver. Prøveopsætning om morgenen (efter inaktiv). Klargør Rack 1: Blank, ca µl manuelt fortyndet blod, evt. fra tidl. kørsel. 1 Dag - dag (gerne fra dagen før). Kalibrator 1( ) og 2( ) som kontroller i adaptor med spalte, eller BioRad kontrol 1 og 2 i adaptor mærket kontrol level 1 og kontrol level 2. Derefter patientprøver(stuetemperatur). Hvis prøverne har stået i køleskab blandes de inden opsætning på apparat ellers er opblanding ikke nødvendig. Eksempel: Rack nr. Positio n Prøve Adaptor BLANK Gammel d.d. Cal 1( ) eller Biorad 1 Cal 2( ) eller Biorad 2 Blank Patientprøver inkl. kontrol - Mikroprøver Kontrol for ca. hver prøver. Der skiftes mellem: Biorad-kontrol 1 Biorad-kontrol 2 eller Calibrator 1( ) Calibrator 2( ) eller Med spalte Med spalte eller til Biorad kt Med spalte eller til Biorad kt Control level 1 Control level 2 eller med spalte (Cal. 1 + Cal. 2) Når første Rack er klar og apparatet er i Ready, startes apparatet: Tryk RUN - Tryk evt. Work-list. Tryk Start. Tryk dine initialer i operator ID. Tryk Start. Gældende version findes i Q-Pulse eller i mappe på sekretærens kontor Side 6 af 75

17 HÆM-AN56 Hemoglobin A1c Variant II Turbo 20, Biorad Aa Dato Initialer De næste racks gøres klar: patientprøver, kontrol for hver prøver. Se skema ovenfor. 4.4 Placering af kontroller Der analyseres kontrol for ca. hver prøver. Dagens serie sluttes altid med en kontrol. Der skelnes mellem 3 hold af kontroller: 1. Calibrator 1( ) og calibrator 2( ). Opbevares på køl. Opløses efter behov. 2. BioRad kontrol 1 (LC-Low) og BioRad kontrol 2 (HC-High). Opbevares ved 80 C 3. Patientprøvekontrol i 2 niveauer (dag - dag kontroller). Medtages en gang dagligt. Niveau HbA1C ca. 31 mmol/mol = ca. 64 mmol/mol = Dag - dag kontroller findes i dagens serie, fra Turbo 1(samme apparat hver dag). 4.5 Placering af rack Rack placeres altid med racks nr. fremad. Fyld op i højre side og derefter i venstre side (se foto), maks. 10 racks. Højre side 6 racks - venstre side 4 racks. 4.6 Afslutning af serie For at slutte en serie: Adaptoren STOP sættes i, eller et tomt Rack sættes som afslutning på serien. Efter analysering af den sidste prøve, går systemet automatisk over i ready state. Efter 30 minutters pause, påbegynder systemet automatisk et kort vaskeprogram, lukker temperaturen og detektorlampen ned. Apparatet går derefter over i inaktiv status. 4.7 Start og stop af apparat Start af apparatet efter INAKTIV I øverste venstre hjørne står Variant II T # 1 V2Turbo_A1C inaktiv. Tryk på MAINTAIN. Tryk på RETURN TO READY state eller ACTIVE Tryk på NO. Tryk DO Startup Actions (fra rullelisten i Execute Commands) Tryk START Apparaturet udfører nu en opstart (varer 6 minutter). Når proceduren er færdig efter 6 minutter ses teksten Ready i feltet Variant II T #1 i øverste venstre hjørne, dvs. apparatet er klar til opsætning af prøver. Ved opsætning af prøver efter INAKTIV startes altid med en blankprøve og en kontrol. Start af apparat efter MANUEL Hvis apparatet efter et problem er gået i status manuel: I øverste venstre hjørne står Variant II T #1 V2 Turbo_A1C manual. Gældende version findes i Q-Pulse eller i mappe på sekretærens kontor Side 7 af 75

18 HÆM-AN56 Hemoglobin A1c Variant II Turbo 20, Biorad Aa Dato Initialer Tryk på feltet. Tryk på RETURN TO READY STATE eller Active STATE Tryk på OK x 2 Når proceduren er færdig, ses teksten: READY eller PAUSED i feltet Variant II T #1 V2 Turbo_A1C. Analyseringen kan fortsætte med blankprøve(vigtigt), derefter sidst kørte prøve, som kontrol. Bemærk om der er prøver, der ikke er analyseret. Tryk på RUN og evt. WORK LIST. Lysfyret lyser gult eller grønt Tryk på lysfyret Tryk på CONTINUE eller START Start af apparat efter PAUSED Hvis apparatet er gået i status pause: I øverste venstre hjørne står Variant II T # 1 V2Turbo_A1C paused. Hvis rack står i apparat til analysering: Tryk på RUN og evt. WORK LIST. Lysfyret lyser gult. Tryk på lysfyret. Tryk på STOP: Racket køres ud. Tryk evt. på STOP igen for at få Variant II Turbo til at stoppe med det samme Analyseringen kan fortsætte med blankprøve, derefter sidst kørte prøve, som kontrol. Bemærk om der er prøver der ikke er analyseret. Start apparat: Se start af apparat efter manuel ovenfor. Hvis rack til analysering er kørt ud: Tryk på RUN og evt. WORK LIST. Lysfyret lyser gult. Tryk på lysfyret. Tryk CONTINUE Analyseringen kan fortsætte med blankprøve, derefter sidst kørte prøve, som kontrol. Bemærk om der er prøver der ikke er analyseret. Start apparat: Se start af apparat efter manuel ovenfor. Stop en kørsel En kørsel kan stoppes ved enten at initiere en pause eller et stop. Tryk på Run Tryk på lysfyret (start/stop) Tryk på STOP Apparatet vil lukke ned og gå i inaktiv, manuel eller Ready. For at fortsætte kørslen, se: Start af apparat efter inaktiv eller manuel. Bemærk at sidste prøve mistes og må køres om. Tryk evt. på STOP igen, hvis apparatet skal stoppe med det samme. Gældende version findes i Q-Pulse eller i mappe på sekretærens kontor Side 8 af 75

19 HÆM-AN56 Hemoglobin A1c Variant II Turbo 20, Biorad Aa Dato Initialer Pause en kørsel Tryk på lysfyret (start/stop). Tryk på PAUSE. Apparatet vil nedsætte flowhastigheden til 0,2 ml/min. For at fortsætte kørslen, se startapparatet efter PAUSED. Bemærk at sidste prøve mistes og må køres om. 4.8 Påfyldning af reagens Kan foretages under analysering ved hjælp af tragt. Kontrollér, at slangerne når bunden. Slangerne må ikke tages op. 4.9 Skift af reagens Reagensflaskerne kan skiftes når Flow står på 0 ml/min. Reagenset vendes forsigtigt, inden det sættes på instrumentet. Under en kørsel: Tryk STOP i Run/Work-list billede. Tryk Pause. Vent til der står Pause i Variant II billedet. Bemærk, at Flow er 0,2 ml/min. Skift reagens. Tryk Continue. OBS: Den sidste prøve mistes og må køres om. 5. Kontroller: (Fremstilling, se R-blad 3 af 3) Biorad kontrol 1 og 2 medtages minimum 1 gang daglig. Calibrator 1, labka nr og calibrator 2 labka nr medtages 1 gang daglig i adaptor med spalte. Dag-dag kontrol: lav (ca. 31 mmol/mol) labka nr og mellem (ca. 64 mmol/mol) labka nr medtages minimum 1 gang daglig. Findes i dagens kørte prøver på Turbo 1. Kontrolregler: Omkørselsregel: 1:3 SD Dvs. hvis 1 resultat ligger udenfor 3 SD. Analyseserien forkastes og der genanalyseres. Advarselsregel: 4:1SD Dvs. hvis 4 på hinanden følgende resultater ligger udenfor 1 SD. Analyseserie godkendes. Årsag findes, problemet løses fremadrettet. Ekstern kontrol: 5 gange om året modtages to eksterne kontroller fra Labquality, måned 2,4,6,8 og 10. Analyseres helst samme dag som de er modtaget. Gældende version findes i Q-Pulse eller i mappe på sekretærens kontor Side 9 af 75

20 HÆM-AN56 Hemoglobin A1c Variant II Turbo 20, Biorad Aa Dato Initialer Kontrollerne modtages i Labka og rekvisitionerne printes inden analysering. Rekvisitionerne ligger forudbestilt som kontrol med cpr.nr A27K. Udskriv de rekvisitioner(6 stk.) med den laveste dato. Husk at rette dato til: modtage dato for kontrol. Forsyn de fortyndede kontroller med tilhørende stregkode. I note felt på rekvisitionen er angivet hvilket apparat og kontrol (ret evt kontrol nr.) stregkoden tilhører. Kontrollerne analyseres i dobbeltbestemmelse på begge apparater. Samtidig analyseres kalibratorer fra DEKS som opbevares ved -80 grader. Svarene noteres på kopi af svarark medsendt fra labquality eller på rekvisitionssedlerne. Afdelingsbioanalytiker eller fagspecialist kontaktes mht. aflevering af svar til labquality. Regionskontroller: En gang pr måned udsendes 2 kontroller til regionens sygehuse i samarbejde med koagulation. Se specialvejledning i mappe regionskontroller. DEKS kalibratorer: DEKS L, M, H kalibratorer medtages ved behov: ca. 1 gang pr måned, ved kørsel af ekstern kontrol fra Labquality og ved reagens lot nr. skifte. Skrives på kontrolskemaer. 6. Kalibrering: I et rack placeres en Blank og en prøve (Dag-dag kontrol fra dagen før) og derefter Kalibrator 1 og 2 i adaptor mærket henholdsvis calibrator 1 og calibrator 2. Ved kalibrering i dagens serie sættes Calibrator 1 og 2 i adaptor mærket henholdsvis calibrator 1 og calibrator 2 i stedet for 2 prøver, blank ikke nødvendig. Analysér derefter Biorad kontrol 1 og 2 eller dag til dag kontrollerne, derefter prøver. Efter analysering af calibratorerne beregnes slope og intercept automatisk. Gem udskrifterne i mappe minimum 1 år. Der kalibreres ved ibrugtagning af ny kolonne eller hvis kontrollerne ligger uden for 3 SD. 7. Beregning, resultatvurdering og svarafgivelse: Kontrollerne føres på blåt kontrolskema. Kontrolregler 1:3SD, omkørselsregel. 4:1SD, advarselsregel. Analysen er lineær fra 15 mmol/mol til 184 mmol/mol HBA1C. Prøver < 15 mmol/mol og > 184 mmol/mol - kontakt afdelingsbioanalytiker. 7.1 Eksempel på identifikationsvinduer(peak table) Kan varierer ved nyt lot reagens. Gældende version findes i Q-Pulse eller i mappe på sekretærens kontor Side 10 af 75

21 HÆM-AN56 Hemoglobin A1c Variant II Turbo 20, Biorad Aa Dato Initialer Retentionstiden er målt fra tiden for prøvens injektion til maksimalpunktet for hver prøve. Den aktuelle peak table findes i Set-up, test, peak table. Som afslutning på en serie, udskrives en Summary Report indeholdende prøvens: Injektionsnr., Rack ID, Tube nr. (placering i Rack). Type: PR = primer. BL = blank, C = calibrator, LC og HC =Biorad kontroller, P = prøve, Lotnr./sample ID = prøvens LABKAnr. eller lotnr på Biorad 1 og 2, Total-area = Total areal, A1c (IFCC) = koncentration af prøvens HbA1c i mmol/mol, Variant Window (%) = koncentrationen af Hb variant E, D eller S i %, HbC % = koncentrationen af evt. HbC i %. Eksempel: Totalt areal skal ligge mellem og Er dette ikke tilfældet, markeres det med *, prøven køres om se nedenfor. 7.2 Omkørsler (på grund af areal) Veneblodsprøver analyseres igen. Mikroprøver tilsættes mere wash, hvis arealet er > Er arealet stadig markeret med *, genanalyseres prøven i manuel fortynding (se punkt 4.1) eller anden fortynding (manuelt). Gældende version findes i Q-Pulse eller i mappe på sekretærens kontor Side 11 af 75

22 HÆM-AN56 Hemoglobin A1c Variant II Turbo 20, Biorad Aa Dato Initialer Areal < 1 mill, f.eks. 8 μl blod μl wash/diluent solution. Areal > 3,5 mill., f.eks. 4 μl blod μl wash/diluent solution. 7.3 HbA1C-koncentration kurvevurdering Prøven < 27 og > 108 mmol/mol markeres med *. Undersøg om prøven bør gentages, når HbA1c <20 eller >108 mmol/mol, ved at vurdere patientens øvrige tal. HbA1c <27 mmol/mol vurdér kromatogram en ekstra gang. Nedenstående vurderes og kommentarer noteres på svararket under comments. Se kurvevurdering med eksempler til de enkelte punkter i Bilag 4, B-blad side Hvis LA1c toppen er højere end A1c toppen og de er dårligt adskilt, sendes prøven til Thisted til analysering.(formentlig Hb-Athens), der laves sendeliste. HbA1c målt på Turbo afvises. Kromatogram arkiveres med svar fra Thisted påskrevet, uden navn og CPR nr. Prøver med skulder: Hvis HbA1c er mindre end 44 mmol/mol og større end 53 mmol/mol kan HbA1c analyseret på Turbo afleveres. Hvis HbA1c er fra mmol/mol sendes prøven til Thisted til analysering, der laves sendeliste. HbA1c målt på Turbo afvises. Kromatogram arkiveres med svar fra Thisted påskrevet, uden navn og cpr nr. Brede toppe og høj grundlinje(måles for høje) sendes til Thisted uden sendeliste. Måles i Thisted på immunologisk metode (DCA) og Tosoh (HPLC). Specielt følgebrev medsendes, se bilag 6, da vi selv afleverer svar. Svaraflevering kontakt afdelingsbioanalytiker eller fagspecialist for svaraflevering, når Thisted har faxet svar tilbage. Kromatogram gemmes i mappe Problemprøver. Prøver med normale resultater < 44 mmol/mol skal normalt ikke sendes. Kurven vurderes evt. af afdelingsbioanalytiker eller fagspecialist. Top F: Ved HbF > 4 % (areal). HbA1c svaret kan afleveres, HbF afleveres som intern prøvekommentar. HbF x %, hvor x (helt tal) er den aktuelle % (i helt tal) for HbF. Undersøg derefter om patienten er kendt med HbF. Hvis det er en kendt patient afleveres HbF kun første gang den findes. Hvis patienten ikke er kendt kontakt afdelingsbioanalytiker/fagspecialist/læge for området, idet kurven og patientdata tages fra, til vurdering af om HbF skal afleveres. HbF tilføjes evt. senere, hvis det vurderes af læge at den skal afleveres, som ekstern prøvekommentar: Der er fundet en HbF, der udgør x%(helt tal) af total Hb. Kromatotogram arkivers i mappe. Hvis HbF er større end 25 % kan HbA1c ikke afleveres. Standardsvar: Se note. I ekstern prøvekommentar tilføjes: HbA1c måles ikke korrekt da HbF er XX %, XX % rettes til aktuelle HbF koncentration. Top HbA1c. Dårlig adskillelse. Køres om evt. på den anden Turbo. Sendes evt. til Thisted. HbA1c-værdi <27 mmol/mol, hvis kromatogram er normalt tilføjes ekstern prøvekommentar: Lav Hba1c, kan forårsages af nedsat erytrocytlevetid eller blødning. Søg i ekstern prøvekommentar på: lav hba1c eller i referencekode på lha. Kromatogram arkiveres i mappe Hba1c < 27 mmol/mol uden navn og cpr nr. Gældende version findes i Q-Pulse eller i mappe på sekretærens kontor Side 12 af 75

23 HÆM-AN Hemoglobin A1c Variant II Turbo 20, Biorad Aa Dato Initialer Top P3/P4>10% eller top P3>5% ved hæmoglobinvariantprøver, kontakt afdelingsbioanalytiker eller fagspecialist. Kan evt. betyde at det er en gammel prøve. Der bedes evt. om ny prøve. Kan også betyde at der er en ukendt Hb-variant. Top i variantvindue (E, D eller S): HbA1c svaret afleveres, ekstern prøvekommentar tilføjes: Der er fundet en Hb-variant, formentlig HbE, HbD eller HbS, der udgør XX (helt tal) % af total Hb. For yderligere undersøgelse kan Hb-type rekvireres. Kommentaren søges i ekstern prøvekommentar, Tryk Opslag: Søg i referencekode på forkortelsen ha1. xx% rettes til aktuelle % for varianten(helt tal). Fund af Hb variant afleveres hver gang den observeres. Kromatogram arkiveres 1. gang der observeres hb-variant. Kontakt evt. afdelingsbioanalytiker/fagspecialist. Hvis Hb-varianten er >60 % kan HbA1c ikke afleveres. Kromatogram arkiveres i mappe uden navn og CPR nr. Top C: Som Top i variantvindue, se punkt 8. Kommentaren søges i ekstern prøvekommentar, Tryk opslag: Søg i referencekode på forkortelsen Ha2 slettes-(eller søg i forkortelse på forkortelsen HbC). xx% rettes til aktuelle % for HbC. Kromatogram arkiveres i mappe uden navn og CPR nr. Grundlinjen viser drift. Prøven køres om. Øvrige uregelmæssigheder og tvivl kontakt afdelingsbioanalytiker. Brede toppe: mange brede toppe kan skyldes dårlig kolonne. Prøver der skal sendes til Thisted sættes normalt på sendeliste. Thisted afleverer svaret når prøven er kørt. I specielle tilfælde afleveres svar af Hba1c Aalborg, når der er kommet svar fra Thisted. 7.4 Svar aflevering HbA1c afleveres i Labka II som en liste: Hb(B)-Hæmoglobin A1c(IFCC)= HbA1Ci P-Glucose, middel(fra HbA1c)= EAG Efter resultatvurdering kan svar afleveres via Labka II. Resultatet udskrives som mmol/mol (IFCC) i summary report. Dette afleveres i Labka II. HbA1C(IFCC) bliver afleveret fra Variant II Turbo til Labka ll efter hver injektion. Der beregnes automatisk eag, efter godkendelse af HbA1c(IFCC). Gældende version findes i Q-Pulse eller i mappe på sekretærens kontor Side 13 af 75

24 HÆM-AN56 Hemoglobin A1c Variant II Turbo 20, Biorad Aa Dato Initialer 7.5 Sammenhæng mellem HbA1c værdier Se endvidere Bilag 3 Tabel fra laboratorievejledningen. 7.6 Aflevering af svar i LABKA II Tryk på analyseplads. Tryk på godkendelse(f7). Vælg arbejdsplads - koagulation. Leverandør: Turbo 1, Turbo 2 eller Turbo 3 Svar der er klar til aflevering markeres og der trykkes Godkend. HbA1ci og eag beregnes, når der trykkes Godkend, markér beregningerne og godkend dem. Tryk evt. opdater og godkend resten af beregningerne. Kontrollér at alle resultater er overført til LABKA II (positionsnr. i højre kolonne). Kontroller: Værdierne fra (Calibrator 1) og (calibrator 2) samt og godkendes i Labka ll, hvis de er i orden(kontrolskema). Biorad I og Biorad II resultaterne afvises. Omkørsel: Hvis der er svar der skal køres om eller sendes til Thisted, markeres disse og der trykkes på afvis(gentest). Rettelse af ikke læste numre: Højreklik på prøvenummer og vælg ret prøvenr. Det rigtige prøvenummer indtastes. Søg tidligere svar på patient: Marker linje med resultatet. Højreklik og vælg vis, vis svar (kumuleret svar). Her ses evt. tidligere svar. Numre der er sendt manuelt via LIS på Turbo, overføres til sidst eller midt i den serie, der kører. Gældende version findes i Q-Pulse eller i mappe på sekretærens kontor Side 14 af 75

25 HÆM-AN56 Hemoglobin A1c Variant II Turbo 20, Biorad Aa Dato Initialer Kontroller: Værdierne fra (cal 1) og (cal2) samt og (D-D prøverne) overføres til Labka. Manuel aflevering af svar: Tryk analyseplads. Tryk manuel resultatindtastning. Vælg leverandør og arbejdsplads: Koagulation, type: instrument, navn: Turbo 1, Turbo 2 eller Turbo 3. Vælg pr. prøve. Indtast prøvenr. Tryk SØG. Tryk INDTAST SVAR. Resultatet indtastes i mmol/mol under HbA1ci. EAG beregnes automatisk, godkendes i godkendelsesbilledet til Turbo 1/Turbo 2, eller autogodkendes. 7.7 Overførsel af mistede resultater til LABKA via Data Tryk data Tryk select Vælg All in run selection Vælg All in sample selection Tryk view run Tryk på det run nr. der ønskes prøver overført fra. I feltet: From inj#: Indtast injektions nr. på første prøve der ønskes overført. I feltet: To inj#: Indtast injektionsnr. på sidste prøve der ønskes overført. Tryk export to lis. Resultaterne overføres samlet uden rack nr. identifikation. 7.8 Mangelliste Mangelliste tages ud indtil foregående dag til kl Mangelliste laves inden kl , da gamle hæmatologiprøver bliver smidt ud kl Vælg analyseplads Vælg mangleliste Vælg faneblad gruppe Søgekriterier: Vælg søg sluttid. Foregående dag Vælg arbejdsplads Vælg koagulation/hba1c Vælg variant/turbo HbA1C Vælg vis eller udskriv Gældende version findes i Q-Pulse eller i mappe på sekretærens kontor Side 15 af 75

26 HÆM-AN56 Hemoglobin A1c Variant II Turbo 20, Biorad Aa Dato Initialer Hæmatologiprøver: ADVIA 4 (Syd) ADVIA 6 (Syd) ADVIA 8 (Syd) ADVIA 7 (Nord) 8. Referenceinterval: Hb(B)-Hæmoglobin mmol/mol A1c(IFCC): P-Glucose, middel(fra HbA1c): 5,4-7,3 mmol/l Hb(B)-Hæmoglobin 0,050-0,062 A1c(DCCT): Afleveres ikke fra den 7. januar 2013 Rettet 1. oktober 2006 i forbindelse med LABKA II, ansvarlig N. J. Christensen, Århus, Tage Hansensgade Klinik: Glykeret hæmoglobin (hemoglobin A1c): Siden begyndelsen af 1980'erne har muligheden for at måle mængden af glykeret hæmoglobin og den øgede selvmonitorering af blodglukose stort set overflødiggjort måling af uringlukose. Glykeret hæmoglobin (HbA1c) er den delmængde (fraktion) af hæmoglobinet, hvor glukose eller glukose-deriverede produkter er bundet. Mængden af glykeret hæmoglobin afspejler det integrerede (gennemsnitlige) blodglukose over de forløbne 6 uger. Normalområdet for hæmoglobin A1c hos individer uden diabetes er 0,050-0,062. Som tommelfingerregel kan det gennemsnitlige blodsukker-niveau beregnes som aktuel HbA1c % x 2 minus 6. Tabel 2: Kilde: Bayer Diagnostica. Gældende version findes i Q-Pulse eller i mappe på sekretærens kontor Side 16 af 75

27 HÆM-AN56 Hemoglobin A1c Variant II Turbo 20, Biorad Aa Dato Initialer Tabel 3 (Indført ) Behandlingsmålet for den metaboliske langtidsregulation er HbA1c på 0,075. Dette mål må ofte lempes, f.eks. på grund af hypoglykæmitendens. Ved type I diabetes anbefales kontrol af HbA1c hver 3. måned og ved type II diabetes hver 3. til 12. måned. Tilstande med nedsat erythrocytoverlevelse (blødningsanæmi og hæmolyse), og nefrotisk syndrom samt graviditet giver anledning til relativt for lave hæmoglobin A1cværdier pga. erytrocytternes forkortede levetid. Prøver fra patienter med polycytæmi eller efter splenektomi kan vise forhøjede HbA1c værdier pga. erytrocytternes forholdsvise længere levetid. Forekomst af abnorme hæmoglobin-varianter (HbS, HbC og HbF) kan påvirke HbA1cværdien, men vil blive bemærket under analysen med det udstyr, der anvendes på FBE Klinisk Biokemi Syd, Aalborg Sygehus. Se endvidere bilag 5 med faktorer som kan influere på Hba1c og dets måling. Gældende version findes i Q-Pulse eller i mappe på sekretærens kontor Side 17 af 75

28 HÆM-AN56 Hemoglobin A1c Variant II Turbo 20, Biorad Aa Dato Initialer 9.1 Dannelse af HbA1c Hb + glc La1C Hba1c Dannelse af Schiff base (LAIc) er direkte proportional med glucosekoncentrationen i blodet. Koncentrationen af HbA1c afhænger af både glucosegennemsnitskoncentrationen og erythrocytoverlevelsen i cirkulationen. HbA1c dannes i 2 trin ved en ikke enzymatisk glykering af HbA. Første trin er dannelsen af ustabilt aldimin (shiffs base, labilt A1c/ præ-a1c), en reversibel reaktion mellem glukosens carbonylgruppe og N-terminalen valin på Hb s beta-kæde. Dannelse af labilt A1c er direkte proportional med blodglucosekoncentrationen. Under cirkulation af erytrocytter omdannes en del af det labile A1c (Amodorirearrangement) til et stabilt ketoamin, HbA1c. 10. Interferens og fejlkilder: Ukendte/unormale Hb varianter kan influere på Hba1c målingen og give forkert Hba1c værdi. 11. Dataopbevaring: Arbejdsliste med resultater gemmes i ringbind under dato, minimum en måned. Kurver gemmes i tidsskriftskasette i 1 uge. Manuelt indtastede svar gemmes 5 år. Kontrolresultater gemmes 10 år. Kalibreringsresultater gemmes i 1 år. Databasen tømmes når der kommer en meddelelse derom på apparaturskærmen. Resultaterne overføres til CD-R. Se bilag 1. Gemmes i 10 år. Gældende version findes i Q-Pulse eller i mappe på sekretærens kontor Side 18 af 75

29 HÆM-AN56 Hemoglobin A1c Variant II Turbo 20, Biorad Aa Dato Initialer 12. Tekniske bemærkninger: 12.1 Udprint en ny arbejdsliste Tryk Data. Tryk Select Vælg All i Run selection og Sampel selection. Tryk View Run. Tryk på det Runnr., der skal udprintes. Tryk Print 12.2 Udprint af et prøvesvar eller se om prøverne er kørt Tryk Data. Tryk Select. Instrument Selection: Kun Instrument # 1 skal være markeret. Run Selection: All skal være markeret. Tryk i By Sample ID eller By Injection og indtast enten prøvenr. eller injektionsnr. Tryk View Sample. Tryk Print 12.3 Udprint af flere prøvesvar Tryk Data. Tryk Select. Instrument Selection: Kun instrument # 1 skal være markeret. Run Selection: All skal være markeret. Sample Selection: All skal være markeret. Tryk View Run. Markér det run number i øverste boks, hvori prøven er kørt. Tryk View Sample. Tryk Print. Tryk i feltet: From inj#, skriv injektionsnr på første og sidste prøve der ønskes udskrevet. Tryk OK Udprint af kalibreringsrapport Tryk Data. Tryk Select Vælg All og All Tryk view run Tryk på den ene af calibratorerne I den nederste boks(joblisten hvor der er kalibreret) Tryk view sample Tryk print Vælg calibration summary report Tryk OK Gældende version findes i Q-Pulse eller i mappe på sekretærens kontor Side 19 af 75

30 HÆM-AN56 Hemoglobin A1c Variant II Turbo 20, Biorad Aa Dato Initialer 12.5 Installering af ny kolonne og forfilter med samme batchnr. Anvendelse af Variant II Turbo kræver et forfilter og en analytisk kolonne til prøveanalyse. Hver kolonne har en kapacitet på minimum 2500 injektioner, der er reagens til kørsel af ca injektioner. Når 2500 eller injektioner er nået, kommer en meddelelse på skærmen, men analyseringen fortsætter. Hver forfilter har en kapacitet på minimum 500 injektioner. Hvis trykket stiger til omkring 100 kg/cm2 vurderes om filtret skal skiftes. Når 500 injektioner er nået komme en meddelelse på skærmen, men analyseringen fortsætter Procedure ved skift af forfilter/prefilter Hvis kun forfiltret skal skiftes skal/kan apparatet stå i ready eller inaktiv. Efter skift af forfilter/prefilter startes serien direkte med blank og kontroller Opdatering af ny forfilter/prefilter Tryk SET UP Tryk TEST Tryk Cartridge Tryk på pilen ud for YES ud for det prefilter, der skal kasseres. Tryk NO i den ny rubrik der dannes. Tast prefilterets lot nr. (står på posen). Tryk på NO ud for det nye prefilter. Tryk på YES. Se punkt for skift af forfilter Procedure ved skift af kolonne 1:Fremstilling af primer til brug ved kolonne skift, se punkt Sæt apparatet i INACTIVE: Tryk MAINTAIN. Tryk MAKE INACTIVE. Vælg Normal TRYK YES Vent til der står INACTIVE i øverste venstre hjørne Opdatering af ny kolonne Tryk SET UP. Tryk TEST. Tryk Cartridge. Tryk på pilen ud for YES ud for den kolonne(a1c_turbo), der skal kasseres. Tryk NO i den ny rubrik der dannes. Tast kolonnens lot nr. (står på posen) i Lot # Tast serienr. Kolonnens serie nummer står på siden af kolonnen. Tryk på NO ud for den nye kolonne. Tryk på YES. Derefter isættes ny kolonne og/eller forfilter(vurder om filteret skal skiftes). Gældende version findes i Q-Pulse eller i mappe på sekretærens kontor Side 20 af 75

31 HÆM-AN56 Hemoglobin A1c Variant II Turbo 20, Biorad Aa Dato Initialer Isætning af kolonne og/eller forfilter Skift af forfilter/prefilter Følg punkterne 1, 2, 3, 5, 6, og 7. Forfilter 1. Åben lugen til Chromatografen (VCS). Find kolonnens termomodul i midten af VCS en. Lås op for varmedøren ved at dreje håndtaget en kvart omgang. Åben dækslet, og lad det hvile til venstre. 2. Løft kolonneholderen ud af klipsene. Løsen skruen øverst i kolonneholderen(udløbshætten). Grib fat i holderens nederste del(indløbshætte) samt den beige konnektor (peak-kabinet), og drej den med uret for at fjerne den fra den beige konnektor. Fjern forfiltret. Lad forfilteradaptoren i rustfrit stål blive siddende i holderens nederste del. Gældende version findes i Q-Pulse eller i mappe på sekretærens kontor Side 21 af 75

32 HÆM-AN56 Hemoglobin A1c Variant II Turbo 20, Biorad Aa Dato Initialer 3. Åben posen med den nye forfilter. Tryk forfilteret godt ned over forfilteradaptoren i holderens nederste del. Forfilteret kan installeres i begge retninger. Skru peekkabinet og indløbshætten sammen igen. Kolonne Grib fat i den beige konnektor(peek-kabinet) og udløbshætten(del 1), og drej den med uret for at fjerne den fra toppen af holderen. Fjern analysekolonnen. Fjern lågene fra den nye analysekolonne. Placer kolonnen, med pilen pegende i flowretningen (nedefra og op efter), i den beige konnektor. Skub kolonnen ordentlig på plads i den beige konnektor. Skru udløbshætten(del 1) fast over kolonnen på den beige konnektor Fælles Skruen øverst i kolonneholderen(udløbshætten) skrues fast igen. Placer kolonneholderen i klipsene indeni termomodulblokken, og kontroller, at opløsningslinjerne hviler i rillerne (se figur 3-14). Hold opløsningslinjerne øverst i rillen, og luk termoduldækslet. Drej håndtaget med uret for at låse varmedøren Variant II Turbo sættes i aktiv Tryk på Maintain Tryk return to Ready State eller active Tryk no Vælg do start-up actions fra rullelisten Execute commands Tryk Start, kontrollér om der er utætheder. Apparaturet udfører nu en opstart(varer 6 minutter). Når proceduren er færdig ses teksten Ready i feltet Variant II T # 1 i øverste venstre hjørne. Kolonnen er nu klar til priming og calibrering: Priming og kalibrering af kolonne efter skift af kolonne Afpipettér ca μl primer i 2 mikrorør. Fremstilling af primer, se nedenfor. Placér dem i adaptor, mærket primer i position 1 og 2. I de næste 3 positioner sættes dest. H2O. Næste position 1 BLANK, 1 dag til dag kontrol, Calibrator 1 og 2 i kalibreringsadoptor, derefter Biorad 1 og Biorad 2 i kontrol adaptor, samt patientprøver, se skema nedenfor. Tryk RUN Tryk START Sæt flueben i Automatic Priming feltet. Vigtigt for at man kan prime og kalibrere i en procedure Tryk START Vurdér kalibrerings og kontrolresultater Gældende version findes i Q-Pulse eller i mappe på sekretærens kontor Side 22 af 75

33 HÆM-AN56 Prøverørs position Hemoglobin A1c Variant II Turbo 20, Biorad Aa Dato Initialer Adaptoretiket Prøve Primer Primer Adaptor med spalte Adaptor med spalte Adaptor med spalte Blank Rekonstitueret fuldblodsprimer (1 ml) Rekonstitueret fuldblodsprimer (1 ml) Destilleret H2O Destilleret H2O Destilleret H2O Fortyndet prøve (1 ml) Dag til dag kontrol Calibrator 1 Calibrator 2 Biorad kontrol 1 Biorad kontrol 2 Prøver incl kontroller Calibrator level 1 Calibrator level 2 Control level 1 Control level Fremstilling af primer Primer opbevares i køleskab Når stuetemperatur er opnået: Tilsæt 1000 μl destilleret H2O Lad glasset stå 10 min. ved stuetemperatur Vend glasset forsigtigt nogle gange, så materialet blandes Opløsningen er klar til brug Holdbar 1 døgn i køleskab Fremstilling af calibratorer HbA1c calibratorer level 1 og 2 opbevares i køleskab. Når stuetemperatur er opnået: Tilsæt 7,0 ml (2 X 3,5 ml) calibrator diluent (kold, temperatur underordnet) Lad calibratorerne stå 2 min. Blandes derefter grundigt (slettet) 3-5 min. Calibratorerne er derefter klar til brug Fordeles i mikrorør (Biorad) af min. 690 μl (10 stk.) Holdbarhed: 20 dage i køleskab (egen undersøgelse) Skift til nyt batchnr. Apparatet sættes i inactiv Tryk Set up Indsæt medfølgende cd-rom i cd- drevet Tryk Update Kit Tryk Drives. Vælg e: Vælg den test der skal opdateres(v2turbo_a1c) Tryk OK Tag CD-rom ud igen. Gældende version findes i Q-Pulse eller i mappe på sekretærens kontor Side 23 af 75

34 HÆM-AN56 Hemoglobin A1c Variant II Turbo 20, Biorad Aa Dato Initialer Kalibrator 1 og 2 værdier: kontrollér at værdierne passer med paknings insert. Tryk set-up, tryk sampletypes, tryk calibrator Skift kolonne, evt. forfilter(afhængig af antal injektioner) og reagenser Turbo sættes i Ready, se punktet start efter inaktiv. Systemet skylles med de nye reagenser. Set-up, test, cartridges, start systemflush vælg den korte skylning Nyt lot calibratorer tages i brug. Følg punkt 12.12: Priming og kalibrering af kolonne efter kolonneskift. Brug nyt lot calibratorer. Medtag DEKS kalibratorer L, M og H Vedligeholdelse Vedligeholdelse dagligt Skyl stempel/forseglingsvaskeport. Fyld sprøjten på 10 ml med demineraliseret vand. Indsæt sprøjten i stempel/forseglingsvaskeporten. - se billede. Tryk langsomt sprøjtestemplet i bund, indtil al væske er dispenseret. Lad vandet blive i linjerne. Kontrollér antal injektioner på kolonnen og forfiltret Tryk set-up. Tryk Test. Tryk Cartridges (colonne) - notér på vedligeholdelsesskema, hvor mange injektioner, der er udført på kolonnen(a1c_turbo) og prefilter(forfilter). Se endvidere vedligeholdelsesskema. Vedligeholdelse hver 14. dag FORSIGTIG! Prøvenålen er meget spids. Håndter nålen forsigtigt så skader undgås. ADVARSEL! Nålens dør er blokeret. Når nålen skal udskiftes, vil låsekontakten slukke strømmen på nålesamlingsenheden. Rengør fortyndingskammeret på VSS en Sluk for Variant II Turbo prøvestationen (VSS) Fjern nåldøren. Skub nålophænget tilbage, væk fra fortyndingskammeret. Rens fortyndingskammeret med vatpinde og demineraliseret vand. Fjern partikelrester ved at fylde kammeret med demineraliseret vand. brug herefter vatpinde til at rense og opsuge partikelrester. Sæt nåldøren på igen. Tænd for VSS, vent til prøvetageren færdiggør opstart og skyllecyklus. Klik evt. på OK i CDM-feltet for kommunikationsfejl, prøvetager, nulstilling og racknulstilling, således af systemet returneres til Ready State. Gældende version findes i Q-Pulse eller i mappe på sekretærens kontor Side 24 af 75

35 HÆM-AN56 Hemoglobin A1c Variant II Turbo 20, Biorad Aa Dato Initialer Månedelig vedligeholdelse. Rensning af probe-slanger med hypochlorit Apparatet sættes i inaktiv. Fjern kolonnen og forfiltret med adaptor - erstat kolonnen med plastikkolonne (dummy) og plastikfilter (dummy). Tryk set up. Tryk test. Vælg testen decon_t i Select New Test. Slangen mellem detektoren og kolonneholderen skrues af. Dekontamineringsslange sættes på udgangsstudsen på kolonneholderen. Den anden ende af dekontamineringsslange sættes i beholder til opsamling af affald. Tryk i feltet Variant II T#1 V2Tubo_A1C. Tryk Return to aktiv - tryk yes. Placér 5 prøvekopper med 5 % natrium-hypoclorit opløsning i adaptorer i de første 5 positioner. Placér 5 prøvekopper med dest. vand i de sidste 5 positioner. Klargør 5 ml blanding af fuldblod i dest. H2O: 500 ul fuldblod + 4,5 ml dest. H2O. Placér 5 prøvekopper med 1 ml i hver af hæmolysatopløsningen i adaptorer. Sættes i nyt rack. Placér racket på prøvestationens højre bånd. Placér et tomt rack bagved. Når der står Ready, startes apparatet på vanlig vis. Når apparatet vender tilbage til Ready Status, er renseproceduren slut Tryk set up. Vælg V2TURBO_A1C I Select new test. Tryk OK. Tryk Maintain. Tryk Make Inactive. Fjern plastikkolonnen og plastikfilter, skyl kolonneholderen med dest. H2O og isæt originalkolonnen og filter med adaptor. Slangen mellem detektoren og kolonneholderen sættes på igen. Apparatet sættes i Ready. Analyseringen kan starte. Vedligeholdelse hver 2. måned Rengøring af stregkodelæser: (hvis kun dette foretages) Tag alle rack bort fra prøvestationen. Tag beskyttelseskappen af. Nu er stregkodelæseren synlig. Tør snavs og støv bort med linsepapir eller en blød pensel. Sæt beskyttelseskappen tilbage. Efter opstartprocessen er systemet klart til brug. Gældende version findes i Q-Pulse eller i mappe på sekretærens kontor Side 25 af 75

36 HÆM-AN56 Hemoglobin A1c Variant II Turbo 20, Biorad Aa Dato Initialer Rensning af ydre overflader Yder overflader aftørres med en fugtig klud, opvredet i vand. Rengøring af rack, special Hvis der er problemer med rackfremføring kan rack rengøres med sprit og derefter evt. smøres lidt med siliconefedt. ½ årlig vedligeholdelse Set klokken: Luk CDM ned Dobbeltclik på uret i højre hjørne Ret klokkeslæt Start CDM Vedligeholdelse ved lejlighed Tømning af database Der kommer en meddelelse om, at databasen er fyldt, dog tømmes databassen ved maks injektioner. Se vejledning bilag 1. Data overføres til CD-R. Data gemmes i 10 år. Rengøring af transportbånd Tage alle rack væk fra transportbåndet. Tryk Maintain i CDM. Tryk på pilen ud for Execute Commands. Vælg Cleaning Belts. Tryk Start. Transportbåndet starter og kan rengøres med en fugtig klud. Ved spild af blod kan transportbåndet aftørres med 50 % alkohol og derefter en klud, fugtet med vand. Tryk Stop. Rengøring eller udskiftning af nål Tryk Maintain i CDM. Tryk Sampler og vælg Replace Needle. Vent til nålen har flyttet sig, tag beskyttelseskappen bort. Skru slangen af, som sidder på nålen. Løft nålen af og rengør den i alkohol eller i ultralydsbad. FORSIGTIG nålen er meget spids. Håndteres så skader undgås. Sæt nålen tilbage (ny eller rengjort) med nålåbningen mod venstre. Sæt beskyttelseslåget på. Tryk Move Needle Home. Vælg at nålen skylles. Kontroller at nålen sidder korrekt under skylning. Gældende version findes i Q-Pulse eller i mappe på sekretærens kontor Side 26 af 75