TILSIGTET ANVENDELSE SAMMENDRAG OG FORKLARING TESTPRINCIP. Kun til brug med Sofia Analyzer

Transkript

1 Kun til brug med Sofia Analyzer TILSIGTET ANVENDELSE Sofia RSV FIA anvender immunofluorescens til detektion af respiratorisk syncytialvirus (RSV) nucleoprotein antistof direkte fra nasopharyngeal swab- og nasopharyngeal aspirat/vask-prøver fra patienter med symptomer. Den kvalitative test er beregnet til anvendelse som hjælp til hurtig diagnose af akutte RSV-infektioner. Negative resultater udelukker ikke RSV-infektion og bør ikke anvendes som eneste grundlag for behandling eller andre administrationsbeslutninger. SAMMENDRAG OG FORKLARING RSV er et underliggende stof med stærkt smitsom, akut, viral infektion af åndedrætsorganet hos pædiatriske og ældre befolkningsgrupper. Respiratorisk syncytialvirus er en enkeltstrenget RNAvirus. 1 Næsten halvdelen af alle børn bliver inficeret med RSV i løbet af deres første leveår. Det er også den største virale årsag til hospitalsinfektioner hos børn, der allerede er indlagt af andre årsager. 2 I USA skønnes RSV at være ansvarlig for til indlæggelser om året for bronchiolitis og lungebetændelse alene blandt børn under 1 år. 3 Hos børn, der er indlagt med RSVinfektion, menes det at være den mest almindelige virale dødsårsag hos børn under 5 år, navnlig hos børn under 1 år. 4 Blandt børn, der er indlagt med RSV-infektion, skønnes dødeligheden at være så lav som 0,3 % til 1,0 % 3, 5 og i området 2,5 % til 4,0 % for børn med underliggende hjerte- eller 3, 5, 6 lungesygdomme. TESTPRINCIP Sofia RSV FIA-testen anvender immunofluorescens-teknologi, som anvendes i Sofia Analyzer til hurtig detektion af RSV-antistoffer. Sofia RSV FIA-testen omfatter fraktionering af virale antistoffer fra RSV. Patientprøven placeres i reagensrøret, hvor viruspartiklerne i prøven fraktioneres og eksponerer interne virale nucleoproteiner. Efter fraktionering placeres prøven i kassettens prøvebrønd. Fra prøvebrønden migrerer prøven gennem en teststrip, der indeholder forskellige unikke kemiske miljøer. Hvis der er virale antistoffer fra RSV til stede, vil de blive opfanget et specifikt sted. Bemærk: Afhængigt af brugerens valg, placeres kassetten enten inden i Sofia Analyzer til automatisk tidssat udvikling (Gå-væk-tilstand), eller den placeres på bordpladen til manuelt tidssat udvikling, hvorefter den placeres i Sofia Analyzer til scanning (Læs-nu-tilstand). Sofia Analyzer vil scanne teststrip'en og måle det fluorescerende signal ved behandling af resultaterne med metodespecifikke algoritmer. Sofia Analyzer vil vise testresultaterne (Positive, Negative eller Ugyldige) på skærmen. Resultaterne kan også automatisk udskrives på den indbyggede printer, hvis denne mulighed vælges. Sofia RSV FIA Side 1 af 19

2 MEDLEVEREDE REAGENSER OG MATERIALER 25-testsæt: Individuelt pakkede kassetter (25): Muse-monoklonale anti-rsv-antistoffer Reagensrør (25): Frysetørret buffer med detergenter og reduktionsmidler Reagensopløsning (25): Ampuller med saltopløsning Sterile nasopharyngeal-swabs (25) Store, lyserøde fastvolumen-pipetter (25) Små, klare fastvolumen-pipetter (25) RSV-positiv kontrolswab (1): Swab er overtrukket med ikke-smitsomt RSV-antistof Negativ kontrolswab (1): Swab er overtrukket med varme-inaktiveret, ikke-smitsom streptokok C-antistof Indlægsseddel (1) Vejledning til hurtig reference (1) Kvalitetskontrolkort (findes på sættets æske) Oversættelser på CD-rom (1) Printerpapir (1) MATERIALER, DER IKKE MEDLEVERES I SÆTTET Stopur eller ur til brug i Læs-nu-tilstand Sofia Analyzer-instrument Steril saltopløsning til indsamling af nasopharyngeal aspirat- eller vask-prøver Udstyr, der anvendes til indsamling af nasopharyngeal aspirat eller nasopharyngeal vask Kalibreringskassette (leveres med Sofia Analyzer) ADVARSLER OG FORHOLDSREGLER Til in vitro diagnostisk anvendelse. Anvend ikke sættets indhold efter den udløbsdato, der er trykt på æskens yderside. Anvend passende forholdsregler ved indsamling, håndtering, opbevaring og bortskaffelse af patientprøver og brugt sæt-indhold. 7 Det anbefales at bruge nitril- eller latex-handsker (eller tilsvarende), når der arbejdes med patientprøver. 7 Bortskaf beholdere og brugt indhold i overensstemmelse med føderale, statslige og lokale krav. Genanvend ikke brugte kassetter, fastvolumen-pipetter, reagensrør, opløsninger eller kontrolswabs. Brugeren må ikke åbne folieposen med testkassetten, så den eksponeres for det omgivende miljø, før kassetten er klar til øjeblikkelig brug. Bortskaf og brug ikke beskadigede kassetter eller materialer. Reagensopløsningen indeholder en saltopløsning (salin). Hvis opløsningen kommer i kontakt med hud eller øjne, skal der skylles med rigelige mængder vand. Pakkens indlægsseddels vejledninger skal følges for at opnå nøjagtige resultater. Kalibreringskassetten skal opbevares i den medfølgende opbevaringspose mellem anvendelser. Sofia RSV FIA Side 2 af 19

3 Utilstrækkelig eller forkert prøvetagning, -opbevaring og -transport kan forårsage forkerte testresultater. Prøvetagnings- og håndteringsprocedurer kræver specifik oplæring og vejledning. Brug det virale transportmedie, der anbefales i indlægssedlen. Når der tages en nasopharyngeal swabprøve, bruges den nasopharyngeal-swab, der følger med sættet. Brug den korrekte fastvolumen-pipette i overensstemmelse med testprocedurerne: Den lille, klare fastvolumen-pipette må KUN anvendes til at lægge patientprøven i testkassetten. Den store, lyserøde fastvolumen-pipette må KUN bruges til aspirat/vask eller til testprocedure med viralt transportmedie under overførsel af patientprøven fra prøvetagningskoppen til reagensrøret. Skriv ikke på stregkoden på kassetten. Den bruges af Sofia Analyzer til at identificere den type test, der køres, og til at identificere hver enkelt kassette, så en læsning nr. 2 af kassetten i samme Sofia Analyzer forhindres. Prøv ikke at scanne en kassette mere end én gang. Stregkoden på kassetten indeholder en unik identifikator, som forhindrer Sofia Analyzer i at udføre en læsning nr. 2 på en allerede scannet kassette. Der vil blive vist en fejlmeddelelse, hvis en kassette scannes mere end én gang. Da detektionsreagensen er en fluorescerende forbindelse, vil der ikke være noget synligt resultat på teststrip'en. Sofia Analyzer skal anvendes til fortolkning af resultatet. OPBEVARING OG STABILITET AF SÆT Opbevar sættet ved stuetemperatur, F (15 30 C), og borte fra direkte sollys. Indholdet af sættet er stabilt indtil den udløbsdato, der er trykt på den ydre æske. Må ikke nedfryses. KVALITETSKONTROL Der er tre typer kvalitetskontrol for Sofia Analyzer og kassetten: Sofia Analyzer kalibreringstjekprocedure, indbyggede proceduremæssige kontrolegenskaber samt eksterne kontroller. Sofia Analyzer kalibreringstjekprocedure Bemærk: Dette er en "kalibreringstjek"-procedure. Kalibreringstjekproceduren bør udføres for hver tredive (30) dage. Sofia Analyzer kan indstilles til at minde brugeren om at udføre kalibreringstjekproceduren. Kalibreringstjek er en nødvendig funktion, der tjekker Sofia Analyzers optik og beregningssystemer ved hjælp af en specifik kalibreringskassette. Kalibreringskassetten følger med Sofiainstallationspakken. Der henvises til Sofia Analyzers brugermanual for detaljer vedrørende kalibreringstjekprocedure. Vigtigt: Sørg for, at kalibreringskassetten opbevares i den medfølgende opbevaringspose mellem anvendelser, så den beskyttes mod eksponering for lys. Sofia RSV FIA Side 3 af 19

4 1. Vælg "Kalibrering" i hovedmenuen for at tjekke kalibreringen af Sofia Analyzer. 2. Følg anvisningerne, indsæt kalibreringskassetten i Sofia Analyzer og luk skuffen. Analyzeren udfører automatisk kalibreringstjek uden behov for brugerinput. Sofia Analyzer angiver, hvornår kalibreringstjekket er afsluttet. Vælg OK for at vende tilbage til hovedmenuen. BEMÆRK: Hvis kalibreringstjekket ikke gennemføres, skal det meddeles til supervisoren på stedet, eller kontakt Quidel teknisk support for assistance fra kl til PST, på (800) (i USA); (858) (uden for USA); Fax: (858) ; custserv@quidel.com (kundeservice); technicalsupport@quidel.com (teknisk support), eller kontakt din lokale forhandler. Indbyggede proceduremæssige kontroller: Sofia RSV FIA indeholder en indbygget proceduremæssig kontrolfunktion. Hver gang, der køres en test i Sofia Analyzer, scannes den proceduremæssige kontrolzone af Sofia Analyzer, og resultatet vises på analyzerens skærm. Fabrikantens anbefaling til daglig kontrol skal dokumentere resultaterne af disse indbyggede proceduremæssige kontroller for den første prøve, der testes hver dag. Dokumentationen logges automatisk i analyzeren sammen med hvert testresultat. Et gyldigt resultat fra den proceduremæssige kontrol påviser, at testen flyder korrekt, og at kassettens funktionsmæssige integritet er bibeholdt. Den proceduremæssige kontrol fortolkes af Sofia Analyzer, når kassetten er blevet udviklet i femten (15) minutter. Hvis testen ikke flyder korrekt, vil Sofia Analyzer angive, at resultatet er ugyldigt. Hvis det sker, skal proceduren gennemgås, og testen gentages med en ny patientprøve og en ny testkassette. Sofia RSV FIA Side 4 af 19

5 Eksempel: Dette display viser et ugyldigt resultat. Ekstern kvalitetskontrol Eksterne kvalitetskontroller kan også bruges til at påvise, at reagenser og analyseprocedurer opfører sig korrekt. Quidel anbefaler, at der køres positive og negative eksterne kontroller: Én gang for hver uerfaren operatør Én gang for hver ny forsendelse af sæt - forudsat at hvert enkelt modtaget sæt i forsendelsen testes Som yderligere skønnet nødvendigt af dine interne kvalitetskontrolprocedurer, og i overensstemmelse med lokale, statslige og føderale regulativer eller akkrediteringskrav. Brugeren skal først vælge Kør kvalitetskontrol i Sofia Analyzers hovedmenu, og derefter scanne kvalitetskontrolkortet (ligger i sæt-æsken) ifølge anvisningerne. Kortet giver information, der er specifik for sæt-partiet, inklusive partinummer og udløbsdato. Analyzeren vil bede brugeren om at vælge den ønskede tilstand (Gå-væk eller Læs-nu) og derefter køre eksterne kontrolswabs. Eksterne positive og negative kontrolswabs leveres med sættet og bør testes ved hjælp af swabtestproceduren, der er angivet i denne indlægsseddel eller vejledningerne til hurtig reference. Når kvalitetskontroltesten er gennemført, vil hvert resultat blive vist som "Gennemført" eller "Mislykket" for både den positive kontrol og den negative kontrol. Udfør ikke patienttest og rapportér ikke patienttestresultater, hvis en af kvalitetskontroltestene ikke giver de forventede resultaterne. Gentag testen, eller kontakt Quidel teknisk support før test af patientprøver, hvis der opnås et "Mislykket" resultat ved de eksterne kontroller. Yderligere eksterne kontrolswabs kan fås separat ved at kontakte Quidels kundesupportservice på (800) (gratis i USA) eller (858) Sofia RSV FIA Side 5 af 19

6 PRØVETAGNING OG -HÅNDTERING PRØVETAGNING Nasopharyngeal swabprøve: Brug den nasopharyngeale swab, der leveres med sættet. Nasopharyngeal swabprøvetagning sker ved omhyggeligt at placere swab'en i det næsebor, der ved visuel inspektion udviser størst sekretion. Hold swab'en nær ved bunden af næseskillevæggen og tryk forsigtigt swab'en ned bag i næsesvælgrummet. Drej swab'en flere gange, og fjern den derefter fra næsesvælgrummet. Nasopharyngeal aspirat/vask-prøve: Følg din institutions protokol for udtagning af nasopharyngeale aspirat/vask-prøver. Brug så små mængder saltopløsning, som jeres procedure tillader. Hvis din institution ikke har en protokol, kan du alternativt overveje følgende procedurer, der anvendes af klinikere. Nasopharyngeal aspirat-prøvetagning: Indfør nogle få dråber steril saltopløsning i det næsebor, der skal suges. Indfør den fleksible plastikslange langs det nederste af næseboret, parallelt med ganen. Efter indføring i næsesvælgrummet, opsuges sekreterne, mens røret fjernes. Proceduren bør gentages for det andet næsebor, hvis der blev opsuget utilstrækkelige sekreter fra første næsebor. Nasopharyngeal vask-prøvetagning: Barnet bør sidde på en af forældrenes skød med ansigtet fremad og barnets hoved mod forælderens bryst. Fyld kanylen eller aspiratballonen med den mindste mængde saltopløsning, der er nødvendig i forhold til patientens størrelse og alder. Indfør saltopløsningen i det ene næsebor, mens hovedet hælder bagud. Aspirer vask-prøven tilbage i kanylen eller ballonen. Den aspirerede vask-prøve vil sandsynligvis have et volumen på cirka 1 cm3. Alternativt hældes hovedet fremad efter indføring af saltopløsningen, og saltopløsningen løber ud i en ren opsamlingskop. TRANSPORT OG OPBEVARING AF PRØVE Prøver bør testes så hurtigt som muligt efter prøvetagning. Hvis transport af prøver imidlertid er nødvendig, anbefales en minimal fortynding af prøven, da fortynding kan resultere i nedsat testfølsomhed. En (1) milliliter eller derunder foreslås for optimal hurtig testudførelse. De virale transportmedier, der er vist i efterfølgende Tabel 1, er kompatible med Sofia RSV FIA: Viralt transportmedie Tabel 1 Anbefalet viralt transportmedie Anbefalede opbevaringsbetingelser 2-8 C 25 C Copan Universal Transport Media 24 timer 24 timer Hank s Balanced Salt Solution 24 timer 24 timer Liquid Amies Media 24 timer 24 timer M4 24 timer 24 timer M4-RT 24 timer 24 timer M6 24 timer 24 timer Modified Liquid Stuarts Media 24 timer 24 timer Saltopløsning 24 timer 24 timer Starplex Multitrans 24 timer 24 timer Fosfatbuffersaltopløsning 24 timer 24 timer Sofia RSV FIA Side 6 af 19

7 TESTPROCEDURE Alle kliniske prøver skal være ved stuetemperatur før starten af analysen. Udløbsdato: Tjek udløbsdatoen på hver enkelt pakke eller yderside af æsken før brug. Brug ikke test, der har overskredet udløbsdatoen på labelen. Nasopharyngeal swab-testprocedure 1. Tjek, at Sofia Analyzer er indstillet til den ønskede analysetilstand: Gåvæk eller Læs-nu. Se afsnittet Anvendelse af Sofia Analyzer for flere oplysninger. 2. Fyld al reagensopløsning i reagensrøret. Ryst forsigtigt reagensrøret, så indholdet opløses. 3. Placer patientens swabprøve i reagensrøret. Rul swab'en mindst tre (3) gange, mens enden holdes trykket ind imod bunden og siden i reagensrøret. Lad swab'en være i reagensrøret i et (1) minut. 4. Rul swab'ens ende imod indersiden af reagensrøret, når du fjerner den. Bortskaf den brugte swab sammen med biologisk farligt affald. 5. Fyld den medfølgende lille, klare fastvolumen-pipette med patientprøven fra reagensrøret. Sådan fyldes fastvolumen-pipetten med patientprøven: a) Tryk ballonenden FAST sammen. b) Mens du stadig trykker, placeres pipettespidsen i patientprøven. c) Med pipettespidsen i patientprøven slippes ballonen, så pipetten fyldes. Sofia RSV FIA Side 7 af 19

8 6. Tryk ballonenden fast sammen, så indholdet af den lille, klare fastvolumen-pipette tømmes i kassettens prøvebrønd. Det er ok, hvis der er mere væske i overløbs-ballonen. BEMÆRK: Fastvolumen-pipetten er designet til at samle og dosere den korrekte mængde væskeprøve. Bortskaf pipetten sammen med dit biologisk farlige affald. 7. Gå til næste afsnit, "Anvendelse af Sofia Analyzer", for at afslutte testen. Testprocedure for nasopharyngeal aspirat/vask eller prøver i viralt transportmedie 1. Tjek, at Sofia Analyzer er indstillet til den ønskede analysetilstand: Gåvæk eller Læs-nu. Se afsnittet Anvendelse af Sofia Analyzer for flere oplysninger. 2. Fyld al reagensopløsning i reagensrøret. Ryst forsigtigt reagensrøret, så indholdet opløses. 3. Fyld den medfølgende store, lyserøde fastvolumen-pipette med patientens væskeprøve fra opsamlingskoppen. Sådan fyldes fastvolumen-pipetten med prøven: a) Tryk ballonenden FAST sammen. b) Mens du stadig trykker, placeres pipettespidsen i væskeprøven. c) Med pipettespidsen i væskeprøven slippes ballonen, så pipetten fyldes. 4. Klem ballonen fast sammen, så indholdet af den store, lyserøde fastvolumen-pipette tømmes i reagensrøret. Det er ok, hvis der er mere væske i overløbs-ballonen. Ryst forsigtigt reagensrøret, så indholdet bliver blandet. BEMÆRK: Fastvolumen-pipetten er designet til at samle og dosere den korrekte mængde væskeprøve. Bortskaf pipetten sammen med dit biologisk farlige affald. Sofia RSV FIA Side 8 af 19

9 5. Fyld den medfølgende lille, klare fastvolumen-pipette med patientprøven fra reagensrøret. 6. Tryk ballonenden fast sammen, så indholdet af den lille, klare fastvolumen-pipette tømmes i kassettens prøvebrønd. Det er ok, hvis der er mere væske i overløbs-ballonen. Bortskaf pipetten sammen med dit biologisk farlige affald. 7. Gå til næste afsnit, "Anvendelse af Sofia Analyzer", for at afslutte testen. ANVENDELSE AF SOFIA ANALYZER Tilstandene Gå-væk/Læs-nu Der henvises til Sofia Analyzers brugermanual for driftsvejledninger. Analyzeren kan sættes i to forskellige tilstande (Gå-væk og Læs-nu). Procedurerne for hver tilstand er beskrevet herunder. Gå-væk-tilstand I Gå-væk-tilstand indsætter brugeren straks kassetten i analyzeren. Efter femten (15) minutter kommer brugeren tilbage for at få testresultatet. I denne tilstand vil analyzeren automatisk indstille testudviklingen før scanning og vise testresultatet. Læs-nu-tilstand Lad testen udvikle sig i de fulde femten (15) minutter, FØR den placeres i analyzeren. Brugeren skal først placere kassetten på bordpladen i femten (15) minutter (uden for analyzeren) og manuelt tidssætte dette udviklingstrin. Derefter indsætter brugeren kassetten i analyzeren. I Læsnu-tilstand vil analyzeren scanne og vise testresultatet i løbet af et (1) minut. Tips til batch-test Afhængigt af arbejdsbyrden findes der flere måder at gøre batch-test nemmere. Brugeren kan tilføje reagensopløsning i et eller flere reagensrør, lukke dem og gemme dem på bordpladen ved stuetemperatur i op til 12 timer uden aktivitetstab, før tilsætning af prøven(rne). Alternativt kan brugeren efter tilsætning af reagensopløsning behandle swab- eller væskeprøverne i reagensrøret, derefter fjerne swab'en (hvis anvendelig), sætte hætten på røret igen og lade dem stå ved stuetemperatur i op til 12 timer uden aktivitetstab før testudførelse. Sofia RSV FIA Side 9 af 19

10 Det er afgørende vigtigt, at brugeren ikke åbner folieposen med testkassetten, så den eksponeres for det omgivende miljø, før kassetten er klar til øjeblikkelig brug. Kør test 1. Indsæt bruger-id med stregkodescanneren, eller indtast data manuelt på tastaturet. BEMÆRK: Hvis du ved en fejl scanner den forkerte stregkode, skal du bruge piltasterne på Sofia Analyzers tastatur til at genfremhæve feltet. Derefter scannes igen med den korrekte stregkode, og den tidligere anvendte vil blive overskrevet af den korrekte stregkode. 2. Indsæt Patient-id eller Bestillingsnr. med stregkodescanneren, eller indtast data manuelt på tastaturet. Sofia RSV FIA Side 10 af 19

11 3. Tryk Start test, og Sofia Analyzers skuffe åbnes automatisk. 4. Kontrollér, at den korrekte udviklingstilstand, Gå-væk eller Læs-nu, er valgt. Indsæt den forberedte kassette med patientprøven i skuffen i Sofia Analyzer, og luk skuffen. 5. Analyzeren starter automatisk og viser fremskridt, som vist i eksemplet herunder. I Gå-væktilstand vil testresultaterne blive vist på skærmen efter cirka femten (15) minutter. I Læs-nutilstand vil testresultaterne blive vist på skærmen i løbet af et (1) minut. Se afsnittet Fortolkning af resultater. Eksempel: Dette display viser, at testen i Gå-væk-tilstand har 12 minutter og 13 sekunder tilbage. Sofia Analyzer vil læse og vise resultaterne efter 15 minutter. FORTOLKNING AF RESULTATER Når testen er afsluttet, vil resultaterne blive vist på Sofia Analyzer-skærmen. Resultaterne kan automatisk udskrives på den indbyggede printer, hvis denne mulighed vælges. Testlinjerne, der er fluorescerende, kan ikke ses med det blotte øje. Sofia RSV FIA Side 11 af 19

12 Sofia Analyzer-skærmen vil vise resultaterne for de proceduremæssige kontroller som værende "gyldige eller ugyldige" og vil give et positivt eller negativt resultat for RSV. Hvis den proceduremæssige kontrol er "ugyldig", skal der testes igen med en ny patientprøve og en ny kassette. Positive resultater: Eksempel: Dette display viser et gyldigt positivt resultat for RSV. BEMÆRK: Et positivt resultat udelukker ikke andre infektioner med andre patogener. Negative resultater: Eksempel: Dette display viser et gyldigt negativt resultat for RSV. BEMÆRK: Et negativt resultat udelukker ikke RSV viral infektion. Negative resultater bør bekræftes af en viral kultur. Sofia RSV FIA Side 12 af 19

13 Ugyldige resultater: Eksempel: Dette display viser et ugyldigt resultat. Ugyldigt resultat: Hvis testen er ugyldig, skal der udføres en ny test med en ny patientprøve og en ny testkassette. BEGRÆNSNINGER Indholdet af dette sæt skal anvendes til kvalitativ detektion af RSV-antistoffer fra nasopharyngeal swab- og nasopharyngeal aspirat/vask-prøver. Denne test detekterer både levedygtige (levende) og ikke-levedygtige RSV. Testresultatet afhænger af mængden af virus (antistof) i prøven og kan hænge sammen med virale kulturresultater udført på samme prøve eller ikke. Et negativt testresultat opstår, hvis niveauet af antistof i en prøve er under detektionsgrænsen for testen, eller hvis prøven blev taget eller transporteret på forkert måde. Hvis testproceduren ikke følges, kan det påvirke testresultatet ugunstigt og/eller ugyldiggøre testresultatet. Testresultatet skal vurderes i sammenhæng med andre kliniske data, som er til lægens rådighed. Positive resultater udelukker ikke andre infektioner med andre patogener. Negative testresultater er ikke beregnet til at være bestemmende i forhold til andre ikke-rsv virale eller bakterielle infektioner. Børn plejer at afgive virus i større mængder og længere tidsperioder end voksne. Derfor vil testprøver fra voksne ofte give lavere følsomhed end testprøver fra børn. Positive og negative prædikative værdier afhænger meget af prævalens. Falske negative testresultater er mere sandsynlige under topaktivitet, når prævalensen for sygdom er høj. Falske positive testresultater er mere sandsynlige under perioder med lav RSV-aktivitet, når prævalensen er moderat til lav. Monoklonale antistoffer kan undlade at detektere eller detektere RSV-vira, der har gennemgået mindre aminosyreændringer i målepitopområdet, med mindre følsomhed. Prøver, der er forurenet med fuldblod >1 % v/v, kan gribe ind i fortolkningen af testen. Synligt blodige prøver må ikke anvendes. Udførelsen af denne test er ikke evalueret for brug hos patienter uden tegn og symptomer på luftvejsinfektioner. Sofia RSV FIA Side 13 af 19

14 FORVENTEDE VÆRDIER Den grad af positivitet, der er observeret i RSV-test, vil variere afhængigt af den prøvetagningsmetode, det anvendte håndterings-/transportsystem, den anvendte detektionsmetode, årstiden, patientens alder og sygdomsprævalens. Den observerede prævalens med kultur under det kliniske studie var 7 % (81/1142) UDFØRELSESKARAKTERISTIKA Sofia RSV FIA-udførelse vs. Cellekultur Sofia RSV FIA-udførelsen blev sammenlignet med virale cellekulturmetoder, fulgt af DFA i en multicenter, klinisk feltundersøgelse i perioden februar til marts 2012 i USA. Undersøgelsen blev udført af sundhedspersonale på 7 selvstændige steder i forskellige geografiske områder i USA. I denne multicenter, point-of-care (POC) feltafprøvning blev der taget to (2) nasopharyngeal swabeller nasopharyngeal aspirat/vask-prøver fra hver af de 1142 patienter. Et sæt nasopharyngeale swabprøver blev leveret af 412 patienter, og en nasopharyngeal aspirat/vask-prøve blev leveret af 730 patienter. Alle kliniske prøver blev taget fra symptomatiske patienter (i alderen 18 år og yngre): 56 % var mænd 44 % var kvinder. Test på stedet af en nasopharyngeal swabprøve eller en mængde nasopharyngeal aspirat/vaskprøve blev udført af medicinsk personale i lægens praksis eller hospitalsfacilitet med Sofia RSV FIA. Prøver blev taget fra ny og testet. Den tilbageværende prøve blev placeret i et viralt transportmedie til dyrkning. De parrede swabprøver blev randomiseret med hensyn til prøverækkefølgen i Sofia RSV FIA vs. dyrkning. Virale cellekulturer blev udført enten på et lokalt klinisk laboratorium på teststedet, eller prøverne blev transporteret kolde på isposer, ikke frosne, i løbet af natten til et centralt laboratorium til dyrkning i 48 timer. Resultaterne er vist i Tabel 2 og 3. Tabel 2 Sofia RSV FIA nasopharyngeale swab-resultater vs. dyrkning Dyrkning Sens = 22/22 = 100 % Pos. Neg. (95 % C.I %) Sofia Pos Sofia Neg Prøve = 376/390 = 96 % (95 % C.I %) PPV = 61 % NPV = 100 % Tabel 3 Sofia RSV FIA nasopharyngeale aspirat/vask-resultater vs. dyrkning Dyrkning Sens = 54/59 = 92 % Pos. Neg. (95 % C.I %) Sofia Pos Prøve = 656/671 = 98 % Sofia Neg (95 % C.I %) PPV = 78 % NPV = 99 % Sofia RSV FIA Side 14 af 19

15 Sofia RSV FIA-ydeevne vs. cellekultur ved test af prøver placeret i virustransportmedium Ydeevnen af Sofia RSV FIA ved test af prøver placeret i VTM blev sammenlignet med viruscellekultur-metoder efterfulgt af DFA i den samme multi-center kliniske feltundersøgelse i løbet af februar og marts 2012 i USA. Denne del af undersøgelsen blev gennemført af laboratoriepersonale på to (2) forskellige laboratorier i USA. En nasopharyngeale swab eller nasopharyngeal aspirat/vaskeprøve blev placeret i 1,5 ml universelt transportmedium (Copan) og derefter transporteret koldt på ispakker, ikke frossent, natten over i laboratoriet. Sofia RSV FIAtesten blev gennemført på en del af hver prøve, og kulturen blev dannet ved at bruge resten af den samme prøve i VTM. Prøver af nasopharyngeale swab blev givet af 413 patienter, og prøver af nasopharyngeal aspirat/vaskeprøve blev givet af 738 patienter. Resultaterne bliver præsenteret i tabel 4 og 5. Tabel 4 Sofia RSV FIA nasopharyngeale swab i VTM-resultater versus kultur Kultur Føls. = 22/22 = 100 % Pos Neg (95 % C.I %) Sofia Pos Spek. = 380/391 = 97 % Sofia Neg (95 % C.I %) PPV = 67 % NPV = 100 % Tabel 5 Sofia RSV FIA nasopharyngealt aspirat/vaskeprøve i VTM-resultater versus kultur Kultur Føls. = 58/60 = 97 % Pos Neg (95 % C.I %) Sofia Pos Spek. = 657/678 = 97 % Sofia Neg (95 % C.I %) PPV = 73 % NPV = 100 % Detektionsgrænse og analytisk reaktivitet Detektionsgrænsen (DG) for Sofia RSV FIA blev bestemt ved hjælp af i alt fire (4) RSV-strenge, to (2) rendyrkninger af RSV A og to (2) rendyrkninger af RSV B (Tabel 6). Tabel 6 Detektionsgrænse med humane rendyrkninger af RSV A og B Viral streng Minimumsdetektionsniveau (TCID) 50 /ml) RSV A RSV A Lang 172 RSV B Washington/18537/62 27 RSV B CH93-18(18) 225 TCID 50/ml=50 % vævskulturinfektionsdosis. TCID 50-niveauer blev bestemt ved Reed-Muench-metoden. Sofia RSV FIA Side 15 af 19

16 Analytisk reaktivitet blev påvist ved hjælp af yderligere to (2) RSV B-strenge: West Virginiastreng/14617/85 og RSV Hver streng producerede positive resultater ved eller over 142 TCID 50 /ml (WV) og 7 TCID 50 /ml (9320). Analytisk specificitet Krydsspecificitet Sofia RSV FIA blev evalueret med i alt 32 bakterielle mikroorganismer og svampemikroorganismer og 42 ikke-rsv virale rendyrkninger. Bakterielle og svamperendyrkninger blev evalueret ved koncentrationer fra 1.76 x x10 6 kde/ml. Virale rendyrkninger blev evalueret ved koncentrationer fra 2.00x x10 7 TCID 50 /ml. Ved de koncentrationer, der er anført i tabel 7 herunder, viste ingen af organismerne eller ikke-rsv viraene tegn på krydsreaktivitet i analysen. Heller ikke flow af prøven eller udseendet af kontrollinjen blev berørt. Tabel 7 Analytisk specificitet og krydsreaktivitet Organisme/ikke-RSV virus Koncentration* Resultat Acinetobacter baumannii 1.76x10 6 kde/ml Negativ Bacteroides fragilis 1.76x10 6 kde/ml Negativ Bordetella pertussis 1.76x10 6 kde/ml Negativ Candida albicans (gær) 1.76x10 6 kde/ml Negativ Corynebacterium diptheriae 1.76x10 6 kde/ml Negativ Escherichia coli 1.76x10 6 kde/ml Negativ Haemophilus influenzae 1.76x10 6 kde/ml Negativ Klebsiella pneumoniae 1.76x10 6 kde/ml Negativ Lactobacillus plantarum 1.76x10 6 kde/ml Negativ Legionella pneumophila 1.76x10 6 kde/ml Negativ Moraxella catarrhalis 1.76x10 6 kde/ml Negativ Mycobacterium avium 1.76x10 6 kde/ml Negativ Mycobacterium intracellulare 1.76x10 6 kde/ml Negativ Mycobacterium tuberculosis 1.76x10 6 kde/ml Negativ Mycoplasma pneumoniae 1.76x10 4 kde/ml Negativ Neisseria meningitides 1.76x10 6 kde/ml Negativ Neisseria mucosa 1.76x10 6 kde/ml Negativ Neisseria sicca 1.76x10 6 kde/ml Negativ Neisseria subflava 1.76x10 6 kde/ml Negativ Pseudomanas aeruginosa 1.76x10 6 kde/ml Negativ Serratia marcescens 1.76x10 6 kde/ml Negativ Staphylococcus aureus 1.76x10 6 kde/ml Negativ Staphylococcus aureus (Cowen 1) 1.76x10 6 kde/ml Negativ Staphylococcus epidermidis 1.76x10 6 kde/ml Negativ Streptococcus mutans 1.76x10 6 kde/ml Negativ Streptococcus pneumoniae 1.76x10 6 kde/ml Negativ Streptoccocus pyogenes 1.76x10 6 kde/ml Negativ Streptococcus sanguis 1.76x10 6 kde/ml Negativ Streptococcus sp. Gruppe B 1.76x10 6 kde/ml Negativ Streptococcus sp. Gruppe C 1.76x10 6 kde/ml Negativ Streptococcus sp. Gruppe F 1.76x10 6 kde/ml Negativ Streptococcus sp. Gruppe G 1.76x10 6 kde/ml Negativ Sofia RSV FIA Side 16 af 19

17 Organisme/ikke-RSV virus Koncentration* Resultat Adenovirus x10 5 TCID 50 /ml Negativ Adenovirus x10 4 TCID 50 /ml Negativ Adenovirus x10 5 TCID 50 /ml Negativ Adenovirus 7A 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativ Adenovirus x10 5 TCID 50 /ml Negativ Coranavirus OC x10 5 TCID 50 /ml Negativ Coranavirus 229E 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativ Coxsackievirus B5 (Faulkner) 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativ Cytomegalovirus AD x10 5 TCID 50 /ml Negativ Cytomegalovirus Towne 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativ Echovirus Type x10 5 TCID 50 /ml Negativ Herpes Simplex virus x10 5 TCID 50 /ml Negativ Herpes Simplex virus x10 5 TCID 50 /ml Negativ Human Metapneumovirus A1 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativ Human Metapneumovirus A2 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativ Human Metapneumovirus B1 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativ Human Metapneumovirus B2 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativ Human Metapneumovirus VR UIHC 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativ Influenza A H1N1 (5 strenge) 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativ Influenza A H3N2 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativ Influenza B Hong Kong 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativ Influenza B Panama 1.76x10 7 TCID 50 /ml Negativ Influenza C/Taylor/1233/ x10 5 TCID 50 /ml Negativ Mæslinger (Edmonston) 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativ Fåresyge (Enders) 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativ Parainfluenza virus x10 5 TCID 50 /ml Negativ Parainfluenza virus x10 5 TCID 50 /ml Negativ Parainfluenza virus x10 5 TCID 50 /ml Negativ Parainfluenza virus 4A 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativ Parainfluenza virus 4B 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativ Rhinovirus Type 1B 1.76x10 5 TCID 50 /ml Negativ Rhinovirus Type x10 5 TCID 50 /ml Negativ Rhinovirus Type x10 5 TCID 50 /ml Negativ Rhinovirus Type x10 5 TCID 50 /ml Negativ Rhinovirus Type x10 5 TCID 50 /ml Negativ Rhinovirus Type x10 5 TCID 50 /ml Negativ Rhinovirus Type x10 5 TCID 50 /ml Negativ Varicella Zoster Virus 2.69x10 4 TCID 50 /ml Negativ *Bakterieniveauer blev bestemt ved begrænsende fortynding, bakteriekultur og kolonitælling for at få kde/ml (kde = kolonidannende enhed). Viruskoncentrationer blev bestemt ved standard virologimetoder, Reed-Muench. Forstyrrende substanser Fuldblod, mucin og mange håndkøbsprodukter samt almindelige kemikalier blev evalueret og var ikke forstyrrende for Sofia RSV FIA på de testede niveauer (Tabel 8). Sofia RSV FIA Side 17 af 19

18 Tabel 8 Ikke-forstyrrende substanser Substans [Aktiv ingrediens] Koncentration Fuldblod 1 % Mucin Listerine Cool Mint mundskyl [eucalyptol, menthol, methylsalicylat og thymol] Crest Pro-health mundskyl [cetylpyridiniumklorid] 7 mg/ml 44 % 44 % Scope mundskyl [cetylpyridiniumklorid] 44 % CVS Menthol [menthol] 26 % Halls Mentho-lyptus [menthol] 26 % Ricola [menthol] 26 % Vicks Sinex nasal spray [oxymetazolin hydrochlorid] 4 Way Fast Acting nasal spray [phenylephrin hydrochlorid] Equate Fast Acting nasal spray [phenylephrin hydrochlorid] Acetamidophenol Acetylsalicylsyre Chlorpheniramin Dextromethorphan Diphenhydramin Guaiacol Phenylephrin Rimantadin Albuterol 18 % 18 % 18 % 18 mg/ml 18 mg/ml 3 mg/ml 3 mg/ml 3 mg/ml 35 mg/ml 9 mg/ml 88 µg/ml 35 mg/ml ASSISTANCE Hvis du har spørgsmål vedrørende anvendelsen af dette produkt, eller hvis du vil rapportere et testsystemproblem, bedes du ringe til Quidels tekniske supportnummer (800) (gratis i USA) eller (858) , mandag til fredag, mellem kl og 17.00, Pacific Time Zone, USA. Hvis du er uden for USA, kontaktes din lokale forhandler eller technicalsupport@quidel.com. REFERENCER 1. Red Book, American Academy of Pediatrics, 28. udgave, (2009) s Macartney K. et al. Nosocomial Respiratory Syncytial Virus Infections: The Cost-Effectiveness and Cost-Benefit of Infection Control. Pediatrics, 2000 Sept;106: Collins P., Chanock R., Murphy B. Fields Virology. Fjerde udgave. Bind 1. Kapitel 45 Respiratory Syncytial Virus. Lippincot Williams og Wilkins (2001). 4. Thompson W. et al. Mortality Associated With Influenza and Respiratory Syncytial Virus in the United States. JAMA, 2003 Januar; 289(2): Navas L., Wang E. et al. Improved outcome of respiratory syncytial virus infection in a high risk hospitalized population of Canadian children. Pediatric Investigators Collaborative Network on Infections in Canada. J Pediatr Sep; 121(3): Sofia RSV FIA Side 18 af 19

19 6. Moler F.W. et al. Respiratory syncytial virus morbidity and mortality estimates in congenital heart disease patients: a recent experience. Crit Care Med Okt; 20(10): Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories, 5th Edition. U.S. Department of Health and Human Services, CDC, NIH, Washington, DC (2007) Sofia RSV FIA 25 Test MDSS GmbH Schiffgraben Hannover, Tyskland Quidel Corporation Worldwide Headquarters McKellar Court San Diego, CA USA quidel.com DA00 (08/12) Autoriseret repræsentant i det Europæiske Fællesskab Katalognummer Positiv kontrol Negativ kontrol Batch-kode Til in vitro diagnostisk anvendelse Se brugsvejledninger CD-rom Anvendes inden Producent Temperaturbegrænsning Sofia RSV FIA Side 19 af 19