ScanGel Monoclonal ABO/RH1/K 86495 48 kort 86485 288 kort

ScanGel Monoclonal ABO/RH1/K 86495 48 kort 86485 288 kort GELER INDEHOLDENDE MONOKLONALE REAGENSER AF MURIN ELLER HUMAN OPRINDELSE ABO1, ABO2, RH1, KEL1 Ag BESTEMMELSE IVD Alle de af Bio-Rad producerede og markedsførte produkter gennemgår fra modtagelse af råmateriale til markedsføring af slutproduktet i et komplet kvalitetssikringssystem. Hvert batch af slutproduktet gennemgår kvalitetskontrol og markedsføres kun, hvis det opfylder de fastsatte kvalitetskriterier. Dokumentation vedrørende produktion og kontrol af hvert batch opbevares af producenten. 61

I - ANVENDELSE OG ANALYSEPRINCIP Dette kort må udelukkende anvendes til professionel in vitro diagnostik. Testen er designet til bestemmelse af antigener ABO1 (A), ABO2 (B), RH1 (D) og KEL1 (K) og kombinerer agglutination- og gelfiltreringsprincipperne. Reaktionen fremkommer og aflæses efter centrifugering af specialdesignede mikrorør, indeholdende gel, der er imprægneret med reagens specifikt mod det erythrocytantigen der skal bestemmes. En erythrocytsuspension fordeles i hvert mikrorør og røret centrifugeres omgående. Ikke agglutinerede røde blodlegemer samles i bunden af mikrorøret, mens agglutinater spredes over hele i mikrorørets gel afhængig af agglutinatets størrelse. Deres position i gelen er udtryk for reaktionens intensitet. - + ++ +++ ++++ II - BESKRIVELSE AF REAGENSERNE De første to mikrorør til ScanGel Monoclonal ABO/RH1/K-kortet indeholder gel, imprægneret med murint monoklonal reagens specifikt rettet mod henholdsvis anti-abo1 (A) og anti-abo2 (B). Antistofferne fremstilles af følgende kloner : anti-abo1 (A) : 15750F7 anti-abo2 (B) : X9 Det tredje og fjerde mikrorør indeholder begge en gel, imprægneret med humant monoklonal reagens specifiktrettet mod anti-rh1 (D) : Antistoffet i det tredje mikrorør er et IgM fremstillet af klonen B9A4-B2A6A6A1A1. Antistoffet i det fjerde mikrorør er et IgG fremstillet af klonen H2D5D2F5. De to anti-d-reagenser muliggør ikke påvisning af fænotypen RH1 delkategori VI (D VI ). Det femte mikrorør indeholder en gel, der er imprægneret med humant, monoklonalt reagens, der er specifik rettet mod anti-kel1 (K). Antistoffet er et IgM fremstillet af klonen MS 56. Det sjette mikrorør indeholder en antistoffri gel og er kontrollen (Ctl). Reagenserne indeholder natriumazid (< 0,1%) som konserveringsmiddel. Produktkoden og antallet af kort pr. kasse fremgår af etiketten på æsken. 62

III - OPBEVARING HOLDBARHED Udløbsdatoen og opbevaringsbetingelser fremgår af æsken. Opbevar kortene ved stuetemperatur (+15 C - +25 C). Opbevar kortene vertikalt, beskyttet for varmepåvirkning i et rum med relativ konstant temperatur og luftfugtighed. IV - ADVARSLER OG FORHOLDSREGLER Resultaternes pålidelighed afhænger af en korrekt implementering af følgende regler for god laboratoriepraksis : Brug ikke reagenserne efter den udløbsdato, der står på etiketten. Brug ikke kort, hvor der er tegn på udtørring, bobler eller en beskadiget forseglingsstrimmel. Mikrorørene indeholder forskellige reagenser, så det er vigtigt at udvise forsigtighed for at undgå kontaminering mellem mikrorørene; især under fjernelse af aluminiumsstrimlen og under afpipetteringerne. Brug en ny pipette til hver prøve. Kontroller, at pipetterne og andet udstyr fungerer korrekt, og kontroller også deres nøjagtighed. Brug handsker og sikkerhedsbriller under håndtering af reagenser og prøver. Pipettér aldrig direkte med munden. Undgå stænk. I tilfælde af stænk, skal der rengøres med 12% hypoklorit i en 1:10-opløsning og tørres efter med absorberende papir. Det materiale, der anvendes til rengøringen, skal kasseres og placeres i beholderen til kontamineret affald. Forbrugsartikler og andre produkter, der været i kontakt med prøver eller reagenser, der indeholder materiale af human oprindelse, må først kasseres efter dekontaminering. Sikkerhedsdatablad udleveres efter forespørgsel. V - UDTAGNING OG BEHANDLING AF PRØVER Foretag en aseptisk blodprøvetagning i et rør med eller uden antikoagulans (EDTA, CPD). Udfør testen, snarest muligt efter prøvetagning. Prøver, der ikke kan analyseres straks, skal opbevares ved +2 C - +8 C og skal testes inden for 48 timer. Der må under ingen omstændighed forekomme hæmolyse. Undgå at opvarme prøvematerialet. 63

VI - METODE Leveret udstyr ScanGel Monoclonal ABO/RH1/K-kort Nødvendigt, ikke leveret udstyr Erythrocytsuspensionsreagens 86441 ScanLiss 100 ml 86442 ScanLiss 500 ml 86448 ScanSol 100 ml 86449 ScanSol 500 ml IH QC : Kintrol af blodgruppeserologi 86745 IH QC 4 x 6 ml Centrifuge : ScanGel Centrifuge Automatiske eller semiautomatiske pipetter Pipettespidser Engangsrør Beholder til affald, der er forbundet med biologisk risiko Hypoklorit Gummihandsker Sugende papir Sikkerhedsbriller Kontroller Positive og negative kontroller : Røde blodlegemer, der er kendt positive og negative for det undersøgte antigen, testes samtidig med prøvematerialets røde blodlegemer for at vurdere reagensaktivit. IH QC : Kintrol af blodgruppeserologi. Fremgangsmåde Følg fremgangsmåden nøje. Alle reagenser skal have stuetemperatur, før de bruges. Adskil serum eller plasma fra de røde blodlegemer i den prøve, der skal testes ved centrifugering. VI.1 - Suspension i ScanLiss a) Fremstil en frisk erythrocytsuspension 1% i ScanLiss umiddelbart før brug Overfør 1 ml ScanLiss i et mærket engangsrør. Tilsæt 10 μl koncentrerede røde blodlegemer. Bland. Erythrocytsuspensionen er klar til brug. 64

b) Metode 1. Sæt en etiket på kortet med prøvenavn eller -nummer. Fjern forsigtigt aluminiumstrimmelen fra kortet for at forhindre krydskontaminering. Bland erythrocytsuspensionen igen før anvendelse. 2. Fordel 50 μl af suspensionen i hvert mikrorør på kortet. 3. Centrifugér derefter 10 minutter i ScanGelcentrifugen. 4. Aflæs reaktionerne. VI.2 - Suspension i ScanSol a) Fremstil en frisk erythrocytsuspension 5% i ScanSol umiddelbart før brug Overfør 0,5 ml ScanSol tilsæt i et mærket engangsrør. Tilsæt 25 μl koncentrerede røde blodlegemer. Bland. Erythrocytsuspensionen er klar til brug. b) Metode 1. Sæt en etiket på kortet med prøvenavn eller -nummer. Fjern forsigtigt aluminiumstrimmelen fra kortet for at forhindre krydskontaminering. Genopslæm de røde blodlegemer før anvendelse. 2. Fordel 10 μl af erythrocytsuspensionen i brønden af hver korts mikrorør. 3. Centrifugér straks 10 minutter i ScanGel Centrifuge. Dette skal ske inden 10 minutter efter at prøvefordelingen er afsluttet. 4. Aflæs reaktionerne. VII - RESULTATER OG FORTOLKNING Agglutinater på overfladen af eller spredt i gelen viser et positivt resultat og indikerer tilstedeværelse af det korresponderende erytrocyt-antigenet. Koncentration af røde blodlegemer i bunden af mikrorøret er lig med et negativt resultat og indikerer, at det korresponderende erythrocytantigen ikke er påvist. En positiv reaktion i et af mikrorørene kan kun valideres, hvis Ctl mikrorøret er negativt. Hvis mikrorøret med kontrollen viser en positiv reaktion : Vask de røde blodlegemer i en normal saltvandsopløsning (0,9% NaCl). Gentag fremgangsmåden, som angivet i afsnit VI.1 eller VI.2. Hvis mikrorøret Ctl stadiq viser en positiv reaktion, kan reaktionerne opnået med ScanGel Monoclonal ABO/RH1/K-kortet ikke fortolkes. Gentag testen med en anden metode end gelfiltreringsmetoden. 65

Hvis mikrorøret med kontrollen er negativt, er fortolkningen for hvert af de øvrige mikrorør som følger : Positivt resultat Svagt positivt resultat Negativt resultat ++++ + til +++ - Resultaterne valideres kun, hvis de positive og negative kontroller giver de forventede resultater. a) Fortolkning af ABO1(A)- og ABO2 (B)- mikrorør Et positivt resultat i mikrorør ABO1 (A) indikerer tilstedeværelse af antigenet ABO1 (A) på overfladen af de røde blodlegemer Et positivt resultat i mikrorør ABO2 (B) indikerer tilstedeværelse af antigenet ABO2 (B) på overfladen af de røde blodlegemer. En fuldstændig ABO-blodtypebestemmelse kræver 2 komplementerende tests: den direkte test udført med anti-abo1 (A), anti-abo2 (B) reagenser og om nødvendigt med anti-abo3 (AB) reagens og serumkontrol udført med testerythrocyter. Resultaterne af den direkte og serumkontrollen skal være overensstemmende. Enhver afvigelse mellem disse to tests skal løses inden fastsættelse af et resultat af ABO-blodtypebestemmelsen. Når resultaterne mellem den direkte test og serumtesten afviger, skal der udføres komplementerende tests med respektive kontroller. b) Fortolkning af RH1 (D)-mikrorør Et positivt resultat i mindst ét af RH1 (D)-mikrorørene indikerer tilstedeværelse af antigen RH1 (D) på overfladen af prøvens røde blodlegemer. Et negativt resultat i ét af af RH1 (D)- mikrorørene og et positivt resultat i det andet kan være forbundet med tilstedeværelse af antigenet RHW1 (svag D) eller antigenvarianten RH1(D). Der skal udføres en supplerende test med ScanGel Monoclonal Anti-RH1 (D)/RHW1 flydende reagens sammen med et ScanGel COOMBS Anti-IgG-,-C 3 d -kort. c) Fortolkning af KEL1 (K)-mikrorør Et positivt resultat i KEL1 (K)-mikrorøret indikerer tilstedeværelse af antigenet KEL1 (K) på overfladen af prøvens røde blodlegemer. 66

VIII - YDEEVNE ScanGel Monoclonal ABO/RH1/K-kortet ydeevne er blevet evalueret på et panel af tilfældigt valgte prøver (donorer, patienter og nyfødte) og et panel af udvalgte prøver. Hvert resultat er blevet sammenlignet med det, der er opnået via objektglas-, rør-, mikrorør- eller gelfiltreringsteknikker. a) Særlig ydeevne for anti-abo1(a)-og anti-abo2 (B)-reagenser Anti-ABO1 (A)- og anti-abo2 (B)-reagenser blev evalueret på et panel af 1641 tilfældigt valgte prøver (1150 donorer, 332 patienter og 159 nyfødte), suppleret med et panel af udvalgte prøver (svage antigener). De 1641 prøver har givet de forventede resultater. Der blev også testet et panel på 17 udvalgte prøver (Ax, B3, AxB, Bh, CisAB, A3B, Abf). I alle prøver blev der konstateret en reaktion på 1+ til 3+. I de testede erhvervede B-antigener blev ikke påvist med anti-abo2 (B) på ScanGel Monoclonal ABO/RH1/K-kortet. Anti-ABO1 (A)- og anti-abo2 (B)-reagenser på ScanGel Monoclonal ABO/RH1/K-kortet viste god reproducerbarhed i både interne og krydskontrollerede test. b) Særlig ydeevne for anti-rh1(d)-reagenser Anti-RH1 (D), B9A4-klon, blev evalueret på et panel af 1641 tilfældigt valgte prøver (1150 donorer, 332 patienter og 159 nyfødte), suppleret med et panel på 24 udvalgte prøver (svage antigener, varianter og særlige fænotyper). De 1641 prøver gav de forventede resultater. 94% af RHW1 (svag D) antigener blev påvist. Alle varianter og særlige fænotyper blev også påvist, undtagen fænotypen RH1 delkategori VI (D VI ). Anti-RH1 (D) reagens, klonen H2D5D2F5, er blevet evalueret på et panel af 1444 tilfældigt udvalgte prøver (1121 donorer, 292 patienter, 26 nyfødte og 5 frosne prøver) hvoraf der var 21 RHW1 (svag D)-antigener og 5 RH1 (D) varianter, der inkluderede 3 med fænotype RH1 delkategori VI (D VI ). Alle prøver gav de forventede resultater. De 3 prøver med fænotype RH1 delkategori VI (D VI ) blev ikke påvist. Begge Anti-RH1 (D)-reagenser på ScanGel Monoclonal ABO/RH1/K-kortet viste god reproducerbarhed i både interne og krydskontrollerede test. 67

c) Særlig ydeevne for anti-kel1(k)-reagenser Anti-KEL1 (K)-reagens blev evalueret på 1519 tilfældigt valgte prøver (1150 donorer, 332 patienter og 37 nyfødte) og et panel på 5 frosne, røde blodlegemer. Alle prøver gav de forventede resultater. Anti-KEL1 (K)-reagenser på ScanGel Monoclonal ABO/RH1/K-kortet viste god reproducerbarhed i både interne og krydskontrollerede test. GRÆNSER Abnorme resultater kan væreforårsaget af : bakteriel eller kemisk kontaminering af serum, plasma, de røde blodlegemer eller udstyret. patientmedicinering eller sygdomme, der fremkalder en krydsreaktion. en anden fremstilling af erythrocytsuspension end den anbefalede. tilstedeværelsen af fibrin (kompakt cellekoncentrat i bunden af mikrorøret sammen med et fint, lyserødt bånd øverst i gelen, der opstår som følge af røde blodlegemer, der tilbageholdes af fibrinresterne). anvendelse af en en anden end den anbefalede suspensionsvæske til de røde blodlegemer. kontaminering fra mikrorør til mikrorør. anvendelse af andre procedurer end den ovenfor beskrevne. Under licens fra DIAMED SA, 1785 Cressier-sur-Morat, Schweiz 68

Bio-Rad 3, bd Raymond Poincaré 92430 Marnes-la-Coquette - France Tél.: +33 1 47 95 60 00 02/2008 Fax.: +33 1 47 41 91 33 Code: 470190