Kemi Kulhydrater og protein Formål:
Formålet med forsøget er at vise hvordan man kan påvise protein, fedtstof, simple sukkerarter eller stivelse i forskellige fødevarer. Samtidig kan man få en fornemmelse af mængderne af bestanddelene i det enkelte levnedsmiddel. Teori: Protein: For at på bevise der er proteiner i produktet, skal vi tilsætte en basisk opløsning, der giver en svag farvereaktion, når Cu 2+ bindes komplekst til 2 nabo peptidbindinger. Det her virker ikke hvis det er farvede levnedsmidler. Simple sukkerarter ( reducerende sukkerarter): Kan påvises ved Fehlings reaktion. Fehlings væske er en basisk opløsning der indeholder kobber(ii)-ioner. Under opvarmning giver det et rødt bundfald, som på beviser der er sukker i produktet. Stivelse ( kompliceret sukkerart) : Stivelse består af en bland af amylose og amylopektin. Hvis iod-molekyler indlejres i stivelsens amylose fremkommer en kraftig blå farve, mens iod danner en rødviolet farve med amylopektin. Fedtstof : Kan påvises ved at udtrække det med petroleumsether. Petroleumsetheren lægger sig oven på en eventuel vandig fase. Petroeleumsetherfasen suges op og placeres i en petriskål, når det er fordampet ses eventuelt en fedt plet. Reagenser: 2 M NaOH, 1% CuSO 4, Fehlings reagens I og II, Iod/iodkalium opløsning, petroleumesether. Positive kontroller: 1% opløsninger af henholdsvis glucose, stivelse, casein og olivenolie. Fødevare: Kødpålæg, kartoffel (rå), chips, mælk.
Apparatur: Rivejern eller blender, kniv, morter, reagensglas, petriskål, engangspipette, måleglas, kogeplade, 250 ml bægerglas (Til vandbad) Fremgangsmåde: Laboratoriet vil være opdelt i 4 arbejdsstationer, en til påvisning af protein, en til påvisning af simple sukkerarter, en til påvisning af stivelse og en til påvisning af fedtstof. Den første prøve ved hver station er den positive kontrol. Beskriv resultatet af den positive kontrol i resultatskema 1. Beskrivelsen kan være opløsningen eller bundfaldets farve eller andre kendetegn. Gem reagensglasset med den positive kontrol til sammenligning med levnedsmidlerne. De næste 4 prøver er de levnedsmidler i skal undersøge (se reagenser). Gennemfør igen påvisningen efter vejledningen nedenfor og skriv de fundne resultater i resultatskema 2. Forbehandling af fødevarer: Hvis det levnedsmiddel der skal undersøges ikke er flydende, findeles en passende mængde f.eks. med blender eller rivejern. Derefter behandles det med vand i en morter til det har konsistens som vælling. Denne anvendes nu til prøverne. Påvisning af protein Biuretprøve: Første prøve: 1% opløsning af casein. Øvrige prøver: Levnedsmiddel (flydende eller vælling). Overfør 1 ml prøve til et reagensglas. Tilsæt 1 ml 2 M NaOH og ca. 5 dråber 1% CuSO 4. En svag violet farve viser, at der er et stof tilstede med mindst to pepetidebindinger, protein. Farven bliver tydeligere efter et par minutter. Tilsæt ikke for meget CuSO 4 da det vil tilsløre farven. Farven kan være meget svag, hvis der kun er lidt protein tilstede. Er det tilfældet sammenlign med farven af en blanding af 1 ml ionbyttet vand, 1 ml 2 M NaOH og fem dråber 1% CuSO 4.
Påvisning af simple sukkerarter: For hver prøve: Bland 2 ml Fehling I med 2 ml Fehling II og tilsæt 2 ml prøve. Blanding sættes til opvarmning i et kogende vandbad i ca. 5 min. (Brug sikkerhedsbriller). Efter henstand iagtages om der er dannet et rødt bundfald som tegn på tilstedeværelse af en simpel sukkerart. Påvisning af stivelse ( en kompliceret sukkerart): Første prøve: 1% opløsning af stivelse. Øvrige prøver: Levnedsmiddel ( væske eller fast). For hver prøve: band 2 ml Fehling (I) med 2 ml Fehling (II) og tilsæt 2 ml prøve. Blandingen sættes til opvarmning i et kogende vandbad i ca. 5 min. Brug sikkerhedsbriller. Efter henstand se der om der er dannet et rødt bundfald som tegn på der er en simpel sukkerart. Påvisning af fedtstof: Første prøve: 1% opløsning af olivenolie. Øvrige prøver: Levnedsmiddel ( væske eller fast). Det følgende foretages i en stinkskab og der må ikke være åben ild i nærheden. Lige dele prøve og petroleumsether blandes i et reagensglas. Prop sættes i og det rystes godt. Reagensglasset stilles i ro et par minutter. Med en engangspipette tages petroleumsether-fasen til en petriskål. Der skal det stå til fordampning, vi forøger hastigheden ved hjælp af udsugningen. Hvis levnedsmidlet indeholder fedt vil der være en fedtet plet tilbage i petriskålen Resultater, fået fra : Marie Helena, Henriette, Mads og Lisa s gruppe
Produkt Stivelse Protein Simpel sukker art Bønner + + + Cornflakes + + + Yoghurt + + + Diskussion: 1: Mælk Æg Ost Hytteost Kød Yoghurt Fisk Fjerkræ Bønner Linser Kikærter bulgur Brød (især mørkt brød) Pasta Nødder Kerner 2: En meget simpel aminosyre er glycerin og den kemiske formel er C 2 H 5 NO 2. 3: Proteiner består af polypeptidkæder, altså mange peptidkæder og de er opbygget af aminosyrer som er bundet sammen kovalent ved hjælp af peptidbindinger. 4: Kager Chokolade Honning Pizza Sødet morgenmadsprodukter Sodavand Slik
5: Formlen for glucose er C 6 H 12 O 6. Formlen for saccharose er C 5 H 22 O 11. 6: Kartofler Pasta Ris Brød 7: C 6 H 10 O 5 8: Oligosaccharider Polysaccharider 9: Fedt kød Smør Sødmælk Sødmælks yogurt 10: Side 6 af 7
konklusion Original konklusion af Marie Helena, Henriette, Mads og Lisa : Vi kan konkludere at de levnedsmidler vi undersøgte alle sammen indeholdte fedt, proteiner og simple sukker arter. Nogen indeholdte mere end andre. Ud fra de forskellige farver på produkterne efter de forskellige opløsninger til påvisning, kan man se at der er forskellige mængder i produkterne. Som i f.eks. cornflaksne var der ikke så meget sukker fordi at vællingen ikke fik et særlig rødt bundfald, da vællingen blev blandet med et miks af de to Fehlings væsker. Derfra kan vi se at, ved tilsætning af forskellige opløsninger kan vi påvise forskellige mængder af bestanddele i produkter. Med det forsøg vi lavede kan man dog ikke påvise den nøjagtige mængde af enten protein, fedt og simpel sukkerart. Vores Konklusion: Vi kan efter det her forsøg konkludere at de fødevarer det blev undersøgt alle indeholdte fedt, proteiner og simple sukker arter. Vi kan ikke sige noget om farverne siden at de ikke beskriver farverne. Side 7 af 7