Kundeservice: Kontakt den lokale Abbott-repræsentant, eller find landespecifikke kontakt oplysninger på

da Tacrolimus system 1L77 B1L776 G4-3594/R08 Læs markerede ændringer Revideret i september 2013 Tacrolimus Kundeservice: Kontakt den lokale Abbott-repræsentant, eller find landespecifikke kontakt oplysninger på www.abbottdiagnostics.com Anvisningerne i denne brugsanvisning skal følges nøje. Hvis anvisningerne ikke følges, kan testresultaternes pålidelighed ikke garanteres. Symbolforklaring Bestillingsnummer RV-celler Medicinsk udstyr til in vitro-diagnostik Gummimembran Serienummer Lotnummer Globalt varenummer Udløbsdato Opbevares ved 2-8 C Opbevares ved 15-30 C Se brugsanvisningen Repræsentant i EU Fabrikant Reagenslot Analyse-cd-rom Kontrolnummer Ekstra skruelåg Centrifugerør Centrifuge Dispenser med god præcision Sterilt, steriliserings metode: Stråling Må ikke genbruges Indeholder natriumazid. Udvikler meget giftig gas ved kontakt med syre. Advarsel: Kan udløse allergisk reaktion Komponenterne indeholder methylisothiazoloner Produceret af USA Oplysningerne gælder kun for USA Produceret for Abbott af Se afsnittet REAGENSER for nærmere oplysninger om de enkelte reagenssymboler. 1

BETEGNELSE ARCHITECT Tacrolimus ANVENDELSE ARCHITECT Tacrolimus-analysen er en kemiluminescensmikropartikelimmunanalyse (CMIA) til kvantitativ bestemmelse af tacrolimus i humant fuldblod på ARCHITECT i System. ARCHITECT Tacrolimus-analysen anvendes som hjælp til håndtering af lever- og nyretransplanterede patienter i tacrolimusbehandling. 1,2 RESUME OG ANALYSEFORKLARING Tacrolimus er et immunsuppressivt lægemiddel, som blev opdaget i 1984 af Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Det har vist sig at være effektivt til behandling af organafstødning efter transplantation. Der er offentliggjort resultater af kliniske forsøg med lever 3 og nyrer. 4,5 Der foretages til stadighed kliniske studier for en række indikationer. Tacrolimus binder til en gruppe proteiner kaldet FK506-bindingsproteiner (tacrolimusbindingsproteiner) (FKBP er). 6,7 Dannelsen af et større pentamert kompleks bestående af FKBP, tacrolimus, calmodulin og calcineurin A og B medfører inhibition af calcineurins fosfataseaktivitet. 8 Aktiviteten af transkriptionsfaktorerne, som kræver defosforylering til transport til cellekernerne, hæmmes dermed, hvilket medfører blokering af T-cellespredningen og -funktionen. Tacrolimus indgives intravenøst eller indtages peroralt. Absorption fra mavetarm-kanalen er varierende og uregelmæssig. 9 Farmakokinetiske studier med tacrolimus har vist store inter- og intraindividuelle forskelle i stoffets kinetiske egenskaber hos organtransplanterede patienter. 10,11 Farmakokinetiske studier har ligeledes vist, at fuldblod er et bedre medium til beskrivelse af tacrolimus' farmakokinetiske egenskaber end plasma. Tacrolimus er bundet til proteiner, primært albumin og α-1- syreglykoprotein, og er kraftigt bundet til erytrocytter. Fordelingen af tacrolimus mellem fuldblod og plasma afhænger af forskellige faktorer som hæmatokrit, temperatur ved plasmaseparation, koncentration af stoffet og koncentration af plasmaproteiner. I et amerikansk studie var forholdet mellem fuldblodskoncentrationen og plasmakoncentrationen 12 til 67 (gennemsnitligt 35). 12 Tacrolimus omsættes ekstensivt i leverens og tyndtarmens mikrosomer ved hjælp af cytokrom P450-enzymer. 13 Der er identificeret 9 forskellige tacrolimusmetabolitter. Flere af disse metabolitter er fundet og testet i fuldblod. 14-18 Indtagelse af tacrolimus er forbundet med alvorlige toksiske bivirkninger, primært nefrotoksicitet. 19,20 På nuværende tidspunkt er det ikke afklaret, om nefrotoksicitet forårsaget af tacrolimus skyldes moderstoffet, metabolitterne eller en kombination heraf. Andre bivirkninger inkluderer neurotoksicitet, forhøjet blodtryk, søvnløshed og kvalme. 21 ANALYSEPRINCIP ARCHITECT Tacrolimus-analysen er en forsinket ettrinsimmunanalyse til kvantitativ bestemmelse af tacrolimus i humant fuldblod og er baseret på teknologien for kemiluminescensmikropartikelimmunanalyser (CMIA) med fleksible analyseprotokoller, kaldet Chemiflex. Før påbegyndelse af den automatiske ARCHITECT-sekvens udføres en manuel forbehandling, hvor fuldblodsprøven ekstraheres med et fældningsreagens og centrifugeres. Supernatanten dekanteres i et transplantatforbehandlings rør, som sættes i ARCHITECT i System. Prøvemateriale, analysefortyndingsopløsning og paramagnetiske mikropartikler coatet med anti-tacrolimus blandes i reaktions blandingen. Tacrolimus i prøven binder til mikropartiklerne, der er coatet med antitacrolimus. Efter en forsinkelse tilføjes acridinmærket tacrolimus konjugat til reaktions blandningen. Tacrolimus i det acridinmærkede konjugat konkurrerer om de ledige bindingspladser på mikropartiklerne. Efter en inkubation vaskes mikropartiklerne, og prætrigger- og triggeropløsning tilsættes i reaktionsblandingen. Den efterfølgende kemiluminescens reaktion måles i form af relative lysenheder (RLU). Mængden af tacrolimus i prøven og mængden af RLU, som optikken i ARCHITECT i System måler, er omvendt proportional. Se kapitel 3 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om systemet og analyseteknologien. REAGENSER Reagenssæt, 100 test/500 test BEMÆRK: Nogle reagenssæt kan ikke fås i alle lande eller til anvendelse på alle ARCHITECT i Systems. Kontakt venligst Abbotts ordrekontor for nærmere oplysninger. ARCHITECT Tacrolimus Reagent Kit (1L77) 1 flaske (6,6 ml til 100 test/27,0 ml til 500 test) mikropartikler, der er coatet med anti-tacrolimus (mus, monoklonalt), i EDTA-buffer med okseproteinstabilisator. Minimumskoncentration: 0,09% tørstof. Konserveringsmidler: natriumazid og ProClin 950. 1 flaske (7,8 ml til 100 test/16,0 ml til 500 test) acridinmærket tacrolimus konjugat i citratbuffer med okseproteinstabilisator. Minimums koncentration: 5,0 ng/ml. Konserveringsmiddel: ProClin 300. 1 flaske (8,9 ml til 100 test/45,8 ml til 500 test) analysefortyndingsopløsning indeholdende MES-buffer med natriumklorid. Konserveringsmidler: ProClin 950 og ProClin 300. Andre reagenser ARCHITECT i Pre-Trigger Solution Prætriggeropløsning indeholdende 1,32% (w/v) hydrogenperoxid. ARCHITECT i Trigger Solution Triggeropløsning indeholdende 0,35 N natriumhydroxid. ARCHITECT i Wash Buffer Vaskebuffer indeholdende fosfatbufferopløsning. Konserverings midler: antimikrobielle midler. VIGTIGE FORHOLDSREGLER Til in vitro-diagnostisk brug Anvisningerne i denne brugsanvisning skal følges nøje. Hvis anvisningerne ikke følges, kan testresultaternes pålidelighed ikke garanteres. Sikkerhedsforanstaltninger VIGTIGT: Brug af dette produkt kræver håndtering af humane prøver. Det anbefales, at alt materiale af human oprindelse betragtes som potentielt smittefarligt og håndteres i overensstemmelse med det amerikanske arbejdsmiljøinstitut OSHA's standard Bloodborne Pathogens. 22 Biosafety Level 2 23 eller andre gældende sikkerhedsforanstaltninger for biologisk materiale 24,25 bør anvendes ved håndtering af materiale, der indeholder eller mistænkes for at indeholde smittefarlige stoffer. Mikropartiklerne, konjugatet og analysefortyndingsopløsningen indeholder methylisothiazoloner, som er komponenter i ProClin, og er klassificeret i henhold til De Europæiske Fællesskabers (EF) gældende direktiver som: lokalirriterende (Xi). Se følgende risiko- (R) og sikkerhedssætninger (S): R43 Kan give overfølsomhed ved kontakt med huden. S24 Undgå kontakt med huden. S35 Materialet og dets beholder skal bortskaffes på en sikker måde. S37 Brug egnede beskyttelseshandsker under arbejdet. S46 Ved indtagelse, kontakt omgående læge og vis denne beholder eller etiket. Dette produkt indeholder natriumazid. Se afsnittet REAGENSER for nærmere angivelse. Udvikler meget giftig gas ved kontakt med syre. Materialet og dets beholder skal bortskaffes på en sikker måde. Sikkerhedsdatablade er til rådighed på www.abbottdiagnostics.com eller kan fås ved henvendelse til kundeservice. Se kapitel 8 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om sikker bortskaffelse af natriumazid og en detaljeret beskrivelse af sikkerhedsforanstaltningerne ved brug. Forholdsregler ved anvendelse Anvend ikke reagenssæt, hvor udløbsdatoen er overskredet. Bland ikke reagenser med andre reagenser fra samme eller andre reagenssæt. 2

Før ARCHITECT Tacrolimus-reagenssættet placeres i systemet første gang, skal flasken med mikropartikler blandes grundigt for at få mikropartikler, som har bundfældet sig under transporten, til at resuspendere. For anvisninger vedrørende blanding af mikropartikler henvises til afsnittet PROCEDURE, Analyseprocedure i denne brugsanvisning. Gummimembran SKAL anvendes for at undgå fordampning og kontaminering og for at sikre reagensernes holdbarhed. Hvis ikke gummimembran anvendes som anført i denne brugsanvisning, kan testresultaternes pålidelighed ikke garanteres. Brug rene handsker for at undgå kontaminering, når der sættes gummimembran på en åben reagensflaske. Når den åbne reagensflaske er forsynet med en gummimembran, må flasken ikke vendes, da dette vil medføre udsivning af reagens, hvilket vil kunne have indflydelse på testresultaterne. Med tiden vil tilbagebleven væske kunne tørre fast på gummimembranen. Der vil typisk være tale om indtørrede salte, der ikke har nogen betydning for analysen. Se kapitel 7 i ARCHITECT-brugermanualen for en nærmere beskrivelse af forholdsreglerne ved betjening af systemet. Opbevaring ARCHITECT Tacrolimus-reagenssættet skal opbevares ved 2-8 C i oprejst stilling og kan anvendes, straks efter at det er fjernet fra køl (2-8 C). Reagenserne er holdbare indtil udløbsdatoen ved opbevaring og håndtering efter forskrifterne. ARCHITECT Tacrolimus-reagenssættet kan opbevares i ARCHITECT i System i højst 30 dage, hvorefter det skal bortskaffes. Rekalibrering kan være nødvendig for at opnå maksimal reagensstabilitet i systemet. Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om styring af reagensholdbarhed i systemet. Reagenserne kan opbevares i eller uden for ARCHITECT i System. Hvis reagenserne fjernes fra systemet, bør de opbevares oprejst ved 2-8 C (med gummimembran og nyt skruelåg). Det anbefales i så fald at placere dem i de originale bakker og æsker, hvori de står korrekt. Hvis flasken med mikropartikler ikke står oprejst (forsynet med gummimembran) på køl uden for systemet, skal reagenssættet bortskaffes. Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om udtagning af prøver. Indikation af reagenshenfald Hvis en kontrolværdi ligger uden for det specificerede område, kan dette være et tegn på reagenshenfald eller procedurefejl. Tilhørende testresultater er ugyldige, og prøverne skal testes igen. Rekalibrering kan være påkrævet. Se kapitel 10 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om fejlfinding. INSTRUMENTPROCEDURE ARCHITECT Tacrolimus-analysefilen skal installeres på ARCHITECT i System fra en ARCHITECT i System Assay CD-ROM, før analysen udføres. Se kapitel 2 i ARCHITECT-brugermanualen for nærmere oplysninger om installation af analysefil samt om visning og ændring af analyseparametre. Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om udskrivning af analyseparametre. Se ARCHITECT-brugermanualen for en detaljeret beskrivelse af systemprocedurer. Standardresultatenheden for ARCHITECT Tacrolimus-analysen er ng/ml. Det er muligt at vælge resultatenheden nmol/l eller μg/l til afgivelse af resultater. Dette gøres ved at redigere analyseparameteret Result concentration units. Hvis den alternative resultatenhed nmol/l vælges, benytter systemet omregningsfaktoren 1,2438. Hvis den alternative resultatenhed μg/l vælges, benytter systemet omregningsfaktoren 1,0. Omregningsfaktor: (koncentration i ng/ml) x (1,2438) = nmol/l Omregningsfaktor: (koncentration i ng/ml) x (1,0) = µg/l PRØVETAGNING OG KLARGØRING Prøvetyper Kun humane fuldblodsprøver udtaget i EDTA-rør kan anvendes til ARCHITECT Tacrolimus-analysen. Følg fabrikantens brugervejledning for fuldblodsprøvetagningsrør. Det anbefales at mærke prøverne med både tidspunkt for prøvetagning og sidste indgivelse af lægemidlet. System kontrollerer ikke prøvetypen. Det er brugerens opgave at kontrollere, at den korrekte prøvetype anvendes til ARCHITECT Tacrolimus-analysen. Forhold vedrørende prøvemateriale Anvend ikke prøver, der er: varmeinaktiverede udtaget post mortem eller af andre kropsvæsker tydeligt mikrobielt kontaminerede Vær forsigtig ved håndtering af patientprøver for at undgå krydskontaminering. Det anbefales at bruge engangspipetter eller -pipettespidser. Klargøring Følg fabrikantens brugervejledning til fuldblodsprøvetagningsrør. Bland optøede prøver grundigt ved at vortexe dem ved lav hastighed eller ved at vende dem 10 gange. Kontrollér prøverne visuelt. Hvis en lagdeling kan konstateres, skal prøverne vendes yderligere, indtil de er synligt homogene. Følg vejledningen i PROCEDURE, Manuel forbehandlingsprocedure. Opbevaring Før testning kan prøver udtaget i EDTA-rør opbevares i op til 7 dage ved 2-8 C. 26 Hvis testningen bliver forsinket i mere end 7 dage, bør prøverne opbevares nedfrosset (-10 C eller koldere). Prøverne skal blandes grundigt efter optøning for at sikre overensstemmende testresultater. Genfindelse af tacrolimus i frosne fuldblodsprøver er rapporteret til > 90% efter 6 måneder, men der sker et tab på 46% efter 9 måneder. 1 Bortskaf overskydende forbehandlede prøver, efter at testen er færdig. ARCHITECT Tacrolimus-test kan ikke genbestilles. Retestning kræver gentagelse af den manuelle forbehandlingsprocedure, som er beskrevet i afsnittet PROCEDURE. Forsendelse Ved forsendelse skal prøverne pakkes og mærkes i overensstemmelse med gældende nationale og internationale regler for transport af kliniske prøver og smittefarlige stoffer. Prøverne skal forsendes på tøris eller med køleelement. Ovenstående opbevaringstider må ikke overskrides. PROCEDURE Medfølgende produkter 1L77 ARCHITECT Tacrolimus Reagent Kit 1L77-55 ARCHITECT Tacrolimus Whole Blood Precipitation Reagent 9527-40 XSYSTEMS 1P06 Transplant Pretreatment Tubes Nødvendigt tilbehør og udstyr System ARCHITECT Tacrolimus-analysefilen fra: System e-assay CD-ROM, der findes på www.abbottdiagnostics.com 3K50 ARCHITECT i - US Addition A 3K52 ARCHITECT i - WW (excluding US)- Addition A 1L77-01 ARCHITECT Tacrolimus Calibrators 1P05-10 Abbott Immunosuppressant-MCC eller andre kommercielt tilgængelige kontroller 3

Vortex-blander 9527-26 XSYSTEMS eller anden laboratorie mikrocentrifuge. af polypropylen, der er kompatible med laboratoriets mikrocentrifuge. Præcisionsmikropipetter Pipettespidser 9528-02 XSYSTEMS eller tilsvarende 2,5 ml Combitips eller tilsvarende til Se kapitel 9 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om nødvendigt udstyr til brug i forbindelse med vedligeholdelsesprocedurer. Manuel forbehandlingsprocedure ARCHITECT Tacrolimus-analysen kræver et manuelt forbehandlingstrin for alle fuldblodspatientprøver, ARCHITECT Tacrolimus Calibrators og Abbott Immunosuppressant-MCC eller andre kontroller. Anvend kun ARCHITECT Tacrolimus Whole Blood Precipitation Reagent (1L77-55). Når den manuelle forbehandlingsprocedure er påbegyndt, skal alle trin fuldføres i umiddelbar rækkefølge. Bemærk: Hvis der kræves fortynding af en prøve, skal den fortyndes før den manuelle forbehandling. Se afsnittet Prøvefortyndingsprocedurer i denne brugsanvisning. Advarsel: Der må kun bruges transplantatforbehandlingsrør (bestillingsnr. 1P06) til forbehandling af tacrolimusprøver til brug i ARCHITECT i System. Pålideligheden af andre ARCHITECT-analyseresultater kan blive påvirket, hvis der ikke anvendes transplantatforbehandlingsrør sammen med ARCHITECT Tacrolimus-analysen. Advarsel: Alle forbehandlede prøver (prøver, kalibratorer eller kontroller) skal testes højst 30 minutter efter dekantering i transplantatforbehandlingsrørene og isætning i ARCHITECT i System. Alle ARCHITECT Tacrolimus-prøver skal isættes som hasteprøver. Isætning som hasteprøver forebygger fordampning, som påvirker analyseresultaterne. Der må ikke isættes mere end 100 tacrolimusprøver i i 2000-systemet samtidig. Der må ikke isættes mere end 24 tacrolimusprøver i i1000-systemet samtidig. Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om isætning af hasteprøver. Bemærk: En vejledning i forbehandling af ARCHITECT Tacrolimus-prøver med beskrivelse af forbehandlingstrinene fås ved henvendelse til Abbotts kundeservice. Manuel forbehandlingsprocedure Bemærk: Nedenstående manuelle forbehandlingstrin skal følges nøjagtigt for at opnå optimale resultater med ARCHITECT Tacrolimusanalysen. 1. Bland hver prøve (prøve, kalibrator eller kontrol) grundigt ved at vende beholderen forsigtigt 5-10 gange. Det kan være nødvendigt at blande ældre fuldblodsprøver i længere tid. Kontrollér prøven visuelt for at sikre, at den er blandet tilstrækkeligt. 2. Brug en præcisionspipette til at dispensere 200 µl af hver prøve i et XSYSTEMS-centrifugerør eller lignende centrifugerør af polypropylen(f.eks. med rund bund) straks efter blandingen. Brug et nyt rør for hver prøve. Bemærk: Der skal anvendes en ny pipettespids, hver gang der aspireres 200 µl. Undgå aftørring af pipettespidser. Undgå overaspirering. Genanvend ikke pipettespidser til gentagne overførsler af den samme prøve. Anvendelse af "positive displacement"-pipetter, fugtning af pipettespidsen og omvendt afpipettering (pipettering med dødvolumen) anbefales ikke, eftersom disse metoder kan resultere i fejlkoder og tilføre analysen større impræcision. 3a. Indstil en dispenser med god præcision til at dispensere 200 µl. Fyld dispenseren med en tilstrækkelig mængde af ARCHITECT Tacrolimus Whole Blood Precipitation Reagent fra flasken med blå mærkat. Fjern luftbobler fra dispenseren ved at dispensere en lille mængde af fældningsreagenset i en passende affaldsbeholder. Bemærk: Undlad at placere en fyldt dispenser på laboratoriebordet for at undgå udsivning. ARCHITECT Tacrolimus Whole Blood Precipitation Reagent er meget flygtigt. For at forhindre fordampning skal beholderen holdes tæt lukket, når den ikke anvendes. 3b. Tilsæt 200 µl ARCHITECT Tacrolimus Whole Blood Precipitation Reagent i det første centrifugerør, således at pipettespidsen rører ved indersiden af centrifugerøret. Advarsel: Hætten skal sættes på hvert enkelt rør, og røret skal vortexes straks efter tilsætning af ARCHITECT Tacrolimus Whole Blood Precipitation Reagent, før fældningsreagenset tilsættes i de efterfølgende rør. 3c. Sæt hætte på det første rør, og vortex straks. 3d. Vortex kraftigt i 5-10 sekunder. Brug den maksimale Vortexindstilling. Advarsel: Hvis hvert enkelt rør ikke vortexes straks efter tilsætning af ARCHITECT Tacrolimus Whole Blood Precipitation Reagent, vil det føre til fejlagtige analyseresultater. Bemærk: Visuel inspektion er påkrævet for at sikre, at blandingen af prøven med fældningsreagenset er ensartet og homogen. Der må ikke være ublandet materiale fra blandingen i bunden af røret. Hvis der er ublandet materiale i bunden af røret, skal det løsnes ved at vende røret og banke på bunden af det. Vortex derefter prøven igen. Dette er tegn på, at den oprindelige Vortex-blanding har været utilstrækkelig. Omgående Vortex-blanding minimerer den tid, der er til rådighed til bundfældning. Ikke alle Vortex-blandere giver tilstrækkelig blanding. Gentag processen med "tilsæt, sæt hætte på, og vortex" for alle efterfølgende prøver. For hvert enkelt rør skal Vortex-blandingen udføres i lige lang tid, og processen med tilsæt, sæt hætte på, og vortex skal udføres, før der fortsættes med næste rør. Dispensér ikke ARCHITECT Tacrolimus Whole Blood Precipitation Reagent i alle rørene på én gang. Hætten skal sættes på hvert enkelt rør, og røret skal vortexes straks efter tilsætning af ARCHITECT Tacrolimus Whole Blood Precipitation Reagent, før fældningsreagenset tilsættes i de efterfølgende rør. 4. Isæt hvert rør i en XSYSTEMS-centrifuge eller en tilsvarende laboratoriemikrocentrifuge på en sådan måde, at rotoren afbalanceres. Der kan eventuelt isættes et ekstra rør for at udligne balancen. Der kan kun centrifugeres et lige antal rør ad gangen. Centrifugér rørene i mindst 4 minutter ved > 9500 x g RCF eller i 38.500 g-minutter. 5. Fjern hvert enkelt rør fra centrifugen, og kontrollér for forekomsten af bundfald og klar supernatant. 6. Tag hætten af hvert rør, og dekanter (hæld af) supernatanten i transplantatforbehandlingsrøret, når ARCHITECT i System er klar til at modtage prøver. Advarsel: Hvirvl ikke bundfaldet op. Afpipetter ikke supernatanten, da det vil bidrage til at sikre, at bundfaldet ikke hvirvles op. Bemærk: Brug et nyt transplantatforbehandlingsrør for hver prøve. Advarsel: Der må kun bruges transplantatforbehandlingsrør (bestillingsnr. 1P06) til forbehandling af tacrolimusprøver til brug i ARCHITECT i System. Pålideligheden af andre ARCHITECT-analyseresultater kan blive påvirket, hvis der ikke anvendes transplantatforbehandlingsrør sammen med ARCHITECT Tacrolimus-analysen. 4

Advarsel: Alle forbehandlede prøver (prøver, kalibratorer eller kontroller) skal testes højst 30 minutter efter dekantering i transplantatforbehandlingsrørene og isætning i ARCHITECT i System. Alle ARCHITECT Tacrolimus-prøver skal isættes som haste prøver. Isætning som hasteprøver forebygger fordampning, som påvirker analyseresultaterne. Der må ikke isættes mere end 100 tacrolimusprøver i i 2000-systemet samtidig. Der må ikke isættes mere end 24 tacrolimusprøver i i1000-systemet samtidig. Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om isætning af hasteprøver. 7. Vortex transplantatforbehandlingsrøret i 5-10 sekunder. 8. Overfør transplantatforbehandlingsrøret til ARCHITECTprøveholderen. Bemærk: Placer transplantatforbehandlingsrøret, således at det rører bunden af prøveholderen. Bortskaf overskydende forbehandlede prøver, efter at testen er færdig. ARCHITECT Tacrolimus-test kan ikke genbestilles. Ved en retestning skal den manuelle forbehandlingsprocedure gentages. Analyseprocedure Før ARCHITECT Tacrolimus-reagenssættet placeres i systemet første gang, skal flasken med mikropartikler blandes grundigt for at få mikropartikler, som har bundfældet sig under transporten, til at resuspendere. Når mikropartiklerne er blevet placeret i systemet første gang, er der ikke behov for yderligere blanding. Vend flasken med mikropartikler 30 gange. Kontrollér, at mikropartiklerne er resuspenderet i flasken. Hvis der stadig sidder mikropartikler fast i flasken, skal flasken vendes, indtil mikropartiklerne er helt resuspenderet. Hvis mikropartiklerne ikke kan resuspenderes, MÅ DE IKKE ANVENDES. Kontakt Abbotts kundeservice. Når mikropartiklerne er resuspenderet, sættes en gummimembran på flasken. Se afsnittet Forholdsregler ved anvendelse i denne brugsanvisning for oplysninger om påsætning af gummimembraner. Anbring ARCHITECT Tacrolimus-reagenssættet i ARCHITECT i System. Kontrollér, at alle nødvendige reagenser forefindes. Kontrollér, at alle reagensflasker er forsynet med en gummimembran. Bestil evt. kalibrering. Se kapitel 6 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om bestilling af kalibrering. Bestil testene. Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om bestilling af patientprøver og kontroller samt generelle betjeningsprocedurer. Der må højst udføres 3 gentagelser fra samme transplantatforbehandlingsrør. Alle forbehandlede prøver (prøver, kalibratorer eller kontroller) skal testes højst 30 minutter efter dekantering i transplantatforbehandlingsrørene og isætning i ARCHITECT i System. Alle ARCHITECT Tacrolimus-prøver skal isættes som hasteprøver. Isætning som hasteprøver forebygger fordampning, som påvirker analyseresultaterne. Der må ikke isættes mere end 100 tacrolimusprøver i i 2000-systemet samtidig. Der må ikke isættes mere end 24 tacrolimusprøver i i 1000-systemet samtidig. Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om isætning af hasteprøver. Ved brug af transplantatforbehandlingsrør bør prøvemåler anvendes for at sikre, at der er nok prøvemateriale til ARCHITECT Tacrolimus-analysen. Klargør kalibratorer og kontroller. Se afsnittet i PROCEDURE, Manuel forbehandlingsprocedure. Isæt de forbehandlede prøver. Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om isætning af prøver. Tryk på RUN. Se kapitel 3 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om betjening. For at opnå optimal ydeevne er det vigtigt at følge procedurerne for rutinevedligeholdelse i kapitel 9 i ARCHITECT-brugermanualen. Udfør vedligeholdelsesprocedurerne hyppigere, hvis det kræves af laboratoriets procedurer. Prøvefortyndingsprocedurer Prøver med tacrolimuskoncentrationer, der er større end 30,0 ng/ml, markeres som >30.0 ng/ml og kan fortyndes ved hjælp af den manuelle fortyndingsprocedure. Manuelle fortyndinger bør foretages som følger: Den anbefalede fortynding til ARCHITECT Tacrolimus-analysen er 1:2. Prøverne skal fortyndes før forbehandling. Tilsæt 150 µl af patientprøven til 150 µl of ARCHITECT Tacrolimus Calibrator A, og fortsæt derefter med den manuelle forbehandlingsprocedure i afsnittet PROCEDURE. Det er brugerens opgave at indtaste fortyndingsfaktoren på skærmbilledet til bestilling af patientprøver og kontroller. Systemet anvender denne fortyndingsfaktor til automatisk at beregne prøvens koncentration før fortynding og afgive resultatet. Resultatet (før fortyndingsfaktoren anvendes) bør være større end 3,0 ng/ml. Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om bestilling af fortyndinger. Kalibrering For at udføre en ARCHITECT Tacrolimus-kalibrering skal kalibrator A, B, C, D, E og F testes i dobbeltbestemmelse. Der kræves kun 1 forbehandlet prøve af hver ARCHITECT Tacrolimus Calibrator for at udføre en kalibrering på ARCHITECT i System. Dette giver en tilstrækkelig mængde til at kunne teste hver kalibrator i dobbeltbestemmelse. En enkelt prøve af hvert tacrolimuskontrolniveau skal testes for at evaluere analysens kalibrering. Kontrollér, at analysekontrol værdierne ligger inden for de fastsatte områder. Kalibreringsområde: 0,0 til 30,0 ng/ml. Når en ARCHITECT Tacrolimus-kalibrering er godkendt og gemt, kan alle efterfølgende prøver testes uden yderligere kalibrering, medmindre: Et reagenssæt med et nyt lotnummer tages i brug. Kontrollerne ligger uden for det specificerede område. Se kapitel 6 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om udførelse af analysekalibrering. PROCEDURER FOR KVALITETSKONTROL For at overholde kontrolkravene til ARCHITECT Tacrolimus-analysen bør alle kontrolniveauerne testes i enkeltbestemmelse 1 gang i døgnet på kørselsdage. Kommercielle kontroller, såsom Abbott Immunosuppressant- MCC, er egnede til dette formål. Hvis laboratoriets procedurer for kvalitetskontrol kræver hyppigere brug af kontroller til verifikation af testresultater, bør de pågældende procedurer følges. Det anbefales, at det enkelte laboratorium fastsætter sine egne kontrolområder til overvågning af analysens ydeevne. Hvis en kontrolværdi ligger uden for det specificerede område, er de tilhørende testresultater ugyldige, og prøverne skal retestes. Rekalibrering kan være nødvendig. Verifikation af analysens dokumenterede egenskaber Se appendiks B i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om fremgangsmåde til verifikation af analysens dokumenterede egenskaber. ARCHITECT Tacrolimus-analysen tilhører metodegruppe 6. ARCHITECT Tacrolimus Calibrators kan anvendes, når MasterCheck ikke er tilgængelig. Se appendiks B i ARCHITECT-brugermanualen. RESULTATER Til beregning af kalibreringskurven anvender ARCHITECT Tacrolimusanalysen en logistisk 4-parameterdatareduktionsmetode (4PLC, Y-vægtet). 5

Flag Nogle resultater har meddelelser i flagfeltet. Se kapitel 5 i ARCHITECTbrugermanualen for en beskrivelse af de flag, der kan forekomme i dette felt. Måleområde (rapporterbart område) Måleområdet for ARCHITECT Tacrolimus-analysen er 2 ng/ml (den minimale lineære værdi er baseret på funktionel sensitivitet) til 30 ng/ml. PROCEDUREBEGRÆNSNINGER Til diagnostisk brug bør resultaterne anvendes sammen med andre data, som f.eks. symptomer, resultater fra andre analyser, kliniske indtryk, osv. Hvis tacrolimusresultaterne ikke stemmer overens med den kliniske udredning, anbefales det at foretage yderligere test for at konfirmere resultatet. Hvis tacrolimusanalyseværdien i en given prøve er bestemt ud fra analyser fra forskellige fabrikanter, kan denne variere på grund af forskelle i analysemetoder og reagensspecificitet. Immunanalyser er uspecifikke og krydsreagerer med metabolitterne. Når eliminering af tacrolimus er nedsat (f.eks. ved kolestase), kan der ophobes tacrolimusmetabolitter. Immunanalysen kan overvurdere tacrolimuskoncentrationen. I sådanne tilfælde kan brug af en specifik analyse (f.eks. væskekromatografi med massespektrometri/massespektrometri [LC/MS/MS]) overvejes. Se afsnittet SPECIFICITET nedenfor for vurderinger af ARCHITECT Tacrolimus-analysens krydsreaktivitet med visse tacrolimusmetabolitter. Se afsnittet METODESAMMENLIGNING nedenfor for repræsentative data om sammenligning af patientresultater fra ARCHITECT Tacrolimus-analysen, IMx Tacrolimus II-analysen og en LC/MS/MS-metode. Heterofile antistoffer i humant serum kan reagere med reagensimmun globulin og dermed interferere med in vitro-immunanalyser. 27 Patienter, som ofte er i kontakt med dyr eller serum produkter fra dyr, kan have tendens til denne interferens, og afvigende værdier kan ses. Yderligere oplysninger kan være påkrævet til diagnosticering. Prøver fra patienter, der har modtaget præparater med musemonoklonale antistoffer til diagnosticering eller behandling, kan indeholde humane anti-mus-antistoffer (HAMA-effekt). 28,29 Sådanne prøver kan udvise afvigende værdier ved anvendelse af reagenssæt (såsom ARCHITECT Tacrolimus), der indeholder musemonoklonale antistoffer. 28 FORVENTEDE VÆRDIER VIGTIGT: Der findes intet fast terapeutisk område for tacrolimus i fuldblod. Kompleksiteten af klinisk status, individuelle forskelle i sensitivitet over for tacrolimus' immunsuppressive og nefrotoksiske virkninger, kombinationsbehandling med andre immunsuppressive lægemidler, transplantationstypen, tidsrummet efter transplantationen og en række andre faktorer bidrager til forskellige krav til optimale niveauer af tacrolimus i blodet. Derfor kan individuelle tacrolimusværdier ikke anvendes som eneste indikator for ændringer i behandlingsregimet, og hver enkelt patient skal underkastes en grundig klinisk evaluering, før behandlingsregimet ændres. Hver enkelt bruger skal fastsætte egne områder på baggrund af egen klinisk erfaring. De terapeutiske områder varierer alt efter den anvendte kommercielle analyse og bør derfor fastsættes individuelt for hver kommerciel analyse. De værdier, der måles med forskellige analysemetoder, kan ikke udskiftes med en anden metode på grund af forskelle i analysemetoder og krydsreaktivitet med metabolitter, og der bør ikke anvendes korrektionsfaktorer. Konsekvent brug af samme analyse anbefales derfor for den enkelte patient. Ifølge Consensus Document er det terapeutiske område for tacrolimus ikke klart defineret, men fastlagte dalværdier for koncentration i fuldblod over 12 timer er 5-20 ng/ml i den første tid efter transplantation. Højere koncentrationer associeres med øget incidens af bivirkninger. Dalværdier for koncentration over 24 timer er 33-50% mindre end de tilsvarende dalværdier for 12 timer. 1 Genfindelse ARCHITECT Tacrolimus-analysen er udviklet til at have en middelgenfindelse på 100 ± 10% af den forventede værdi. Der blev udført et studie, hvor kendte koncentrationer af tacrolimus blev tilsat i mængder af fuldblodsprøver. Tacrolimuskoncentrationen blev bestemt ved hjælp af ARCHITECT Tacrolimus-analysen, og den deraf resulterende genfindelsesprocent blev beregnet. Data fra dette studie er opstillet i følgende tabel.* Prøve Endogen koncentration Tilsat tacrolimus Målt koncentration YDEEVNE Præcision ARCHITECT Tacrolimus-analysen er udviklet til at have en præcision på 10% total CV. Der blev udført et studie med ARCHITECT Tacrolimus-analysen baseret på retningslinjer i Clinical and Laboratory Standards Institutes (CLSI, tidligere NCCLS) dokument EP5-A2. 30 Abbott Immunosuppressant-MCC (niveau 1, 2 og 3) og 5 fuldblodspaneler blev testet i dobbeltbestemmelse med 2 reagenslot på 2 instrumenter 2 gange dagligt i 20 dage. Til hvert reagenslot anvendtes den samme kalibreringskurve i hele studiet. Data fra dette studie er opstillet i følgende tabel.* Instru- Reagenslot Middel Intraseriel Total Prøve ment n SD %CV SD %CV Niveau 1 1 1 80 3,0 0,1 3,7 0,1 4,9 2 2 80 2,9 0,2 5,8 0,2 6,7 Niveau 2 1 1 80 7,8 0,2 2,4 0,3 3,6 2 2 80 8,5 0,2 2,7 0,4 4,2 Niveau 3 1 1 80 14,5 0,4 2,5 0,5 3,5 2 2 80 15,7 0,5 2,9 0,6 4,0 Panel 1 1 1 80 5,5 0,2 3,6 0,2 4,4 2 2 80 5,9 0,2 4,0 0,3 5,2 Panel 2 1 1 80 14,0 0,5 3,5 0,6 4,2 2 2 80 15,3 0,6 4,1 0,7 4,7 Panel 3 1 1 80 4,8 0,2 4,4 0,2 5,2 2 2 80 4,9 0,2 5,0 0,3 6,3 Panel 4 1 1 80 10,1 0,2 2,4 0,4 4,4 2 2 80 11,2 0,5 4,1 0,6 5,3 Panel 5 1 1 80 21,2 0,7 3,3 0,9 4,4 2 2 80 22,4 0,8 3,6 1,3 5,7 Genfindelsesprocent a 1 0,1 6,9 6,9 99 9,3 9,3 99 15,2 16,4 107 18,8 18,8 99 2 0,2 6,9 7,1 100 9,3 9,5 100 15,2 16,2 105 18,8 19,1 101 3 0,1 6,9 6,9 98 9,3 9,7 103 15,2 16,1 105 18,8 19,3 102 Middelgenfindelse = 102% a Genfindelsesprocent = Målt koncentration Endogen koncentration + Tilsat tacrolimus x 100 6

Fortyndingslinearitet ARCHITECT Tacrolimus-analysen er udviklet til at have en middelgenfindelse på 100 ± 10% af det forventede værdier for fortyndede prøver. Der blev udført et fortyndingslinearitetsstudie ved at fortynde fuldblodsprøver med høje koncentrationer af tacrolimus med ARCHITECT Tacrolimus Calibrator A. Tacrolimuskoncentrationen blev bestemt for hver prøve fortynding, og genfindelsesprocenten blev beregnet. Data fra dette studie er opstillet i følgende tabel.* Prøve Målt koncentration Beregnet koncentration a Fortyndingsfaktor Genfindelsesprocent 1 Ufortyndet 29,4 --- --- 1:1,11 26,7 29,6 101 1:1,25 23,0 28,8 98 1:1,43 20,7 29,6 101 1:1,67 17,3 28,9 98 1:2,5 11,7 29,3 99 1:5 6,0 30,0 102 1:10 2,8 28,0 95 2 Ufortyndet 27,8 --- --- 1:1,11 25,6 28,4 102 1:1,25 23,3 29,1 105 1:1,43 20,1 28,7 103 1:1,67 17,9 29,9 108 1:2,5 11,9 29,8 107 1:5 5,8 29,0 104 1:10 2,9 29,0 104 3 Ufortyndet 28,1 --- --- 1:1,11 25,3 28,1 100 1:1,25 22,8 28,5 101 1:1,43 20,1 28,7 102 1:1,67 17,2 28,7 102 1:2,5 11,7 29,3 104 1:5 5,9 29,5 105 1:10 2,8 28,0 100 Middelgenfindelse = 102% a Beregnet koncentration = Observeret koncentration x Fortyndingsfaktor b Genfindelsesprocent = Beregnet koncentration Ufortyndet observeret koncentration x 100 Sensitivitet ARCHITECT Tacrolimus-analysen er udviklet til at have en detektionsgrænse på 1,5 ng/ml, hvilket ligger under ARCHITECT Tacrolimus-analysens måleområde. ARCHITECT Tacrolimus-analysens detektionsgrænse, defineret som koncentrationen ved 2 standardafvigelser over ARCHITECT Tacrolimus Calibrator A (0 ng/ml), blev beregnet til at være 0,3 ng/ml* ved 95%-konfidensniveauet (baseret på et studie med n = 24 kørsler, 10 gentagelser af kalibrator A og 4 gentagelser af kalibrator B pr. kørsel). Funktionel sensitivitet ARCHITECT Tacrolimus-analysen er udviklet til at have en funktionel sensitivitet på 2 ng/ml. Der blev udført et studie, hvor fuldblodsprøver blev beriget med tacrolimus til koncentrationer fra 0,2 til 4,4 ng/ml. Disse blev analyseret i 10 gentagelser 2 gange dagligt i 5 dage med 1 reagenslot og 1 kalibratorlot med i alt 100 gentagelser pr. panel. Total % CV blev beregnet og plottet ind i forhold til middelkoncentrationen. Efter tilpasning af den reciprokke kurve blev værdien for funktionel sensitivitet beregnet til den koncentration, der svarer til et 20%-variationskoefficientniveau på den tilpassede kurve. Ved den øvre 95%-konfidensgrænse blev den laveste ARCHITECT Tacrolimusanalyseværdi med 20% CV beregnet til at være 0,8 ng/ml, hvilket ligger under ARCHITECT Tacrolimus-analysens måleområde.* Specificitet Der blev udført et studie med ARCHITECT Tacrolimus-analysen baseret på retningslinjer i CLSI's dokument EP7-A2. 31 Mængder af fuldblodsprøver blev tilsat tacrolimus til fastsatte værdier fra 5 til 22 ng/ml. Disse prøver blev beriget med krydsreagerende opløsninger. Data fra dette studie er opstillet i følgende tabel.* Tacrolimusmetabolitter, som er blevet påvist i humant blod, blev testet med ARCHITECT Tacrolimus-analysen. Fysiologiske koncentrationer af tacrolimusmetabolitter i fuldblod og tacrolimusmetabolitternes kliniske signifikans er ikke defineret. Oprensede tacrolimusmetabolitter kan ikke erhverves kommercielt til krydsreaktivitetstestning. Tacrolimusmetabolitterne blev klargjort in vitro ved inkubation af tacrolimus med levermikrosomer fra phenobarbitalbehandlede rotter med forekomst af et NADPH-genererende system under aerobe forhold eller biokonverteret ved inkubation af tacrolimus med en actinomycet. Oxidative metabolitter, som blev dannet i reaktionsmediet, blev isoleret og identificeret. Oprensede prøver blev analyseret ved HPLC, massespektrometri og NMR-spektroskopi. Metabolit b M-I (13-Odemetyltacrolimus) M-II (31-Odemetyltacrolimus) M-III (15-Odemetyltacrolimus) M-IV (12 hydroxytacrolimus) Tilsat mængde Gennemsnitlig påvist overskydende koncentration (ng/ml, n=5) % krydsreaktivitet a 10 0,8 8 10 9,4 94 10 4,5 45 10 0,8 9 a Krydsreaktivitet som estimeret ved interferens med måling af tacrolimus i fuldblodsprøver. b Metabolitter fra MV til og med MVIII er ikke vurderet til bestemmelse af den mulige effekt på analysens ydeevne. Interferens ARCHITECT Tacrolimus-analysen er udviklet til at have en middelgenfindelse på 100 ± 10% ved forekomst af farmaceutika, potentielt interfererende endogene stoffer og potentielt interfererende kliniske tilstande ved nedenstående niveauer. Der blev udført et studie baseret på retningslinjer i CLSI's dokument EP7-A2 31 for ARCHITECT Tacrolimus-analysen. Potentielt interfererende farmaceutika Fuldblodsprøver med tacrolimusniveauer på mellem 4,9 og 19,8 ng/ml blev tilsat følgende potentielt interfererende stoffer. Den gennemsnitlige genfindelse i studiet var på 95% til 104%.* Stof Testet konc. Testet stof Testet konc. Acetaminophen 20 mg/dl Kanamycin B-sulfat 6 mg/dl Acyclovir 3,2 µg/ml Ketoconazol 50 µg/ml Allopurinol 5 mg/dl Labetalol 17,1 µg/ml Amikacin*2H 2 O 15 mg/dl Lidocain 6 mg/dl Amphotericin B 5,8 µg/ml Lovastatin 20 µg/ml Apresolin 100 μg/ml Minoxidil 60 µg/ml Azathioprin 1 mg/dl Mycofenolsyre 500 µg/ml Bromocriptin 8 µg/ml Mycofenolsyreglukuronid 1800 µg/ml Carbamazepin 12 mg/dl N-acetylprocainamid 12 mg/dl Cephalosporin 100 μg/ml Nadolol 1,2 µg/ml Kloramfenikol 25 mg/dl Nicardipin 0,5 µg/ml Klorokin 1,5 µg/ml PenicillinG Na+ 100 µg/ml Cimetidin 10 mg/dl Phenobarbital 15 mg/dl 7

Stof Testet konc. Testet stof Testet konc. Ciprofloxacin 7,4 µg/ml Phenytoin 10 mg/dl Clonidin 0,01 µg/ml Prazosin 25 µg/ml Colchicin 0,09 µg/ml Prednisolon 100 µg/ml Kortison 1,2 µg/ml Prednison 100 µg/ml Cyclosporin 3200 ng/ml Primidon 10 mg/dl Digitoxin 80 ng/ml Probucol 600 µg/ml Digoxin 4,8 ng/ml Procainamid 10 mg/dl Diltiazem 60 µg/ml Propranolol 0,5 mg/dl Disopyramid 3 mg/dl Quinidin 5 mg/dl Erythromycin 20 mg/dl Ranitidin 20 mg/dl Fluconazol 30 µg/ml Rifampin 5 mg/dl Flucytosin 40 µg/ml Sirolimus 60 ng/ml Furosemid 2 mg/dl Spectinomycin 100 µg/ml Ganciclovir 1000 µg/ml Ticlopidin 150 µg/ml Gemfibrozil 100 μg/ml Tobramycin 2 mg/dl Gentamicin 12 mg/dl Trimethoprim 40 µg/ml Hydrokortison 1,2 μg/ml Valproat 50 mg/dl Itraconazol 50 μg/ml Vancomycin 6 mg/dl Kanamycin A-sulfat 6 mg/dl Verapamil 10 µg/ml Potentielt interfererende endogene stoffer Fuldblodsprøver med tacrolimusniveauer på mellem 5,5 og 18,0 ng/ml blev tilsat følgende potentielt interfererende endogene stoffer. Den gennemsnitlige genfindelse i studiet var på 96% til 105%.* Potentielt interfererende stof Koncentration Triglycerider 800 mg/dl Hæmatokrit 25%, 55% Bilirubin 40 mg/dl Totalprotein 3 g/dl Totalprotein 12 g/dl Kolesterol 500 mg/dl Urat 20 mg/dl Potentielt interfererende kliniske forhold ARCHITECT Tacrolimus-analysen blev evalueret ved at teste prøver med HAMA og RF med henblik på yderligere vurdering af den kliniske specificitet. Fem HAMA-positive og 5 RF-positive prøver blev evalueret for genfindelsesprocent med berigede tacrolimusniveauer fra 7,1 til 20,0 ng/ml ved 2 koncentrationer for hver prøve. Resultaterne for middelgenfindelsesprocent er opstillet i følgende tabel.* Middelgenfindelse i Kliniske forhold Antal prøver procent HAMA 10 97 RF 10 99 Metodesammenligning ARCHITECT Tacrolimus-analysen er udviklet til at have en korrelationskoefficient på 0,90 for prøver mellem 2-30 ng/ml ved sammenligning med IMx Tacrolimus II-analysen. Der blev udført et studie med henblik på sammenligning af ARCHITECT Tacrolimus-analysen med IMx Tacrolimus II-analysen på basis af humane fuldblods-edta-prøver fra lever- og nyretransplanterede patienter i tacrolimusbehandling. Der blev udført regressionsanalyse med Passing- Bablok-metoden. 32 Data fra dette studie er opstillet i følgende tabel.* a Konfidensinterval (CI) Prøveområde (ARCHITECT): 2,2 ng/ml til 14,8 ng/ml Prøveområde (IMx): 2,1 ng/ml til 15,9 ng/ml * Repræsentative data. Variabler som f.eks. forskelle i prøvestørrelser og prøvepopulation kan påvirke analysens korrelation, og resultaterne på de enkelte laboratorier kan derfor variere ARCHITECT Tacrolimus-analysen har en korrelationskoefficient på 0,90 for prøver med 2-30 ng/ml ved sammenligning med LC/MS/MS. Yderligere testning af ovenstående prøver blev gennemført med LC/MS/ MS, hvor regressionsanalysen blev udført med Passing-Bablok-metoden. 32 Data fra dette studie er opstillet i følgende tabel.* ARCHITECT Tacrolimus vs. IMx Tacrolimus II Antal observationer Skæring (95% CI a ) Hældning (95% CI) Korrelationskoefficient 124 0,37 (0,00 til 0,68) 0,81 (0,75 til 0,88) 0,90 ARCHITECT Tacrolimus vs. LC/MS/MS Antal observationer Skæring (95% CI) Hældning (95% CI) Korrelationskoefficient 125 0,22 (0,02 til 0,48) 1,07 (1,01 til 1,12) 0,92 Prøveområde (ARCHITECT): 2,1 ng/ml til 14,8 ng/ml Prøveområde (LC/MS/MS): 1,78 ng/ml til 19,20 ng/ml * Repræsentative data. Variabler som f.eks. forskelle i prøvestørrelser og prøvepopulation kan påvirke analysens korrelation, og resultaterne på de enkelte laboratorier kan derfor variere En biasanalyse af ARCHITECT Tacrolimus- vs. IMx Tacrolimus II-analysen blev foretaget af de samme 124 humane fuldblods-edta-prøver inden for området 2-30 ng/ml. De følgende repræsentative data er anført for at hjælpe med at forstå forskellen mellem de to analyser. Den gennemsnitlige biasforskel i ng/ml, som ARCHITECT Tacrolimus- vs. IMx Tacrolimus II-analysen udviste i denne undersøgelse, var -0,94 ng/ml. 95%-konfidensintervallet for denne biasforskel i ng/ml er fra -1,16 til -0,71 ng/ml. Se resultaterne af undersøgelsen nedenfor. Forskel mellem metoder i ng/ml ARCHITECT Tacrolimus biasforskel i ng/ml i forhold til IMx Tacrolimus II IMx Tacrolimus II Nulbias En biasanalyse af ARCHITECT Tacrolimus- vs. LC/MS/MS blev foretaget af de samme 125 humane fuldblods-edta-prøver inden for området 2-30 ng/ml. De følgende repræsentative data er anført for at hjælpe med at forstå forskellen mellem de to analyser. Den gennemsnitlige biasforskel i ng/ml, som ARCHITECT Tacrolimus vs. LC/MS/MS udviste i denne undersøgelse, var 0,51 ng/ml. 95%-konfidensintervallet for denne biasforskel i ng/ml er fra 0,31 til 0,71 ng/ml. Se resultaterne af undersøgelsen nedenfor. Forskel mellem metoder i ng/ml ARCHITECT Tacrolimus biasforskel i ng/ml i forhold til LC/MS/MS LC/MS/MS Nulbias 8

BIBLIOGRAFI 1. Jusko WJ, Thomson AW, Fung J, et al. Consensus document: therapeutic monitoring of tacrolimus (FK-506). Ther Drug Monit 1995;17(6):606-14. 2. Laskow DA, Vincenti F, Neylan JF, et al. An open-label, concentrationranging trial of FK506 in primary kidney transplantation. Transplantation 1996; 62(7):900 5. 3. Porayko MK, Gonwa TA, Klintmalm GB, et al. Comparing nephrotoxicity of FK506 and cyclosporine regimens after liver transplantation: preliminary results from US Multicenter Trial. Transplant Proc 1995;27(1):1114-6. 4. Laskow DA, Vincenti F, Neylan J, et al. Phase II FK506 multicenter concentration control study: one-year follow-up. Transplant Proc 1995;27(1):809-11. 5. Yokoyama I, Uchida K, Fukao K, et al. FK506: long-term study in kidney transplantation. Transplant Proc 1995;27(1):818-21. 6. Harding MW, Galat A, Uehling DE, et al. A receptor for the immunosuppressant FK506 is a cis-trans peptidyl-prolyl isomerase. Nature 1989;341:758-60. 7. Siekierka JJ, Hung SH, Poe M, et al. A cytosolic binding protein for the immunosuppressant FK506 has peptidyl-prolyl isomerase activity but is distinct from cyclophilin. Nature 1989;341:755-7. 8. McKeon F. When worlds collide: immunosuppressants meet protein phosphatases. Cell 1991;66:823-6. 9. Ericzon BG, Ekqvist B, Groth CG, et al. Pharmacokinetics of FK506 during maintenance therapy in liver transplant patients. Transplant Proc 1991;23(6):2275-6. 10. Venkataramanan R, Jain A, Warty VW, et al. Pharmacokinetics of FK506 following oral administration. A comparison of FK506 and cyclosporine. Transplant Proc 1991;23(1):931-3. 11. Warty V, Zuckerman S, Venkataramanan R, et al. FK506 measurement: comparison of different analytical methods. Ther Drug Monit 1993;15(3):204-8. 12. PROGRAF [package insert]. Deerfield, IL: Astellas Pharma US, Inc.;2006. 13. Sattler M, Guengerich FP, Yun C-H, et al. Cytochrome P-450 3A enzymes are responsible for biotransformation of FK506 and Rapamycin in man and rat. Drug Metab Dispos 1992;20(5):753-61. 14. Christians U, Kruse C, Kownatzki R, et al. Measurement of FK506 by HPLC and isolation and characterization of its metabolites. Transplant Proc 1991;23(1):940-1. 15. Christians U, Radeke HH, Kownatzki R, et al. Isolation of an immunosuppressive metabolite of FK506 generated by human microsome preparations. Clin Biochem 1991;24:271-5. 16. Christians U, Braun F, Schmidt M, et al. Specific and sensitive measurement of FK506 and its metabolites in blood and urine of liver-graft recipients. Clin Chem 1992;38(10):2025-32. 17. Iwasaki K. Shiraga T, Nagase K, et al. Isolation, identification, and biological activities of oxidative metabolites of FK506, a potent immunosuppressive macrolide lactone. Drug Metab and Disposition 1993;21(6):971-7. 18. Winkler M, Wonigeit K, Undre N, et al. Comparison of plasma vs whole blood as matrix for FK506 drug level monitoring. Transplant Proc 1995;27(1):822-5. 19. Fung JJ, Alessiani M, Abu-Elmagd K, et al. Adverse effects associated with the use of FK506. Transplant Proc 1991;23(6):3105-8. 20. Winkler M, Ringe B, Gerstenkorn C, et al. Use of FK506 for treatment of chronic rejection after liver transplantation. Transplant Proc 1991;23(6):2984-6. 21. Hebert MF, Ascher NL, Lake JR, et al. Efficacy and toxicity of FK506 for the treatment of resistant rejection in liver transplant patients. Transplant Proc 1991;23(6):3109-10. 22. US Department of Labor, Occupational Safety and Health Administration, 29 CFR Part 1910.1030, Bloodborne pathogens. 23. US Department of Health and Human Services. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. 5th ed. Washington, DC: US Government Printing Office; December 2009. 24. World Health Organization. Laboratory Biosafety Manual. 3rd ed. Geneva: World Health Organization; 2004. 25. Clinical and Laboratory Standards Institute. Protection of Laboratory Workers from Occupationally Acquired Infections: Approved Guideline-Third Edition. CLSI Document M29-A3. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2005. 26. Annesley TM, Hunter BC, Fidler DR, et al. Stability of tacrolimus (FK506) and cyclosporin G in whole blood. Ther Drug Monit 1995;17(4):361-5. 27. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988;34(1):27-33. 28. Primus FJ, Kelley EA, Hansen HJ, et al. Sandwich -type immunoassay of carcinoembryonic antigen in patients receiving murine monoclonal antibodies for diagnosis and therapy. Clin Chem 1988;34(2):261-4. 29. Schroff RW, Foon KA, Beatty SM, et al. Human anti-murine immunoglobulin responses in patients receiving monoclonal antibody therapy. Cancer Res 1985;45:879-85. 30. National Committee for Clinical Laboratory Standards. Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline-Second Edition. NCCLS document EP5-A2. Wayne, PA: NCCLS. 2004. 31. Clinical and Laboratory Standards Institute. Interference Testing in Clinical Chemistry; Approved Guideline-Second Edition. CLSI document EP7-A2. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute, 2005. 32. Passing H, Bablok W. A new biometrical procedure for testing the equality of measurements from two different analytical methods. J Clin Chem Clin Biochem 1983;21(11):709-20. ARCHITECT, Chemiflex og IMx er varemærker tilhørende Abbott Laboratories i visse jurisdiktioner. Alle varemærker tilhører de respektive ejere. Abbott Laboratories Diagnostics Division Abbott Park, IL 60064 USA ABBOTT Max-Planck-Ring 2 65205 Wiesbaden Germany +49-6122-580 Produceret af Fujirebio Diagnostics Inc., Malvern, PA 19355, USA for Abbott Distribueret af Abbott Laboratories Abbott Park, IL 60064, USA September 2013 2006, 2013 Abbott Laboratories 9