DAHANCA 24 CIRRO-IP010209

Transkript

1 DAHANCA 24 CIRRO-IP Den prognostiske værdi af 18 F -FAZA Positron Emissions Tomografi hos patienter med hoved-hals karcinom efter primær strålebehandling Denne protokol og de til den hørende dokumenter kan findes på DAHANCA hjemmesiden: Godkendt af Lægemiddelstyrelsen (journal nr og ) Godkendt af Den Videnskabsetiske Komité for Region Midt (journal nr.m ) Godkendt af datatilsynet (journal nr ) Anmeldt til (afventer ID-nr.) DAHANCA sekretariatet Afdeling for Eksperimentel Klinisk Onkologi Nørrebrogade 44 Tel: Fax: Version november 2009 Version 2.1 1

2 PROTOKOL ORGANISATION: Investigator: Klinisk assistent Lise Saksø Mortensen Afdeling for Eksperimentel Klinisk Onkologi, Sponsor: Professor Jens Overgaard Afdeling for Eksperimentel Klinisk Onkologi, Protokol koordineret af: Overlæge Marianne Nordsmark Afdeling for Eksperimentel Klinisk Onkologi, Overlæge Jørn Theil PET Centret, DELTAGENDE AFDELINGER Protokolansvarlig: Overlæge Marie Overgaard Onkologisk Afdeling, Overlæge Jørn Theil PET-centret, Øre- næse- og halsafdeling, Protokolansvarlig: Overlæge Jørgen Johansen Onkologisk Afdeling, Odense Universitetshospital Nuklearmedicinsk afdeling, Odense Universitetshospital Øre-næse-hals kirurgisk afdeling, Odense Universitetshospital Version 2.1 2

3 Protokolansvarlig: Overlæge Jens Bentzen Onkologisk afdeling, Amtssygehuset Herlev Nuklearmedicinsk Afdeling, Amtssygehuset Herlev Onkologisk Afdeling, Amtssygehuset Herlev Protokolansvarlig: Overlæge Lisbeth J. Andersen Onkologisk Afdeling, Ålborg Universitetshospital Nuklearmedicinsk Afdeling, Ålborg Universitetshospital Version 2.1 3

4 1. Undersøgelsens mål Undersøgelsens primære mål er at evaluere den prognostiske værdi af 18 F-FAZA PET efter kurativ strålebehandling for patienter med primært planocellulært hoved-hals karcinom. 2. Baggrund De fleste solide tumorer indeholder områder af hypoksiske celler, der er relativt resistente for strålebehandling 1. Studier af patienter med karcinom i hoved-hals og cervix uteri har vist, at hypoksi er associeret med dårlig lokal kontrol og overlevelse 2,3. Modifikation af hypoksi er forbundet med øget lokal tumorkontrol og overlevelse i hoved-hals cancer 4. I takt med nye teknologiske fremskridt åbnes muligheden for mere individualiseret strålebehandling. Et eksempel er intensitetsmoduleret stråleterapi (IMRT), hvor man med stor præcision kan øge stråledosis til stråleresistente hypoksiske områder af tumor, uden at øge toksicitet til normalvævet. Ved netop at integrere biologisk information om graden af hypoksi i strålebehandlingsplanen kan man således ramme stråleresistente områder. Denne teknik er i litteraturen beskrevet som dose painting 5. Afgørende for effekten af individualiseret behandling er korrekt identifikation af hypoksi i tumor. Forskellige metoder har været benyttet med henblik på at måle hypoksi: Eppendorf elektroder, som måler fysisk ilt; eksogene hypoksimarkører, der måles immunhistokemisk (eks. pimonidazol) eller via billed-modaliteter (eks. 18 F-FMISO PET skanning) og endogene hypoksimarkører (eks. HIF- 1α, CA9). Der er tiltagende interesse for netop de eksogene hypoksimarkører, som kan detekteres non-invasivt med PET skanning. Som ved klassisk diagnostisk 18 FDG-PET skanning injicerer man et radioaktivt sporstof. De hypoksiske sporstoffer udmærker sig ved at akkumuleres i hypoksisk væv. Fordelene ved metoden er, at den ikke er invasiv, fordelingen af tumor-hypoksi kan studeres i tre dimensioner og skanningen vil kunne gentages, hvorved ændringer af hypoksi i såvel ubehandlede som behandlede tumorer kan undersøges. Den mest anvendte markør hidtil er 18 F-fluoromisonidazole ( 18 F-FMISO) 6. Der foreligger aktuelt > 30 publicerede kliniske 18 F-FMISO studier, hvoraf halvdelen er udført i hoved-hals karcinomer 7. Et nyere nitroimidazolderivat er 18 F-fluoroazomycin arabinoside ( 18 F-FAZA) 8, der er mindre lipofilt end 18 F-FMISO, udvaskes hurtigere og derfor forventes at kunne levere et mere præcist mål for hypoksi. Forløbige studier har vist at 18 F-FAZA er en valid og praktisk anvendelig hypoksimarkør 9. Et præklinisk sammenlignende PET studie af 18 F-FAZA og 18 F-FMISO, konkluderede at 18 F-FAZA har bedre biokinetik 10, hvilket stemmer overens med resultater i patienter med hoved hals karcinomer 11. Hvis information fra en 18 F-FAZA PET skanning skal kunne benyttes med henblik på dose painting, er det afgørende, at PET signalet leverer et pålideligt resultatet ved bestemmelsen af såvel hypoksiske som ikke-hypoksiske områder af tumor. Prækliniske erfaringer med immunohistokemisk farvning af et nitroimidazolderivat (pimonidazole) og autoradiografisk fremstilling af radioaktivt 18 F-FAZA på konsekutive snit, har vis god overensstemmelse imellem disse to hypoksimarkører 9. Opløseligheden i en mikro-pet til dyreeksperimentelle studier er højere end de ca. 4-6 mm i en klinisk PET skanner. Således vil en enkelt klinisk PET voksels 18 F-FAZA-signal formentligt repræsenterer områder med varierende grader af hypoksi, normoksi og anoksi på mikroskopisk niveau 12. Version 2.1 4

5 Der findes enkelte studier, som beskriver ændringen af hypoksi over tid og under strålebehandling. Studierne er uensartede i design og resultaterne er divergerende. Et studie viste ingen dag-til-dag variation af baseline hypoksi ( 18 F-FMISO PET signalet) forud for start af strålebehandling 13, mens et andet viste betydelig variation af hypoksi ( 18 F-FMISO skanninger) med 3 dages mellemrum 14. Et studie viste, at distributionen og mængden af 18 F-FMISO PET i tumorer ændres signifikant under behandlingen i forhold til en baseline skanning 15. Meget tyder på, at der er prognostisk information i nitroimidazol-baserede assays, og at denne information vil kunne benyttes til at selektere patienter til mere individualiserede behandlinger. Et studie viste, at baseline hypoksi detekteret med pimonidazol var korreleret til dårligere lokoregional kontrol efter strålebehandling i patienter med hoved hals karcinom. Tilsvarende er det vist at baseline hypoksi detekteret med 18 F-FMISO PET er associeret med høj risiko for loko-regional behandlingssvigt Undersøgelsens formål 3.1 Hypotese: Lav ilttension målt med 18 F-FAZA PET skanning i hoved-hals karcinomer, er forbundet med dårlig prognose efter strålebehandling. 3.2 Formål Det primære mål er at evaluere den prognostiske værdi af 18 F-FAZA efter kurativ strålebehandling ved patienter med primært planocellulært hoved-hals karcinom. Et sekundært mål er at evaluere, hvorvidt tumor-hypoksi med 18 F-FAZA ændres under strålebehandling ved den samme patientgruppe. 4. Undersøgelsens design 4.1 Design Studiet er åbent, prospektivt og ikke randomiseret. Studiepopulationen udgør patienter med planocellulært karcinom i hoved-hals (HNSCC) i klinisk stadium T1-T4, N0-N3, M0, som modtager kurativt intenderet strålebehandling i henhold til DAHANCAs retningslinier. (Se Kriterier for patientudvælgelse fremgår nedenfor. Version 2.1 5

6 4.2 Figur over undersøgelsens design 18 F-FAZA PET 18 Strålebeh. F-FAZA PET 18 F-FAZA PET 18 F-FAZA PET 18 F-FAZA Biopsi boost Pimonidazol 5. Før start af strålebehandlingen 5.1 Kriterier for patientudvælgelse Histologisk eller cytologisk verificeret planocellulært karcinom i cavum oris, larynx, oropharynx eller hypopharynx. Klinisk stadium T1-4 N0-N3 M0. Visiteret til primær strålebehandling i henhold til DAHANCAs retningslinjer. Alder over 18 år. Ingen tilstedeværende psykologiske, familiære, sociologiske eller geografiske forhold, som potentielt kunne hindre overholdelse af plan for undersøgelsesprotokollen og opfølgning. Sådanne forhold skal drøftes med patienten før deltagelse i undersøgelsen. Ingen samtidig eller tidligere malign lidelse, som kan påvirke behandlingen, evalueringen og udfaldet af den nuværende sygdom og behandling. Mundtligt og skriftligt informeret samtykke i henhold til lokal og national lovgivning. Kvinder må ikke være gravide eller ammende. Normal S-kreatinin. 6. Udførelse af 18 F-FAZA PET og biopsi undersøgelser F-FAZA Der foretages en 18 F-FAZA PET skanning før planlagt strålebehandling (baseline) samt, i det omfang det er muligt, en skanning cirka uge 2 og cirka uge 4 under strålebehandling, samt 2 måneder efter endt behandling. Skanningen udføres, imens patienten ligger i behandlingsskallen. Den foretages på en kombineret PET/CT skanner, idet CT billederne giver anatomisk information. Hvor det er muligt, vil patienten skannes med standard CT kontraststof. Se venligst appendiks II. 6.2 Biopsi I det omfang det er muligt, vil patienten få foretaget en biopsi. Version 2.1 6

7 Biopsien foretages umiddelbart efter PET skanningen eller i dagene inden start på strålebehandling. Minimum to timer før biopsien tages, injiceres pimonidazol og/eller 18 F-FAZA boost. Se venligst appendiks II. 7. Endepunkter 7.1 Primært endepunkt Strålebehandling er en loko-regional behandling, og derfor vil det primære endepunkt for undersøgelsen være loko-regional kontrol (T+N). 7.2 Sekundære Endepunkter Relation af 18 F-FAZA PET hypoksi - med lokal kontrol (T-lokalisation). - med sygdomsspecifik overlevelse. - med overall overlevelse. - ved baseline, cirka uge 2 og cirka uge 4 under strålebehandling, samt 2 måneder efter endt Behandling. - i primær tumor og loko-regionale lymfeknuder. - med pimonidazol immunohistokemi og 18 F-FAZA autoradiografi. 8. Evaluering 8.1 Tumorrespons Patienterne følges i henhold til DAHANCAs retningslinier (se Patienterne randomiseres retrospektivt i henhold til HPV status. Loko-regional kontrol måles fra datoen for strålebehandlingsstart til den første dokumentation for loko-regional behandlingssvigt. Tumorrespons skal bekræftes af en CT-, MR- eller 18 FDG PETskanning samt, om muligt, histologisk verificeres. Patienter, der stadig er i live og uden tegn på loko-regional recidiv/progression på tidspunktet for analysen, og patienter, der er døende eller udvikler metastaser uden evidens for recidiv/progression, vil blive censureret på datoen for sidste opfølgning, død eller dokumentation for metastaser. Lokal kontrol i T-position vil blive målt fra datoen for patienten starter strålebehandling til den første dokumentation for et lokalt behandlingssvigt. Hvis der opstår regionalt behandlingssvigt hos en patient under lokal kontrol, vil patienten fortsætte med at blive fulgt med henblik på lokalt behandlingssvigt. Sygdoms-specifik overlevelse måles fra datoen for patienten starter strålebehandling til datoen for død på grund af behandlingssvigt eller fjernmetastaser fra den primære cancer. Patienter, der stadig er i live på tidspunktet for analysen, og patienter, der dør af andre årsager, vil blive censureret på datoen for sidste opfølgning eller død. Version 2.1 7

8 Overlevelse måles fra datoen for strålebehandlings start til datoen for død (af alle årsager). Patienter, der stadig er i live på tidspunktet for analysen, vil blive censureret på datoen for sidste opfølgning. 8.2 Hypoksi Sammenligning af 18 F-FAZA skanninger Områder af tumor/lymfeknuder med forhøjet T/M sammenlignes baseline, cirka uge 2 og cirka uge 4 under strålebehandling, samt 2 måneder efter endt behandling. Se venligst appendiks II. Sammenligning af 18 F-FAZA og pimonidazol i biopsi Distribution af 18 F-FAZA og pimonidazol vil blive sammenlignet pixel-by-pixel. Se venligst appendiks II. 9. Statistiske overvejelser Patientantal Det primære endepunkt for den prognostiske del af studiet, vil være loko-regional tumorkontrol. Patientantallet (40 patienter) baseres på at tidligere studier af lignende patientpopulationer, undersøgt med Eppendorf elektroder eller pimonidazol, med tilstrækkelig statistisk styrke har kunne separere patienterne med hensyn til lokoregional kontrol, baseret på graden af hypoksi Patienterne i dette studie vil blive fulgt i minimum 18 måneder, da tidligere studier har vist at hypoksi-relaterede recidiver opstår indenfor denne periode (> 80 % indenfor 12 måneder efter behandling). Det aktuelle studie vil blive evalueret ved hjælp af Kaplan-Meier og multipel regressionsanalyse. 10. Bivirkninger, risici og ulemper Anlæggelse af venflon til injektion af 18 F-FAZA kan være forbundet med lette smerter. Der er beskeden risiko for infektion svarende til indstiksstedet. Der anvendes almindelig steril teknik. Tumorbiopsi kan medføre lettere ubehag i forbindelse med anlæggelse af lokalanæstesi. Der vil være beskeden risiko for infektion og efterfølgende blødning svarende til biopsistedet. Der vil blive anvendt almindelig steril teknik. CT kontraststoffet har ingen eller meget få bivirkninger. En let forbigående varmefornemmelse eller metalsmag ved injektionen kan forekomme. Overfølsomhedsreaktioner såsom forbigående udslæt og astma-lignende symptomer forekommer hos få procent. Pimonidazol samt nært beslægtede stoffer misonidazol og nimorazol er afprøvet som strålesensitizere givet dagligt i farmakologiske doser. Et fase III studie viste let forøgede reversible CNS symptomer i pimonidazol armen. Fase 1 studier viste, at polyneuropati var den dosisbegrænsende faktor for misonidazol og i væsentlig mindre grad for nimorazol, der indgår som led i standardbehandling af hoved-hals cancer i Danmark 4. Da 18 F-FAZA og pimonidazol alene benyttes i sporstofsdoser i dette studie forventes ingen bivirkninger. Der forventes ikke at være nogen interaktion mellem pimonidazol og 18 F-FAZA, idet der ikke opnås mætning af enzymerne. Version 2.1 8

9 Den samlede strålebelastning patienten maksimalt vil blive udsat for er ca. 34 msv i denne protokol. Imidlertid vil patienterne i denne undersøgelse modtage en stråledosis i forbindelse med deres behandling, som er mange gange højere. Derfor betragtes den øgede stråledosis i nærværende undersøgelse som værende ubetydelig og uden påvirkning af patientens overlevelse og udvikling af sekundær malignitet. Se venligst appendiks I. 11. Etiske overvejelser Undersøgelsen gennemføres i overensstemmelse med principperne i Helsinki-deklaration II med tillæg, samt retningslinjerne for God Klinisk Praksis. Patienterne informeres (skriftligt og mundtligt) om protokollen ved et af de første ambulante besøg før start af behandling. Ved informationen redegøres for formål med studiet, procedurer, forbundne risici og strålehygiejniske forhold. Der gives ambulant tid til svar vedrørende deltagelse i undersøgelsen i passende afstand fra den mundtlige information. Patienterne vil ligeledes blive informeret om deres ret til at medbringe en bisidder ved den mundtlige information. Det vil blive understreget, at tilsagn om deltagelse til et hvert tidspunkt kan tilbagetrækkes, uden nogen forventet konsekvens for patientens behandling. Informationen tilstræbes givet i et for forsøgspersonen let forståeligt sprog. Folderen Før du beslutter dig udleveres til forsøgspersonen ved informations-samtalen, hvor der også gøres opmærksom på muligheder for at finde oplysninger fra de videnskabsetiske komitéer om deltagelse i lægevidenskabelige forsøg. Oplysninger vedrørende forsøgspersoner beskyttes i henhold til lov om behandling af personoplysninger og lov om patienters retsstilling. Udtaget biologisk materiale vil efter projektets afslutning blive opbevaret i personhenførbar form. Materialet vil ikke blive videregivet til andre og vil kun kunne anvendes i et nyt forskningsprojekt med tilladelse fra Videnskabsetisk Komité Region Midtjylland. Lægemiddelstyrelsen har godkendt 18 F-FAZA og pimonidazol til humant eksperimentelt brug hos patienter. Projektet er godkendt af Den Videnskabsetiske Komité for Region Midt, samt Datatilsynet. Der ydes ikke honorar til forsøgspersonerne. Udgifter til transport i forbindelse med lægesamtaler, PET skanning og eventuelt afledte supplerende undersøgelser refunderes i henhold til gældende retningslinjer. Projektet er initieret af Professor dr. med. Jens Overgaard. Projektet er støttet af The Lundbeck Foundation Centre for Interventional Research in Radiation Oncology (CIRRO), som bidrager med løn og forskningsinfrastruktur. Den forsøgsansvarlige har ingen økonomisk tilknytning til støttegiveren. Udgifter til PET skanning afholdes af de involverede institutioner. Resultaterne, uanset positive eller negative, vil blive publiceret i form af en eller flere artikler i anerkendte internationale videnskabelige tidsskrifter i henhold til Vancouver reglerne. Risikovurdering er beskrevet i detaljer i ovenstående afsnit 10 om bivirkninger, risici og ulemper. Samlet vurderes risici, ulemper og bivirkninger, inklusiv udsættelse for ekstra ioniserende stråling, at være acceptable i forhold til fordele for fremtidig forskning og behandling af patienter, samt projektets formål. Version 2.1 9

10 Dette studie forventes at bidrage med ny viden om tumor hypoksi og dermed udvikling af strålebehandling til patienter med hoved halskræft samt andre kræftformer. På længere sigt vil dette potentielt kunne lede til at biologisk information vil kunne integreres i strålebehandling, hvorved stråleresistente områder af tumor vil kunne modtage en højere dosis med henblik på at forbedre overlevelsen med acceptabel morbiditet for patienterne. Undersøgelsens resultater vil ikke få konsekvens for behandlingen af den enkelte patient, men projektet forventes at kunne komme fremtidige patienter til gavn. Version

11 Reference List 1. Gray, L. H., A. D. CONGER, M. EBERT, S. HORNSEY, and O. C. SCOTT The concentration of oxygen dissolved in tissues at the time of irradiation as a factor in radiotherapy. Br. J. Radiol. 26: Nordsmark, M., M. Overgaard, and J. Overgaard Pretreatment oxygenation predicts radiation response in advanced squamous cell carcinoma of the head and neck. Radiother. Oncol. 41: Fyles, A., M. Milosevic, D. Hedley, M. Pintilie, W. Levin, L. Manchul, and R. P. Hill Tumor hypoxia has independent predictor impact only in patients with node-negative cervix cancer. J. Clin. Oncol. 20: Overgaard, J., H. H. Sand, B. Lindelov, M. Overgaard, K. Jorgensen, B. Rasmusson, and A. Berthelsen Nimorazole as a hypoxic radiosensitizer in the treatment of supraglottic larynx and pharynx carcinoma. First report from the Danish Head and Neck Cancer Study (DAHANCA) protocol Radiother. Oncol. 20 Suppl 1: Ling, C. C., J. Humm, S. Larson, H. Amols, Z. Fuks, S. Leibel, and J. A. Koutcher Towards multidimensional radiotherapy (MD-CRT): biological imaging and biological conformality. Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 47: Rasey, J. S., Z. Grunbaum, S. Magee, N. J. Nelson, P. L. Olive, R. E. Durand, and K. A. Krohn Characterization of radiolabeled fluoromisonidazole as a probe for hypoxic cells. Radiation Research 111: Lee, S. T. and A. M. Scott Hypoxia positron emission tomography imaging with 18f-fluoromisonidazole. Semin. Nucl. Med. 37: Kumar, P., D. Stypinski, H. Xia, A. J. B. McEwan, H. J. Machulla, and L. I. Wiebe Fluoroazomycin arabinoside (FAZA): Synthesis, 2H and 3Hlabelling and preliminary biological evaluation of a novel 2-nitroimidazole marker of tissue hypoxia. Journal of Labelled Compounds and Radiopharmaceuticals 42: Busk, M., M. R. Horsman, S. Jakobsen, S. Keiding, A. J. van der Kogel, J. Bussink, and J. Overgaard Imaging hypoxia in xenografted and murine tumors with 18F-fluoroazomycin arabinoside: a comparative study involving micropet, autoradiography, PO2-polarography, and fluorescence microscopy. Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 70: Piert, M., H. J. Machulla, M. Picchio, G. Reischl, S. Ziegler, P. Kumar, H. J. Wester, R. Beck, A. J. McEwan, L. I. Wiebe, and M. Schwaiger Hypoxia-specific tumor imaging with 18F-fluoroazomycin arabinoside. J. Nucl. Med. 46: Version

12 11. Rischin, D., R. Fisher, L. Peters, J. Corry, and R. Hicks Hypoxia in head and neck cancer: studies with hypoxic positron emission tomography imaging and hypoxic cytotoxins. Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 69:S61-S Busk, M., M. R. Horsman, and J. Overgaard Resolution in PET hypoxia imaging: voxel size matters. Acta Oncol. 47: Lee, N., S. Nehmeh, J. Humm, S. Cai, R. Finn, and H. Schoder Reproducibility of Fluorine-18-Labeled Fluoro-Misonidazole Positron Emission Tomography (FMISO PET) in Detecting Chronic Hypoxia (CH) in Head/Neck Cancer (HNC). International Journal of Radiation Oncology*Biology*Physics 63:S148-S Lin, Z., J. Mechalakos, S. Nehmeh, H. Schoder, N. Lee, J. Humm, and C. C. Ling The influence of changes in tumor hypoxia on dose-painting treatment plans based on 18F-FMISO positron emission tomography. Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 70: Paulsen, F., S. M. Eschmann, M. Alber, D. Buck, H. J. Machulla, R. Bares, and M. Bamberg Time course of hypoxia in head and neck cancer patients treated by radiotherapy. International Journal of Radiation Oncology*Biology*Physics 57:S Rischin, D., R. J. Hicks, R. Fisher, D. Binns, J. Corry, S. Porceddu, and L. J. Peters Prognostic significance of [18F]-misonidazole positron emission tomography-detected tumor hypoxia in patients with advanced head and neck cancer randomly assigned to chemoradiation with or without tirapazamine: a substudy of Trans-Tasman Radiation Oncology Group Study J. Clin. Oncol. 24: Nordsmark, M., M. Overgaard, and J. Overgaard Pretreatment oxygenation predicts radiation response in advanced squamous cell carcinoma of the head and neck. Radiother. Oncol. 41: Nordsmark, M. and J. Overgaard A confirmatory prognostic study on oxygenation status and loco-regional control in advanced head and neck squamous cell carcinoma treated by radiation therapy. Radiother. Oncol. 57: Kaanders, J. H., K. I. Wijffels, H. A. Marres, A. S. Ljungkvist, L. A. Pop, F. J. van den Hoogen, P. C. de Wilde, J. Bussink, J. A. Raleigh, and A. J. van der Kogel Pimonidazole binding and tumor vascularity predict for treatment outcome in head and neck cancer. Cancer Res. 62: Pugachev, A., S. Ruan, S. Carlin, S. M. Larson, J. Campa, C. C. Ling, and J. L. Humm Dependence of FDG uptake on tumor microenvironment. Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 62: Version

13 APPENDIX I: STRÅLERISIKO Dosiskoefficienten for 18 F-FAZA er 0, 0149 msv/mbq. Beregningerne er udført af fysiker Søren Baarsgaard Hansen, PET Centret i Århus på grundlag af data fra Souvatzoglou et al. Strålebelastningen i forbindelse med en 18 F-FAZA PET skanning (med op til 400 MBq 18 FAZA), estimeres til ca. 6 msv. Strålebelastningen ved en CT med kontrast af hoved og hals er ca. 2,5 msv. Indgift af ca. 100 MBq 18 F-FAZA forud for biopsi estimeres til en strålebelastning på ca. 1,5 msv. Samlet vil patienten således maksimalt blive udsat for ((8,5 msv x 4) + 1,5mSv) = ca. 35,5 msv i denne protokol (såfremt patienten modtager alle 4 18 F-FAZA PET skanninger samt biopteres). Til sammenligning kan oplyses, at den årlige baggrundsstråling i Danmark ligger på ca. 3 msv. Stråledosis ved 18 FAZA PET skanning når ikke et niveau, der indebærer risiko for deterministiske skader. For stokastiske skader kendes ingen nedre tærskelværdi under hvilken, der med sikkerhed ikke er en øget risiko. Ioniserende stråling er et kendt karcinogen og øger risikoen for kræft dosisafhængigt. Den bestråling, patienten vil modtage i denne undersøgelse, vil give en risiko for samlet stokastisk skade på Hos en population af raske forsøgspersoner ville dette indebære, at livstids-risikoen for at dø af kræft ville stige fra 25,0 % til ca. 27,00 %. Imidlertid vil patienterne i denne undersøgelse modtage en stråledosis i forbindelse med deres behandling, som er mange gange højere, og risikoen for ny cancer i studiepopulationen er a priori langt større. Derfor betragtes den øgede stråledosis i forbindelse med denne undersøgelse at være ubetydelig i forhold til at indvirke på patientens overlevelse og udvikling af sekundær malignitet. Version

14 APPENDIKS II Udførelse af 18 F-FAZA PET skanning Patienten vil få anlagt venflon i vena basilica til indgift af den radioaktive tracer. Herefter injiceres op til 400 MBq 18 F-FAZA intravenøst. Patienten venter i seng eller stol i 2 timer, fulgt af en statisk PET skanning i 30 min. i 25 cm transaxialt field of view. Det tilstræbes at patienten under skanningen ligger i strålebehandlingsfiksationen. Skanningen vil blive foretaget på en kombineret PET/CT skanner, og idet omfang det er muligt, vil CT kontrast blive anvendt. (CT kontrast anvendes rutinemæssigt ved diagnostiske CT skanninger) Analyse af 18 F-FAZA skanninger Fordelingen af 18 F-FAZA i tumor og normalt væv (skeletmuskulatur) analyseres dels fra billeder, dels fra et standardiseret mål for aktivitetsoptagelsen i udvalgte områder (tumor, lymfeknude samt muskel) normaliseret til legemsvægten, SUV (Standardized Uptake Value). Såvel maksimal SUV som median SUV bestemmes, og ud fra dette bestemmes forhøjet tumor/muskel ratio (T/M), som udtryk for mængden af hypoksi i tumor eller lymfeknuder. Forhøjet T/M vil initialt blive vurderet i forhold til medianen. Områder af tumor/lymfeknuder med forhøjet T/M sammenlignes ved baseline, cirka uge 2 og cirka uge 4 under strålebehandling, samt 2 måneder efter endt behandling. Biopsi Patienter, for hvem en biopsi vil blive aktuelt, vil få denne foretaget a) umiddelbart efter 18 F-FAZA PET skanningen, eller b) i dagene mellem skanningen og opstart af strålebehandling. I så fald er biopsien forudgået af injektion af pimonidazol og/eller 18 F-FAZA boost. Pimonidazol indgives intravenøst over 20 min. 2 timer inden biopsien tages. Der indgives 0,5 g/m² pimonidazol i 100 ml 0,9 % isotonisk saltvand. 18 F-FAZA boost: 100 MBq 18 F-FAZA indgives intravenøst 2 timer inden biopsien tages. Biopsien vil blive markeret med henblik på retnings-angivelser i tre dimensioner. Sammenligning af 18 F-FAZA og pimonidazol i biopsi Baseret på et autoradiogram kortlægges den spatiale PET tracer distribution i det pågældende snit af biopsien. Dette sammenlignes med distributionen af pimonidazol vurderet via immunofluorescence mikroskopi via et monoclonalt antistof, der er kommercielt tilgængeligt (Se Metoden for sammenligning er udviklet af Pugachev et al. med 18 F DG PET 20, og af Busk et al. for 18 F-FAZA PET 9. Ud fra den endelige pixel-by-pixel sammenligning, vil scatterplots blive genereret, og disse vil vise korrelationen mellem signalet fra autoradiogrammet ( 18 F-FAZA) og fluorescence intensiteten (pimonidazol). Version