Nye retningslinjer under udarbejdelse aktuelt. Behov for nye retningslinjer pga nye metoder i den prænatale diagnostik.

Transkript

1 Prænatal Diagnostik Overlæge Christina Fagerberg, Molekylærbiolog Charlotte Brasch Andersen, PhD, Klinisk Genetisk Afdeling, OUH Afdelingslæge Geske Bak, Føtalmedicinsk Klinik, Gynækologisk-Obstestrisk Afdeling D, OUH

2 Informeret valg: tilbud om information, så den gravide selv kan tage stilling til undersøgelser Undersøgelser, der kan tilvælges: Første trimester risikovurdering for Down Syndrom Misdannelsesskanning o. 18 uger mhp strukturelle misdannelser og udviklingsdefekter Nye retningslinjer under udarbejdelse aktuelt. Behov for nye retningslinjer pga nye metoder i den prænatale diagnostik.

3 Case 1 37 årig kvinde Gravida 4, Para 1 (rask barn) Ønsker 1. trimester risikovurdering 1. Trimester risikovurdering ( ): Doubletest ( PAPP-A og HCG) Nakkefoldsskanning (NF) Moderens alder

4 GA 12+1 (CRL 56,3 mm) NF 1,6mm Case 1

5 Estimeret risiko for Trisomi 21: Baggrundsrisiko: 1:148 Justeret risiko: 1:50

6 Case 1 Ønsker CVS (moderkagebiopsi): ½-1% risiko for abort 1-2 dage QF-PCR: normal 14 dage Karyotype: normal

7 Case 1 GA 20+1: Gennemskanning for misdannelser Steno-Fallots tetralogi : VSD Bred aorta overridende VSD Tynd truncus pulmonalis Hø.ventrikel let hypertrofisk I øvrigt ingen misdannelser

8 Normalt hjerte Steno-Fallot

9 Case 1 Børnekardiolog tilkaldes og ser med ved UL Parret informeres om: Barnet har brug for operation 6-12 mdr. efter fødsel God prognose med overlevelse på95% Henvises til Skejby

10 Case 1 Klinisk genetisk afdeling har gemt DNA fra CVS 2 genetiske undersøgelsesmetoder: MLPA: specifiktfor DiGeorge Syndrom (del 22q11.2) fordi ca. 10% af børn med Steno-Fallot har deletion 22q11.2 Mikroarray-analyse: undersøger hele genomet for mindre afvigelser, idet man måske finder flere genetiske årsager til Steno-Fallot

11 Indikationer for at lave mikroarray* (DFMS-guideline, 2013): Misdannelser Nakkefold 3,5 mm Små biometrier Uforklarlig intrauterin eller perinatalt dødsfald *Array-CGH og SNP-array = forskellige typer af mikroarrays

12

13 Hvad er der pået array? Hver DNA spot består af en unik DNA sekvens der er specifik for et bestemt sted i genomet. AGILENT

14 Patient DNA Reference DNA (Normalt) Indmærkning Indmærkning Eller sammenligning bioinformatisk, sammenligning med >1000 normalprøver. Agilent CYTOCHIP Hybridisering CYTOCHIP Agilent Normalt Deletion Amplifikation

15 Case 1: Mikroarray-analyse Konklusion: DiGeorge syndrom

16 Mikroarray-analyse usikkert fund Proband Mor Far

17 Prænataldiagnostik Case 2

18 21 årig kvinde Gravida 2, Para 1 (rask barn) Fætter-kusine ægteskab GA 18+6 Gennemskanning (oprindelsesland) Cystisk hygrom Ingen yderligere undersøgelser Info: stor risiko for spontan abort

19 GA 21+1: Gennemskanning: Levende pige Ingen misdannelser (hjerte) Cystisk hygrom & hydrops føtalis

20 Case 2

21 Case 2 GA 21+4 : Amniocentese Peak systolic velocity (PSV) over 1,6 MoM (anæmi) TORCH + parvovirus: negative HbA1c: normal Ansøger om samrådet om tilladelse til abort inden svar på prøverne.

22 Samråd Et i hver region Behandler sager vedr. abort, fosterreduktion og sterilisation Består af : speciallæge i gyn-obs speciallæge i psykiatri juridisk eller socialfaglig regionsmedarbejder Afgørelsen kan ankes til Det nationale Ankenævn for abort, forsterreduktion og sterilisation

23 Case 2 Amniocentese ikke brugbar pga maternel kontaminering Achillesbiopsi x 2 til mikroarray

24 Mikroarray-analyse af biopsi Ingen patogene kvantitative ændringer. Flere områder med regions of homozygosity, Indikerende at forældrene er konsanguine.

25

26 Mikroarray-analyse af biopsi Ved søgning på hydrops fetalis i OMIM-tekst pågener i homozygote områder fremkommer kandidatgen i 1q21: GBA, Beta-glycosidase, acid

27

28 Næste graviditet Der skal tilbydes prænatal diagnostik for den erkendte lidelse. Pt skal IKKE afvente risikovurdering.

29 Prænataldiagnostik Case 3

30 Case 3 37 årig kvinde Gravida 1 efter 6. IVF-forsøg Ønsker 1. trimester risikovurdering

31 GA 13+1 (CRL 70,3mm) NF 2,3 mm

32 Estimeret risiko for Trisomi 21: Baggrundsrisiko: 1:148 Justeret risiko: 1:22 Ønsker ikke barn med Down syndrom (DS) Ønsker ikke invasiv diagnostik. Hvad kan såtilbydes?

33 Tidlig gennemskanning GA 16 for Downs markører: nakkeødem kort humerus kort femur hydronefrose ekkogent fokus hyperekkogen tarm misdannelser Sen gennemskanning GA 20

34 Fremtiden: NonInvasive Prenatal Testing Cell Free Fetal DNA (NIPT) (cff DNA) in Maternal Blood

35 Fetal Cell-free DNA in Maternal Blood A Reliable Analyte During Pregnancy Released through apoptosis Fetal cfdna likely arises from cytotrophoblastic cells of placenta Released into bloodstream as small DNA fragments ( bp) Reliably detected after 7+ weeks gestation Undetectable within hours postpartum.

36 NIPT bygger pånext Generation Sequencing (NGS) Med NGS kan man sekventere HELE genomet påen gang. Massive parallel sequencing = man sekventerer en masse små DNA fragmenter parallelt NIPT måler ratioen af kromosom 21, 13, 18 mod kontrol kromosom sekvens

37 DNA Sequencing using cell free DNA Fetal DNA fragments in maternal blood. Cell free DNA fragments are then sequenced. Compare the individual sequenced chromosomes against a reference for analysis..

38 Detection of Fetal Aneuploidy MPS Enables Precise Molecular Counting Fetal cfdna (20%) NOT TO SCALE 10% more Chr21 cfdna in T21 Counting Maternal cfdna VS Chromosomes: Trisomy Verinata. Content is proprietary and confidential.

39 NIPT i Danmark Både sensitivitet og specificitet for NIPT er meget bedre for NIPT end de eksisterende metoder Ingen risiko for spontan abort som følge af proceduren Målgruppen for NIPT er stadig til debat i sundhedsstyrelsen

40