Skriftlig tværfaglig mappe-eksamen S5 onsdag den 25. aug. 2010 kl. 10.00 torsdag den 26. aug. kl. 10.00 Væsentligste hjælpemidler: Mappen, Dansk Laboratoriemedicin, Databog i fysik og kemi og lommeregner. Sættet indeholder i alt 9 nummererede sider inklusiv forsiden og bilag. Kontrollér venligst med det samme om alle sider er der. Alle sider i eksamensbesvarelsen skal forsynes med navn, studienummer og hold nr. Opgavebesvarelserne angives med tydelig opgavenummer og må maximalt have et omfang svarende til 5 normalsider. Bilag 2 afleveres som besvarelse på opgave 6c og tæller ikke med i antallet af normalsider. Aflevering: Besvarelsen afleveres samlet i plastlomme i skolens reception. NAVN: HOLD: 1
Case En ældre patient med et større medicin- og alkoholforbrug bag sig indlægges på grund af tiltagende dårlig almentilstand. Der observeres ikterus og generaliseret ødem. Blandt flere analyser måltes S-Albumin. Patienten viste sig at have hypoalbuminæmi. Opgaver 1. Angiv om S-albumin er over eller under referenceintervallet. 2. Forklar kort albumins rolle i forbindelse med opretholdelse af det kolloidosmotiske tryk og reflekter over, om hypoalbuminæmi er i overensstemmelse med patientens kliniske symptomer. 3. Forklar, hvorfor en ændret mængde albumin i blodet kan have betydning for lægemidlers dosering, og angiv hvilken type lægemiddel, der er mest afhængig af albuminkoncentrationen. 4. Angiv en mulig årsag til, at patienten er ikterisk (har ikterus) og forklar, hvorfor den angivne årsag medfører ikterus. 5. Angiv mindst 2 analyser, som kan bidrage til at udrede årsagen til, at patienten er ikterisk. Diskuter, hvordan analyseresultaterne vil variere for de angivne analyser, afhængigt af årsagen til patientens ikterus. 6. For at bekræfte en diagnose udtages en leverbiopsi. Vævssnit fra leverbiopsier farves ofte med Hematoxylin-Eosin (HE) suppleret med vævssnit farvet med Massons Trichrom (se bilag 1). a. Beskriv, hvilken ændring, der hyppigt ses i hepatocytterne efter et stort alkoholindtag og angiv navnet for denne reversible tilstand. b. Forklar, hvorledes langvarigt alkoholindtag kan føre til cirrose og beskriv det histologiske udseende af leveren ved cirrose. 2
c. Angiv med pile på billederne på bilag 2, hvor de nævnte histologiske karakteristika kan erkendes (Bilag 2 indeholder billeder af præparater med levercirrose). d. Reflekter over, hvordan de to anvendte farvemetoder hver især bidrager til diagnostik af cirrose. Nedsat leverfunktion kan påvirke mange fysiologiske processer 7. Forklar, hvilken indvirkning leverlidelse kan have på koagulationsprocessen (den sekundære hæmostase). 8. Angiv hvilke analyser, der ville kunne bruges til at teste om leverlidelsen har haft en effekt på koagulationsprocessen og beskriv kort, hvilket prøvemateriale, der bruges til analyserne, og beskriv analyseprincippet i en af analyserne. 9. Nedsat leverfunktion kan også have en negativ indvirkning på immunsystemet, da de fleste komplementfaktorer produceres i leveren. Forklar kort hvorledes henholdsvis: C3a + C5a C3b MAC kan bidrage til bekæmpelse af en infektion med en Gram negativ bakterie. 3
Til kontrol af analysemetode til måling af S-albumin anvendes en kontrolopløsning med en koncentration på μ 0 = 600 μmol/l. Resultatet af 12 dages målinger på kontrolopløsningen ses i bilag 3. 10. Beregn middelværdien af disse 12 målinger. 11. Metodens analyseusikkerhed vides at være SD ana = 10,0 μmol/l (bestemt med et meget stort antal frihedsgrader). Redegør ved hjælp af en t-test for om metodens akkuratesse (bias) er i orden. 12. Resultaterne af målingerne på kontrolopløsningen ses på kontrolkortet i bilag 4, og følgende kontrolregler anvendes til kontrol af metoden: 1 3s, 2 2s, 4 1s, R 4s. Vurder kontrolkortet i forhold til disse kontrolregler. 13. Patienten fik målt sin S-albumin til en værdi på 243 µmol/l den sidste dag (dag 12). Vurder på baggrund af kontrolkortet om patientens resultat fra dag 12 kan godkendes/accepteres. 14. Begrund, om der er overensstemmelse mellem patientens resultat og de oplysninger, der foreligger om patienten. 15. For S-albumin angives ét referenceinterval for voksne og ét for nyfødte. Diskuter, hvilken statistisk test, der er bedst egnet til at afgøre, om det er nødvendigt at angive to referenceintervaller og ikke blot ét fælles referenceinterval for voksne og nyfødte. 4
En metode til måling af albumin i urin er anvendelse af stix. Der foretages en sammenligning af en indirekte sandwich ELISA og en Stix Micral Test. ELISA-metoden antages at være guldstandard. Der undersøges 1500 prøver, hvoraf 885 stammer fra syge personer. Stix Micral testen viste sig at være positiv i 1073 tilfælde og falsk negativ i 71 tilfælde. Stix Micral Test positive negative I alt Indirekte sandwich ELISA syge raske I alt 16. Beregn Stix Micral testens sensitivitet og specificitet, og vurder metodens egnethed. 17. Beregn PV + og forklar, hvad der forstås ved PV + 18. Hvor mange % af de undersøgte får et positivt svar, selvom de er raske? 19. Skitser opbygningen af en indirekte sandwich ELISA til detektion af albumin. Der skal sættes navn på alle de skitserede dele. 5
Albumin er et protein, der forekommer i 20 genetiske varianter, uden fysiologiske forskelle. 20. Beskriv, hvad genetisk variation (polymorfi) er og forklar, hvorledes denne variation er mulig uden, at der er fysiologiske konsekvenser (dvs. proteinets funktion er bevaret). 21. Angiv en analysemetode, der kan anvendes til at skelne mellem genetiske varianter. En anden årsag til hypoalbuminæmi kan skyldes, at der tabes protein fra tarmen på grund af en inflammatorisk tilstand, som eksempelvis Morbus Crohn. Der udføres en leukocytscintigrafi, hvor patientens egne leukocytter mærkes med 99m Tc-HMPAO. 22. Forklar, hvorfor det er relevant for diagnostik af Morbus Crohn at anvende en leukocytscintigrafi. 23. Ifølge DLM kan leukocytscintigrafien ikke anvendes ved neutropeni. Forklar hvorfor. 6
Bilag 1 Protokol for Massons trichrome samt forventede farveresultater kan bl.a. findes her: http://stainsfile.info/stainsfile/stain/conektv/masson_o1.htm og her http://www.urmc.rochester.edu/path/zqu/stainsmanual/index.html?massonstrichromestain1 7
Bilag 2 Figur 1: Lever med cirrose HE x4 Figur 1: Lever med cirrose (Masson trichrom x4) 8
Bilag 3 Målinger på kontrolopløsningen Koncentration Dag (μmol/l) 1 601 2 613 3 591 4 605 5 613 6 594 7 606 8 603 9 614 10 612 11 624 12 621 Bilag 4 konc umol/l. Kontrolkort albuminanalysen 640 630 620 610 600 590 580 570 +3SD +2SD +1SD 0-1SD -2SD -3SD 560 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 dagnr. 9