Brugsanvisning. PCR-amplifikation og sekventering af HLA-klasse I- og II-loci. Versionsnr.: 16.0 Udfærdigelsesdato: August 2016
|
|
- Filippa Ludvigsen
- 5 år siden
- Visninger:
Transkript
1 Brugsanvisning PCR-amplifikation og sekventering af HLA-klasse I- og II-loci Versionsnr.: 16.0 Udfærdigelsesdato: August 2016 EC REP Conexio Genomics Pty Ltd Qarad bvba 20 Collie Street Cipalstraat 3 Fremantle 6160 B-2440 Geel Western Australia Belgium Australia Side 1 af 24
2 Indholdsfortegnelse PRINCIP... 3 TILS IGTET ANVENDELS E... 3 KIT-SAMMENSÆTNING... 4 OPBEVARINGS KRAV... 8 MATERIALER, REAGENS ER OG UDS TYR, DER IKKE MEDFØLGER... 8 PRØVEKRAV... 9 ADVARSLER OG S IKKERHEDS MÆSSIGE FORHOLDSREGLER...10 SYMBOLER...10 PROCEDURE PCR AGAROSEGELELEKTROFORESE OPRENSNING AF PCR-PRODUKT SEKVENTERINGSREAKTION OPRENSNING AF SEKVENTERINGSREAKTIONSPRODUKTER DENATURERING & ELEKTROFORESE AF SEKVENTERINGSREAKTIONSPRODUKTER REDIGERING OG ANALYSE AF ELEKTROFEROGRAMMER...16 YDEEVNEKARAKTERIS TIKA...17 NØJAGTIGHED...17 DETEKTIONSGRÆNSE...18 SPECIFICITET...18 BEGRÆNSNINGER OG FORHOLDSREGLER...18 LICENS...19 LITTERATURLIS TE...19 FEJLFINDING...20 RELATEREDE PRODUKTER...22 Side 2 af 24
3 Princip Den HLA-sekvensbaserede typebestemmelses (SBT)-procedure, der er beskrevet her, blev oprindeligt udviklet af D. Sayer i og udviklet til en enkeltrørsanalyse i Proceduren inddrager en indledende amplifikation af målsekvensen, efterfulgt af enzymatisk behandling til fjernelse af ikke-inkorporerede primere og dntp er. Amplikonen anvendes herefter som template til direkte automatisk fluorescerende DNA-sekventering ved anvendelse af speciallavede sekventeringsprimere og Big Dye -terminatorsekventeringskemien, der er tilgængelig fra Applied Biosystems under Life Technologies. Forlængelsesprodukterne oprenses ifølge ethanolfældningsmetoden og denatureres ved brug af Hi-Di -formamid, der er tilgængelig fra Applied Biosystems under Life Technologies, før separering og påvisning på en automatisk fluorescerende DNA-sekvenator. Det anbefales, at de resulterende data herefter analyseres med Assign - SBT-sekvensanalysesoftware fra Conexio Genomics Pty Ltd. 3-5 Tilsigtet anvendelse Conexio Genomics SBT Resolver -HLA-SBT-kits anvendes til typebestemmelse af HLAklasse I (HLA-A, -B og -C)- og klasse II (HLA-DRB1, -DQB1 og -DPB1)-gener i en laboratorieopsætning fra genomisk DNA. Hvert kit indeholder reagenser, der letter PCRamplifikationen og DNA-sekventeringen af et bestemt gen. De resulterende sekventeringsdata tolkes herefter ved anvendelse af Conexio Genomics Assign -SBTsoftware. Det skal bemærkes, at disse SBT-kits ikke anvendes til diagnosticering af sygdom. Side 3 af 24
4 Kit-sammensætning Kit Katalognummer PRE-PCR-indhold (Antal hætteglas) Klasse I HLA-A XH-PD1.1-2(20) 20 tests DNA POL- HLA-A 1 x 25 µl HLA-A MIX 1 x 352 µl AEX1F AEX2F AEX3F AEX4F POST-PCR-indhold (Antal hætteglas) AEX1R AEX2R AEX3R AEX4R 1 x 44 µl XH-PD1.1-2(50) 50 tests DNA POL- HLA-A 1 x 60 µl HLA-A MIX 1 x 880 µl AEX1F AEX2F AEX1R AEX2R 1 x 110 µl AEX3F AEX3R AEX4F AEX4R HLA-B BS-PD2.1-2(20) 20 tests DNA POL- HLA-B 1 x 25 µl HLA-B MIX 1 x 352 µl BEX1F BEX2R BEX2F BEX3F 1 x 44 µl BEX3R BEX4F BEX4R BS-PD2.1-2(50) 50 tests 1 x 60 µl DNA POL- HLA-B HLA-B MIX 1 x 880 µl BEX1F BEX2R BEX2F BEX3F 1 x 110 µl BEX3R BEX4F BEX4R Side 4 af 24
5 HLA-C HH-PD 3.2-2(20) 20 tests DNA POL- HLA-C 1 x 25 µl HLA-C MIX 1 x 352 µl CEX1F CEX2F CEX1R CEX2R 1 x 44 µl CEX3F CEX3R CEX4F CEX4R CEX5F CEX5R CEX6F CEX6R CEX7F HH-PD 3.2-2(50) 50 tests DNA POL- HLA-C 1 x 60 µl HLA-C MIX 1 x 880 µl CEX1F CEX2F CEX1R CEX2R 1 x 110 µl CEX3F CEX3R CEX4F CEX4R CEX5F CEX5R CEX6F CEX6R CEX7F Klasse II HLA-DRB1 HH-PD5.2-5(20) 20 tests DNA POL- DRB1 1 x 10 µl HLA-DRB1 MIX 1 x 370 µl DRB1EX2F DRB1EX3R-2 DRB1EX2R-2 RB-TG344-R 1 x 44 µl Side 5 af 24
6 HH-PD5.2-5(50) 50 tests DNA POL- DRB1 1 x 20 µl HLA-DRB1 MIX 1 x 920 µl DRB1EX2F DRB1EX3R-2 DRB1EX2R-2 RB-TG344-R 1 x 110 µl LG-PD5.2-7(20) 20 tests DNA POL DRB1 1 x 10 L HLA-DRB1 MIX 1 x 370 L DRB1EX2F DRB1EX3F-7 DRB1EX2R-2 DRB1EX3R-7 1 x 44 L RB-TG344-R LG-PD5.2-7(50) 50 tests 1 x 20 L DNA POL DRB1 HLA-DRB1 MIX 1 x 920 L DRB1EX2F DRB1EX3F-7 DRB1EX2R-2 DRB1EX3R-7 1 x 110 L RB-TG344-R HLA-DQB1 PQ-PD6.2-2(20) 20 tests DNA POL- DQB1 1 x 10 µl HLA-DQB1 MIX 1 x 370 µl DQB1EX2F DQB1EX3F DQB1EX2R DQB1EX3R 1 x 44 µl PQ-PD6.2-2(50) 50 tests DNA POL- DQB1 1 x 20 µl HLA-DQB1 MIX 1 x 920 µl DQB1EX2F DQB1EX3F DQB1EX2R DQB1EX3R 1 x 110 µl AN-PD6.2-3(20) 20 tests 1 x 10 L DNA POL- DQB1 HLA-DQB1 MIX 1 x 370 L DQB1EX3F DQB1EX3R 1 x 44 L AN-PD6.2-3(50) 50 tests 1 x 20 L DNA POL DQB1 HLA-DQB1 MIX 1 x 920 L DQB1EX2F DQB1EX3F DQB1EX2R-3 DQB1EX3R 1 x 110 L Side 6 af 24
7 HLA-DPB1 HH-PD10.1(20) 20 tests 1 x 10 µl DNA POL- DPB1 HLA-DPB1 MIX 1 x 370 µl DPB1EX2F DPB1EX2R 1 x 44 µl HH-PD10.1(50) 50 tests 1 x 20 µl DNA POL- DPB1 HLA-DPB1 MIX 1 x 920 µl DPB1EX2F DPB1EX2R 1 x 110 µl KD-PD10.2-1(20) 20 tests 1 x 10 L DNA POL DPB1 1 x 370 L DPB1EX1F DPB1EX1R HLA-DPB1 MIX DPB1EX2F DPB1EX2R 1 x 44 L DPB1EX3F DPB1EX4F DPB1EX5F DPB1EX3R DPB1EX4R DPB1EX5R PB-AG341-R KD-PD10.2-1(50) 50 tests 1 x 20 L DNA POL DPB1 HLA-DPB1 MIX 1 x 920 L DPB1EX1F DPB1EX2F DPB1EX1R DPB1EX2R 1 x 110 L DPB1EX3F DPB1EX3R DPB1EX4F DPB1EX4R DPB1EX5F DPB1EX5R PB-AG341-R PRE-PCR-kittet indeholder et hætteglas med en locusspecifik PCR-blanding (f.eks. HLA-A MIX ), der består af PCR-buffer, dntp er, MgCl 2 og locusspecifikke PCR-primere, sammen med et enkelt hætteglas med DNA-polymerase (f.eks. ). POST-PCR-kittet indeholder sekventeringsprimere (f.eks. AEX1F ). DNA POL- HLA-A Side 7 af 24
8 Opbevaringskrav PRE- og POST-PCR-kasserne kan adskilles og opbevares i udpegede PRE- og POST-PCRfrysere. Ved opbevaring ved -20 C (temperaturintervallet -15 C til -25 C er acceptabelt) kan kitbestanddelene anvendes indtil udløbsdatoen, der er angivet på de ydre kitbeholdere, og de kan tåle op til 25 fryse-tø-cykler. Accelereret stabilitetstestning af HLA-A-, -B-, -C,- -DRB1-, -DQB1- og -DPB1-kittene viste en holdbarhed på 2½ år fra fremstillingsdatoen ved opbevaring ved -20 C. Mens man venter på bekræftende realtidstestning, anbefales det kraftigt, at disse kits IKKE bruges efter deres udløbsdato. For at opretholde optimal ydeevne for kittet skal kitbestanddelene tages ud fra opbevaringsstedet ved -20 C og tøs hurtigt op ved stuetemperatur før brug. Kitbestanddelene med undtagelse af polymerasen skal herefter vortexblandes med forsigtighed for at sikre, at bestanddelene i t rør er ordentligt blandet efter optøning. Efter brug skal kittene/bestanddelene straks returneres til -20 C. Materialer, reagenser og udstyr, der ikke medfølger PCR 1. Steriliseret vand 2. Elektroniske eller mekaniske pipetter og aerosolresistente spidser 3. Termisk cyklusapparat med opvarmet låg Disse kits er blevet valideret ved brug af følgende termiske cyklusapparater: MJ Research PTC 225 DNA Engine DYAD, Applied Biosystems under Life Technologies, Veriti Thermal cycler, Gene Amp PCR System 9700 og Eppendorf Mastercycler Pro. Anvendelse af andre termiske cyklusapparater med disse kits kræver validering af brugeren. 4. 0,2 ml tyndvæggede reaktionsrør til termisk cyklus (8 brønds-strimler eller 96 brønds- plader). Anvend de, der anbefales til brug med dit termiske cyklusapparat. 5. Sterile 1,5 ml-rør 6. Sterilt arbejdsområde, såsom biologisk sikkerhedsskab eller stinkskab. 7. Bordcentrifuge med pladeadaptere og en kapacitet til at nå 2500 x g 8. Vortex Agarosegelelektroforese 9. Agarosegelelektroforeseapparat % agarose (molekylærbiologisk kvalitet) TBE-gel, der indeholder 0,1 g/ml ethidiumbromid. 11. Loadingbuffer 12. PCR-markør, der er egnet til at dække intervallet bp 13. UV-transilluminator Side 8 af 24
9 Oprensning af PCR-produkt 14. ExoSAP (USB ExoSAP-IT, katalognummer 78200, til 100 reaktioner eller Illustra ExoProStar, katalognr. US77702, til 100 reaktioner) mm MgCl 2 (kan købet hos Conexio Genomics, produktkode MgCl2-1.0(50) eller MgCl2-1.0(3000)) 16. Omryster Anvendelse af alternative PCR-oprensningsteknikker kræver validering af brugeren før brug. Sekventeringsreaktion 17. BigDye -terminator-cyklussekventeringskit v3.1 eller v1.1, Applied Biosystems under Life Technologies x sekventeringsreaktionsbuffer (Conexio Genomics, produktkode SEQ BUF- 2.0(400) eller SEQ BUF-2.0(5000)) eller BigDye Terminator v3.1 eller v1.1 5X sekventeringsbuffer, Applied Biosystems under Life Technologies. Oprensning af sekventeringsreaktionsprodukter mm EDTA, ph 8,0 (kan købes hos Conexio Genomics, produktkode EDTA- 3.0(200) eller EDTA-3.0(5000)). 20. Absolut og 80 % ethanol. Hver kørsel kræver friskfremstillet 80 % ethanol, der består af absolut ethanol og sterilt vand. ANVEND IKKE DENATURERET ETHANOL (også i nogle lande kendt som denatureret sprit). Anvendelse af alternative sekventeringsoprensningsteknikker kræver validering af brugeren før brug. Denaturering og elektroforese af sekventeringsreaktionsprodukter 21. Hi-Di -formamid, Applied Biosystems under Life Technologies, produktkode Automatisk DNA-sekvenator og tilbehør (f.eks. Applied Biosystems under Life Technologies ABI Prism 3730), inklusive dataopsamling og software. Disse kits er blevet testet og valideret på Applied Biosystems under Life Technologies 3100, 3730 og 3730xl kapillærsekvenatorer og software. Anvendelse af andre denatureringsteknikker og sekventeringsplatforme kræver validering af brugeren før brug. 23. HLA-sekventeringsanalysesoftware (f.eks. Assign SBT, version 3.6+ eller højere Conexio Genomics Pty Ltd). Prøvekrav 1. Steriliseret vand (negativ/ingen template-kontrol) 2. Højmolekylært humant genomisk DNA (koncentrationsinterval ng/µl i Tris/EDTA-buffer og OD 260/280 > 1,8) ekstraheret fra ACD- eller EDTA-antikoagulerede fuldblodsprøver. Anvend IKKE fuldblodsprøver, der indeholder heparin. Side 9 af 24
10 Advarsler og sikkerhedsmæssige forholdsregler Dette kit skal anvendes af uddannet og autoriseret laboratoriepersonale. Alle prøver, alt udstyr og alle reagenser skal håndteres i overensstemmelse med god laboratoriepraksis. Især skal alt patientmateriale betragtes som potentielt smittefarligt. Brug af handsker og kitler anbefales kraftigt. Håndtér og bortskaf alt prøvemateriale i henhold til lokale og nationale lovmæssige retningslinjer. Der er INGEN farlige stoffer indeholdt i nogen af kitbestanddelene. Anvend IKKE reagenser efter deres udløbsdato. Anvendelse af kitbestanddele fra forskellige kitpartier anbefales IKKE. En sådan anvendelse kan have indvirkning på analysens ydeevne. Anvendelse af reagenser, der ikke er inkluderet i dette kit eller anført under Materialer, reagenser og udstyr, der ikke medfølger (f.eks. alternative Taq-DNApolymeraser), anbefales IKKE. En sådan anvendelse kan have indvirkning på analysens ydeevne. Vær omhyggelig med at undgå krydskontaminering af DNA-prøver. Skift spidser mellem DNA-prøver, hvor det er muligt. Pre- og Post-PCR-aktiviteter skal være strengt fysisk adskilt. Anvend specifikt udpeget/udpegede udstyr, reagenser og kitler. Ethidiumbromid er et potentielt karcinogen. Der skal altid bruges beskyttelseshandsker ved fremstilling og håndtering af geler. Bortskaf ethidiumbromidgeler og buffere i henhold til lokale og nationale retningslinjer. Undgå altid direkte eksponering og brug passende UV-blokerende ansigtsbeskyttelse, engangshandsker og kitler under inspektion og fotografering af agarosegeler under UV-lys, Symboler Følgende ikke-standardsymboler er blevet anvendt: Symbol Beskrivelse HLA-X MIX DNA POL-XXXXX AEX1F Locusspecifik PCR-blanding DNA-polymerase HLA-A-exon 1-fremad sekventeringsprimer. Der henvises til Kitsammensætning og tabel 4 for andre sekventeringsprimere. Fremstillingsdato (kræves til ikke-eu-markeder). Side 10 af 24
11 Procedure 1. PCR 1.1. Det er nødvendigt at opsætte en separat PCR-reaktion for t locus, der skal amplificeres, og for individuelle prøve, der skal testes. Hver kørsel skal inkludere en eller flere passende positive kontroller med kendt genotype og mindst én negativ kontrol for t locus, der amplificeres Fremstil en frisk opløsning af PCR-masterblanding gang, der udføres en PCR. Optø hurtigt den locusspecifikke PCR-blanding ved stuetemperatur. Når den er optøet, blandes den kortvarigt på vortexblander Fordel den nødvendige mængde af PCR-blanding og DNA-polymerase i et sterilt rør til det antal prøver, der skal testes (der henvises til tabel 1 nedenfor for volumen pr. reaktion). Puls-vortexbland opløsningen 3-4 gange. Locus A B C DRB1 DQB1 DPB1 Locusspecifik PCR-blanding f.eks. HLA-A MIX 16 L 16 L 16 L 16,7 L 16,7 L 16,7 L DNA-polymerase f.eks. DNA POL- HLA-A 1 L 1 L 1 L 0,3 L 0,3 L 0,3 L Tabel 1: Sammensætning af masterblandingen, der er nødvendig pr. prøve Fordel 17 L af masterblandingen i reaktionsbrønd Tilsæt 3 L prøve-dna eller passende positive kontroller til reaktionsbrønd. Tilsæt 3 L sterilt vand til reaktionsbrønden med den negative kontrol Forsegl reaktionsbrøndene. Bland forsigtigt med vortexblander, og centrifugér kortvarigt Anbring reaktionsbrøndene i et termisk cyklusapparat og lav en kørsel ifølge betingelserne for den termiske cyklus nedenfor. 95 C - 10 minutter 96 C - 20 sekunder 60 C - 30 sekunder 33 cykler 72 C 3 minutter 15 C - hold 1.8. Amplifikation tager ca. 2,5 timer at gennemføre Når PCR en er gennemført, fjernes reaktionsbrøndene/pladen fra det termiske cyklusapparat, hvorefter de/den enten fortsætter direkte til gelelektroforese eller opbevares ved 4 C indtil anvendelse. BEMÆRK: Oprensning af amplikoner ved hjælp af ExoSAP-behandling skal finde sted inden for 24 timer efter udførelse af PCR. Side 11 af 24
12 2. Agarosegelelektroforese 2.1. Bekræft succesfuld amplifikation ved hjælp af agarosegelelektroforese ved brug af 2 L af t PCR-produkt kombineret med 5 L loadingbuffer (alternative voluminer af loadingbuffer skal valideres før brug). Anvendelse af 1 %-agarosegeler anbefales Antallet og de forventede størrelser af de resulterende amplikoner vil variere alt efter locus og prøvegenotype. Forventede PCR-amplikonstørrelser er angivet i tabel 2. Locus HLA-A HLA-B HLA-C HLA-DRB1 HLA-DQB1 Forventede båndstørrelser 2 kbp 2 kbp 1,1 kbp og 1,4 kbp 450 bp bp (HH-PD5.2-5) 630 bp bp (LG-PD5.2-7) Båndmønsteret vil variere afhængig af tilstedeværelsen af specifikke allelgrupper 300 bp og 500 bp (PQ-PD6.2-2) 400 bp og 500 bp (AN-PD6.2-3) HLA-DPB1 400 bp (HH-PD10.1) 400 bp, 780 bp og 1470 bp (KD-PD10.2-1) Tabel 2: Forventede produktstørrelser for analyse. 3. Oprensning af PCR-produkt BEMÆRK: Andre oprensningssystemer end EXOSAP-IT eller ExoProStar TM (f.eks. Agencourt AMPure XP eller søjlebaserede systemer) kan anvendes til oprensning af disse PCR-produkter. Det anbefales kraftigt, at brugerne validerer disse procedurer før anvendelse. Hvis EXOSAP-behandling skal anvendes, anbefales det, at brugerne følger proceduren, der er beskrevet nedenfor Fremstil en masterblanding, der består af 4 µl ExoSAP-IT eller ExoProStar TM og 8 µl 2 mm MgCl 2 pr. prøve, der skal oprenses. Bland ved hjælp af forsigtig pulsvortexblanding. Tilsæt 12 L af masterblandingen i reaktionsbrønden for reaktiv prøve. Forsegl brøndene, vortexbland og anbring dem på en omryster eller vortexbland forsigtigt i 2 minutter. Centrifugér kortvarigt før anbringelse i det termiske cyklusapparat. Kør den termiske cyklus efter følgende profil: 37 C 30 minutter 80 C 15 minutter 4 C - hold 3.2. Efter gennemførelse fortyndes det oprensede produkt 1:4 med sterilt vand. Dette fortyndingstrin vil sikre, at der er tilstrækkelig template til udførelse af Side 12 af 24
13 sekventeringsreaktionerne, og sikre, at koncentrationen af templaten er tilstrækkelig til at frembringe sekvensdata af god kvalitet. BEMÆRK: En højere fortyndingsfaktor (f.eks. 1:8) kan være nødvendig, hvis der observeres konsekvent høje signaler og tilknyttet støj og artefakter. Svagere PCR-produkter kan kræve en lavere fortyndingsfaktor ExoSAP-behandlede prøver kan opbevares ved 4 C, indtil de er klar til brug. Disse prøver kan opbevares ved 4 C i op til en uge før brug, men skal opbevares ved - 20 C ved langtidsopbevaring. 4. Sekventeringsreaktion BEMÆRK: I tilfælde, hvor heterozygotiske tvetydigheder skal løses med hemizygotiske sekventeringsprimere, såsom HARPS, henvises til brugsanvisningen til SBT Resolver HARPS Tabel 3 viser en liste over sekventeringsprimere, der anvendes til t enkelt locus. HLA-A HLA-B HLA-C AEX1F AEX1R BEX1F BEX2F CEX1F CEX1R AEX2F AEX2R BEX2R BEX3F CEX2F CEX2R AEX3F AEX3R BEX3R BEX4F CEX3F CEX3R AEX4F AEX4R BEX4R CEX4F CEX4R CEX5F CEX5R CEX6F CEX6R CEX7F HLA-DRB1 HLA-DQB1 HLA-DPB1 DRB1EX2F DRB1EX2R-2 DQB1EX2F DQB1EX2R DPB1EX2F DPB1EX2R DRB1EX3R-2^ RB-TG344-R DQB1EX3F DQB1EX3R eller eller eller DRB1EX2F DRB1EX2R-2 DQB1EX2F DQB1EX2R-3 DPB1EX1F DPB1EX1R DRB1EX3F-7 DRB1EX3R-7 DQB1EX3F DQB1EX3R DPB1EX2F DPB1EX2R RB-TG344-R DPB1EX3F DPB1EX4F DPB1EX5F PB-AG341-R* DPB1EX3R DPB1EX4R DPB1EX5R Tabel 3: Sekventeringsprimere, der leveres til brug til t enkelt locus. RB-TG344-R er en HARP, der er rettet mod kodon 86-dimorfi. Brug af denne er valgfri. *PB-AG341-R er en HARP, der er ettet mod kodon 85-dimorfi i DPB1. Brug af denne er valgfri. Side 13 af 24
14 ^DRB1EX3R-2 er en DRB1-sekventeringsprimer i HH-PD5.2-5-kittene, der opfører sig tilsvarende en HARP og er beregnet til sekventering af følgende allelgrupper: *03, *08, *11, *12, *13, *14, *15 og *16. Denne primer vil frembringe enten heterozytiske, hemizygotiske eller ingen sekventeringsdata afhængig af genotypen af prøven, der typebestemmes. Når DRB1EX3R-2-data analyseres i Assign mod DRB1-FullX2-referencen vil de resulterende exon 3-data blive analyseret i et separat lag, og de vil åbne mulighed for løsning af en række alleltvetydigheder i exon 3, såsom DRB1*14:01 vs. *14:54-uklarheden. Brug af denne er valgfri afhænigig af den typebestemmelsesstrategi, der anvendes af laboratoriet. Dette gælder ikke for LG-PD5.2-7-kittene, da bidirektionel sekventering af exon 3 er tilgængelig Fremstil en frisk opløsning af sekventeringsprimerblanding på is gang, der udføres en sekvensreaktion. Sammensætningen og voluminerne for blandingen er angivet pr. prøve. Bestanddel Volumen Sekventeringsprimer 2µL Sterilt vand 11,5µL BigDye -terminatorer 1µL 5X sekventeringsbuffer 3,5µL 4.3. Bland sekventeringsreaktionsblanding forsigtigt ved hjælp af pulsvortexblanding Fordel 18 µl af sekventeringsreaktionsblandingen i t/ relevant reaktionsrør/brønd. BEMÆRK: Ved kørsler, der inddrager få prøver med mange sekventeringsprimere, er det acceptabelt at tilsætte sekventeringsprimeren (2 µl) direkte i de individuelle reaktionsbrønde. Der kan herefter fremstilles en masterblanding, der består af sterilt vand, BigDye - terminatorer og 5x Seq Rxn Buffer, hvoraf der skal tilsættes 16 µl til reaktionsbrønd. Det anbefales kraftigt, at brug af denne alternative procedure valideres af brugeren før implementering Tilsæt 2 µl oprenset PCR-produkt til relevant brønd. BEMÆRK: Vær omhyggelig med at undgå krydskontaminering af sekvensreaktioner Forsegl reaktionsbrøndene, bland forsigtigt og centrifugér kortvarigt for at sikre, at indholdet befinder sig i bunden af reaktionsbrønd Anbring reaktionsrørene i et termisk cyklusapparat og kør efter følgende profil: Antal cykler Temperatur og tid C 10 sekunder 50 C 5 sekunder 60 C 2 minutter 1 4 C - hold 4.8. Når programmet er gennemført, fjernes reaktionsbrøndene/pladen fra det termiske cyklusapparat, hvorefter de/den enten fortsætter direkte til oprensning af reaktionsprodukterne eller opbevares i mørke ved 4 C indtil anvendelse. Det anbefales, at prøver oprenses og køres på DNA-sekvenatoren inden for 24 timer. Side 14 af 24
15 5. Oprensning af sekventeringsreaktionsprodukter BEMÆRK: Oprensning af reaktionsprodukterne kan udføres ved hjælp af andre procedurer end ethanolfældningsmetoden, der er beskrevet her. Det anbefales kraftigt, at brugerne validerer disse procedurer før anvendelse Centrifugér kortvarigt reaktionsrørene/pladerne, før der fortsættes. Hvis der er anvendt låg/hætter, der kan genbruges, under den termiske cyklus, skal lågene/hætterne mærkes for at undgå krydskontaminering Fjern forsigtigt forseglingen Til t reaktionsrør tilsættes 5µL 125 mm EDTA, ph 8,0. Sørg for, at EDTA en når bunden af reaktionsrøret Tilsæt 60µL 100 % ethanol til reaktionsbrønd. Forsegl brøndene/pladen, og vortexbland kortvarigt men grundigt for at sikre grundig opblanding Pelletér forlængelsesprodukterne ved hjælp af centrifugering ved 2000g i 45 minutter. GÅ STRAKS VIDERE TIL NÆSTE TRIN. Hvis dette ikke er muligt, recentrifugeres i yderligere 10 minutter, før der fortsættes Tag forseglingerne af reaktionsbrøndene, og fjern supernatanten ved at vende reaktionsbrøndene med bunden i vejret på en papirserviet Anbring de omvendte reaktionsbrønde og papirservietten i centrifugen. Centrifugér ved 350g i 1 minut til fjernelse af resterende supernatant Tag reaktionsbrøndene ud af centrifugen, og anbring dem i opretstående position på arbejdsbordet. Smid papirservietten væk Fremstil en frisk opløsning af 80 % ethanol med absolut ethanol og sterilt vand Tilsæt 60 µl 80 % ethanol til brønd. Forsegl på ny brøndene, og vortexbland kortvarigt Centrifugér ved 2000g i 5 minutter Gentag trinene 5.6 og Fjern reaktionsrørene fra centrifugen, og smid papirsservietten ud. Forsegl på ny reaktionsbrøndene, og gå videre til denatureringstrinet. Eller opbevar ved -20 C i mørke. Det anbefales, at forlængelsesprodukterne køres på DNA-sekvenatoren inden for 24 timer efter opsætning af sekventeringsreaktionerne. 6. Denaturering & elektroforese af sekventeringsreaktionsprodukter BEMÆRK: Proceduren for denaturering af forlængelsesprodukter i Hi-Di -formamid, der er beskrevet her, er muligvis ikke nødvendig, hvis der er brugt andre oprensningsprocedurer end ethanolfældning. Det anbefales kraftigt, at brugerne validerer alternative procedurer før anvendelse Tilsæt 12 µl Hi-Di -formamid til t reaktionsrør. Vortexbland og centrifugér brøndene/pladen kortvarigt Inkubér reaktionsbrøndene ved 98 C i 5 minutter. Sørg efter inkubation for, at reaktionsbrøndene hurtigt nedkøles til stuetemperatur (anbring f.eks. disse på is eller Side 15 af 24
16 brug det termiske cyklusapparat til at udføre denaturerings- og nedkølingstrinene), før de anbringes på sekvenatoren. Hvis det ikke er muligt at køre pladerne straks, opbevares disse ved 4 C indtil anvendelse. BEMÆRK: Sørg for, at der ikke er luftbobler i reaktionsbrøndene. Disse kan trænge ind og beskadige kapillæret Sæt reaktionsbrøndene/pladen på den automatiske sekvenator, og klargør dataopsamlingsfilen i henhold til sekvenatorproducentens specifikationer Følgende instrumentparametre er blevet valideret af producenten ved brug af Big Dye -terminator-sekventeringskit v3.1 og POP-7. Disse parametre kan kræve brugervalidering for andre polymerer, sekventeringskemier og instrumenter. Der henvises til den relevante instrumentbrugervejledning for detaljerede anvisninger og vejledning (sørg f.eks. for, at dye-sæt-indstillingen er korrekt i forhold til den anvendte kemi. For eksempel kræver v1.1 Big Dye -terminator-sekventeringskemi et andet dye-sæt). Parameter Dyeset (Dye-sæt) Mobility file (Mobilitetsfil) Basecaller Run Module (Kørselsmodul) Injection time (Injektionstid) Run time (Kørselstid) Indstilling Z_BigDyeV3 KB_3730_POP7_BDTV3 KB.bcp Regular FastSeq50_POP7 15 sek sek Brug instrumentets dataopsamlingssoftware til behandling af de rå indsamlede data og frembringelse af sekvensfilerne. Der henvises til den relevante instrumentbrugervejledning for detaljerede anvisninger og vejledning. 7. Redigering og analyse af elektroferogrammer SBT Resolver -kittene er udviklet og valideret ved brug af Assign -SBT- og Assign - ATF-softwaren, der er udviklet af Conexio Genomics Pty Ltd. Brugere anbefales at bruge Assign SBT-versioner 3.6+ og derover, da disse versioner af softwaren anvender indstillingsog referencefiler, der er specifikt udformet til SBT Resolver -typebestemmelseskittene og HARPS. For yderligere oplysninger om anvendelsen af denne software henvises til de relevante brugervejledninger, der kan downloades fra Conexio Genomics website ( Sekventeringen, der er baseret på typebestemmelsesdata frembragt ved anvendelse af SBT Resolver -typebestemmelseskittene bør analyseres mod følgende Assign -referencefiler, der leveres af Conexio Genomics: Analyse Produktkode Assign-referencefil SBT Resolver HLA-A XH-PD1.1-2 A.xml SBT Resolver HLA-B BS-PD2.1-2 B.xml SBT Resolver HLA-C HH-PD3.2-2 C.xml eller Cw.xml SBT Resolver HLA-DRB1 HH-PD5.2-5 DRB1-FullX2.xml LG-PD _DRB1.xml Side 16 af 24
17 Locus Analyse Produktkode Assign-referencefil SBT Resolver HLA-DQB1 PQ-PD6.2-2 DQB1.xml SBT Resolver HLA-DPB1 Ydeevnekarakteristika Nøjagtighed AN-PD6.2-3 HH-PD10.1 KD-PD _DQB1.xml DPB1.xml DPB1.xml Paneler af op 93 prøver fra UCLA International DNA Exchange proficiency testing program ( ), der blev anvendt til intern testning til SBT Resolver -kittene, gav følgende resultater: Antal testede prøver Diagnostisk Følsomhed (% succesfulde PCRer) Diagnostisk specificitet (% opnåede genotyper) Antal diskordante prøver Antal heterozygotiske prøver Antal unikke alleler HLA-A % 100% HLA-B % 98.8% HLA-C % 97.5% HLA-DRB % 96.7% HLA-DQB1 (PQ-PD6.2-2) HLA-DQB1 (AN-PD6.2-3) HLA-DPB1 (HH-PD10.1) HLA-DPB1 (KD-PD10.2-1) % 100% % 100% % 100% % 100% 2* * De to diskordante prøver indeholdt yderligere sekvensinformation uden for exon 2, som ikke var rapporteret af UCLA International DNA Exchange proficiency testing program. Én prøve indeholdt 131:01, men var rapporteret som 13:01 af UCLA International DNA Exchange proficiency testing program. Allelerne er forskellige i exon 3 og 4. Den anden prøve indeholdt 107:01, men var rapporteret som 13:01 af UCLA International DNA Exchange proficiency testing program. Disse alleler er forskellige i exon 1. For SBT Resolver HLA-DRB1-kittene (produktkode LG-PD5.2-7) blev anvendt et panel af 23 velkarakteriserede prøver, der dækkede et bredt spekter af alleler, til intern test. Endvidere blev også et panel af 293 eksternt opnåede prøver typebestemt uden a priori-kendskab til andre HLA-typebestemmelsesdata. Disse prøver blev også testet med SBT Resolver -HLA- DQB1-analysen (PQ-PD6.2-2). I de tilfælde, hvor der blev opnået et homozygotisk resultat, blev DQB1/DRB1-forbindelserne for disse prøver undersøgt til bekræftelse af resultatet samt påvisning af tilfælde, hvor der kan være forekommet allel-dropout. Side 17 af 24
18 Testen gav følgende resultater: Locus Antal testede prøver Diagnostisk følsomhed Diagnostisk specificitet Antal diskordante prøver Antal heterozygotiske prøver Antal unikke alleler HLA-DRB % 100% * 97.9% 99.6% * For seks prøver mislykkedes amplifikation på grund af en dårlig DNA-prøvekvalitet. Én prøve viste sig at indeholde kontaminerende DNA, hvor kilden stammede fra laboratoriet, hvorfra prøverne var opnået. På grund af kontamineringen kunne der ikke opnås en genotype for denne prøve. Sekvensanalyse af PCR og sekventeringsprimersteder og ydeevneevalueringsundersøgelser har ikke identificeret nogen almindelige og veldokumenterede alleler, der ikke er blevet amplificeret ved den anbefalede brug af disse kits. For yderligere oplysninger henvises til SBT Resolver -primeranalysedokumentet, der er tilgængeligt sammen med Assign - SBT-referencefrigivelse, der kan downloades fra Conexio Genomics website ( Detektionsgrænse Den anbefalede koncentration af højmolekylært humant genomisk DNA er ng/µl. Intern testning har vist, at prøver med koncentrationer så lave som 5 ng/µl også kan anvendes. Korrekte genotyper opnåedes også fra DNA af dårlig kvalitet eller sheared DNA. Specificitet Conexio Genomics Pty Ltd s SBT Resolver -kits er locusspecifikke analyser. Anvendelse af kittene i overensstemmelse med disse anvisninger skulle kun amplificere et enkelt locus. I de fleste tilfælde vil anvendelsen af sekventeringsprimerne, der er inkorporeret i t kit, frembringe en HLA-typebestemmelse for de fleste prøver, uden at der er behov for yderligere opløsning. I de tilfælde, hvor der er heterozygotiske tvetydigheder, anbefales anvendelse af opløsende sekventeringsprimere (såsom SBT Resolver TM HARPS ). Det skal bemærkes, at mutationer i amplifikations- eller sekventeringsprimersteder er mulige og kan resultere i allel-dropout. Prøver, der tyder på et homozygotisk typebestemmelsesresultat, skal bekræftes ved hjælp af alternative procedurer. Begrænsninger og forholdsregler Det anbefales kraftigt, at disse kits valideres af brugeren før implementering i laboratoriet ved brug af prøver, hvis HLA-type er blevet bestemt ved hjælp af andre molekylærbaserede procedurer. Især skal en afvigelse fra denne procedure (f.eks. brug af alternative PCR- eller DNA-sekventeringsoprensningsprocedurer) valideres af brugeren før implementering. Disse kits er blevet valideret ved brug af paneler af prøver, hvis genotyper dækker et bredt spekter af alleler. Det skal dog bemærkes, at man kan støde på sjældne alleler og alleler med polymorfi i amplifikations- og sekventeringsprimerstederne, og disse amplificeres eller sekventeres muligvis ikke. Side 18 af 24
19 Karakteren af HLA-sekvensbaseret typebestemmelse er således, at andre faktorer end PCR-blandingen kan resultere i præference-amplifikation eller allel-dropout. Som følge heraf skal tilsyneladende homozygotiske typebestemmelsesresultater bekræftes ved brug af alternative metoder og/eller familiær genotypebestemmelse. En positiv kontrol (human DNA) og negativ kontrol (sterilt vand) skal inkluderes ved PCR-kørsel. Den positive kontrol skal frembringe et PCR-produkt med den passende størrelse afhængig af det amplificerede locus, og den resulterende sekvens skal være i overensstemmelse med prøvens genotype. Der må ikke være nogen PCR-produkter i den negative templatekontrol for t forsøg. Hvis der fremkommer et bånd, kan der være sket kontaminering på et eller andet niveau, og kørslen skal gentages. Der kan lejlighedsvis ses større, svagere PCR-produkter. Disse ekstra bånd interfererer ikke med sekvensresultaterne eller kvaliteten. Licens SBT Resolver -kittene indeholder GoTaq -Hot Start-polymerase (DNA POL), der fremstilles af Promega Corporation til distribution af Conexio Genomics Pty Ltd. Med licens til Promega under US patent nr og og de tilsvarende udenlandske patenter. Litteraturliste 1. Sayer D, Whidborne R, Brestovac B, Trimboli F, Witt C, Christiansen F (2001): HLA- DRB1 DNA sequencing based typing: an approach suitable for high throughput typing including unrelated bone marrow registry donors. Tissue Antigens 57: Sayer D, Whidborne R, DeSantis D, Rozemuller EH, Christiansen F, Tilanus MG (2004). A multicentre international evaluation of single-tube amplification protocols for sequencing-based typing of HLA-DRB1 and HLA-DRB3, 4, 5. Tissue Antigens 63: Assign SBT v3.6+ Operator Manual, Conexio Genomics Pty Ltd 4. Assign SBT v4.7 Operator Manual, Conexio Genomics Pty Ltd 5. Assign SBT v471 Operator Manual, Conexio Genomics Pty Ltd 6. Mere information omthe UCLA DNA Exchange Program kan findes på: 7. Aktuelle HLA-alleler kan findes på: Side 19 af 24
20 Fejlfinding Problem Mulig(e) årsag(er) Løsning Intet eller svagt PCRprodukt Intet eller svagt PCRprodukt for exon 3-5- båndet for KD-PD analysen DNA af dårlig kvalitet Utilstrækkelig mængde af DNA tilsat til PCR. Tilstedeværelse af PCRinhibitorer i genomisk DNA Vurdér DNA-kvaliteten ved hjælp af gelelektroforese. Intakt DNA skal være ca. 3 kb med lidt eller ingen tegn på smearing på gelen. Reekstrahér DNA og gentag PCR, hvor det er muligt. Kontrollér, at koncentrationen af DNA er mellem ng/µl. Reekstrahér DNA og gentag PCR, hvor det er muligt. Undgå brug af fuldblodsprøver, der indeholder heparin. Reekstrahér DNA og gentag PCR, hvor det er muligt. DNA-polymerase ikke tilsat til Gentag PCR. Sørg for, at masterblandingen eller masterblandingens bestanddele utilstrækkelig opblanding af tilsættes og blandes masterblandingen før tilsætning tilstrækkeligt ved hjælp af til prøver. vortexblander. Problemer med termisk cyklus Kontrollér parametrene for kørslen af den termiske cyklus. Kontrollér kørselshistorien for at sikre, at kørslen ikke blev afsluttet før tid. Intet ethidiumbromid tilsat til gelen. DNA-prøver er elueret eller fortyndet i vand, der kan have et let surt ph. Sørg for, at det termiske cyklusapparat fungerer ifølge producentens specifikationer og vedligeholdes regelmæssigt. Nedsænk gelen i et farvebad, der indeholder 1X TBE med 0,5 mg/ml ethidiumbromid. Affarv i 1X TBE, før der tages gelbillede. Sørg for, at ethidiumbromid tilsættes til gelen, før den støbes. Brug sterilt vand med neutralt ph, hvor det er muligt. Dårlig DNA-kvalitet Amplifikation af prøver af meget dårlig kvalitet kan resultere i svag amplifikation af exon 3-5-amplikonen. Typebestemmelse kan stadig opnås ved anvendelse af exon 1 og 2-sekvensdata. Alternativt Side 20 af 24
21 Problem Mulig(e) årsag(er) Løsning skal DNA om muligt reekstraheres, og PCR gentages. Ukorrekte båndstørrelser Anvendelse af ukorrekt kit Kontrollér, at det passende kit anvendes. Svag signalintensitet på elektroferogrammer Signalintensiteten er for høj (tilstedeværelse af høje fluorescerende toppe artefakter) Baseline-støj (høj baggrund) Anvendelse af ukorrekt termisk cyklus-program. Kontrollér parametrene for den termiske cyklus. PCR-kontaminering Kontrollér den negative kontrol for tegn på kontaminering. Dekontaminér arbejdsområdet og gentag PCR. Gentag PCR for at identificere kontamineringskilden. Overvej at bruge et nyt kit. Hvis det genomiske DNA i en prøve ser ud til at være kontamineret, gentag da ekstraktionen eller opnå en alternativ kilde af DNA. Svagt PCR-produkt Kontrollér gelbilledet. Sekventering af svage PCRbånd anbefales IKKE, da sekvenskvaliteten kan være utilstrækkelig til SBT. Overvej at bruge en lavere fortyndingsfaktor (f.eks. 1:2, Utilstrækkelig mængde af reaktionsprodukt påsat sekvenatoren Problemer under oprensning af sekvenatorprodukter For meget PCR-produkt For stor mængde af reaktionsprodukter påsat sekvenatoren. Kontamineret PCR-produkt Amplifikation af nært beslægtede HLA-gener 1:3) efter PCR-oprensning. Kontrollér sekvenatorparametre. Det kan være nødvendigt at øge injektionstid og spænding. Vær yderst omhyggelig, når supernatanten fjernes, da dette kan flytte pelleten. Kontrollér gelbilledet. Overvej at bruge en højere fortyndingsfaktor efter PCRoprensning. Kontrollér mængden af DNApolymerase, der anvendes i PCR en. Kontrollér instrumentparametre. Overvej at reducere injektionstiden og spændingen. Der henvises til korrigerende handlinger, der er anført ovenfor. Kontrollér parametre for termisk cyklus. Side 21 af 24
22 Problem Mulig(e) årsag(er) Løsning Tilstedeværelse af farveklatter Dårlig PCR-oprensing Sørg for, at ExoSAPbehandling udføres ifølge kittets brugsanvisning. Sørg for, at PCR-blandingen blandes grundigt med ExoSAP. Overvej at bruge ExoSAP ifølge producentens procedure (ved forøgelse af mængden af enzym), eller overvej en alternativ oprensningsteknik. Kontaminerede Sørg for, at alle forholdsregler sekventeringsreaktioner tages for at forhindre krydskontaminering. Skift pipettespidser, hvor det er muligt. Tilsæt væsker i toppen af reaktionsbrøndene. Undgå aerosoler. Kontamineret sekventeringsprimer Kontamineret farveterminatorblanding eller sekventeringsbuffer Dårlig oprensning af sekventeringsprodukter. Dårlig oprensning af sekventeringsprodukter Kontrollér sekvenskvaliteten for de andre sekventeringsprimere og andre prøver ved brug af den samme primer. Overvej at bruge en frisk portion sekventeringsprimer. Gentag sekventering med en frisk portion reagenser. Gentag sekventering og sørg for, at oprensningen udføres ifølge producentens anvisninger. Oprens produkterne ifølge kitanvisningerne. Sørg for, at produkterne vaskes tilstrækkeligt med 80 % ethanol. Relaterede produkter CE-mærkede IVD er: Produktkode: CGX0036+ Produktkode: CGX00470 Produktkode: CGX00471 Side 22 af 24
23 For fuld produktliste, henvises til SBT Resolver HARPS Brugsanvisning Udelukkende til forskningsbrug: AN-PD11.0-0(20) AN-PD11.0-0(50) AN-PD12.0-0(20) AN-PD12.0-0(50) AN-PD13.0-0(20) AN-PD13.0-0(50) LC-PD2.9(20) LC-PD2.9(50) SBT Resolver HLA-DRB3 kit (20 og 50 tests) SBT Resolver HLA-DRB4 kit (20 og 50 tests) SBT Resolver HLA-DRB5 kit (20 og 50 tests) SBT Resolver HLA-B57 kit (20 og 50 tests) Bemærk: produkterne, der er anført ovenfor, er godkendt som IVD er i Australien Laboratoriereagenser til generelle formål MgCl2 1.0(50) MgCl2-1.0(3000)) SEQ BUF 2.0(400) SEQ BUF 2.0(5000) EDTA 3.0(200) EDTA 3.0(5000) 2mM MgCl2 5x Seq Rxn Buffer 125mM EDTA, ph8.0 Kontakt venligst din lokale distributør for yderligere oplysninger Selvcertificerede kits: HH-PD3.2-2(20) HH-PD3.2-2(50) PQ-PD6.2-2(20) PQ-PD6.2-2(50) AN-PD6.2-3(20) AN-PD6.2-3(50) HH-PD10.1(20) HH-PD10.1(50) KD-PD10.2-1(20) KD-PD10.2-1(50) Support og kontaktoplysninger Conexio Genomics Pty Ltd PO Box 1294 Fremantle 6959 Western Australia Australia Tlf.: Mail: support@conexio-genomics.com Skype: conexiocgx Hjemmeside: SBT Resolver -HLA-C-kit (20 og 50 tests) SBT Resolver -HLA-DQB1-kit (20 og 50 tests) SBT Resolver -HLA-DPB1-kit (20 og 50 tests) Eller din lokale distributør Side 23 af 24
24 For bestillingsoplysninger henvises til Olerup-hjemmesiden ( Conexio og HARPS er varemærker tilhørende Conexio 4 Pty Ltd. HARPS er et registreret varemærke i nogle områder. Side 24 af 24
Brugsanvisning. PCR-amplifikation og sekventering af HLA-klasse I- og II-loci. Versionsnr.: 13.0 Udfærdigelsesdato: Juli 2013
Brugsanvisning PCR-amplifikation og sekventering af HLA-klasse I- og II-loci Versionsnr.: 13.0 Udfærdigelsesdato: Juli 2013 EC REP Conexio Genomics Pty Ltd Qarad bvba 8/31 Pakenham St Cipalstraat 3 Fremantle
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Navn: Forsøgsvejledning Side 1 af 8 Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Navn: Forsøgsvejledning Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA sekvens,
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Navn: Forsøgsvejledning Side 1 af 8 Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA-sekvens,
Læs mereProtokol for genetisk bestemmelse af ABO blodtyper
Page1 Udarbejdet i samarbejde mellem: Kåre Lehmann, Annabeth Høgh Petersen, Anne Rusborg Nygaard og Jørn M. Clausen Page2 VIGTIGT: SKIFT PIPETTE SPIDSER/TIPS EFTER HVER GANG!! Så undgår du at forurene
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Forsøgsvejledning Navn: Side 1 af 7 Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Navn: Forsøgsvejledning Side 1 af 8 Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA-sekvens,
Læs mereGAPDH PCR modul Manual
GAPDH PCR modul Manual Katalog nr. 166-5010EDU explorer.bio-rad.com Kopiering kun tilladt til undervisningsbrug Bemærk: Kittet indeholder temperaturfølsomme dele. Åbn derfor straks kassen og læg de pågældende
Læs mereLeucosep rør LTK.615 INDLÆGSSEDDEL. Til diagnostisk anvendelse in vitro PI-LT.615-DK-V3
Leucosep rør LTK.615 INDLÆGSSEDDEL Til diagnostisk anvendelse in vitro PI-LT.615-DK-V3 Vejledende information Tilsigtet anvendelse Leucosep rørene er beregnet til anvendelse i forbindelse med indsamling
Læs mereLaboratorieprotokol for manuel isolering af DNA fra 0,5 ml prøve
Laboratorieprotokol for manuel isolering af DNA fra 0,5 ml prøve Til isolering af genomisk DNA fra indsamlingssætserierne Oragene - og ORAcollect. Du kan finde flere sprog og protokoller på vores webside
Læs mereC V C. Vejledning i brug af Biofortuna SSPGo TM HLA No Template Control Kit BF-40-02. Revision 2. Juli 2014
DOT131v1 Instructions for Use Biofortuna SSPGo TM HLA No Template Control Kit BF-40-02 Side 1 af 7 Vejledning i brug af Biofortuna SSPGo TM HLA No Template Control Kit BF-40-02 Revision 2 Juli 2014 DOT131v1
Læs mereScanGel Monoclonal ABO/RH1/K 86495 48 kort 86485 288 kort
ScanGel Monoclonal ABO/RH1/K 86495 48 kort 86485 288 kort GELER INDEHOLDENDE MONOKLONALE REAGENSER AF MURIN ELLER HUMAN OPRINDELSE ABO1, ABO2, RH1, KEL1 Ag BESTEMMELSE IVD Alle de af Bio-Rad producerede
Læs mereScanGel ReverScan A1, B 86790 2 x 5 ml ReverScan A1, A2, B, O 86795 4 x 5 ml
ScanGel ReverScan A1, B 86790 2 x 5 ml ReverScan A1, A2, B, O 86795 4 x 5 ml HUMANE TESTERYTHROCYTER TIL ABO-SERUMKONTROL IVD Alle de af Bio-Rad producerede og markedsførte produkter gennemgår fra modtagelse
Læs mereBiotechnology Explorer
Biotechnology Explorer Oprensning af genomisk DNA fra plantemateriale Manual Katalog nr. 166-5005EDU explorer.bio-rad.com Oversat og bearbejdet af Birgit Sandermann Justesen, Nærum Gymnasium, februar 2009
Læs mereGerningsstedets gåde Den usynlige sandhed - DNA PCR Basics Kit. Katalog nr. 166-2600EDU
1 Gerningsstedets gåde Den usynlige sandhed - DNA PCR Basics Kit Katalog nr. 166-2600EDU Bemærk: Kittet indeholder temperaturfølsomme dele. Åbn derfor straks pakken og læg de dele, der er mærket med -20
Læs mereProtokol for genetisk bestemmelse af ABO blodtyper
Page1 Udarbejdet i samarbejde mellem: Kåre Lehmann, Annabeth Høgh Petersen, Anne Rusborg Nygaard og Jørn M. Clausen Page2 VIGTIGT: SKIFT PIPETTE SPIDSER/TIPS EFTER HVER GANG!! Så undgår du at forurene
Læs merePCR (Polymerase Chain Reaction): Opkopiering af DNA
PCR (Polymerase Chain Reaction): Opkopiering af DNA PCR til at opkopiere bestemte DNA-sekvenser i en prøve er nu en af genteknologiens absolut vigtigste værktøjer. Peter Rugbjerg, Biotech Academy PCR (Polymerase
Læs mereKRIMINALDETEKTIVEN GERNINGSSTEDETS GÅDE PCR
KRIMINALDETEKTIVEN GERNINGSSTEDETS GÅDE Elevvejledning PCR PCR trin for trin PCR involverer en række gentagne cykler, der hver består af følgende tre trin: Denaturering, primer påsætning og forlængelse
Læs mereTissue_LC_200_V7_DSP og Tissue_HC_200_V7_DSP
August 2015 QIAsymphony SPprotokolark Tissue_LC_200_V7_DSP og Tissue_HC_200_V7_DSP Dette dokument er Tissue_LC_200_V7_DSP og Tissue_HC_200_V7_DSP QIAsymphony SPprotokolark, R2, til kitversion 1. QIAsymphony
Læs mereVejledning i brug af Biofortuna SSPGo TM HLA Typing Kits CE revision 5, Januar 2014
DOT109v8: Vejledning i brug af Biofortuna SSPGo TM HLA Typing Kits. CE Revision 5 Side 1 af 11 1. Anvendelse Vejledning i brug af Biofortuna SSPGo TM HLA Typing Kits CE revision 5, Januar 2014 Biofortuna
Læs mereHOLOTYPE HLA 24/11 CONFIGURATION A1 & CE/A2 & CE/A3 & CE/A4 & CE BRUGSANVISNING VERSION
HOLOTYPE HLA 24/11 CONFIGURATION A1 & CE/A2 & CE/A3 & CE/A4 & CE BRUGSANVISNING VERSION 1 16.04.2018 Til in vitro-diagnostisk brug 0086 Præparerer DNA til sekventeringsanalyse på Illumina MiSeq Indhold
Læs mereDNA origami øvelse DNA origami øvelse
DNA origami øvelse Introduktion I denne øvelse bruger vi DNA origami teknikken til at samle en tavle af DNA med dimensioner på 70 nm x 100 nm. Tavlen dannes af et langt enkeltstrenget DNA molekyle, der
Læs mereHOLOTYPE HLA 96/7 CONFIGURATION A & CE OG CONFIGURATION B & CE (REF: H32.1 OG REF: H34.1) BRUGSANVISNING VERSION
HOLOTYPE HLA 96/7 CONFIGURATION A & CE OG CONFIGURATION B & CE (REF: H32.1 OG REF: H34.1) BRUGSANVISNING VERSION 10 16.04.2018 Til in vitro-diagnostisk brug 0086 Præparerer DNA til sekventeringsanalyse
Læs mereVelkommen. Test dit eget DNA med PCR. Undervisningsdag på DTU Systembiologi. Undervisere:
Velkommen Test dit eget DNA med PCR Undervisningsdag på DTU Systembiologi Undervisere: Hvem er I? 2 DTU Systembiologi, Danmarks Tekniske Universitet Hvilke baser indgår i DNA? A. Adenin, Guanin, Cytosin,
Læs mereQIAsymphony RGQ-protokolark
QIAsymphony RGQ-protokolark Indstillinger til kørsel af artus CT/NG QS- RGQ-kittet (Rotor-Gene Q-software.) Kontroller, om der er nye reviderede udgaver af elektronisk mærkning på www.qiagen.com/products/artusctngqsrgqkitce.aspx,
Læs mereTrin 1: Oprensning af genomisk DNA (DeoxyriboNucleicAcid)
Trin 1: Oprensning af genomisk DNA (DeoxyriboNucleicAcid) (Denne del tager ca. 3 timer, max 14 prøver) ELEVVEJLEDNING forsøgskasse nr. 1 AAU Oprensning af DNA-prøven foregår gennem fem trin, se figur 1:
Læs mereBrugsanvisning IVD Matrix HCCA-portioned
Brugsanvisning IVD Matrix HCCA-portioned Rendyrket matrixsubstans til matrix-assisteret-laser-desorption-ionisering time-of-flight-massespektrometri (MALDI-TOF-MS). CARE- produkterne er designet til at
Læs mereTil brug til klargøring og isolation af oprensede lymfocytter direkte fra fuldblod INDLÆGSSEDDEL. Til in vitro diagnostisk anvendelse PI-TT.
Til brug til klargøring og isolation af oprensede lymfocytter direkte fra fuldblod INDLÆGSSEDDEL Til in vitro diagnostisk anvendelse PI-TT.610-DK-V6 Instruktionsinformation Beregnet anvendelse T-Cell Xtend-reagenset
Læs mereBrugsanvisning for SURVEYOR Scan NRAS Kit Exons 2, 3 & 4 CE IVD
1 Producent Brugsanvisning for SURVEYOR Scan NRAS Kit Exons 2, 3 & 4 CE IVD for DHPLC systemer Læs venligst denne brugsanvisning grundigt igennem, før dette produkt anvendes. Gem denne brugsanvisning til
Læs mereMaxwell 16 Blood DNA Purification System
Teknisk vejledning Maxwell 16 Blood DNA Purification System Forsigtig - håndter kassettene med omhu, kanterne på forsejlingen kan være skarpe. 2800 Woods Hollow Rd. Madison, WI USA In vitro diagnostisk
Læs mereBrugsanvisning for SURVEYOR Scan KRAS Kit Exon 2 CE IVD
1 Producent Brugsanvisning for SURVEYOR Scan KRAS Kit Exon 2 CE IVD for DHPLC systemer Læs venligst denne brugsanvisning grundigt igennem, før dette produkt anvendes. Gem denne brugsanvisning til senere
Læs mereAdnaTest ProstateCancerSelect
AdnaTest ProstateCancerSelect Berigelse af tumorceller fra blod fra prostatacancerpatienter til genekspressionsanalyse Til in vitro-diagnostisk brug Vejledning T-1-520 Indhold Bestillingsinformation...
Læs mereDNA origami øvelse. Introduktion. DNA origami øvelse 3 timer 2018
DNA origami øvelse Introduktion I denne øvelse bruger vi DNA origami teknikken til at samle en tavle af DNA med dimensioner på 70 nm x 100 nm. Tavlen dannes af et langt enkeltstrenget DNA molekyle, der
Læs mereDNA origami øvelse 2013. DNA origami øvelse
DNA origami øvelse Introduktion I denne øvelse bruger vi DNA origami teknikken til at samle en tavle af DNA med dimensioner på 70 nm x 100 nm. Tavlen dannes af et langt enkeltstrenget DNA molekyle, der
Læs mereHLA SSP Kits. Klar til brug Sequence Specific Primers (SSP) reagens kit for DNA baseret HLA typning [IVD] For In Vitro Diagnostisk Brug [DK]
[DK] HLA SSP Kits Klar til brug Sequence Specific Primers (SSP) reagens kit for DNA baseret HLA typning [IVD] For In Vitro Diagnostisk Brug HLA-A SSP [REF] 826 201 0197 HLA-B SSP [REF] 826 206 0197 HLA-C
Læs mereValidering af molekylærbiologiske analyser. Marianne Antonius Jakobsen Afsnitsleder for molekylærbiologisk lab. Klinisk Immunologisk afdeling, OUH.
Validering af molekylærbiologiske analyser Marianne Antonius Jakobsen Afsnitsleder for molekylærbiologisk lab. Klinisk Immunologisk afdeling, OUH. Hvordan laver man en god validering? Standarden: Mere
Læs mereI N D L Æ G S S E D D E L
Immucor Transplant Diagnostics, Inc. 550 West Avenue, Stamford, Connecticut 06902; USA Tlf.: +1-203-328-9500 eller +1-888-329-0255 (i USA og Canada), Fax: +1-203-328-9599 WWW.IMMUCOR.COM Produktdokumentation
Læs mereTidlig Graviditetstest Stav
DK Tidlig Graviditetstest Stav Brugsanvisning Version 1.0 DK 17012017 Cat.No. W1-M14 10mIU Babyplan Tidlig Graviditetstest er en hurtig graviditetstest som du let kan udføre selv. Den tester for tilstedeværelsen
Læs mereAppendix 1: Udregning af mængde cellesuspention til udsåning. Faktor mellem total antal celler og antal celler der ønskes udsås:
Appendix Appendix 1: Udregning af mængde cellesuspention til udsåning Fortyndingsfaktor: Efter trypsinering og centrifugering af celler fra cellestokken, opblandes cellerne i 1 ml medie. For at lave en
Læs mereMælkesyrebakterier og holdbarhed
Mælkesyrebakterier og holdbarhed Navn: Forsøgsvejledning Mælkesyrebakterier og holdbarhed Formål med forsøget Formålet med denne øvelse er at undersøge mælkesyrebakteriers og probiotikas evne til at øge
Læs mereQIAsymphony SP-protokolark
Februar 2017 QIAsymphony SP-protokolark circdna_2000_dsp_v1 og circdna_4000_dsp_v1 Dette dokument er QIAsymphony circdna_2000_dsp_v1 og circdna_4000_dsp_v1 protokolark, version 1, R1 Sample to Insight
Læs mereRegnskovens hemmeligheder
Center for Undervisningsmidler, afdeling København Regnskovens hemmeligheder Øvelsesvejledning Formål Et gen for et kræfthelbredende protein er blevet fundet i nogle mystiske blade i regnskoven. Forskere
Læs merecobas EGFR Mutation Test
cobas EGFR Mutation Test TIL IN VITRO-DIAGNOSTIK. cobas DNA Sample Preparation Kit DNA SP 24 Tests P/N: 05985536190 cobas EGFR Mutation Test EGFR 24 Tests P/N: 06471463190 BEMÆRK: Købet af dette produkt
Læs mereVelkommen. Test dit eget DNA med PCR. Undervisningsdag på DTU Systembiologi. Undervisere: Sebastian, Louise og Ana
Velkommen Test dit eget DNA med PCR Undervisningsdag på DTU Systembiologi Undervisere: Sebastian, Louise og Ana Hvem er I? 2 DTU Systembiologi, Danmarks Tekniske Universitet Dagens program 9:00 10:00 Introduktion
Læs mereEn forsker har lavet et cdna insert vha PCR og har anvendt det følgende primer sæt, som producerer hele den åbne læseramme af cdna et:
F2011-Opgave 1. En forsker har lavet et cdna insert vha PCR og har anvendt det følgende primer sæt, som producerer hele den åbne læseramme af cdna et: Forward primer: 5 CC ATG GGT ATG AAG CTT TGC AGC CTT
Læs mereDNA origami øvelse DNA origami øvelse
DNA origami øvelse Introduktion I denne øvelse bruger vi DNA origami teknikken til at samle en tavle af DNA med dimensioner på 70 nm x 100 nm. Tavlen dannes af et langt enkeltstrenget DNA molekyle, der
Læs mereI N D L Æ G S S E D D E L
Immucor Transplant Diagnostics, Inc. 5 West Avenue, Stamford, Connecticut 06902; USA Tlf.: +1-203-328-90 eller +1-888-329-0255 (i USA og Canada), Fax: +1-203-328-9599 WWW.IMMUCOR.COM Produktdokumentation
Læs mereBiotechnology Explorer. Kromosom 16 PV92 PCR Kit
1 Biotechnology Explorer Kromosom 16 PV92 PCR Kit Katalog nr.166-2500edu explorer.bio-rad.com Bemærk: Kittet indeholder temperaturfølsomme dele. Åbn derfor straks kassen og læg de pågældende dele til opbevaring
Læs mereH5i desinfektionsguide
H5i desinfektionsguide Dansk Denne desinfektionsguide er beregnet for H5i-fugteren til flerpatientsbrug i søvnlaboratorium, klinik, hospital eller hos en behandler. Hvis du bruger H5i-fugteren som enkeltbruger
Læs mereIVD Bacterial Test Standard
Brugsanvisning IVD Bacterial Test Standard Standard for massekalibrering, som viser en typisk Escherichia coli DH5- alfapeptid- og -proteinprofil plus yderligere proteiner. Til anvendelse ved matrix-assisteret-laser-desorption-ionisering
Læs mereBleach Enhancer for Cleaning
Bleach Enhancer for Cleaning Generel information........................................ 2 Tilsigtet anvendelse........................................ 2 Resumé.................................................
Læs mereBiotechnology Explorer GMO analyse Kit
1 Biotechnology Explorer GMO analyse Kit Katalog nr.166-2500edu www.biorad.com Oversat og bearbejdet af Birgit Sandermann Justesen december 2005 - revideret februar 2010 Bemærk: Kittet indeholder temperaturfølsomme
Læs mere7900003 24 analyser Circulating Tumor Cell Control Kit
7900003 24 analyser Circulating Tumor Cell Control Kit 1 TILSIGTET ANVENDELSE Til in vitro-diagnostisk brug CELLSEARCH -kontrolkit til cirkulerende tumorceller er beregnet til brug som analysekontrol for
Læs mereAnalyse af proteiner Øvelsesvejledning
Center for Undervisningsmidler, afdeling København Analyse af proteiner Øvelsesvejledning Formål At separere og analysere proteiner i almindelige fødevarer ved brug af gelelektroforese. Teori Alle dele
Læs mere0 Indhold. Titel: Klorofyl a koncentration. Dokumenttype: Teknisk anvisning. Version: 1
Titel: Klorofyl a koncentration Dokumenttype: Teknisk anvisning Forfattere: Stiig Markager og Henrik Fossing TA henvisninger TA. nr.: M07 Version: 1 Oprettet: 20.12.2013 Gyldig fra: 20.12.2013 Sider: 10
Læs mereMaxwell CSC Blood DNA Kit
TEKNISK VEJLEDNING Maxwell CSC Blood DNA Kit Brugsanvisning for produktet AS1321 Forsigtig: Håndter cartridges forsigtigt; kanterne af forseglingen kan være skarpe. BRUGSANVISNING FOR PRODUKTET AS1321
Læs mereMaxwell CSC Blood RNA Kit
TEKNISK VEJLEDNING Maxwell CSC Blood RNA Kit Brugsanvisning for produktet AS1410 Forsigtig: Håndter cartridges forsigtigt; kanterne af forseglingen kan være skarpe. BRUGSANVISNING FOR PRODUKTET AS1410
Læs mereBrugsanvisning IVD Matrix HCCA-portioned
Brugsanvisning IVD Matrix HCCA-portioned Rendyrket matrixsubstans til matrix-assisteret-laser-desorption-ionisering time-of-flight-massespektrometri (MALDI-TOF-MS). CARE- produkterne er designet til at
Læs mereartus EBV QS-RGQ-kit Ydelsesegenskaber Maj 2012 Sample & Assay Technologies Analysefølsomhed plasma artus EBV QS-RGQ-kit, Version 1,
artus EBV QS-RGQ-kit Ydelsesegenskaber artus EBV QS-RGQ-kit, Version 1, 4501363 Kontroller, om der er nye revisioner med elektronisk mærkning på www.qiagen.com/products/artusebvpcrkitce.aspx inden udførelse
Læs mereLTK.615 INDLÆGSSEDDEL
LTK.615 INDLÆGSSEDDEL Til diagnostisk brug in vitro PI-LT.615-DK-V4 Brugsvejledning Tilsigtet anvendelse Leucosep-glas er beregnet til indsamling og separation af perifere, enkernede blodceller (PBMC er)
Læs mereQIAsymphony SP Protokolside
QIAsymphony SP Protokolside Cellfree500_V3_DSP protokol Generel information Til in vitro-diagnostisk brug. Kit Prøvemateriale Protokolnavn QIAsymphony DSP Virus/Pathogen Midi-kit Plasma, serum og CSF Cellfree500_V3_DSP
Læs merecobas KRAS Mutation Test KRAS
cobas KRAS Mutation Test TIL IN VITRO-DIAGNOSTIK. cobas DNA Sample Preparation Kit DNA SP 24 Tests P/N: 05985536190 cobas KRAS Mutation Test KRAS 24 Tests P/N: 05852170190 BEMÆRK: Købet af dette produkt
Læs mereOPTIMERING AF PCR MHP. DETEKTION AF SNP ER I CERS6.
OPTIMERING AF PCR MHP. DETEKTION AF SNP ER I CERS6. Bachelorprojekt Udarbejdet af Sandra Reinholt Nielsen 14.08.1981 Projektperiode: 6. April 9.juni 2009 Vejledere: Søren Jensen, Lektor, Professionshøjskolen
Læs mereMælkesyrebakterier og holdbarhed
Mælkesyrebakterier og holdbarhed Formål Formålet med denne øvelse er at undersøge mælkesyrebakteriers og probiotikas evne til at øge holdbarheden af kød ved at: 1. Undersøge forskellen på bakterieantal
Læs mereTidlig Graviditetstest Strimmel
DK Tidlig Graviditetstest Strimmel Brugsanvisning Beregnet til hjemmebrug. Version 1.0 DK 17012017 Cat.No. W1-S 10mIU Babyplan Tidlig Graviditetstest er en hurtig graviditetstest som du let kan udføre
Læs mereSom substrat i forsøgene anvender vi para nitrophenylfosfat, der vha. enzymet omdannes til paranitrofenol
Enzymkinetik Introduktion I disse forsøg skal I arbejde med enzymet alkalisk fosfatase. Fosfataser er meget almindelige i levende organismer og er enzymer med relativt bred substrat specificitet. De katalyserer
Læs mereFORSØG ØL verdens første svar på anvendt
FORSØG ØL verdens første svar på anvendt bioteknologi Biotech Academy BioCentrum-DTU Søltofts Plads DTU - Bygning 221 2800 Kgs. Lyngby www.biotechacademy.dk bioteket@biocentrum.dtu.dk INDHOLDSFORTEGNELSE
Læs mereOSTEOSET XR-knOglEfyldSTOf
DA OSTEOSET XR-knOglEfyldSTOf 150841-0 følgende sprog er inkluderet i denne pakke: Dansk (da) M Yderligere sprog findes på vores hjemmeside www.wmt.com Klik herefter på valget Prescribing Information (forskriftsoplysninger).
Læs mereVi går derfor ud fra, at I ved, at DNA molekyler er meget lange molekyler
DNA-profil analyse Indledning DNA-profil analyser eller i daglig tale DNA-fingeraftryk er en metode, der bruges, når man skal finde ud af, hvem der er far et barn, hvis der altså er flere muligheder. Det
Læs mereAndrostenon-indol-skatol-protokol.
Androstenon-indol-skatol-protokol. Indholdsfortegnelse: 1. Formål side 2 2. Teori side 2 2. Prøvebehandling side 2 3. Materialer side 2 3.1 Apparatur side 2 3.2 Kemikalier side 3 3.3 Reagenser side 3 4.
Læs mereLigerings- og transformationsmodul inklusiv plasmidoprensning og restriktionsanalyse
Biotechnology Explorer Ligerings- og transformationsmodul inklusiv plasmidoprensning og restriktionsanalyse Katalog nr. 166-5015EDU explorer.bio-rad.com Kopiering kun tilladt til undervisningsbrug Bemærk:
Læs mereAptima prøvetagningskit til multitestpodning
Tilsigtet brug Aptima prøvetagningskit til multitestpodning er til brug med Aptima assays. Aptima prøvetagningskit til multitestpodning er beregnet til vaginale podningsprøver taget af klinikeren eller
Læs merePræanalytiske fejlkilder ved brug af POC udstyr
Præanalytiske fejlkilder ved brug af POC udstyr LKO temadag 2012 POC udstyr hvor der anvendes Kuvette/Kasette/Strips/Kapillærrør Fyldning af kuvetter/strips/kapillærrør Skal fyldes helt op, der må ikke
Læs mereI N D L Æ G S S E D D E L
Immucor GTI Diagnostics, Inc. 20925 Crossroads Circle, Waukesha, WI 53186; USA Tlf.: +1 (855) 466-8267 WWW.IMMUCOR.COM Produktdokumentation og oversættelser kan hentes på: www.immucor.com LIFECODES HLA
Læs mereBiotechnology Explorer. Protein Fingerprinting
Biotechnology Explorer Protein Fingerprinting Instruktionsmanual Katalognummer 166-0100EDU explorer.bio-rad.com Delene i dette kit er sendt i seperate æsker. Opbevar proteinstandarderne i fryseren, ved
Læs mereMaxwell CSC DNA FFPE Kit
TEKNISK VEJLEDNING Maxwell CSC DNA FFPE Kit Brugsanvisning for produktet AS1350 Forsigtig: Håndter cartridges forsigtigt; kanterne af forseglingen kan være skarpe. BRUGSANVISNING FOR PRODUKTET AS1350 2800
Læs mereRestriktionsenzymer findes Genkendelsessekvens
Restriktionsenzymer Skanning Restriktionsenzymer findes i bakterier (forsvarsmekanisme) IKKE i eukaryote celler 3-5 - 5-3 - Restriktionsenzyme Genkendelsessekvens Palindromisk Otto, Anna, radar Madam I
Læs mereanalyser Circulating Tumor Cell Control Kit
7900003 24 analyser Circulating Tumor Cell Control Kit 1 TILSIGTET ANVENDELSE Til in vitro-diagnostisk brug CELLSEARCH -kontrolkit til cirkulerende tumorceller er beregnet til brug som analysekontrol for
Læs mereProduktinformation. Brugervejledning. Blodprøvetagning / aflæsning Opbevaring Sikkerhedshensyn Rengøring af stativer. Vedr.: VT+ESRV og RA+ESRV
Blodprøvetagning / aflæsning Opbevaring Sikkerhedshensyn Rengøring af stativer 1 Blodprøvetagning: Følg trin for trin vejledning på side 3 Ved brug af sommerfugle tages evt. andre rør eller dummy først
Læs mereVEJLEDNINGER TIL HURTIG REFERENCE Kun til brug med Sofia Analyzer.
Analyzer og FIA VEJLEDNINGER TIL HURTIG REFERENCE Kun til brug med Sofia Analyzer. Læs indlægssedlen og brugermanualen grundigt før brug af vejledningerne til hurtig reference. Dette er ikke en komplet
Læs mereÆgløsningstest Strimmel
DK Ægløsningstest Strimmel Brugsanvisning Version 1.0 SE 17012017 Cat.No. W2-S Babyplan Ægløsningstest er en kvalitativ test som bruges til at forudsige hvornår der er stigning i LH, og dermed, hvornår
Læs mereProbeTec ET Chlamydia trachomatis and Neisseria gonorrhoeae Amplified DNA Assays
ProbeTec ET Chlamydia trachomatis and Neisseria gonorrhoeae Amplified DNA Assays 3300754JAA 2008/09 Dansk USA patent nr. 5,270,184; 5,547,861; 5,648,211; 5,712,124; 5,744,311; 5,846,726; 5,851,767; 5,866,336;
Læs mereAptima Multitest Swab Specimen Collection Kit
Multitest Swab Specimen Collection Kit Aptima Tilsigtet anvendelse Aptima Multitest Swab Specimen Collection Kit (Aptima Multitest prøvetagningskit til podning) er til brug med Aptima assays. Aptima Multitest
Læs mereFaktor V Leiden mutation
Faktor V Leiden mutation Formål: finde ud af om individ har mutation i faktor V Leiden gen (missense: arginin glutamin) Materiale: oprens DNA fra leukocytter Metode: PCR med specifikke primere, oprens,
Læs mereHÅNDTERING AF MICROPORT SPECIELT FREMSTILLEDE PROPHECY ENGANGSINSTRUMENTER 150807-0. Følgende sprog er inkluderet i denne pakke:
DA HÅNDTERING AF MICROPORT SPECIELT FREMSTILLEDE PROPHECY ENGANGSINSTRUMENTER 150807-0 Dansk (da) Følgende sprog er inkluderet i denne pakke: Yderligere sprog findes på vores hjemmeside www.ortho.microport.com.
Læs mere6996T. Tunneleringsværktøj. Teknisk håndbog
6996T Tunneleringsværktøj Teknisk håndbog Følgende liste indeholder varemærker eller registrerede varemærker tilhørende Medtronic i USA og muligvis andre lande. Alle andre varemærker tilhører de respektive
Læs mereØvelse med tarmkræftceller i kultur.
Øvelse med tarmkræftceller i kultur. Baggrund Hver 3. dansker bliver ramt af kræft, inden de er blevet 75 år. Tyktarmskræft er den 3. hyppigste kræftform hos både mænd og kvinder, hvor henholdsvis 7.3
Læs merePROCEDURENS PRINCIPPER BD
ProbeTec ET Chlamydia trachomatis Amplified DNA Assay 3300755JAA 2008/09 Dansk Patent Numbers: 5,270,184; 5,547,861; 5,648,211; 5,712,124; 5,744,311; 5,846,726; 5,851,767; 5,866,336; 5,919,630; 5,928,869;
Læs mereDette er en kladde til et genoptryk af Eksperimentel Genteknologi fra 1991. Ideer, rettelser og forslag modtages gerne. Kh Claudia.
Transformation af E.coli K 12 Version 3. marts 2009 (C) Claudia Girnth-Diamba og Bjørn Fahnøe Dette er en kladde til et genoptryk af Eksperimentel Genteknologi fra 1991. Ideer, rettelser og forslag modtages
Læs mereI N D L Æ G S S E D D E L
Immucor GTI Diagnostics, Inc. 20925 Crossroads Circle, Waukesha, WI 53186; USA Tlf.: +1 (855) 466-8267 WWW.IMMUCOR.COM Produktdokumentation og oversættelser kan hentes på: www.immucor.com LIFECODES HLA
Læs mereTeknisk anvisning for marin overvågning
NOVANA Teknisk anvisning for marin overvågning 2.3 Klorofyl a Britta Pedersen H Afdeling for Marin Økologi Miljøministeriet Danmarks Miljøundersøgelser 2.3-1 Indhold 2.3 Klorofyl-a 2.3-3 2.3.1 Formål 2.3-3
Læs mereProduktion af biodiesel fra rapsolie ved en enzymatisk reaktion
Produktion af biodiesel fra rapsolie ved en enzymatisk reaktion produceres fra rapsolie som består af 95% triglycerider (TG), samt diglycerider (DG), monoglycerider (MG) og frie fedtsyrer (FA). Under reaktionen
Læs mereQIAsymphony SP-protokolark
QIAsymphony SP-protokolark PC_AXpH_HC2_V1_DSP-protokol Tilsigtet anvendelse Til in vitro-diagnostisk brug. Denne protokol er udviklet til brug sammen med cervikalprøver, der opbevares i PreservCyt -opløsning,
Læs mereÆgløsningstest Stav. Brugsanvisning. Version 1.0 DK Cat.No. W2-MII
DK Ægløsningstest Stav Brugsanvisning Version 1.0 DK 17012017 Cat.No. W2-MII Babyplan Ægløsningstest er en kvalitativ test som bruges til at forudsige hvornår der er stigning i LH, og dermed, hvornår du
Læs mereVIGTIGE SIKKERHEDSFORANSTALTNINGER
ISMASKINE PRO 3000 Sikkerhed og generel beskrivelse VIGTIGE SIKKERHEDSFORANSTALTNINGER Ved brug af elektriske apparater, må der altid tages sikkerhedsforanstaltninger: 1. Læs denne vejledning omhyggeligt,
Læs mereMaxwell CSC RNA FFPE Kit
TEKNISK VEJLEDNING Maxwell CSC RNA FFPE Kit Brugsanvisning for produktet AS1360 Forsigtig: Håndter cartridges forsigtigt; kanterne af forseglingen kan være skarpe. BRUGSANVISNING FOR PRODUKTET AS1360 2800
Læs mereTissue_LC_200_V7_DSP og Tissue_HC_200_V7_DSP (brugervalideret til QIAsymphony DSP DNA Mini-kit)
August 2015 QIAsymphony SP-protokolark Tissue_LC_200_V7_DSP og Tissue_HC_200_V7_DSP (brugervalideret til QIAsymphony DSP DNA Mini-kit) Dette dokument er Tissue_LC_200_V7_DSP og Tissue_HC_200_V7_DSP (brugervalideret
Læs mereTrin 1: Oprensning af genomisk DNA (DeoxyriboNucleicAcid)
Trin 1: Oprensning af genomisk DNA (DeoxyriboNucleicAcid) LÆRERVEJLEDNING forsøgskasse nr. 1 AAU (rev.17.02.16) (Denne del tager ca. 3 timer, max 14 prøver) Oprensningen forudsætter elevernes fortrolighed
Læs mereVestsjællands Amtssygehus Klinisk Biokemisk Afdeling Centralsygehuset i Slagelse
Bilag D Vestsjællands Amtssygehus Klinisk Biokemisk Afdeling Centralsygehuset i Slagelse INTERN RAPPORT Afprøvning af Immunofixation af M-komponenter (Bestemmelse af immunoglobulin-klasse og -type) på
Læs mereSpænding Kapacitet (mm) (mm) (g) (V) (mah) PR10-D6A PR70 1,4 75 5,8 3,6 0,3 PR13-D6A PR48 1,4 265 7,9 5,4 0,83 PR312-D6A PR41 1,4 145 7,9 3,6 0,58
Produkt Zinc Air-batteri Modelnavn IEC Nominel Nominel Diameter Højde Vægt Spænding Kapacitet (mm) (mm) (g) (V) (mah) PR10-D6A PR70 1,4 75 5,8 3,6 0,3 PR13-D6A PR48 1,4 265 7,9 5,4 0,83 PR312-D6A PR41
Læs mere