Ordreinformation 20753610 122 (200 tests) System-ID 07 5361 0 03304671 190 Preciset Plus I CAL 1-6 (6 5 ml) 03304698 190 C.f.a.s. Qualitative Plus (6 5 ml) 04590856 190 C.f.a.s. Qualitative Plus Clinical (3 5 ml) 03312950 190 04500873 190 Control Set I PreciPos Set I (2 10 ml) PreciNeg Set I (2 10 ml) Control Set Clinical PreciPos Clinical (2 10 ml) PreciNeg Clinical (2 10 ml) Analyseinstrumenter, hvor cobas c pack kan anvendes COBAS INTEGRA 800 Dansk Systeminformation Test S, test ID 0 633 til semikvantitativ analyse Test MTQQL, test ID 0 133 til kvalitativ analyse Test MTQQC, test ID 0533 til kvalitativ analyse ved brug af C.f.a.s. Qualitative Plus Clinical Anvendelse Methaqualone () er en in vitro-diagnostisk test til semikvantitativ og kvalitativ påvisning af metakvalon og metabolitter heraf i human urin ved en cutoff-koncentration på 300 på COBAS INTEGRA systemer. Semikvantitative analyseresultater gør det muligt for laboratorierne at anvende analysen som en del af et kvalitetskontrolprogram. Semikvantitative analyser er beregnet til bestemmelse af en egnet fortynding af prøver til konfirmation ved hjælp af en konfirmatorisk metode som f.eks. gaskromatografi/massespektrometri (GC/MS). Metakvalon giver kun et foreløbigt analyseresultat. Der skal anvendes en mere specifik alternativ kemisk metode for at få et konfirmeret analyseresultat. GC/MS er den foretrukne konfirmatoriske metode. 1 Kliniske betragtninger og professionelle vurderinger skal anvendes ved alle analyseresultater for misbrugsstoffer, især når der er tale om foreløbigt positive resultater. Resumé Metakvalon er et quinazolinderivat, som blev syntetiseret i 1951. Stoffets sedative og hypnotiske effekt blev konstateret i 1956. 2 Det blev oprindeligt beskrevet som et ikke vanedannende non-barbiturat hypnotikum i 1965, men allerede kort efter blev der rapporteret om fysisk og psykisk afhængighed. Det blev solgt som afrodisiakum på gaden, hvor det snart blev populært, og i 1972 var luding out (300 til 450 mg metakvalon taget sammen med vin) almindeligt blandt studerende på college. Dette gav en følelse af uforgængelighed og eufori. 3 Ligesom andre sedative hypnotika reducerer metakvalon hæmninger og seksuel formåen. Stoffet blev fjernet fra det amerikanske marked i 1984 på grund af det omfattende misbrug, men der foregår stadig en ulovlig produktion. Symptomer på overdosis af metakvalon spænder fra mavetarmproblemer, døsighed, ataksi, kriblende fornemmelser, utydelig tale og muskulær hyperaktivitet til indre blødninger, kramper og koma. 4 Metakvalon indtages oralt og absorberes hurtigt i mavetarmkanalen. Det er meget let fedtopløseligt og fordeles i hele kroppen. 70 til 80 % af metakvalon bindes til vævsproteiner og har en lang halveringstid, som forlænges ved overdoser. 5 72 timer efter indtagelse er kun 40 til 50 % af en dosis udskilt. 6 Metabolisme sker primært ved monohydroxylering i leverens mikrosomale enzymsystem samt ved dannelsen af varmeustabil N oxid. 7 Der er 5 vigtige hydroxymetabolitter, hvoraf 4 hydroxy-metakvalon er den dominerende. Metabolitterne findes primært i urin som glukuronider, og < 1 % af det oprindelige stof udskilles uforandret. 7,8 Udskillelsesmønstret for metabolitter varierer kraftigt afhængig af urinmængde, individuelt stofskifte og tolerance over for misbrugsstoffet. 7,8,9 Analyseprincip Kinetisk interaktion af mikropartikler i en opløsning (KIMS) 10,11 målt ved ændringer i lystransmissionen. I en prøve uden misbrugsstoffer binder de frie antistoffer sig til misbrugsstof-mikropartikel-konjugater, hvilket fører til dannelse af partikelaggregater. I en prøve uden misbrugsstoffer fortsætter aggregatreaktionen, og absorbansen øges. I en urinprøve med det pågældende misbrugsstof konkurrerer misbrugsstoffet med det partikelbundne misbrugsstofderivat om de frie antistoffer. Antistoffer, som er bundet til det stof, der findes i prøven, er ikke længere til rådighed til dannelse af partikelaggregater, hvorfor den efterfølgende dannelse af partikelkompleks hæmmes. Ved en prøve indeholdende misbrugsstoffer reduceres stigningen i absorbans i forhold til koncentrationen af misbrugsstof i prøven. Indholdet af misbrugsstof i en prøve sammenholdes med den værdi, der er fundet for en kendt cutoff-koncentration af misbrugsstof. Reagenser - arbejdsopløsninger Prøvediluent (SD) Buffer indeholdende stabilisator og 0.09 % natriumazid. Antistofreagens (AB) Mikropartikelreagens (MP) Metakvalon polyklonalt antistof (ged) i buffer og 0.09 % natriumazid. Konjugerede metakvalonderivatmikropartikler i buffer og 0.09 % natriumazid. SD er i position A, AB er i position B og MP er i position C. Afpipetteringsrækkefølge analyseinstrument R1 = AB R2 = SD R3 (SR) = MP R1 = SD R2 = AB R3 (SR) = MP Forholdsregler og advarsler Vær opmærksom på alle advarsler og forholdsregler i kapitel 1, Indledning, i denne metodemanual. I USA: Vigtigt: Lovgivningen påbyder, at salg af dette produkt kun må foretages af en læge eller efter lægelig ordination. Reagenshåndtering analyseinstrument Før nye (ikke gennembrudte) cobas c packs placeres på instrumentet, skal de mixes i 1 minut på kassettemixeren. Alle cobas c packs i brug skal ligeledes blandes på denne måde én gang om ugen. Klar til brug. Reagenset blandes automatisk i 1 minut, efter at cobas c pack er gennembrudt, og i et halvt minut under daglig opstart (Begin of Day (BOD)). 1 / 5
Opbevaring og holdbarhed Holdbarhed ved 2 8 C: analyseinstrument I brug på instrumentet ved 10 15 C I brug på instrumentet ved 8 C Se udløbsdatoen på etiketten på cobas c pack 83 dage 56 dage Reagenserne må ikke fryses. Reagenser, som har været frosne, skal kasseres. Prøvetagning og -forberedelse Kun de nedennævnte prøvematerialer er testet og fundet acceptable. Urin: Opsaml urinprøver i rene glas- eller plastbeholdere. Friske urinprøver kræver ikke speciel håndtering eller forbehandling, men de afpipetterede prøver bør dog ikke indeholde større mængder bundfald. Prøver bør ligge inden for det normale fysiologiske ph-område på 5 8. Additiver eller konserveringsmidler er ikke nødvendige. Det anbefales at opbevare urinprøver ved 2 8 C og analysere dem inden for 5 dage efter opsamling. 12 Ved længere opbevaring anbefales frysning af prøverne. Centrifugér meget uklare prøver før analysering. Forfalskning eller fortynding af prøven kan give fejlagtige resultater. Ved mistanke om forfalskning skal der tages en ny prøve. Kontrol af prøvers validitet er nødvendig for prøver taget i henhold til Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs. 13 Vigtigt: Prøvefortyndinger bør kun anvendes som estimering til GC/MS og er ikke beregnet til patientværdier. Hvis der anvendes fortyndingsprocedurer, skal de valideres. Leverede materialer Se venligst afsnittet "Reagenser - arbejdsopløsninger" m.h.t. reagenser. Analyse Hvis analysen skal udføres optimalt, skal anvisningerne for det aktuelle analyseinstrument følges. Se venligst den aktuelle brugermanual for instrumentspecifikke analyseinstruktioner. Applikation til urin testdefinitioner Semikvantitativ Kvalitativ Målemetode Absorbans Absorbans Abs. beregningsmetode Endpoint Endpoint Reaktionsmetode R1-R2-S-SR R1-R2-S-SR Reaktionsretning Stigende Stigende Reaktionsstart SR SR Bølgelængde A 552 nm 552 nm Måleområde 0-600 0-2000 med postdilution 0-6000 Postdilution factor 10 anbefales a) Nej Calc. first/last 49/60 49/60 Enhed a) Ved estimering af koncentrationen til brug ved GC/MS-analyse. Afpipetteringsparametre Diluent (H 2 O) R1 53 µl 8 µl R2 50 µl 15 µl Prøve 3 µl 6 µl SR 15 µl 8 µl Totalvolumen 158 µl COBAS INTEGRA 800 testdefinitioner Semikvantitativ Kvalitativ Målemetode Absorbans Absorbans Abs. beregningsmetode Endpoint Endpoint Reaktionsmetode R1-R2-S-SR R1-R2-S-SR Reaktionsretning Stigende Stigende Reaktionsstart SR SR Bølgelængde A 552 nm 552 nm Måleområde 0-600 0-2000 med postdilution 0-6000 Postdilution factor 10 anbefales b) Nej Calc. first/last 44/78 44/78 Enhed b) Ved estimering af koncentrationen til brug ved GC/MS-analyse. Afpipetteringsparametre Diluent (H 2 O) R1 50 µl 7 µl R2 53 µl 7 µl Prøve 4 µl 4 µl SR 15 µl 7 µl Totalvolumen 147 µl Kalibrering Kalibratorer Semikvantitativ applikation S, 0-633 Preciset Plus I kalibratorer, CAL 1-4 0, 150, 300, 600 metakvalon (S9, system ID 07 6798 0) Kvalitative applikationer MTQQL, 0-133 Preciset Plus I kalibratorer, CAL 1 0 eller deioniseret vand og Preciset Plus I kalibratorer, CAL 3 c) eller C.f.a.s. Qualitative Plus 300 (Q1, system ID 07 6744 1) MTQQC, 0-533 Preciset Plus I eller II d) kalibratorer, CAL 1 0 eller deioniseret vand og C.f.a.s. Qualitative Plus Clinical 300 (Q5, system ID 07 6880 4) Til kvalitative applikationer er cutoff-værdien sat til 1000. c) Anvend ikke Preciset Plus I, CAL 3, til kalibrering af analysen Opiates 300/2000 kvalitativ 2000 (test OP2QL, test ID 0 410). d) Preciset Plus II, CAL 1, som normalt ikke er nødvendig til kalibrering af Methaqualoneanalysen, kan anvendes som en alternativ 0 -kalibrator til Q5, system ID 07 6880 4. Kalibreringsmetode Kalibreringsbestemmelse Semikvantitativ applikation Lineær interpolering Kvalitative applikationer Lineær regression Dobbeltbestemmelse anbefales 2 / 5
Kalibreringsinterval analyseinstrument: Hvert lot eller hver 12. uge, eller som krævet ifølge kvalitetskontrolprocedurerne : Hvert lot eller hver 3. uge, eller som krævet ifølge kvalitetskontrolprocedurerne Der fremstilles en kalibreringskurve ved hjælp af kalibratorerne. Kalibratorerne skal anbringes med den højeste koncentration først og den laveste sidst på CAL/QC-racket. Denne kurve gemmes i hukommelsen i COBAS INTEGRA systemet og kan kaldes frem igen på et senere tidspunkt. Kalibreringsintervallet kan udvides baseret på en acceptabel verifikation af kalibreringen foretaget af laboratoriet. Sporbarhed: Denne metode er standardiseret over for en primær referencemetode (GC/MS). Kvalitetskontrol Kvalitetskontrol Kontrolrækkefølge Kontrol efter kalibrering Control Set I PreciPos Set I (1P, system-id 07 6753 0) PreciNeg Set I (1N, system-id 07 6754 9) eller Control Set Clinical PreciPos Clinical (CP, system-id 07 6879 0) PreciNeg Clinical (CN, system-id 07 6878 2) Brugerdefineret Anbefales Anvend det kontrolmateriale, der er angivet i afsnittet Ordreinformation, til kvalitetskontrol. Derudover kan andre egnede kontrolmaterialer anvendes. Stofkoncentrationerne i Control Set I og Clinical er verificeret med GC/MS. Kontrolintervallerne og -grænserne bør tilpasses det enkelte laboratoriums individuelle krav. De opnåede værdier skal ligge inden for de definerede grænser. Hvert laboratorium bør etablere egne korrektionsprocedurer, som skal anvendes, hvis en værdi falder uden for de definerede grænser. Følg de gældende offentlige regulativer og lokale retningslinjer for kvalitetskontrol. Resultater COBAS INTEGRA systemerne vil rapportere resultater med følgende testmarkeringer: Semikvantitativ resultatrapportering Markering COBAS INTEGRA Værdiområde Ingen markering Negativ < 300 <TEST RNG Negativ < 0 >TEST RNG Positiv > 600 POS 300 Positiv 300 De ovennævnte værdier er baseret på en cutoff-værdi på 300. Kvalitativ resultatrapportering Markering COBAS INTEGRA Værdiområde Ingen markering Negativ < 1000 <TEST RNG Negativ < 0 >TEST RNG Positiv > 2000 POS 1000 Positiv 1000 De ovennævnte værdier er baseret på tildeling af en værdi på 1000 til cutoff-værdien på 300. Semikvantitativ resultatrapportering Semikvantificeringen af foreløbigt positive resultater bør kun anvendes af laboratorierne til at bestemme en egnet fortynding af prøver til konfirmation ved hjælp af en konfirmatorisk metode som f.eks. GC/MS. Laboratoriet kan også fastsætte kvalitetskontrolprocedurer og vurdere kontrolfunktionen. Bemærk: Ved brug af post-dilution-funktionen (1:10 fortynding) for at sikre, at prøven ikke fortyndes for meget, skal resultatet for fortyndingen være mindst halvdelen af cutoff-værdien for analyten gange 10. Hvis resultatet for fortyndingen ligger under halvdelen af cutoff-værdien gange 10, skal prøven analyseres igen i en mindre fortynding. En fortynding med et resultat tæt på cutoff for analytten giver den mest nøjagtige værdi. For at beregne koncentrationen af den foreløbigt positive prøve skal resultatet multipliceres med fortyndingsfaktoren. Fortyndinger bør kun anvendes som en estimering ved GC/MS. Begrænsninger - interferens Se afsnittet "Testspecifikke performance-data" i dette dokument vedrørende oplysninger om substanser, der er testet med denne analyse. Andre stoffer og/eller faktorer kan muligvis interferere med testen og give fejlagtige resultater (f.eks. tekniske eller proceduremæssige fejl). Et foreløbigt positivt resultat med denne analyse indikerer tilstedeværelse af metakvalon og/eller metabolitter heraf i urinen. Det afspejler ikke graden af intoksikation. Til diagnostiske formål skal resultaterne altid sammenholdes med patientens anamnese, kliniske undersøgelser og andre resultater. NØDVENDIG HANDLING Speciel vaskeprogrammering: Brugen af specielle vasketrin er obligatorisk, når visse testkombinationer udføres på COBAS INTEGRA analyseinstrumenter. For yderligere vejledning og for den seneste version af listen over ekstra vaskecykler henvises til metodebladet til CLEAN. Hvor det er nødvendigt, skal speciel programmering til vask/forhindring af carry-over udføres, før der rapporteres resultater med denne test. Testspecifikke performance-data Repræsentative performance-data på COBAS INTEGRA analyseinstrumenter angives nedenfor. Resultaterne kan variere fra laboratorium til laboratorium. Præcision Præcisionen blev bestemt i en intern protokol ved at udføre en række metakvalonkontroller i serier på 20, én gang om dagen i 5 dage på 2 analyseinstrumenter. Der blev opnået nedenstående resultater på et COBAS INTEGRA 700 analyseinstrument. Semikvantitativ præcision Repetérbarhed Middel SD Niveau 1 155 9.0 5.8 Niveau 2 253 7.9 3.1 Niveau 3 319 11.7 3.7 Niveau 4 408 13.3 3.3 Intermediær præcision Middel SD Niveau 1 155 11.1 7.2 Niveau 2 253 10.1 4.0 Niveau 3 319 17.1 5.4 Niveau 4 408 17.3 4.2 Kvalitativ præcision Cutoff (x) Antal testet Korrekte resultater CV % CV % Konfidensniveau 0.8x 200 200 > 95 % negativt resultat 3 / 5
Cutoff (x) Antal testet Korrekte resultater Konfidensniveau 1.2x 200 200 > 95 % positivt resultat Testens nedre detektionsgrænse 38 Den nedre detektionsgrænse repræsenterer det lavest målbare niveau, som kan skelnes fra nul. Det beregnes som den værdi, som ligger 2 standardafvigelser over nulkalibratoren (nulkalibrator + 2 SD, repetérbarhed, n = 20). Akkuratesse 100 urinprøver fra et klinisk laboratorium, hvor de blev screenet negative for et panel af misbrugsstoffer med en anden teknologi, blev analyseret for metakvalon på COBAS INTEGRA systemerne. Alle 100 kliniske prøver var negative ved en cutoff på 300. 62 urinprøver fra et klinisk laboratorium, hvor de blev screenet foreløbigt positive med et kommercielt tilgængeligt enzymimmunoassay og konfirmeret positive for metakvalon med GC/MS, blev ligeledes analyseret på et COBAS INTEGRA 700 analyseinstrument. Alle 62 prøver var positive med COBAS INTEGRA Methaqualone-analysen ved en cutoff på 300. GC/MS + COBAS INTEGRA 700 + 62 0 analyseinstrument 0 0 Analytisk specificitet Specificiteten af COBAS INTEGRA Methaqualone-analysen til strukturelt lignende forbindelser blev bestemt ved at fremstille hæmningskurver for hver af de nævnte forbindelser og bestemme den omtrentlige koncentration af hver forbindelse, der svarer til analysereaktiviteten af cutoff på 300 for metakvalonanalysen. Forbindelse Omtrentlig konc. i svarende til 300 metakvalon Omtrentlig procent krydsreaktivitet Mecloqualon 211 142 4 -hydroxy-metakvalon 266 113 3 -hydroxy-metakvalon 352 85 2 -hydroxymethyl-metakvalon 492 61 2-hydroxymethyl-metakvalon 625 48 6-hydroxy-metakvalon 1560 19 Stofinterferens Følgende forbindelser blev tilsat til afmålte mængder af en pool af normal human urin i en koncentration på 100000. Ingen af disse forbindelser gav værdier med analysen, som var lig med eller større end 0.1 % krydsreaktivitet. Acetaminophen Acetylsalicylsyre Aminopyrin Amitriptylin Amobarbital d-amfetamin l-amfetamin Ampicillin Askorbinsyre Aspartam Atropin Isoproterenol Ketamin Lidocain LSD MDA MDMA Melanin Meperidin Methadon d-methamfetamin l-methamfetamin Benzocain Benzoylecgonin (kokainmetabolit) Benzphetamin Butabarbital Koffein Calciumhypochlorit Chlordiazepoxid Chloroquin Chlorpheniramin Chlorpromazin Kokain Codein Dextromethorphan Diazepam Diphenhydramin Diphenylhydantoin Dopamin Doxylamin Ecgonin Ecgoninmethylester Ephedrin d-ephedrin l-ephedrin Epinephrin Erythromycin Østriol Fenoprofen Furosemid Gentisinsyre Glutethimid Guaiacolglycerolether Hydrochlorthiazid p-hydroxyamfetamin Ibuprofen Imipramin Methylphenidat Methyprylon Morfinsulfat Naloxon Naltrexon Naproxen Niacinamid Nordiazepam Norethindron l-norpseudoephedrin Oxazepam Penicillin G Pentobarbital Phencyclidin β-phenethylamin Phenobarbital Phenothiazin Phentermin Phenylbutazon Phenylpropanolamin d-fenylpropanolamin Procain Promethazin d-propoxyfen d-pseudoephedrin l-pseudoephedrin Chinidin Kinin Secobarbital Sulindac Tetracyclin Δ 9 THC-9-carboxylsyre Tetrahydrozolin Trifluoperazin Tyramin Verapamil Eventuelle modifikationer af instrumentet beskrevet heri skal valideres af laboratoriet. Referencer 1 Karch SB, ed. Drug Abuse Handbook. Boca Raton, FL: CRC Press LLC 1998. 2 Baselt RC. Disposition of Toxic Drugs and Chemicals in Man. 7th ed. Foster City, CA: Biomedical Publications 2004. 3 Ager SA. Luding out. N Engl J Med 1972;287(1):51. 4 Abboud RT, Freemann MT, Rogers RM, et al. Methaqualone poisoning with muscular hyperactivity necessitating the use of curare. Chest 1974;65(2):204-205. 5 Nayak RK, Smyth RD, Chamberlain JH, et al. Methaqualone pharmacokinetics after single and multiple dose administration in man. J Pharmacokinet Biopharm 1974;2(2):107-121. 6 Smyth RD, Lee JK, Polk A, et al. Bioavailability of methaqualone. J Clin Pharmacol 1973;13(10):391-400. 4 / 5
7 Reynolds CN, Wilson K, Burnett D. Urinary excretion of methaqualone N-oxide in man. Xenobiotica 1976;6(2):113-124. 8 Wilson K, Burnett D, Oram M, et al. The kinetics of urinary excretion of the N-oxide and glucuronides of methaqualone in man. Eur J Drug Metab Pharmacokinet 1981;6(4):289-295. 9 Ericsson O, Danielsson B. Urinary excretion pattern of methaqualone metabolites in man. Drug Metab Dispos 1977;5(6):497-502. 10 Brenner C, Hui R, Passarelli J, et al. Comparison of methaqualone excretion patterns using Abuscreen ONLINE and EMIT II immunoassays and GC/MS. Forensic Sci Int 1996;79(1):31-41. 11 Armbruster DA, Schwarzhoff RH, Pierce BL, et al. Method comparison of EMIT II and ONLINE with RIA for drug screening. J Forensic Sci 1993;38:1326-1341. 12 Toxicology and Drug Testing in the Clinical Laboratory; Approved Guideline. 2nd ed. (C52-A2). Clinical and Laboratory Standards Institute 2007;27:33. 13 Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs. Fed Regist 2008 Nov 25;73:71858-71907. I dette metodeblad anvendes altid punktum som skilletegn for at markere grænsen mellem hele tal og decimaler i et decimaltal. Skilletegn for tusinder anvendes ikke. Symboler Roche Diagnostics anvender nedenstående tegn og symboler ud over dem, der er angivet i ISO 15223 1-standarden (for USA: se https://usdiagnostics.roche.com for definition af de anvendte symboler): GTIN Indhold i pakning Mængde efter rekonstituering eller blanding Global Trade Item Number Tilføjelser, sletninger eller ændringer er vist ved en streg i margenen. 2016, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim www.roche.com Distribution i USA af: Roche Diagnostics, Indianpolis, IN US Customer Technical Support 1-800-428-2336 5 / 5