Klinisk relevante markører rer og laboratoriemetoder. Lars Henrik Jensen, overlæge ph.d. Onkologisk afdeling Sygehus Lillebælt

Transkript

1 Klinisk relevante markører rer og laboratoriemetoder Lars Henrik Jensen, overlæge ph.d. Onkologisk afdeling Sygehus Lillebælt

2 Markører og metoder - eksempler fra 3 store sygdomme Mamma HER2 Vævsanalyser Lunge EGFR/erlotinib, ALK/crizotinib PCR CRC MSI, RAS Metylering

3 Molekylært målrettet m medicinsk behandling Specifik hæmning af molekyler, der stimulererer carcinogese og cancercellevækst Ideelt Molekylært angrebspunkt target Target kan måles Måling af target korrelerer med effekt Reelt Antistoffer -mab er Kinaseinhibitorer -ib er

4 Markører rer i klinisk onkologi Biologisk karakteristikum ved en individuel cancer. Klinisk relevant information om Ætiologi Diagnose Prognose hvordan går det alt andet lige Prædiktion hvor godt vil en behandling virke

5 Trastuzumab (mammacancer) Cetuximab og panitumumab (colorektalcancer) -mab Mutation Ligand Protein Bevacizumab (colorektalcancer lungecancer) Mutation Erlotinib (c. pulm.) Receptor Gefitinib (c. pulm.) KRAS BRAF Cytoplasm Proteinekspression IHC -nib MEK Regulation mirna ERK Genekspression RNA Genamplifikation FiSH DNA Activation of transcription factors Nucleus Polymorfi

6 Mammacancer

7 Onkogenet HER2 Overekspression hos 10-20% Prognostisk faktor? Prædiktiv faktor?

8

9 Immunhistokemi IHC

10 FISH (Fluorescence In Situ Hybridization)

11

12 Herceptin og Pertuzumab

13

14 CLEOPATRA study Pertuzumab, trastuzumab, and docetaxel for HER2-positive metastatic breast cancer: overall survival results from a randomised, double-blind, placebocontrolled, phase 3 study Lancet Oncol 14, May 2013,

15

16 KRIS Perjeta (Pertuzumab) Perjeta (Pertuzumab) anbefales sammen med trastuzumab i kombination med docetaxel som 1. linjebehandling af patienter med HER-2 positiv metastaserende eller lokalt avanceret brystkræft. Såfremt Perjeta og trastuzumab anvendes i kombination med andre lægemidler, skal effekten monitoreres.

17 Lungecancer

18 Nature Reviews Cancer 10,

19 Aktiverende mutationer C.pulm, gefitinib, erlotinib CML, imatinib GIST, imatinib Nature Reviews Cancer 10,

20 Praktisk mutationsanalyse Mikrodissektion eller lasermikrodissektion DNA-oprensning 2 dage Real-time PCR

21

22 Kemoterapi eller gefitinib? IPASS

23 Crizotinib N=133 Crizotinib was well tolerated in patients with pretreated ALK-rearranged NSCLC 51% ORR (including 1 CR and 67 PRs) PKI 450 Da Antistof Da J Clin Oncol 29: 2011; (suppl; abstr 7514)

24 Crizotinib og NSCLC: respons

25 ALK rearrangement FISH Nature 448,

26 Colorektalcancer

27 To hovedtyper Kromosominstabilitet Berører hele eller dele af kromosomer 85 % Mikrosatellitinstabilitet MSI DNA sekvenser diploid DNA Få kromosomale ændringer 15 % proksimal colon, ældre patienter, kvinder, HNPCC/Lynch Syndrome

28 Mikrosatellitinstabilitet MSI Klinisk relevant markør Bedre prognose Nedsat effekt af 5FU Relateret til arvelig cancer (HNPCC eller Lynch Syndrome) JNCI :1 J Clin Oncol Jan 20;23(3): N Engl J Med May 5;352(18): N Engl J Med Jul 17;349(3):247-57

29 Hvad er MSI? Hvad er mismatch repair?

30 Mismatch Repair C A C A C A C A C A C A G T G T G T G T G T G T

31 Mismatch Repair Base:Base Mispair C A C A C A C A C A C A G T G T G T G T G T G T C-A Deletion Loop C G C A C A C A C A G T G T G T G T G T

32 Mismatch Repair Base:Base Mispair C A C A C A C A C A C A G T G T G T G T G T G T MLH1 PMS2 MSH2 MSH6 C A C A C A C A C A C A G T G T G T G T G T G T Mismatch Repair C-A C G C A C A C A C A G T G T G T G T G T Deletion Loop DNA Damage Signaling A P O P T O S I S

33 Mismatch Repair Deficiency Wildtype Mutation Base:Base Mispair Methylation Mutation C A C A C A C A C A C A G T G T G T G T G T G T C-A C G C A C A C A C A G T G T G T G T G T MLH1 PMS2 MSH2 MSH6 Deletion Loop Mismatch Repair DNA Damage Signaling Hypermutability and DNA Damage Tolerance CANCER

34 Mikrosatellitinstabilitet MSI Normal mikrosatellit Tumour MSI: Længdemutationer i tumor DNA sammenlignet med normal DNA

35 PCR Anticancer Res 2006;26,2069

36 MSI på protein niveau Protein detection of the four important mismatch repair genes MLH1, MSH2, MSH6 or PMS2

37 Metylering

38 Metylering og genekspression

39 MSI og metylering 5 -AACGAATTAATAGGAAGAGCGGATAGCG -3 Cytosine 5 -AAUGAATTAATAGGAAGAGUCCTATCUG-3 Uracil NH 4 + Sodium bisulfite treatment CH 3 CH 3 Methylated cytosine 5 -AACGAATTAATAGGAAGAGCGGATAGCG -3 Methylated cytosine 5 -AACGAATTAATAGGAAGAGCGGATAGCG -3

40 Lynch Syndrome

41 MSI og Lynch Syndrome MSI skyldes sporadisk metylering eller arvelige mutationer Hvis der ikke påvises metylering, så skal patienten henvises til genetisk rådgivning Molekylær screening for arvelig tarmkræft

42 EGFR aktivering

43 Selvaktivering

44 KRAS og NRAS kan have aktiverende mutationer

45 PRIME-studiet

46 Forbedret patientselektion

47 RAS negativ prædiktor

48 ECC 2013 LATE BREAKING ABSTRACT: Analysis of KRAS/NRAS and BRAF mutations in FIRE-3: A randomized phase III study of FOLFIRI plus cetuximab or bevacizumab as first-line treatment for wild-type (WT) KRAS (exon 2) metastatic colorectal cancer (mcrc) patients

49 FOLFIRI + cetuximab FOLFIRI + bevacizumab ORR Fisher s one-sided p WT ITT (n= 592) 62.0% 58.0% RAS WT (n= 301) 76.0% 65.2% RAS MT (n=55) 42.9% 66.7% BRAF MT (n=40) 63.2% 42.9% PFS Logrank p WT ITT (n= 592) 10.0 mo 10.3 mo RAS WT (n= 334) 10.5 mo 10.4 mo RAS MT (n=62) 6.1 mo 12.2 mo BRAF MT (n=43) 6.3 mo 5.7 mo OS Logrank p WT ITT (n= 592) 28.7 mo 25.0 mo RAS WT (n= 334) 33.1 mo 25.9 mo RAS MT (n=62) 19.1 mo 20.6 mo BRAF MT (n=43) 12.9 mo 11.0 mo 0.448

50 ECC 2013 LATE BREAKING ABSTRACT: ASPECCT: a randomized, multicenter, open-label, phase 3 study of panitumumab (pmab) vs cetuximab (cmab) for previously treated wild-type (WT) KRAS metastatic colorectal cancer (mcrc)

51 OS- median, mos (95% CI) HR (95% CI) P value PFS- median, mos (95% CI) HR (95% CI) ORR- % (95% CI) Pmab N= ( ) 4.1 ( ) 22 ( ) Cmab N= ( ) 0.97 ( ) ( ) 1.00 ( ) 19.8 ( )