Total PSA. da Total PSA. system. Symbolforklaring

Transkript

1 system Total PSA da Total PSA 7K70 B7K706 G2-8855/R03 Ændringer er markeret Revideret i juni 2012 Kontakt den lokale Abbott-repræsentant, eller find landespecifikke kontaktoplysninger på Det anbefales at læse og følge denne brugsanvisning nøje. Hvis anvisningerne ikke følges, kan testresultaternes pålidelighed ikke garanteres. Symbolforklaring Bestillingsnummer Medicinsk udstyr til in vitrodiagnostik Lotnummer Udløbsdato Opbevares ved 2-8 C. Se brugsanvisningen. RV-celler Prøvekopper Ekstra skruelåg Gummimembran Serienummer Reagenslot Kontrolnummer Globalt varenummer Fabrikant Produceret i Irland Se afsnittet REAGENSER for nærmere oplysninger om de enkelte reagenssymboler. 1

2 ADVARSEL: Koncentrationen af total PSA i en given prøve, der er bestemt med analyser fra forskellige fabrikanter, kan variere på grund af forskelle i analysemetoder og reagensspecificitet. Resultater, der afgives fra laboratoriet til lægen, skal indeholde angivelse af den anvendte total PSA-analyse. Værdier fra forskellige analysemetoder, herunder Abbott PSA-analyser, er ikke direkte sammenlignelige. Hvis analysemetoden til seriel bestemmelse af total PSA-niveauer ændres i løbet af overvågningen af en patient, skal der udføres yderligere parallel testning. Inden analyser udskiftes, SKAL laboratoriet kontrollere basisværdierne for patienter, der overvåges serielt. BETEGNELSE ARCHITECT Total PSA (Prostate Specific Antigen) ANVENDELSE ARCHITECT Total PSA-analysen er en kemiluminescens mikropartikelimmunanalyse (CMIA) til kvantitativ bestemmelse af total PSA (både frit PSA og PSA i kompleks med alfa-1-antichymotrypsin) i humant serum: 1. Analysen bruges som hjælp til påvisning af prostatacancer, når metoden anvendes sammen med digital rektaleksploration (DRE) hos mænd på 50 år eller derover. Cancerdiagnosticering kræver prostatabiopsi. 2. Analysen bruges også som en supplerende test i forbindelse med behandlingen af prostatacancer. RESUME OG ANALYSEFORKLARING Det prostataspecifikke antigen (PSA), som tilhører den humane kallikreingenfamilie, er en serinprotease med chymotrypsinlignende aktivitet. I sin modne form er PSA et enkeltkædet glykoprotein på 237 aminosyrer bestående af 7-8 % kulhydrat som en enkelt N-bundet oligosakkaridsidekæde. PSA har en molekylvægt på ca dalton. 1,8,37,38 PSA produceres primært i prostatas epitelceller. PSA er også observeret ved brystcancer og spytkirtelneoplasme samt i periuretrale kirtler og analkirtler, i uretraceller hos mænd, modermælk, blod og urin. 1,2 Det PSA, der produceres i prostata, udskilles i høj koncentration i sædvæsken. En af PSA s væsentligste funktioner er proteolytisk spaltning af geldannende proteiner i sædvæsken, hvilket gør sædvæsken tyndtflydende og øger spermmobiliteten. 1 Blodet har et lille indhold af PSA som følge af PSA-lækage fra prostata. Øgede PSAniveauer i serum forbindes med prostatapatologi, herunder prostatitis, benign prostatahyperplasi (BPH) og prostatacancer. 1,3-7 PSA findes i 3 primære former i blodet. Den væsentligste form, som kan påvises ved immunanalyse, er PSA i et kompleks med serinproteasehæmmeren alfa-1-antichymotrypsin (PSA-ACT). Ikkekompleksbundet PSA, eller frit PSA, er den anden PSA-form i serum, som kan påvises ved immunanalyse. Størstedelen af frit PSA i serum synes at være en inaktiv form, som ikke kan indgå i kompleks med proteasehæmmere og kan være enten et PSA-zymogen eller en enzymatisk inaktiv, spaltet form af PSA. PSA-analyser med ækvimolarreaktion har en ækvivalent reaktion på både frit PSA og PSA-ACT. 1 ARCHITECT Total PSA-analysen er en ækvimolar analyse. En tredje PSA-form, et kompleks med alfa-2-makroglobulin, kan ikke påvises med de aktuelle PSA-immunanalyser på grund af alfa-2- makroglobulinmolekylets omslutning og efterfølgende maskering af PSA-epitoper. 1,8,9 Prostatacancer er den mest almindelige form for cancer blandt mænd og den næsthyppigste årsag til dødsfald som følge af cancer blandt mænd i USA. 10 Tidlig diagnosticering af prostatacancer vanskeliggøres af mangelen på symptomer hos mænd med lokaliserede tumorer. For at kunne diagnosticere sygdommen tidligt er der derfor behov for en enkel, sikker og billig test for sygdommen hos mænd uden symptomer. Den traditionelle metode til påvisning af prostatacancer er digital rektaleksploration (DRE). Imidlertid kan kun % af de cancertilfælde, der findes ved screening med digital rektaleksploration, forventes at være begrænset til prostata. De hyppige fund af lokalt avanceret prostatacancer hos screenede patienter kan skyldes, at de små tumorer, der med størst sandsynlighed er begrænset til prostata, ikke kan findes ved digital rektaleksploration. 11 Eftersom patienter med små tumorer menes at have den bedste prognose, kan det konkluderes, at digital rektaleksploration har begrænset sensitivitet til påvisning af de tumorer, der har størst mulighed for helbredelse. 12 I 1990 offentliggjorde Cooner et al. data vedrørende den kliniske anvendelse af andre diagnostiske metoder, f.eks. ultralydsundersøgelse af prostata og måling af prostataspecifikt antigen i serum, til tidlig påvisning af prostatacancer. I dette studie blev det påvist, at forudsigeligheden for cancer var betydeligt øget, når både digital rektaleksploration og PSA-måling var unormale. 13 Flere andre studier har vist, at måling af PSA-koncentrationer i serum giver adskillige fordele ved tidlig påvisning af prostatacancer. Analysen er mindre ubehagelig for patienterne, resultatet er objektivt og kvantitativt, og analysen er ikke afhængig af personalets uddannelses- eller erfaringsniveau. I flere nyere studier af raske mænd på 50 år eller derover var PSA-niveauet i serum den metode, der med størst sandsynlighed kunne bruges til at forudsige prostatacancer. Konklusionen på disse studier var, at måling af PSA i serum ikke kun er et nyttigt supplement til rektaleksploration og ultralyd ved påvisning af prostatacancer, men at det også er den mest præcise af de tre test, der eksisterer til formålet. 14,15 I januar 1992 godkendte den amerikanske urologiforening (American Urological Association) årlig screening med digital rektaleksploration og PSAmåling med henblik på tidlig påvisning af prostatacancer, begyndende ved de 50 år. 16 Dette blev bekræftet af den amerikanske cancerforening (American Cancer Society) i november Kombinationen af digital rektaleksploration og PSA-måling har vist sig at medføre øget påvisning af de tidligere faser af prostatacancer, men fordelene ved tidlig påvisning for patientens prognose er ikke bevist og er stadig genstand for kliniske studier. 4-7,13-15,18,19 Måling af PSA kan have en betydelig værdi ved påvisning af metastaser eller vedvarende sygdom hos patienter efter kirurgisk eller medicinsk behandling af prostatacancer. Hvis der efter behandling forekommer kronisk forhøjet PSA eller stigende PSA, er dette tegn på recidiverende eller tilbageværende sygdom. PSA-testen er generelt accepteret som en supplerende test i forbindelse med behandlingen af prostatacancer. 3-7 ANALYSEPRINCIP ARCHITECT Total PSA-analysen er en totrinsimmunanalyse til bestemmelse af forekomst af total PSA (både frit PSA og PSA i kompleks med alfa-1-antichymotrypsin) i humant serum og er baseret på teknologien bag kemiluminescensmikropartikelimmunanalyse (CMIA) med fleksible analyseprocedurer, kaldet Chemiflex. I første trin blandes prøven med paramagnetiske mikropartikler, der er coatet med anti-psa. PSA i prøven binder til mikropartiklerne, der er coatet med anti-psa. I andet trin tilsættes acridinmærket anti-psa-konjugat efter udført vask. Derefter tilsættes prætriggerog triggeropløsning i reaktionsblandingen. Den deraf følgende kemiluminescerende reaktion måles i form af relative lysenheder (RLU). Mængden af total PSA i prøven og mængden af RLU, som optikken i * måler, er direkte proportional. Se kapitel 3 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om systemet og analyseteknologien. * i = immunanalyse REAGENSER Reagenssæt, 100 test/500 test BEMÆRK: Nogle reagenssæt kan ikke fås i alle lande eller til anvendelse på alle Systems. Kontakt venligst Abbotts ordrekontor for nærmere oplysninger. ARCHITECT Total PSA Reagent Kit (7K70) 1 eller 4 flasker (6,6 ml til 100 test/27,0 ml til 500 test) mikropartikler, der er coatet med anti-psa (mus, monoklonalt), i TRIS-buffer med okseproteinstabilisator. Konserveringsmiddel: antimikrobielle midler. 1 eller 4 flasker (5,9 ml til 100 test/26,3 ml til 500 test) acridinmærket anti-psa-konjugat (mus, monoklonalt) i MES-buffer med okseproteinstabilisator. Minimumskoncentration: 10 ng/ml. Konserverings middel: antimikrobielle midler. Analysefortyndingsopløsning Multi-Assay Manual Diluent (7D82-50) 1 flaske (100 ml) ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent indeholdende fosfatbufferopløsning. Konserveringsmiddel: antimikrobielt middel. 2

3 Andre reagenser Pre-Trigger Solution Prætriggeropløsning indeholdende 1,32% (w/v) hydrogenperoxid. Trigger Solution Triggeropløsning indeholdende 0,35N natriumhydroxid. Wash Buffer BEMÆRK: Flaskens størrelse og mængde afhænger af størrelsen på det bestilte reagenssæt. Vaskebuffer indeholdende fosfatbufferopløsning. Konserveringsmidler: antimikrobielle midler. VIGTIGE FORHOLDSREGLER Til in vitro-diagnostisk brug Det anbefales at læse og følge denne brugsanvisning nøje. Hvis anvisningerne ikke følges, kan testresultaternes pålidelighed ikke garanteres. Sikkerhedsforanstaltninger VIGTIGT: Brug af dette produkt kræver håndtering af humane prøver. Det anbefales, at alt materiale af human oprindelse betragtes som potentielt smittefarligt og håndteres i overensstemmelse med det amerikanske arbejdsmiljøinstitut OSHA's standard Bloodborne Pathogens. 20 Biosafety Level 2 21 eller andre gældende sikkerhedsforanstaltninger for biologisk materiale 22,23 bør anvendes ved håndtering af materiale, der indeholder eller mistænkes for at indeholde smittefarlige stoffer. Sikkerhedsdatablade er til rådighed på eller kan fås ved henvendelse til kundeservice. Se kapitel 8 i ARCHITECT-brugermanualen for en nærmere beskrivelse af sikkerhedsforanstaltningerne ved betjening af systemet. Forholdsregler ved anvendelse Anvend ikke reagenssæt, hvor udløbsdatoen er overskredet. Bland ikke reagenser fra forskellige reagenssæt. Før ARCHITECT Total PSA-reagenssættet placeres i systemet første gang, skal flasken med mikropartikler blandes grundigt for at få mikropartikler, som har bundfældet sig under transporten, til at resuspendere. For anvisninger vedrørende blanding af mikropartikler henvises til afsnittet PROCEDURE, Analyseprocedure i denne brugsanvisning. Gummimembran SKAL anvendes for at undgå fordampning og kontaminering og for at sikre reagensernes holdbarhed. Hvis ikke gummimembran anvendes som anført i denne brugsanvisning, kan testresultaternes pålidelighed ikke garanteres. Brug rene handsker for at undgå kontaminering, når der sættes gummimembran på en åben reagensflaske. Når den åbne reagensflaske er forsynet med en gummimembran, må flasken ikke vendes, da dette vil medføre udsivning af reagens, hvilket vil kunne have indflydelse på testresultaterne. Med tiden vil tilbagebleven væske kunne tørre fast på gummimembranen. Der vil typisk være tale om indtørrede salte, der ikke har nogen betydning for analysen. Se kapitel 7 i ARCHITECT-brugermanualen for en nærmere beskrivelse af forholdsreglerne ved betjening af systemet. Opbevaring Reagenserne kan opbevares i eller uden for System. Hvis reagenserne fjernes fra systemet, bør de opbevares oprejst ved 2-8 C (med gummimembran og nyt skruelåg). Det anbefales i så fald at placere dem i de originale bakker og æsker, hvori de står korrekt. Hvis flasken med mikropartikler ikke står oprejst (forsynet med gummimembran) på køl uden for systemet, skal reagenssættet bortskaffes. Når reagenserne fjernes fra systemet, skal der foretages en scanning for at opdatere systemets holdbarhedstimer. Indikation af reagenshenfald Hvis en kontrolværdi ligger uden for det specificerede område, kan dette være et tegn på reagenshenfald eller procedurefejl. Tilhørende testresultater er ugyldige, og prøverne skal testes igen. Rekalibrering kan være påkrævet. Se kapitel 10 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om fejlfinding. Forhøjede prøveresultater Proteinaflejringer på prøveopsugningsnålen kan resultere i, at visse prøver udviser forhøjet koncentration på grund af afsmitning fra en prøve med meget høj PSA-koncentration. Se kapitel 10 i ARCHITECTbrugermanualen for oplysninger om fejlfinding. INSTRUMENTPROCEDURE ARCHITECT Total PSA-analysefilen skal installeres på ARCHITECT i System fra Assay CD-ROM, inden analysen udføres. Se kapitel 2 i ARCHITECT-brugermanualen for nærmere oplysninger om installation af analysefil samt om visning og ændring af analyseparametre. Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om udskrivning af analyseparametre. Se ARCHITECT-brugermanualen for en detaljeret beskrivelse af systemprocedurer. Standardresultatenheden for ARCHITECT Total PSA-analysen er ng/ml. Det er muligt at vælge en anden resultatenhed, μg/l. Dette gøres ved at ændre analyseparametret Result Concentration Units til μg/l. Systemet benytter omregningsfaktor 1,0. PRØVETAGNING OG KLARGØRING Der kan kun anvendes humant serum i ARCHITECT Total PSAanalysen. Følg fabrikantens brugervejledning for serum prøvetagningsrør. Det anbefales at udtage prøver til PSA-testning før procedurer, der indbefatter manipulation af prostata. Følg rørfabrikantens brugervejledning samt anvisningerne i denne brugsanvisning vedrørende prøvetagning og forberedelse til analyse. Se rørfabrikantens brugervejledning for oplysninger om centrifugeringstid og -hastighed. Utilstrækkelig forbehandling af prøven eller henfald af prøvematerialet under transporten kan medføre for lave resultater. For at opnå de mest præcise resultater bør serumprøverne være fri for fibrin, røde blodlegemer og andre udfældninger. For at sikre overens stemmende resultater skal prøver, der indeholder fibrin, røde blodlegemer eller udfældninger, centrifugeres før brug. Kontrollér, at fuldstændig koagulation har fundet sted i serumprøver inden centrifugeringen. Nogle prøver kan have længere koagulations tid; især hvis de er udtaget fra patienter i antikoagulant eller trombolytisk behandling. Hvis prøverne centrifugeres, inden fuldstændig koagulation har fundet sted, kan forekomst af fibrin eller udfældninger medføre fejlagtige resultater. Prøver, der indeholder fibrin, røde blodlegemer eller udfældninger, skal centrifugeres. Bemærk, at interfererende niveauer af fibrin kan være til stede i prøver uden tydelige eller synlige udfældninger. ARCHITECT Total PSA-reagenssættet skal opbevares ved 2-8 C og kan anvendes, straks efter at det er fjernet fra køl (2-8 C). Reagenserne er holdbare indtil udløbsdatoen ved opbevaring og håndtering efter forskrifterne. ARCHITECT Total PSA-reagenssættet kan opbevares i ARCHITECT i System i højst 30 dage, hvorefter det skal bortskaffes. Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om styring af reagensholdbarhed i systemet. 3

4 Hvis det ikke kan bekræftes, at den korrekte prøvetagning og klargøring har fundet sted, eller hvis prøvematerialet er henfaldet på grund af transporten eller prøvehåndteringen, anbefales det at tilføje et yderligere centrifugeringstrin. Centrifugeringen bør være tilstrækkelig til at fjerne udfældninger. Prøvemateriale, der overhældes i stedet for afpipetteres fra prøverør uden gel, er udsat for større risiko for udfældning med for lave resultater til følge. Hvis disse anvisninger ikke følges, kan det føre til for lave prøveresultater. Prøver kan opbevares i op til 24 timer ved 2-8 C inden testning. Hvis testningen bliver forsinket i mere end 24 timer, skal prøvematerialet fjernes fra koaglet eller gelen og opbevares ved -20 C eller koldere. 24,25 BEMÆRK: Prøver, som skal testes for frit PSA, bør fjernes fra koaglet inden for 3 timer. System kontrollerer ikke prøvetypen. Det er brugerens opgave at kontrollere, at den korrekte prøvetype anvendes til ARCHITECT Total PSA-analysen. Vær forsigtig ved håndtering af patientprøver for at undgå krydskontaminering. Det anbefales at bruge engangspipetter eller -pipettespidser. Anvend ikke kraftigt hæmolyserede prøver. Undersøg alle prøver for bobler for at få de bedst mulige resultater. Fjern alle bobler med en rørepind, inden analysen påbegyndes. Anvend en ny rørepind til hver prøve for at undgå krydskontaminering. Gentagne nedfrysninger og optøninger bør undgås. Prøver skal blandes GRUNDIGT efter optøning ved at vortexe dem. Optøede prøver, der indeholder røde blodlegemer eller udfældninger, eller som er uklare, skal centrifugeres før anvendelse for at sikre overensstemmende resultater. Anvend ikke prøver med tydelig mikrobiel kontamination. Ved forsendelse skal prøverne pakkes og mærkes i overensstemmelse med gældende nationale og internationale regler for transport af kliniske prøver og smittefarlige stoffer. Prøver, der ikke analyseres inden for 24 timer, bør opbevares/forsendes i frossen tilstand. Det anbefales at fjerne prøverne fra koaglet eller gelen inden forsendelse. ARCHITECT Total PSA-kalibratorer og -kontroller bør blandes forsigtigt ved at vende flaskerne, før de tages i brug. PROCEDURE Medfølgende produkter 7K70 ARCHITECT Total PSA Reagent Kit Nødvendigt tilbehør og udstyr System ARCHITECT Total PSA-analysefilen fra: System e-assay CD-ROM, som findes på Assay CD-ROM 7K70-01 ARCHITECT Total PSA Calibrators 7D82-50 Pipetter eller pipettespidser (valgfrit) til at dispensere de mængder, der er specificeret på patientprøve- og kontrolbestillingsskærmbilledet. Se kapitel 9 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om nødvendigt udstyr til brug i forbindelse med vedligeholdelsesprocedurer. Tilgængeligt tilbehør og udstyr 7K70-10 ARCHITECT Total PSA Controls Analyseprocedure Før ARCHITECT Total PSA-reagenssættet placeres i systemet første gang, skal flasken med mikropartikler blandes grundigt for at få mikropartikler, som har bundfældet sig under transporten, til at resuspendere: Vend flasken med mikropartikler 30 gange. Kontrollér, at mikropartiklerne er resuspenderet i flasken. Hvis der stadig sidder mikropartikler fast i flasken, skal flasken vendes, indtil mikropartiklerne er helt resuspenderet. Skru låget af, når mikropartiklerne er resuspenderet, og kassér det. Tag en gummimembran ud af posen. Brug rene handsker. Sæt forsigtigt gummimembranen fast på flaskeåbningen. Hvis mikropartiklerne ikke kan resuspenderes, MÅ DE IKKE ANVENDES. Kontakt Abbotts kundeservice. Bestil testene. Anbring ARCHITECT Total PSA-reagenssættet i ARCHITECT i System. Kontrollér, at alle nødvendige reagenser forefindes. Kontrollér, at alle reagensflasker er forsynet med en gummimembran. Prøvekoppens minimumsvolumen udregnes af systemet og fremgår af bestillingsudskriften (Orderlist report). Der må højst udføres 10 gentagelser fra samme prøvekop. For at minimere effekten af fordampning skal det kontrolleres, at der er nok prøvemateriale i prøvekoppen, inden testen køres. Hasteprøver: 100 µl til den første Total PSA-test plus 50 µl til hver yderligere Total PSA-test fra samme prøvekop. 3 timer i systemet: 150 µl til den første Total PSA-test plus 50 µl til hver yderligere Total PSA-test fra samme prøvekop. > 3 timer i systemet: Yderligere prøvemængde er nødvendig. Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om fordampning af prøvemateriale og prøvemængder. Tryk på RUN. System udfører følgende funktioner: Flytter prøven hen til aspirationspositionen. Ved brug af primære og sekundære rør bør prøvemåler anvendes for at sikre, at der er nok prøvemateriale. For at opnå de anbefalede mængder af ARCHITECT Total PSA-kalibratorer og -kontroller holdes flaskerne lodret, mens 7 dråber af hver kalibrator eller 4 dråber af hver kontrol dispenseres ned i de respektive prøvekopper. Isæt prøverne. Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om isætning af prøver. Tryk på RUN. System udfører følgende funktioner: Skubber prøveholderen hen til aspirationspositionen. Transporterer en RV-celle ind i det indre analyseringsområde. Aspirerer og overfører prøvematerialet til RV-cellen Rykker RV-cellen én position frem og dispenserer mikropartiklerne ned i den. Blander, inkuberer og vasker reaktionsblandingen. Tilsætter konjugat i RV-cellen. Blander, inkuberer og vasker reaktionsblandingen. Tilsætter prætrigger- og triggeropløsning. Måler emissionen af kemiluminescens til bestemmelse af kvantiteten af total PSA i prøven. Aspirerer indholdet i RV-cellen og overfører det til beholderen med flydende affald, mens RV-cellen overføres til beholderen med fast affald. Udregner resultatet. Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om bestilling af patientprøver og kontroller samt generelle betjeningsprocedurer. For at opnå optimal ydeevne er det vigtigt at følge procedurerne for rutinevedligeholdelse i kapitel 9 i ARCHITECT-brugermanualen. Udfør vedligeholdelsesprocedurerne hyppigere, hvis det kræves af laboratoriets procedurer. 4

5 Prøvefortyndingsprocedurer Prøver med en total PSA-værdi, der overstiger 100 ng/ml, markeres med koden > og kan fortyndes enten med systemets automatiske fortyndingsfunktion eller den manuelle fortyndingsprocedure. Hvis den automatiske fortyndingsprocedure anvendes, udfører systemet en fortynding af prøven i forholdet 1:10, udregner automatisk koncentrationen af den ufortyndede prøve og afgiver resultatet. Fortyndinger i andre forhold end 1:10 bør udføres manuelt. Eksempel: Til en 1:20-fortynding tilsættes 50 μl patientprøve til 950 μl Multi-Assay Manual Diluent (7D82-50). Det er brugerens opgave at indtaste fortyndingsfaktoren på skærmbilledet til bestilling af patientprøver og kontroller. Alle analyser, der vælges for den pågældende bestilling, fortyndes. Systemet anvender denne fortyndingsfaktor til automatisk at beregne prøvens koncentration før fortynding og afgive resultatet. Fortyndingen bør udføres, så resultatet af den fortyndede prøve bliver større end 0,4 ng/ml. Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om bestilling af fortyndinger. Kalibrering For at udføre en ARCHITECT Total PSA-kalibrering skal kalibrator 1 og 2 testes i dobbeltbestemmelse. Alle kontrolniveauer af total PSA skal testes i enkeltbestemmelse for at vurdere analysekalibreringen. Kontrollér, at kontrolværdierne ligger inden for de koncentrationsområder, der er anført i brugsanvisningen til kontrollerne. Kalibratorer bør håndteres som hasteprøver. Kalibreringsområde: 0-50 ng/ml. Analyseproceduren giver mulighed for at udvide området til 100 ng / ml. Når en ARCHITECT Total PSA-kalibrering er godkendt og gemt, kan alle efterfølgende prøver testes uden yderligere kalibrering, medmindre: Et reagenssæt med et nyt lotnummer tages i brug. Kontrollerne ligger uden for det specificerede område. Se kapitel 6 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om udførelse af analysekalibrering. PROCEDURER FOR KVALITETSKONTROL For at overholde kontrolkravene til ARCHITECT Total PSA-analysen bør alle kontrolniveauerne testes i enkeltbestemmelse en gang i døgnet på kørsels dage. Hvis laboratoriets procedurer for kvalitetskontrol kræver hyppigere brug af kontroller til verifikation af testresultater, bør disse procedurer følges. Kontrollér, at analysekontrolværdierne ligger inden for de specificerede koncentrationsområder. Verifikation af analysens dokumenterede egenskaber Se appendiks B i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om fremgangsmåde til verifikation af analysens dokumenterede egenskaber. ARCHITECT Total PSA-analysen tilhører metodegruppe 1. RESULTATER Til udregning af kalibreringskurven anvender ARCHITECT Total PSAanalysen en logistisk 4-parameterdatareduktionsmetode (4PLC, Y-vægtet). Andre resultatenheder Standardresultatenheden for ARCHITECT Total PSA-analysen er ng/ml. Hvis resultatenheden µg/l vælges, benytter systemet omregningsfaktor 1,0. Omregningsformel: (Koncentration i ng/ml) x (1,0) = µg/l Flag Nogle resultater har meddelelser i flagfeltet. Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for en beskrivelse af de flag, der kan forekomme i dette felt. PROCEDUREBEGRÆNSNINGER Prøver fra patienter, der har modtaget præparater med musemonoklonale antistoffer til diagnosticering eller behandling, kan indeholde humane anti-mus-antistoffer (HAMA-effekt). Disse prøver kan udvise enten falsk forhøjede eller for lave værdier ved anvendelse af reagenssæt, der indeholder monoklonale antistoffer fra mus. 26,27 ARCHITECT Total PSA-reagenser indeholder en komponent, der reducerer effekten af HAMA-reaktive prøver. Der kan være behov for yderligere kliniske eller diagnostiske oplysninger for at afgøre patientstatus. Heterofile antistoffer i humant serum kan reagere med reagensimmunglobulin og dermed interferere med in vitro-immunanalyser. 28 Patienter, som ofte er i kontakt med dyr eller serumprodukter fra dyr, kan have tendens til denne interferens, og afvigende værdier kan ses. Yderligere oplysninger kan være påkrævet til diagnosticering. Koncentrationen af PSA, der er bestemt med analyser fra forskellige fabrikanter, kan i en given prøve variere på grund af forskelle mellem analysemetoder, kalibrering og reagensspecificitet. 1,29,30 Kvalitetskontrolprøver kan fremstilles ved at opblande sædvæske- PSA i en human serummatrix. PSA i serum og sædvæske kan eksistere i forskellige former. Koncentrationen af PSA i disse kontroller, bestemt ved analyser fra andre fabrikanter, kan variere på grund af forskelle i analysemetode, kalibrering, reagensspecificitet og den form, som PSA er til stede i. Det er derfor vigtigt at bruge analysespecifikke værdier til at evaluere kontrolresultaterne. Hormonbehandling kan påvirke PSA-ekspressionen, og et lavt PSA-niveau efter enhver behandling, der omfatter hormoner, afspejler derfor muligvis ikke tilstedeværelsen af tilbageværende eller recidiverende sygdom korrekt. 31 I de fleste tilfælde udviser prøver udtaget fra patienter umiddelbart efter digital rektaleksploration ingen klinisk signifikant forhøjelse af PSA-niveauet. 32 Prostatamassage, ultralydsscanning og nålebiopsi kan dog forårsage klinisk signifikante forhøjelser. 33 PSA-niveauet kan også være forhøjet efter ejakulation. 34 Aktivt, frit PSA i serum ved blodprøvetagning kan efterfølgende indgå i kompleks med serumproteasehæmmere, især alfa-2- makroglobulin, hvilket kan medføre et hurtigt fald i PSA-niveauerne af den aktive form af frit PSA. 35 PSA-koncentration i serum bør ikke fortolkes som endegyldigt bevis for tilstedeværelse eller fravær af prostatacancer. Forhøjet PSA-koncentration kan ses i serum hos patienter med benign prostatahyperplasi eller andre ikke-maligne forstyrrelser og ved prostatacancer. Endvidere er lav PSA-koncentration ikke altid tegn på fravær af cancer. PSA-værdien bør anvendes sammen med oplysninger fra kliniske studier og andre diagnostiske metoder, f.eks. digital rektaleksploration. Visse tilfælde af tidlig prostatacancer påvises ikke nødvendigvis ved PSA-testning eller digital rektaleksploration. Cancerdiagnosticering kræver prostatabiopsi. FORVENTEDE VÆRDIER VED PÅVISNING AF PROSTATA- CANCER [Værdier fra 2000-analyseinstrumentet.] Der blev udført et prospektivt studie på 7 kliniske laboratorier for at vise, at PSA, sammen med digital rektaleksploration, med fordel kan anvendes til påvisning af prostatacancer. Alle kliniske data, som blev fremlagt til understøttelse af effekten af påvisning, blev genereret på System med ARCHITECT Total PSA-analysereagenser. I alt 531 mænd på 50 år eller derover deltog i studiet. Alle personer fik foretaget biopsi baseret på en initialt forhøjet PSA-værdi og/eller et mistænkeligt rektaleksplorationsresultat. I nedenstående tabel vises fordelingen af ARCHITECT Total PSA-resultaterne: 5

6 Fordeling af ARCHITECT Total PSA-resultaterne PSA 4,0 PSA > 4,0 Total DRE- b ,0% 60,1% 66,1% DRE+ a ,1% 15,8% 33,9% Total ,1% 75,9% 100,0% Bemærk: 499 patienter blev testet positive ved DRE og/eller PSA. a DRE+: Digital rektaleksploration (med mistanke om cancer) b DRE-: Digital rektaleksploration (uden mistanke om cancer) De positive prædiktive værdier for forskellige kombinationer af DRE og PSA er vist grafisk i figuren og i tabellen nedenfor. Positiv prædiktiv værdi 64,3 ARCHITECT Total PSA (ng/ml) Positiv prædiktiv værdi (%) 37,2 39,2 DRE+ PSA > 4,0 13,5 PSA 4,0 PSA > 4,0 og DRE+ og DRE- Detektionsmetode Positive prædiktive værdier Positiv Antal personer prædiktiv med cancer/ Påvisnings- værdi Antal personer med metode (%)* mistanke om cancer DRE+ 37,2 67/180 (30,1-44,7) PSA > 4,0 39,2 158/403 (34,4-44,2) PSA 4,0 og DRE+ 13,5 13/96 (7,4-22,0) PSA > 4,0 og DRE- 32,6 104/319 (27,5-38,0) PSA > 4,0 og DRE+ 64,3 54/84 (53,1-74,4) PSA > 4,0 eller DRE+ 34,3 171/499 (30,1-38,6) * 95%-konfidensinterval (nederste grænse - øverste grænse) Der blev påvist cancer hos 177 af de 531 personer. Den samlede cancerpåvisning var 96,6 % (171/177), når mindst én af påvisningsmetoderne viste mistænkelige resultater, 30,5 % (54/177) når begge påvisningsmetoder viste mistænkelige resultater, 58,8 % (104/177) når påvisningsmetoden var PSA alene og 7,3 % (13/177) når påvisningsmetoden var digital rektaleksploration alene. KORRELATION For at vise at ARCHITECT Total PSA-analysen giver resultater, der kan sammenlignes med AxSYM Total PSA-analysen, blev der udført en lineær mindste kvadraters-regressionsanalyse, der sammen lignede PSA-værdierne for kliniske prøver målt på begge analyseinstrumenter. Sammenligningen viste en korrelationskoefficient på 0,987, en hældning på 1,06 og en Y-skæring på 0,344 for prøver inden for området < 100 ng/ml. Se følgende figur: 32,6 PSA > 4,0 og DRE+ 34,3 PSA > 4,0 el. DRE+ Denne sammenligning viser, at resultater opnået med ARCHITECT Total PSA-analysen er ækvivalente med resultater opnået med AxSYM Total PSA-analysen. PSA-koncentration i serum bør uanset værdien ikke fortolkes som endegyldigt bevis for tilstedeværelse eller fravær af prostatacancer. Endvidere bør PSA-testning udføres sammen med digital rektaleksploration, da PSA-måling og digital rektaleksploration anvendt sammen påviser størst antal cancertilfælde. Cancerdiagnosticering kræver prostatabiopsi. FORVENTEDE VÆRDIER [Værdier fra 2000-analyseinstrumentet.] Fordelingen af ARCHITECT Total PSA -analyseværdier, der blev bestemt ud fra prøver, er vist i følgende tabel: Fordelingen af ARCHITECT Total PSA-værdier Procent (%) Antal 0-4,0 >4,0-10 >10-30 >30-60 >60 patienter (ng/ml) (ng/ml) (ng/ml) (ng/ml) (ng/ml) Tilsyneladende raske patienter Kvinder ,0 0,0 0,0 0,0 0,0 Mænd 40 til ,0 0,0 0,0 0,0 0,0 Mænd 50 til ,5 2,5 0,0 0,0 0,0 Mænd 60 til ,5 6,5 0,0 0,0 0,0 Mænd 70 til ,9 7,3 0,8 0,0 0,0 Ikke-malign sygdom BPH ,6 42,3 12,8 1,1 1,1 Cirrose 89 94,4 3,4 1,1 0,0 1,1 Urogenital ,7 7,3 1,3 0,7 0,0 Prostatitis ,5 40,1 11,3 1,4 0,7 Renalt ,0 5,7 2,9 1,4 0,0 Malign sygdom AxSYM Total PSA (ng/ml) Prostatastadium 94 46,8 30,9 17,0 1,1 4,3 A Prostatastadium ,1 44,0 23,5 0,6 1,8 B Prostatastadium ,2 22,7 29,1 12,8 9,2 C Prostatastadium 95 15,8 12,6 32,6 10,5 28,4 D Urogenital ,9 3,9 1,9 0,6 0,6 6

7 I dette studie udviste 95,5 % af prøverne fra tilsyneladende raske mænd (n = 466) værdier på højst 4,0 ng/ml. Det anbefales, at laboratoriet fastsætter sit eget referenceområde for den population, der undersøges. Tallene for maligne sygdomme i fordelingstabellen stammer primært fra cancerpatienter, herunder både aktive (klinisk bevis på sygdomsudvikling) og inaktive (intet klinisk bevis på sygdomsudvikling) sygdomstilstande. Ved ændring af PSA-analysemetoder under overvågning af en patient bør der foretages yderligere sekventiel testning for at konfirmere basisværdierne. YDEEVNE Præcision a Præcisionen for ARCHITECT Total PSA-analysen er 8 %. Præcisionen blev bestemt ud fra National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS) protokol EP5-A. 36 Seks prøver bestående af 3 serumbaserede paneler og 3 total PSA-kontroller blev analyseret på 3 instrumenter i dobbeltbestemmelse 2 gange dagligt i 20 dage (n = 80 for hver prøve) med et enkelt reagenslot og en enkelt kalibrering. Data fra dette studie er opstillet i følgende tabel.* ARCHITECT Total PSA-analysens reproducerbarhed Instrument Middel total PSA Intraseriel Total Prøve (ng/ml) SD %CV SD %CV Lav kontrol 1 0,498 0,0087 1,8 0,0109 2,2 2 0,511 0,0203 4,0 0,0237 4,6 3 0,504 0,0131 2,6 0,0194 3,9 Mellemkontrol 1 4,030 0,1036 2,6 0,1107 2,7 2 4,104 0,1517 3,7 0,1836 4,5 3 4,101 0,1218 3,0 0,1714 4,2 Høj kontrol 1 24,565 0,7187 2,9 0,8121 3,3 2 24,558 1,0663 4,3 1,1691 4,8 3 24,210 0,7742 3,2 1,5808 6,5 Panel 1 1 4,130 0,1129 2,7 0,3230 7,8 2 4,109 0,1479 3,6 0,1665 4,1 3 4,139 0,1042 2,5 0,2099 5,1 Panel ,191 1,6925 3,4 1,8405 3,7 2 46,943 2,0034 4,3 2,6271 5,6 3 47,770 1,5792 3,3 3,4934 7,3 Panel ,952 2,0804 3,1 4,1157 6,1 2 62,631 3,1461 5,0 3,2269 5,2 3 61,632 1,5634 2,5 5,5307 9,0 * Repræsentative data for ydeevne. Resultaterne kan variere fra laboratorium til laboratorium. MÅLEOMRÅDE Måleområdet (rapportområdet) for ARCHITECT Total PSA-analysen er 0,008 ng/ml til 100 ng/ml og er defineret af den nedre grænse for analytisk sensitivitet og den øvre grænse for det udvidede kalibreringsområde. Se afsnittet Prøvefortyndingsprocedurer i denne brugsanvisning for patientprøver med en Total PSA-analyseværdi, der overstiger 100 ng/ml. Genfindelse a Kendte koncentrationer af serum-psa blev tilsat i 10 normale humane serumprøver. Hver prøve blev beriget ved et lavt og et højt niveau. Koncentrationen af total PSA blev bestemt ved hjælp af ARCHITECT Total PSA-analysen, og den deraf resulterende genfindelsesprocent blev udregnet. Middelgenfindelsen var 95,9 % med værdier fra 89,8 % til 99,6 %. Sensitivitet a Funktionel Den funktionelle sensitivitet defineres som den laveste koncentration, der kan måles med en interseriel variationskoefficient (CV), der er mindre end eller lig med 20 %. Den beregnede CV i % for 1 reagenslot fra alle laboratorier blev plottet ind over for middelkoncentrationen for hvert panel. Efter tilpasning af den parametriske kurve blev den funktionelle sensitivitet bestemt til at være mindre end 0,05 ng/ml, hvilket svarer til mindre end 20 % CV på den tilpassede kurve. Analytisk ARCHITECT Total PSA-analysens analytiske sensitivitet er beregnet til at være mindre end 0,008 ng/ml. Denne sensitivitet defineres som koncentrationen ved 2 standardafvigelser over middel-rlu for ARCHITECT Total PSA MasterCheck Level 0 og udgør den lavest målbare total PSA-koncentration, der er forskellig fra 0. Analytisk specificitet a ARCHITECT Total PSA-analysens analytiske specificitet blev bestemt ved testning af serum indeholdende de stoffer, der angives nedenfor. Disse stoffer udviste en interferens, der var mindre end eller lig med 10 % i ARCHITECT Total PSA-analysen ved nedenstående niveauer. INTERFERERENDE STOFFER Testet stof Koncentration Bilirubin 20 mg/dl Hæmoglobin 500 mg/dl Totalprotein 2,0 g/dl & 12,0 g/dl Sur prostatafosfatase 1000 ng/ml Triglycerider 3000 mg/dl Hytrin 10 µg/ml Proscar 25 µg/ml Flomax 1 µg/ml KEMOTERAPEUTIKA Testet stof Koncentration Cyklofosfamid 700 µg/ml Diethylstilbestrol 2 µg/ml Doxorubicin-HCI 16 µg/ml Estramustinfosfat 200 µg/ml Flutamid 10 µg/ml Goserelinacetat 100 ng/ml Lupron 100 µg/ml Megestrolacetat 90 µg/ml Methotrexat 30 µg/ml Afsmitning a Ingen signifikant afsmitning (mindre end 0,5 ppm) blev påvist ved analyseringen af 1 prøve indeholdende ng/ml PSA. I tilfælde hvor PSA-analysen køres lige efter >230 test af ARCHITECT B12- anlysen, kan afsmitning af PSA dog være over 0,5 ppm på grund af proteinaflejringer på prøveopsugningsnålen. For at fastholde optimal systemydeevne og reducere risikoen for afsmitning forårsaget af proteinaflejringer i prøvepipettoropsugningsnålen er det vigtigt at følge procedurerne for rutinevedligeholdelse, som er beskrevet i kapitel 9 i ARCHITECT-brugermanualen, eller se kapitel 10 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om fejlfinding. High dose hook-effekt a High dose hook-effekt er et fænomen, hvorved prøver med meget højt niveau kan give resultater inden for analysens dynamiske måleområde. Der er ikke observeret high dose hook-effekt for ARCHITECT Total PSA-analysen ved analysering af prøver indeholdende op til cirka ng/ml PSA. a [Værdier fra 2000-analyseinstrumentet.] Korrelationsdata ARCHITECT Total PSA-analysereagenserne blev sammenlignet på 2000/i2000 SR og 1000 SR. Resultaterne af prøvetestningen er angivet nedenfor. Korrelationskoefficient Statistisk metode Antal obs. Skæring Hældning Mindste kvadrater Passing- Bablok* 151-0,06 1,05 0, ,03 1,04 0,996 * Lineær regressionsmetode, der ikke forudsætter særlig fordeling af prøver og målefejl. 39 I dette studie lå resultaterne af de testede serumprøver fra 0,046 ng/ml til 81,710 ng/ml med i1000 SR. 7

8 BIBLIOGRAFI 1. McCormack RT, Rittenhouse HG, Finlay JA, et al. Molecular Forms of Prostate-Specific Antigen and the Human Kallikrein Gene Family: A New Era. Urology 1995;45: Graves HCB. Nonprostatic Sources of Prostate-Specific Antigen: A Steroid Hormone-Dependent Phenomenon? Clin Chem 1995;41: Kuriyama M, Wang MC, Papsidero LD, et al. Quantitation of Prostate-Specific Antigen in Serum by a Sensitive Enzyme Immunoassay. Cancer Res 1980;40: Oesterling JE. Prostate Specific Antigen: A Critical Assessment of the Most Useful Tumor Marker for Adenocarcinoma of the Prostate. J Urol 1991;145: Kantoff PW, Talcott JA. The Prostate Specific Antigen. Its Use as a Tumor Marker for Prostate Cancer Hematol Oncol Clin N Amer 1994;8: Partin AW, Oesterling JE. The Clinical Usefulness of Prostate Specific Antigen: Update J Urol 1994;152: Bunting S. A Guide to the Interpretation of Serum Prostate Specific Antigen Levels. Clin Biochem 1995;28: Christensson A, Laurell C-B, Lilja H. Enzymatic Activity of Prostate- Specific Antigen and its Reactions with Extracellular Serine Proteinase Inhibitors. Eur J Biochem 1990;194: Stenman U-H, Leinonen J, Alfthan H, et al. A Complex Between Prostate-Specific Antigen and a1-antichymotrypsin is the Major Form of Prostate-Specific Antigen in Serum of Patients with Prostatic Cancer: Assay of the Complex Improves Clinical Sensitivity for Cancer. Cancer Res 1991;51: Parker SL, Tong T, Bolden S, et al. Cancer Statistics, CA Cancer J Clin 1997;47: Gerber GS, Chodak GW. Routine Screening for Cancer of the Prostate (Review). J Natl Ca Inst 1991;83: Lee F, Littrup PJ, Torp-Pedersen ST, et al. Prostate Cancer: Comparison of Transrectal US and Digital Rectal Examination for Screening. Radiology 1988;168: Cooner WH, Mosely BR, Rutherford CL, et al. Prostate Cancer Detection in a Clinical Urological Practice by Ultrasonography, Digital Rectal Examination and Prostate Specific Antigen. J Urol 1990;143: Catalona WJ, Richie JP, Ahmann FR, et al. Comparison of Digital Rectal Examination and Serum Prostate Specific Antigen in the Early Detection of Prostate Cancer: Results of a Multicenter Clinical Trial of 6,630 Men. J Urol 1994;151: Crawford ED, DeAntoni EP, Etzioni R, et al. Serum Prostate-Specific Antigen and Digital Rectum Examination for Early Detection of Prostate Cancer in a National Community-Based Program. Urology 1996;47: American Urological Association - Early Detection of Prostate Cancer Policy Statement. Board of Directors Minutes Mettlin C, Jones G, Averette H, et al. Defining and Updating the American Cancer Society Guidelines for the Cancer-Related Checkup: Prostate and Endometrial Cancers. CA-A Cancer Journal for Clinicians 1993;43: Walther PJ. Prostate Cancer Screening. Why the Controversy? Surg Oncol Clin NA 1995;4: Jacobson JO. Can Screening for Early-Stage Prostate Cancer be Rationalized? Hematol Oncol Clinics NA 1996;10: US Department of Labor, Occupational Safety and Health Administration, 29 CFR Part , Bloodborne pathogens. 21. US Department of Health and Human Services. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. 5th ed. Washington, DC: US Government Printing Office; December World Health Organization. Laboratory Biosafety Manual. 3rd ed. Geneva: World Health Organization; Clinical and Laboratory Standards Institute. Protection of Laboratory Workers from Occupationally Acquired Infections: Approved Guideline Third Edition. CLSI Document M29-A3. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; Woodrum D, French C, Shamel LB. Stability of Free Prostate-Specific Antigen in Serum Samples Under a Variety of Sample Collection and Sample Storage Conditions. Urology (Suppl. 6A)1996;48: Piironen T, Pettersson K, Suonpää M, et al. In Vitro Stability of Free Prostate-Specific Antigen (PSA) and Prostate-Specific Antigen (PSA) Complexed to a1-antichymotrypsin in Blood Samples. Urology (Suppl. 6A) 1996;48: Primus FJ, Kelley EA, Hansen HJ, et al. Sandwich -Type Immunoassay of Carcinoembryonic Antigen in Patients Receiving Murine Monoclonal Antibodies for Diagnosis and Therapy. Clin Chem 1988;34: Schroff RW, Foon KA, Beatty SM, et al. Human Anti-Murine Immunoglobulin Responses in Patients Receiving Monoclonal Antibody Therapy. Cancer Res 1985;45: Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic Antibodies: A Problem for All Immunoassays. Clin Chem 1988;34(1): Chan DW, Bruzek DJ, Oesterling JE, et al. Prostate-Specific Antigen as a Marker for Prostatic Cancer: A Monoclonal and a Polyclonal Immunoassay Compared. Clin Chem 1987;33: Hortin GL, Bahnson RR, Daft M, et al. Differences in Values Obtained with 2 Assays of Prostate Specific Antigen. J Urol 1988;139: Morgan WR, Zincke H, Rainwater LM, et al. Prostate Specific Antigen Values after Radical Retropubic Prostatectomy for Adenocarcinoma of the Prostate: Impact of Adjuvant Treatment (Hormonal and Radiation). J Urol 1991;145: Chybowski FM, Bergstralh EJ, Oesterling JE. The Effect of Digital Rectal Examination on the Serum Prostate Specific Antigen Levels. J Urol 1992;148: Yuan JJJ, Coplen DE, Petros JA, et al. Effects of Rectal Examination, Prostatic Massage, Ultrasonography and Needle Biopsy on Serum Prostate Specific Antigen Levels. J Urol 1992;147: Tchetgen M-B, Song JT, Strawderman M, et al. Ejaculation Increases the Serum Prostate-Specific Antigen Concentration. Urology 1996;47: Stenman U-H, Leinonen J, Zhang W-M. Problems in the Determination of Prostate Specific Antigen. Eur J Clin Chem Biochem 1996;34: NCCLS. Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices; Approved Guideline. NCCLS document EP5-A (ISBN X). NCCLS, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA , USA, Watt KWK, Lee P-J, M Timkulu T, et al. Human Prostate-Specific Antigen: Structural and Functional Similarity with Serine Proteases. Proc Natl Acad Sci USA 1986;83: Belanger A, van Halbeek H, Graves HCB, et al. Molecular Mass and Carbohydrate Structure of Prostate Specific Antigen: Studies for Establishment of an International PSA Standard. Prostate 1995;27: Passing H, Bablok W. A New Biometrical Procedure for Testing the Equality of Measurements from Two Different Analytical Methods. J Clin Chem. Clin Biochem 1983;21; ARCHITECT, AxSYM, Chemiflex og MasterCheck er varemærker tilhørende Abbott Laboratories i visse jurisdiktioner. Abbott Ireland Diagnostics Division Finisklin Business Park Sligo Ireland Juni , 2012 Abbott Laboratories