ACTIVATED ALANINE AMINOTRANSFERASE

Transkript

1 ACTIVATED ALANINE AMINOTRANSFERASE da ACTIVATED ALANINE AMINOTRANSFERASE 8L92 B8L9X6 G2-5262/R02 Denne brugsanvisning indeholder oplysninger om kørsel af Activated Alanine Aminotransferase-analysen på ARCHITECT c Systems. BEMÆRK: Ændringer er markeret BEMÆRK: Det anbefales at læse og følge denne brugsanvisning nøje, før produktet tages i brug. Hvis anvisningerne ikke følges, kan testresultaternes pålidelighed ikke garanteres. Kundeservice: Kontakt den lokale Abbott-repræsentant, eller find landespecifikke kontakt oplysninger på Symbolforklaring Koncentration Reagens 2 Sættets indhold Bestillingsnummer Repræsentant i EU Serienummer Indholdsstoffer Medicinsk udstyr til in vitrodiagnostik Se brugsanvisningen. Fabrikant Lotnummer Reagens 1 Temperaturbegrænsning Udløbsdato December , 2011 Abbott Laboratories 1

2 BETEGNELSE ACTIVATED ALANINE AMINOTRANSFERASE ANVENDELSE Activated Alanine Aminotransferase-analysen (aktiveret ALAT) anvendes til kvantitativ bestemmelse af alaninaminotransferase i humant serum eller plasma. RESUME OG ANALYSEFORKLARING Alaninaminotransferase (ALAT), også kaldet glutamatpyruvattransaminase (GPT), er et enzym, der medvirker ved aminosyre omsætningen. Det findes i mange vævstyper, men de højeste niveauer findes i leverog nyrevævet. Ved vævsnedbrydning frigives enzymet i cellerne til blodbanen. Ved mange forskellige sygdomme med leverpåvirkning, f.eks. hepatitis, mononucleose og cirrose, findes markant forhøjede ALATniveauer i serum. Disse meget høje ALAT-niveauer ses normalt ikke ved andre sygdomsprocesser, f.eks. myokardieinfarkt, og ALAT regnes derfor som en ret specifik indikator for leversygdom. ANALYSEPRINCIP ALAT i prøven katalyserer overførslen af aminogruppen fra L-alanin til 2-oxoglutarat, ved tilstedeværelse af pyridoxal-5 -fosfat, og danner derved pyruvat og L-glutamat. Ved tilstedeværelse af NADH og laktat dehydrogenase (LD) reduceres pyruvat til L-laktat. Ved denne reaktion oxyderes NADH til NAD. Reaktionen overvåges ved at måle absorbansens reduktionshastighed ved 340 nm. Den er forårsaget af oxyderingen af NADH til NAD. ALAT, P-5 -P L-alanin + 2-oxoglutarat Pyruvat + L-glutamat LD Pyruvat + NADH L-laktat + NAD + Aktiveret ALAT-reagenset er baseret på den optimerede formulering som anbefalet af IFCC (International Federation of Clinical Chemistry). 1,2 Metode: IFCC REAGENSER Reagenssæt Aktiveret ALAT-analysen leveres i væskeform og er klar til brug. Dobbeltreagenssættet indeholder: 8L x 40 ml 10 x 40 ml Estimeret antal test pr. reagenssæt: 2.750* 8L x 68 ml 10 x 68 ml Estimeret antal test pr. reagenssæt: 4.820* * Beregningen er baseret på den mindste reagensmængde pr. reagenssæt. Reaktive indholdsstoffer β-nadh LD Pyridoxal-fosfatmonohydrat TRIS L-alanin 2-oxoglutarsyre TRIS Koncentration 0,369 mmol/l U/l 0,205 mmol/l 100 mmol/l mmol/l 30,75 mmol/l 105 mmol/l HÅNDTERING OG OPBEVARING AF REAGENSER Håndtering af reagenser Fjern eventuelle luftbobler i reagenskassetten med en ny rørepind. Alternativt kan reagenserne henstå ved en passende temperatur, indtil boblerne er forsvundet. For at minimere reagenstab må der ikke anvendes dråbepipette til at fjerne bobler. VIGTIGT: Bobler i reagenserne kan påvirke målingen af reagensniveauet i kassetten og medføre utilstrækkelig reagensaspiration, hvilket kan påvirke resultaterne. Opbevaring af reagenser Uåbnede reagenser er holdbare indtil udløbsdatoen, når de opbevares ved 2-8 C. Reagenserne er holdbare i 30 dage, når de opbevares åbnet i systemet. Indikation af henfald Ustabilitet eller henfald bør forventes, hvis der er udfældninger, synlige tegn på udsivning, ekstrem turbiditet eller mikrobiel vækst, hvis kalibreringen ikke overholder kriterierne i den tilhørende brugsanvisning og/eller i ARCHITECT-brugermanualen, eller hvis kontrollerne ikke overholder de relevante kriterier. VIGTIGE FORHOLDSREGLER Forholdsregler ved anvendelse Til in vitro-diagnostisk brug. Anvend ikke komponenter efter udløbsdatoen. Bland ikke indholdet fra forskellige lotnumre. Sikkerhedsdatablade er til rådighed på eller kan fås ved henvendelse til kundeservice. VIGTIGT: Dette produkt skal behandles på samme måde som humane prøver. Det anbefales, at alt materiale af human oprindelse betragtes som potentielt smittefarligt og håndteres i overensstemmelse med det amerikanske arbejdsmiljøinstitut OSHA s standard Bloodborne Pathogens. 3 Biosafety Level 2 4 eller andre gældende sikkerheds foranstaltninger for biologisk materiale 5,6 bør anvendes ved håndtering af materiale, der indeholder eller mistænkes for at indeholde smittefarlige stoffer. PRØVETAGNING OG -HÅNDTERING Egnet prøvemateriale Serum og plasma er egnet prøvemateriale. VIGTIGT: Erytrocytter indeholder ca. 7 gange mere ALAT end serum. 7 Hæmolyse i serum eller plasma kan forhøje testresultatet. Serum: Brug serum udtaget ved standardvenepunktur i glas- eller plastikrør med eller uden gelbarriere. Sørg for, at fuldstændig koagulation har fundet sted inden centrifugering. Centrifugér i henhold til prøverørs fabrikantens anvisninger for at sikre korrekt separation af serum fra blodlegemerne. Nogle prøver kan udvise forlænget koagulationstid, især hvis de er udtaget fra patienter i antikoagulant eller trombolytisk behandling. Der kan dannes fibrintråde i sådanne serumprøver, hvilket kan medføre fejlagtige resultater. Plasma: Brug plasma udtaget ved standardvenepunktur i glas- eller plastikrør med eller uden gelbarriere. Acceptable antikoagulanser er litiumheparin (med eller uden gelbarriere), natriumheparin og EDTA. Sørg for tilstrækkelig centrifugering til at fjerne blodplader. Centrifugér i henhold til prøverørs fabrikantens anvisninger for at sikre korrekt separation af plasma fra blodlegemerne. Se afsnittet ANALYSEPARAMETRE for i denne brugsanvisning eller kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om samlede prøvemængdekrav. 2

3 PRØVETAGNING OG -HÅNDTERING (fortsat) Prøveopbevaring Serum og plasma Det anbefales, at prøverne analyseres på udtagningsdagen. 8,9 Flere publikationer har defineret opbevaringsbetingelser for ALAT Der er vist eksempler i tabellen nedenfor. Temperatur Maksimal Bibliografi opbevaring 30 C 3 dage C 7 dage C 60 dage 20 Ved opbevaring af prøver i 8 dage ved -20 C blev der observeret en reduktion i ALAT-aktivitet på 11%. Ved opbevaring i 1 måned ved -20 C blev der observeret en reduktion i ALAT-aktivitet på 20%. 21 BEMÆRK: Gemte prøver skal kontrolleres for udfældninger. Hvis der er udfældninger i prøven, skal den blandes og centrifugeres før analysering for at fjerne udfældningerne. PROCEDURE Nødvendige produkter 8L92 Activated ALT Reagent Kit Nødvendigt tilbehør og udstyr Kontrolmateriale Saltvand (0,85% til 0,90% NaCl) til prøver, som skal fortyndes Analyseprocedure Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om kørsel af en analyse. Prøvefortyndingsprocedurer ARCHITECT c Systems har en automatisk fortyndings funktion. For yderligere oplysninger henvises til kapitel 2 i ARCHITECT-brugermanualen. Serum og plasma: Prøver, hvor ALAT-værdien overstiger U/l (4.772 U/l for det lineære flex rate-måleområde), markeres med et flag og kan fortyndes ved hjælp af enten den automatiserede eller manuelle fortyndingsprocedure. Automatiseret fortyndingsprocedure Hvis den automatiserede fortyndingsprocedure anvendes, udfører systemet en fortynding af prøven i forholdet 1:5 og korrigerer automatisk enzymaktivitetsværdien ved at gange resultatet med den korrekte fortyndingsfaktor. Manuel fortyndingsprocedure Manuelle fortyndinger skal foretages som følger: Brug saltvand (0,85% til 0,90% NaCl) til at fortynde prøven. Det er brugerens opgave at indtaste fortyndingsfaktoren på skærmbilledet for bestilling af patientprøver eller kontroller. Systemet anvender denne fortyndingsfaktor til automatisk at korrigere enzymaktivitetsværdien ved at gange resultatet med den indtastede faktor. Hvis brugeren ikke indtaster fortyndingsfaktoren, skal resultatet ganges med den relevante fortyndingsfaktor, før resultatet frigives. BEMÆRK: Hvis en fortyndet prøve er markeret med et flag, der angiver, at resultatet ligger under den nedre lineære grænseværdi, må resultatet ikke frigives. Gentag analysen med en korrekt fortynding. Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om bestilling af fortyndinger. KALIBRERING Kalibreringen er holdbar i ca. 30 dage (720 timer), og kalibrering er påkrævet, når et nyt reagenslotnummer tages i brug. Kontrollér kalibreringen med mindst 2 kontrolniveauer i henhold til laboratoriets krav til kvalitetskontrol. Hvis resultaterne af kvalitetskontrollen ligger uden for acceptgrænserne, kan det være nødvendigt at foretage rekalibrering. Der skal indtastes en kalibreringsfaktor i vinduet Configure assay parameters, visningen Calibration. Se afsnittet ANALYSEPARAMETRE i denne brugsanvisning for oplysninger om den specifikke faktor. Se kapitel 6 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om kalibrering af en analyse. KVALITETSKONTROL Nedenstående proces anbefales af Abbott Laboratories til kvalitetskontrol. For yderligere krav til kvalitetskontrol og eventuel korrigerende handling henvises til laboratoriets SOP og/eller kvalitetssikringsbestemmelser. Der skal køres 2 kontrolniveauer (normalt og unormalt) mindst 1 gang i døgnet. Hvis laboratoriets procedurer for kvalitetskontrol kræver hyppigere kontrolovervågning, bør disse følges. Hvis resultaterne af kvalitetskontrollen ikke ligger inden for den af laboratoriet fastlagte acceptgrænse, kan patientresultaterne være upålidelige. Følg laboratoriets procedurer for kvalitetskontrol. Rekalibrering kan være påkrævet. Gennemgå kvalitetskontrolresultater og acceptgrænser efter skift til nyt reagenslot. RESULTATER Se appendiks C i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om resultatberegning. Se afsnittene FORVENTEDE VÆRDIER og YDEEVNE i denne brugsanvisning for repræsentative data om ydeevne. Resultater fra forskellige laboratorier kan variere. PROCEDUREBEGRÆNSNINGER Se afsnittene PRØVETAGNING OG -HÅNDTERING og YDEEVNE i denne brugsanvisning. Alle aktiveret ALAT-resultater, herunder <6 U/l bør evalueres ved at foretage en sammenligning med andre klinisk relevante oplysninger. FORVENTEDE VÆRDIER Referenceområde Serum 22 /plasma Område (U/l) Voksne 0-55 Det anbefales, at det enkelte laboratorium fastsætter sit eget referenceområde på baggrund af lokale forhold og patientpopulationen Offentliggjorte referenceområdestudier har vist, at ALAT-aktiviteten varierer efter BMI (Body-Mass Index), demografiske og geografiske forhold. 23,24 Ved anvendelse af en population, der efter strenge kriterier var udvalgt til kun at omfatte raske personer, blev der påvist en øvre referencegrænse på 19 U/l for kvinder og 30 U/l for mænd. 25 Vejledende øvre referencegrænser baseret på en hospitalsindlagt tysk population er blevet offentliggjort for IFCC-referenceproceduren. For ALAT var disse værdier 34 U/l for kvinder og 45 U/l for mænd. 26 YDEEVNE Lineært måleområde Aktiveret ALAT er lineært op til U/l. Det lineære flex rate-måleområde er U/l. Brugeren skal ændre den højeste lineære værdi til skærmbilledet Configure assay parameters, visningen Results under ARCHITECT csystem ASSAY Parameters. Det lineære måleområde er verificeret med CLSI s (Clinical and Laboratory Standards Institute) protokol NCCLS EP6-A. 27 Detektionsgrænse Detektionsgrænsen for aktiveret ALAT er 5 U/l. Detektionsgrænsen svarer til middelkoncentrationen af en analysekomponentfri prøve + 2 SD, hvor SD = den puljede analysekomponentfrie prøves intraserielle standardafvigelse. En undersøgelse udført på ARCHITECT c Systems gav en detektionsgrænse for aktiveret ALAT på 4,8 U/l. Kvantiteringsgrænse Kvantiteringsgrænsen for aktiveret ALAT er 5,7 U/l. Kvantiterings grænsen svarer til den analysekomponentkoncentration, hvor CV = 20%. 3

4 YDEEVNE (fortsat) Interfererende stoffer Interferenspåvirkninger blev vurderet med dose response- og paired difference-metoder ved analysekomponentens medicinske beslutningsniveau. Interfererende stof Bilirubin Hæmoglobin Intralipid Koncentration af interfererende stof N Fastlagt niveau (U/l) Målt (% af fastlagt niveau) 30 mg/dl (513 µmol/l) 4 58, mg/dl (1.026 µmol/l) 4 58, mg/dl (7,5 g/l) 4 63, mg/dl (10,0 g/l) 4 63, mg/dl (5,0 g/l) 4 63, mg/dl (7,5 g/l) 3 63,9 99 Bilirubinopløsninger i de ovenfor anførte koncentrationer blev klargjort ved tilsætning af en bilirubinstamopløsning i humane serumpuljer. Hæmoglobinopløsninger i de ovenfor anførte koncentrationer blev klar gjort ved tilsætning af hæmolysat i humane serumpuljer. Intralipidopløsninger i de ovenfor anførte koncentrationer blev klargjort ved tilsætning af Intralipid i humane serumpuljer. Interferens fra medicin eller endogene stoffer kan påvirke resultaterne. 28 Præcision Aktiveret ALAT-analysens impræcision er 6,0% total CV. Repræsentative data fra studier med CLSI s protokol NCCLS EP5-A2 29 er vist nedenfor. Kontrol Niveau 1 Niveau 2 N Middelværdi (U/l) SD 0,45 0,42 Intraseriel %CV 1,2 0,5 Interseriel SD 0,44 0,26 %CV 1,2 0,3 Dag til dag SD 0,65 1,41 %CV 1,8 1,7 I alt SD 0,90 1,50 %CV 2,5 1,8 Metodesammenligning Der blev udført korrelationsstudier med CLSI s protokol NCCLS EP9 A2. 30 Serumresultater fra aktiveret ALAT-analysen på et ARCHITECT c System blev sammenlignet med resultaterne fra aktiveret ALAT-analysen (ALT-A 8D36) på AEROSET-systemet. Aktiveret ALAT på ARCHITECT vs. Abbott ALT-A på AEROSET N 106 Y-skæring 7,72 Korrelationskoefficient 0,998 Hældning 1,00 Område (U/l) BIBLIOGRAFI 1. Bergmeyer HU, Hørder M, Rej R. Approved recommendation (1985) on IFCC methods for the measurement of catalytic concentration of enzymes. J Clin Chem Clin Biochem 1986;24(7): Schumann G, Bonora R, Ceriotti F, et al. IFCC primary reference procedures for the measurement of catalytic activity concentrations of enzymes at 37 degrees C. International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine. Part 4. Reference procedure for the measurement of catalytic concentration of alanine aminotransferase. Clin Chem Lab Med 2002;40(7): US Department of Labor, Occupational Safety and Health Administration. 29 CFR Part Bloodborne Pathogens. 4. US Department of Health and Human Services. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories, 5th ed. Washington, DC: US Government Printing Office, January World Health Organization. Laboratory Biosafety Manual, 3rd ed. Geneva: World Health Organization, Sewell DL, Bove KE, Callihan DR, et al. Protection of Laboratory Workers from Occupationally Acquired Infections; Approved Guideline Third Edition (M29-A3). Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute, Rej R. Aminotransferases in disease. Clin Lab Med 1989;9(4): Burtis CA, Ashwood ER, Bruns DE, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics, 4th ed. St. Louis, MO: Elsevier; 2006: Cuccherini B, Nussbaum SJ, Seeff LB, et al. Stability of aspartate aminotransferase and alanine aminotransferase activities. J Lab Clin Med 1983;102(3): Williams KM, Williams AE, Kline LM, et al. Stability of serum alanine aminotransferase activity. Transfusion 1987;27(5): Henry RJ, Cannon DC, Winkelman JW. Clinical Chemistry Principles and Technics, 2nd ed. Hagerstown, MD: Harper and Row; 1974: Ruby SG, Reiber NE, Lonser RE. Pre-analytical variation in alanine aminotransferase. Clin Chem 1988;34(4) Heins M, Heil W, Withold W. Storage of serum or whole blood samples? Effects of time and temperature on 22 serum analytes. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1995;33(4): Dale JC, Pruett SK. Phlebotomy a minimalist approach. Mayo Clin Proc 1993;68(3): Young DS. Effects of Preanalytical Variables on Clinical Laboratory Tests, 2nd ed. Washington, DC: AACC Press; 1997: Elfath D, Cooney J, McDaniel R, et al. Effect of frozen storage of serum on the level of 22 chemistry analytes [Poster 0102 presented at AACC 43rd National Meeting in Washington, DC: July 30, 1991]. Clin Chem 1991;37(6): Faulkner AM, Lukes-Hall AM, White GW. Evaluation of the Greiner plasma separator blood tube. Ann Clin Biochem 1990;27: Wilding P, Zilva JF, Wilde CE. Transport of specimens for clinical chemistry analysis. Ann Clin Biochem 1977;14(6): Schwartz MK. Interferences in diagnostic biochemical procedures. Adv Clin Chem 1973;16: Mosley JW, Goodwin RF. Stability of serum glutamic pyruvic transaminase activity on storage. Am J Clin Pathol 1965;44: Donnelly JG, Soldin SJ, Nealon DA, et al. Stability of twenty-five analytes in human serum at 22 C, 4 C, and -20 C. Pediatr Pathol Lab Med 1995;15(6): Murray RL. Alanine aminotransferase. In: Kaplan LA, Pesce AJ, editors. Clinical Chemistry Theory, Analysis, and Correlation, 2nd ed. St. Louis, MO: CV Mosby; 1989: Sherman KE, Dodd RY, et al. Alanine aminotransferase levels among volunteer blood donors: geographic variation and risk factors. J Infect Dis 1982;145(3): Sherman KE. Alanine aminotransferase in clinical practice. A review. Arch Intern Med 1991;151(2); Prati D, Taioli E, Zanella A, et al. Updated definitions of healthy ranges for serum alanine aminotransferase levels. Ann Intern Med 2002; 137(1): Schumann G, Klauke R. New IFCC reference procedures for the determination of catalytic activity concentrations of five enzymes in serum: preliminary upper reference limits obtained in hospitalized subjects. Clin Chim Acta 2003;327(1 2):

5 BIBLIOGRAFI (fortsat) 27. Tholen DW, Kroll M, Astles JR, et al. Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement Procedures: A Statistical Approach; Approved Guideline (EP6-A). Wayne, PA: The National Committee for Clinical Laboratory Standards, Young DS. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, 4th ed. Washington, DC: AACC Press; 1995: Tholen DW, Kallner A, Kennedy JW, et al. Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline Second Edition (EP5-A2). Wayne, PA: The National Committee for Clinical Laboratory Standards, Krouwer JS, Tholen DW, Garber CC, et al. Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples; Approved Guideline Second Edition (EP9-A2). Wayne, PA: The National Committee for Clinical Laboratory Standards, VAREMÆRKER ARCHITECT c System-familien består af c 4000-, c og c analyseinstrumenter. AEROSET, ARCHITECT, c 4000, c 8000, c 16000, c System og SmartWash er varemærker tilhørende Abbott Laboratories i visse jurisdiktioner. Alle varemærker tilhører de respektive ejere. Abbott Laboratories Abbott Park, IL USA ABBOTT Max-Planck-Ring Wiesbaden Germany

6 ANALYSEPARAMETRE TIL ARCHITECT csystems Aktiveret alaninaminotransferase i serum/plasma Masseenheder og SI-enheder Configure assay parameters General Configure assay parameters SmartWash General о Calibration о SmartWash о Results о Interpretation о Assay: A-ALT Type: Photometric Version: General о Calibration SmartWash о Results о Interpretation Assay: A-ALT Number: 1032 Run controls for onboard reagents by: COMPONENT REAGENT / ASSAY WASH Volume Replicates Lot Cuvette Trig*** 10% Detergent B 345 Reaction definition о Reagent / Sample о Validity checks ***ikke påkrævet til ARCHITECT-softwareversion 7.00 og nyere. Reaction mode: Rate down Primary Secondary Read times Wavelength: 340 / 548 Main: Last required read: 33 Flex: Absorbance range: Color correction: Sample blank type: None о Reaction definition Reagent / Sample о Validity checks R1 R2 Reagent: AALT9 Reagent volume: Diluent: Saline Water volume: Diluent dispense mode: Type 0 Dispense mode: Type 0 Type 0 Diluted Default Dilution name Sample sample Diluent Water Dilution factor dilution STANDARD : 6.0 = 1:1.00 1:5 : = 1:5.00 о : = о о Reaction definition о Reagent / Sample Validity checks Reaction check: None Rate linearity %: 10 Configure assay parameters Calibration о General Calibration о SmartWash о Results о Interpretation Assay: A-ALT Calibration method: Factor Factor: Calibrators о Volumes о Intervals о Validity checks Calibrator set: Calibrator level: Concentration: None Blank: Water 0 Replicates: 3 [Range 1 3] о Calibrators Volumes о Intervals о Validity checks Calibrator: Diluted Calibrator level Sample sample Diluent Water Blank: Water 6.0 Configure assay parameters Results о General о Calibration о SmartWash Results о Interpretation Assay: A-ALT Assay number 1032 Dilution default range: Result units: U/L Low-Linearity: 6** High-Linearity: 2855 Gender and age specific ranges:* GENDER AGE (UNITS) NORMAL EXTREME Either (Y) 0 55 Configure result units Assay: A-ALT Version: Result units: U/L Decimal places: 0 [Range 0 4] Correlation factor: Intercept: о Calibrators о Volumes Intervals о Validity checks Calibration intervals: Full interval: 720 (hours) о Calibrators о Volumes о Intervals Validity checks Blank absorbance range: Versionsnumrene kan variere pga. forskelle i instrumentsystemer og konfigurering af enheder. Parameteret er tilgængeligt i ARCHITECT-softwareversion 7.00 og nyere. ** Low-Linearity er kvantiteringsgrænsen rundet op til antallet af decimalpladser, der er defineret i feltet Decimal places. * Brugerdefineret. 6