Diagnostikken rundt på ½ time

Transkript

1 Diagnostikken rundt på ½ time af Charlotte Hoffmann-Timmol Nordic Manager, DVM Præanalytiske faktorer Hvor kan det gå galt? Patient forberedelse (faste, stress, motion) Blodprøvning (korrekt reagensglas, kompressionstid, kanylestørrelse, vacutainer) Håndtering/Tid fra udtagning til færdigt serum/plasma Opbevaring (temperatur, sollys) Tid på dagen, tid på året Kurer / Postforsendelse Test procedurer (Test metode) Resultat fortolkning Før prøve udtagning... Hvad skal bruges? Serum eller plasma (hvilken slags plasma?) Hvor meget skal bruges? Mærkning af prøver? Mærkning på reagensglas evt. brug af stregkoder

2 Antikoagulanter / reagensglas Serum / Plasma Hæmatologi: EDTA-blod (+ tynd blodudstrygning) Serologi, klinisk kemi: Serum (sjældent plasma) Serum: er den cellefrie del efter centrifugering af en: Plasma: er den cellefrie del efter centrifugering af en: PCR tests: Glukose: Steril tørsvab NaFl-blod komplet koaguleret prøve uden fibrin ukoaguleret prøve med fibrin Hormoner: Kølet serum el. plasma!! Ca. 1/3 serum udbytte Ca. ½ plasma udbytte Tid på dagen/året Daglig krops-rytme / fluktuation Glukose niveau Hormoner (specielt T4, TSH, Cortisol) Årlig variation ACTH Undgå hæmolyse Stas venen så kort tid som muligt Kort, stor kanyle - så stor G som muligt Hold reagensglasset skråt, så blod rinder ned af væggen Vend prøven 6-10 gange straks efter udtagning Undgå sollys Centrifuger snarest muligt (samme dag) Kun serum/plasma tåler frysning Opbevaring ved 4 grader holder prøven stabil i 24 timer (frysning anbefalet ved ACTH- samt insulinprøver)

3 Undgå hæmolyse Hæmolyse ASAT, ALP, -HBDH LDH, CK Amylase total bilirubin Creatinin Glukose GGT Fe, Mg, P, K, total protein UREA (BUN) Pak rigtigt... Forpakning - Transport Korrekt forpakningsmateriale (UN 3373) Tid (kurer eller post?) Korrekt identifikation / stregkoder Komplet udfyldt rekvisition Praksisstempel, dyreart, chipnummer mm. Temperatur

4 Forstyrrende faktorer Analyseapparater Lipæmi Hæmolyse!! Ikterus Medicin Lige spist Prøveudtagnings-teknik, håndtering, Transport! Leversygdom, hæmolyse mm. Corticosteroider, sulfunamider, NSAID m.m. Pålidelighed?? Test procedurer (hvem laver hvad, hvornår) Test metode (sensibilitet/specificitet) Vedligeholdelse / service Præcision og nøjagtighed (kalibrering) Validering / akkreditering Test resultat Sensitivitet: A/(A+C) Specificitet: D/(B+D) Sensitivitet/specificitet Sand sygdomsstatus Syg Rask Total Positiv A B A+B Negativ C D C+D Total A+C B+D N A = sand positive B = falsk positive C = falsk negative D = sand negative N = totale antal dyr hvor god er testen til at påvise syge dyr hvor god er testen til at påvise sygdomsfrie dyr Arbejd standardiseret Benyt samme rutiner hver gang Udtag prøver på samme tidspunkt hver gang Benyt det samme laboratorium til samme test hver gang!! hvert lab har sine egne reference intervaller Benyt kun akkrediterede tests Sæt alt i system

5 PPID Diagnostik PPID Diagnostik ACTH Dexamethason Suppressions Test (DST) Insulin (kend EMS-status!!) Proxies (TRH-Stimulation Test) Bi-fund ved Cushing-Patienter: Glukose ( 64%) (evt. glukose i urin!) Stress-leucogram hos nogle Triglycerider -GT, GOT, CK, AP: ofte forhøjede Insulin ( 70%) ACTH måling Afslappet hest (ikke ved akut laminitis!) EDTA-blod udtages Centrifugeres indenfor 1 time EDTA-plasma pipetteres fra og fryses Sendes fra fryser via kurer til laboratoriet (ikke nødvendigt at sende i frysebeholder til LABOKLIN!) ACTH måling PPID (n) Healthy (n) Cut-Off Sensitivity Specificity Accuracy Reference pg/ml 100 % 100 % 100 % Van der Kolk et al pg/ml 67 % 100 % 88 % Beech et al pg/ml 71 % 96 % 83 % Beech et al Hæmolyse fri!! Udtagning: % 97 % 90 % stress-frie! Cave: Smerte, Sæson variation!

6 Horses with PPID Reference value Healthy Horses Dexamethasone Suppression Test 15:00 - Basal Cortisol - 40 g/kg Dexamethasone i.m./i.v. (10 ml/500 kg) 19 Hours 10:00 - Cortisol value after stimulation Reference intervaller: < 29 pg/ml < 47 pg/ml August-Oktober Dexamethasone Suppression Test Time in hours 1 g/dl Interpretation: Raske heste supprimerer cortisol til < 10 ng/ml PPID / ECS Normal values Normal response 19h : < 1 g/dl (< 27 nmol/l) PPID Nogle heste med Cushing har samtidig Insulin-resistens (IR) Forøget laminitis risiko Derfor: Altid test PPID-heste for insulin-resistens! Insulin (kraftfoder fastet) Serum indenfor 1h Fryses, fra fryser til kurer CLIOs (chemiluminescence-metode (lig Liverpool) Reference interval < 23 U/ml Glukose (NaFl-rør, kraftfoder fastet)

7 Proxies Proxies RISQI = 1 : Insulin -0.5 = Insulin sensitivity MIRG = [ x(ins-50) 2 ] : [gluc-30] = Pancreatic ß-cell function reciprocal inverse square of insulin modified insulin to glucose ratio Reference: > 0.32 Reference: < 5.6 Proxies I/G-ratio = Fasted-Ins : Fasted-Glucose = Pancreatic ß-cell function Reference: < 6 Faldgrubber 1. Stress / Smerte Kraftig smerte eller hårdt arbejde (30 min) influerer ACTH 2. Stabilitet Plasma indenfor 1h og på frys for ACTH og Insulin. 3. Sæsonafhængig En vis grad af hypofyse-hyperaktivitet Aug-Okt er normalt Optimalt at teste August-Oktober 4. Sikkerhed ACTH mere sikker end DST

8 ACTH anbefalet som rutine diagnostisk test for PPID (i stedet for DST) Hvis stadig tvivl test igen til efteråret! Sæson variation kan modvirkes ved at anvende laboratorier, der benytter sæsonafhængige reference værdier ACTH test til behandlingskontrol Hurtig/korrekt håndtering, frysning, <20 timer transport! Test hesten for både EMS og PPID