2015/02/02 A93A01360BDA A11A01611 25 ml 23.5 ml Højsensitiv metode 400 Diagnostisk reagens til kvantitativ in vitro-bestemmelse af C-reaktivt protein ved brug af højsensitiv metode (CRP HS) i serum eller plasma ved latexforstærket immunturbidimetri. QUAL-QA-TEMP-0846 Rev.9 Applikationsudgivelse Serum, plasma: CRPhs 3.xx Tilsigtet anvendelse reagens er beregnet til kvantitativ in vitro-diagnostisk bestemmelse af C-reaktivt protein i humant serum og plasma baseret på en immunturbidimetrisk analyse. Måling af C-reaktivt protein hjælper ved evaluering af skade på kropsvæv. Klinisk interesse a Normal applikation (1,0-800 mg/l): C-reaktive proteinniveauer i serum kan stige dramatisk efter myokardieinfarkt, stress, traume, infektion, inflammation, operation eller neoplastisk proliferation. Stigningen forekommer inden for 24 til 48 timer, og niveauet kan være 2000 gange det normale. Fordi stigningen er uspecifik kan den imidlertid ikke fortolkes uden en komplet klinisk anamnese, og selv da kun ved sammenligning med tidligere værdier. Højsensitiv (hjerte) applikation (0,12-100 mg/l): Studier har også vist, at detektionen af meget lavere CRP-niveauer kan give værdifuld information. Den typiske CRP-koncentration for raske voksne er (afhængigt af det specifikke niveau hos den enkelte patient) < 1 mg/l (1). a Modifikation: Ændring af klinisk interesse. b Modifikation: "Metode": modifikation. Lidt højere værdier kan være tegn på en øget risiko for koronar hjertesygdom hos asymptomatiske patienter (2, 3). CRP-koncentrationer over 3 mg/l på tidspunktet for indlæggelse forudsiger et usikkert resultat efter et myokardieinfarkt (4). Følgende relative risikokategorier i forhold til gennemsnitligt CRP-niveau har været anbefalet: lav < 1 mg/l, gennemsnitlig 1,0 til 3,0 mg/l og høj > 3,0 mg/l (5). Stigninger i C-reaktive proteinværdier er ikke specifikke og bør ikke fortolkes uden en komplet klinisk anamnese, eftersom CRP er et akutfaseprotein, som kan stige uspecifikt på grund af andre inflammatoriske tilstande. Ved risikoanalyse for hjertesygdom skal der udføres anden hjertesygdomsspecifik testning, f.eks. total kolesterol, HDL-kolesterol og LDL-kolesterol. Ved anvendelse til risikovurdering bør CRP-niveauer > 10 mg/l evalueres for anden ikke-kardiovaskulær oprindelse. Testning for enhver type risikovurdering bør ikke udføres, mens der er tegn på infektion, systemisk inflammation eller traume. Denne analyse er ikke beregnet til behandling af akut koronart syndrom, og den kan ikke erstatte traditionelle, kardiovaskulære risikofaktorer. Det anbefales ikke at screene hele den voksne population for hscrp. De gennemsnitlige hscrp-niveauer, bestemt med to ugers mellemrum, bør anvendes til risikovurdering af metabolisk stabile patienter. hscrp anses for at være en klasse IIamarkør for akut koronart syndrom ud over troponin I. (6). Metode b (Licenseret til USP6, 248, 597/ USP6, 828, 158 og tilsvarende patenter i andre lande) er en latexforbedret immunturbidimetrisk analyse, som er 1 / 5
udviklet med henblik på nøjagtig måling af CRP-niveauer i serum- og plasmaprøver. Når der forekommer en immunstof-antistof-reaktion mellem CRP i en prøve og anti-crp-antistof, som er sensibiliseret over for latexpartikler, vil det føre til agglutination. Agglutinationen registreres som en absorbansændring, hvor ændringens størrelse er proportional med mængden af CRP i prøven. Den faktiske koncentration bestemmes derefter ved hjælp af interpolation fra en kalibreringskurve, som er udarbejdet ud fra kalibratorer med kendt koncentration. Reagenser er klar til brug. Reagens 1: Bufferopløsning: Glycinbufferopløsning Reagens 2: Latexsuspension: 0,20% w/v suspension af latexpartikler, som er sensibiliseret med anti-crp-antistoffer (kanin) Når målingerne er udført, skal reagenskassetterne forblive i 400-køleområdet. Sørg for, at hætterne ikke forbyttes med hætterne fra andre kassetter. Reagenser med forskellige lotnumre må ikke ombyttes eller blandes. skal anvendes i henhold til denne reagensvejledning. Producenten kan ikke garantere ydeevnen, hvis der anvendes andre fremgangsmåder. Håndtering 1. Tag begge hætter af kassetterne. 2. Hvis der er skum, skal det fjernes med en plastikpipette. 3. Placer kassetten i det afkølede 400- reagensrum. Kalibrator c Til kalibrering skal der anvendes: CRP HS Cal, ref. A11A01983 (medfølger ikke) 2 x 2 ml Kalibratoren kan spores op imod IRMM/ERM-DA472/ IFCC. Kontrol Til intern kvalitetskontrol skal der anvendes: Low CRP Control, ref. A11A01731 (medfølger ikke) 4 x 1 ml Hver kontrol skal analyseres dagligt og/eller efter en kalibrering. Frekvensen af kontroller og konfidensintervallerne skal svare til laboratoriets retningslinjer og de landespecifikke forskrifter. Nationale og regionale bestemmelser bør følges ved testning af kvalitetskontrolmaterialer. Resultaterne skal ligge inden for de fastlagte konfidensgrænser. Hvert laboratorium skal etablere en procedure, som skal følges, hvis resultaterne overskrider konfidensgrænserne. Nødvendige materialer, der ikke er vedlagt Automatiseret klinisk kemi-analysator: 400 Kalibrator: CRP HS Cal, ref. A11A01983 Kontrol: Low CRP Control, ref. A11A01731 Rengøringsopløsning: Clean-Chem CP, ref. A11A01755, 30 ml eller Clean-Chem 99 CP, ref. A11A01789, 4 x 99 ml Standardlaboratorieudstyr. Prøve Serum. Plasma i lithiumheparin. Plasma i EDTA. Andre antikoagulanter end de, der er angivet heri, er ikke blevet testet af HORIBA Medical og anbefales ikke til anvendelse sammen med denne analyse. Stabilitet (7): Ved 20-25 C: 15 dage Ved 2-8 C: 2 måneder Ved -20 C: 3 år c Modifikation: information tilføjet. 2 / 5
Referenceområde (8) d Da værdierne kan variere i henhold til alder, kost, køn og den geografiske fordeling, bør hvert enkelt laboratorium udarbejde sit eget referenceområde. De værdier, der angives her, er kun vejledende. CRP: Voksne (20-60 år) < 5 mg/l Anbefalede kategorier for risikovurdering for hjertesygdom (5) Lav < 1 mg/l Gennemsnitlig 1,0 til 3,0 mg/l Høj > 3,0 mg/l Intraindividuelle variationer af CRP er signifikante og skal tages i betragtning, når værdierne fortolkes. Opbevaring og stabilitet Reagenser i uåbnede kassetter er stabile op til udløbsdatoen på etiketten, hvis de opbevares mellem 2-10 C. Stabilitet efter åbning: se afsnittet "Ydeevne på 400". Affaldshåndtering Der henvises til de lokale lovbestemmelser. Dette reagens indeholder mindre end 0,1% natriumazid som konserveringsmiddel. Natriumazid kan reagere med bly og kobber og danne eksplosionsfarlige metalazider. Generelle forholdsregler Dette reagens er kun beregnet til professionel in-vitrodiagnosticering. Kun efter ordination. Diagnosticering bør kun foretages, efter at man har taget kliniske symptomer og resultaterne af andre tests med i betragtning. Overhold forholdsreglerne for standard laboratoriebrug. Reagenskassetterne er beregnet til engangsbrug og skal kasseres i overensstemmelse med lokale lovbestemmelser. Se sikkerhedsdatabladet, som følger med reagenset. Produktet må ikke anvendes, hvis der er synlige tegn på biologisk, kemisk eller fysisk forringelse. Analysen er kun beregnet til konventionel CRP-brug. Det er brugerens ansvar at kontrollere, at dette dokument er relevant for det anvendte reagens. Ydeevne på 400 Nedenstående ydelsesdata er opnået på 400- analyseinstrument. Antal test: 200 test Hvis antallet af bestilte test er lavt, og 400 brugeren har til hensigt at bruge kassetten til maks. stabilitet efter isætning, anbefales det af HORIBA Medical at bruge forbrugsvaren XEC084 (kitmembran) til at opnå det antal test, der er angivet i denne vejledning. Reagensstabilitet efter isætning i instrumentet: Efter åbning er reagenskassetten, hvis den placeres i det afkølede 400 rum, stabil i 64 døgn. Prøvevolumen: 12 µl/test Kvantiteringsgrænse: Kvantiteringsgrænsen bestemmes i henhold til CLSI (NCCLS), EP17-A2 protokol (9) og svarer til 0,12 mg/l. Minimal fortolkningsgrænse: Den minimale fortolkningsgrænse (MIL) evalueres ved hjælp af flere bestemmelser af prøver med lav koncentration og er lig med 0,048 mg/l. Nøjagtighed og præcision: Repeterbarhed (inden for kørselspræcision) 4 prøver med lav, middel og høj koncentration og 1 kontrol testes 20 gange i henhold til anbefalingerne i Valtec-protokollen (10). Gennemsnitsværdi mg/l CV % Kontrolprøve 1 1,78 0,86 Prøve 1 0,30 2,48 Prøve 2 1,06 1,38 Prøve 3 5,76 0,43 Prøve 4 8,74 0,55 d Modifikation: ændring af referenceområde. 3 / 5
Reproducerbarhed (total præcision) 4 prøver med lave, medium og høje niveauer og 1 kontrol er testet med dobbeltbestemmelse over 20 dage (2 serier pr. dag) i henhold til anbefalingerne i CLSI (NCCLS), EP5- A-protokollen (11). Gennemsnitsværdi mg/l CV % Kontrolprøve 1 1,59 3,27 Prøve 1 0,23 6,05 Prøve 2 0,91 3,61 Prøve 3 4,78 2,35 Prøve 4 8,23 2,18 Måleområde: Analysen bekræftede målingsområdet fra 0,12 til 10 (mg/l) med en automatisk efterfortynding på op til 100 mg/l. Reagenslineariteten er blevet vurderet op til 10 mg/l i henhold til anbefalingerne i CLSI (NCCLS), EP6-Aprotokol (12). Korrelation e Patientprøver: Serum Antal patientprøver: 103 Prøverne er korreleret med et industrireagens, som er taget som reference, i henhold til anbefalingerne i CLSI (NCCLS), EP9-A2-protokol (13). Værdierne varierede fra 0,19 til 9,57 mg/l. Ligningen for den allometriske linje, der er opnået ved hjælp af Passing-Bablock-regressionsproceduren (14), er: Y = 1,05 X - 0,03 (mg/l) med en korrelationskoefficient r 2 = 0,996. Interferens: Hæmoglobin: Ingen signifikant påvirkning er observeret op til 290 µmol/l (500 mg/dl). Triglycerider: Ingen signifikant påvirkning er observeret op til en triglyceridkoncentration på 6,18 mmol/l (541 mg/l). Total bilirubin: Ingen signifikant påvirkning er observeret op til 440 µmol/l (25,7 mg/dl). Direkte bilirubin: Ingen signifikant påvirkning er observeret op til 560 µmol/l (32,8 mg/dl). Ascorbinsyre: Ingen signifikant påvirkning er observeret op til 340 µmol/l (5,98 mg/dl). Ibuprofen: Ingen signifikant påvirkning er observeret op til 2,43 mmol/l (50,1 mg/dl). Acetaminophen: Ingen signifikant påvirkning er observeret op til 1324 µmol/l (20 mg/dl). Acetylsalicylsyre: Ingen signifikant påvirkning er observeret op til 3,62 mmol/l (65,2 mg/dl). Andre begrænsninger gives af Young i form af en liste over stoffer og foranalysevariabler kendt for at påvirke denne metode (15, 16). Prozoneffekt f : Der er ikke blevet fundet noget overskud af antistoffer op til en koncentration på 200 mg/l. Når prøvekoncentrationen er over måleområdet for denne højsensitive metode (> 100 mg/l), skal prøven måles med den anden applikation (måleområde fra 1 til 800 mg/l). Kalibreringsstabilitet: Reagenset blev kalibreret på dag 0. Kalibreringsstabiliteten er blevet kontrolleret ved at teste én kontrolprøve. Kalibreringsstabiliteten er 18 døgn. Bemærk: Rekalibreringen anbefales, når reagenslots ændrer sig, og når resultaterne af kvalitetskontrollen falder uden for det etablerede område. Applikationsudgivelse: 3.xx Reference 1. Raifai N, Ridker PM. Population Distributions of C- reactive Protein in Aparently Healthy Men and Women in the United States: Implication for Clinical Interpretation. Clin Chem (2003) 49: 666-669. 2. Morrow AD, Ridker PM. C-reactive protein, inflammation, and coronary risk. Med. Clin. of North Am. (2000) 84: 149161. 3. Ridker PM. Novel risk factors and markers for coronary disease. Adv. Int. Med. (2000) 45: 391-419. e Modifikation: modifikation af korrelation. f Modifikation: data tilføjet. 4 / 5
4. Ridker PM, Cannon CP, Morrow D, Rifai N, Rose LM, McCabe CH, Pfeffer MA, Braunwald E. C-Reactive Protein Levels and Outcomes after Statin Therapy. N. Eng. J. Med. (2005) 352: 20-28. 5. Pearson TA et al. Markers of inflammation and cardiovascular disease. Application to clinical and public health practice. A statement for healthcare professionals from the Centers for Disease Control and Prevention and the American Heart Association. http://www.circulationaha.org. 6. R.H. Christianson et al. NACB Biomarkers of Acute Coronary Syndrome & Heart Failure (draft guidelines) AACC Press, (2004). 7. Guder WG, Zawta B. The Quality of Diagnostics Samples. Samples: From the Patient to the Laboratory. 1 st ed. Guder WG, Narayanan S, Zawta B. (WHILEY-VCH, Darmstadt, Germany), (2001): 24. 8. Roberts WL, McMillin GA, Burtis CA, Bruns DE. Reference Information for the Clinical Laboratory, Tietz Textbook of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics; 4 th Ed., Burtis CA, Ashwood ER, Bruns DE (Elsevier Saunders eds., St Louis, USA), (2006): 2263. 9. Evaluation of detection capability for clinical laboratory measurement procedures. Approved Guideline, 2 nd ed., CLSI (NCCLS) document EP17-A2 (2012) 32 (8). 10. Vassault A, Grafmeyer D, Naudin C et al. Protocole de validation de techniques (document B). Ann. Biol. Clin. (1986) 44: 686-745. 11. Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Method. Approved Guideline, CLSI (NCCLS) document EP5-A2 (2004) 24 (25). 12. Evaluation of the Linearity of Quantitative Analytical Methods. Approved Guideline, CLSI (NCCLS) document EP6-A (2003) 23 (16). 13. Measurement Procedure Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples. Approved Guideline, 3 rd ed., CLSI (NCCLS) document EP9-A3 (2013) 33 (11). 14. Passing H, Bablock W. A new biometrical procedure for testing the equality of measurements from two different analytical methods. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. (1983) 21: 709-20. 15. Young DS. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests. 4 th Edition, Washington, DC, AACC Press (1997) 3: 143-163. 16. Young DS. Effects of Preanalytical Variables on Clinical Laboratory Tests. 2 nd Edition, Washington, DC, AACC Press (1997) 3: 120-132. 5 / 5