Proteinelektroforese af GFP Suppleringskit til pglo
|
|
- Børge Nøhr
- 8 år siden
- Visninger:
Transkript
1 Proteinelektroforese af GFP Suppleringskit til pglo Katalognummer nr EDU rad.com Oversat og bearbejdet af Birgit Sandermann Justesen, Nærum Gymnasium, Nærum Hovedgade 30, 2850 Nærum Kopiering kun tilladt til undervisningsbrug Brugen af dette kit til undervisningsbrug skal varetages af en gymnasielærer, som har en biologisk uddannelsesbaggrund mindst svarende til de af VTU udstukne faglige mindstekrav i biologi. og som har gennemført et af Arbejdstilsynet godkendt kompetencegivende kursus af 2 dages varighed i eksperimentel genteknologi. Når eksperimenter, som er omfattet af aftalen, gennemføres i forbindelse med enkeltfaglig eller tværfaglig undervisning, har gymnasielæreren ansvar for at forsøgene gennemføres efter de gældende retningslinjer.aftalen vedrører undervisning i genteknologi i biologi, bioteknologi A, teknikfag og teknologi A i STX (det almene gymnasium), HTX og HF De genteknologiske forsøg må kun udføres, dersom der senest 3 uger forud for arbejdet med forsøgene (herunder forarbejdet) er sendt en indberetning til Undervisningsministeriets fagkonsulent i biologi på det indberetningsskema, der indgår som en del af aftalen Ved indberetning indsendes altid en udfyldt forside og mindst ét udfyldt bilag. Indberetningsskemaets forside skal underskrives af både den for forsøgenes udførelse ansvarlige lærer og skolens rektor/leder og sendes til Undervisningsministeriets fagkonsulent i biologi 3 uger inden forarbejdet påbegyndes. Link til indberetningsskemaet: 20A F/Biologi%20 %20stx.aspx 1
2 Proteinekstraktion og elektroforese af GFP (suppleringskit til pglo Bakterietransformationskittet) Formål Formålet med kittet er ved hjælp af en ekstraktion og efterfølgende proteinelektroforese at lave en nærmere identifikation af det fluorescerende protein, GFP, som bevirker at kolonier fra pglo transformationen lyser, når de dyrkes på selektivt medie indeholdende ampicillin og arabinose. Introduktion GFP (Green Fluorescens Protein) er et naturligt forekommende protein hos mange gopler. Det gen, der danner basis for GFP stammer oprindeligt fra den bioluminiscerende gople Aequorea victoria. Grønt Fluorescerende Protein får goplen til at fluorescere og lyse i mørket. Siden begyndelsen af 1990 erne har man i højere og højere grad benyttet genet som et redskab i forskningen, hvor det brugs til at afsløre resultater inden for rekombinerede E. coli og ved kloning. Proteinet består af 239 aminosyrer. Krystallografiske studier har vist, at GFP er et tøndeformet protein og at den fluorescerende chromophor ( en kemisk gruppe, der laver farve) er begravet midt inde i proteinet. I vildtypen består chromophoren af tre sammenhængende aminosyrer Ser-Tyr_Gly, som for at kunne udtrykkes undergår en række forandringer og danner komplekser med et aktiverende protein, aequorin, et calcium-aktiveret luminiscensprotein. Fra aequorin overføres der energi til GFP, hvilket resulterer i fluorescens. 2
3 I laboratoriet har GFP ikke et tilsvarende aktiverende protein og det er derfor nødvendigt at excitere proteinet ved hjælp af en ekstern energiressource for at aktivere det. UV-lys er perfekt til dette, idet GFP s chromophorer absorberer bølger ved 395nm, hvorved der exciteres elektroner i chromophoren til et højere energiniveau. Når elektronerne falder tilbage i energiniveau udsendes energi i form af synligt grønt lys på 509nm. Det er derfor muligt, at få bakterier, der har fået indsat GFP, til at producere det fluorescerende protein, der får bakterierne til at lyse med en skinnende grøn farve under en UV-lampe. Figuren viser exciterings- og emissionprofilerne for GFP-chromophoren. I denne øvelse vil vi sammenligne proteinsammensætningen hos bakterier, hvor promotoren er aktiveret med de proteinsammensætningen hos de bakterier, som har vokset på arabinose-frit medium og derved ikke har fået aktiveret GFP. Sikkerhedsanvisninger Bemærk, at levende bakterier, der indeholder genteknologisk fremstillede plasmider ikke må slippes ud i naturen. Følgende sikkerhedsforskrifter SKAL derfor overholdes: Arbejd kun på pladser med dækpapir Bær kittel Opsaml alt affald Al affald skal destrueres efter forskrifterne Rapporter straks ved eventuelt uheld Arbejd stille og roligt Mad og drikkevarer må ikke indtages i laboratoriet Vask hænder, når laboratoriet forlades 3
4 Oversigtsfigur over forsøget: 4
5 Materialer (til 8 grupper), kemikalier og opløsninger pglo-kit LB/Amp og LB/amp/ara plader med hhv. hvide og grønt fluorescerende bakteriekolonier på (fra pglo-forsøget) pglo SDS-PAGE Extension kit (Indeholder 1g DTT, 100uL kaleidoskop standard, 100 ml Coommassiefarve, 1L TGS-buffer og 30 ml Laemmlibuffer) Færdigstøbte polyacrylamidgeler 4-20%, 10 brønde, Tris-HCL (TGS-geler) Demineraliseret vand Nødvendigt udstyr Udstyr til lodret elektroforese Strømforsyning Vandbad op til 100 o C Mikropipetter (0-20µL, µL, µL) Spidser til mikropipetterne Bøtte til affald Evt. geltørringssystem Fremgangsmåde Prøverne klargøres 1. Mærk 4 skruelågs-mikrocentrifugerør med Hvid varme, grøn -varme, hvid +varme og grøn +varme. 2. Tilsæt 300µL Laemmlibuffer til de to -varme rør 3. Med en steril podenål tages en passende mængde kolonier ( kolonier)fra en LB/amp plade med hvide kolonier og disse overføres til røret, der er mærket hvid varme. Bland godt ved at snurre podenålen rundt mellem fingrene. Der må ikke være klumper i. Bland yderligere ved at stille mikropipetten på 100µL, sætte en ny spids på og derefter suge op og ned. 4. Gentag proceduren til røret mærket grøn varme med kolonier fra LB/amp/ara-pladen 5. Overfør derefter 150µL fra hvid varme -røret til hvid +varme -røret. Overfør derefter 150µL fra grøn varme røret til grøn +varme -røret. 5
6 6. Inkuber de to +varme -rør i 5 minutter i 95 o C vandbadet. Afkøl efterfølgende til stuetemperatur Elektroforesen Her benyttes BioRads lodrette elektroforeseudstyr med dertil passende geler. Man skal derfor rete vejledningen til, når der benyttes andet udstyr 1. Tag handsker på, når gelen skal håndteres! 2. Skær med en skarp skalpel langs den sorte linie cut i bunden af gelen. Træk derefter modsat i slippen pull. Træk nu meget forsigtigt kammen op. Dette skal ske helt parallelt. Sæt de to geler* fast i den inderste holder med den korte plade indad. Vær sikker på at gelen er helt i bund. Saml det lodrette elektroforesekar med gelerne i selve karret * Hvis man kun har én gel sættes en erstatningsplade i hvor den anden gel elles skulle være placeret. 3. Tjek at karret er samlet korrekt, så det ikke lækker. Fyld det indre kammer med elektroforesebuffer til et stykke op over toppen af den mindste plade. Fyld derefter det ydre kammer med ca. 200 ml TGS elektroforesebuffer. 4. Placer prøvepåsætningshjælperen over gelerne 5. Noter, hvad der skal puttes i hver brønd, idet følgende skema følges: 1 5µL Kaleidoskopstandard 2 15µL hvid -varme 3 15µL grøn -varme 4 15µL hvid +varme 5 15µL grøn +varme 6 5µL Kaleidoskopstandard 7 15µL hvid -varme 8 15µL grøn -varme 9 15µL hvid +varme 10 15µL grøn +varme Roligt håndelag og stor tålmodighed er nødvendigt. Der skal skiftes pipettespids imellem hver prøve! 6. Kør elektroforesen: Fjern prøvepåsætningshjælperen. Luk karret og tilslut elektroforeseapparatet til strømforsyningen. Kør gelen ved 200V i 30 minutter. Hold øje med kaleidoskopstandarden. Da alle prøverne er farvede kan elektroforesen følges flot og illustrativt. Lad ikke den blå linje køre længere end til bunden af gelen. 7. Efter elektroforesen fjernes bundkanten fra den færdigstøbte gel ved at skære med et plastikkort eller en lineal. Brug derefter en lineal eller et skarpt barberblad/skalpel til forsigtigt at dele gelen i to. Skær lige inden kaleidoskopstandarden i brønd 6. 6
7 8. Put hver gel op i et farvekar og skyl med vand i 3x5minutter 9. Den ene halvdel undersøges ved hjælp af en UV-lampe den anden halvdel farves med coommassieblå: 50 ml Coomassie farve pr 2 geler. Farvestoffet binder sig til proteinerne. Lad gelen farve i 1 time. Vip forsigtigt ind imellem. Der kan fint farves natten over, hvis man har sikret sig at gelen er dækket med farve. Hæld farven fra og fyld karret med postevand. Vip og hæld vandet fra. Gentag flere gange. Lad eventuelt gelen ligge i vand natten over. Tag et digitalt billede af gelen. Resultater 10. Analyser gelen. På figuren ses et billede af en gel med det mønster, der forventes: Tørring af gelerne 11. Fugt 2 stykker GelAir cellofan i et kar med vand i sekunder 12. Placer det ene stykke cellofan over et plastikkar og stræk det så meget, at det danner en vandret overflade. Brug en elastik til at holde cellofanen på plads. 13. Placer en gel oven på cellofanen. Fjern eventuelle luftbobler under og ved kanten af gelen. Placer nu det andet stykke cellofan oven på gelen. Undgå at der dannes luftbobler mellem gelen og cellofanen. Sæt endnu en elastik på for at holde på det andet stykke cellofan. Lad gelen tørre i flere dage i et velventileret rum. Hvis man skærer bunden af plastikkarret øges ventilationen og gelen tørrer hurtigere 7
8 Undersøgelse af geler fra elektroforese af DNA eller proteiner ved brug af LoggerPro software (Vernier) Formål: at analysere elektroforesen af DNA/proteiner og finde sammenhæng mellem vandringslængde og størrelsen. Fremgangsmåde: Gå ind i "insert" og importer et billede af en gel med farvede bånd. Billedet skal helst vise klare og tydelige bånd. Desuden skal der være påsat en standard med kendte størrelser af båndene. 1. Gå ind under "page" og klik auto arrange. Nu vil billedet af gelen fint sidde ved siden af et koordinatsystem med DNA/protein-størrelsen som funktion af vandringslængden 2. Ved siden af koordinatsystemet ses en bjælke med forskellige funktioner. Først klikkes på den øverste knap og man kan sætte 0-linien, hvorfra man måler vandringslængden 3. Klik på næste knap og indstil skalaen ved at trække markøren fra 0-linien til det der svarer til 1 cm. Nu vil alle vandringslængder blive målt i cm. 4. Klik på tredie knap og indtast værdierne fra standarden. Dette gøres ved at klikke på et af de kendte bånd og indtaste størrelsen på DNA'et/proteinerne i kb eller kdalton. Punktet bliver nu indsat på grafen, med logaritmen til størrelsen som funktion af vandringslængden. 5. Dette gøres for alle båndene i standarden, og der fremkommer en graf der i forskellige områder er lineær. 6. Nu kan man bestemme båndlængde for alle de andre prøver ved at klikke 7. Klik nu på den fjerde knap og tilføj en prøve. (add lane!) 8. Dobbelt-klik på feltet over den søjlerne i regnearket for den nye prøve og indfør titel + evt. kb eller kd for størrelsen af båndene. 9. Ved at klikke på de enkelte bånd i fra en given brønd vil programmet nu beregne fragmentstørrelsen i båndet. 10. Nu kan denne procedure gentages for alle de andre prøver og man kan sammenligne båndstørrelserne for de enkelte prøver. 8
9 Lærersupplement Forberedelse Klargøring af Laemmlibuffer med DTT: Tag 30 ml Laemmlibuffer og tilsæt hele indholdet af glasset med DTT (det totale volumen vil blive ca. 50 ml). Mærk 8 1,5 ml mikrocentrifugerør med PB for prøvebuffer. Fordel 1,5 ml Laemmlibuffer med DTT til hvert af de 8 rør. Rørene stilles i fryseren til de skal bruges. Rørene med den færdigblandede Laemmlibuffer kan opbevares i fryseren i op til 3 måneder. Bemærk: På grund af det ustabile DTT opbevares prøverne i fryseren. Den lave temperatur vil til gengæld betyde at den SDS, der er i prøven, udfældes. Det er derfor nødvendigt at varme prøven op til stuetemperatur og ryste grundigt før brug. Elektroforesebuffer til polyacrylamidgeler (TGS geler) Der er brug for ca. 500 ml elektroforesebuffer pr. lodret elektroforesekar. Hvert kar kan tage 2 geler. For at fremstille 2L elektroforesebuffer tages 200mL 10x Tris-glycin-SDS med ml demineraliseret vand. Den færdige buffer kan opbevares i op til 6 måneder ved stuetemperatur. Tips: Det er en god ide, at fremstille 1-2 L ekstra buffer i tilfælde af, at et af elektroforesekarret lækker. Alternativt kan man lade karret stå i en bakke e.l. under påfyldningen, så man kan samle eventuelt spild op. Kaleidoskopstandarden Før kaleidoskopstandarden skal bruges eller fordeles varmes den til stuetemperatur for at få opløst alle SDS-udfældninger, der dannes, når den fryses. Mærk 8 1,5 ml mikrocentrifugerør med K og fordel 6 µl Kaleidoskopstandard til hvert rør. Yderligere beskrivelse af proteinelektroforese findes i Proteomik 1 Proteinelektroforese. Se emu en. Indkøb og leverandører Kemikalier mm. Købes hos Udstyr og geler til den lodrette elektroforese kan købes hos mange forhandlere. Vær opmærksom på, at gelerne passer til det elektroforeseapparat, der benyttes. Her er beskrevet udstyret fra 9
10 Opbevaring af materialer Det er meget vigtigt at pointere, at polyacrylamidgelerne normalt kun kan holde sig 4-5 uger i køleskab, hvorfor disse først bestilles, når man er sikker på, hvornår forsøget skal køre. Alle de forskellige kemikalier og opløsninger opbevares som beskrevet på etiketten. Forsøget bør udføres umiddelbart efter, at man har fået kolonier på pladerne fra pglo-kittet, da disse plader ikke må opbevares i længere tid, men skal destrueres jvf. de skærpede sikkerhedskrav. Praktisk tips og mulige fejlkilder Sørg for at tage en tilpas mange kolonier det øger chancen for et godt resultat! Det kan være en fordel at fylde elektroforesebuffer på før man forsigtigt fjerner kammen. Gelerne er meget tynde og derfor skal man have et roligt håndelag. Ved påsætning af prøverne kan det være en stor hjælp at benytte en prøve-påsætningshjælper, hvis en sådan findes til elektroforeseudstyret. Benyt de særlige pipettespidser til lodret elektroforese de har en ekstra lang tynd spids, hvilket letter prøvepåsætningen. Kilder: 10
Elevvejledning pglo transformation
Introduktion til transformation Elevvejledning pglo transformation I denne øvelse skal du lære fremgangsmåden ved genetisk transformation. Husk på, at et gen er et stykke DNA, der indeholder informationer
Læs mereUndersøgelser af fiskeproteiner. protein-fingerprinting og immunoblotting 1. Proteomik kit I Proteinelektroforese
Undersøgelser af fiskeproteiner. protein-fingerprinting og immunoblotting 1 Proteomik kit I Proteinelektroforese Oversat og bearbejdet af Birgit Sandermann Justesen, Nærum Gymnasium og Niels Troest, Bjerringbro
Læs mereBiotechnology Explorer. Protein Fingerprinting
Biotechnology Explorer Protein Fingerprinting Instruktionsmanual Katalognummer 166-0100EDU explorer.bio-rad.com Delene i dette kit er sendt i seperate æsker. Opbevar proteinstandarderne i fryseren, ved
Læs mereGreen Fluorescent Protein (GFP) Oprensning af GFP
1 Green Fluorescent Protein (GFP) Oprensning af GFP Katalognummer 166-0005EDU www.biorad.com Oversat og bearbejdet af Birgit Sandermann Justesen, Nærum Gymnasium Revideret februar 2010. Kontakt: Birgitjustesen@gmail.com
Læs merepglo-transformationskit
1 Katalog nummer 166-0003-EDU www.bio-rad.com pglo-transformationskit arac ori pglo bla GFP Oversat og bearbejdet af Birgit Sandermann Justesen og Lars Moeslund, 2007 Revideret november 2009. Kontakt:
Læs mereBiotechnology Explorer
Biotechnology Explorer Green Fluorescent Protein (GFP) Oprensnignskit Katalognummer 166-0005-EDU www.bio-rad.com For teknisk service bedes du ringe til dit lokale Bio-Rad kontor Office or in the U.S. Call
Læs merepglo-transformationskit
Katalog nummer 166-0003-EDU pglo-transformationskit arac ori pglo bla GFP Oversat og bearbejdet af Birgit Sandermann Justesen og Lars Moeslund, 2004 Brugen af dette kit til undervisningsbrug skal varetages
Læs mereBiotechnology Explorer
Biotechnology Explorer Oprensning af genomisk DNA fra plantemateriale Manual Katalog nr. 166-5005EDU explorer.bio-rad.com Oversat og bearbejdet af Birgit Sandermann Justesen, Nærum Gymnasium, februar 2009
Læs mereFormål At analysere for myosin i muskelvæv fra fisk ved brug af western blotting
Center for Undervisningsmidler, afdeling København Western blotting Øvelsesvejledning Formål At analysere for myosin i muskelvæv fra fisk ved brug af western blotting Teori Proteomik er studiet af celleproteiners
Læs mereRegnskovens hemmelighed
1 Regnskovens hemmelighed Katalognummer 1660006-EDU www.bio-rad.com Oversat og bearbejdet af Birgit Sandermann Justesen, Nærum Gymnasium Revideret februar 2010. Kontakt: Birgitjustesen@gmail.com Brugen
Læs mereBiotechnology Explorer
Biotechnology Explorer pglo Transformationskit Katalognummer 166-0003-EDU explorer.bio-rad.com Dette kit skal opbevares ved stuetemperatur Kopiering af enhver del af dette dokument er kun tilladt til undervisningsbrug
Læs mereBiotechnology Explorer
Biotechnology Explorer Genes in a Bottle Kit DNA Extraction Module Lav et halssmykke med dit eget DNA Katalognr.: 166-2000EDU Dertil kan man købe ekstradele, hvis der skal laves halskæder til eleverne.
Læs mereBiotechnology Explorer. Regnskovens hemmelighed
Biotechnology Explorer Regnskovens hemmelighed Katalognummer 166-0006-EDU explorer.bio-rad.com For teknisk service bedes du ringe til dit lokale Bio-Rad kontor Office or in the U.S. Call 1-800-4BIORAD
Læs mereAnalyse af proteiner Øvelsesvejledning
Center for Undervisningsmidler, afdeling København Analyse af proteiner Øvelsesvejledning Formål At separere og analysere proteiner i almindelige fødevarer ved brug af gelelektroforese. Teori Alle dele
Læs mereRegnskovens hemmeligheder
Center for Undervisningsmidler, afdeling København Regnskovens hemmeligheder Øvelsesvejledning Formål Et gen for et kræfthelbredende protein er blevet fundet i nogle mystiske blade i regnskoven. Forskere
Læs mereLigerings- og transformationsmodul inklusiv plasmidoprensning og restriktionsanalyse
Biotechnology Explorer Ligerings- og transformationsmodul inklusiv plasmidoprensning og restriktionsanalyse Katalog nr. 166-5015EDU explorer.bio-rad.com Kopiering kun tilladt til undervisningsbrug Bemærk:
Læs mereGAPDH PCR modul Manual
GAPDH PCR modul Manual Katalog nr. 166-5010EDU explorer.bio-rad.com Kopiering kun tilladt til undervisningsbrug Bemærk: Kittet indeholder temperaturfølsomme dele. Åbn derfor straks kassen og læg de pågældende
Læs mereKRIMINALDETEKTIVEN GERNINGSSTEDETS GÅDE PCR
KRIMINALDETEKTIVEN GERNINGSSTEDETS GÅDE Elevvejledning PCR PCR trin for trin PCR involverer en række gentagne cykler, der hver består af følgende tre trin: Denaturering, primer påsætning og forlængelse
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Forsøgsvejledning Navn: Side 1 af 7 Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Navn: Forsøgsvejledning Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA sekvens,
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Navn: Forsøgsvejledning Side 1 af 8 Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA
Læs mereDette er en kladde til et genoptryk af Eksperimentel Genteknologi fra 1991. Ideer, rettelser og forslag modtages gerne. Kh Claudia.
Transformation af E.coli K 12 Version 3. marts 2009 (C) Claudia Girnth-Diamba og Bjørn Fahnøe Dette er en kladde til et genoptryk af Eksperimentel Genteknologi fra 1991. Ideer, rettelser og forslag modtages
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Navn: Forsøgsvejledning Side 1 af 8 Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA-sekvens,
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Navn: Forsøgsvejledning Side 1 af 8 Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA-sekvens,
Læs mereMælkesyrebakterier og holdbarhed
Mælkesyrebakterier og holdbarhed Formål Formålet med denne øvelse er at undersøge mælkesyrebakteriers og probiotikas evne til at øge holdbarheden af kød ved at: 1. Undersøge forskellen på bakterieantal
Læs mereDNA-smykke Simpel ekstraktion af DNA fra kindceller fra mennesket, som er velegnet til at bruge i et halssmykke
145678 John Schollar and Dean Madden National Centre for Biotechnology Education, University of Reading Science and Technology Centre, Earley Gate, Reading RG6 6BZ UK E: J.W.Schollar@reading.ac.uk Simpel
Læs mereProteomik kit II. Oversat og bearbejdet af Birgit Sandermann Justesen, Nærum Gymnasium, oktober 2007
1 Proteomik kit II Oversat og bearbejdet af Birgit Sandermann Justesen, Nærum Gymnasium, oktober 2007 2 Indledning Formålet med denne danske version af vejledninger til de to kits Proteomics I og Proteomics
Læs mereElektroforese. Navne: Rami Kassim Kaddoura Roman Averin Safa Sarac Magnus Høegh Jensen Frederik Gaarde Lindskov
Elektroforese Navne: Rami Kassim Kaddoura Roman Averin Safa Sarac Magnus Høegh Jensen Frederik Gaarde Lindskov Klasse: 1.4 Fag: Biologi Vejleder: Brian Christensen Skole: Roskilde tekniske gymnasium, Htx
Læs mereDNA origami øvelse 2013. DNA origami øvelse
DNA origami øvelse Introduktion I denne øvelse bruger vi DNA origami teknikken til at samle en tavle af DNA med dimensioner på 70 nm x 100 nm. Tavlen dannes af et langt enkeltstrenget DNA molekyle, der
Læs mereMælkesyrebakterier og holdbarhed
Mælkesyrebakterier og holdbarhed Navn: Forsøgsvejledning Mælkesyrebakterier og holdbarhed Formål med forsøget Formålet med denne øvelse er at undersøge mælkesyrebakteriers og probiotikas evne til at øge
Læs mereProtokol for genetisk bestemmelse af ABO blodtyper
Page1 Udarbejdet i samarbejde mellem: Kåre Lehmann, Annabeth Høgh Petersen, Anne Rusborg Nygaard og Jørn M. Clausen Page2 VIGTIGT: SKIFT PIPETTE SPIDSER/TIPS EFTER HVER GANG!! Så undgår du at forurene
Læs merePCR (Polymerase Chain Reaction): Opkopiering af DNA
PCR (Polymerase Chain Reaction): Opkopiering af DNA PCR til at opkopiere bestemte DNA-sekvenser i en prøve er nu en af genteknologiens absolut vigtigste værktøjer. Peter Rugbjerg, Biotech Academy PCR (Polymerase
Læs mereEkstraktion af proteiner fra kød, æg og mælkeprodukter
Ekstraktion af proteiner fra kød, æg og mælkeprodukter Udarbejdet af Lektor Lars Haastrup Pedersen, forskningsadjunkt Claus Gyrup Nielsen, Phd. Anders Bundgaard Sørensen, Phd. Malene Bredal Brohus samt
Læs mereLaboratorieprotokol for manuel isolering af DNA fra 0,5 ml prøve
Laboratorieprotokol for manuel isolering af DNA fra 0,5 ml prøve Til isolering af genomisk DNA fra indsamlingssætserierne Oragene - og ORAcollect. Du kan finde flere sprog og protokoller på vores webside
Læs merePå jagt efter min far. Edvotec S-49.
På jagt efter min far. Edvotec S-49. Skolekom eller Frederiksen er leverandører Dansk oversættelse Lektor Åse Uttenthal, Vordingborg Gymnasium og HF. Figurer fra Edvotecs vejledning. Oktober 2017, version
Læs merePlasmidoprensning med kogemetode Oprensning af plasmid DNA med kogemetode for brug til transformation og restriktionsanalyse
www.volvoxdk.dk C. Girnth-Diamba og B. Fahnøe, 2010 Claudia Girnth-Diamba og Bjørn Fahnøe Solrød Gymnasium, Solrød Center 2 DK 2680 Solrød Strand, Denmark E: sgcg@solgym.dk og sgbf@solgym.dk Plasmidoprensning
Læs mereGerningsstedets gåde Den usynlige sandhed - DNA PCR Basics Kit. Katalog nr. 166-2600EDU
1 Gerningsstedets gåde Den usynlige sandhed - DNA PCR Basics Kit Katalog nr. 166-2600EDU Bemærk: Kittet indeholder temperaturfølsomme dele. Åbn derfor straks pakken og læg de dele, der er mærket med -20
Læs mereDNA origami øvelse. Introduktion. DNA origami øvelse 3 timer 2018
DNA origami øvelse Introduktion I denne øvelse bruger vi DNA origami teknikken til at samle en tavle af DNA med dimensioner på 70 nm x 100 nm. Tavlen dannes af et langt enkeltstrenget DNA molekyle, der
Læs mereAlgedråber og fotosyntese
Algedråber og fotosyntese Fotosyntesen er en utrolig kompleks proces, som kan være svær at forstå. Heldigvis kan fotosyntesen illustreres på en måde, så alle kan forstå, hvad der helt præcist foregår i
Læs mereOpdateret d. 17. august Biosensor. Niveau 1. Øvelsesvejledning
Opdateret d. 17. august 2017 Biosensor Niveau 1 Øvelsesvejledning Vigtig information om brug af Biosensor-kittet for undervisere Før øvelsen startes er det vigtigt, at underviseren har læst følgende erklæring
Læs mereDe fremstillede transformerede kloner kan eventuel analyseres som beskrevet i punkt C.
11. juni UVM sags nr. 166.471.021 AT jnr. 20050002257 Aftale mellem Undervisningsministeriet og Arbejdstilsynet om retningslinjer for godkendte forsøg med genteknologi i henhold til Bekendtgørelse om genteknologi
Læs mereKapitel 1 Genteknologi (1/6)
Kapitel 1 Genteknologi (1/6) Transformation FOTO: SØREN LUNDBERG FORMÅL At isolere plasmider fra plasmidbærende bakterier og overføre dem til andre bakterier. TEORI Transformation er den teknik, hvor generne
Læs mereTag dine gener om halsen. Isoler dit eget DNA, og lav et halssmykke ud af det.
Samarbejde mellem gymnasier og Aarhus Universitet Bioteknologiske eksperimenter Tag dine gener om halsen. Isoler dit eget DNA, og lav et halssmykke ud af det. Denne øvelse er baseret på øvelseskittet:
Læs mereFind enzymer til miljøvenligt vaskepulver
Find enzymer til miljøvenligt vaskepulver Enzymer, der er aktive under kolde forhold, har adskillige bioteknologiske anvendelsesmuligheder. Nye smarte og bæredygtige produkter kan nemlig blive udviklet
Læs mereDNA origami øvelse DNA origami øvelse
DNA origami øvelse Introduktion I denne øvelse bruger vi DNA origami teknikken til at samle en tavle af DNA med dimensioner på 70 nm x 100 nm. Tavlen dannes af et langt enkeltstrenget DNA molekyle, der
Læs mereTitel: OPLØSELIGHEDEN AF KOBBER(II)SULFAT. Litteratur: Klasse: Dato: Ark 1 af. Helge Mygind, Kemi 2000 A-niveau 1, s. 290-292 8/9-2008/OV
Fag: KEMI Journal nr. Titel: OPLØSELIGHEDEN AF KOBBER(II)SULFAT Navn: Litteratur: Klasse: Dato: Ark 1 af Helge Mygind, Kemi 2000 A-niveau 1, s. 290-292 8/9-2008/OV Formålet er at bestemme opløseligheden
Læs mereIsolering af DNA fra løg
Isolering af DNA fra løg Formål: At afprøve en metode til isolering af DNA fra et levende væv. At anvende enzymer.. Indledning: Isolering af DNA fra celler er første trin i mange molekylærbiologiske undersøgelser.
Læs mereBiotechnology Explorer GMO analyse Kit
1 Biotechnology Explorer GMO analyse Kit Katalog nr.166-2500edu www.biorad.com Oversat og bearbejdet af Birgit Sandermann Justesen december 2005 - revideret februar 2010 Bemærk: Kittet indeholder temperaturfølsomme
Læs mereE 10: Fremstilling af PEC-solceller
E 10: Fremstilling af PEC-solceller Formål Formålet med forsøget er at fremstille PEC (Photo Electro Chemical) solceller ud fra vinduesruder, plantesaft, hvid maling og grafit fra en blyant. Apparatur
Læs mereØvelse med tarmkræftceller i kultur.
Øvelse med tarmkræftceller i kultur. Baggrund Hver 3. dansker bliver ramt af kræft, inden de er blevet 75 år. Tyktarmskræft er den 3. hyppigste kræftform hos både mænd og kvinder, hvor henholdsvis 7.3
Læs mereDNA origami øvelse DNA origami øvelse
DNA origami øvelse Introduktion I denne øvelse bruger vi DNA origami teknikken til at samle en tavle af DNA med dimensioner på 70 nm x 100 nm. Tavlen dannes af et langt enkeltstrenget DNA molekyle, der
Læs mereSTUDERENDES ØVELSESARK TIL EKSPERIMENT A: NATURLIGE NANOMATERIALER
STUDERENDES ØVELSESARK TIL EKSPERIMENT A: NATURLIGE NANOMATERIALER Navn: Dato:.. MÅL: - Lær om eksistensen af naturlige nanomaterialer - Lysets interaktion med kolloider - Gelatine og mælk som eksempler
Læs mereUndersøgelse af forskellige probiotiske stammer
Undersøgelse af forskellige probiotiske stammer Formål Formålet med denne øvelse er: 1. At undersøge om varer med probiotika indeholder et tilstrækkeligt antal probiotiske bakterier, dvs. om antallet svarer
Læs mere230 215 200 185 170 ionic + - ionic titanium. pro 230 steam
1 8 1 9 3 2 230 215 200 185 170 ionic + - 5 4 6 7 pro 230 steam ionic titanium 2 DANSK Glattejern i pro 230 steam Glattejernet i pro 230 steam fra BaByliss er et dampglattejern med meget høj temperatur
Læs mereIdentifikation af aminosyre
Identifikation af aminosyre Kapitel 8: Bioteknologi proteiner, DNA og bioethanol Problemstilling Aminosyrer er opløselige i vand og har syre-baseegenskaber. Et 2-aminosyremolekyle indeholder mindst én
Læs mereKonkurrence mellem to bakteriearter
1 Biologi-forsøg: Populationsbiologi/evolution Konkurrence mellem to bakteriearter Forsøget undersøger, hvordan en ydre miljøfaktor (temperatur) påvirker konkurrencen mellem to forskellige arter. I dette
Læs mereELISA Immuno Explorer TM Kit
- 1 - ELISA Immuno Explorer TM Kit Katalog nummer 166-2400EDU Til læreren Dette kit er lavet for at lette og illustrere immunologiundervisningen og kan give en øget forståelse af antigen-antistof interaktionen,
Læs mereLøsninger til udvalgte opgaver i opgavehæftet
V3. Marstal solvarmeanlæg a) Den samlede effekt, som solfangeren tilføres er Solskinstiden omregnet til sekunder er Den tilførte energi er så: Kun af denne er nyttiggjort, så den nyttiggjorte energi udgør
Læs mereBiosensor. by Biotech Academy. Øvelsesvejledning
Biosensor by Biotech Academy Øvelsesvejledning Vigtig information om brug af biosensor kittet for undervisere Før øvelsen startes, er det vigtigt at underviseren har læst følgende erklæring og lærervejledningen,
Læs mereBiosensor Niveau 1 Øvelsesvejledning
Opdateret august 2018 Biosensor Niveau 1 Øvelsesvejledning Vigtig information om brug af Biosensor-kittet for undervisere Før øvelsen startes er det vigtigt, at underviseren har læst følgende erklæring
Læs mereBilag til Kvantitativ bestemmelse af glucose
Bilag til Kvantitativ bestemmelse af glucose Det synlige formål med øvelsen er at lære, hvorledes man helt præcist kan bestemme små mængder af glucose i en vandig opløsning ved hjælp af målepipetter, spektrofotometer
Læs mereBrugsanvisning til Depend GelLack
Depend GelLack En ny generation af neglelak, der hærder i LED-lampe og giver et lakresultat, som holder i 2-3 uger. Depend GelLack er et nyt revolutionerende produkt, der er lettere at påføre end almindelig
Læs mereProduktion af biodiesel fra rapsolie ved en enzymatisk reaktion
Produktion af biodiesel fra rapsolie ved en enzymatisk reaktion produceres fra rapsolie som består af 95% triglycerider (TG), samt diglycerider (DG), monoglycerider (MG) og frie fedtsyrer (FA). Under reaktionen
Læs mereKvantitativ bestemmelse af reducerende sukker (glukose)
Kvantitativ bestemmelse af reducerende sukker (glukose) Baggrund: Det viser sig at en del af de sukkerarter vi indtager med vores mad er hvad man i fagsproget kalder reducerende sukkerarter. Disse vil
Læs mereBrugsanvisning IVD Matrix HCCA-portioned
Brugsanvisning IVD Matrix HCCA-portioned Rendyrket matrixsubstans til matrix-assisteret-laser-desorption-ionisering time-of-flight-massespektrometri (MALDI-TOF-MS). CARE- produkterne er designet til at
Læs mereBiotechnology Explorer ELISA Immuno Explorer Kit. Instruktionsmanual
Biotechnology Explorer ELISA Immuno Explorer Kit Instruktionsmanual Katalognummer 166-2400EDU explorer.bio-rad.com Delene i dette kit er sendt i separate æsker. Opbevar posen med reagenser i køleskab indefor
Læs mereBiologisk rensning Fjern opløst organisk stof fra vand
Spildevandscenter Avedøre Biologisk rensning Fjern opløst organisk stof fra vand Øvelse I Formål: På renseanlægget renses et mekanisk, biologisk og kemisk. I den biologiske rensning på renseanlægget benyttes
Læs mereSom substrat i forsøgene anvender vi para nitrophenylfosfat, der vha. enzymet omdannes til paranitrofenol
Enzymkinetik Introduktion I disse forsøg skal I arbejde med enzymet alkalisk fosfatase. Fosfataser er meget almindelige i levende organismer og er enzymer med relativt bred substrat specificitet. De katalyserer
Læs mereForsøgsprotokol til larveforsøg: Tilsætning af 3 dage gamle larver til gødning inficeret med patogene bakterier
Forsøgsprotokol til larveforsøg: Tilsætning af 3 dage gamle larver til gødning inficeret med patogene bakterier Formål: at undersøge udviklingen i mængden af tilsatte patogene bakterier til hønsegødning.
Læs mereSådan laver du sundere juleguf
Sådan laver du sundere juleguf Læs Rasmus Fredslunds seks sunde og e-numre-fri opskrifter på julegodter. Orangestænger 3 appelsiner, helst økologiske (lav eventuelt lidt ekstra og gem i køleskabet) 1 liter
Læs mereSilikoneposer. Produktinformation
Silikoneposer da Produktinformation Kære kunde! I dine nye silikoneposer kan du både holde madvarer friske, fryse og marinere dem og du kan endda også opvarme og tilberede retter i poserne. Silikoneposerne
Læs mere1 ISMASKINE OXIRIA Sikkerhed og generel beskrivelse VIGTIGE SIKKERHEDSFORANSTALTNINGER Ved brug af elektriske apparater, må der altid tages sikkerhedsforanstaltninger: 1. Læs denne vejledning omhyggeligt,
Læs mereBeer Machine Q/A. minutter. Herefter er monteringen nemmere Pensel evt. lidt madolie på indersiden af holderne
Beer Machine Q/A Samling og test Problem Den store firkantede pakning hopper op i hjørnerne Holderne kan være svære at montere efter pakningen er monteret Beer Machine holder ikke trykket Beer Machine
Læs mereSMARTBOARD. Hvordan fungerer det? Et kursusmateriale
SMARTBOARD Hvordan fungerer det? Et kursusmateriale Materialet må ikke kopieres eller på anden måde videredistribueres Opgave 1 Det grundlæggende a) Skriv med håndskrift på tavlen følgende brug pen eller
Læs merePRØVETAGNING. Kontrol af patientforberedelse Nogle analyser kræver, at patienten er fastende inden prøvetagningen.
PRØVETAGNING Identifikation af patienten Identifikation følger Region Hovedstadens vejledning: Identifikation af patienter [1] Bed patienten om at oplyse fulde navn og CPR-nr. Det er ikke tilladt at bede
Læs mereBROMBÆRSOLCELLEN. Øvelsesvejledning. nano-science center
BROMBÆRSOLCELLEN Øvelsesvejledning nano-science center kø b e n h av n s u n i v e r s i t e t Farvning af titandioxid Fremstilling af kulelektroden Først skal I lave et farvestof, som titandioxidlaget
Læs mereEnergi Til Livet Nu -Sundhed i en travl hverdag. Kombucha guide
Dette skal du bruge Kombucha guide (Til 2 liter kombucha lavet på ActiGreen Grøn te ekstrakt Udstyr: Stort patentglas på 2 liter 1 stk. viskestykke klippet ud 2 elastikker 1 plastik si (scoby kan IKKE
Læs mereFAQ (Frequent Asked Questions) OSS (Ofte Stillede Spørgsmål)
FAQ (Frequent Asked Questions) OSS (Ofte Stillede Spørgsmål) Batteriet (ego) Tanken (Væskebeholder) Brænder (Coil) Påfyldning af væske Opladning af batteri Vedligehold Ryge/damp væsker Nikotin Fordele
Læs mereAppendix 1: Udregning af mængde cellesuspention til udsåning. Faktor mellem total antal celler og antal celler der ønskes udsås:
Appendix Appendix 1: Udregning af mængde cellesuspention til udsåning Fortyndingsfaktor: Efter trypsinering og centrifugering af celler fra cellestokken, opblandes cellerne i 1 ml medie. For at lave en
Læs mereGrøn energi - biogas. Teknologi, Fysik og biologi. Grøn energiproduktion - biogas. Svendborg Htx og Haarhs skole. Grundforløbet, uge 47-49 2013
Brobygning på Htx Teknologi, Fysik og biologi Grøn energi - biogas Svendborg Htx og Haarhs skole 1 Grundforløbet, uge 47-49 2013 HTX Svendborg Tekniske Gymnasium Metoder og Samspil mellem fag Grøn energiproduktion
Læs mere7900003 24 analyser Circulating Tumor Cell Control Kit
7900003 24 analyser Circulating Tumor Cell Control Kit 1 TILSIGTET ANVENDELSE Til in vitro-diagnostisk brug CELLSEARCH -kontrolkit til cirkulerende tumorceller er beregnet til brug som analysekontrol for
Læs mereDet store energikørekort
Blik- og Rørarbejderforbundet - i forbund med fremtiden El- og Vvs-branchens Uddannelsessekretariat - Højnæsvej 71-2610 Rødovre - tlf.: 36 72 64 00 www.vvs-uddannelse.dk/folkeskole - E-mail: folkeskole@vvsu.dk
Læs mereSDI-test. Brugsanvisning. Version 1.0 DK
DK SDI-test Brugsanvisning Version 1.0 DK 10102018 En almindelig undersøgelse af sædkvalitet fortæller kun om sædcellerenes antal, om de svømmer fint og ser normale ud. DNA et i sædcellerne undersøges
Læs mereIntroduktion til Calc Open Office med øvelser
Side 1 af 8 Introduktion til Calc Open Office med øvelser Introduktion til Calc Open Office... 2 Indtastning i celler... 2 Formler... 3 Decimaler... 4 Skrifttype... 5 Skrifteffekter... 6 Justering... 6
Læs mereTegning/Todimensionale billeder
Tegning/Todimensionale billeder - TEGNETEKNIKKER, REDSKABER OG OPGAVER At tegne er en proces, en måde at skildre på. Hemmeligheden ved en vellykket tegning er en omhyggelig iagttagelse, en forenkling af
Læs mereSÅDAN GØR DU, NÅR DU KOMMER HJEM
Du skal i gang med at måle CRP på apparatet Quik Read Go. Det er fødeafdelingen, der fortæller dig, hvor ofte du skal foretage CRP-måling og lave de øvrige undersøgelser, som du skal gennemføre på dig
Læs mereWord-5: Tabeller og hængende indrykning
Word-5: Tabeller og hængende indrykning Tabel-funktionen i Word laver en slags skemaer. Word er jo et amerikansk program og på deres sprog hedder skema: table. Det er nok sådan udtrykket er opstået, da
Læs mereIVD Bacterial Test Standard
Brugsanvisning IVD Bacterial Test Standard Standard for massekalibrering, som viser en typisk Escherichia coli DH5- alfapeptid- og -proteinprofil plus yderligere proteiner. Til anvendelse ved matrix-assisteret-laser-desorption-ionisering
Læs mereINGENIØRENS ARBEJDSMETODE: ØV DIG I METODEN
MODUL 7: INTRODUKTION TIL INNOVATION INGENIØRENS ARBEJDSMETODE ELEVVEJLEDNING INGENIØRENS ARBEJDSMETODE: ØV DIG I METODEN I denne aktivitet skal I øve jer i at bruge ingeniørens arbejdsmetode. Øvelsen
Læs mereBestemmelse af koffein i cola
Bestemmelse af koffein i cola 1,3,7-trimethylxanthine Koffein i læskedrikke Læs følgende links, hvor der blandt andet står nogle informationer om koffein og regler for hvor meget koffein, der må være i
Læs mereElkedel Brugsanvisning
Tillykke med købet af denne elkedel! Læs venligst brugsanvisningen omhyggeligt, inden elkedelen tages i brug, og gem brugsanvisningen til fremtidig brug. Elkedel Brugsanvisning Model: MK-17S17C Sikkerhedsforanstaltninger
Læs mereSikkerhedsdatablad. 3. Sammensætning af/oplysning om indholdsstoffer Einecs nr. Stoffer Klassificering w/w% Note 200-543-5
Sikkerhedsdatablad 1. Identifikation af stoffet/det kemiske produkt og af selskabet/virksomheden PR-nummer: 1065464 Udarbejdelsesdato: 31-10-2005 Udarbejdet den: 15-07-2010 / LBN Anvendelse: Renser sølv
Læs mereNa + -selektiv elektrode
C.11.1 Na + -selektiv elektrode Formål: Øvelsens formål er at kalibrere en Na + -ISE (ionselektiv elektrode) finde elektrodens linearitetsområde anvende elektroden til koncentrationsbestemmelse belyse
Læs mereAlgedråber og fotosyntese lærervejledning
Algedråber og fotosyntese lærervejledning Kære lærer Først og fremmest tak fordi du har tænkt dig at bruge dette forsøg som en del af din undervisning. Dette dokument er en komplet vejledning til dig,
Læs mereHjemmelavet ost. Hvis man ikke har prøvet det før, kan det måske være lidt svært at overskue at gå igang med at lave sin egen hjemmelavede ost, så...
Hvis man ikke har prøvet det før, kan det måske være lidt svært at overskue at gå igang med at lave sin egen hjemmelavede ost, så... Her er lidt hjælp En skridt for skridt opskrift til en af de nemmeste
Læs mereKonkurrence mellem to bakteriearter
1 Biologi-forsøg: Populationsbiologi/evolution Konkurrence mellem to bakteriearter Forsøget undersøger, hvordan en ydre miljøfaktor (temperatur) påvirker konkurrencen mellem to forskellige arter. I dette
Læs mereSTUDERENDES ØVELSESARK TIL EKSPERIMENT B: FLYDENDE KRYSTALLER
Navn: Dato:.. STUDERENDES ØVELSESARK TIL EKSPERIMENT B: FLYDENDE KRYSTALLER MÅL: - Forstå selv-samlingskonceptet. - Forstå måden et materiale opfører sig på, på makroskala, er afhængig af dets struktur
Læs mereFLERE TIMERS UNDERHOLDNING ANDRE AKTIVITETER
FLERE TIMERS UNDERHOLDNING ANDRE AKTIVITETER // Vil du gerne have at dit arrangement strækker sig over flere timer, giver vi her en række forslag til aktiviteter der kan laves før eller efter selve CRIMEbuster
Læs mereMaterialeliste: Ready-to-loadTM DNA prøver til elektroforese. Medfølgende reagenser og tilbehør. Egne materialer
Elevvejledning 1 Materialeliste: Ready-to-loadTM DNA prøver til elektroforese A B C D E F Plasmid DNA (uskåret) Plasmid skåret med Bgl I Plasmid skåret med Eco RI Lambda DNA (uskåret) Lambda DNA skåret
Læs mere