Genscreen HIV-1/2 Version 2

Transkript

1 Genscreen HIV-1/2 Version 2 1 plade plader SCREENINGSKIT TIL DETEKTERING AF ANTISTOFFER MOD HIV-1 OG HIV- 2 I SERUM/PLASMA VED ENZYMIMMUNANALYSE /01

2 INDHOLD 1 - KLINISK VÆRDI 2 - PRINCIPPET FOR Genscreen HIV-1/2 Version 2-KIT 3 - INDHOLDET AF Genscreen HIV-1/2 Version 2-KIT 4 - OPBEVARINGSBETINGELSER - HOLDBARHED 5 - KRAV TIL MATERIALE, DER IKKE FØLGER MED KITTET 6 - INDSAMLING OG HÅNDTERING AF PRØVEMATERIALE 7 - FORHOLDSREGLER 8 - FORBEREDELSE AF REAGENSER 9 - ANALYSEPROCEDURE 10 - ANBEFALINGER 11 - BEREGNING OG FORTOLKNING AF RESULTATERNE 12 - SPEKTROFOTOMETRISK KONTROL AF PRØVE- OG KONJUGATPIPETTERING 13 - YDEEVNE 14 - TESTENS BEGRÆNSNINGER 15 - REFERENCER 2

3 1 - KLINISK VÆRDI AIDS (Acquired Immunodeficiency Syndrome) er en virusbetinget infektionssygdom, der er karakteriseret ved stærkt nedsat immunforsvar. To typer vira, der er forbundet med Lentivirus-gruppen, er blevet isoleret fra lymfocytterne hos patienter, der lider af AIDS eller har sygdommens forstadier. Den første ved navn HIV-1 blev isoleret i Frankrig og derefter i USA. Den anden ved navn VIH-2 eller HIV-2 blev isoleret hos to patienter, der var bosiddende i Afrika. Denne begivenhed var anledning til et nyt fokus på AIDS i Vestafrika. Kendskab til HIV-virusstammernes genetiske variation opstod ved sekvensering af GAG-, POL- og ENV-generne i repræsentative stammer af hver undertype. HIV-1-viraene opdeles i to grupper: M-gruppen, herunder ni undertyper (A til I), og O-gruppen. HIV-2-virusen omfatter fem undertyper. Den geografiske fordeling af de forskellige undertyper er efterhånden defineret ganske nøje. Nogle HIV-1-varianters GAG- og POL-gener stemmer kun 70 % overens med hovedkulturerne, mens ENV-generne kun stemmer 50 % overens. Disse forskelle kan forklare fejldiagnosticeringen af infektionen hos nogle patienter. De forskellige VIH-2 eller HIV-2-kulturer har antigener tilfælles med SIV-abevirus i alle proteiner (envelopeproteiner og coreproteiner: heterologi = 30 %), men udtrykker mindre end 40 % homologi med HIV-1- envelopeproteiner. Genscreen HIV-1/2 Version 2 muliggør samtidig konstatering af antistoffer mod HIV-1 og HIV PRINCIPPET FOR Genscreen HIV-1/2 Version 2-SÆTTET Genscreen HIV-1/2 Version 2 er en enzymatisk immunologisk analyse baseret på totrins sandwich-princip, til påvisning af de forskellige antistoffer, der er forbundet med HIV-1- og/eller HIV-2-virus i humant serum eller plasma. Genscreen HIV-1/2 Version 2 er baseret på en fast fase, der er belagt med oprensede antigener (HIV 1 rekombinante gp160- og p25-proteiner og et peptid, der ligner det immunodominante epitop på HIV-2- envelopeproteinet), og af et antigen-peroxidase konjugat (peptider, der ligner de immundominante epitoper på HIV-1- og HIV-2-envelopeglykoproteinerne og nukleocapsid rekombinant protein). Analyseproceduren omfatter følgende reaktionstrin: 1. De serumprøver og kontrolsera der skal analyseres, afpipetteres i mikrotiterbrøndene. Ved tilstedeværesle af HIV-1 og/eller HIV-2 antistoffer, vil disse binde sig til de antigener, der er immobiliserede på den faste fase. Prøvefordelingen valideres ved hjælp af en farveændring fra lilla til blå (SDP = Sample Deposition Proof). 2. Peroxidasemærkede, oprensede HIV-1- og HIV-2-antigener tilsættes. De binder sig på skift til IgG-, IgM- eller IgA-antistofferne fra patientprøverne der er bundet på den faste fase. 3. Når den ubundne konjugat fraktion er fjernet ved vask, vises tilstedeværelsen af det immobiliserede enzym på komplekserne efter inkubationen med substrat 4. Reaktionen standses, og absorberingerne aflæses ved hjælp af et spektrofotometer ved 450/ nm. Den målte absorbering på en prøve afgør forekomsten eller fraværet af de pågældende HIV-1- og/eller HIV-2- antistoffer. 3

4 3 - INDHOLDET AF Genscreen HIV-1/2 Version 2-SÆTTET Alle reagenser er udelukkende til in vitro-diagnosticering. Etiket Reagenssammensætning Præsentation R1 Microplate Mikrotiterplade 12 teststrimler med 8 brønde, belagt med oprensede HIV-1- og HIV-2-antigener 1 plade 5 plader R2 Concentrated washing solution (20X) Koncentreret vaskereagens (20X) Tris NaCl - buffer, ph 7,4 Konseveringsmiddel: ProClin 300 (0,04 %) 70 ml 235 ml R3 Negative control Negativ kontrol Varmeinaktiveret humant plasma, der er negativt for HBs-antigen, HIV-antigen, anti HIV-1, anti HIV-2 og anti- HCV-antistoffer. Konserveringsmiddel: Natriumazid < 0,1 % 1 ml 1 ml R4 Cut-off control Cut-Off-kontrol Varmebehandlet humant plasma, der er positivt for HIVantistoffer, negativt for HBs-antigener og HCV-antistoffer Konserveringsmiddel: Natriumazid < 0,1 % 2,5 ml 2,5 ml R5 Positive control Positiv kontrol Varmebehandlet humant plasma, der er positivt for HIVantistoffer, negativt for HBs-antigener og HCV-antistoffer Konserveringsmiddel: Natriumazid < 0,1 % 1 ml 1 ml R6 Sample diluent Prøvefortynder Kalveserumopløsning (Tris-buffer med 0,1 % kloroform og ProClin 300 samt farveindikator) 14 ml 2 flasker 2 x 10 ml R7a R7b R8 R9 Conjugate Conjugate diluent Substrate buffer Chromogen: TMB solution (11X) R10 Stopping solution Stopopløsning 1N-svovlsyreopløsning Konjugat Peroxidasemærkede oprensede HIV-1- og HIV-2- antigener Konjugatfortynder Skummetmælksopløsning (Tris-buffer med 0,1 % kloroform og ProClin 300) Peroxidasesubstratbuffer Natriumcitrat- og natriumacetatopløsning med ph 4,0, der indeholder H (0,015 %) og DMSO (4 %) Kromogen Opløsning, der indeholder tetramethylbenzidin (TMB) q.s. ad 12,5 ml 12,5 ml 60 ml 5 ml 28 ml 2 flasker q.s. ad 2 x 30 ml 2 flasker 2 x 30 ml 2 flasker 2 x 60 ml 2 flasker 2 x 5 ml 3 flasker 3 x 28 ml 4 - OPBEVARINGSBETINGELSER - HOLDBARHED Kittet skal opbevares ved +2-8 C. Ved opbevaring ved denne temperatur er alle regenser i Genscreen HIV 1/2 Version 2-kittet efter åbning holdbare indtil udløbsdato med følgende undtagelser: R1: Når du har åbnet den vakuum-forseglede pose, kan teststrimlerne med mikropladebrønde bruges i en måned, når de opbevares ved +2-8 C i den omhyggeligt forseglede pose. R2: Den fortyndede vaskeopløsning kan opbevares ved stuetemperatur (2-30 C) i 2 uger. Den koncentrerede vaskeopløsning (R2) kan opbevares ved C. R7a + R7b: Reagenser opbevaret ved +2-8 C kan bruges i 4 uger efter flaskerne er blevet rekonstitueret. R8 + R9: Efter rekonstitution kan reagenset, når det opbevares i mørke, bruges i 6 timer ved stuetemperatur (18-30 C). 4

5 5 - KRAV TIL MATERIALE, DER IKKE FØLGER MED KITTET Destilleret vand. Natriumhypochlorit (husholdningsklor) og natriumbikarbonat. Automatiske eller halvautomatiske, justerbare eller forindstillede pipetter eller multipipetter til måling og fordeling af 25 μl, 75 μl, 80 μl og 200 μl. Graduerede måleglas på 25 ml, 100 ml og ml. Beskyttet beholder til farligt biologisk affald. Vandbad eller tilsvarende inkubator til mikrotiterplader med termostatindstilling til 37 C ± 1 C (*). Manuel, halvautomatisk eller automatisk mikrotitervasker (*). Mikrotiterlæser med filtre på 450 nm og nm (*). (Kontakt vores tekniske serviceafdeling for yderligere oplysninger om monokromatisk procedure). Sugende papir. (*) Kontakt os for yderligere detaljerede oplysninger om det udstyr, der anbefales af vores tekniske afdeling. 6 - INDSAMLING OG HÅNDTERING AF PRØVEMATERIALE Blodprøven tages i overensstemmelse med gældende praksis. Testen skal udføres på ufortyndet serum eller plasma (tilsat EDTA, heparin, citrat eller ACD-baserede antikoagulerende stoffer). Prøven centrifugeres hurtigst muligt for at undgå eventuel hæmolyse. Kraftig hæmolyse kan påvirke testresultatet. Opslæmmede fibrinpartikler eller -aggregater kan give fejlagtige positive resultater. Prøverne må ikke opvarmes. Prøvematerialet kan opbevares ved +2-8 C, hvis screeningen udføres inden for 7 dage, eller det kan nedfryses ved -20 C. For at undgå fibrinudfældninger optøs plasma ved opvarmning i få minutter i et vandbad på 40 C. Undgå gentagen nedfrysning/optøning. Prøver, der har været nedfrosset og optøet mere end tre gange, kan ikke anvendes. Hvis prøvematerialet skal sendes, skal det pakkes ifølge de gældende regulativer angående transport af ætiologiske stoffer. UNDGÅ AT ANVENDE KONTAMINERET, HYPERLIPÆMISK ELLER HYPERHÆMOLYSERET SERUM ELLER PLASMA. Bemærk: Prøver, der indeholder op til 90g/l albumin, 200 mg/l bilirubin, lipæmiske prøver, der indeholder mængder op til det, der svarer til 36 g/l triglycerid, og hæmolyserede prøver, der indeholder op til 20 g/l hæmoglobin, påvirker ikke resultaterne. 7 - FORHOLDSREGLER Resultaternes pålidelighed afhænger af en korrekt implementering af følgende regler for god laboratoriepraksis: Testnavnet samt et specifikt identifikationsnummer for testen er skrevet på rammen på hver mikrotiterplade. Dette specifikke identifikationsnummer er desuden angivet på hver teststrimmel. Genscreen HIV 1/2 Version 2: Specifikt ID-nummer = 05. Kontroller det specifikke identifikationsnummer før enhver brug. Hvis identifikationsnummeret mangler eller er forskelligt fra det angivne nummer ovenfor, må teststrimlen ikke bruges. Anvend ikke reagenser der er udløbet. Bland ikke reagenser fra forskellige partier i samme testkørsel. Bemærk! Det gælder for vaskeopløsning (R2 identificeret 20X med grøn skrift på etiketten), peroxidasesubstratbuffer (R8, etiketidentifikation: TMB-buffer, farvet blå), kromogen (R9, etiketidentifikation: TMB 11X, farvet lilla) og stopopløsning (R10, etiketidentifikation: 1N farvet rød). Det er muligt at bruge andre partier end dem i dette sæt under forudsætning af, at det samme parti bruges inden for hele testforløbet. Disse reagenser kan anvendes sammen med en række andre produkter fra vores virksomhed. Desuden kan vaskeopløsningen (R2 identificeret 20X med grøn skrift på etiketten) blandes med en af de to andre vaskeopløsninger indeholdt i de forskellige Bio-Rad reagenskit (R2 identificeret 10X med blå skrift eller 10X med orange skrift på etiketten), når de rekonstitueres korrekt og på betingelse af at der kun bruges én blanding til et bestemt testforløb. Kontakt vores tekniske serviceafdeling for detaljerede oplysninger. Udviklingsopløsningen (substratbuffer + kromogen) skal være pink. Ændres den pink farve inden for få minutters opløsning, kan reagensen ikke anvendes og skal udskiftes. Forberedelsen af udviklingsopløsningen kan foretages i en ny engangsplastikbakke eller en glasbeholder, der først er rengjort med 1N HCI og derefter skyllet grundigt med destilleret vand og tørret. Denne reagens skal opbevares i mørke. Lad alle reagenser stabilisere sig i 10 minutter ved stuetemperatur før brug Rekonstituer reagenserne omhyggeligt. Kontroller, at pipetterne og andet udstyr er i orden og fungerer korrekt. Analyseproceduren må ikke ændres. Vask: Følg de angivne vaskeprocedurer nøje for at opnå de bedst mulige testresultater. 5

6 6 Helbreds- og sikkerhedsinstruktioner Den positive kontrol er varmeinaktiveret. Hver human donorenhed, der er anvendt ved fremstilling af den negative kontrol, er blevet testet og fundet ikkereaktivt for hepatitis B-overfladeantigen (HBs Ag), antistoffer mod hepatitis C (HCV Ab) og antistoffer mod Human Immunodeficiency Virus (HIV-1 og HIV-2). Hver human donorenhed, der er anvendt ved fremstilling af den positive kontrol- og cut-off-serum, er blevet testet og fundet ikke-reaktivt for hepatitis B-overfladeantigen (HBs Ag) og antistoffer mod hepatitis C (HCV Ab). Ingen kendt testmetode kan garantere fuld sikkerhed for tilstedeværelse af smittefarligt kildemateriale. Derfor bør alle materialer af human oprindelse betragtes som potentiel smittekilde og håndteres efter samme forholdsregler som patientprøver. Alt udstyr, der er i direkte kontakt med såvel prøvemateriale og reagenser som vaskeopløsninger, skal betragtes som kontaminerede produkter og håndteres derefter. Autoklavering i min. én time ved 121 C er den bedste metode til deaktivering af HIV- og HB-vira. ANBRING IKKE OPLØSNINGER, DER INDEHOLDER NATRIUMHYPOCHLORIT, I AUTOKLAVEN. Produktdatablad udleveres ved henvendelse. Behandling af kontaminerede opløsninger og kontamineret udstyr med natriumhypochlorit ved en slutkoncentration på 5 % i 30 minutter kan også inaktivere HIV- og HB-vira. Undgå, at hud og slimhinder kommer i kontakt med substratbufferen, kromogenet og stopreagens (fare for forgiftning, irritation eller forbrændinger). Kemikalier skal håndteres og kasseres ifølge god laboratoriepraksis. Se piktogrammet(merne), som er angivet på mærkaterne, og informationerne sidst i brugsanvisningen i forbindelse med farer og forholdsregler for kemiske komponenter i dette testsæt. Sikkerhedsdatabladet kan findes på FORBERDELSE AF REAGENSER Bemærk: Lad reagenserne stabilisere sig ved stuetemperatur (18-30 C), før de anvendes. Reagens 1 (R1): Mikrotiterplade Hver støtteramme indeholder 12 teststrimler, der er pakket i en forseglet foliepose. Åbn posen med en saks eller skalpel 0,5-1 cm over forseglingen. Åbn posen, og tag rammen ud. Læg de ubrugte strimler tilbage i posen. Luk posen omhyggeligt, og opbevar den ved +2-8 C. Reagens 2 (R2): Koncentreret vaskereagens (20X) Fortynd 1:20 med destilleret vand til den brugsklare opløsning. Forbered 800 ml til én plade med 12 teststrips. Reagens (R3): Negativ kontrol Humant serum, negativ for Anti-HIV-1, Anti-HIV-2, Anti-HCV og HBsAg; Indeholder 0,1 % natriumazid som konserveringsmiddel. Reagens (R4): Cut-Off-kontroll Varmeinaktiveret humant plasma, negativ for HBsAg og Anti-HCV, indeholder HIV-antistoffer. Indeholder 0,1 % natriumazid som konserveringsmiddel. Reagens 5 (R5): Positiv kontrol Varmeinaktiveret humant plasma, negativ for HBsAg og Anti-HCV, indeholder HIV-antistoffer. Indeholder 0,1 % natriumazid som konserveringsmiddel. Reagens 6 (R6): Prøvefortynder Kalveserumopløsning (Tris-buffer med 0,1 % kloroform og ProClin 300 samt farveindikator). Reagens 7a (R7a): Konjugat Peroxidasemærkede, oprensede HIV-1- og HIV-2-antigener. Indeholder BSA og 0,1 % ProClin 300. Bank forsigtigt flasken mod bordet for at fjerne eventuelt materiale fra gummihætten. Fjern forsigtigt hætten, og hæld indholdet af flasken med konjugatfortynder over i flasken med frysetørret konjugat. Sæt hætten på igen, og lad flasken stå i 10 minutter, mens du ryster og vender den regelmæssigt for at fremme opløsning af konjugatet. Reagens 7b (R7b): Konjugatfortynder Skummetmælksopløsning (Tris-buffer med 0,1 % kloroform og ProClin 300). Reagens 8 (R8): Peroxidasesubstratbuffer En brugsklar citronsyre- og natriumacetatopløsning med ph 4,0, der indeholder 0,015 % hydrogenperoxid og 4 % dimethylsulfoxid (DMSO). Reagens 9 (R9): Kromogen En opløsning, der indeholder tetrametylbenzidin (TMB). Fortynd opløsningen 1:11 med buffersubstrat (f.eks.: 1 ml reagens R ml reagens R8). Når opløsningen er forberedt, er den holdbar 6 timer ved opbevaring i mørke. Reagens 10 (R10): Stopopløsning Brugsklar 1N-svovlsyreopløsning.

7 9 - ANALYSEPROCEDURE Følg den angivne procedure nøje. Negative, positive og cut-off-kontroller skal anvendes i hver analyseserie til validering af testresultaterne. Følg nedenstående regler for god laboratoriepraksis (GLP): 1. Fastlæg omhyggeligt prøvefordelingen og identifikationsoversigten. 2. Klargør den fortyndede vaskeopløsning. 3. Tag transportbakken og teststrips (R1) ud af beskyttelsespakningen. 4. Anvend pladen direkte uden forudgående vask og i rækkefølge: 25 μl fortynder i hver brønd 75 μl negativ kontrolserum (R3) i brønd A1 75 μl cut-off-kontrolserum (R4) i brøndene B1, C1 og D1. 75 μl positiv kontrolserum (R5) i brønd E1. 75 μl prøvemateriale 1 i brønd F1. 75 μl prøvemateriale 2 i brønd G1 osv. Afhængig af det anvendte system er det muligt at ændre placering af kontrollerne ellerdistribueringsrækkefølgen. Blandingen homogeniseres med mindst tre opsugninger med en 75 μl pipette eller ved at ryste mikrotiterpladen efter pipetteringen. Det er også muligt at anvende 100 μl fortyndet prøvemateriale. Prøven fortyndes 3:4 (f.eks. 350 μl serum + 50 μl fortynder). NB: Fordelingen af prøvematerialet kan kontrolleres visuelt på dette stadie: Når prøvematerialet tilsættes, skifter opløsningen farve fra lilla til blå. (se afsnit 12 om automatisk kontrol - SPEKTROFOTOMETRISK KONTROL AF PRØVE- OG KONJUGATPIPETTERING) 5. Mikrotiterpladen afdækkes med selvklæbende film. Pres filmen ned over hele pladen for at sikre en tæt forsegling. 6. Mikrotiterpladen inkuberes i et termostatkontrolleret vandbad eller mikrotiterinkubator ved 37 C ± 1 C i 30 ± 5 minutter. 7. Fjern den selvklæbende film. Sug indholdet af alle brønde op i en beholder til biologisk farligt affald (en beholder med natriumhypochlorit). Tilsæt mindst 370 μl vaskeopløsning i hver brønd. Vent mindst 30 sekunder, på at væsken opsuges. Sug vaskeopløsningen fra igen. Gentag denne procedure mindst to gange (dvs. alt i alt mindst 3 gange vask). Restmængden skal være mindre end 10 μl (om nødvendigt vendes pladen på hovedet på sugende papir). Ved anvendelse af automatisk vasker følges samme procedure (se afsnit 10: anbefalinger). 8. Fordel hurtigt 100 μl konjugatopløsning i alle brøndene. Konjugatopløsningen skal rystes forsigtigt før brug. NB: Fordelingen af konjugatet, der er farvet grønt, kan kontrolleres visuelt på dette stadie (se afsnit 12 om automatisk kontrol - SPEKTROFOTOMETRISK KONTROL AF PRØVE- OG KONJUGATPIPETTERING) 9. Mikrotiterpladen afdækkes med en ny selvklæbende film. Inkuberes ved stuetemperatur (18-30 C) i 30 ± 5 minutter. 10. Fjern den selvklæbende film, tøm alle brønde ved opsugning, og vask mindst 5 gange som beskrevet ovenfor. Restmængden skal være mindre end 10 μl (om nødvendigt vendes pladen på hovedet på sugende papir). 11. Fordel hurtigt 80 μl nyforberedt udviklingsopløsning (R8 + R9) i hver brønd. Lad reaktionen foregå i mørke i 30 ± 5 minutter ved stuetemperatur (18-30 C). Undgå at bruge selvklæbende film under dyrkningen. NB: Fordelingen af udviklingsopløsningen, der er farvet pink, kan kontrolleres visuelt på dette stadie i manipulationen. Der er en tydelig farveforskel på en tom brønd og en brønd med den pink-farvede substratopløsning (se afsnit 12 om automatisk kontrol: SPEKTROFOTOMETRISK KONTROL AF PRØVE- OG REAGENSPIPETTERING). 12. Tilføj 100 μl stopopløsning (R10) i samme rækkefølge og med samme distributionsfrekvens som for substratopløsningen. Homogeniser reagensblandingen. NB: Fordelingen af stopopløsningen, der er ufarvet, kan kontrolleres visuelt på dette stadie i manipulationen. Efter tilsætningen af stopopløsningen forsvinder den pink farve i substratet (for de negative prøver) eller bliver blå til gul (for de positive prøver). 13. Tør undersiden af pladen forsigtigt af. Mindst fire minutter efter tilsætning af stopopløsningen og senest 30 minutter efter at reaktionen er stoppet aflæses den optiske densitet ved 450/ nm ved hjælp af en mikropladeaflæser. 14. Kontroller overensstemmelse mellem aflæsning af resultater og plade- og, prøvefordeling i identifikationsoversigten. 7

8 10 - ANBEFALINGER ADVARSEL! UNDGÅ KONTAMINERING UNDER UDFØRELSE AF ANALYSEN I TILFÆLDE AF KONTAMINERING (væske, der spildes osv.) Ikke-syreholdige væsker, der spildes, skal tørres grundigt op med en 5 % (min.) natriumhypochloritopløsning. Syreholdige væsker, der spildes, skal tørres op uden brug af nogen væsker. Det område, der er spildt på, skal derefter rengøres med en 5 % (min.) natriumhypochloritopløsning. Det materiale, der anvendes til rengøringen, skal placeres i en beholder til biologisk farligt affald og kasseres i overensstemmelse med de relevante sikkerhedsforskrifter (se afsnit 7 om forholdsregler). ANVEND ALDRIG DEN SAMME BEHOLDER TIL FORDELING AF KONJUGAT- OG ENZYMUDVIKLINGSOPLØSNINGEN. OVERHOLD DET ANBEFALEDE ANTAL VASKEPROCEDURER NØJE.* KONTROLLER ENZYMUDVIKLINGSOPLØSNING (buffersubstrat og kromogen) FØR TILSÆTNING. Den skal være farveløs. Hvis der fremkommer en blå farve inden for få minutter efter opløsning, indikerer det, at reagenset kan være kontamineret af metalioner og skal kasseres. Det anbefales at anvende plastikbeholdere og pipetter. Alternativt kan anvendes glas, der først er blevet rengjort med 1N HCI, skyllet grundigt med destilleret vand og tørret. (*) Kontakt os, hvis der ønskes nærmere oplysninger om det udstyr, der anbefales af vores tekniske afdeling BEREGNING OG FORTOLKNING AF RESULTATERNE Forekomst eller fravær af antistoffer mod HIV-1 og/eller HIV-2 måles ved sammenligning af prøvens absorbtionsværdi med den beregnede cut-off-værdi. 1) Beregn den gennemsnitlige absorbering af cut-off-kontrolserum (ODR4) OD (B1) + OD (C1) + OD (D1) ODR4 = 3 2) Beregn cut-off-værdien Cut-off-værdien er bestemt af forholdet: ODR4 C.0. = ) Validering af analyse Absorbtion af den negative kontrolserum bør være mindre end 70 % af cut-off-værdien: ODR3 < 0,7 x C.O Den gennemsnitlige absorbtion af cut-off-kontrolserummet bør være større end 0,80: ODR4 > 0,80 Valgfrit: Forholdet: ODR5/ODR4 bør være større end eller lig med 1,3 (denne valgfri norm finder anvendelse, når lineariteten for den anvendte læser er over 3,000). 4) Fortolkning af resultaterne Prøver med absorbtionsværdier under cut-off-værdien betragtes som negative af Genscreen HIV-1/2 Version 2-testen. Resultater som er lige under cut-off-værdien (C.O -10 % < OD < C.O) bør dog fortolkes varsomt (det anbefales at pågældende prøver udføres i duplikater, når de anvendte systemer og laboratorieprocedurer tillader det). Prøver med absorbtionsværdier, der er lig med eller større end cut-off-værdien, betragtes initielt positive af Genscreen HIV-1/2 Version 2-testen. De bør genanalyseres i dublikater, før den endelige fortolkning foretages. Såfremt absorbtionsværdien af begge duplikater efter genanalysering er mindre end cut-off-værdien, kan det oprindelige resultat ikke bekræftes og prøven erklæres at være negativ ifølge Genscreen HIV-1/2 Version 2-testen. Reaktioner, der ikke bekræftes ved gentagelse, skyldes ofte: utilstrækkelig vask af mikrotiterplader kontaminering af negativprøver med serum med højt antistof-titer kontaminering af udviklingsopløsningen med oxiderende stoffer (hypoklorit, metalioner osv.) kontaminering af stopopløsningen. Såfremt absorbtionsværdien af én af duplkaterne i genanalyseringen er lig med eller større end cut-offværdien, er det oprindelige resultat bekræftet, og prøven erklæres at være positiv ifølge Genscreen HIV-1/2 Version 2-testen, der imidlertid er underlagt procedurens begrænsninger som beskrevet nedenfor. 8

9 12 - SPEKTROFOTOMETRISK KONTROL AF PRØVE- OG KONJUGATPIPETTERING Kontrol af prøvepipettering prøv Efter dispensering af prøvefortynder (R6) og prøver er det muligt at verificere om de er, som skal testes, findes i brøndene ved hjælp af en spektrofotometrisk læsning ved 620 nm: den optiske densitet for en brønd med prøvemateriale er større end 0,150 (mindre OD angiver manglende fordeling af prøvematerialet). Kontrol af konjugatpipettering Efter dispensering af konjugat (R7a + R7b), er det muligt at verificere forekomsten af konjugatet i brøndene ved hjælp af en spektrofotometrisk læsning ved 620 nm: den optiske densitet for en brønd med konjugat er større end 0,100 (mindre OD angiver manglende fordeling af konjugatet). Kontrolpipettering af udviklingsopløsning Du kan kontrollere, at der er pink udviklingsopløsning i brøndene ved hjælp af en automatisk læsning ved 490 nm. En brønd med udviklingsopløsning skal have en optisk densitet større end 0,100 (lavere OD angiver dårlig fordeling af udviklingsopløsningen) YDEEVNE Der er udført sensitivitetsstudier med Genscreen HIV-1/2 Version 2-testen på positive prøver fra patienter, der har fået diagnosticeret AIDS eller ARC (Aids Related Complex), og på sensitivitetspaneler med dokumenterede prøver fra patienter, der for nylig er blevet smittet med HIV. sensitiviteten for HIV-1 var 100 %. Den er evalueret på 413 personer med diagnosen AIDS eller ARC ifølge prøver fra den positive HIV-1-gruppe M, som blev bekræftet af Western-Blot, og 31 prøver fra HIV-1-gruppe O, som blev bekræftet af Western-Blot HIV-1. Sensitiviteten for gruppe O blev også evalueret på 4 prøver fra HIV-1-gruppe O, som viste sig tvivlsomme med Western-Blot. Den blev betragtet som tilfredsstillende med 3 prøver, der blev fundet positive. sensitiviteten for HIV-2 var 100 % Den er evalueret på 119 fortyndede eller ufortyndede prøver fra positive prøver, der er bekræftet med Western-Blot. Sensitivieten for HIV-1-gruppe M blev evalueret på 29 kommercielle serokonversionspaneler (BBI, NABI, biokliniske partnere) og på et INTS-sensitivitetspanel. Resultaterner af bedste kvalitet. Fra INTS-panelet viste 45 prøver på serokonversioner og 13 prøver på per-serokonversioner sig positive. Specificiteten for testen, testet på bloddonorer var 99,98 % for testede prøver. Der er observeret 3 positive resultater ud af 212 for patienter, der led af forskellige sygdomme eller symptomer, der ikke kunne forbindes med hepatitis B (gravide kvinder, reumatoid faktor, anti-nuklear IgG eller andre virusinfektioner). Genscreen HIV-1/2 Version 2-testens præcision er fastlagt ved analysering af 4 prøver: 1 negativ prøve (prøve 1), 2 lave anti HIV-1-positive prøver (prøverne 2 og 3) og 1 høj anti HIV-1-positiv prøve (prøve 4). Reproducerbarheden indenfor samme analyseserie er evalueret ved at teste disse 4 prøver 30 gange i samme analyseserie. Reproducerbarheden imellem analyseserier er evalueret ved at teste disse 4 prøver 3 gange på 2 mikrotiterplader i 2 uafhængige analyseserier hver dag i 5 dage. Resultaterne vises i følgende tabeller: Tabel 1: Reproducerbarhed indenfor samme analyseserie n = 30 prøve 1 prøve 2 prøve 3 prøve 4 Gennemsnitsforhold * 0,12 3,34 9,05 19,6 Standardafvigelse 0,04 0,45 0,30 0,73 (SD - Standard Deviation) CV (%)-forhold 31,5 % 13,6 % 3,3 % 3,7 % * Gennemsnitsforhold = OD/CO Tabel 2: Reproducerbarheden imellem analyseserier n = 30 prøve 1 prøve 2 prøve 3 prøve 4 Gennemsnitsforhold * 0,12 3,43 9,27 19,35 Standardafvigelse 0,02 0,41 0,89 1,93 (SD - Standard Deviation) CV (%)-forhold 19,3 % 12,1 % 9,65 % 10,0 % * Gennemsnitsforhold = OD/CO 9

10 14 - TESTENS BEGRÆNSNINGER Meget lav antistof-titer detekteres ikke med sikkerhed i det første stadium af infektionen, hvorfor et negativt resultat angiver, at den testede prøve ikke indeholder påviselige anti-hiv-antistoffer med Genscreen HIV-1/2 Version 2- testen. Et sådant resultat forudsiger eller udelukker imidlertid ikke muligheden af en HIV-1/HIV-2-infektion. Variationen i HIV-1 (gruppe M og gruppe O) og HIV 2 gør, at muligheden for falske negative reaktioner ikke kan udelukkes. Ingen kendt testmetode kan give fuld sikkerhed for, at der ikke forefindes HIV-virus. Meget følsomme ELISA-teknikker kan vise falske positive resultater. For at verificere specificiteten af reaktionen bør alle positive resultater (i overensstemmelse med fortolkningskriterierne for Genscreen HIV-1/2 Version 2-testen) bekræftes med en relevant metode (Western-Blot). Opvarmning af prøver kan påvirke kvaliteten af resultaterne. Den kolorimetriske metode til kontrol af prøve-, konjugat- og udviklingsopløsningsfordelingen kontrollerer ikke nøjagtigheden af de fordelte mængder. Denne metode viser kun forekomsten af prøvemateriale, konjugat og udviklingsopløsning i brønde. Fejlprocenten ved denne metode er tæt forbundet med nøjagtigheden af det anvendte system (en kumuleret variationskoefficient på mere end 10 % for fordelingen og aflæsningen nedsætter kvaliteten af kontrollen markant). I tilfælde af meget dårlig vaskeeffektivitet efter inkubationen af konjugatet kan den automatiske kontrol af pipettering af udviklingsopløsning (ved aflæsning af brøndenes OD ved 490 nm) give forkerte resultater med OD over 0,100 uden udviklingsopløsning. Dette fænomen er imidlertid aldrig observeret under bedømmelsen af 939 testede prøver REFERENCER 1. BARRE-SINOUSSI F., CHERMANN J.C., REY F. et al Isolation of a T. lymphotropic retrovirus from a patient at risk for acquired immunodeficiency syndrome (AIDS), Science, 1983, 220, ALIZON M., SONIGO P., BARRE-SINOUSSI F. et al. Molecular cloning of lymphadenopathy associated virus Nature, 1984, 312, CLAVEL F., GUETARD D., BRUN-VEZINET F. et al. Isolation of a new human retrovirus from West African patients with AIDS. Science. 1986, 233, CLAVEL F., GUYADER M., GUETARD D. et al. Molecular cloning and polymorphism of the human immune deficiency virus type 2. Nature, 1986, 324, BRUN-VEZINET F., ROUZIOUX C., BARRE-SINOUSSI F. et al. Detection of IgG antibodies to lymphadenopathy associated virus (LAV) by ELISA, in patients with acquired immunodeficiency syndrome or lymphadenopathy syndrome. Lancet. 1984, June, MATHIESEN T., CHIODI F., BROLIDEN P.A., et al. Analysis of a subclass restricted HIV-1 gp 41 epitope by omission peptides. Immunology, 1989, 67, NORRBY E., BIBERFELD G., JOHNSON PR et al. The chemistry of site directed serology for HIV Infections. AIDS Res Human Retroviruses. 1989, 5, 487/ McKEATING J.A., WILLEY R.L. Structure and fonction of the HIV envelope. AIDS, 1989, 3, S35-S41 9. PASQUALI J.L., KIENY M.P., KOLBE H. et al. Immunogenicity and epitope mapping of a recombinant soluble gp 160 of the human immunodeficiency virus type 1 envelop glycoprotein. AIDS Res. Human Retroviruses, 1990, 6, NEURATH A.R., STRICK N., TAYLOR P. et al Search for eptiope specific antibody responses to human immunodeficiency virus (HIV-1) envelope glycoproteins signifying resistance to disease development. AIDS Res. Human Retroviruses, 1990, 6, NAIR B.C., FORD G., KALYANARAMAN V.S. et al. Enzyme immunoassay using native envelope glycoprotein (gp 160) for detection of human immunodeficiency virus type 1 antibodies. J. Clin. Microbio. 1994, 32, ZAAIJER H.L., EXEL-OEHLERS P.V., KRAAIJEVELDT T., et al. Early detection of antibodies to HIV-1 by third generation assays. The Lancet, 1992, 340, CONSTANTINE N.T., VAN DER GROEN G., BELSEY E.M. et al Sensitivity of HIV antibody assays determined by seroconversion panels AIDS, 1994, 8, ENGELBRECHT S., DE JAGER G.J., VAN RENSBURG E.J. Evaluation of commercially available assays for antibodies to HIV-1 in serum obtained from south african patients infected with HIV-1 subtypes B, C, and D. J. Med. Viroloogy 1994, 44, COUROUCE A.M. et al. Trousses de dépistage des anticorps anti VIH-1 et VIH-2. Spectra Biologie, 1994, 6, DONDERO T.J., HU D.J., GEORGE J.R. HIV-1 variants : yet another challenge to public health. The Lancet 1994, 343, SIMON F., LY T.D., BAILLOU-BEAUFILS A., et al Sensitivity of screening kits for anti HIV-1 subtypes O antibodies. AIDS, 1994, 8,

11 18. JANSSENS W., HEYNDRICKX L. FRANSEN et al. Genetic and phylogenetic analysis of ENV subtypes G and H in Central Africa AIDS Res. Hum. Retrovirus 1994, 10, GAOF., YUE L. ROBERTSON D.L. et al. Genetic diversity of human immunodeficiency virus type 2 : evidence for distinct sequence subtypes with differences in virus biology. J. Virol. 1994, 68,

12 (BG) Този продукт съдържа човешки или животински компоненти. Бъдете внимателни при работа с него. (CZ) Tento výrobek obsahuje lidské nebo zvířecí komponenty. Zacházejte s ním opatrně. (DE) Dieses Produkt enthält Bestandteile menschlichen oder tierischen Ursprungs. Vorsichtig handhaben. (DK) Dette produkt indeholder humane og animalske komponenter. Skal behandles med forsigtighed. (EE) Käesolev toode sisaldab inim-või loomseid komponente. Käsitseda ettevaatlikult. (EN) This product contains human or animal components. Handle with care. (ES) Este producto contiene componentes humanos o animales. Manejar con cuidado. (FI) Tässä tuotteessa on ihmisestä tai eläimistä peräisin olevia osia. Käsittele varovasti. (FR) Ce produit contient des composants d'origine humaine ou animale. Manipuler avec précaution. (GR) Αυτό το προϊόν περιέχει ανθρώπινα ή ζωικά στοιχεία. Χειριστείτε το με προσοχή. (HR) Ovaj proizvod sadrži ljudske ili životinjske sastojke. Pažljivo rukovati. (HU) A készítmény emberi vagy állati eredetű összetevőket tartalmaz. Óvatosan kezelendő. (IT) Questo prodotto contiene componenti umane o animali. Maneggiare con cura. (LT) Šiame produkte yra žmogiškosios arba gyvūninės kilmės sudėtinių dalių. Elgtis atsargiai. (MT) Dan il-prodott fih komponenti umani jew tal-annimali. Uża b attenzjoni. (NL) Dit product bevat menselijke of dierlijke bestanddelen. Breekbaar. (NO) Dette produktet inneholder humane eller animalske komponenter. Håndteres med forsiktighet. (PL) Niniejszy produkt zawiera składniki pochodzenia ludzkiego lub zwierzęcego. Należy obchodzić się z nim ostrożnie. (PT) Este medicamento contém componentes de origem humana ou animal. Manuseie com cuidado. (RO) Acest produs conţine materiale de origine umană sau animală. Manevraţi-l cu grijă. (SE) Denna produkt innehåller beståndsdelar från människa eller djur. Hantera produkten varsamt. (SI) Izdelek vsebuje človeške ali živalske sestavine. Rokujte previdno. (SK) Tento výrobok obsahuje ľudské alebo zvieracie zložky. Narábajte s ním opatrne.

13 H314 - H317 P280 - P305+P351+P338 - P301+P330+P331 - P303+P361+P353 - P333+P313 - P501 (BG) опасно Причинява тежки изгаряния на кожата и сериозно увреждане на очите. Може да причини алергична кожна реакция. Използвайте предпазни ръкавици/предпазно облекло/предпазни очила/предпазна маска за лице. ПРИ КОНТАКТ С ОЧИТЕ: Промивайте внимателно с вода в продължение на няколко минути. Свалете контактните лещи, ако има такива и доколкото това е възможно. Продължавайте да промивате. ПРИ ПОГЛЪЩАНЕ: изплакнете устата. НЕ предизвиквайте повръщане. ПРИ КОНТАКТ С КОЖАТА (или косата): Незабавно свалете цялото замърсено облекло. Облейте кожата с вода/вземете душ При поява на кожно дразнене или обрив на кожата: Потърсете медицински съвет/помощ. Изхвърлете съдържанието/контейнера в съответствие с местните/регионалните/националните/ международните разпоредби. (CZ) Nebezpečí Způsobuje těžké poleptání kůže a poškození očí. Může vyvolat alergickou kožní reakci. Používejte ochranné rukavice/ochranný oděv/ochranné brýle/obličejový štít. PŘI ZASAŽENÍ OČÍ: Několik minut opatrně vyplachujte vodou. Vyjměte kontaktní čočky, jsou-li nasazeny a pokud je lze vyjmout snadno. Pokračujte ve vyplachování. PŘI POŽITÍ: Vypláchněte ústa. NEVYVOLÁVEJTE zvracení. PŘI STYKU S KŮŽÍ (nebo s vlasy): Veškeré kontaminované části oděvu okamžitě svlékněte. Opláchněte kůži vodou/osprchujte. Při podráždění kůže nebo vyrážce: Vyhledejte lékařskou pomoc/ošetření. Obsah/nádobu likvidujte v souladu s místními/regionálními/národními/mezinárodními předpisy. (DE) Gefahr Verursacht schwere Verätzungen der Haut und schwere Augenschäden. Kann allergische Hautreaktionen verursachen. Schutzhandschuhe/Schutzkleidung/Augenschutz/Gesichtssch utz tragen. BEI KONTAKT MIT DEN AUGEN: Einige Minuten lang behutsam mit Wasser spülen. Vorhandene Kontaktlinsen nach Möglichkeit entfernen. Weiter spülen. BEI VERSCHLUCKEN: Mund ausspülen. KEIN Erbrechen herbeiführen. BEI KONTAKT MIT DER HAUT (oder dem Haar): Alle beschmutzten, getränkten Kleidungsstücke sofort ausziehen. Haut mit Wasser abwaschen/duschen. Bei Hautreizung oder -ausschlag: Ärztlichen Rat einholen/ärztliche Hilfe hinzuziehen. Entsorgung des Inhalts / des Behälters gemäß den örtlichen / regionalen / nationalen/ internationalen Vorschriften. (DK) Fare Forårsager svære forbrændinger af huden og øjenskader. Kan forårsage allergisk hudreaktion. Bær beskyttelseshandsker/beskyttelsestøj/øjenbeskyttelse/ ansigtsbeskyttelse VED KONTAKT MED ØJNENE: Skyl forsigtigt med vand i flere minutter. Fjern eventuelle kontaktlinser, hvis dette kan gøres let. Fortsæt skylning. I TILFÆLDE AF INDTAGELSE: Skyl munden. Fremkald IKKE opkastning. VED KONTAKT MED HUDEN (eller håret): Tilsmudset tøj tages straks af/fjernes. Skyl/brus huden med vand. Ved hudirritation eller udslet: Søg lægehjælp. Bortskaffelse af indholdet/beholderen i henhold til de lokale/regionale/nationale/internationale forskrifter. (EE) Ettevaatust Põhjustab rasket nahasöövitust ja silmakahjustusi. Võib põhjustada allergilist nahareaktsiooni. Kanda kaitsekindaid/kaitserõivastust/kaitseprille/kaitsemaski. SILMA SATTUMISE KORRAL: loputada mitme minuti jooksul ettevaatlikult veega. Eemaldada kontaktläätsed, kui neid kasutatakse ja kui neid on kerge eemaldada. Loputada veel kord. ALLANEELAMISE KORRAL: loputada suud. MITTE kutsuda esile oksendamist. NAHALE (või juustele) SATTUMISE KORRAL: võtta viivitamata kõik saastunud rõivad seljast. Loputada nahka veega/loputada duši all. Nahaärrituse või _obe korral: pöörduda arsti poole. Sisu/konteineri käitlus vastavuses kohalike/regionaalsete/rahvuslike/rahvusvaheliste nõuetega. (EN) Danger Causes severe skin burns and eye damage. May cause an allergic skin reaction. Wear protective gloves/protective clothing/eye protection/face protection. IF IN EYES: Rinse cautiously with water for several minutes. Remove contact lenses, if present and easy to do. Continue rinsing. IF SWALLOWED: rinse mouth. Do NOT induce vomiting. IF ON SKIN (or hair): Remove/Take off immediately all contaminated clothing. Rinse skin with water/shower. If skin irritation or rash occurs: Get medical advice/attention. Dispose of contents/container in accordance with local/regional/national/international regulations. (ES) Peligro Provoca quemaduras graves en la piel y lesiones oculares graves. Puede provocar una reacción alérgica en la piel. Llevar guantes que aíslen del frío/gafas/máscara. EN CASO DE CONTACTO CON LOS OJOS: Aclarar cuidadosamente con agua durante varios minutos. Quitar las lentes de contacto, si lleva y resulta fácil. Seguir aclarando. EN CASO DE INGESTIÓN: Enjuagarse la boca. NO provocar el vómito. EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL (o el pelo): Quitarse inmediatamente las prendas contaminadas. Aclararse la piel con agua o ducharse. En caso de irritación o erupción cutánea: Consultar a un médico. Eliminar el contenido o el recipiente conforme a la reglamentación local/regional/nacional/ internacional. (FI) Vaara Voimakkaasti ihoa syövyttävää ja silmiä vaurioittavaa. Voi aiheuttaa allergisen ihoreaktion. Käytä suojakäsineitä/suojavaatetusta/silmiensuojainta/ kasvonsuojainta. JOS KEMIKAALIA JOUTUU SILMIIN: Huuhdo huolellisesti vedellä usean minuutin ajan. Poista piilolinssit, _edical voi tehdä helposti. Jatka huuhtomista. JOS KEMIKAALIA ON NIELTY: Huuhdo suu. EI saa oksennuttaa. JOS KEMIKAALIA JOUTUU IHOLLE (tai hiuksiin): Riisu saastunut vaatetus välittömästi. Huuhdo/suihkuta iho vedellä. Jos ilmenee ihoärsytystä tai ihottumaa: Hakeudu lääkäriin. Säilytä säiliö(t) noudattaen paikallisia/alueellisia/kansallisia/ kansainvälisiä määräyksiä.

14 (FR) Danger Provoque des brûlures de la peau et des lésions oculaires graves. Peut provoquer une allergie cutanée. Porter des gants de protection/des vêtements de protection/un équipement de protection des yeux/du visage. EN CAS DE CONTACT AVEC LES YEUX: rincer avec précaution à l eau pendant plusieurs minutes. Enlever les lentilles de contact si la victime en porte et si elles peuvent être facilement enlevées. Continuer à rincer. EN CAS D INGESTION: rincer la bouche. NE PAS faire vomir. EN CAS DE CONTACT AVEC LA PEAU (ou les cheveux): enlever immédiatement les vêtements contaminés. Rincer la peau à l eau/se doucher. En cas d irritation ou d éruption cutanée: consulter un médecin. Éliminer le contenu/récipient conformément à la réglementation locale/régionale/nationale/internationale. (GR) Κίνδυνος Προκαλεί σοβαρά δερµατικά εγκαύµατα και οφθαλµικές βλάβες. Μπορεί να προκαλέσει αλλεργική δερµατική αντίδραση. Να φοράτε προστατευτικά γάντια/προστατευτικά ενδύµατα/µέσα ατοµικής προστασίας για ταµάτια/πρόσωπο. ΣΕ ΠΕΡΙΠΤΩΣΗ ΕΠΑΦΗΣ ΜΕ ΤΑ ΜΑΤΙΑ: Ξεπλύνετε προσεκτικά µε νερό για αρκετά λεπτά. Εάν υπάρχουν φακοί επαφής, αφαιρέστε τους, εφόσον είναι εύκολο. Συνεχίστε να ξεπλένετε. ΣΕ ΠΕΡΙΠΤΩΣΗ ΚΑΤΑΠΟΣΗΣ: Ξεπλύνετε το στόµα. ΜΗΝ προκαλέσετε εµετό. ΣΕ ΠΕΡΙΠΤΩΣΗ ΕΠΑΦΗΣ ΜΕ ΤΟ ΔΕΡΜΑ (ή µετα µαλλιά): Αφαιρέστε αµέσως όλα τα µολυσµένα ενδύµατα. Ξεπλύνετε το δέρµα µε νερό/στο ντους. Εάν παρατηρηθεί ερεθισµός του δέρµατος ή εµφανιστεί εξάνθηµα: Συµβουλευθείτε/Επισκεφθείτεγιατρό. Απορρίψτε τα περιεχόµενα/δοχείο σύµφωνα µε τους τοπικούς/εθνικούς/διεθνείς κανονισµούς. (HR) Ppasnost Uzrokuje teške opekline kože i ozljede oka. Može izazvati alergijsku reakciju na koži. Nositi zaštitne rukavice/zaštitnu odijelo/zaštitu za oči/zaštitu za lice. U SLUČAJU DODIRA S OČIMA: oprezno ispirati vodom nekoliko minuta. Ukloniti kontaktne leće ukoliko ih nosite i ako se one lako uklanjaju. Nastaviti ispiranje. AKO SE PROGUTA: isprati usta. NE izazivati povraćanje. U SLUČAJU DODIRA S KOŽOM (ili kosom): odmah ukloniti/skinuti svu zaganenu odjeću. Isprati kožu vodom/tuširanjem. U slučaju nadražaja ili osipa na koži: zatražiti savjet/pomoć liječnika. Odložite sadržaje /spremnike u skladu s lokalnim/regionalnim/nacionalni/ međunarodnim odredbama. (HU) Veszély Smarkiai nudegina odą ir pažeidžia akis. Allergiás bőrreakciót válthat ki. Védőkesztyű/védőruha/szemvédő/arcvédő használata kötelező. SZEMBE KERÜLÉS esetén: Több percig tartó óvatos öblítés vízzel. Adott esetben a kontaktlencsék eltávolítása, ha könnyen megoldható. Az öblítés folytatása. LENYELÉS ESETÉN: a szájat ki kell öblíteni. TILOS hánytatni. HA BŐRRE (vagy hajra) KERÜL: Az összes szennyezett ruhadarabot azonnal el kell távolítani/le kell vetni. A bőrt le kell öblíteni vízzel/zuhanyozás. Bőrirritáció vagy kiütések megjelenése esetén: orvosi ellátást kell kérni. Az edény tartalmát / a tartályt a helyi/regionális/nemzeti/nemzetközi szabályozásoknak megfelelően kell hulladékként elhelyezni. (IT) Pericolo Provoca gravi ustioni cutanee e gravi lesioni oculari. Può provocare una reazione allergica cutanea. Indossare guanti/indumenti protettivi/proteggere gli occhi/il viso. IN CASO DI CONTATTO CON GLI OCCHI: sciacquare accuratamente per parecchi minuti. Togliere le eventuali lenti a contatto se è agevole farlo. Continuare a sciacquare. IN CASO DI INGESTIONE: sciacquare la bocca. NON provocare il vomito. IN CASO DI CONTATTO CON LA PELLE (o con i capelli): togliersi di dosso immediatamente tutti gli indumenti contaminati. Sciacquare la pelle/fare una doccia. In caso di irritazione o eruzione della pelle: consultare un medico. Smaltire il prodotto/recipiente in conformità con le disposizioni locali / regionali / nazionali / internazionali. (LT) Pavojinga Smarkiai nudegina odą ir pažeidžia akis. Gali sukelti alerginę odos reakciją. Mūvėti apsaugines pirštines/dėvėti apsauginius drabužius/ naudoti akių (veido) apsaugos priemones. PATEKUS Į AKIS: Kelias minutes atsargiai plauti vandeniu. Išimti kontaktinius lęšius, jeigu jie yra ir jeigu lengvai galima tai padaryti. Toliau plauti akis. PRARIJUS: išskalauti burną. NESKATINTI vėmimo. PATEKUS ANT ODOS (arba plaukų): Nedelsiant nuvilkti/pašalinti visus užterštus drabužius. Odą nuplauti vandeniu/čiurkšle. Jeigu sudirginama oda arba ją išberia: kreiptis į gydytoją. Turinį/talpą išpilti (išmesti) - šalinti pagal vietines / regionines / nacionalines / tarptautines taisykles. (NL) Gevaar Veroorzaakt ernstige brandwonden en oogletsel. Kan een allergische huidreactie veroorzaken. Beschermende handschoenen/beschermende kleding/ oogbescherming/gelaatsbescherming dragen. BIJ CONTACT MET DE OGEN: voorzichtig afspoelen met water gedurende een aantal minuten; contactlenzen verwijderen, indien mogelijk; blijven spoelen. NA INSLIKKEN: de mond spoelen GEEN braken opwekken. BIJ CONTACT MET DE HUID (of het haar): verontreinigde kleding onmiddellijk uittrekken huid met water afspoelen/afdouchen. Bij huidirritatie of uitslag: een arts raadplegen. De inhoud en de verpakking verwerken volgens de plaatselijke/regionale/nationale/internationale voorschriften. (NO) Fare Forårsaker alvorlige hudforbrenninger og øyeskader. Kan forårsake allergiske hudreaksjoner. Bruk vernehansker/verneklær/vernebriller/ansiktsskjerm. VED KONTAKT MED ØYNENE: Skyll forsiktig med vann i opptil flere minutter. Fjern evt. kontaktlinser såfremt dette er lett mulig. Fortsett skyllingen. VED SVELGING: Skyll munnen. IKKE fremkall brekninger. VED HUDKONTAKT (eller kontakt med hår): Alle tilsølte klær må fjernes straks. Vask/dusj huden med vann. Ved hudirritasjon eller -utslett: Kontakt / tilkall lege. Innholdet / emballasjen skal avhendes i henhold til de lokale / regionale / nasjonale / internasjonale forskrifter.

15 (PL) Niebezpieczeństwo Powoduje poważne oparzenia skóry oraz uszkodzenia oczu. Może powodować reakcję alergiczną skóry. Stosować rękawice ochronne/odzież ochronną/ochronę oczu/ochronę twarzy. W PRZYPADKU DOSTANIA SIĘ DO OCZU: Ostrożnie płukać wodą przez kilka minut. Wyjąć soczewki kontaktowe, jeżeli są i można je łatwo usunąć. Nadal płukać. W PRZYPADKU POŁKNIĘCIA: wypłukać usta. NIE wywoływać wymiotów. W PRZYPADKU KONTATKU ZE SKÓRĄ (lub z włosami): Natychmiast usunąć/zdjąć całą zanieczyszczoną odzież. Spłukać skórę pod strumieniem wody/prysznicem. W przypadku wystąpienia podrażnienia skóry lub wysypki: Zasięgnąć porady/zgłosić się pod opiekę lekarza. Zawartość / pojemnik usuwać zgodnie z przepisami miejscowymi / regionalnymi / narodowymi / międzynarodowymi. (PT) Perigo Provoca queimaduras na pele e lesões oculares graves. Pode provocar uma reacção alérgica cutânea. Usar luvas de protecção/vestuário de protecção/protecção ocular/protecção facial. SE ENTRAR EM CONTACTO COM OS OLHOS: enxaguar cuidadosamente com água durante vários minutos. Se usar lentes de contacto, retire-as, se tal lhe for possível. Continuar a enxaguar. EM CASO DE INGESTÃO: enxaguar a boca. NÃO provocar o vómito. SE ENTRAR EM CONTACTO COM A PELE (ou o cabelo): despir/retirar imediatamente toda a roupa contaminada. Enxaguar a pele com água/tomar um duche. Em caso de irritação ou erupção cutânea: consulte um médico. Eliminar o conteúdo/recipiente de acordo com a legislação local/regional/nacional/ internacional. (Sl) Nevarno Povzroča hude opekline kože in poškodbe oči. Lahko povzroči alergijski odziv kože. Nositi zaščitne rokavice/zaščitno obleko/zaščito za oči/zaščito za obraz. PRI STIKU Z OČMI: previdno izpirajte z vodo nekaj minut. Odstranite kontaktne leče, če jih imate in če to lahko storite brez težav. Nadaljujte z izpiranjem. PRI STIKU Z OČMI: previdno izpirajte z vodo nekaj minut. Odstranite kontaktne leče, če jih imate in če to lahko storite brez težav. Nadaljujte z izpiranjem. PRI STIKU S KOŽO (ali lasmi): takoj odstraniti/sleči vsa kontaminirana oblačila. Izprati kožo z vodo/prho. Če nastopi draženje kože ali se pojavi izpuščaj: poiščite zdravniško pomoč/oskrbo. Vsebino/vsebnik odstranite v skladu z lokalnimi/regionalnimi/narodnimi/mednarodnimi predpisi. (SK) Nebezpečenstvo Provoacă arsuri grave ale pielii şi lezarea ochilor. Môže vyvolať alergickú kožnú reakciu. Noste ochranné rukavice/ochranný odev/ochranné okuliare/ochranu tváre. PO POŽITÍ: vypláchnite ústa. Nevyvolávajte zvracanie. PO POŽITÍ: vypláchnite ústa. Nevyvolávajte zvracanie. PRI KONTAKTE S POKOŽKOU (alebo vlasmi): Odstráňte/vyzlečte všetky kontaminované časti odevu. Pokožku ihneď opláchnite vodou/sprchou. Ak sa prejaví podráždenie pokožky alebo sa vytvoria vyrážky: vyhľadajte lekársku pomoc/starostlivosť. Zneškodnenie obsahu/obalu v súlade s miestnymi/oblastnými/ národnými/medzinárodnými nariadeniami. (RO) Pericol Provoacă arsuri grave ale pielii şi lezarea ochilor. Poate provoca o reacţie alergică a pielii. Purtaţi mănuşi de protecţie/îmbrăcăminte de protecţie/echipament de protecţie a ochilor/ chipament de protecţie a feţei. ÎN CAZ DE CONTACT CU OCHII: clătiţi cu atenţie cu apă timp de mai multe minute. Scoateţi lentilele de contact, dacă este cazul şi dacă acest lucru se poate face cu uşurinţă. Continuaţi să clătiţi. ÎN CAZ DE ÎNGHIŢIRE: clătiţi gura. NU provocaţi voma. ÎN CAZ DE CONTACT CU PIELEA (sau părul): scoateţi imediat toată îmbrăcămintea contaminată. Clătiţi pielea cu apă/faceţi duş. În caz de iritare a pielii sau de erupţie cutanată: consultaţi medicul. Aruncaţi conţinutul/containerul în acord cu regulamentele locale/ regionale/naţionale/internaţionale. (SE) Fara Orsakar allvarliga frätskador på hud och ögon. Kan orsaka allergisk hudreaktion. Använd skyddshandskar/skyddskläder/ögonskydd/ ansiktsskydd. VID KONTAKT MED ÖGONEN: Skölj försiktigt med vatten i flera minuter. Ta ur eventuella kontaktlinser om det går lätt. Fortsätt att skölja. VID FÖRTÄRING: Skölj munnen. Framkalla INTE kräkning. VID HUDKONTAKT (även håret): Ta omedelbart av alla nedstänkta kläder. Skölj huden med vatten/duscha. Vid hudirritation eller utslag: Sök läkarhjälp. Innehållet / behållaren avfallshanteras enligt lokala / regionala / nationella / internationella föreskrifter.

16 Bio-Rad 3, boulevard Raymond Poincaré Marnes-la-Coquette - France Tel.: +33 (0) Fax: +33 (0) /