VALIDERINGSRAPPORT COBAS e411 Godkendt til ikrafttrædelse Dato: 21-9-23 Underskrift: 1. INDLEDNING... 2 2. ANALYSEDATA... 2 2.1 Navn, IUPAC-kode eller dansk kode og enhed... 2 2.2 Engelsk navn... 2 2.3 Indikation... 2 2.4 Apparatur... 2 2.5 Analyseprincip / -metode... 2 2.6 Kvalitetssikringskontroller leverandør og data... 2 3. KRAVSPECIFIKATIONER... 3 4. RESULTATER FRA METODEETABLERINGEN... 4 4.1 Linearitet... 4 4.2 Måleinterval (nedre målegrænse og øvre målegrænse)... 4 4.3 Svarafgivelsesinterval... 4 4.4 Svarformat... 4 4.5 Detektionsgrænse... 5 4.6 Metodesammenligning... 5 4.7 Korrekthed... 5 4.8 Analytisk specificitet... 6 4.9 Præcisionsprofil (intraseriel- og intermediær præcision)... 7 4.1 Metrologisk sporbarhed... 7 4.11 Robusthed... 7 4.12 Afsmitning... 7 4.13 Evt. apparatsammenligning... 7 4.14 Præanalytiske forhold... 8 4. Referenceinterval / klinisk beslutningsgrænse... 8 4.16 Måleusikkerhedsbudget... 8 5. KONKLUSION... 9 6. SIKKERHED, MILJØ OG HYGIEJNE... 9 7. REFERENCER... 9 7.1 Interne... 9 7.2 Eksterne... 9 8. DATABLAD... 9 Side 1 af 9
1. INDLEDNING I denne rapport redegøres for validering af NT-proBNP II analysen på Cobas e411. Kardiologisk afdeling på BBH ønskede analysen opsat i overensstemmelse med guidelines fra det Europæiske Kardiologiske Selskab (ESC), [EXT-182 ESC Guidelines for the diagnosis and treatment of acute and chronic heart failure 28, European Heart Journal 28;29:2388-2442], da analysen hos patienter med hjertesvigt potentielt kan medføre kortere indlæggelsestid, optimeret udnyttelse af de ekkokardiografiske ressourcer og et mere hensigtsmæssigt patientforløb af høj faglig kvalitet. 2. ANALYSEDATA 2.1 Navn, IUPAC-kode eller dansk kode og enhed NPU26811 P-Pro-brain natriuretisk peptid(1-76); stofk. =? pmol/l I dette og andre dokumenter anvendes navnet (Labka II analysekode) 2.2 Engelsk navn NPU26811 P-Pro-brain natriuretic peptide(1-76); subst.c. =? pmol/l 2.3 Indikation Diagnostik og prognose ved hjerteinsufficiens 2.4 Apparatur Cobas e411, Roche Diagnostics A/S 2.5 Analyseprincip / -metode Elektrokemiluminescens princip (sandwich princip). CE-mærket ifølge IVD-direktiv. Se producentens metodeblad [EXT-176, Cobas probnp II, 28-9, V 3 Dansk] 2.6 Kvalitetssikringskontroller leverandør og data Interne: PreciControl Cardiac II 1 og 2. For disse kontroller anvendes betegnelserne PC CARD 1 og PC CARD 2. PC CARD 2 anvendes som daglig kontrol. PC CARD 1 anvendes som kalibreringskontrol og ved problemudredning. Se producentens indlægsseddel [EXT-178 Cobas PreciControl Cardiac II, 29-1, V 4 English] DEKS HK6 Special. For denne kontrol anvendes betegnelsen HK6 S. HK6 S anvendes som daglig kontrol. Eksterne: 3344 FIN Labquality - Myocardieinfaktmarkør, Brain natriuretisk peptid (NT-ProBNP). 2 prøver 4 gange om året. Side 2 af 9
3. KRAVSPECIFIKATIONER På baggrund af den kliniske anvendelse af analysen på patientpopulationen er nedenstående krav udarbejdet ud fra en konkret lægefaglig vurdering. Metodevurdering Vi har sammenlignet Cobas e411 (Roche) med Elecsys 21 (Roche) på Klinisk Biokemisk Afdeling, Frederiksberg Hospital. Dette apparat benytter samme analysemetode som Cobas e411, og analysen er akkrediteret. Metodesammenligningen er foretaget som beskrevet i {PRO-24 Validering af analysemetoder}. Korrekthed På baggrund af den højeste beslutningsgrænse (kvinder) på 87,1 pmol/l og den kliniske anvendelse af analysen på patientpopulationen er nedenstående krav udarbejdet ud fra en konkret lægefaglig vurdering. Analysemetodens korrekthed vurderes ved sammenligning med et akkrediteret laboratorium, der anvender samme analysemetode. Max. absolut bias krav er sat til 1 pmol/l. Max. absolut 95% grænse krav sat til 4 pmol/l. Ved en lineær regressionsanalyse mellem de to laboratorier skal 95 % konfidensintervallet for regressionsligningens hældningskoefficient indeholde tallet 1,. Tilsvarende skal 95 % konfidensintervallet for regressionsligningens skæring med Y-aksen indeholde tallet,. Krav til begge laboratoriers præstationsprøvninger er DEKS krav = +/- %. Præcisionsprofil For de intermediære præcisioner er der opstillet krav på maximum 8 % til variationskoefficienterne i to niveauer. For den intraserielle præcision er kravet sat til at være to tredjedele (2/3) af kravet til de intermediære præcisioner, svarende til 5 %. Side 3 af 9
4. RESULTATER FRA METODEETABLERINGEN 4.1 Linearitet Producenten angiver at lineariteten går fra,6 pmol/l til 413 pmol/l. Se producentens metodeblad [EXT-176, Cobas probnp II, 28-9, V 3 Dansk] samt dokumentation [EXT-29 Cobas 2bn26a_Linearity] 4.2 Måleinterval (nedre målegrænse og øvre målegrænse) Øverste kalibrator (PRO BNP II Cal2) har værdien ca. 32 pmol/l. For at validere den del af måleintervallet, som ligger over den øverste kalibrator er nedenstående forsøg udført. Til forsøget er anvendt en patientprøve med høj koncentration (ca. 12 pmol/l) fortyndet med NaCl. Forsøget er udført 21-6-11. Fortynding Kendt koncentration pmol/l Målt koncentration pmol/l 1:1 12 12 1:1 12 1 1:1 12 15 1:5 24 193 1:5 24 192 1:5 24 21 1:1 12 114 1:1 12 114 1:1 12 112 1:6 2 194 1:6 2 196 1:6 2 199 1:4 3 32 1:4 3 298 1:4 3 38 35 3 25 2 1 5 Målt værdi Cobas e411, (pmol/l) y = 1,163x - 49,231 R2 =,9991 y = 1,163x - 49,231 R 2 =,9991 Kendt værdi 5 1 2 25 3 35 Forsøget viser lineær sammenhæng i det undersøgte område fra 1 3 pmol/l. Måleintervallet er derfor sat til:,6 pmol/l til 3 pmol/l. Se P:\KBA\ISO189\Dokumenter\3-VAL-Valideringsrapporter\36-VAL Cobas e411\\ 36-LIN-1 Cobas e411_. Derudover findes rådata sammen med kurver m.m. i mapperne: Cobas e411 Diverse validering. Placeret i rum 6.K6. 4.3 Svarafgivelsesinterval,6 pmol/l til 3 pmol/l 4.4 Svarformat Nedre grænse Øvre grænse Decimaler,6 99,9 1 1 999 Værdier > 1 afgives i hele tiere Side 4 af 9
4.5 Detektionsgrænse Ikke relevant 4.6 Metodesammenligning Der er analyseret 45 prøver parallelt på henholdsvis Cobas e411 og Elecsys 21 (FH), i perioden fra 14/8-29 til 26/9-29 samt juni 21. Bias er beregnet til 7,4 pmol/l. Maksimalt tilladt 1 pmol/l 95% nedre grænse er beregnet til -35,3 pmol/l. Maksimalt tilladt -4 pmol/l 95% øvre er beregnet til 2,5 pmol/l. Maksimalt tilladt 4 pmol/l. Hældningskoefficienten er beregnet til,967, 95% Cl:,957,977 Skæring med y-aksen er beregnet til -3,38, 95% Cl: -6,39,233 Specifikke kommentarer Afvigelsen på hældningskoefficienten skønnes ikke at have klinisk betydning, og den kan til dels forklares ved et stort antal data, en lille spredning og et deraf følgende meget snævert konfidensinterval. Endvidere ligger resultaterne omkring den øverste beslutningsgrænse på 87,1 pmol/l tæt på hinanden. Forskellene bliver først betydelige i niveauer langt herover, hvor patienterne under alle omstændigheder er vurderet som havende hjertesvigt. Kravoverskridelsen har derfor ikke givet anledning til ændring i referenceinterval eller faktorisering. Se P:\KBA\ISO189\Dokumenter\3-VAL-Valideringsrapporter\36-VAL Cobas e411\\ 36-MES-1 Cobas e411 vs Cobas Elecsys 21 FH_. Derudover findes rådata sammen med kurver m.m. i mapperne: Cobas e411 patientprøver validering. Placeret i rum 6.K6. 4.7 Korrekthed Analysemetodens korrekthed er vurderet ved sammenligning med et akkrediteret laboratorium (se 4.6), der anvender samme analysemetode. Der er indhentet resultater fra præstationsprøvninger fra dette laboratorium. Resultaterne ses i nedenstående skemaer. Maksimal tilladt afvigelse (%) Rationale for maksimalt tilladt afvigelse DEKS krav Niveau 1 Dato Eget resultat Target åååå-mm-dd pmol/l pmol/l 29-8-1 57 55,4 29-11- 5,6 5,2 21-2-1 77,4 72,7 2 1 5-5 -1 - -2 29-7-6 29-8-25 29-1-14 29-12-3 21-1-22 21-3-13 2 Niveau 2 Dato Eget resultat Target åååå-mm-dd pmol/l pmol/l 29-8-1 266 26,2 29-11- 59 53,3 21-2-1 287 287,1 Alle resultaterne ses at ligge indenfor DEKS krav til analysen. 1 5-5 -1 - -2 29-7-6 29-8-25 29-1-14 29-12-3 21-1-22 21-3-13 Side 5 af 9
Ved metodesammenligningen mellem Cobas e411 og Elecsys 21 (FH) blev der ikke fundet klinisk relevante forskelle. Til yderligere støtte for metodens korrekthed ses nedenfor resultater fra KBA, BBH s første 4 præstationsprøveninger over en periode på 1 mdr. Data er opgjort fra: Labquality Natriuretic peptides, B-type, 3/29-3/21. Maksimal tilladt afvigelse (%) Rationale for maksimalt tilladt afvigelse DEKS krav Niveau 1 Dato Eget resultat Target åååå-mm-dd pmol/l pmol/l 29-9-25 49,6 55,4 21-2-1 7,4 72,7 21-4-16 6,6 57 21-7-9 55,5 48,3 Niveau 2 Dato Eget resultat Target åååå-mm-dd pmol/l pmol/l 29-9-25 235 25,2 21-2-1 279 287,1 21-4-16 25,8 231,8 21-7-9 234 22 2 1 5-5 -1 - -2 29-8-25 29-1-14 29-12-3 21-1-22 21-3-13 21-5-2 21-6-21 21-8-1 2 1 5-5 -1 Alle resultaterne ses at ligge indenfor DEKS krav til analysen. - -2 29-8-25 29-1-14 29-12-3 21-1-22 21-3-13 21-5-2 21-6-21 21-8-1 4.8 Analytisk specificitet analysen viser ingen signifikante krydsreaktioner med følgende substanser testet med NT-proBNP -koncentrationer på ca. 27,14 pmol/l og 271,4 pmol/l: Adrenomedullin (1, ng/ml), aldosteron (,6 ng/ml), angiotensin I (,6 ng/ml), angiotensin II (,6 ng/ml), angiotensin III (1, ng/ml), ANP 28 (3,1µg/mL) Arg-vasopressin (1, ng/ml), BNP 32 (3,5 µg/ml), CNP 22 (2,2 µg/ml), endothelin (2 pg/ml), NT-proANP 1-3 (3,5 µg/ml), NT-proANP 31-67 (1, ng/ml), NT-proANP 79-98 (1, ng/ml), renin (5 ng/ml) og urodilatin (3,5 µg/ml). Dette er oplyst fra producentens metodeblad, [EXT-176 Cobas probnp II, 28-9, V 3 Dansk] Side 6 af 9
4.9 Præcisionsprofil (intraseriel- og intermediær præcision) Intraseriel præcision: HK6S er analyseret på Cobas e411 2 gange på samme dag (29-9-25). Kontrol Niveau pmol/l Krav til Krav opfyldt HK6S 1,5 5, 1,8 Ja Se P:\KBA\ISO189\Dokumenter\3-VAL-Valideringsrapporter\36-VAL Cobas e411\\ 36-PRÆ-1 Cobas e411_. Derudover findes rådata sammen med kurver m.m. i mapperne: Cobas e411 patientprøver validering. Placeret i rum 6.K6. Intermediær præcision: PC CARD 1, PC CARD 2 og HK6S er analyseret på Cobas e411. Kontrollerne ligger i tre forskellige niveauer. Alle tre niveauer er analyseret minimum 31 gange i perioden 29-8-14 til 29-9-26 Kontrol Niveau pmol/l Krav til Krav opfyldt HK6S 1,5 8, 5,7 Ja PC CARD 1,4 8, 3,5 Ja PC CARD 2 494 8, 3,8 Ja Se P:\KBA\ISO189\Dokumenter\3-VAL-Valideringsrapporter\36-VAL Cobas e411\\ 36-PRÆ-1 Cobas e411_. Derudover findes rådata sammen med kurver m.m. i mapperne: Cobas e411 patientprøver validering. Placeret i rum 6.K6. 4.1 Metrologisk sporbarhed NT-proBNP II analysen er standardiseret over for Elecsys probnp analysen (1. generation). Elecsys probnp analysen (1. generation) blev oprindeligt standardiseret op imod afvejet syntetisk NT-proBNP (1-76) i en serummatrix. Se [EXT-28 Cobas Sporbarhed; Korrespondance med ROCHE] Se producentens metodeblad [EXT-176 Cobas probnp II, 28-9, V 3 Dansk] Kalibratorens værdi og den udvidede kombinerede usikkerhed kan ses i producentens CalSet [EXT-16 Roche Traceability And Uncertainty, Penzberg 17 sept. 29]. 4.11 Robusthed I valideringsperioden er der anvendt flere forskellige reagens lotnr. Og erfaring viser at skift i reagenser incl. lotnr., temperatur, operatør ikke påvirker apparatets ydeevne. 4.12 Afsmitning Leverandøren oplyser, at der kan forekomme afsmitning. Fejlmeddelelsen 46-potential microparticle carryover vises i Labka II, hvis der kan være sket carryover (afsmitning), fra den foregående prøve. Prøven bliver reanalyseret. Se [EXT-114 Cobas e411 Brugermanual] 4.13 Evt. apparatsammenligning Ikke relevant Side 7 af 9
4.14 Præanalytiske forhold Valideringsrapporten er udarbejdet på baggrund af prøvetagning i Lithiumheparin glas - grøn4s (Greiner - Vacuette 45429). Vi har anvendt heparin plasma til valideringen, men det er også muligt at anvende Serum, K 2 EDTA plasma og K 3 EDTA plasma iflg. producentens metodeblad [EXT-176 Cobas probnp II, 28-9, V 3 Dansk] Holdbarhed: 3 dage ved stuetemperatur, 6 dage ved 2-8 o C, 24 måneder ved 2 o C og prøven må kun fryses én gang. Specifikke kommentarer Hæmolyse, icterus og lipæmi kan i forskellig grad påvirke analysen. Cobas e411 har ikke mulighed for at analysere en hæmolyse-, icterus- og lipæmi-værdi, så dette vurderes visuelt - se {VEJ-589 Apparat - Cobas e411}. Ekstremt høje titre af antistoffer mod streptavidin og ruthenium kan interferere. 4. Referenceinterval / klinisk beslutningsgrænse ROCHE s anbefalede referenceintervaller iflg. metodeblad er anvendt i Labka II, analysekode version 2. Se [EXT-176 Cobas probnp II, 28-9, V 3 Dansk] : Omregningsfaktor: pg/ml*,118 = pmol/l Analyse Referenceinterval i Labka II Enhed Kvinder 18 44 år <,3 Kvinder 45 54 år < 29,4 Kvinder 55 64 år < 33,9 Kvinder 65 74 år < 35,5 Kvinder 75 125 år < 87,1 Mænd 18 44 år < 1,1 pmol/l Mænd 45 54 år < 14,3 Mænd 55 64 år < 24,8 Mænd 65 74 år < 44,4 Mænd 75 125 år < 57,3 4.16 Måleusikkerhedsbudget Se P:\KBA\ISO189\Dokumenter\3-VAL-Valideringsrapporter\36-VAL Cobas e411\\ 36-PRÆ-1 Cobas e411_. Derudover findes rådata sammen med kurver m.m. i mapperne: Cobas e411 patientprøver validering. Placeret i rum 6.K6. Der er ikke foretaget biaskorrektioner, hvorfor dette ikke er med i usikkerhedsbudgettet. Den udvidede usikkerhed CVdelta er beregnet som k*cv c, hvor dækningsfaktoren er sat til 2. Resultatet for CVdelta er ikke vist, men findes i databladet intermediær Niveau 1 Niveau 2 Niveau 3 kalibrator præanalyse CV c () intermediær kalibrator præanalyse CV c () intermediær kalibrator præanalyse 5,7 1,13 4, 7, 3,5 1,13 4, 5,4 3,8 1,13 4, 5,6 CV c () Side 8 af 9
5. KONKLUSION Sammenfattende er valideringsrapporten 36-VAL Cobas e411_ udfærdiget i overensstemmelse med afdelingens procedurer for validering af nye analysemetoder {PRO- 24 Validering af analysemetoder}. Rapporten dokumenter, at analysen opfylder de opstillet krav. I de få tilfælde, hvor der har været uoverensstemmelse mellem krav og ydeevne, er der redegjort herfor i rapporten. Valideringsrapporten godkendes: Henrik L. Jørgensen Overlæge, ph.d. Pia Ussing Afdelingsbioanalytiker 6. SIKKERHED, MILJØ OG HYGIEJNE Der henvises til gul mappe mærket {Arbejdspladsbrugsanvisninger, Cobas, Rum nr. 6.} Reagensnavn med mere Anvendelse APBA Sys Wash Fællesreagens APBA-668 System-vand Fællesreagens ISE Cleaning Solution Fællesreagens APBA-667 Clean Cell Fællesreagens APBA-669 ProCell ProBNP II PC CARD 1 + 2 HK6 S ProBNP II Calset Fællesreagens Analysereagens Kontrol fra Roche Kontrol fra DEKS Analysekalibrator 7. REFERENCER 7.1 Interne Arbejdspladsbrugsanvisninger, Cobas, Rum nr. 6.... 9 PRO-24 Validering af analysemetoder... 3;9 VEJ-589 Apparat - Cobas e411... 8 7.2 Eksterne EXT-182 ESC Guidelines for the diagnosis and treatment of acute and chronic heart failure 28, European Heart Journal 28;29:2388-2442 EXT-176 Cobas probnp II, 28-9, V 3 Dansk EXT-178 Cobas PreciControl Cardiac II, 29-1, V 4 English EXT-16 Roche Traceability And Uncertainty, Penzberg 17 sept. 29 EXT-114 Cobas e411 Brugermanual EXT-1 Cobas e411 Hjælpemanual EXT-28 Cobas Sporbarhed; Korrespondance med ROCHE EXT-29 Cobas 2bn26a_Linearity 8. DATABLAD DAT-489 P-proBNP (1-76) Side 9 af 9