cq1.1 Reflektometrisk cholesterolmåling Øvelsens pædagogiske rammer Sammenhæng Denne øvelse indgår på modul 9 ved Bioanalytikeruddannelsen i et undervisningsforløb der er sammensat af kemi og patofysiologi. Undervisningsforløbet udgør 1,05 ECTS som er delt næsten ligeligt mellem de to fag. Det betyder, at der sammenlagt forventes studieaktivitet svarende til 26 timer til dette undervisningsforløb. Kemi omhandler reflektometrisk cholesterolmåling, og patofysiologi har fokus på lipidstatus. Mange analysesvar eksempelvis på klinisk biokemisk afdeling bygger på et reflektometrisk måleprincip, hvilket betyder at øvelsen er relevant for såvel den teoretiske som kliniske undervisning. Formål Formålet med øvelsen er at støtte den teoretiske undervisning med praktiske erfaringer træne planlægning, udførelse og dokumentation af en eksemplarisk analyse Arbejdsform Undervisningsforløbet foregår i øvelsesgrupper og består af følgende skemalagte aktiviteter: En eksaminatorietime som introducerer forløbet. I ugen efter introduktionen er der 3 dage skemalagt 3 sammenhængende timer. I det tidsrum foregår følgende: o ½ time i laboratoriet til praktisk udførelse af øvelsen, idet øvelsesgruppens egne beskrivelser følges. Under selve udførelsen af øvelsen vil der være mulighed for hjælp og vejledning af laboratoriepersonalet. o Hjælp og vejledning fra kemi- og patofysiologiunderviser til udarbejdning af journal og besvarelse af henholdsvis kemi- og patofysiologiopgaver i øvelsesvejledningen. Vejledningen vil foregå på fællesarealet samlet for alle hold på årgangen. o Hver enkelt øvelsesgruppe kontakter såvel en patofysiologi- som en kemiunderviser med henblik på evaluering. Se afsnittet Evaluering for flere detaljer.
cq1.2 Undervisningsforløbet indeholder også en række ikke skemalagte aktiviteter, af en samlet varighed på cirka 16 timer, som fleksibelt kan realiseres i perioden fra introduktionen til sidste skemalagte dag. Disse aktiviteter er: Hvert hold sammensætter umiddelbart efter (gerne tidligere) introduktionen op til 8 øvelsesgrupper á 2-3 personer. Hver øvelsesgruppe forbereder øvelsen, hvilket vil sige o besvarelse og kontrol af Laboratorieopgave 1,2 og 3 i øvelsesvejledningen inden øvelsen udføres. Læs flere detaljer i afsnittet Evaluering. o reservation af øvelsestid i laboratoriet på det reservationsskema, som forefindes på opslagstavlen i laboratoriet. Hver øvelsesgruppe udformer en journal, som inkluderer besvarelse af Laboratorie-, kemi- og patofysiologiopgavene i øvelsesvejledningen. Besvarelserne af disse opgaver kan med fordel være påbegyndte allerede inden første skemalagte timer, således at vejledernes tid udnyttes effektivt. Af modulets prøvekriterier vil det fremgå, hvis nogle af ovenstående elementer er obligatoriske. Evaluering Øvelsesforløbet evalueres på følgende måder: 1. Inden øvelsen udføres kontakter hver enkelt øvelsesgruppe laboratoriepersonalet, som kontrollerer, at fremgangsmåden er hensigtsmæssig. 2. I forbindelse med den skemalagte vejledning, som er knyttet til undervisningsforløbet, kontrollerer vejlederne journalens faglige indhold. a. Patofysiologiunderviseren kontrollerer besvarelsen af patofysiologiopgaverne. b. Kemiunderviseren kontrollere resten. Obligatoriske aktiviteter afkrydses af laboratoriepersonale/underviser i et godkendelsesskema. Studerende har medansvar i forhold til at sikre, at de obligatoriske aktiviteter bliver godkendte og at godkendelserne bliver registreret.
cq1.3 Øvelsesvejledning Mål Målet med øvelsen er at sammenligne analyseapparaterne Reflotron og Accutrend begge fra Roche ud fra bestemmelse af cholesterolkoncentration i kapillærblod. Litteratur Modul 9, Kemi, Kompendium modul 9 VIA University College, Bioanalytikeruddannelsen, 2. udgave, januar 2011, side 18-22. Wind, T., Bendsen T., Møller E.R. og Simonsen J. Reflektormetri kapitel 6 i Modul 1 og 3, Mikroskopi og fotometri, Noter Thomas Bendsen. Kap. 4.16, Kritisk forskel i Noter i statistik. Tilgængelig på http://statnoter.biolyt.dk (3/1/2011). Lyngbye J., Kjær A., Ladefoged S og Nissen P.H Lyngbyes laboratoriemedicin. Nyt Nordisk Forlag Arnold Busck. 2010. Sikkerhed Laboratorieopgave 1 De sikkerhedsmæssige forhold vil fremgå af de videoklip som knytter sig til øvelsen. Når disse er set, formuleres hvilke sikkerhedsmæssige foranstaltninger der knytter sig til udførelse af øvelsen. Teori Kemiopgave 1 Lav en kort beskrivelse af 1. det generelle måleprincip for Reflotron. 2. det generelle måleprincip for Accutrend. 3. det specifikke testprincip for cholesterolmåling på Reflotron. 4. det specifikke testprincip for cholesterolmåling på Accutrend Når to prøver udtaget fra samme person inden for et snævert tidsinterval og analyseres på hvert sit analyseapparat, som tilfældet er i denne øvelse, kan der beregnes en kritisk difference efter Formel 1 herunder. Formel 1
cq1.4 Formlen fremkommer efter samme logik, som beskrevet i Noter i statistik kap. 4.16, blot er måleusikkerheden forskellig i de to målinger og den biologiske variation er 0, når prøverne tages fra samme person umiddelbart efter hinanden. De værdier, som skal anvendes i Formel 1, beregnes ud fra CV værdier, som er opgivet i hhv. pakningsindlæg til Reflotron Cholesterol og Accutrend Cholesterol. I de tilfælde hvor der opgives et interval for CV, vælges middelværdien. Den teststørrelse, som skal sammenlignes med beregnes som: Formel 2 Materialer og metoder Apparatur Reflotron fra Roche Accutrend fra Roche Utensilier Cholesterol teststrimler til Reflotron Cholesterol teststrimler til Accutrend Applikator Kapillarrør Lancet Spritservietter Vat Metode Reflektometrisk koncentrationsbestemmelse. Fremgangsmåde Laboratorieopgave 2 Angiv en hensigtsmæssig rækkefølge af de videoklip der findes på hjemmesiden: http://net.biolyt.dk/index.php?sid=828 og lav derudfra en kort beskrivelse af hvorledes en cholesterolmåling udføres med en Reflotron. Beskrivelsen skal være så udførlig, at andre vil kunne forstå og bruge den. Laboratorieopgave 3 Lav en kort beskrivelse af hvorledes en cholesterolmåling med en Accutrend udføres, idet relevante dele fra Laboratorieopgave 2 genbruges og idet videoklippet på hjemmesiden http://net.biolyt.dk/index.php?sid=831 anvendes. Beskrivelsen skal være så udførlig, at andre vil kunne forstå og bruge den.
Person Reflotron (mm) Accutrend (mm) Teststørrelse CV Reflotron SD Reflotron CV Accutrend SD Accutrend Kritisk forskel Kemi-patofysiologiøvelse 1 cq1.5 Resultater Lav målinger på mindst ét af og gerne alle gruppemedlemmer, og indsæt resultaterne i tabellen herunder. 1 2 3 4 Kemiopgave 2 Udfyld resten af tabellen ved brug af informationerne på pakningsindlæggene og beregning. Afgør om de to apparater måler signifikant forskelligt. Diskussion Kemiopgave 3 Hvis resultaterne viser at apparaterne måler signifikant forskelligt, diskuteres/forklares det forhold. Diskuter med udgangspunkt i resultaterne hvorvidt begge apparaterne vil kunne egne sig til screening. Ekstra hvis tid: Inddrag evt. økonomi og apparatbetjening i diskussionen, Konklusion
cq1.6 Øvrige opgaver til øvelsen. Patofysiologi - Lipidstatus 1. Hvordan transporteres cholesterol i blodet? Beskriv kort de enkelte lipoproteiner. Benyt evt. fig. 1 i Walldius og Jungner 2005. Cholesterol i lipoproteiner optages ved endocytose. Beskriv processen. Hvad bestemmer, hvor cholesterolet kan optages? 2. Beskriv trinnene i processen, der fører til aterosklerose. Hvilken rolle spiller LDL, oxldl og Apo B. Hvilke kliniske og parakliniske manifestationer kan aterosklerose medføre? Beskriv, hvordan Apo A-1 og HDL beskytter mod udviklingen af aterosklerose. 3. Både genetiske og miljømæssige faktorer kan have indflydelse på lipidstatus. Nævn nogle af de miljømæssige faktorer. 4. Sammenlign måling af Apo B og bestemmelse af LDL-cholesterol. Hvad er fordelene ved at måle Apo B frem for at bestemme LDL? Hvordan kan en patient med et konstateret lavt LDL-cholesterol have en stor kardiovaskulær risiko alligevel? 5. Diskuter med udgangspunkt I Walldius & Jungner, 2005 og Lyngbyes Laboratorie-medicin, hvilke faktorer til at bestemme lipidstatus, der bør indgå i retningslinjer for et screeningsprogram for risiko for kardiovaskulær sygdom. Gør dette ved at opstille et skema, magen til det som skitseret herunder, hvor I sammenligner præanalytiske forhold (faste/ikke-faste, prøvemateriale osv.), fordele, ulemper, anvendelighed inden for screening og prognostisk værdi. TC LDL HDL Apo B Apo A-1 ApoB/ApoA-1 ratio Triglycerider Præanalytiske forhold Fordele Ulemper Anvendelighed og prognostisk værdi